brozura hx 3 - ousa.eu · a kvalitu poskytovaných služieb klientom za svoju prioritu. ... 6....
Post on 26-Apr-2018
253 Views
Preview:
TRANSCRIPT
September 2013Onkologický ústav sv. Alžbety, s.r.o.Oddelenie manažérstva kvality a marketingu
Onkologický ústav sv. Alžbety, s.r.o., Heydukova 10, 812 50 Bratislava
Laboratórne službyOnkologického ústavu sv. Alžbety
Oddelenie manažérstva kvality a marketingu
Onkologický ústav sv. Alžbety, s.r.o.
je moderným neštátnym zdravotníckym zariadením, ktoré slúži potrebám nie len
onkologických pacientov z celého územia Slovenska. Ústav je začlenený do siete zdravotníckych
zariadení a má zmluvný vzťah so všetkými zdravotnými poisťovňami pôsobiacimi v SR.
V Onkologickom ústave sv. Alžbety (OUSA) je 7 lôžkových oddelení s kapacitou
203 postelí (chirurgické, onkogynekologické, maxilo-faciálnej chirurgie, intenzívnej medicíny,
interné, rádioterapeutické a nukleárnej medicíny). Ďalej sa v ňom nachádza 25 bezlôžkových
oddelení, 74 odborných ambulancií a Lekáreň sv. Alžbety, slúžiaca potrebám ústavu aj verejnosti.
Po odbornej stránke je Onkologický ústav sv. Alžbety jediným centrom v SR, kde sa vykonáva
liečba malígnych ochorení otvorenými rádionuklidmi, stereorádiochirurgiou, intenzitu modulovanou
rádioterapiou, liečba laserom a fotodynamickými postupmi. Je tiež jediným pracoviskom, kde sa
realizuje diagnostika nádorov pomocou pozitrónového emisného tomografu, ako aj pomocou
viacerých špeciálnych laboratórnych vyšetrení. V rámci 15 kliník sa v OUSA v širokom merítku
vykonáva pregraduálna a postgraduálna výchova študentov pre potreby LFUK, SZU, TU a VŠZaSP
sv. Alžbety.
V Ústave sa kladie veľký dôraz aj na psychologické aspekty, na pozitívny a citlivý prístup
personálu k neraz ťažko chorým pacientom vychádzajúci z kresťanských princípov, pre ktoré bola
pred vyše 200 rokmi nemocnica sv. Alžbety zriadená. Cieľom poskytovania duševného zdravia
slúži pacientom aj ústavná kaplnka, kde sú každodenne vykonávané bohoslužby.
Onkologický ústav sv. Alžbety, s.r.o. v Bratislave poskytuje špičkovú zdravotnú starostlivosť
podporovanú moderným a unikátnym diagnostickým a terapeutickým vybavením, vysoko odborným
a vľúdnym ľudským prístupom.
V našich odborných ambulanciách a preventívnych centrách poskytujeme tiež neonkologickú
odbornú a preventívnu starostlivosť a tiež preventívnu zdravotnú starostlivosť (pzs) pre klientov,
ktorí si uvedomujú hodnotu svojho zdravia. Diagnostika je zabezpečovaná širokým spektrom
špecializovaných diagnostických a terapeutických pracovísk (Rtg, ultrazvuk, digitálna mamografia,
3T NMR, SPECT-CT, PET kamera a komplexné laboratóriá).
Onkologický ústav sv. Alžbety, s.r.o., Heydukova 10, 812 50 Bratislava
3
OBSAH Kvalita a certifikáty ............................................................................................... 4
Laboratórne služby ................................................................................................ 6
Oddelenie klinickej biochémie – OKB ................................................................. 8
Oddelenie imunodiagnostiky – OID ................................................................... 30
Oddelenie hematológie a transfuziológie – HTO ............................................... 44
Oddelenie klinickej imunológie a alergológie – OKIA ...................................... 56
Ústav patológie SZU a OUSA – ÚP ................................................................... 78
Oddelenie klinickej farmakológie – OKF ........................................................... 86
Oddelenie lekárskej genetiky – OLG .................................................................. 90
Legislatívne usmernenie k preventívnym zdravotným prehliadkam ................ 110
PRÍLOHY číslo:
1. Žiadanka na laboratórne biochemické a hematologické vyšetrenie 2. Sprievodný list na skríning Trisomie 3. Žiadanka na prietokovú cytometriu pre HTO 4. Žiadanka na prietokovú cytomeriu pre OKIA 5. Žiadanka na genetické vyšetrenie
Ostatné žiadanky a tlačivá nájdete na našej web stránke:
http://www.ousa.sk/sk/elektronicke-sluzby/ziadanky-na-vysetrenia
4
Kvalita a certifikáty
Vedenie OUSA považuje kvalitu poskytovanej zdravotníckej starostlivosti pacientom a kvalitu poskytovaných služieb klientom za svoju prioritu.
OUSA je nositeľom certifikátu ISO 9001:2008 a 6 laboratórnych pracovísk je akreditovaných podľa ISO 17025:2005. Akreditácia podľa ISO 17025
Počiatky akreditácie laboratórií v OUSA siahajú do roku 2003 keď boli akreditované 3 laboratórne oddelenia – Oddelenie klinickej biochémie, Oddelenie imunodiagnostiky a Oddelenie lekárskej genetiky, ako jedny s prvých akreditovaných laboratórií v SR. Postupne sa akreditovali ďalšie laboratória – Oddelenie hematológie a transfuziológie, Oddelenie klinickej patológie a cytológie (dnes Ústav patológie) a Oddelenie klinickej imunológie a alergológie. Oddelenie lekárskej genetiky má priznaný štatút flexibilného rozsahu akreditácie (http://www.ousa.sk/_img/Documents/Noivnky/flexibilny_zoznam.pdf). Náročné posudzovanie a udelenie osvedčenia o akreditácii vykonal medzinárodne uznávaný akreditačný orgán SNAS – Slovenská národná akreditačná služba (http://www.snas.sk/). Prínos akreditácie pre medicínske laboratóriá
Dôležitou súčasťou systému zdravotnej starostlivosti o pacientov sú aj služby, ktoré poskytujú medicínske laboratóriá. Výsledky ich činnosti sú často základom pre rozhodovanie sa lekára o postupe liečby pacienta, môžu rozhodnúť o diagnóze, na ich základe je možné vyvodzovať prognózu ochorenia. V mnohých prípadoch sú laboratórne vyšetrenia drahé a ten, kto ich platí, právom očakáva, že dostane valídnu informáciu. Preto je veľmi dôležité, aby laboratóriá pracovali na vysokej profesionálnej úrovni, boli vhodne vybavené potrebnými zariadeniami, mali kvalifikovaný personál a najmä, aby poskytovali spoľahlivé a správne výsledky. Certifikácia podľa ISO 9001:2008
V roku 2007 OUSA obdržal Certifikát podľa ISO 9001:2008, na: „Poskytovanie služieb v oblasti prevencie, diagnostiky a liečby nádorových a nenádorových ochorení vo všetkých orgánových lokalizáciách, liečba nádorových ochorení pomocou postupov chirurgických, interných, metabolických, rádioterapeutických, ako aj všetkými druhmi žiaričov. Sledovanie onkologickej epidemiológie v SR. Klinický výskum v onkologickej problematike. Pregraduálna a postgraduálna výchova v zdravotníctve.“
Výsledkom viacročnej prípravy je zdokumentovaný, udržiavaný a cieľavedome
zlepšovaný manažérsky systém. Cieľom systému je zvyšovanie kvality a efektívnosti poskytovaných služieb a zvyšovanie spokojnosti pacientov a ostatných klientov.
5
Certifikát pre systém manažérstva kvality vydaný BUREAU VERITAS Certification
(http://www.bureauveritas.sk/wps/wcm/connect/bv_sk/Local/Footer/Home/) pod akreditáciou UKAS QUALITY MANAGEMENT, potvrdzuje, OUSA splnil prísne požiadavky na zabezpečenie kvality poskytovaných služieb podľa požiadaviek medzinárodnej normy ISO 9001:2008.
Certifikát ISO 9001:2008
6
Laboratórne služby Ústavu laboratórnej medicíny (ÚLM)
Onkologického ústavu sv. Alžbety, s.r.o. v Bratislave Široké spektrum laboratórnych vyšetrení v laboratóriách s certifikátom kvality podľa
ISO 9001 a s akreditáciou podľa medzinárodnej normy pre laboratória ISO 17025 Špičková kvalita modernej laboratórnej diagnostiky s garanciou kvalifikovaného
personálu a špičkovej diagnostickej techniky Vlastný spoľahlivý zvoz biologického materiálu a distribúcia odberového
materiálu Elektronický prístup k výsledkom prostredníctvom internetu alebo iného
elektronického programu Odberový materiál zadarmo Zmluvné partnerstvo so všetkými zdravotnými poisťovňami Komplexnosť služieb a poskytovanie interpretácie výsledkov
Spoluprácou s laboratóriami ÚLM OUSA zabezpečíte maximálny prospech
pre Vašich pacientov.
Laboratória ÚLM poskytujú laboratórne služby v nasledujúcich odboroch:
1. klinická biochémia – oddelenie klinickej biochémie – OKB 2. hormóny a onkomarkery – oddelenie imunodiagnostiky – OID 3. hematológia a transfuziológia – oddelenie hematológie a transfuziológie – HTO 4. klinická imunológia a alergológia – odd. klinickej imunológie a alergológie – OKIA 5. klinická patológia a cytológia – ústav patológie – ÚP 6. lekárska genetika – oddelenie lekárskej genetiky – OLG 7. klinická farmakológia – oddelenie klinickej farmakológie – OKF
UPOZORNENIE:
Pre efektívne využívanie laboratórnych vyšetrení je potrebné sa riadiť pokynmi
uvedenými pri jednotlivých vyšetreniach:
1. Vypĺňanie žiadaniek: pečiatka lekára s kódmi musí byť čitateľná – žiadanka musí byť opečiatkovaná lekárom, ktorý má oprávnenie (odbornosť) – indikovať požadované vyšetrenia – musí byť zadaná aktuálna poisťovňa pacienta – meno pacienta a rodné číslo musia byť v súlade s údajmi uvedenými na preukaze
poistenca – štvormiestny kód diagnóz, nestačí slovné vypísanie – čitateľnosť ostatných údajov na žiadanke – používať žiadanky laboratórií OUSA – na žiadanke musia byť jednoznačne vyznačené požadované vyšetrenia
7
Žiadame všetkých žiadateľov o laboratórne vyšetrenia, aby na žiadanky zadávali platný kód podľa MKCH 10.
Kód musí byť štvormiestny! V prípade, že vami uvedený kód má podobu napríklad
/N60/, poisťovňa laboratórne vyšetrenie s takýmto MKCH 10 neprepláca. Nakoľko pri príjme takejto žiadanky v laboratóriu nie je možné vami zadaný kód MKCH opraviť, budeme nútení sprievodný list i s materiálom Vám vrátiť k zjednaniu nápravy, alebo Vás žiadať o doplnenie tohto údaju. Príklad: C 53. – nesprávne! C 53.1 – správne 2. Vzorka biologického materiálu:
- rešpektovať požiadavku na množstvo odobratého biologického materiálu podľa požadovaného vyšetrenia a druhu odberovej skúmavky
- rešpektovať obmedzenia stability odobratého biologického materiálu podľa požadovaného vyšetrenia pri plánovaní odberu vzhľadom na termíny transportu
- rešpektovať špecifické požiadavky niektorých vyšetrení na prípravu pacienta a odber vzorky
Kontakt:
V prípade záujmu o niektorú z ponúkaných služieb alebo prípadných nejasností ako
i Vašich ďalších otázok kontaktujte pracovníkov Oddelenia manažérstva kvality a marketingu na telefónnych číslach: +421 917 200 225, +421 918 389 018 alebo +421 2 322 48 413, alebo e-mail: marketing@ousa.sk a www.ousa.sk.
Pre konkrétnejšie, špecializované otázky konktaktujte zodpovedných pracovníkov na kontaktoch uvedených na jednotlivých oddeleniach. RNDr. Ľubomír Špaček vedúci Oddelenia manažérstva kvality a marketingu +421 2 322 48 413 lspacek@ousa.sk RNDr. Regína Lohajová Behulová, PhD. Manažér pre marketing +421 918 389 018 +421 917 148 766 regina.behulova@ousa.sk
RNDr. Jozef Tóth, CSc. Manažér pre marketing +421 2 3224 8414 +421 918 477 108 jozef.toth@ousa.sk
Zdena Hrubá samostatný odborný referent +421 917 200 225 zhruba@ousa.sk
8
Oddelenie klinickej biochémie – OKB
Zabezpečuje kompletnú klinicko-biochemickú základnú a špeciálnu diagnostiku zo séra, moču, likvoru, stolice, ako aj iných biologických materiálov. Okrem základných biochemických vyšetrení vykonáva tiež vyšetrenia špecifických proteínov a zápalových markerov, markerov kostného metabolizmu, kardiálnych markerov, komplexnú diagnostiku metabolizmu železa a hemopoézy, ďalej vyšetrenia rôznych hormónov, vitamínov, ako aj diabetologickú diagnostiku.
Laboratórna diagnostika sa realizuje na najmodernejšom prístrojovom vybavení s využitím spektrofotometrických a nefelometrických metód, metód enzýmovej imuno-analýzy, elektroforetických a separačných HPLC metód. Vysoká kvalita poskytovaných laboratórnych vyšetrovacích metód je zabezpečená zapojením sa OKB do uznávaných medzinárodných systémov externého hodnotenia kvality. OKB, ako súčasť ÚLM, má od r. 2002 zavedený systém manažérstva kvality pre medicínske laboratóriá podľa ISO 17025 a súčasne je toto laboratórium akreditované a tiež certifikované v rámci OUSA podľa ISO 9001.
Pracovníci OKB
Pracovník Funkcia Tel. č. e-mail Darina Veličová, Ing. vedúci odd. (primár) 322 49 519 dvelicov@ousa.sk
Katarína Rácová, RNDr. sam. odb. pracovník,zástupca primára 322 49 600
kracova@ousa.skCecília Belovičová, RNDr. sam. odb. pracovník 322 49 531 cbelovic@ousa.sk
Jana Kružlíková vedúca laborantka 322 49 555
Sortiment vyšetrení na OKB – radené abecedne
P.č. Skratka Názov vyšetrenia Systém
(biologický materiál) 1. ABR Acidobázická rovnováha KK, AK,VK 2. ADDIS Addisov sediment 12h M 3. ALB* Albumín S 4. ALP* Alkalická fosfatáza S 5. ALT* Alanin-aminotransferáza S 6. AMG 2-makroglobulín S 7. AMS Amyláza S, M, Pt 8. ASLO Anti-streptolyzín S 9. AST* Aspartát-aminotransferáza S 10. A1AT 1-antitrypsín S 11. A1GP 1- kyslý glykoproteín (orosomukoid) S 12. BILD Bilirubín priamy S 13. BILT* Bilirubín celkový S 14. BJ Imunofixácia BJK a BJL v moči M 15. CA* Vápnik S, 24h M 16. CB* Celková bielkovina S, 24h M, L, Pt 17. CHOL* Cholesterol S, Pt 18. CIK Cirkulujúce imunokomplexy S 19. CK Kreatinkináza celková S 20. CK-MB Kreatinkináza MB-izoenzým (mass) S 21. CL* Chloridy S, 24h M, L, Pt 22. CORT Kortizol S, 24h M 23. CPEPT C-peptid S
OKB
9
P.č. Skratka Názov vyšetrenia Systém
(biologický materiál) 24. CPL Ceruloplazmín S 25. CRP C-reaktívny proteín S 26. CTX Cross-Laps (C-terminál kost. telopeptidu) S 27. CVK Celková väzbová kapacita železa S 28. C3 C3-komplement S 29. C4 C4-komplement S 30. DIGO Digoxín S 31. DVIT 25-hydroxy-vitamín D (D3) S 32. ELFO Elektroforéza bielkovín S 33. EPO Erytropoetin S 34. FE* Železo S 35. FERR Ferritín S 36. FOL Folát S 37. GLU* Glukóza S, 24h M, L, Pt 38. GMT* Gama-glutamyltransferáza S 39. HBA1C Glykovaný hemoglobín (HPLC) KK 40. HCYST Homocysteín S 41. HDL HDL cholesterol S 42. 5-HIAA Kyselina hydroxyindoloctová v moči 24h M 43. HPT Haptoglobín S 44. ICA Ionizovaný vápnik S, KK 45. IELFO ELFO s imunofixáciou S 46. IGA Imunoglobulín A S 47. IGE Imunoglobulín E S 48. IGG Imunoglobulín G S 49. IGM Imunoglobulín M S 50. INZUL Inzulín S 51. JOD Jodidy v moči 24h M 52. K* Draslík S, 24h M 53. KM* Kyselina močová S, 24h M 54. KREA* Kreatinín S, 24h (12h) M 55. LAKTAT Laktát v plazme P 56. LDH* Laktátdehydrogenáza S, L, Pt 57. LDL LDL cholesterol S 58. LIPAZA Lipáza S 59. MG* Horčík S, 24h M 60. MOC CH Moč chemický M 61. NA* Sodík S, 24h M 62. OK-FOB Okultné krvácanie v stolici (FOB-test) F 63. OSMO Osmolalita v sére (výpočtom) S 64. OSTA Kostný izoenzým ALP (Ostáza) S 65. P* Fosfor S, 24h M 66. PREA Prealbumín S 67. RF Reumatoidný faktor S 68. STFR Solubilné transferínové receptory S 69. S100 Proteín S-100 S 70. TAG* Triacylglyceroly S 71. TNI Troponín I S 72. TRF Transferín S 73. UMALB Mikroalbumín v moči M, 24h M 74. UREA* Močovina S, 24h M 75. VITB12 Vitamín B12 S Vysvetlivky: *- akreditovaná metóda, AK - arteriálna krv, KK - kapilárna krv, VK - venózna krv, S - sérum, P - plazma, Pt - punktát, L - likvor, M - ranný moč, 12h M - 12 hod. moč, 24h M - 24 hod. moč
OKB
10
Referenčné hodnoty – aktualizované k 06.03.2012
Parameter Pohlavie a vek Od Do Jednotky Poznámka
KRV, SÉRUM, PLAZMA
Základné vyšetrenia
Glukóza (sérum) GLU
1 deň 2,2 3,3 mmol/l porušená glykémia nalačno 6,1 – 6,9 kritická hodnota pre DM >6,9 (2x v rôz. dňoch)
2 – 5 dní 0,7 4,2 mmol/l 6 dní – 2 roky 1,8 6,2 mmol/l 2 – 4 roky 2,9 5,4 mmol/l 4 – 6 rokov 3,8 5,5 mmol/l 6 – 15 rokov 3,3 6,1 mmol/l
15 – 100 rokov 3,9 5,9 mmol/l
Urea (Močovina) UREA
0 – 6 mesiacov 0,7 7,0 mmol/l
6 mesiacov – 13 rokov 0,7 8,0 mmol/l 13 – 18 rokov 1,8 6,4 mmol/l ženy 18 – 50 rokov 2,6 6,4 mmol/l ženy > 50 rokov 3,1 7,9 mmol/l muži 18 – 50 rokov 3,2 8,1 mmol/l muži > 50 rokov 3,5 8,1 mmol/l
Kreatinín KREA
0 – 1 týždeň 20 115 μmol/l
1 – 2 týždne 17 80 μmol/l 2 – 4 týždne 15 50 μmol/l 4 týždne – 1 rok 20 80 μmol/l 1 –15 rokov 40 90 μmol/l ženy 15 – 50 rokov 50 81 μmol/l ženy > 50 rokov 51 87 μmol/l muži 15 – 50 rokov 63 96 μmol/l muži > 50 rokov 62 106 μmol/l
Kyselina močová KM
0 – 1 mesiac 100 310 μmol/l
1 – 12 mesiacov 140 370 μmol/l 1 – 15 rokov 120 360 μmol/l ženy 15 – 50 rokov 140 350 μmol/l ženy > 50 rokov 140 390 μmol/l muži > 15 rokov 200 420 μmol/l
Celkové bielkoviny CB
0 – 1 mesiac 46 68 g/l
1 mesiac – 1 rok 48 76 g/l 1 –15 rokov 60 80 g/l > 15 rokov 64 83 g/l
Albumín ALB
0 – 2 týždne 24 39 g/l
2 týždne – 1 rok 29 45 g/l 1 – 15 rokov 22 50 g/l > 15 rokov 35 50 g/l
Bilirubín celkový BILT
1 deň 34 103 μmol/l
2 – 3 dni 68 171 μmol/l 4 – 5 dní 68 205 μmol/l 2 týždne – 1 rok <29 μmol/l ženy 1 – 50 rokov 4 22 μmol/l ženy > 50 rokov 5 21 μmol/l muži 1 – 50 rokov 5 28 μmol/l muži > 50 rokov 6 25 μmol/l
Bilirubín priamy (konj.) BILD
1 – 5 dní <40 μmol/l 1 – 15 rokov <7 μmol/l
> 15 rokov <5 μmol/l
OKB
11
Parameter Pohlavie a vek Od Do Jednotky Poznámka
Lipidový metabolizmus
Cholesterol celkový CHOL
0 – 1 mesiac 1,3 4,4 mmol/l
1 – 12 mesiacov 1,3 4,0 mmol/l 1 – 3 roky 2,5 4,5 mmol/l 3 – 15 rokov 3,2 4,8 mmol/l
> 15 rokov 3,6 5,2 mmol/l mierne riziko 5,21- 6,2 vysoké riziko >6,2
HDL-cholesterol HDL
0 – 8 rokov 1 3 mmol/l
8 – 15 rokov 1,4 3 mmol/l
ženy > 15 rokov >1,65 mmol/l mierne riziko 1,15 – 1,65 vysoké riziko <1,15
muži > 15 rokov >1,45 mmol/l mierne riziko 0,9 – 1,45 vysoké riziko <0,9
LDL-cholesterol LDL
optimálny
<3,4 mmol/l hraničný 3,4 – 4 vysoký 4 - 5 veľmi vysoký > 5
Triacylglyceroly TAG
0 – 1 rok 0,3 1,2 mmol/l mierne riziko 1,95–2,59 vysoké riziko 2,60–6,49 veľmi vys. riziko >6,50
1 – 15 rokov 0,3 1,4 mmol/l
> 15 rokov <1,95 mmol/l
Rizikový index (aterogénny) RI (CHOL/HDL)
2,3 4,8
ženy mierne riziko 4,8-6,24 vysoké riziko >6,24
muži mierne riziko 4,8 – 7,0 vysoké riziko >7,0
Enzýmy
Aspartát-aminotransferáza AST
1 deň <2,05 μkat/l
2 – 5 dní <1,85 μkat/l 6 dní – 6 mesiacov <1,40 μkat/l 6 – 12 mesiacov <1,00 μkat/l 1 – 15 rokov <0,85 μkat/l ženy > 15 rokov <0,60 μkat/l muži > 15 rokov <0,80 μkat/l
Alanín- aminotransferáza ALT
1 deň <0,50 μkat/l
2 – 5 dní <0,85 μkat/l 6 dní – 6 mesiacov <1,00 μkat/l 6 – 12 mesiacov <0,95 μkat/l 1 – 15 rokov <0,78 μkat/l ženy > 15 rokov <0,60 μkat/l muži > 15 rokov <0,80 μkat/l
Gama-glutamyl-transamináza GMT
1 deň 0,10 2,50 μkat/l
2 – 5 dní 0,10 3,10 μkat/l 6 dní – 6 mesiacov 0,10 3,40 μkat/l 6 – 12 mesiacov 0,10 0,55 μkat/l 1 – 12 rokov 0,10 0,40 μkat/l ženy 12 – 18 rokov 0,10 0,55 μkat/l
muži 12 – 18 rokov 0,10 0,75 μkat/l
ženy 18 – 40 rokov 0,17 0,70 μkat/l
OKB
12
Parameter Pohlavie a vek Od Do Jednotky Poznámka
ženy > 40 rokov 0,18 1,28 μkat/l muži 18 – 40 rokov 0,20 1,30 μkat/l muži > 40 rokov 0,25 1,90 μkat/l
Alkalická fosfatáza ALP
0 – 1 mesiac 1,20 7,00 μkat/l
1 – 12 mesiacov 1,40 6,40 μkat/l 1 – 10 rokov 1,10 5,80 μkat/l ženy 10 – 15 rokov 0,80 4,70 μkat/l ženy 15 – 19 rokov 0,80 2,50 μkat/l muži 10 – 15 rokov 0,70 8,30 μkat/l muži 15 – 19 rokov 0,90 4,60 μkat/l ženy 19 – 50 rokov 0,70 1,63 μkat/l ženy > 50 rokov 0,88 2,35 μkat/l muži 19 – 50 rokov 0,70 2,13 μkat/l muži > 50 rokov 0,95 2,60 μkat/l
Laktátdehydrogenáza LDH
1 deň <22,0 μkat/l
2 – 5 dní <29,0 μkat/l 6 dní – 6 mesiacov <16,3 μkat/l 6 – 12 mesiacov <18,3 μkat/l 1 – 6 rokov <14,2 μkat/l ženy 6 – 12 rokov <9,65 μkat/l ženy 12 –18 rokov <7,25 μkat/l muži 6 – 12 rokov <12,7 μkat/l muži 12 – 18 rokov <11,4 μkat/l 18 – 65 rokov <8,0 μkat/l > 65 rokov <8,85 μkat/l
Alfa-amyláza AMS <1,70 μkat/l Lipáza LIP 0,36 0,85 μkat/l
Ióny
Sodík NA
0 – 1 mesiac 132 147 mmol/l
1 – 12 mesiacov 129 143 mmol/l 1 – 18 rokov 132 145 mmol/l 18 – 65 rokov 136 145 mmol/l > 65 rokov 132 146 mmol/l
Draslík K
0 – 1 mesiac 3,6 6,1 mmol/l
1 – 12 mesiacov 3,6 5,8 mmol/l 1 – 15 rokov 3,2 5,4 mmol/l 15 – 60 rokov 3,3 5,2 mmol/l > 60 rokov 3,5 5,5 mmol/l
Chloridy CL
0 – 1 mesiac 95 116 mmol/l
1 – 12 mesiacov 93 112 mmol/l 1 – 18 rokov 96 111 mmol/l 18 – 65 rokov 98 107 mmol/l > 65 rokov 94 110 mmol/l
Vápnik celkový CA
0 – 1 týždeň 1,9 2,6 mmol/l
1 týždeň – 2 roky 2,24 2,74 mmol/l 2 – 12 rokov 2,20 2,70 mmol/l 12 – 19 rokov 2,30 2,75 mmol/l 19 – 50 rokov 2,20 2,75 mmol/l > 50 rokov 2,15 2,55 mmol/l
Vápnik ionizovaný ICA
0 – 1 mesiac 1,10 1,45 mmol/l
1 – 12 mesiacov 1,15 1,40 mmol/l 1 – 15 rokov 1,20 1,35 mmol/l > 15 rokov 1,13 1,32 mmol/l
OKB
13
Parameter Pohlavie a vek Od Do Jednotky Poznámka
Horčík MG
0 – 4 mesiace 0,60 0,90 mmol/l 4 mesiace – 6 rokov 0,70 0,95 mmol/l 6 – 18 rokov 0,65 0,90 mmol/l > 18 rokov 0,70 1,10 mmol/l
Fosfor P
0 – 1 mesiac 0,90 2,60 mmol/l
1 – 12 mesiacov 0,80 2,40 mmol/l 1 – 3 rokov 1,00 2,10 mmol/l 3 – 15 rokov 1,00 1,90 mmol/l 15 – 18 rokov 1,00 1,75 mmol/l ženy > 18 rokov 0,85 1,50 mmol/l muži 18 – 50 rokov 0,75 1,65 mmol/l muži > 50rokov 0,75 1,35 mmol/l
Osmolalita séra OSMO 280 300 mOs/kg výpočet podľa KazduVyšetrenia DM
Glukóza v kap. krvi KKGLU
3,3 5,6 mmol/l porušená glykémia nalačno 5,6 – 6,1
Orálny glukózo-tolerančný test Glykémia nalačno OGTT 0 3,3 5,6 mmol/l
Glykémia po 1 hod. OGTT 60 <11,0 mmol/l Glykémia po 2 hod. OGTT 120 <7,8 mmol/l
Glykovaný hemoglobín (NGSP) HBA1C
výborná kompenzácia 4 6 %
uspokojivá kompenzácia
6 8 %
zlá kompenzácia >8 %
Glykovaný hemoglobín (IFCC) HBA1C V
výborná kompenzácia 2,9 4,2 %
výpočet z HBA1C uspokojivá kompenzácia
4,2 6,0 %
zlá kompenzácia >6 % C-peptid CPEPT 0,80 5,20 ng/ml Inzulín INZUL 1,9 23,0 μIU/ml
Metabolizmus železa a hemopoéza
Železo FE
0 – 1 mesiac 9,0 36,0 μmol/l
1 – 12 mesiacov 5,0 28,0 μmol/l 1 – 12 rokov 4,0 24,0 μmol/l ženy 12 – 25 rokov 6,6 29,5 μmol/l ženy 25 – 40 rokov 4,1 24,0 μmol/l ženy > 40 rokov 7,0 26,7 μmol/l muži 12 – 25 rokov 7,2 27,7 μmol/l muži 25 – 40 rokov 6,3 30,1 μmol/l muži > 40 rokov 7,2 21,5 μmol/l
Väzb. kap.železa voľná VVK 19,7 66,2 μmol/l
Väzb. kap. železa – celková CVK
0 – 1 týždeň 10,6 31,3 μmol/l
2 týždne – 1 rok 20,8 68,7 μmol/l 1 – 15 rokov 29,9 69,8 μmol/l > 15 rokov 44,8 80,6 μmol/l
Saturácia železom SAT 30 50 %
Transferín TRF 0 – 15 rokov 1,3 3,6 g/l
ženy > 15 rokov 2,5 3,8 g/l muži > 15 rokov 2,2 3,7 g/l
Haptoglobín HPT
0 – 6 mesiacov <0,70 g/l 6 mesiacov – 18 rokov 0,22 1,69 g/l > 18 rokov 0,36 1,95 g/l
Ferritín FERR
0 – 3 mesiace 52,0 421,0 ng/ml 3 – 12 mesiacov 114,0 440,0 ng/ml
1 – 10 rokov 9,3 65,0 ng/ml
OKB
14
Parameter Pohlavie a vek Od Do Jednotky Poznámka
10 – 15 rokov 12,0 150,0 ng/ml ženy > 15 rokov 11,0 306,8 ng/ml muži > 15 rokov 23,9 336,2 ng/ml
Solubilné transferínové receptory sTfR
12,16 27,25 nmol/l cutoff =21 anémia z nedostatku Fe
sTfR index = (sTfR) / log (FERR)
6,42 22,47 cutoff=14 anémia z nedostatku Fe
Vitamín B12 VITB12
180 914 pg/ml hraničné hodn. 145-
180, deficit <145 Folát (kys.listová) FOL
>4,0 ng/ml hraničné hodn. 3 - 4
deficit <3 Erytropoetín EPO > 15 rokov 2,59 18,5 mIU/ml
Špecifické proteíny
Imunoglobulín G IGG
0 – 1 mesiac 7,0 16,0 g/l
1 – 3 mesiace 2,5 7,5 g/l 3 – 6 mesiacov 1,8 8,0 g/l 1 – 12 mesiacov 3,0 10,0 g/l 1 – 13 rokov 4,5 15,5 g/l > 13 rokov 7,0 16,0 g/l
Imunoglobulín A IGA
0 – 1 mesiac 0,07 0,94 g/l
1 – 12 mesiacov 0,10 1,31 g/l 1 – 13 rokov 0,20 3,58 g/l > 13 rokov 0,82 4,53 g/l
Imunoglobulín M IGM
0 – 1 mesiac 0,10 0,30 g/l
1 – 3 mesiace 0,10 0,70 g/l 3 – 12 mesiacov 0,10 1,45 g/l 1 – 13 rokov 0,20 2,39 g/l > 13 rokov 0,46 3,04 g/l
Imunoglobulín E IGE
0 – 1 mesiac < 2 IU/ml
1 mesiac – 1 rok < 15 IU/ml 1 – 6 rokov < 60 IU/ml 6 – 10 rokov < 90 IU/ml 10 – 15 rokov <200 IU/ml > 15 rokov < 165 IU/ml
Prealbumín PREA
0 – 1 mesiac 0,07 0,39 g/l
1 – 6 mesiacov 0,08 0,34 g/l 6 mesiacov – 6 rokov 0,12 0,36 g/l > 6 rokov 0,20 0,40 g/l
Alfa1-kyslý glykoproteín A1GP
ženy 0,40 1,20 g/l muži 0,50 1,30 g/l
Alfa1antitrypsín A1AT
0 – 1 mesiac 1,24 3,48 g/l
1 – 6 mesiacov 1,11 2,97 g/l 6 mesiacov – 3 roky 0,95 2,51 g/l 3 – 18 rokov 1,10 2,80 g/l > 18 rokov 0,90 2,00 g/l
Ceruloplazmín CPL
ženy 0,20 0,70 g/l muži 0,20 0,60 g/l
Alfa2makroglobulínAMG 1,02 2,59 g/l Elektroforéza bielkovín ELFO Albumín ELFO-ALB 55,0 69,0 % Alfa1-globulín ELFO-A1G 1,6 5,8 % Alfa2-globulín ELFO-A2G 5,9 11,0 % Beta-globulín ELFO-BGL 7,9 14,0 % Gama-globulín ELFO-GGL 11,0 18,0 %
OKB
15
Parameter Pohlavie a vek Od Do Jednotky Poznámka
Homocysteín HCYST
15 – 60 rokov 5 15 μmol/l > 60 rokov 5 20 μmol/l
Cystatin-C CYS
0 – 1 rok 1,0 2,0 mg/l 1 – 15 rokov 0,5 1,0 mg/l
> 15 rokov 0,62 1,15 mg/l
Zápalové markery
Komplement C3 C3
0 – 1 mesiac 0,58 1,08 g/l
1 – 3 mesiace 0,67 1,24 g/l 3 – 6 mesiacov 0,74 1,38 g/l 6 – 12 mesiacov 0,78 1,44 g/l 1 – 12 rokov 0,80 1,50 g/l 12 – 20 rokov 0,82 1,60 g/l 20 – 40 rokov 0,84 1,60 g/l > 40 rokov 0,90 1,70 g/l
Komplement C4 C4
0 – 1 mesiac 0,07 0,24 g/l
1 – 3 mesiace 0,09 0,31 g/l 3 – 6 mesiacov 0,10 0,35 g/l 6 – 12 mesiacov 0,12 0,40 g/l 1 – 12 rokov 0,13 0,43 g/l 12 – 20 rokov 0,14 0,43 g/l 20 – 40 rokov 0,16 0,46 g/l > 40 rokov 0,18 0,49 g/l
Cir. imunokomplexy CIK <60 arb.j.
C-reaktívny proteín CRP 0 – 1 mesiac <4 mg/l
1 mesiac – 15 rokov <3 mg/l > 15 rokov <8 mg/l
Antistreptolyzín ASLO
0 – 6 rokov <100 IU/ml 6 – 18 rokov <166 IU/ml
> 18 rokov <116 IU/ml Reumatoidný faktor RF
<20 IU/ml hraničný 20 - 30 pozitívny >30
Kardiomarkery
Kreatínkináza CK
0 – 1 týždeň <10,50 μkat/l
1 týždeň – 6 mesiacov <5,50 μkat/l 6 – 12 mesiacov <4,90 μkat/l 1 – 4 roky <3,80 μkat/l ženy 4 – 12 rokov <2,55 μkat/l ženy 12 – 18 rokov <2,05 μkat/l
muži 4 – 12 rokov <4,10 μkat/l
muži 12 – 18 rokov <4,50 μkat/l ženy > 18 rokov <2,83 μkat/l muži > 18 rokov <3,25 μkat/l
CK-MB (mass) muži > 18 rokov <5,0 ng/ml ženy > 18 rokov <3,0 ng/ml
Troponín I TNI <0,5 ng/ml Osteomarkery
C-terminálne telopeptidy kolagénu typu I CTX
ženy >18 rokov - premenopauza
0,13 0,44 ng/ml
- postmenopauza
0,23 0,78 ng/ml
muži 18 – 50 rokov 0,16 0,44 ng/ml muži 50 – 70 rokov 0,10 0,50 ng/ml muži > 70 rokov 0,16 0,62 ng/ml
Ostáza –. kostný izoenzým ALP
ženy >18 rokov - premenopauza
<14,3 μg/l
OKB
16
Parameter Pohlavie a vek Od Do Jednotky Poznámka
OSTA - postmenopauza
<22,4 μg/l
muži > 18 rokov <20,1 μg/l
Vitamín D3 DVIT 25-hydroxy-vitamín D3
47,7 144,0 nmol/l insuficiencia 27,7-–47,7, ťažká insuf. <27,7
Hormóny, liečivá a iné
Kortizol CORT
> 6 rokov ráno 7 – 10 hod.
240 620 nmol/l
poobede 16 – 20 hod. <280 nmol/l Digoxín DIGO terapeutický interval 0,8 2,0 μg/l >2,5 toxickáhladina
Laktát LAKTAT
venózna 0,50 2,22 mmol/l !!! plazma !!!
arteriálna 0,50 1,60 mmol/lProteín S-100 S100 <90 ng/l
Vyšetrenie acidobázickej rovnováhy pH krvi 7,35 7,45
parc. tlak CO2 pCO2 ženy 4,3 6,0 kPa
muži 4,7 6,4 kPa
parc. tlak O2 pO2 11,1 14,4 kPa aktuál. bikarbon. HCO3 22,0 26,0 mmol/l štand. bikarbon. SBC 22,0 26,0 mmol/l celkový CO2 TCO2 22,0 26,0 mmol/l base exces BE -2,5 +2,5 mmol/l saturácia krvi O2 O2s >94 % obsah O2 v arteriálnej krvi O2ct
ženy 15,9 22,4 % muži 17,9 24,7 %
MOČ
Chemické vyšetrenie moču - močovým prúžkom pH moču 4,8 7,4 Hustota moču SG 1,005 1,035 kg/l
Bielkoviny
norma <0,1 g/l negat
hodnotenie patologického nálezu
0,1 0,3 g/l stopy 0,3 1,0 g/l 1+ 1,0 3,0 g/l 2+ >3,0 g/l 3+
Glukóza
norma <0,84 mmol/l negat
hodnotenie patologického nálezu
0,84 1,7 mmol/l stopy 1,7 2,8 mmol/l 1+ 2,8 5,5 mmol/l 2+ 5,5 17 mmol/l 3+
Ketolátky
norma <0,5 mmol/l negat
hodnotenie patologického nálezu
0,5 1,5 mmol/l stopy 1,5 3,9 mmol/l 1+ 3,9 7,8 mmol/l 2+ >7,8 mmol/l 3+
Bilirubín
norma <3,4 μmol/l negat
hodnotenie patologického nálezu
3,5 5 μmol/l stopy 5 10 μmol/l 1+ 10 20 μmol/l 2+ 20 40 μmol/l 3+
Urobilinogén norma 3,2 16 μmol/l negat hodnotenie patologického nálezu
16 33 μmol/l stopy 33 66 μmol/l 1+
OKB
17
Parameter Pohlavie a vek Od Do Jednotky Poznámka
66 131 μmol/l 2+ >131 μmol/l 3+
Krv (Erytrocyty)
norma <5 Éry/μl negat
hodnotenie patologického nálezu
6 10 Ery/μl 1+ 10 50 Ery/μl 2+ 50 250 Ery/μl 3+
Nitráty (Hnis) žiadne negat
Mikroskopické vyšetrenie močového sedimentu Erytrocyty <2 j/zor.pole negat
Leukocyty <5 j/zor.pole negat
Epitélie <16 j/zor.pole negat Valce žiadne negat Baktérie žiadne negat Kvasinky žiadne negat Amorfné soli žiadne negat
Addisov sediment (ADDIS) – zbieraný 12h moč
Erytrocyty <1 mil. negat Leukocyty <2 mil. negat Valce <50 tis. negat
Iné vyšetrenia – jednorazový moč Amyláza UAMS <8,35 μkat/l
Albumín UMALB „mikroalbumín“
<25 mg/l zber moču od 22 :00 do 6:00 hod.
Index UMALB/MKREA IMA
<2,8 mg/mmol v norme 2,8 22,8 mg/mmol mikroalbuminúria >22,8 mg/mmol albuminúria
Klírens kreatinínu (24h resp. 12h moč)
Glomerulárna filtrácia GFR
0 – 2 dni 0,08 0,12 ml/s
2 – 7 dní 0,28 0,33 ml/s 1 – 2 týždne 0,58 0,75 ml/s 2 týždne – ½ roka 0,58 1,52 ml/s ½ - 1 rok 1,05 1,52 ml/s
1 – 10 rokov 1,0 2,0 ml/s
10 – 20 rokov 1,5 2,3 ml/s 20 – 40 rokov 1,3 2,5 ml/s 40 – 50 rokov 1,25 2,2 ml/s 50 – 60 rokov 1,15 2,0 ml/s > 60 rokov 1,1 1,9 ml/s
Tubulárna resorbcia vody RESO 98,3 99,5 % Frakčná exkrécia vody FREX 0,5 1,7 %
Hodnotenie glomerulárnej filtrácie na základe sérovej hodnoty Cystatinu C
Glomerulárna filtrácia GF-CYS
v norme 1,33 2,50 ml/s zber moču nie je potrebný nie je závislá na veku, pohlaví a teles. hmot.
mierne znížená 0,92 1,33 ml/s stredne znížená 0,48 0,92 ml/s silne znížená 0,25 0,48 ml/s
obličkové zlyhanie <0,25 ml/s
Vyšetrenie zbieraného moču za 24 hodín - odpady Glukóza M24 GLU <1,7 mmol/l Bielkoviny M24 CB <0,15 g/l Albumín MALB „mikroalbumín“
<30 mg/24h v norme 30 300 mg/24h mikroalbuminúria
OKB
18
Parameter Pohlavie a vek Od Do Jednotky Poznámka
>300 mg/24h albuminúria
Urea M24 UREA
0 – 1 týždeň 2 4 mmol/24h 2 – 4 týždne 10 17 mmol/24h 1 – 12 mesiacov 33 67 mmol/24h 1 – 15 rokov 67 333 mmol/24h > 15 rokov 330 580 mmol/24h
Kreatinín M24 KREA
0 – 1 mesiac 0,4 0,6 mmol/24h 1 – 12 mesiacov 0,5 1,2 mmol/24h 1 – 4 roky 1,0 3,8 mmol/24h 4 – 15 rokov 3,3 9,2 mmol/24h ženy > 15 rokov 5,0 16,0 mmol/24h muži > 15 rokov 7,0 18,0 mmol/24h
Kys. močová M24 KM <52 μmol/24h/kg prepočet na telesnú hmotnosť
Sodík M24 NA
0 – 6 mesiacov 1 10 mmol/24h 6 – 12 mesiacov 10 30 mmol/24h 1 – 7 rokov 20 60 mmol/24h 7 – 15 rokov 20 120 mmol/24h > 15 rokov 30 300 mmol/24h
Draslík M24 K
0 – 1 mesiac 5 25 mmol/24h 1 – 12 mesiacov 15 40 mmol/24h 1 – 15 rokov 20 60 mmol/24h > 15 rokov 25 125 mmol/24h
Chloridy M24 CL
0 – 1 mesiac 0,3 1,4 mmol/24h 1 – 12 mesiacov 2 15 mmol/24h 1 – 7 rokov 15 70 mmol/24h 7 – 15 rokov 50 130 mmol/24h > 15 rokov 110 250 mmol/24h
Vápnik M24 CA
0 – 1 mesiac <1,5 mmol/24h 1 – 12 mesiacov 0,1 2,5 mmol/24h 1 – 15 rokov 2,0 4,0 mmol/24h 15 – 18 rokov 2,0 5,0 mmol/24h > 18 rokov 2,5 7,5 mmol/24h
Fosfor M24 P 0 – 1 rok <1,3 mmol/24h
1 – 15 rokov 2,0 10,0 mmol/24h 15 – 18 rokov 19,0 23,0 mmol/24h > 18 rokov 13,0 42,0 mmol/24h
Horčík M24 MG
0 – 1 rok 0,1 1,2 mmol/24h 1 – 15 rokov 1,2 8,2 mmol/24h > 15 rokov 2,5 8,5 mmol/24h
Jodidy JOD
100 400 μg/24h v norme 75 100 μg/24h ľahká jodopénia
30 75 μg/24h stredne ťažká
jodopénia <30 μg/24h ťažká jodopénia
5-hydroxy-indol octová kyselina 5HIAA
<30 μmol/24h
Kortizol UCORT > 6 rokov 160 1112 nmol/24h
LIKVOR Glukóza LGLU 2,5 3,9 mmol/l Celkové bielkoviny LCB 150 450 mg/l Chloridy LCL 118 132 mmol/l
OKB
19
Kritické hodnoty Kritické hodnoty laboratórny personál po overení a potvrdení opakovaným
vyšetrením tej istej vzorky telefonicky hlási žiadajúcemu oddeleniu (resp. lekárovi).
Analyt Materiál Kritické hodnoty Jednotky Poznámka
Železo S <3,1 μmol/l Ťažká anémia
CK S >16,7 μkat/l Digoxín S >2,5 μg/l Toxicita
CRP S >100 mg/l Nešpecifický indikátor zápalových procesov
Osmolalita S >330 mOsm/kg
Laktát S, KK >3,4 mmol/l
pH KK <7,1 >7,7 Acidémia
Alkalémia
pCO2 KK <2,7 >8,6 kPa Respiračná alkalóza
Respiračná acidóza pO2 KK <5,7 kPa Sat.O2 KK <80 %
HCO3 KK <17,1 >33,8 mmol/l Metabolická acidóza
Metabolická alkalóza
BE KK < -8 >+10 mmol/l Metabolická acidóza
Metabolická alkalóza *Vysvetlivky: S – sérum, KK – kapilárna krv
Pokyny pre správny odber a transport vzoriek
Oddelenie klinickej biochémie dodáva svojim klientom pre odber biologického materiálu bezplatne nasledovný odberový systém:
na odber zrážavej krvi - SARSTEDT - S-Monovette skúmavky 7,5 ml - BD VACUTAINER - skúmavky so sep. gélom 7,5 ml na odber kapilárnej krvi - SARSTEDT -Microvette CB 300 (pre HbA1c) - EPPENDORF - mikroskúmavka 1,5 ml (obsahuje 1 ml hemolyzačného roztoku)+ heparinizovaná kapilára 20 l (pre GLU z kap. krvi) na odber moču - plastové nesterilné skúmavky so zátkou 10 ml a 15 ml na odber stolice na OK - Test 3.generácie
Ku každej vzorke biologického materiálu musí byť priložená dôkladne vypísaná
žiadanka (sprievodný lístok). Na žiadanke musia byť uvedené základné údaje: meno, priezvisko, titul, rodné číslo a diagnóza pacienta, kód zdravotnej poisťovne, kód ambulancie (oddelenia), kód ošetrujúceho alebo ordinujúceho lekára, jeho pečiatka a podpis, druh materiálu, žiadané vyšetrenia, dátum a čas odberu, príp. doplňujúce údaje: doterajšia liečba, súčasný stav choroby.
Oddelenia a ambulancie v rámci OUSA vygenerujú a vytlačia žiadanku v nemocničnom informačnom systéme (NIS), pre externých klientov OKB dodáva formulár spoločnej žiadanky pre vyšetrenia vo všetkých typoch biologického materiálu na OKB, OID a HTO.
OKB
20
Odber krvi - Odber krvi na biochemické vyšetrenia sa vykonáva po telesnom odpočinku ráno medzi 7:00 –9:00 hod. Pred odberom je vhodný dostatočný príjem tekutín (voda, resp. nesladený čaj). Ak je to možné, 24 – 72 hodín pred odberom sa vynechá farmakoterapia. Odberu nesmie predchádzať fyzická námaha, záťažové diagnostické alebo terapeutické zákroky. Pred odberom materiálu sestra označí odberovú nádobu štítkom, kde značí základné údaje: meno, priezvisko a rok narodenia pacienta, dátum a čas odberu. Údaje musia byť presné, čitateľné a identické s údajmi na žiadanke – sprievodnom lístku.
Po odbere vložte skúmavku do stojana v kolmej polohe (nikdy neukladajte skúmavky ležmo na stôl) a nechajte krv voľne koagulovať pri izbovej teplote 30 minút. Materiál sa do laboratória odosiela čo najskôr, približne do 60 minút po odbere, na súrne vyšetrenia okamžite z oddelení a ambulancií OUSA sa odobratý materiál sústreďuje v určenej miestnosti vo vestibule hlavnej budovy „A“. Vzorky pre OKB, OID a HTO doručí sanitárka v pravidelných časových intervaloch na Centrálny príjem vzoriek ÚLVM v budove „K“. Zvoz biologického materiálu z externých pracovísk zabezpečuje po dohode Dopravná služba OUSA. Pracovník Dopravnej služby je zodpovedný po prevzatí vzoriek za ich správny transport počas dopravy do laboratória. Vzorky sú transportované v prenosných chladničkách vo fixovanej zvislej polohe. Vzorky z nemocníc môžu byť do laboratória transportované aj dopravnou službou iných zdravotníckych zariadení.
Pre vzdialenejšie externé pracoviská, kde nie je možné zabezpečiť doručenie krvných
vzoriek do 2 hodín od odberu, je odporúčané používať ako odberový systém skúmavky so separačným gélom BD VACUTAINER a vzorky po 30 minútach scentrifugovať (pri 2500 – 3000 otáčkach/min po dobu 10 minút) a takto pripravené vzorky transportovať do laboratória. Separačný gél po centrifugácii inertne oddelí sérum od krvných elementov a zabráni tak ich vzájomnému nežiaducemu ovplyvňovaniu.
Skratka Názov parametra Požiadavky na biologický materiál
DVIT 1,25 dihydroxyvitamín D
Materiál : sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Oddelené séra ( do 3 hodín ) možno uchovávať 24 hodín pri 2-8°C, alebo dlhšie zmrazené na -20°C a dopravia sa do laboratória v ľade v chladenom boxe
VitB12 vitamín B12
Materiál: sérum, plazmaOdber a transport: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA Oddelené séra a plazmy možno uchovávať po dobu 24 hodín pri 2-8 °C. Pri dlhšom skladovaní musia byť zmrazené na -20°C, transport do laboratória v chladiacich boxoch
FER Feritín Materiál : sérumOdber a transort: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať 24 hodín, oddelené séra možno 7 dní pri 2-8°C, dlhšie skladovanie v zmrazenom stave pri -20°C
FOLÁT Kyselina folová
Materiál: sérum, plazma erytrocytyOdber a transport vzoriek: 1. Stanovenie v sére alebo v plazme: odoberá sa krv bez aditív alebo s K2EDTA nalačno. Oddelené séra a plazmy možno uchovávať v uzavretých skúmavkách chránené pred svetlom po dobu 8 hodín pri 2 - 8°C, transport do laboratória v chladenom boxe v deň odberu 2. Folát v eytrocytoch - návod na prípravu lyzátu (vykonáva sa priamo v hematologickej ambulancii): a) vo vzorke nezrazenej krvi stanovte a zaznamenajte hematokrit b) lyzačné činidlo rekonštituujte pridaním 25 ml destilovanej vody, nechajte voľne rozpúšťať 40 min, pred použitím premiešajte točivým pohybom. Skladujte pri 2-8°C maximálne 2 týždne, pred každým použitím vytemperujte na laboratórnu teplotu c) z premiešanej vzorky plnej krvi odoberte 50μl a pridajte 1 ml lyzačného činidla d) opakovaným prevracaním skúmavky premiešajte a nechajte stáť 90
OKB
21
Skratka Názov parametra Požiadavky na biologický materiál
minút pri laboratórnej teplote e) hemolyzát do 3 hodín transportujte do laboratória alebo skladujte do analýzy zmrazené pri -20°C po dobu 30 dní
EPO Erytropoetín
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív, prípadne s K2EDTA Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hod, oddelené séra a plazmy po dobu 7 dní pri 2-8 ° C . Transport do laboratória v chladiacom boxe
Príjem materiálu je na OKB zabezpečený v pracovných dňoch cez Centrálny príjem
vzoriek v čase od 7:00 do 17:00 hod. Po tomto čase od 17:00 do 19:00 hod a v dňoch pracovného pokoja od 8:00 do 12:00 hod je zabezpečený službukonajúcou laborantkou. Po ukončení analýzy sa krvné vzorky skladujú v primárnych skúmavkách v chladničke pri teplote +4°C až +8°C po dobu 48 hodín. Do tejto doby je možné telefonicky požiadať o doplnenie biochemických vyšetrení (pre analyty K, GLU, LDH len ak bol odber urobený do skúmavky so separačným gélom BD VACUTAINER, pre analyty AST, ALT, CK, CK-MB a TNI je nutné urobiť nový odber). Odber moču - Na odber moču sa používajú sklenené alebo plastové skúmavky, močové poháre alebo zberné nádoby. Vyšetruje sa čerstvý ranný stredný prúd moču alebo zbieraný moč za určené a presne udané časové obdobie. Prvý ranný moč (stredný prúd) sa používa na kvalitatívne (chemické) vyšetrenie. Pokyny pre zachytenie stredného prúdu prvého ranného moču: a) pacient vykoná intímnu hygienu b) prvú porciu ranného moču vymočí do WC c) strednú porciu ranného moču zachytí do močového pohára d) zbytok vymočí do WC
Pre odoslanie do laboratória odleje cca 5 – 7ml zo stredného prúdu moču do skúmavky, ktorú dôkladne zazátkuje. Skúmavka musí byť označená štítkom s nasledovnými údajmi: meno, priezvisko a rok narodenia pacienta, označenie materiálu – ranný moč, (pri opakovanom odbere moču, napr. pri glykemickom profile alebo OGTT musí byť vyznačený aj čas odberu moču).
Zbieraný moč za určitý časový úsek sa používa na kvantitatívnu analýzu. Odberová
skúmavka alebo zberná nádoba s močom sa opatrí štítkom s nasledovnými údajmi: meno, priezvisko a rok narodenia pacienta, dátum odberu, pri zbieranom moči doba zberu a objem zbieraného moču. Údaje musia byť presné, čitateľné a identické s údajmi na žiadanke – sprievodnom lístku. V prípade zbieraného moču je potrebné na žiadanku zaznamenať aj výšku a hmotnosť pacienta, dobu zberu a diurézu (objem zbieraného moču/ za časové obdobie). Diuréza u zdravého dospelého človeka je 1200 – 1500 ml/24 hod. (hranične 500 – 2000 ml), u detí je 300 – 1500 ml/24 hod.
Poruchy vo vylučovaní moču:
a) polyúria vylúčenie moču nad 2500 ml/24 hod. b) oligoúria vylúčenie moču pod 300 ml/24 hod c) anúria vylúčenie moču pod 100 ml/24 hod.
OKB
22
Tabuľka uvádza pred analytické podmienky pre vyšetrenie odpadových látok v zbieranom moči:.
Analyt Inštrukcie pre zber moču
Spôsob skladovaniaa transportu *
Poznámka
Amyláza ranný moč ak 24h žiadne aditívum
v chladničke skúmavka zber. nádoba
Glukóza žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba
Urea žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba
Kreatinín žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba
Okyslený moč nevhodný na analýzu.
Kys. močová 10ml 5%NaOH pri izb. teplote !!! zber. nádoba
Total protein žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba
Okyslený moč nevhodný na analýzu.
Mikroalbumín ranný moč ak 24h žiadne aditívum
v chladničke skúmavka zber. nádoba
Zmrazený aj okyslený moč je nevhodný na analýzu.
Na žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba
Okyslený moč nevhodný na analýzu.
K žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba
Okyslený moč nevhodný na analýzu.
Ca žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba
P žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba
Mg žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba
Cl žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba
Jodidy žiadne aditívum v chladničke zber. nádoba
Kortizol 100 mg kys. boritá v chladničke zber. nádoba
5-HIAA 20ml kys. octová v chladničke zber. nádoba
Katecholamíny 20ml 6N HCl v chladničke zber. nádoba - tmavá
Odosielame na analýzu do Medirexu.
Kys. vanilmandlová 10ml 6N HCl v chladničke zber. nádoba
Odosielame na analýzu do Medirexu.
* Ak má pacient alebo ambulancia možnosť zmerať objem moču v odmernom valci, stačí odoslať z dobre premiešaného a zhomogenizovaného zbieraného moču do laboratória na analýzu 10 – 15 ml v zazátkovanej skúmavke a napísať presnú diurézu.
Odber stolice - Stolicu vyšetrujeme na stanovenie skrytého krvácania imunologickým testom SureScreen FOB a novou metódou skríningu OC – Sensor – test 3. generácie, kvantitatívna metóda detekcie okultného krvácania. Diagnostická súprava obsahuje fľaštičku s tekutinou, ktorú poskytujeme ambulanciám a oddeleniam zdravotníckeho zariadenia a slúži na odber stolice. Fľaštičku skladujte dobre uzavretú pri teplote +2 až +30°C.
Fľaštičku po odbere doručte do laboratória najneskôr do 3 dní. Fľaštička musí byť označená štítkom s nasledovnými údajmi: meno, priezvisko a rok narodenia pacienta, dátum odberu a tieto údaje musia byť presné, čitateľné a identické s údajmi na žiadanke – sprievodnom lístku. Nie je potrebný viacnásobný odber, nakoľko tento imunologický test je vysoko citlivý na ľudský hemoglobín a zachytí aj mikroskopické krvácanie v stolici.
OKB
23
Požiadavky na vyšetrenie vzoriek na zistenie paraproteinémie (monoklónovej gamapatie) metódou imunofixácie
Spolu so vzorkou je potrebné zaslať výsledky:
z elektroforézy bielkovín + fóliu s elektroforetogramom (alebo fotokópiu uvedeného záznamu)
z kvantitatívneho stanovenia imunoglobulínov z prípadných iných vyšetrení, na základe ktorých vzniklo podozrenie na
paraproteinémiu. V prípade, že na vašom pracovisku nie je možné tieto analýzy vykonať, môžu byť urobené
v našom laboratóriu, ale treba to uviesť na žiadanke.
Konfirmačné vyšetrenia reaktívnych serologických výsledkov
V prípade reaktívneho serologického výsledku na anti-HCV, HIV a SYPH, ak si žiadate zabezpečiť konfirmačné vyšetrenie v Národných referenčných centrách prostredníctvom nášho pracoviska - Ústavu laboratórnych vyšetrovacích metód, postupujte nasledovne: Pre konfirmáciu na anti-HCV stačí zaslať vyplnenú žiadanku o serologické vyšetrenie
(žiadanka so žltým pruhom); odoslanie materiálu na vyšetrenie zabezpečí následne naše pracovisko.
Pre konfirmáciu HIV a SYPH si vyžiadajte z nášho pracoviska špeciálne žiadanky, ktoré nám vyplnené pošlete späť; odoslanie materiálu na vyšetrenie zabezpečí následne naše pracovisko.
Kontakty na Národné referenčné centrá:
Slovenská zdravotnícka univerzita NRC pre vírusové hepatitídy, Limbová 14, Bratislava Tel.: 02/ 59 370 883, 885 (RNDr. Čipková, Mgr. Burcáková, Mgr. Gašparovič), 02/ 59 370 250, 880 (MUDr. Kazár, DrSc. – ved. NRC) Slovenská zdravotnícka univerzita NRC pre HIV/AIDS, Limbová 14, Bratislava Tel.: 02/ 59 370 133, 144 (RNDr. Hábeková), 02/ 59 370 382, 869 (RNDr. Staneková – ved. NRC) Regionálny úrad verejného zdravotníctva NRC pre syfilis, Senný trh 4, 040 01 Košice Tel.: 055/ 625 61 93 (MUDr. Vargová – ved. NRC)
OKB
24
Nová metóda skríningu kolorektálneho karcinómu (KRCA) na OKB OUSA
OC-Senzor-μ – automatický analyzátor pre kvantitatívnu analýzu hemoglobínu v stolici –
qi-FOBT (Fecal Occult Blood Test) – 3. generácia testov pre zabezpečenie skríningu kolorektálneho karcinómu (KRCA)
Vzhľadom k tomu, že riziko karcinómu hrubého čreva celosvetovo, a teda aj v populácii SR, trvalo narastá, je nanajvýš žiaduci jeho včasný záchyt (skríning).
Skríningové programy kombinujú zobrazovacie metódy ako sigmoidoskopia,
kolonoskopia, irigografia, tomografia, magnetická rezonancia s laboratórnymi metódami, t.j. predovšetkým s detekciou okultného krvácania (FOBT – Fecal Occult Blood Test), ako aj prípadne s inými genetickými metódami. Dôvodom pre vykonanie FOB testov je fakt, že kolorektálny karcinóm už v asymptomatickej fáze ochorenia, či už ako karcinóm alebo adenómový polyp, intermitentne krváca. Aby detekcia okultného krvácania mala čo najvačšiu výpovednú hodnotu a prínos pre klinickú prax je nutné nie len maximálne eliminovať možnosť získania falošne pozitívnych výsledkov, ale tiež kvantifikovať straty krvi pomocou koncentrácie hemoglobínu v stolici. Práve táto hodnota umožňuje pri pozitívnych testoch veľmi presne odhadnúť štádium KRCA.
Citlivosť – senzitivita FOBT testov a súčasne aj ich špecificita je daná predovšetkým
nastavením hranice detekcie (cut-off hodnoty) vychádzajúcej z fyziologických strát krvi stolicou a súčasne koncentráciou hemoglobínu vo vzorkách stolice pri KRCA. Fyziologické rozmedzie pre denné straty krvi stolicou sú v objeme 0.5 - 2.5 ml, čo po prepočte pomocou koncentrácie hemoglobínu v krvi (120 -150 mg/ml) a množstve stolice za 24 hodín (300 – 450g) odpovedá hodnotám 0.3 - 1.3 mg hemoglobínu na 1g stolice. Z toho vyplýva, že túto koncentráciu by skríningové testy FOBT nemali detegovať ako pozitívny nález.
Pre laboratórny skríning kolorektálneho karcinómu sa v klinickej praxi použivajú dve metódy detekcie okultného krvácania, t. j. stanovenia prítomnosti hemoglobínu vo vzorke stolice. Hemoglobín môže byť detegovaný chemicky (hem), alebo imunochemicky (protein – globin). Tieto dva prístupy sa zásadne líšia citlivosťou, teda pozitivitou výsledkov a sú výrazne ovplyvnené aj rozdielnou rýchlosťou degradácie oboch zložiek hemoglobínu s ohľadom na proximodistálny gradient v tráviacom trakte. Globín je degradovaný omnoho rýchlejšie a pozitivita imunochemických testov takmer eliminuje detekciu krvácania v hornej časti tráviaceho traktu. Degradácia hemu je výrazne pomalšia a preto chemicky orientované testy FOBT, napr. Haemocult, môžu reagovať aj na krvácanie z vyšších oblastí GIT.
OKB
25
Spôsoby detekcie FOB
Guajakove testy (g-FOBT) sú založené na chemickom princípe oxidačnej reakcie – pseudoperoxidázovej reaktivite hemu. Výsledok môže byť ovplyvnený prítomnosťou iných oxidačnych látok, ako aj hemoglobínu z potravy. Pri týchto testoch sa obyčajne vyžaduje viacnásobný odber stolice a dodržiavanie určitej diéty pred samotným odberom vzorky. Hodnotenie je kvalitatívne vizuálnym vyhodnotením modrého sfarbenia testovacieho okienka. Guajakove testy majú vysokú špecificitu, nemajú takmer žiadnu falošnú pozitivitu, vykazujú však nízku senzitivitu, len 30%.
Imunochemické testy (i-FOBT) sú založené na detekcii ľudského hemoglobínu (Hb)
monoklónovou protilátkou, čo vylučuje možnosť ovplyvnenia iným zdrojom hemoglobínu (z potravy), nie je nutná žiadna špecialna diéta a odpadá tiež interferencia chemických látok.
Sú to kvalitatívne testy na báze hemaglutinačnej, latexovej imunoprecipitácie, radiálnej imunodifúzie alebo imunoafinitnej chromatografie. Tieto testy majú takmer 2-násobnu citlivosť – 60%, oproti guajakovým testom, avšak vykazujú veľmi vysokú falošnú pozitivitu dosahujúcu až 25%, to znamená, že ich špecificita je nízka.
Kvantitatívne stanovenie ľudského hemoglobínu (qi-FOBT) je najnovšou metódou
detekcie okultného krvácania. Tato 3. generácia FOB testov predstavuje kvantitatívnu analýzu Hb vo vzorke stolice pomocou automatických analyzátorov. Analyticky sa jedná o latexovú, imunochemickú, aglutinačnú reakciu s polyklonálnym antigénom k proteínu ľudského hemoglobínu typu A0. Automatická analýza sa uskutočňuje turbidimetrickým meraním pri 600 nm v rozsahu 20 – 2000 ng Hb/ml. Kvantitatívna analýza umožňuje oproti kvalitatívnym testom definovať optimálnu cut-off hodnotu a touto optimalizáciou je možné zabezpečiť až 83% senzitivitu pri súčasnej špecificite 97%. Takto dosahované hodnoty senzitivity a špecificity 3. generácie FOB testov ich robia najvhodnejšími laboratórnymi metódami pre skríning KRCA. Optimálnymi FOB testami sú podľa súčasných odporúčaní len kvantitatívne imunochemické testy s automatickou analýzou koncentrácie hemoglobínu, kde možno optimalizovať spoľahlivosť vhodným nastavením cut-off detekcie hemoglobínu. Preto skríningové programy v mnohých európskych krajinách (Francúzsko, Írsko, Taliansko, Holandsko, Veľká Británia) sú na základe odporučenia národných skríningových komisií realizované od r. 2008/2009 práve imunochemickými kvantitatívnymi testami 3. generácie spracovanými automatickými analyzátormi.
V súčasnej dobe existuje na svete 6 výrobcov týchto analyzátorov, väčšina z nich je
z Japonska. Najpoužívanejšími analyzátormi v európskych krajinách i celosvetovo sú prístroje OC-Senzor-μ a OC-Senzor-Diana od japonskej firmy Eiken Chemical, ktoré dodáva v ČR a SR distribučná firma Dialab, spol. s r.o., Praha. Najnovšia európska štúdia porovnávajúca kvalitu imunochemických, kvantitatívnych testov pre skríning kolorektálneho karcinómu, ktorá bola publikovaná v júli 2011, preukázala, že práve pri týchto analyzátoroch je dosiahnutá výrazne vyššia reprodukovateľnosť výsledkov a teplotná stabilita vzoriek daná unikátnou odberovou kazetou (Analytical Comparison of Three Quantitative Immunochemical Fecal Occult Blood Tests for Colorectal Cancer Screening. Guittet L, Guillaume E, Levillain R, Beley P, Tichet J, Lantieri O, Launoy G. (INSERM, IRSA, France) Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2011; 20(7); 1492-1501).
OKB
26
V auguste 2011 bol v Onkologickom ústave sv. Alžbety v Bratislave na oddelení klinickej biochémie inštalovaný OC-Senzor-μ ako prvý analyzátor tohto druhu na Slovensku. Analyzátor OC-Senzor-μ technický popis:
automatizovaný analyzátor FOBT latex aglutinačná imunoturbidimetria polyklonové protilátky proti ľudskému HbA0 rozsah merania: 20 – 2000ng Hb/ml zdroj svetla: LED 660 nm detektor: kremíkova fotodióda kyvety: 5mm akrylové termostat inkubačný: 37°C termostat reagencií: 25°C kapacita zásobnikov: 10 kyviet rýchlosť analýzy: 80 testov/1 hod kapacita pamäte: 999 testov bar code reader termotlačiareň
Systém je kalibrovaný 6-bodovou kalibráciou a interná kontrola kvality je zabezpečená meraním kontrolných vzoriek s definovaným koncentračným rozmedzím. Analyzátor OC-Senzor-μ kombinuje kvantitatívnu analýzu Hb s kvantitatívnym odberom vzorky stolice. Zahrňuje teda optimalizovaný proces odberu vzorky s plastovou kazetou, ktorá sa priamo vkladá do automatického analyzátora. Odberová kazeta pre vzorku stolice je unikátnym systémom, ktorý zaisťuje tiež kvantitatívnu extrakciu odobratej vzorky stolice.
Spôsob kvantitatívneho odberu qi-FOBT
Odobratá stolica na odberovej tyčinke so zárezmi (v množstve 20 – 200 mg) je po zasunutí do kazety pretlačená presne definovaným septom, ktoré zaisťuje extrakciu 10 mg stolice do 2 ml stabilizujúceho tlmivého roztoku. Po odbere vzorky a pevnom uzavretí nádobky horným viečkom nedochádza k žiadnemu úniku akýchkoľvek látok, ktoré by hygienicky znepríjemňovali prácu s týmto systémom.
Odobratá vzorka môže byť pred doručením do laboratória skladovaná v chladničke po dobu 7dní. V analyzátore je kazeta mechanickým tlakom stlačená, čím dochadza k pretlačeniu extraktu stolice filtrom do nástrekovej jamky pod alumíniovou fóliou. Táto fólia je následne perforovaná a nástrek 25 μl extraktu je ihlou aplikovaný do meracej kyvety.
OKB
27
Odberový systém qi-FOBT Odberové kazety qi_FOBT sú riešené pre:
identifikáciu vzorky čiarovým kódom optimálny odber stolice plastovým kartáčikom elimináciu stolice plastovým septom filtráciu extraktu nylónovým filtrom ochranu odberovej jamky hliníkovou fóliouVLOŽENISTOLICE
Hodnotenie testov
Spoločným problémom ako guajakových, tak aj imunochemických testov je ich kvalitatívne hodnotenie (pozitívny – negatívny). Významný efekt na stanovenie má aj spôsob odberu stolice pacientom, ktorý nie je presne kvantifikovaný a tiež vizuálne, subjektívne hodnotenie výsledku testu laboratórnym pracovníkom. Tieto problémy odstraňuje použitie automatických analyzátorov stanovujúcich kvantitatívne množstvo ľudskeho Hb v stolici, ktoré ponúkajú zásadnú zmenu v detekcii FOB pre laboratórny skríning KRCA.
Štúdia z pracoviska prof. Rozena z Tel Avivu demonštruje takmer neuveriteľnú
špecificitu kvantitatívneho stanovenia Hb v súbore 1000 kolonoskopovaných pacientov. Hodnoty Hb (95%-tný rozsah priemerných hodnôt) pri normálnom kolonoskopickom náleze sú 25–45ng/ml, pri nepokročilých adenómoch 44–115ng/ml, pri pokročilých adenómoch 315–654ng/ml a pri karcinómoch 697–1477ng/ml. (Rozen P, Levi Z, Hazazi R, et al. Quantitative colonoscopic evaluation of relative efficiencies of an immunochemical fecal occult blood test and a sensitive guaiac test for detecting significant colorectal neoplasms. Aliment Pharmacol Ther 2009; 29: 450–7, Rozen P, Levi Z, Hazazi R, et al. Identification of colorectal adenomas by a quantitative immunochemical faecal occult blood screening test depends on adenoma characteristics, development threshold used and number of tests performed, Alimentary Pharmacology & Therapeutics Volume 29, Issue 8, pages 906–917, April 2009.)
Štúdie urobené v Českej republike – Všeobecná fakultná nemocnica 1. lekárskej
fakulty UK a Fakultná Thomayerova nemocnica v Prahe odporučili pre skríning KRCA v Českej republike kvantitatívnu imunochemickú metódu OC-Senzor pri cut-off hodnote 75ng/ml s preukázanou spoľahlivosťou detekcie karcinómu, alebo pokročilého adenómu 86.7% (Kocna P. a spol. – Clin Chem Lab Med 2009; 47, Suppl.1, June 2009, Kohout P. a spol. – GUT, 2009; 58, Nov. Suppl.2 – p.950.p.A295, Kovařova J.T. a spol. – Vnitřni lekařstvi, 2009; 55(9):878). Kvantitatívne imunochemické FOB testy sú odporúčaným testom pre skríning kolorektálnych nádorov vo väčšine európskych krajín, vrátane ČR. Rada skríningu KRCA Českej gastroenterologickej spoločnosti odporučila používanie kvantitatívnych FOB testov na svojom zasadaní 16. dec. 2010.
OC-Senzor test je 3-krát citlivejší ako guajakove testy so špecificitou, senzitivitou
a spoľahlivosťou 90–95%, pričom tieto analytické parametre je možné optimalizovať nastavením cut-off hodnoty.
Odporúčanou cut-off hodnotou pre skríning a indikáciu ku kolonoskopii
je 75 ng/ml. Výsledky testov korelujú s morfologickým nálezom. Hodnoty vyššie ako 1000 ng/ml preukazujú so spoľahlivosťou 95% prítomnosť kolorektálneho karcinómu.
OKB
28
Oddelenie klinickej biochémie OUSA zabezpečuje vyšetrenie qi-FOBT – test 3. generácie pre skríning KRCA od augusta 2011. Vyšetrenie vykonávame denne. Na požiadanie pošleme odberové kazety. Prínos pre lekára Test so signifikantne lepšou špecificitou, senzitivitou a spoľahlivosťou a celkovo
výrazne vyššou výpovednou hodnotou Najpresnejšia metóda stanovenia okultného krvácania Výsledky nie sú ovplyvnené diétou ani krvácaním vo vyšších oblastiach GIT Kvantitatívne výsledky korelujúce s mierou krvácania prekanceróz (adenómy)
a nádorov hrubého čreva Výrazne vyšší záchyt pozitívných pacientov Eliminácia väčšiny falošne pozitívných výsledkov Vyšší počet cielených endoskopických vyšetrení
Prínos pre pacienta Neinvazívne, nezaťažujúce bezbolestné vyšetrenie bez akejkoľvek predchádzajúcej
prípravy Ľahký a pritom štandardizovaný odber vždy rovnakého množstva vzorky Nevyžaduje špeciálnu diétu pred odberom Kompaktná, dokonale uzavretá odberová kazeta zabraňujúca úniku látok Teplotná stabilita vzorky v kazete s možnosťou dlhodobého uchovávania – až 7 dní
v chladničke Odpadá zbytočný stres pri falošne pozitívnych výsledkoch získavaných doteraz
z vyšetrení robených inými postupmi Minimalizácia počtu nepríjemných endoskopických vyšetrení s negatívnymi nálezmi Vyššia pravdepodobnosť odhalenia nádorov hrubého čreva a adenómových polypov,
z ktorých sa karcinóm môže vyvinúť
OKB
29
Prínos pre laboratórium Kvantitatívny test Analýza standardného množstva vzorky Automatické spracovanie v analyzátore Rýchlosť vyšetrenia – až 80 vzoriek za hodinu Možnosť nastavení optimálnej hodnoty hranice detekcie (cut-off hodnoty) Minimalizácia výskytu falošne pozitívnych výsledkov Tepelná stabilita vzorky Reprodukovateľnosť vyšetrenia Nemožnosť ovplyvnenia výsledkov subjektívnym vizuálnym vyhodnotením
používaným pri predchádzajúcich testoch
Dokonale uzavretá kazeta eliminujúca nepríjemnú manipuláciu so vzorkou Zabezpečenie kontroly kvality - kontrolné materiály pre internú a externú kontrolu
kvality Text: Ing. Darina Veličová, primár OKB OUSA, RNDr. Karel Stajner, Dialab spol. s r.o., Praha Foto: Dialab spol. s r.o., Praha
OKB
30
Oddelenie imunodiagnostiky – OID
OID sa špecializuje na vyšetrenie nádorových markerov, hormóny, kostné a zápalové
markery. V rámci hormonálnej diagnostiky sú vyšetrované tyroidálne parametre, fertilitná diagnostika, nadobličková diagnostika, diagnostika porúch rastu, skríning v gravidite, diabetologická diagnostika. Sú vyšetrované i vitamíny a ďalšie látky. Vo vyšetrovaní nádorových markerov je toto pracovisko tradičným lídrom na slovensku s najdlhšou tradíciou, najširším spektrom a s najvyššou odbornou erudíciou. Oddelenie imunodiagnostiky je centrom pre určovanie nádorových markerov (onkomarkerov) v SR, z ktorých viaceré sa vyšetrujú len na tomto pracovisku. Oddelenie imunodiagnostiky zabezpečuje skríning trisomie 21, 18 a NTD. Najnovšie bolo zavedené vyšetrenie nádorového markera HE4 pre ovariálny karcinom a solubilný receptor HER2 na karcinóm prsníkov.
Oddelenie imunodiagnostiky zabezpečuje vyšetrenie intaktného PARATHORMÓNU v statimovom režime ( intaktná molekula = celistvá, neporušená, nerozpadnutá molekula, biologicky účinná forma). Pracovníci OID
Pracovník: Funkcia: Tel. č.: e-mail: Juraj Kaušitz,
Doc. MUDr., CSc. vedúci odd. (primár) 3224 9 602 jkausitz@ousa.sk
Mišianik Ján, RNDr.
zástupca primára 3224 9 602 jan.misianik@ousa.sk
Sortiment vyšetrení na OID
Skratka Názov vyšetrenia Systém (biolog.
materiál)
Frekvencia vyšetrenia
1. TYREOIDÁLNA DIAGNOSTIKA 76. TSH * Tyreotropný hormón S,P d 77. T4 Celkový tyroxín S,P d 78. T3 Celkový trijódtyronín S,P d 79. FT4* Voľný tyroxín S,P d 80. FT3* Voľný trijódtyronín S,P d 81. TG Tyreoglobulín S d 82. Anti-TG Autoprotilátky proti tyreoglobulínu S d 83. Anti-TPO* Autoprotilátky proti tyreoperoxidáze S d 84. TRAK Autoprotilátky proti TSH receptorom S d
2. NÁDOROVÉ MARKERY85. AFP* Alfafetoproteín S d 86. ß2-MIKRO (B2M) Beta-2-mikroglobulín S,U 2xt 87. HCG+ * Ľudský choriový gonadotropín - celkový S d 88. CEA* Karcinoembryonálny antigén S,P d 89. CA 125* Karcinoantigén 125 S,P d 90. CA 15-3* Karcinoantigén 15-3 S,P d 91. CA 19-9* Karcinoantigén 19-9 S,P d 92. CA 72-4 Karcinoantigén 72-4 S,P 2xt 93. CYFRA 21-1* Cytokeratínový fragment 21-1 S,P,PV d94. NSE* Neurón špecifická enoláza S d 95. SCC* Karcinómový antigén skvamóznych b. S,P d
OID
31
Skratka Názov vyšetrenia Systém (biolog.
materiál)
Frekvencia vyšetrenia
96. TK Tymidínkináza S 2xt 97. TPS* Tkanivový polypeptidický špecifický antigén S d 98. NEO Neopterín S,P,L,V 2xt 99. PSA* Prostatický špecifický antigén S d 100. FPSA* Voľná frakcia prostatic. špecifického antigénu S d 101. CG-A Chromogranín A S 1xt
3. FERTILITNÁ DIAGNOSTIKA102. LH Luteinizačný hormón S,P d 103. FSH Folikuly stimulujúci hormón S,P d 104. ESTRA 17β- Estradiol S,P d 105. PROG Progesterón S,P d 106. PRL Prolaktín S,P d 107. TEST Testosterón ZS d 108. freeTEST Voľný testosterón S 1xt 109. DHEA-S Dehydroepiandrosterón-sulfát S,P dD
4. NADOBLIČKOVÁ DIAGNOSTIKA110. ACTH Adrenokortikotropný hormón P 1x m 111. CORT Kortizol S,P,U d
5. SKRÍNING V GRAVIDITE112. AFP* Alfa1 fetoproteín S, AF d 113. HCG* Ľudský choriogonadotropín S,P d 114. PAPP-A Pregnancy Associated Plazma Protein-A S,P d
6. DIAGNOSTIKA DIABETU115. C-PEP C - peptid S,P d 116. anti-GAD Protilátky proti dekarboxyláze kys.glutamovej S 1x t
7. MARKERY KOSTNÉHO METABOLIZMU 117. iPTH Intaktný parathormón S,P d 118. OSTEO Osteokalcín S 1x t 119. CT Kalcitonín S,P 2-3x m Vysvetlivky: S - sérum, V - výpotok, ZS – zmesové sérum, AF – plodová voda, Ery – erytrocyty, P – plazma, L – likvor, U - moč, P- pleurálny výpotok, * - Akreditovaná skúška
Požiadavky na odber biologického materiálu
Skratka Názov parametra Požiadavky na biologický materiál
TSH Tyreotropný hormón
Materiál: sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA Odobraté vzorky je možné uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra/plazmy 72 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C.
T4 Celkový tyroxín
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA Odobraté vzorky je možné uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra/plazmy 7 dní pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C.
T3 Celkový trijódtyronín
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA. Odobraté vzorky je možné uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra/plazmy 7 dní pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť zmrazené na - 20°C.
OID
32
Skratka Názov parametra Požiadavky na biologický materiál FT4
Voľný tyroxín
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA. Odobraté vzorky je možné uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra/plazmy 3 dní pri 2-8°C, dlhšie skladovanie pri - 20°C.
FT3 Voľný trijódtyronín
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA. Odobraté vzorky je možné uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra/plazmy 3 dní pri 2-8°C, dlhšie skladovanie pri - 20°C.
TG Tyreoglobulín
Materiál : sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky je možné uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra/plazmy 3 dní pri 2-8°C, dlhšie skladovanie pri -20°C.
Anti-TG Autoprotilátky proti tyreoglobulínu
Materiál : sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno skladovať 24 hodín, oddelené sérum 72 hodín pri 2-8°C. Transport do laboratória v chladiacom boxe
Anti-TPO Autoprotilátky proti tyreoperoxidáze
Materiál : sérumOdber a transport : venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno skladovať po dobu 24 hodín, oddelené séra 7 dní pri 2-8°C.
TRAK Autoprotilátky proti TSH receptorom
Materiál : sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno skladovať po dobu 24 hodín, oddelené séra 3 dni pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na - 20°C.
AFP Alfafetoproteín
Materiál : sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Oddelené séra možno skladovať 24 hodín pri 2-8°C, pri dlhšom skladovaní zmraziť na -18°C. Do laboratória transportovať v chladiacom boxe.
ß2-MIKRO (B2M)
Beta-2-mikroglobulín
Materiál : sérum , močOdber a transport:: venózna krv bez aditív Oddelené sérum je možné uchovávať po dobu 72 hod pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -18°C. Druhý ranný moč sa odoberá do sklených alebo plastových nádob s prídavkom 1 ml 0,1mol/l NaOH na 10 ml moču . Na vyšetrenie sa odošle 1 skúmavka moču. Upozornenie! Pri pH moču nižšom ako 5 sa mikroglobulín denaturuje a jeho koncentrácia sa nedá stanoviť
HCG+ Ľudský choriový gonadotropín -celkový
Materiál : sérumOdber a transport: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať pri 2-8 ° C, ak majú byť analyzované do 5 hodín od odberu. Inak je potrebné oddelenie séra centrifugáciou. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C.
CEA Karcinoembryonálny antigén
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA Odobraté vzorky sú stabilné pri 2-8°C 24 hodín, oddelené séra a plazmy 7 dní .
CA 125 Sacharidový antigén
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport: venózna krv bez aditív alebo s K2ETDA Odobraté vzorky možno skladovať 24 hodín , oddelené séra a plazmy 5 dní pri 2-8°C a transportovať do laboratória v chladenom boxe.
CA 15-3 KARCINOantigén 15-3
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport: venózna krv bez aditív alebo s K2ETDA Odobraté vzorky možno skladovať 24 hodín , oddelené séra a plazmy 7 dní pri 2-8°C a transportovať do laboratória v chladenom boxe.
OID
33
Skratka Názov parametra Požiadavky na biologický materiál
CA 19-9 Karcinoantigén 19-9
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport: venózna krv bez aditív alebo s K2ETDA Odobraté vzorky možno skladovať 24 hodín , oddelené séra a plazmy 7 dní pri 2-8°C a transportovať do laboratória v chladenom boxe.
CA 72-4 Karcinoantigén 72-4
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport: venózna krv bez aditív alebo s K2 EDTA Odobraté vzorky možno skladovať 24 hodín , oddelené séra a plazmy 7 dní pri 2-8°C a transportovať do laboratória v chladenom boxe.
CYFRA 21-1 Cytokeratínový fragment 21-1
Materiál: sérum, plazma, pleurálny výpotok Odber a transport : venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA, pleurálny výpotok bez aditív. Odobraté vzorky možno skladovať 24 hodín , oddelené séra a plazmy 7 dní pri 2-8°C . Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C, transport do laboratóriav chladiacich boxoch.
NSE Neurón špecifická enoláza
Materiál: sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Pri stanovení v plazme inteferuje NSE z trombocytov. Oddelenie séra má byť čo najrýchlejšie, skladovanie celej krvi vedie k uvoľňovaniu NSE z erytrocytov. Oddelené séra možno uchovávať po dobu 72 hodín pri 2-8°C, transport do laboratória v chladenom boxe.
SCC Karcinómový antigén skvamóznych buniek
Materiál: sérum, plazma Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív , prípadne s K2EDTA Vzorky ( oddelené séra a plazmy ) sa uchovávajú po dobu 24 hod pri 2-8°C, dlhšie pri -18°C, transport do laboratória v chladiacich boxoch!
TK Tymidínkináza
Materiál: sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Vzorky ( oddelené séra ) sa uchovávajú po dobu 24 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C, transport do laboratória v chladiacich boxoch
TPS Tkanivový polypeptidický špecifický antigén
Materiál : sérumOdber a transport vzoriek : venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hodín , oddelené séra 48 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C, transport do laboratória v chladiacich boxoch.
NEO Neopterín
Materiál: sérum, plazma, mozgomiechový mok, výpotky Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA, iné telesné tekutiny bez aditív. Keďže NEO je veľmi citlivý na priame svetlo, musia byť vzorky chránené pred priamym slnečným svetlom a skladované v chladničke. Ak vzorky nemožno dopraviť do laboratória v deň odberu, možno ich skladovať 24 hodín chránené pred svetlom pri 2-8°C, oddelené sérum/plazma je stabilná za tých istých podmienok 5 dní.
PSA Prostatický špecifický antigén
Materiál: sérumOdber: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hod., oddelené séra po dobu 5 dní pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C, transport do laboratória v chladiacich boxoch.
FPSA Voľná frakcia prostatického špecifického antigénu
Materiál : len sérumOdber a transport : venózna krv bez aditív Oddelenie séra sa má vykonať do 3 hodín od odberu , séra je možné uchovávať 24 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C a dopravené do laboratória v ľade.
CG-A Chromogranín A
Materiál: sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Oddelené sérum je stabilné 24 hodín pri 2-8°C. Ak sa analýza nevykoná v deň odberu krvi, oddelené séra sa uchovávajú pri -20°C a do laboratória sa transportujú v chladiacom boxe.
OID
34
Skratka Názov parametra Požiadavky na biologický materiál LH
Luteinizačný hormón
Materiál : sérum , plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív, prípadne s K2EDTA.Odobraté vzorky možno skladovať po dobu 24 hodín, oddelené séra 48 hodín pri 2-8°C.
FSH Folikuly stimulujúci hormón
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív, prípadne s K2EDTA. Odobraté vzorky možno skladovať po dobu 24 hodín, oddelené séra 48 hodín pri 2-8°C.
ESTRA 17β- Estradiol
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek : venózna krv bez aditív , prípadne s K2EDTA Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hod pri 2-8°C.
PROG Progesterón
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív, prípadne s K2EDTA. Odobraté vzorky možno skladovať po dobu 24 hodín, oddelené séra 72 hodín pri 2-8°C.
PRL Prolaktín
Materiál: sérum, plazmaOdber a transport vzoriek : venózna krv bez aditív, prípadne s K2EDTA Odobraté vzorky možno sa uchovávať po dobu 24 hod pri 2-8°C.
TEST Testosterón
Materiál : zmesové sérumPoznámka. Hladiny testosterónu v priebehu dňa kolíšu, preto je vhodné použiť pri vyšetrení 3 vzorky odobraté v priebehu jednej hodiny v čase medzi 8. - 10. hodinou a stanovenie uskutočniť zo zmiešaného séra. Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra a plazmy 72 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C.
freeTEST Voľný testosterón
Materiál: sérumOdber a transport: venózna krv bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hod pri 2-8°C, do laboratória sa transportujú v chladenom boxe.
DHEA-S Dehydroepiandrosterón-sulfát
Materiál: sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: Venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA. Odobraté vzorky možno uchovávať po dobu 24 hodín, oddelené séra a plazmy 8 hodín pri 2-8°C možno skladovať 24 hodín pri 2-8°C .
ACTH Adrenokortikotropný hormón
Materiál : plazmaOdber a transport: Odoberie sa 3,0-4,0 ml krvi do vychladených plastových skúmaviek s K2EDTA, premieša sa, scentrifuguje a oddelená plazma sa okamžite zmrazí na –20°C ! Transport do laboratória v ľade.
CORT Kortizol
Materiál: sérum, plazma, m o čOdber a transport: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA, čo najrýchlejšie oddelenie séra alebo plazmy, oddelené séra/plazmy možno skladovať 5 dní pri 2-8°C, pri dlhšom skladovaní zmraziť na -20°C. Na vyšetrenie diurnálneho rytmu: odbery o 7:00-9:00, 16:00-18:00 a 24:00 hodine Pri funkčných testoch (ACTH, CRH, dexametazónovom teste) je potrebné označiť dobu odberu na skúmavkách. Moč sa zbiera 24-hodín s presne odmeraným objemom. Na vyšetrenie odoslať 10 ml moču s vyznačeným objemom (24-hodinová diuréza).
AFP Alfa1 fetoproteín
Materiál : sérum , plodová vodaOdber a transport: venózna krv alebo plodová voda bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať 24 hodín, oddelené séra 7 dní pri 2-8°C, pri dlhšom skladovaní zmraziť na -20°C. Do laboratória transportovať v chladiacom boxe.
OID
35
Skratka Názov parametra Požiadavky na biologický materiál
HCG Ľudský choriogonadotropín
Materiál : sérum, plazma , amniotická tekutina Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív prípadne s K2EDTA , plodová voda bez aditív Odobraté vzorky možno uchovávať 24 hodín, oddelené séra 7 dní pri 2-8°C, pri dlhšom skladovaní zmraziť na -20°C. Do laboratória transportovať v chladiacom boxe
PAPP-A Pregnancy Associated Plazma Protein-A
Materiál: sérum, plazma Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo heparinizovaná plazma. K2ETDA plazma nie je vhodná na vyšetrenie, poskytuje nízke vysledky. Vzorky (oddelené séra a plazmy) sa uchovávajú pri 2-8°C, ak sa vyšetrenie realizuje do 24 hodín od odberu. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené a do laboratória transportované v ľade.
C-PEP C - peptid
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2ETDA Oddelené séra/ plazmy možno skladovať 24 hodín pri 2-8°C , dlhšie skladovanie pri -20°C. Transportovať do laboratória v chladenom boxe.
anti-GAD Protilátky proti dekarboxyláze kys.glutamovej
Materiál : sérumOdber a transport: venózna krv bez aditív odobratá nalačno. Oddelené séra možno uchovávať po dobu 48 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní musia byť vzorky zmrazené na -20°C.
iPTH Intaktný parathormón
Materiál : sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA Vzhľadom na nočný nárast PTH sa odporúča odber nalačno ráno po 7,00 hod. Pri odbere natívnej krvi nechať krv zrážať v chladničke pri 2-8°C, oddelenie krvného koagula vykonať čo najskôr podľa možnosti v chladenej centrifúge. Oddelené sérum je stabilné 24 hodín , plazma 72 hodín pri 2-8°C. Pri dlhšom skladovaní zmraziť pri -20°C. Transport zmrazených vzoriek do laboratória v nádobe s ľadom a v chladiacom boxe.
OSTEO Osteokalcín
Materiál : sérumOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Osteokalcin je veľmi nestabilný protein s biologickým polčasom len niekoľko hodín. Správna predanalytická prípava vzorky je podstatná pre kvalitu vyšetrenia. Odobraté vzorky umiestniť do nádoby s ľadovou drťou a okamžite transportovať do laboratória. Oddelenie séra sa musí vykonať do 6 hodín od odberu. 1 ml séra sa naleje do odberových skúmaviek OSCAstabil tubes, ktoré obsahujú inhibítory proteáz umožňujúce uchovávať intaktnú molekulu osteokalcínu pri 2-8°C 24 hodín. Pri dlhšom skladovaní je nutné vzorky zmraziť na 20°C. Vzorky neošetrené stabilizačným činidlom je nutné zmraziť okamžite. Do laboratória dopraviť v ľade a v chladiacom boxe.
CT Kalcitonín
Materiál: sérum, plazmaOdber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív alebo s K2EDTA Oddelené sérum je stabilné 24 hodín pri 2-8°C. Ak sa analýza nevykoná v deň odberu krvi, oddelené séra sa uchovávajú pri -20°C a do laboratória sa transportujú v ľade a v chladiacom boxe.
OID
36
Nádorové markery v klinickej praxi
Nádorová lokalizácia MKCh
Diferenciálna diagnostika
Histologický typ malignity
Sledovanie účinnosti liečby
Sledovanie v remisii
Poznámky
Nádory hlavy, krku a pažeráka
C00-C15
SCCA, CY 21-1, CEA
Epidermoidný ca
SCCA, CY 21-1, TPS
SCCA, CY 21-1
Adeno ca CEA, TPS CEA Nádory žalúdka
C16 CEA, CA 19-9, CA 72-4
Adeno ca CA 72-4, CEA, TPS
CA 72-4, CEA
Nádory čreva C17-20 CEA, CA 19-9, CgA
Adeno ca CEA, CA 19-9, TPS
CEA, CA 19-9
Karcinoid CgA CgA
Nádory pečene a žlčových ciest
C22-24 AFP, CEA, CA 19-9, FER
Hepatocelulárny ca
AFP, FER AFP
Adeno ca, Cholangio ca
CA 19-9, CEA CA 19-9, CEA
Nádory pankreasu
C25 CA 19-9, CEA, CgA, NSE
Adeno ca CA 19-9, TPS CA 19-9 Pri gastrinómoch – GAST a pri inzulinómoch – INS
Neuroendokrinné nádory
CgA, NSE CgA
Nádory pľúc a pleury
C24, C45
CEA, CY 21-1, NSE, CgA, CA 125, SMRP
Adeno ca CEA, TPS CEA SMRP – solubilný mesotelový peptid (=MESOMARK)
Epidermoidný ca
CY 21-1, TPS CY 21-1
Malobunkový ca
NSE, CgA NSE, CgA
Mesotelióm SMRP, Ca 125 SMRP, CA 125
Nádory hrtana C32 SCCA, CY 21-1, CEA
Epidermoidný ca
SCCA, CY 21-1, TPS
SCCA / CY 21-1
Adenoskvamózny ca
SCCA, CEA SCCA, CEA
Nádory prsníka
C50 CA 15-3, CEA Adeno ca CA 15-3, CEA, TPS
CA 15-3 / CEA, TPS
Nádory krčka maternice a vonkajšieho genitálu
C51-53 SCCA, CEA, CY 21-1
Epidermoidný ca
SCCA / CY 21-1, TPS
SCCA
Adeno ca CEA CEA
Nádory tela maternice
C54-55 HE-4, CA 125 Endometrioidný ca
HE-4, CA 125 HE-4, CA 125
Nádory placenty
HCG Trofoblastické nádory
HCG HCG
Nádory ovárií C56
CA 125, HE-4, CA 72-4, CA 19-9, AFP, HCG, LDH
Adeno ca nemucinózny
CA 125, TPS, CA 72-4
CA 125 Pri disgerminómoch – LDH
Adeno ca mucinózny
CA 125, CA 19-9
CA 19-9
Germinatívne nádory
AFP, HCG AFP, HCG, LDH
OID
37
Nádorová lokalizácia MKCh
Diferenciálna diagnostika
Histologický typ malignity
Sledovanie účinnosti liečby
Sledovanie v remisii
Poznámky
Nádory testes C62 AFP, HCG, Free-HCG, LDH
Seminómy LDH, HCG, Free-HCG
HCG, Free-HCG, LDH
Neseminomatózne nádory
AFP, HCG, Free-HCG, LDH
AFP, HCG, Free-HCG, LDH
Nádory prostaty
C61 PSA, f-PSA, CEA, CgA
Adeno ca PSA, TPS, CEA PSA
Pomer f-PSA/PSA vyšetrovať len pri hodnotách PSA v intervale 4 – 10 ng/ml
Nádory obličiek a močových ciest
C64-66 CEA, CgA, CY 21-1, B2M
Svetlobunkový ca, ca z prechodných buniek
TPS, CEA CEA, TPS
Nádory nadobličiek
C74 CgA, NSE Feochromocytóm
CgA, NSE CgA, NSE
Nádory kože C43-44 S-100, SCCA, Melanóm S-100, TK S-100, TK
Epidermoidný ca
SCCA, TK SCCA
Nádory spojiva C40-41, C49
Sarkómy TK TK
Nádory nervového tkaniva
C70-72 NSE, Neuroblastómy
NSE, TK NSE
Hematologické nádory
C81-96 B2M, TK, FER
Lymfómy B2M, TK B2M, TK
Leukémie TK, FER TK, FER Nádory hypofýzy
C75 PRL, CgA Prolaktinómy PRL PRL
Nádory prištítnych teliesok
C73 PTH, CgA Adenómy, karcinómy
PTH PTH
Nádory štítnej žľazy
C73 TG, CT, CEA, CgA
Diferencované karcinómy
TG TG
Medulárne karcinómy
CT, CEA CT, CEA
©Doc. MUDr. Juraj Kaušitz, CSc. 2011
OID
38
Ponuka nových laboratórnych vyšetrení
Onkomarkery
1. Chromogranín A CG-A 2. Mesomark – SMRP (Soluble Mesothelin Related Peptide) 3. IgM-CEA – cirkulujúci imunokomplex 4. HE4 – Nadsemeníkový sekrečný proteín 4 5. HER-2 – HER-2 receptor (HER-2 ECD)
1. CG-A - chromogranín A Hlavné indikácie vyšetrenia CG-A: Diagnostika, monitorovanie liečby a ďalšieho
priebehu ochorenia u neuroendokrínnych tumorov. Zvýšená produkcia CG-A sa vyskytuje najmä pri:
feochromocytóme karcinoidnom tumore neuroblastóme malobunkovom karcinóme pľúc hyperparatyroidnom adenóme tumore hypofýzy endokrinnom tumore pankreasu MEN1 a MEN2 syndróm (MEN = Multiple Endocrine Neoplasia) iných neuroendokrinných nádoroch (gastrinóm, inzulinóm, glukagonóm,
somatostatinóm) neuroendokrinnom nádore prostaty
Poznámka: Zvýšené hodnoty CG-A pri ca prostaty sú spojené s neuroendokrinnou aktivitou nádoru. Poukazujú na nežiaduci rozvoj ochorenia a nižšiu mieru prežívania nezávislú od klinického štádia choroby. Pri ca prostaty je zvýšená hladina CG-A negatívnym prognostickým faktorom. Interferencie a obmedzenia metódy: Zvýšená produkcia z nemalígnych príčin sa môže vyskytnúť pri:
- chronickom zlyhávaní obličiek - hypergastrinémii - atrofickej gastritíde - liečbe inhibítormi protónovej pumpy - liečbe steroidmi
Materiál: Sérum Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Oddelené sérum je stabilné 24 hodín pri 2-8°C. Ak sa analýza nevykoná v deň odberu krvi, oddelené séra sa uchovávajú pri -20°C a do laboratória sa transportujú v chladiacom boxe. Vzorky silne hemolyzované alebo lipemické interferujú pri stanovení a sú príčinou chybných výsledkov! Ref. hodnoty: 10 – 100 ng/ml / (medián 32 ng/ml) Detekčný limit: 1,5 ng/ml
OID
39
2. MESOMARK - Soluble Mesothelin Related Peptide (SMRP) Hlavné indikácie vyšetrenia: Diagnostika, monitorovanie liečby a ďalšieho priebehu
ochorenia u mesoteliómu. Zvýšená produkcia SMRP sa vyskytuje najmä pri Malignom mesotelióme. Poznámka: - SMRP uvoľňovaný do telesných tekutín z mesoteliomových buniek je možné stanoviť
aj niekoľko rokov pred vypuknutím samotného ochorenia - Stanovenie SMRP umožňuje lekárom rutinné monitorovanie jedincov s vysokým rizikom
výskytu malígneho mesoteliómu z dôvodu ich profesionálnej expozície azbestom v súčasnosti, či v minulosti.
- Materiál: Sérum Odber a transport vzoriek: venózna krv bez aditív Oddelené sérum je stabilné 24 hodín pri 2-8°C. Ak sa analýza nevykoná v deň odberu krvi, oddelené séra sa uchovávajú pri -20°C a do laboratória sa transportujú v chladiacom boxe.Vzorky silne hemolyzované alebo lipemické interferujú pri stanovení a sú príčinou chybných výsledkov! Ref. hodnoty: 0 – 1,5 nM (nmol/L) Detekčný limit: 0,3 nM (nmol/L)
OID
40
3. Vyšetrenie sérových hladín IgM-CEA
Karcinoembryonální antigén (CEA) je proteín, ktorý sa nachádza v mnohých typoch buniek, ale hlavne je spojený s nádorovými a fetálnymi bunkami. CEA sa štandardne stanovuje v sére. Normálneho rozmedzia je <5 ng/ml u dospelých nefajčiarov a <10,0 ng/ml u fajčiarov. Zvýšené hladiny CEA sa nachádzajú pri rôznych onkologických diagnózach a boli popísané pri rakovine hrubého čreva, pankreasu, žalúdka, pľúc, prsníka a pod. Zvýšené hladiny boli zistené aj pri benígnych ochoreniach, vrátane cirhózy, zápalových črevných ochoreniach, chronickom ochorení pľúc a pankreatitíde. Hladiny CEA boli zvýšené až u 19 percent fajčiarov a 3 percentách zdravej populácie. Okrem vyššie opísaných benígnych ochorení je hladina CEA výrazne ovplyvnená aj cirkulujúcimi autoprotilátkami. Zvýšená hladina cirkulujúcich autoprotilátok je spojená s rôznymi autoimunitnými a imunodeficientnými ochoreniami, ktoré sa môžu klinicky manifestovať, alebo sú latentné. Najdôležitejší cirkulujúci imunokomplex v triede CEA je IgM-CEA. Klinické štúdie ukázali, že súčasné stanovenie CEA a IgM-CEA zvyšuje senzitivitu CEA pri I. klinickom štádiu kolorektálneho karcinómu o 50%. Vyšetrenie sérových hladín IgM-CEA je veľmi presný a citlivý ELISA test určený na meranie CEA imunitných komplexov v sérach pacientov. Odber: odoberá sa periférna krv u pacienta nalačno do biochemických odberoviek Vacutainer na sérum (červený vrchnák). Referenčné hodnoty: IgM-CEA: do 200 UI/ml
Vyšetrenie sa realizuje pri hladinách CEA <10,0 ng/ml!
4. HE4 – Nadsemenníkový sekrečný proteín 4 (Human epididymis secretory protein 4)
Hlavné indikácie vyšetrenia:
1. pomoc pri monitorovaní odpovede na terapiu pacientov s invazívnym epiteliálnym karcinómom ovária
2. na monitorovanie stavu ovariálneho karcinómu – stanovenie hladín HE4 v sére sa musí použiť v spojení s ostatnými klinickými metódami
3. hlavné použitie výsledkov HE4, spolu s výsledkami CA125, je pri výpočte rizika epiteliálneho karcinómu ovária u žien so zistenou pelvickou masou v premeno- a postmeno-pauze. Výsledky musia byť interpretované v spojitosti s ostatnými metódami v súlade so štandardnými klinickými postupmi.
Vysvetlenie podstaty testu:
Ľudský nadsemenníkový proteín 4 (HE4) patrí do skupiny WDFC (Whey Acidic Four Disulphide Core) proteínov. HE4 bol prvýkrát identifikovaný v epiteli distálneho nadsemenníka a pôvodne bol pokladaný za inhibítor proteázy pri dozrievaní spermií. Doterajšie publikácie uvádzali, že HE4 sa tvorí aj v iných zdravých tkanivách, napr., respiračnom epiteli, tkanivách pohlavných orgánov a taktiež v tkanivách ovariálneho karcinómu.
OID
41
V porovnávacej štúdii zdravých jedincov a pacientov s ovariálnym karcinómom (Hellström et al.) sa zistilo, že HE4 detekoval ovariálny karcinóm so 67% senzitivitou a 96% špecificitou. V následnej štúdii porovnávajúcej mnoho známych biomarkerov pre ovariálny karcinóm HE4 vykazoval najvyššiu senzitivitu pri detekcii ovariálneho karcinómu, zvlášť pri skorom štádiu ochorenia. V tejto štúdii sa ukázala kombinácia HE4 a CA125 so senzitivitou 76% a špecificitou 95% pre stanovenie malignity oveľa presnejšia, ako ktorýkoľvek iný samostatný marker.
Rakovina ovárií je celosvetovo štvrtá najčastejšia príčina úmrtnosti na rakovinu u žien.
Príznaky ovariálneho karcinómu sú spojené s prítomnosťou adnexových más, ktoré sú často nejasné a nešpecifické. Primárnym cieľom diagnostického hodnotenia adnexových más je zistenie, či ide o benígny proces, alebo o malignitu.
Odhaduje sa, že počas života až 5-10% žien v USA podstúpi chirurgický zákrok pre
podozrenie na ovariálnu neoplazmu a 13-21% z nich bude mať ovariálnu malignitu. Pretože väčšina adnexových más je benígnych je dôležité už predoperačne zistiť – pre zaistenie ďalšieho manažmentu liečby - aké vysoké riziko ovariálnej malignity má pacientka.
Od prvých správ v roku 1988 boli štandardmi pri zisťovaní, či je adnexová masa
podozrivá z malignity alebo nie, nasledovné faktory: klinický dojem, CA125 + USG + CT , MRI + CT/PET.
V literatúre je mnoho prác porovnávajúcich, ktorá kombinácia je najvhodnejšia.
Kombinácia zobrazovacích metód a tandemového vyšetrenia HE4+CA125 s výpočtom ROMA dosahuje dosiaľ najvyššiu pozitívnu prediktívnu hodnotu.
Práve HE4 v spojení s CA125 je pomocou na zlepšenie hodnotenia (triage) pacientok
so zistenou pelvickou masou pri zisťovaní rizika, či má alebo nemá pacientka epiteliálny ovariálny karcinóm.
Výsledky musia byť interpretované v spojení s ostatnými metódami v súlade
so štandardnými klinickými odporúčaniami (management guide-lines). Ďalšie dôležité využitie stanovenia HE4 je monitoring odozvy na liečbu pacienta s invazívnym epiteliálnym ovariálnym karcinómom. Výsledok má byť interpretovaný v spojení s ostatnými klinickými metódami používanými pri monitoringu pacientok s ovariálnym karcinómom.
Odber: odoberá sa periferná krv u pacientky nalačno do biochemických odberoviek Vacutainer na sérum (červený vrchnák).
OID
42
5. HER-2- solobilný EGF receptor 2 extracelulárna doména (HER-2 ECD) Zvýšené sérové hladiny HER2 ECD sa vyskytujú približne v 0%–38% u pacientok
s primárnym karcinómom prsníka a 23%–80% pacientok s metastatickým karcinómom prsníka (HER2 pozitivita nádorového tkaniva IHC/FISH je približne 25-30% z celkového počtu nádorov prsníka). Stanovovaním sérovej hladiny HER2 ECD môžeme získať potencionálny nezávislý prognostický a prediktívny marker u primárneho a metastatického nádoru prsníka. Rovnako ako pri amplifikácii a overexpresii HER2 sa pozitivita HER2 ECD spája s horšou prognózou ochorenia. Kombinácia vyšetrovania HER2 ECD a konvenčne využívaných markerov CEA a CA 15-3 prináša celkové zvýšenie senzitivity hlavne na skorú detekciu relapsu ochorenia až 76%. Zvýšená sérová hladina CA 15-3 v kombinácii so zvýšenou sérovou hladinou HER2 ECD je spojená s horšou prognózou, ako samostatne zvýšená sérová hladina CA 15-3. Klinické štúdie ukázali, že približne 25% pacientok s prvolíniovou hormonálnou terapiou môžu zmeniť svoj status z HER2/neu negativity na HER2/neu pozitivitu. Stanovenie sérovej hladiny HER2 ECD u tejto skupiny je nezávislým rizikovým faktorom.
Pri relapsoch nádoru prsníka sú pozorované zmeny HER2 statusu medzi primárnym nádorom a tkanivom metastáz, pravdepodobne selekciou a zmenami klonov nádorových buniek. Stanovovanie sérovej hladiny HER2 ECD vykazuje vysokú konkordanciu s referenčným štandardom IHC a FISH, so senzitivitou a špecificitou do 90% . Rozdiel vo výsledkoch vyšetrení môže naznačovať práve selekciu klonu. Každý relaps nádoru prsníka nie je niekedy možné bioptizovať a histologizovať, preto môže detekcia HER2 ECD napomáhať stanoveniu prognózy a predikcie, čím prináša pridanú hodnotu oproti konvenčným markerom. Napomáha tiež klinickým rozhodnutiam v prípade diskordaných tkanivových vzoriek. Vysoká sérová hladina HER2 ECD pri negatívnej tkanivovej expresii HER2 je spojená s vysokou pravdepodobnosťou recidívy základného ochorenia. Pri metastatickom HER2 pozitívnom karcinóme prsníka liečenom kombináciou chemoterapie a Trastuzumabom bol v prípade účinnosti liečby zistený signifikantný pokles hladín HER2 ECD oproti vstupným hodnotám. Pacientky, u ktorých došlo k progresii ochorenia počas liečby mali nesignifikantné zmeny sérovej hladiny ECD. Ukazuje sa, že opakované stanovenie HER2 ECD je výborným ukazovateľom účinnosti terapie Trastuzumabom. Elevované hladiny HER2 ECD sú prediktorom relatívnej rezistencie na hormonálnu liečbu a niektoré režimy chemoterapie. Vyšetrovanie HER2 ECD u zdravej kontrolnej populácie počas viacerých mesiacov vykazovalo konzistentné hladiny sérového HER2 ECD v medziach referenčnej normy s minimálnymi odchýlkami. Stanovovanie HER2 ECD predstavuje pravú kvantitatívnu metodiku, ktorá prináša doplňujúcu informáciu k IHC a FISH stanovovaniu HER2 v nádorovom tkanive, ktoré sú semikvantitatívnymi. Perspektívne je vhodné zvážiť súčasné vyšetrovanie sérovej hladiny TIMP-1 a ECD, nakoľko TIMP-1 ovplyvňuje produkciu solubilného HER2 ECD.
OID
43
Využitie monitorovania sérového HER2 ECD a indikácie vyšetrenia 1. Primárny nádor prsníka - predoperačne a pooperačne
– Prognostický indikátor v oboch skupinách: uzlina pozitívneho aj negatívneho karcinómu prsnika
– Elevované hodnoty spojené s horšou prognózou, skrátením času do progresie ochorenia a skrátením DFS (disease free survival)
– Vysoké hodnoty spojené s častejším relapsom vo forme vzdialených mts (45.4%), lokoregionálna recidíva (9.2%)
– Elevované hodnoty spojené s častejšiou rezistenciou na adjuvantnú chemoterapiu CMF
2. Nádor prsníka - obdobie observácie
– Marker rekurencie ochorenia, s vysokou senzitivitou pri viscerálnom postihnutí
3. Metastatický nádor prsníka – Hodnota pred terapiou - čiastočne predikuje odpoveď na 1. a 2. líniu hormonálnej
terapie. Elevované hodnoty spojené s kratším trvaním odpovede na liečbu, skrátenie času do progresie a zlyhania terapie, znížením počtu objektívnych odpovedí a znížením počtu klinických odpovedí vrátane stabilizácie ochorenia
– HER2 ECD predikuje horšiu odpoveď na chemoterapeutické režimy CMF, Taxány – Hodnota po chemoterapii je prognostickým indikátorom DFS – Sledovanie dynamiky hladín HER2 ECD počas chemoterapie koreluje s klinickým
priebehom ochorenia
4. HER2 pozitívny nádor prsníka – Liečba monoklónovou protilátkou (Trastuzumabom) neinterferuje so stanovovaním
sérových hladín HER2 ECD – Sledovanie dynamiky hladín HER2 ECD počas terapie Trastuzumabom koreluje
s odpoveďou na liečbu a klinickým priebehom ochorenia – najvýhodnejšie vyznačené u skupiny pacientok s viscerálnymi metastázami.
Referenčné hodnoty: do 9 ng/ml Materiál: sérum Odber a transport vzoriek: venózna krv Kontakt: Doc. MUDr. Juraj Kaušitz, CSc. primár OID, email: jkausitz@ousa.sk, tel. + 421 2 3224 9602 RNDr. Ján Mišianik, zástupca primára OID, email: jan.misianik@ousa.sk, tel. + 421 2 3224 9602
OID
44
Oddelenie hematológie a transfuziológie – HTO
HTO zabezpečuje komplexnú hematologickú diagnostiku. Okrem vyšetrení
základných parametrov krvného obrazu, diferenciálu leukocytov, počtu retikulocytov a morfologického vyšetrenia periférnej krvi a kostnej drene vykonávame základné a špeciálne hemostazeologické analýzy a imunohematologické vyšetrenia (stanovenie krvných skupín, skríning protilátok, skúška kompatibility) v 24 hodinovej nepretržitej prevádzke. V rámci kompletného hemokoagulačného vyšetrenia okrem výsledku poskytujeme na požiadanie aj interpretáciu a vyhodnotenie laboratórnych parametrov s odporúčaním ďalšieho postupu, prípadne liečby. Konziliárne služby poskytujeme telefonicky, osobne pri lôžku, alebo vo vlastnej ambulancii po objednaní pacienta.
Oddelenie hematológie a transfuziológie ponúka pre klinické oddelenia, ako aj pre ambulancie odborných lekárov špecialistov hematológov, onkológov a kardiológov široké spektrum najmodernejších vyšetrení multiparametrovou prietokovou cytometriou. Pre hematológov a onkológov:
imunofenotypizácia lymfoproliferatívnych a myeloproliferatívnych malignít, detekcia PNH klonov
vyšetrenie včasných markerov zápalu a sepsy (CD64, CR1, CR3) stanovenie subpopulácií lymfocytov stanovenie antitrombocytových protilátok stanovenie viazaných protilátok proti leukocytom angiogénne cytokíny, chemokíny a inflamatórne cytokíny
Pre kardiológov:
– stanovenie fosforylácie VASP (vazodilatačne stimulovaný fosfoproteín) pri monitorovaní antitrombotickej liečby derivátmi tienopyridínov.
Vysoká kvalita poskytovaných laboratórnych vyšetrovacích metód je zabezpečená
zapojením sa HTO do uznávaných medzinárodných systémov externého hodnotenia kvality. HTO má zavedený systém manažérstva kvality pre medicínske laboratóriá podľa ISO 17025 a laboratórium je akreditované a v rámci OUSA je tiež certifikované podľa ISO 9001. Organizačná štruktúra – personál – kontakt - Hematologické a transfuziologické oddelenie sa nachádza v Bloku D na III. poschodí OUSA, Tel. +421 2 322 49 + klapka
Funkcia Pracovník Úsek klapka
Primár Doc. MUDr. Tomáš Lipšic, CSc.
HTO kl.526
Sekundárny lekár MUDr. Zuzana Šimoníková HTO kl.525 Zdravotná sestra Eva Rákoczová Hematologická ambulancia kl.525 Vrchná laborantka Alena Mrázová HTO/Úsek hemokoagulácie kl.523 Laborantka špecialistka Yveta Kováčiková Úsek hematológie kl.522 Laborantka špecialistka Katarína Orgoňová Úsek hematológie kl.522 Laborantka špecialistka Libuše Baumanová Úsek prietokovej cytometrie kl.537 Laborantka špecialistka Mgr. Jana Letenayová Úsek imunohematológie kl.500 Laborantka Jana Rubintová Úsek imunohematológie kl.500
HTO
45
Funkcia Pracovník Úsek klapka
Laborantka špecialistka Eva Lacková HTO/Úsek imunohematológie
kl.500
Iný VŠ pracovník RNDr. Tatiana Železníková, PhD.
Úsek prietokovej cytometrie kl.534
Iný VŠ pracovník Mgr. Peter Bartek, PhD. HTO/Úsek prietokovej cytometrie
kl.537
Pohotovostná služba kl.500, 522, 523, 524 +421 905 623 895
Laboratórno – diagnostické pracovisko spracováva a testuje vzorku biologického materiálu, nie pacienta samotného. Za kvalitu vzorky a jej vhodnosť na vyšetrenie, jej reprezentatívnosť v zmysle korelácie so skutočným stavom pacienta, zodpovedá pracovisko zabezpečujúce prípravu pacienta, odber vzorky, jej skladovanie a transport. Konzekventne klinické pracovisko je zodpovedné za indikáciu vyšetrenia.
Požadované vyšetrenia: – použitie štandardnej žiadanky a uvedenie všetkých požadovaných údajov o pacientovi,
oddelení/pracovisku – čas odberu – uvedenie potrebných klinických údajov – uvedenie potrebných údajov o aktuálnej liečbe
Kvalita vzorky
– použitie štandardnej odberovej skúmavky – adekvátne označenie odberovej skúmavky (pri ručnom označovaní používať paličkové
čitateľné písmo!) – vykonávať atraumatický štandardný odber z nepoškodenej vény a v nepoškodenom
tkanive – pri odbere z kanyly nepoužiť na odber prvých 5 ml krvi – na hemokoagulačné vyšetrenie nepoužiť prvých 3-5 ml krvi (možno ich použiť na iné
vyšetrenie) – štandardné naplnenie odberovej skúmavky (po rysku) – dodržať štandardné postupy po odbere – premiešanie vzorky 3–5 krát ihneď
po odbere, skladovanie pri laboratórnej teplote, resp. pri 2 - 8ºC (podľa typu vzorky a vyšetrenia)
Iné požadované informácie
– uvedenie relevantnej terapie na žiadanke – antikoagulačná terapia (pre hemostazeologické vyšetrenia – druh, dávka, trvanie), hemoterapia pre imunohematologické vyšetrenia, iná terapia, ktorá môže ovplyvňovať vyšetrované parametre (kortikoidy, rastové faktory)
– uvedenie iných údajov, ak sú relevantné (iné diagnózy, klinický stav pacienta – infekt, sepsa, zápal, krvácanie, operácia)
Iné základné informácie
– za kvalitu a identitu vzorky zodpovedá žiadateľ – oddelenie, lekár – pri dostatočnom objeme a kvalite vzorky je možné vyšetrenia rozšíriť o ďalšie testy,
ak je to indikované (úspora času a materiálu) – nie všetky vykonávané vyšetrenia môžu byť statimové – nie všetky vyšetrenia sa vykonávajú v ústavnej pohotovostnej službe
HTO
46
Poznámky k uvádzaným údajom Časy príjmu a spracovania vzoriek
– časy príjmu vzoriek pre rutinné a statimové vyšetrenia boli stanovené na základe organizačných, technologických, biologických, ako aj ekonomických dôvodov a je potrebné ich rámcovo dodržiavať
– časy potrebné na vyšetrenie vzorky (zahrňajú čas od príjmu vzorky, cez spracovanie vzorky a žiadanky, vykonanie testu, hodnotenie technologické a medicínske, po schválenie výsledku) sú definované na základe analýzy pracovnej nálože v danom časovom priestore, personálnych a materiálno-technických možností.
Referenčné hodnoty a limity – pre väčšinu parametrov sú definované dlhodobé referenčné hodnoty určené
na podklade odbornej literatúry s prihliadnutím na štatistické vyhodnotenie vyšetrovanej populácie v rámci ústavu
Alarmové a vitálne hodnoty Alarmové hodnoty sú tie, ktoré významne prekračujú referenčné hodnoty – výsledky
sú následne overené, môžu byť doplnené o iné relevantné testy a konečný výsledok je komentovaný. Pri parametri INR výsledok nemusí byť komentovaný u pacientov, u ktorých je monitorovaná účinnosť antikoagulačnej liečby (pacienti s diagnózou I25 a pridruženými diagnózami).
Vitálne hodnoty sú také, kedy hodnota parametra/parametrov predstavuje závažné ohrozenie stavu, vitálnych funkcií alebo života pacienta - výsledky sú následne overené, môžu byť doplnené o iné relevantné testy, výsledok je okamžité hlásený telefonicky (ak je to možné) na žiadajúce pracovisko a konečný výsledok je komentovaný.
Alarmové a vitálne hodnoty sú stanovené podľa kritérií uvádzaných v literatúre a môžu
byť dohodou upravené.
Parameter Jednotka Alarmové hodnoty Vitálne hodnoty Poznámka
HGB g/L Muži 80 alebo 190 Muži 55 alebo 200 Ženy 70 alebo 170 Ženy 50 alebo 180
RBC 1012/L Muži 3,0 alebo 7,0 Muži 2,5 alebo 8,0 Ženy 2,5 alebo 6,0 Ženy 2,2 alebo 7,0
HCT - Muži 0,30 alebo 0,60 Muži0,25 alebo 0,65
Ženy 0,25 alebo 0,50 Ženy 0,20 alebo 0,55
MCV fl 70 alebo 110 60 alebo 120 MCH Pg 24 24 MCHC g/dL 28 28 WBC 109/L 2,0 alebo >15,0 1,0 alebo 20,0 LYMPH % 15 alebo 60 10 alebo 70 NEUT % 20 alebo 85 10 alebo 90 EO % 8 15 MONO % 15 20 PLT 109/L 50 alebo 600 20 alebo 1000 RT % 0,2 alebo 3,5 0,1 alebo 10,0
Morfológia Er
-
Mikrocytóza, makrocytóza, hypochrómia, polychromázia, sférocytóza, poikilocytóza, inklúzie, fragmenty, erytroblast
Prítomnosť morfologických zmien je vždy komentovaná vo výsledku Morfológia
Le -
Posun doľava, posun doprava,atypické Le, nezrelé elementy,vakuolizácia, toxická granulácia
HTO
47
Parameter Jednotka Alarmové hodnoty Vitálne hodnoty PoznámkaMorfológia Tr
- Mikrocytóza, makrocytóza, obrovské trombocyty
PT INR 0,6 alebo 2,0 0,4 alebo 4,0 APTT R 0,6 alebo 2,0 0,4 alebo 3,0 TT R 0,5 alebo 2,0 0,4 alebo 4,0 FBG g/L 1,0 alebo 6,5 0,6 alebo 8,0 HTI sek 0,6 alebo 2,0 0,5 alebo 2,5 RČP sek 40 alebo 150 30 alebo 180 D-Dimér mg/L 1 20 ATIII % 50 30 PCG 0,5 alebo 1,6 0,3 alebo 3,0 FXII % 40 alebo 200 30 alebo 250
V prípade vyšetrení KS, skríningu protilátok a skúšky kompatibility je potrebné
okamžité oznámenie výsledku skúšky v prípade, keď je tento výsledok v nesúlade s predchádzajúcimi výsledkami. Diagnostická časť HTO poskytuje na požiadanie konzultácie týkajúce sa:
1. interpretácie výsledkov vykonaného vyšetrenia 2. možnosti realizácie vyšetrenia v danom čase u daného pacienta 3. možnosti rozšírenia o ďalšie diagnostické postupy resp. postupnosti diagnostických
algoritmov 4. interferencií ovplyvňujúcich stanovené hodnoty (stav pacienta, terapia)
ZOZNAM HEMATOLOGICKÝCH VYŠETRENÍ
Názov vyšetrenia Materiál/
Objem Typ
skúmavky Čas vyšetrenia Príjem vzoriek
Rutina Statim Rutina Statim
Krvný obraz bez diferenciálu leukocytov PK /
2,7 ml
BD fialový Sarstedt červený
180 min
20 min 7 - 15 0 - 24
Krvný obraz s 5 populačným diferenciálom leukocytov
PK / 2,7 ml
BD fialový Sarstedt červený
180 min
20 min 7 - 15 0 - 24
Počet retikulocytov a ich parametre PK /
2,7 ml
BD fialový Sarstedt červený
180 min
20 min 7 - 15 0 - 24
Reakcia POX v leukocytoch (cytochemicky)
PK, KD / 2,7 ml
BD fialový Sarstedt červený
48 hod - 7 - 15 0 - 24
Reakcia PAS v leukocytoch (cytochemicky)
PK, KD / 2,7 ml
BD fialový Sarstedt červený
48 hod - 7 - 15 0 - 24
Reakcia AF v leukocytoch (cytochemicky) PK, KD /
2,7 ml
BD fialový Sarstedt červený
48 hod - 7 - 15 0 - 24
Sedimentácia erytrocytov (FW) PK /
1,8 ml
BD Seditainer čierny
360 min
120 min
7 - 15 0 - 24
Morfológia periférnej krvi PK /
2,7 ml
BD fialový Sarstedt červený
48 hod 120 min
7 - 15 0 – 24
Morfológia/myelogram kostnej drene KD /
2,7 ml
BD fialový Sarstedt červený
48 hod - 7 - 15 0 – 24
Morfológia likvoru likvor / 2,7
ml
BD fialový Sarstedt červený
48 hod 120 min
7 - 15 0 – 24
HTO
48
ZOZNAM HEMOSTAZEOLOGICKÝCH VYŠETRENÍ
Názov vyšetrenia Materiál/
Objem Typ
skúmavky Čas vyšetrenia Príjem vzoriek
Rutina Statim Rutina Statim
Protrombínový čas QUICK + index INR PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
180 min
20 min 7 - 15 0 – 24
Aktivovaný parciálny tromboplastínový čas APTT + index APTTRatio
PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
180 min
20 min 7 - 15 0 – 24
Fibrinogén – koncentrácia v plazme PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
180 min
20 min 7 - 15 0 – 24
Heparín tolerančný index PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
180 min
20 min 7 - 15 0 – 24
Rekalcifikačný čas plazmy PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
180 min
20 min 7 - 15 0 – 24
D-dimér – stanovenie koncentrácie v plazme
PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
24 hod 120 min
7 - 15 0 – 24
Antitrombín III – stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
24 hod 120 min
7 - 15 0 – 24
ProCGlobal - stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1týždeň - 7 - 15 0 – 24
Faktor XII – stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Faktor II – stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Faktor V – stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Faktor VII – stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Faktor VIII – stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Faktor IX – stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Faktor X – stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Faktor XI – stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Faktor XIII – kvalitatívne stanovenie PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Proteín C – stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Proteín S – stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Lupus antikoagulans – koagulačné stanovenie prítomnosti
PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Plazminogén – stanovenie aktivity PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
2 týždne až
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
DTI – priame inhibítory trombínu PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
2 týždne až
1mesiac
- 7 - 15 0 – 24
Poznámky:
1. odber vzoriek vykonávať atraumaticky s použitím vákuového systému (v kolónke Typ skúmavky sú uvedené také odberové skúmavky, ktoré uprednostňujeme ako najvhodnejšie a preto ich poskytujeme zdarma)
2. vzorky doručiť do 4 hodín od odberu (pri morfologickom vyšetrení do 2 hodín) 3. hodnoty indexov (APTT R, INR, TT R, HTI) udávajú pomer nameranej hodnoty pacientskej vzorky
voči kontrolnej vzorke
HTO
49
ZOZNAM IMUNOHEMATOLOGICKÝCH VYŠETRENÍ
Názov vyšetrenia Materiál/
Objem Typ
skúmavky Čas vyšetrenia Príjem vzoriek
Rutina Statim Rutina Statim
Orientačné vyšetrenie krvnej skupiny ABO PK / 5 ml
BD červený Sarstedt biely
24 hod 45 min 7 - 15 0 – 24
Vyšetrenie krvnej skupiny ABO+Rh(D) PK / 5 ml
BD červený Sarstedt biely
24 hod 45 min 7 - 15 0 – 24
Skríning tepelných protilátok NAT PK / 5 ml
BD červený Sarstedt biely
24 hod 45 min 7 - 15 0 – 24
Skríning tepelných protilátok enzýmovým testom
PK / 5 ml
BD červený Sarstedt biely
1 týždeň
45 min 7 - 15 0 – 24
Skríning chladových protilátok PK / 5 ml
BD červený Sarstedt biely
24 hod 45 min 7 - 15 0 – 24
Priamy antiglobulínový test PK / 5 ml
BD fialový Sarstedt červený
24 hod 45 min 7 - 15 0 – 24
Skúška kompatibility (krížny pokus) PK / 5 ml
BD červený Sarstedt biely
24 hod 45 min 7 - 15 0 – 24
ZOZNAM VYŠETRENÍ PRIETOKOVEJ CYTOMETRIE
Názov vyšetrenia Materiál/
Objem Typ
skúmavky Čas vyšetrenia Príjem vzoriek
Rutina Statim Rutina Statim
Imunofenotypizácia PK,KD / 2,7 ml Likvor Uzlina
BD fialový Sarstedt červený (uzlina vo fyziol. roztoku)
72 hod 180 min
7 - 15 7 - 15
VASP (stanovenie účinnosti liečby clopidogrelom)
PK / 5 ml
BD modrý Sarstedt zelený
24 hod 120 min
7 - 15 7 - 15
CD64 – včasný marker infekcie/sepsy PK / 2,7 ml
BD fialový Sarstedt červený
24 hod 180 min
7 - 15 7 - 15
Subpopulácie lymfocytov PK / 2,7 ml
BD fialový Sarstedt červený
24 hod 120 min
7 - 15 7 - 15
Antitrombocytové protilátky PK / 5,4 ml
BD fialový Sarstedt červený
48 hod 240 min
7 - 15 7 - 15
Cytokínový panel Angio (VEGF, bFGF, IL-6, IL-8, IL-1, MCP-1, TNF)
PK / 2,7 ml
BD fialový Sarstedt červený
1mesiac - 7 - 15 7 - 15
Poznámky:
1. odber vzoriek vykonávať atraumaticky s použitím vákuového systému (v kolónke Typ skúmavky sú uvedené také odberové skúmavky, ktoré uprednostňujeme ako najvhodnejšie a preto ich poskytujeme zdarma)
2. vzorky doručiť do 4 hodín od odberu (pre vyšetrenie antitrombocytových protilátok a panelu cytokínov Angio je dodržanie tejto podmienky zásadné)
3. pre imunofenotypizáciu je potrebné doplnenie relevantných klinických informácií žiadateľom
Naše oddelenie hematológie a transfuziológie ponúka široké spektrum vyšetrení multiparametrovou prietokovou cytometriou, ktoré sú potrebné pre klinické oddelenia nemocnice, ako aj pre ambulancie odborných lekárov špecialistov hematológov, onkológov, kardiológov.
HTO
50
Pre hematológov a onkológov: 1. imunofenotypizácia lymfoproliferatívnych a myeloproliferatívnych malignít pri:
– stanovení diagnózy (z periférnej krvi, kostnej drene, likvoru, lymfatickej uzliny) – monitorovaní úspešnosti liečby (minimálna zvyšková choroba – MRD) – stanovenie deficientného klonu erytrocytov, granulocytov, alebo monocytov
pri diagnostike PNH
2. vyšetrenie zápalových markerov (CD64, CR1, CR3): – včasný zápalový marker s vyššou špecifitou u onkologických pacientov, na rozdiel
od bežných zápalových markerov (napr. CRP, PCT) – pri diferenciálnej diagnostike a monitoringu febrilného stavu a/alebo sepsy – pre zlepšenie diagnostiky pri určovaní závažnosti sepsy/infekcie
3. stanovenie subpopulácií lymfocytov 4. stanovenie antitrombocytových protilátok
– stanovenie prítomnosti imunoglobulínov triedy IgG, A, M viazaných na trombocytoch
– pri diagnóze trombocytopénie neznámej etiológie
5. stanovenie viazaných protilátok proti leukocytom – stanovenie prítomnosti imunoglobulínov triedy IgG, A, M viazaných
na granulocytoch pri dg. neutropénií
Komplexný imunofenotyp stanovujeme použitím širokého spektra monoklónových/ polyklónových protilátok a ich kombinácií v 4 až 6-farebnom značení na prietokovom cytometri FACSCanto II od firmy Becton-Dickinson. Pre lekárov kardiolólogov:
– stanovenie fosforylácie VASP (vazodilatačne stimulovaný fosfoproteín): prediktívny test (PLT VASP/P2Y12) pre monitorovanie efektu účinnosti liečiv na báze thienopyridínov (clopidogrel, ticlopidine, prasugrel) u pacientov po perakútnej koronárnej intervencii (PCI) a pacientov s koronárnym syndrómom (CAD).
Naše oddelenie poskytuje tiež odborné konzultácie, ktoré sa týkajú indikácie vyšetrení,
odberu biologického materiálu a interpretácie výsledkov. V prípade záujmu sme pripravení reagovať na požiadavky lekárov špecialistov a podľa potreby rozšíriť sortiment vyšetrení. Výsledky rutinných vyšetrení sú k dispozícii v deň prijatia vzorky, resp. nasledujúci pracovný deň, súrne vyšetrenia spravidla do 2-3 hodín. Laboratórium má uzavreté zmluvy so všetkými zdravotnými poisťovňami pôsobiacimi v SR. Zabezpečujeme zvoz biologického materiálu z dohodnutých zberných miest a zmluvným ambulanciám poskytujeme odberový materiál. Vyšetrovaný materiál pre: Imunofenotypizáciu hemato-onkologických ochorení:
periférna krv (odber do skúmaviek s heparínom alebo s K3 EDTA) kostná dreň (odber do skúmaviek s heparínom alebo s K3 EDTA) lymfatická uzlina (odber do fyziologického roztoku - sodium chloride 0,9%) likvor (natívny odber – potreba vyšetrenia v najkratšom možnom čase), iné
HTO
51
Zápalové markery: periférna krv (odber do skúmaviek s heparínom alebo s K3 EDTA)
Pre funkčné testy trombocytov (VASP): periférna krv (odber do skúmaviek s antikoagulantom citrát Na)
Pre stanovenie antitrombocytových protilátok: periférna krv (odber do skúmaviek s K3 EDTA) – objem v závislosti na počte
trombocytov: 4 - 6 ml (pri počtom PLT nad 50.109/L) 6 - 9 ml (pri počtom PLT pod 50.109/L) 9 - 12 ml (pri počtom PLT pod 10.109/L)
Pre stanovenie viazaných protilátok proti leukocytom:
periférna krv (odber do skúmaviek s K3 EDTA) - minimálne 5ml PK!
Informácie k vyšetreniam prietokovou cytometriou: Doc. MUDr. Tomáš Lipšic, CSc., primár HTO, tlipsic@ousa.sk, tel. +421 2 322 49 526 Mgr. Peter Bartek, PhD., email: pbartek@ousa.sk tel. +421 2 32249 534 RNDr. Tatiana Železníková, PhD., email: tzelezni@ousa.sk tel.+421 2 322 49 534
ODBER VZORKY KRVI NA LABORATÓRNE VYŠETRENIE SCHÉMA A INŠTRUKCIE
Fáza predanalytického
procesu Činnosť Požiadavka, poznámka
PRÍPRAVA MATERIÁLU
Výber odberovho materiálu
Druh a objemy materiálu určuje (aj poskytuje) diagnostické pracovisko
Kontrola a príprava Kontrola nezávadosti a dátumu expirácie, príprava všetkých častí materiálu: odberový systém, dezinfekčný prostriedok, tampón, škrtidlo, náplasť
Vyplnenie a kontrola žiadanky
Identifikácia pacienta, diagnóza, identifikácia vzorky, kód ZP, požadované vyšetrenia, čitateľná pečiatka pracoviska a lekára, dátum a čas odberu
Označenie odberovej skúmavky
Priezvisko a meno pacienta, rok narodenia (rodné číslo), dátum a čas odberu
Všetky údaje na žiadanke a vzorke musia byť čitateľné!
PRÍPRAVA PACIENTA
Časovanie pacienta Na lačno (ak je potrebné), bez vplyvu liekov s interferenciou
Identifikácia pacienta Pozitívna (kontrola mena) s pacientom
Informovanie pacienta O druhu, spôsobe a účele odberu
Umiestnenie pacienta - polohovanie
Pohodlné uloženie pacienta, polohovanie podľa miesta odberu (sediaca alebo ležiaca poloha)
PRÍPRAVA MIESTA ODBERU
Výber miesta odberu Vhodná véna, bez zápalu, edému, hematómu, iného poškodenia
Dezinfekcia miesta odberu Určeným dezinfekčným prostiedkom
Naloženie škrtidla Primerane pevne, 3-5 cm nad miestom vpichu, maximálne na dobu 2 minút !
Cvičenie ruky Pacient sťahuje a uvoľňuje svaly pod naloženým škrtidlom, max. 2 minúty
Iný druh odberu Z vény bez škrtidla – hrubou ihlou, kapilárna krv, arteriálna krv
HTO
52
Fáza predanalytického procesu
Činnosť Požiadavka, poznámka
ODBER VZORKY
Odber venóznej krvi
Uzavretým systémom – priloženie ihly v ose žily, pod uhlom 20-40 stupňov (podľa anatomických pomerov)
postupným nasávaním vzorky (Sarstedt) alebo podtlakom v skúmavke (BD)
Pozor: Nevhodné pre malé a slabé vény, pacientov s poškodenými krvinkami (hemolytické anémie, trombocytopénie a pod.)
- iný druh odberu – otvorený systém (použitie štandardnej techniky)
Odber kapilárnej krvi Špeciálne odberové skúmavky – nestláčať prst !!
Odber vzorky s následnou aplikáciou lieku
BD alebo Sarstedt systém (sterilný) s adaptérom
Odber vzorky po aplikácii lieku
BD alebo Sarstedt systém (sterilný) s adaptérom
Odber vzorky pri zavedenej infúzii
BD alebo Sarstedt systém (sterilný) s adaptérom: odsať 10 ml krvi sterilne do injekčnej striekačky sterilný odber vzorky sterilným sytémom s adaptérom reaplikácia 10 ml sterilnej krvi do vény napojenie infúzie
UKONČENIE ODBERU
Ošetrenie miesta odberu Suchým, sterilným tampónom, primeraný tlak na tampón 2-5 minút, ev. fixácia náplasťou
Odstránenie ihly Do určeného odpadového kontajneru - Infekčný odpad
Uloženie ostatného materiálu
Piest/adaptéry, iný použitý materiál – do určeného odpadového kontajneru – Infekčný odpad
Manuálne premiešanie vzorky
Inverziou (vertikálnym prevrátením) vzorky 3-5 krát – nie trepanie!
PRED-LABORATÓRNE SPRACOVANIE VZORKY
Kontrola odobratej vzorky Neporušenosť, adekvátny objem vzorky, tesnosť, označenie
Prístrojové miešanie Na miešačke minimálne 5 minút (nie je nevyhnutné) Nemiešajú sa vzorky natívnej krvi!
ULOŽENIE A SKLADOVANIE
Celá krv Kontrolovaná chladnička (2-8C) Vzorky pre imunofenotypizáciu, VASP – pri laboratórnej teplote (22 – 28C)
Vzorky ktoré treba urýchlene dopraviť do
laboratória
Hemokoagulačné vyšetrenia Morfologické vyšetrenia Antitrombocytové protilátky Cytokíny panelu Angio Vzorky likvoru a kostnej drene
Vždy je potrebné sa snažiť o čo najkratšie skladovanie a čo najrýchlejšie dopravenie vzorky do laboratória!
TRANSPORT
Vzorky sú umiestnené vertikálne v stojane a v termoboxe (výnimočne sú dopravované v ruke vo vertikálnej polohe) Vzorky nie sú zabalené do žiadaniek (žiadanky sú voľnou prílohou vzoriek) Vždy je potrebné sa snažiť o čo najkratšie skladovanie a čo najrýchlejšie dopravenie vzorky do laboratória!
HTO
53
PONUKA KOAGULAČNÝCH VYŠETRENÍ
1. Faktor II - aktivita (protrombín) – vitamín K závislá serínová proteáza tvorená v pečeni. Jeho aktívna forma trombín má kľúčovú úlohu v hemostáze. Pôsobí prokoagulačne aj antikoagulačne
indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu, rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, testovanie funkcie pečene pri ochoreniach pečene
Zvýšené hodnoty: mutácia protrombín. Znížené hodnoty: liečba kumarínmi, DIC, hepatopatia, nedostatok vitamínu K, protilátky typu lupus antikoagulans, vrodený nedostatok.
2. Faktor V - aktivita (proakcelerín) – plazmatický kofaktor, ktorý v komplexe protrombinázy významne urýchľuje štiepenie trombínu faktorom Xa
indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu – pečeňových dysfunciách, konzumpčnej koagulopatii, hyperfibrinolýze, ako aj v súvislosti s prítomnosťou tumoru
Znížené hodnoty: DIC, hepatopatia, amyloidóza, protilátky typu lupus antikoagulans (pooperačne, po pôrode, pri autoimúnnych a onkologických ochoreniach), vrodený nedostatok.
3. Faktor VII - aktivita (prokonvertín) – vitamín K závislá serínová proteáza. V komplexe s tkanivovým faktorom tvorí tzv. vonkajšiu tenázu, ktorá aktivuje faktory IX a X
indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu, rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, testovaní funkcie pečene pri ochoreniach pečene
Zvýšené hodnoty: vek, tehotenstvo, zvýšená hladina triglyceridov. Znížené hodnoty: liečba kumarínmi, DIC, hepatopatia, nedostatok vitamínu K, zriedkavo protilátky typu lupus antikoagulans, vrodený nedostatok.
4. Faktor VIII - aktivita (antihemofilický faktor A) – plazmatický kofaktor, ktorý spolu s faktorom IXa tvorí tzv. vnútornú tenázu. Hladina FVIII súvisí s hladinou vWF a krvnou skupinou v systéme ABO.
indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu (hemofília A), rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, monitoringu liečby koncentrátom faktora VIII
Zvýšené hodnoty: vek, tehotenstvo, zápaly, chronické infekcie, fyzická záťaž, stres. Znížené hodnoty: vrodený nedostatok – hemofília A, DIC, hepatopatia, protilátky typu lupus antikoagulans. Faktor IX - aktivita (Christmas faktor) – vitamín K závislá serínová proteáza, ktorá
v komplexe s faktorom VIIIa tvorí tzv. vnútornú tenázu.
indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu (hemofília B – Christmasova choroba), rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, monitoringu liečby koncentrátom faktora IX, pri konzumpčnej koagulopatii, cirhóze pečene
Znížené hodnoty: vrodený nedostatok – hemofília B, DIC, hepatopatia, liečba kumarínmi, nedostatok vitamínu K, protilátky typu lupus antikoagulans.
HTO
54
5. Faktor X - aktivita (Stuarta - Prowerovej faktor) – vitamín K závislá serínová proteáza. Je súčasťou komplexu protrombinázy, ktorá premieňa protrombín na trombín.
indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu, rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, testovanie funkcie pečene pri ochoreniach pečene atď..
Znížené hodnoty: DIC, hepatopatia, liečba kumarínmi, nedostatok vitamínu K, protilátky typu lupus antikoagulans, amyloidóza, vrodený nedostatok.
6. Faktor XI - aktivita (Rosenthalov faktor) – serínová proteáza, ktorá patrí ku tzv. faktorom kontaktnej fáze. Aktivuje faktor IX.
indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu, rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, detekcii aktivácie kontaktnej fázy koagulácie
Znížené hodnoty: vrodený nedostatok (hemofília C), zriedka protilátky typu lupus antikoagulans, hepatopatia.
7. Faktor XII - aktivita (Hagemanov faktor) – serínová proteáza, ktorá patrí ku tzv.faktorom kontaktnej fáze. Aktivuje faktor XI, prekalikreín a vysokomolekulový kininogén.
indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu, rozlíšení dysproteinémie a ochorení súvisiacich s poruchou syntézy bielkovín, pri detekcii aktivácie kontaktnej fázy koagulácie, diagnostike vrodeného angioedému
Znížené hodnoty: vrodený nedostatok, zriedka protilátky typu lupus antikoagulans, hepatopatia. Zvýšené hodnoty: vrodený angioedém.
8. Faktor XIII - aktivita (faktor stabilizujúci fibrín) – transglutamináza, ktorá stabilizuje fibrínové vlákna tvorbou ireverzibilných kovalentých väzieb. Je dôležitý pri hojení rán a udržaní tehotenstva.
indikácia pri diagnostike vrodenej alebo získanej deficiencie Znížené hodnoty: vrodený nedostatok, Henoch-Schönleinova purpura, DIC, hepatopatia, väčšie operácie, malígne ochorenia, protilátky typu lupus antikoagulans.
9. Proteín C - aktivita - vitamín K dependentná serínová proteáza. Systém proteínu C je prirodzená antikoagulačná cesta, ktorej cieľom je štiepenie aktivovaných faktorov V a VIII. – indikácia pri diagnostike vrodeného alebo získaného deficitu proteínu C, chorobách pečene, monitoringu liečby koncentrátom proteínu C
Znížené hodnoty: vrodený nedostatok, hepatopatia, nedostatok vitamínu K, liečba kumarínmi, liečba L-asparaginázou, DIC, väčšie operácie, sepsa, protilátky typu lupus antikoagulans.
10. Proteín S (voľný) - aktivita - vitamín K závislá serínová proteáza, je kofaktorom aktivovaného proteínu C. Má aj vlastnú antikoagulačnú aktivitu, viazaný na C4bBP (C4b Binding Protein) je inaktívny.
pri diagnostike vrodenej deficiencie proteínu S, chorobách pečene Znížené hodnoty: vrodený nedostatok, hepatopatia, nedostatok vitamínu K, liečba kumarínmi, DIC, liečba estrogénmi, L-asparaginázou, väčšie operácie, tehotenstvo, užívanie antikoncepcie, zvýšená hladina C4b-viažúceho proteínu, protilátky typu lupus antikoagulans.
HTO
55
11. LA – Lupus antikoagulans – skríningová detekcia autoprotilátok proti negatívne nabitým fosfolipidom alebo komplexom fosfolipidov s proteínmi (β-2-glykoproteín I, protrombín, proteín C, proteín S, faktory kontaktnej fáze, atď. ) ako významného rizikového faktora u pacientov s trombózou na základe určenia aktivity koagulačného systému. Podľa medzinárodných kritérií je súčasťou vyšetrenia antifosfolipidových protilátok okrem koagulačnej metódy (LA) aj vyšetrenie protilátok ELISA metódou, ktorú vykonáva Oddelenie klinickej imunológie a alergológie Ústavu laboratórnej medicíny OUSA pod panelovým označením APLAG .
12. Plazminogén – stanovenie aktivity (kód vyšetrenia PLG, číslo 625)
- plazminogén ako prekurzor plazmínu, hlavného fibrinolytického enzýmu, podlieha konverzii na plazmín vplyvom aktivátorov (uPA, tPA, streptokináza), resp. je regulovaný prostredníctvom inhibítorov (α-2-antiplazmín, PAI-1) - indikácia vyšetrenia pri diagnostike vrodeného alebo získaného nedostatku plazminogénu Klinická interpretácia:
Znížené hodnoty: ochorenia pečene, DIC, sepsa, trombolytická terapia aktivátormi plazminogénu, vrodený nedostatok.
13. DTI – priame inhibítory trombínu - (kód vyšetrenia DTI, číslo 651)
- kvantitatívne stanovenie priamych inhibítorov trombínu (dabigatran, Argatroban®) pri liečbe pacientov prípravkami s DTI napr. Pradaxa®, ktoré je odporúčané vykonávať počas liečby: - v prípade objavenia sa krvácania nejasného pôvodu - u rizikových skupín pacientov (vek nad 75 rokov, nízka alebo vysoká hmotnosť, pacienti s poruchou funkcie pečene alebo obličiek) - v prípade liečby antikoagulantmi (heparín) - vždy pri objavení sa neočakávanej odpovede na liečbu.
Oddelenie HTO poskytuje tiež odborné konzultácie, ktoré sa týkajú indikácie vyšetrení, odberu biologického materiálu a interpretácie výsledkov. V prípade záujmu sme pripravení reagovať na požiadavky lekárov špecialistov a podľa potreby ešte rozšíriť (v rámci našich možností) sortiment vyšetrení. Výsledky špeciálnych vyšetrení sú k dispozícii v priebehu 2 týždňov až 1 mesiaca (podľa typu vyšetrenia).
Kontakt: Hematologická ambulancia: Doc. MUDr. Lipšic Tomáš, CSc., MUDr. Šimoníková Zuzana Ordinačné hodiny: Pondelok - piatok 7:00 - 10:00 odbery Pondelok, streda, piatok 8:00 - 12:00 MUDr. Šimoníková Zuzana 14:00 - 15:00 tel. konzultácie + administratíva Utorok, štvrtok 8:00 - 12:00 Doc. MUDr. Lipšic Tomáš 14:00 - 15:00 konzíliá + administratíva Kontaktné údaje: tlipsic@ousa.sk, zsimonik@ousa.sk Tel: 02/ 3224 9525, 9526 Informácie: Sestra: Rákoczová Eva
HTO
56
Oddelenie klinickej imunológie a alergológie – OKIA
OKIA vzniklo v Onkologickom ústave sv. Alžbety v roku 2006. Nadviazalo na dlhoročnú prácu OKIA v Národnom ústave tuberkulózy a respiračných chorôb v Podunajských Biskupiciach. Z predošlého pracoviska prešli do OKIA OUSA pracovať obaja lekári a jedna laboratórna VŠ pracovníčka, ako aj zdravotné sestry a niektoré laborantky. V súčasnosti na OKIA OUSA pracuje dvanásť pracovníkov, 4 vysokoškoláci (2 lekári, 2 nelekári) a 6 laborantiek. Charakter práce OKIA OUSA vychádza zo základnej koncepcie klinickej imunológie a alergológie ako klinicko - laboratórneho odboru. Znamená to, že spája klinickú prácu s pacientmi na ambulancii, indikáciu, realizáciu, aj interpretáciu špecifických laboratórnych vyšetrení. Na OKIA OUSA pracujú denne 2 ambulancie - jedna špecializovaná na detskú klientelu, jedna na dospelých pacientov. V ambulanciách pracujú vysoko špecializovaní odborníci - internista alergológ imunológ, resp. pediater alergológ imunológ.
V oboch ambulanciách sa vykonáva klasická diagnostika od anamnézy, cez fyzické vyšetrenie pacienta a indikáciu jednotlivých vyšetrení až po ich interpretáciu a samozrejme liečba. Diagnostikujeme, liečime a dispenzarizujeme pacientov s rôznymi prejavmi respiračnej alergie (rôzne formy alergickej nádchy a astmy), kožnej alergie (atopický ekzém, urtikária), pacientov s rôznymi poruchami imunity (primárne a najmä sekundárne poruchy imunity, vrátane porúch imunity pri onkologických diagnózach) a pacientov so systémovými spojivovými ochoreniami (rôzne prejavy autoimunitných a autozápalových ochorení). Venujeme sa aj in vivo (kožné testy) a in vitro (laboratórne testy) diagnostike liekovej a potravinovej alergie. Naše pracovisko patrí medzi priekopníkov diagnostiky a liečby hereditárneho angioedému a histamínovej intolerancie.
OKIA OUSA je od roku 2010 akreditovaným školiacim pracoviskom Slovenskej zdravotníckej univerzity (pozri sekciu → pedagogická činnosť). Spádovú oblasť našej liečebno - preventívnej starostlivosti tvoria okresy Pezinok a Senec, ale konziliárnu a vysoko špecializovanú činnosť poskytujeme pacientom z celej Bratislavy a okolia, resp. po dohovore z celého Slovenska.
Laboratórium OKIA OUSA poskytuje špecializované imunologické vyšetrenia pre obe ambulancie, celú nemocnicu, ako aj klientov z imunologických - alergologických, pneumologických, otorinolaryngologických, dermatologických, gastroenterologických, neurologických a ďalších špecializovaných ambulancií z veľkej spádovej oblasti (bývalý Západoslovenský kraj), avšak konziliárne služby poskytujeme v celoslovenskej pôsobnosti.
Analýzy sa uskutočňujú na moderných prístrojoch - 6 farebné 2 laserové prietokové cytometre s IVD certifikátom, Phadia CAP250 IVD, CAP100, ELISA automat DSX, HYTEC 288, Dynablot a iné zariadenia využívané k diagnostike a prenosu dát do informačného systému.
Akreditácia. Laboratórium v roku 2011 získalo Osvedčenie o akreditácii podľa ISO 17025:2005.
Pracovníci OKIA
Pracovník: Funkcia: Tel. č.: e-mail: Doc. MUDr. Martin Hrubiško, PhD. Vedúci odd. (primár) 02/322 49 610 mahrubis@ousa.sk
MUDr. Júlia Michaličková lekár 02/322 49 611 jmichali@ousa.sk Ing. Mária Zuzulová Vedúca laboratória 02/322 49 595 mzuzulov@ousa.sk
OKIA
57
Aktuálna ponuka laboratórnych vyšetrení OKIA OUSA (je potrebné konzultovať aktuálnosť (veľká frekvencia zmeny) v laboratóriu : 02/32249595)
Skratka Názov vyšetrenia Jednotky Vzorka Metóda / prístroj
Frekvencia vyšetrenia
CELULÁRNA IMUNITA - SUBPOPULÁCIE LYMFOCYTOV PRIETOKOVÁ CYTOMETRIAZákladný panel bunkovej imunity
CD3 CD3 T Lymfocyty % EDTA, Heparín
Prietoková cytometria
6 color CANTO II
denne
CD3A CD3 abs. počet CD4 CD4 Pomocné T Lymfocyty % CD4A CD4+ abs. počet CD8 CD8 cytotoxické T Lymfocyty % C8A CD8+ abs.. počet CD348 CD3+CD4+CD8+ % Lymfocyty % CD19 CD19 B Lymfocyty % CD19A CD19+ abs. počet NK CD3-/CD16+56 NK bunky % NKA CD16+56+ abs. počet C3DR+ CD3+/CDHLA DR+ aktiv. T Ly %
CD3DRA CD3+/CDHLADR+ Abs. počet
Aktivačné znaky subpopulácií
C325 CD3+/CD25+ neskorý aktivačný marker %
EDTA, Heparín
Prietoková cytometria
6 color CANTO II
denne
C425 CD4+/CD25+ receptor pre IL 2 %
C369+ CD3+/CD69+ včasný aktivačný marker
C469+ CD4+/CD69+ CD838 CD8+38+ T Ly %
C8DR CD8+/HLA DR+ %
T regulačné lymfocyty
TREG CD3+CD4+CD25highCD127low regulačné T lymfocyty EDTA
Iné subpopulácie - podľa dohovoru CELULÁRNA IMUNITA - FAGOCYTÓZA
Funkčná aktivita fagocytózyFagocytóza - prietoková cytometria - DHR
FG DHR Fagocytová aktivita granulocytov %
Heparín
Prietoková cytometria
6color CANTO II
denne
FM DHR Fagocytová aktivita monocytov %
MFI stimulačný koef. granulocytov (oxid.vzplanutie), funkč.aktivita
Fagocytóza -funkčná aktivita BURST Test - len po dohovore s OKIA laboratóriom
BGEC % oxidujúcich granulocytov (E.coli - FACS)
Heparín
Prietoková cytometria
6color CANTO II
1/týždeń
BGPMA vysoký stimulans PMA - FACS BGFMLP nízky stimulans FMLP - FACS
OKIA
58
Skratka Názov vyšetrenia Jednotky Vzorka Metóda / prístroj
Frekvencia vyšetrenia
BMEC % oxidujúcich monocytov E.coli - FACS
BMPMA vysoký stimulans PMA - FACS BMFMLP nízky stimuans FMLP - FACS
Deficit myeloperoxidázy- len po dohovore s laboratóriom s OKIA (vykonáva HTO) MP Deficit myeloperoxidázy Heparín
Stanovenie HLA B27 - FACS - autoimunitné ochorenia
B27
HLA B27
medián FITC
EDTA, Heparín
Prietoková cytometria
6color CANTO II
denne
BASO TEST - basofil degranulačný test FACS
rôzne alergény, podľa dohovoru s laboratóriom
Heparín 1/týždeň
HUMORÁLNA IMUNITA (HI)Poruchy HI - podtriedy imunoglobulínov
A1 IgA1 podtriedy IgA mg/l
Sérum RID 1/týždeň
A2 IgA2 podtriedy IgA mg/L
G1 IgG1 podtriedy IgG g/l
G2 IgG2 podtriedy IgG g/l
G3 IgG3 podtriedy IgG g/l
G4 IgG4 podtriedy IgG g/l
Poruchy HI - hyper IgD, IgE IGD IgD mg/L
Sérum
RIDFEIA
2/mesiac
TIGE IgE denne
Poruchy HI - komplement
MBLO MBL - oligomerizovaný mannan-viažúci
ng/ml Sérum ELISA 2/mesiac
MASP2 Funkčný, aktívny MBL U/ml Sérum
C02 C2 zložka komplementu mg/l Sérum RID 1/týždeň
C1I C1 inhibítor (kvantita) mg/l Sérum RID/nefelo-
metria 1/týždeň
C1F C1 INH funkčná aktivita % EDTA ELISA 1/mesiac
C1Q C1q zložka komplementu mg/L Sérum RID 1/týždeň
CH50 CH50/CH100 aktivita klasickej cesty
Sérum ELISA 1/týždeň
Poruchy HI - špecifická protilátková odpoveďTET
Hladina IgG protilátok proti Tetanus toxoid
Sérum
ELISA
2/mesiac
DFT
Hladina IgG protilátok proti Difterickému toxoidu
HIB
Hladina IgG protilátok proti Haemophilus infl.
PCP Hladina IgG protilátok proti Pneumokokovému kapsulárnemu polysacharidu
OKIA
59
Adhezívne molekuly SCD62E sCD62E ľudský solubilný E-selektín pg/ml
Sérum ELISA 1/mesiac SICAM1 solubilná intracelulárna adh ng/ml
SVCAM1 -1 solub.vaskulárna bunková ad ng/ml
Potravinová intoleranciaKMA KMA IgA proti kravskému mlieku IU/ml
Sérum
ELISA
2/mesiac
KMG KMG IgG proti kravskému mlieku IU/ml
KAZA KAZ A IgA proti kazeínu index
KAZG KAZG IgG proti kazeínu index
BLA IgA proti beta-laktoglobulínu index
BLG IgG proti beta-laktalbumínu index
LAKA IgA proti laktóze index
LAKG IgG proti laktóze index
ASCA IgA proti Saccharomyces cerevi IU/ml
ASCG ASCA IgG proti Saccharomyces cerevi
IU/ml
GLIA IgA proti deaminovanému gliadínu IU/ml
GLIAG IgG proti deaminovanému gliadínu IU/ml
SOJA IgA proti sóji index
SOJG IgG proti sóji index
TTGA tTG A IgA proti ľudskej transglutamináze
U/ml
TTGG tTG G IgG proti ľudskej transglutamináze
IU/ml
Gastro panel (kvalitatívny panel 5 autoprotilátok proti ASCA, TTGA, GLIA, Pariet. bunkám, Intrinsic faktor v tr. IgA, IgG)
LIAGG
GASTRO panel IgG ( TTGA, ASCA, GLIA, pariet. bunky, intrinsic f.)
kvalitat.
Sérum
WB
Pp
LIAG
GASTRO panel IgA (TGA, ASCA, GLIA,pariet.bunky, intrinsic f.)
Anti-glykánové protilátkyALCA anti IgG laminaribioside EU
Sérum
ELISA
pp
ACCA anti IgA Ab chitobioside antigens EU
AMCA anti IgG mannobioside antibodies EU
Histamínová intoleranciaDAO Diamino oxidáza - hladina U/ml Sérum ELISA 2/mesiac
DAOF Diaminooxidáza - funkčná aktivita HDU Sérum ELISA 2/mesiac
OKIA
60
AUTOPROTILÁTKY Imunofluorescenčne
ANA anti nukleárne IF
ANCA anti neutrofilné IF
EMA endomyziálne IF
ARA anti retikulínové IF
AMA mitochondriálne IF
ATA štítna žľaza IF
ASMA Ab proti hladkému svalu IF
ASKMA Ab proti priečne pruhovanému svalu IF
ANA typizácia - panel 15 antigénov
EIRNP EI RNP/Sm ribozomálny proteín Kvalita-tívny +/- sérum WB denne
EISM EI Sm
EISSA EI SSA SS-A native
EIRO52 EI Ro-52
EISSB EI SS-B
EISCL70 EI Scl-70
EIPM EI Pm-Scl
EIJO1 EI Jo-1
EICB EI Cb Centromera B
EIPCNA EI PCNA polycyklin
EIDNA EI ds DNA
EINUC EI Nuc nukleozómy
EIHI EI Hi históny
EIRIB EI RIB ribozomálny P proteín
EIM2 antimitochondriálny proteín A
ANCA typizácia
EIPR3 c ANCA a-PR3 (anti proteináza 3) Kvalita-tívny +/-
sérum WB denne
EIMPO p ANCA a-MPO (antimyeloperoxidáza)
Fosfolipidové
ACLA Antikardiolipínové protilátky IgA,IgG,IgM screen Sérum
B2GPIG-T anti - beta2 glykoproteín IgG U/ml ELISA 2/mesiac
B2GPIM-T anti - beta2 glykoproteín IgM U/ml ELISA pp
ACLAG-T anti - Kardiolipín IgG U/ml ELISA
ACLAM-T anti - Kardiolipín IgM U/ml ELISA
PSM-T anti - fosfatidyl serín IgM U/ml ELISA
PSG-T anti - fosfatidyl serín IgG U/ml ELISA
PIM-T anti - fosfatidyl inozitol IgM U/ml ELISA
PIG-T anti - fosfatidyl inozitol IgG U/ml ELISA
PAM-T anti - kyselina fosfatidylová IgM U/ml ELISA
PAG-T anti - kyselina fosfatidylová IgG U/ml ELISA
SPMM-T sfingomyelín IgM U/ml ELISA
SPMG-T sfingomyelín IgG U/ml ELISA
OKIA
61
Spojivového tkaniva
RFC RF Check - reumatoid.faktor IgA/IgM
U/ml Sérum ELISA 2/mesiac
CCP Cyklický citrulínový proteín U/ml ELISA
AMCV IgG Ab proti mutovanému citrulinovaný vimenktín
U/ml ELISA
DNASE aktivita DNAázy AR% ELISA
Autoimúnne ochorenia pečene - panel autoprotilátok AMAM2 mitochondriálny antigén (PBC)
kvalitatí vny +/-
Sérum
WB
denne
M23E (BPO) mitochondriálny antigén (PBC)
SP100 mitochondriálne Ab (PBC)
PML mitochondriálne Ab (PBC)
GP210 mitochondriálne Ab (PBC)
LKM1 mikrozomálne pečeňové Ab (PBC)
LC1 cytosolové pečeňové Ab (AIH)
SLALP pečeňový antigén (AIH)
RO52B nukleárny antigén (AIH, reum.och.)
Autoprotilátky asociované s myozitídou-panelMI2 Mi-2 antigén
kvalitatí vny +/-
Sérum
WB
denne
KU Ku antigén
PM100 PM-Scl 100 antigén
PM75 PM-Scl 75 antigén
JO1M Jo-1 antigén
SRP SRP antigén
PL7 Pl-7 antigén
PL12 Pl-12 antigén
EJ EJ antigén
OJ OJ antigén
RO52M Ro-52 antigén
ŠPECIÁLNE VYŠETRENIA Cytokíny - multiplexový panel Th1/Th2/Th17 cytokínov
Il2 IL2 plazmatický
pg/ml
pp
Il4 IL4 plazmatický
IL6 IL6 plazmatický
IL10 IL10 plazmatický
TNFalfa TNFalfa plazmatický
IFNgama IFNgama plazmatický
TGF b1 TGF- b1 plazmatický
IL 1alfa IL1-alfa plazmatický
IL23 IL12/23 plazmatický
IL17 IL17A plazmatický
TREG-FA funkčná aktiv.Treg (pomer pro a protizápal.cytokínov
IFN alfa IFNa plazmatický
Th1/Th2 pomer cytokínov (IFNgama/IL-4)
Zloženie panelu cytokínov je podľa aktuálnej požiadavky klinika
OKIA
62
Adipocytokíny - prognostický panel ľudských adipocytokínov ADI Adiponektíén
pg/ml
pp
LEP Leptín
REZ Rezistín
LRI Leptín/rezistín index
ŠPECIFICKÉ IgE, IgG, IgG4 – ELISA
ALERGIA A ATOPIA
TIE Celkové IgE IU/ml PhadiaCAP 2/týždenne
TRP Tryptáza µg/l PhadiaCAP pp
Skratka Názov alergénu Liekové alergény a alergény
pomocných látok liekov
antibiotikáC2 C2 V penicilin
C1 c1 G penicilin
C201 c201 cefalosp. mix (cefacor, cefuroxim)
C223 c223 sulfametoxazol
C202 c202 suxamethoninum chloride
C203 c203 ampicilin
C204 c204 amoxicilin
C216 c216 doxycyklin
C211 c211 tetracyklin
C212 c212 erytromycin
C213 c213 gentamycin
C288 aminoglykozidy mix (genta,Linco,Neo)
C306 C306 Clindamycin
C295 c295 streptomycin
C301 c301 rifampicin
C305 c305 kys.klavulánova
C436 c436 spiramycin
C307 C307 Ciprofloxacin
C409 c409 Ofloxacin
analgetiká, NSAC217 c217 kys.acetylsalicylová
C209 c209 paracetamol
C281 c281 diclofenac
C286 c286 ibuprofen
C283 c283 Naproxen
C294 c294 metamizol
C282 c282 Indomethacin
OKIA
63
Skratka Názov alergénu C388 c388 Ketoprofen
C304 C304 Piroxicam
C398 C398 Metronidazol
CX2 CX2 analgetiká (paracet, ASA, diclofenac, indometacin, ibuprofen)
anestetikáC231 c231 articain
C232 c232 lidocain
C233 c233 mepivacain
C811 C811 mesocain
C284 c284 procain
C285 c285 bupivacain (marcain)
ostatné mixC296 C296 propylphenazon
C300 C300 codein v tr. IgE
C338 C338 karbamazepin (antiepileptikum)
C311 c311 diazepam
C70 c70 inzulín prasačí
C71 c71 inzulín bovinný
C73 c73 inzulím ľudský
C202. C202 suxamethonium chlorid Prídavné látky liekov, potravinové
aditíva
C312 C312 laktóza IgE
C713 C713 methylparaben ( E218)
C714 C714 propylparaben ( E216)
C242 C242 trimetoprim
C254 c254 prednison
C350 c350 dexamethasone
C252 C252 Captopril ACE inhibitor
F90 F90 slad
F246 F246 guarová múčka
F296 F296 múčka z svätojánskeho chleba
F257 F257 kokosová múčka
F373 F373 arabská guma
C708 C708 xantánová múčka
C725 C725 amarantová múčka
C717 C717 tartrazín-Food add.
C703 c703 kys. benzoová - Food add.
C706 C706 Yellow orange - Food add.
C707 C707 kyselina glutámová-Food
C726 C726 Cochein red
C470 C470 Lecitín - Food add.
C636 C636 sacharín
C710 C710 Methylen blue
C638 C638 Talok - Food Add.
OKIA
64
Skratka Názov alergénu C704 C704 Chinolová žlť - Food add.
C711 C711 sodium nitrát - Food add.
C712 C712 Siričitan sodný - Food add.
C716 C716 kyselina askorbová - Food
C701 C701 aminobenzoová kyselina
C716 C716 kyselina askorbová v tr. IgE
profesné alergényKX1 KX1 Syntetické textílie mix(akryl,h
KX2 KX2 Prírodné textílie(juta,hodváb,b
KX4 KX4 Drevo ihličnatých stromov (borovica, ...)
KX5 KX5 Drevo listnatých stromov(dub, ...)
KX6 KX6 Desinficiencie (et. oxid, kys. Fta)
KX7 Chemikálie (izokyanát TDI, MDI, HDI)
K80 K80 Formaldehyd
K75 K75 Izokyanát TDI
K1 K1 akryl
C623 kyselina metakrylová MAA
O1 O01 cotton linters-bavlnené vlákna
kovyC628 C628 Ni
C616 C616 jód
C648 C648 Zn
C617 C617 Kobalt
C609 C609 chróm
CX1 kovy (hliník, meď, nikel, striebro)
latex - panel rekombinantných komponent latexu
K82 K82 Latex
K701 rHev b1 latex - rekombinantný
K702 rHevB5 latex-rekombinantný
K703 rHev B6 02 latex-rekombinantný
Inhalačné alergény
EX5 perie z lôžkovín (hus, kačka, ...)
EX71 Perie domácich vtákov (hus, sliepka, ...)
EX1 epitélie mix (mačka, pes, kôń, krava)
EX72 Perie exotických vtákov (Andulka, ...)
GX2 Trávy mix (tomka, matonoh, Timotej)
HX4 Skladové roztoče (Acarus siro, ...)
MX1 MX1 Plesne
TX10 TX10 Stromy mix (jelša, breza, lieska, ...)
WX5 WX5 Astrovité byliny mix (ambrózia, ...)
WX6 WX6 byliny mix (skoroceľ, mrlík, ...)
D1. Dermatophagoides pteronyssinus
E1 E1 Mačka - epitélie
E2. E2 Pes - epitélie
OKIA
65
Skratka Názov alergénu E5 E5 Pes srsť
E6 E6 Morča-epitélie
E3 E3 Kôň - srsť
E80 E80 Kozí epitel
E82 E82 Králik - epitel
E84 E84 Zlatý škrečok - epitel
E73 E73 Potkan - epitel
E74 E74 Potkan - moč
E7 E7 Holubí trus
G5 G5 mätonoh (Lolium perenne)
G6 G6 Timotejka
G12 G12 Raž siata
T47 T47 Borievka
T23 T23 Hlošina
T81 T81 Tis
T96 T96 Topoľ
T9 T009 Oliva
T3. T3 Breza biela
T205 T205 baza (Sambucus nigra)
W1 W1 Ambrózia palinolistá
W6 W6 Palina obyčyjná
W9 W9 skorocel (Plantago lanceolata)
W10 W10 mrlík ( Chenopodium album)
W15 W15 loboda ( Atriplex lentiformis)
W18 W18 štiav ( Rumex acetosela)
W20 W20 Žihľava dvojdomá
W21 W21 Parietária
Potravinové alergényZmesné alergény
K99 K99 HSA hovädzí sérový labumín
FX1 FX1 orechy mix (burský,lieskový,par
FX2 FX2 ryby mix (treska,garnela,slávk
FX4 FX4 mäso – brav.,jahňa, hov.,kura.
FX41 mliečny mix(KM,alaktalb,bla
FX15 ovocie pomaranč,jablko,banán
FX48 citrus mix(pomaranč,citrón,gre
FX7 zelenina mix(hrášok,rajčina,mrk
Mlieko, vajceF232 F232 ovalbumín
F233 F233 ovomukoid
F1 F1 vaječný bielok
F75 F75 vaječný žĺtok
F199 F199 surové kravské mlieko v tr. Ig
F200 F200 sójové mlieko v tr. IgE
F300 F300 Kozie mlieko
OKIA
66
Skratka Názov alergénu
- alegia kravské mlieko, komponenty mlieka - pozri CAP systém F2 F2 proteíny kravského mliekav tr. I
F76 F76 alfa-laktalbumín v tr. IgE
F77 F77 beta-laktalbumín v tr. IgE
F78 F78 kazeín v tr. IgE
Ryby, mäsoF3 F3 treska
F23 F23 krab
F41 F41 losos
F50 F50 makrela
F205 F205 sleď
F308 F308 sardinka
F24. F24 šrimp (garnát)
F88 F88 Jahňacie maso
MúkyF9 F9 ryža
F4 F4 pšeničná múka
F5 F5 ražná múka
F6 F6 jačmeň
F7 F7 ovsená múka
F8 F8 kukuričná múka
F10 F10 sezamové semienko
F11 F11 pohánka
F14 F14 sója
F198 F198 ľanové semienko
F79 F79 glutén/gliadín v triede IgE
Orechy, semenáF14 sója
F13 arašid (búrsky oriešok)
F18 Brazil nut - para (brazílsky)
F20 F20 mandľa
F36 F36 kokosový orech
F202 F202 kešu orech
F203 F203 pistáciový orech
F17 F17 lieskový orech
F256 F256 vlašský orech
F299 F299 jedlé gaštany
F183 F183 slnečnicové semienko
F224 F224 mak
BôbyF15 F15 biela fazuľa
F287 F287 červená fazuľa
F235 F235 šošovica
F309 F309 cícer
HY F12 F12 hrášok
OKIA
67
Skratka Názov alergénu Zelenina
F25 F25 paradajka
F31 F31 mrkva
F216 F216 Kapusta
F35 F35 zemiak
F46 F46 Paprika červená
F47 F47 cesnak
F48 F48 cibuľa
F86 F86 petržlen
FX9 FX9 zmes kapustovej zeleniny
F215 F215 hlávkový šalát a príbuzné
F152 F152 Paprika zelená
F218 F218 Paprika červená -korenie
F85 F85 zeler
Ovocie F44 F44 jahoda
F22 F22 malina IgE
F29 F29 červený (vodový) melón
F102 F102 Cantaloupe - melón
F174 F174 figa
F210 F210 ananás
F293 F293 papája
F294 F294 maracuja
F49 F49 jablko
F52 F52 čokoláda
F84 F84 kiwi
F87 F87 žltý (sladký) melón
F237 F237 marhuľa
F96 F96 avokádo IgE
F92 F92 banán
F94 F94 hruška IgE
F95 F95 broskyňa IgE
F255 F255 slivka IgE
F259 F259 hrozno IgE
F91 F91 mango IgE
KoreninyFX23 Korenie mix(horč.,papr.,čierne
F19 Cayenne pepper-kajanská paprika
F220 F220 Cinnamon - škorica
F234 F234 vanilka
F271 F271 Aniseed - aniz
F279 F279 Chili Pepper- čierne korenie
F280 F280 Black Pepper - čierne korenie
F281 F281 Curry - kari korenie
F273 F273 Thyme-tymian
OKIA
68
Skratka Názov alergénu F274 F274 majorán
F283 F283 oregáno
F310 F310 Allspice-nové korenie
F317 F317 koriander
F324 F324 Chmeľ
F89 F89 Horčica
F340 F340 želatína
F224 F224 mak
Blanokrídly hmyzI01 i01 včela
I02 sršeň(Dovichovespula maculata)
I03 i03 osa (Vespula spp.)
I04 i04 osa (Polistes spp.)
I05 i05 sršeň (Dolichovespula arenaria)
I06 i06 šváb (Blatella germanica)
I08 i08 Moľa
I075 i075 sršeň ( Vespra crabro)
I71 i71 komár
I73 i73 pakomár
Bakteriálne extraktyO2 O2 Escherichi coli v tr.IgE
O51 O51 Streptococus viridans v tr. IgE
O71 O71 Staphylococcus aureus v tr.IgE
STRIPOVÁ ANALÝZA Atopický panel - panel alergénov viazaných na membráne ATOP
CCD cross-reacting carbohydrate detetminant EIGX EIGX trávy mix (g6/g12)
EIT3 EIt3 breza
EIW6 EIw6 palina
EID1 EId1 Dermatophagoides pteronys.
EID2 EId2 Dermatophagoides farinae
EIE1 EIE1 Mačka
EIE2 EIe2 Pes
EIE3 EIe3 Kôň
EIM2. EIM2 Cladosporium herbatum
EIM3 EIM3 Aspergillus fumigatus
EIM6 EIM6 Alternaria alternata
EIF1 EIf1 vaječný bielok
EIF75 EIF75 vaječný žĺtok
EIF2 EIf2 kravské mlieko
EIF3 EIF3 treska
EIF76 EIF76 Alfa-lactalbumin
EIF77 Beta-Lactoglobulin
EIF78 EIf78 casein
EIE204 E204 bsa/bsa
OKIA
69
Skratka Názov alergénu EIF4 EIf4 pšeničná múka
EIF9 F9 Ryža
EIF14 EIF14 Sója
EIF13 EIf13 Burský orech
EIF17 EIf17 lieskový orech
EIF31 EIf31 mrkva
EIF35 EIf35 zemiak
EIF49 EIf49 jablko
Stredoeurópsky panel inhalačných alergénov viazaných na membráne WBI INT3 T3 Peľ brezy
INT2 T2 Peľ jelše
INT4 T4 Peľ liesky
ING12 G12 raž siata
INGX5 Gx5 trávy mix
INW1 W1 Ambrózia palinolistá
INW5 W5 Palina
INW9 W9 skorocel
INW15 W15 Loboda
INI6 i6 šváb
INE2 E2 pes epitélie
INE1 E1 mačka epitélie
INE3 E3 kôň epitélie
INE6 E6 morča epitélie
IND1 D1 D.pteronyssinus
IND2 D2 D. farinae
INHX HX domáci prach mix
INM3 M3 aspergillus fumigatus
INM1 M1 Penicillium notatum
INM6 M6 Alternaria tenius
Potravinové alergény-panel 20 alergénov viazaných na membráne WBN INF17 F17 Lieskový orech
INF13 F13 Burský oriešok
INF256 F256 Vlašský orech
INF20 F20 Mandľa
INF2 F2 Kravské mlieko
INF1 INF1 Vaječný bielok
INF75 INF75 Vaječný žĺtok
INF78 F78 Kazeín
INF85 F85 Zeler
INF31 F31 Mrkva
INF25 F25 Paradajka
INF3 F3 Treska
INF23 F23 Krab
INF95 F95 Broskyňa
INF49 F49 Jablko
OKIA
70
Skratka Názov alergénu INF14 F14 Sója
INF4 F4 Pšeničná múka
INF10 F10 Sézam
INF5 F5 Ražná múka
Detský stredoeurópsky panel inhalačných alergénov WIP INPT3 T3 peľ brezy
INPT2 T2 peľ jelše
INPT4 T4 peľ liesky
INPT7 T7 peľ duba
INPGX5 GX5 trávy mix
INPG12 G12 raž siata
INPW6 W6 palina obyčajná
INPW9 W9 skorocel
INPD1 D1 D.pteronyssinus
INPD2 D2 D.farinae
INPE2 E2 pes epitélie
INPE1 E1 mačka epitélie
INPE3 E3 kôň epitélie
INPE6 E6 morča epitélie
INPE84 E84 škrečok epitélie
INPE82 E82 zajac epitélie
INPM3 M3 Aspergillus fumigatus
INPM2 M2 Cladosporium herbatum
INPM1 M1 Penicilium notatum
INPM6 M6 Alternaria tenius
plesneM2 M2 Cladosporium herbarum
M3 M3 Aspergillus fumigatus
M5 M5 Candida Albicans
M43 M43 Saccharomyces carlsbergensis
M44 M44 Saccharomyces cerevisiae
M207 M207 Aspergillus niger
Skratka Názov alergénuCAP systém - FEIA
- rekombinantné a komponentné zložky inhalačných alergénov, profilínový, tropomyozínový panel
MILKCAP špecifické IgE - mlieko a komponenty mlieka, CAP systém
F2C F2C kravské mlieko sIgE CAP
F76RC F76 nBos d4 alpha-lactalbumín natív. komponent-CAP
F77RC F77 nBos d5 beta-lactoglobulín natív. komponent-CAP
F78 RC F78 nBos d8 Casein natívny komponent-CAP
F334RC F334 nBos d Lactoferín natívny komponent-CAP
OKIA
71
Skratka Názov alergénuROZTCAP špecifické IgE - komponenty roztočov, CAP systém
D202RC d202 nDer p1 Dp-rekombinant CAP
D203RC d203 rDer p2 DP - rekombinant CAP
D205RC d205 rDer p10 tropomyosin DP - rekombinant CAP
HMYZCAP špecifické IgE - komponenty hmyzu, CAP systém
I208RC rApi m1 phospholipase A2,CAP
I209RC rVes v5 Common wasp
I210RC rPol d5 Paper waspSTROMCAP špecifické IgE - komponenty stromov, CAP systém T215RC rBet v1 PR-10 Birch -rekombinant CAP
T216RC t216 rBet v2 Profilin Birch-rekombinant CAP
T220RC t220 rBet v4, Birch-rekombinant CAP
T225RC t225 rBet v6 Birch - rekombinant CAP
T226RC t226 nCup a1 Cypress-natívny komponent CAP
T224RC t224 nOlie e1 Olive-nativny komponent CAP
BYLCAP špecifické IgE - komponenty bylín, CAP systém,
W230RC nAmb a1 Ragweed-natívny komponent CAP
W231RC nArt v1 Mugwort-natívny komponent CAP
W233RC nArt v3 LTP Mugwort-natívny komponent CAP
TRAVCAP špecifické IgE - komponenty tráv, CAP systém
G216RC nCyn d1 Bermuda grass
G205RC r Phl p1 Timothy
G206RC r Phl p2 Timothy
G208RC r Phl p4 Timothy
G209RC r Phl p6 Timothy
G210RC r Phl p7 Timothy
G211RC r Phl p11 Timothy
G212RC r Phl p12 Profilin, Timothy
G213RC r Phl p 5b Timothy
TROPO špecifické IgE - tropomyozínový panel, CAP systém
D205RC d205 rDer p10 tropomyosin DP - rekombinant CAP
F351RC rPen a1 Tropomyosin, kreveta
I6C i6 šváb (german) CAP systém
I8C I8 moľa CAP systém
PROFILIN špecifické IgE - profilínový panel, CAP systém
K221RC rHev b8 Profilín, latex
F421RC rPru p4 profilín, broskyňa CAP
T216RC t216 rBet v2 Profilin Birch-rekombinant CAP
G212RC r Phl p12 Profilin, Timothy
OKIA
72
Ponuka nových laboratórnych vyšetrení
BAZOTEST - funkčný test aktivácie bazofilov určený na in vitro diagnostiku IgE sprostredkovanej alergickej reakcie na rôzne alergény s využitím prietokovej cytometrie.
Test aktivácie bazofilov s využitím prietokovej cytometrie je alternatívnou metódou
pre in vitro diagnostiku IgE sprostredkovanej alergickej reakcie. Princípom testu je vyvolanie aktivácie bazofilov in vitro v prítomnosti senzibilizujúceho alergénu a následné meranie expresie aktivačného znaku bazofilov (CD63) na bunkovom povrchu, detekovaného monoklónovou protilátkou. Výsledok vyjadrený ako množstvo aktivovaných (degranulovaných) bazofilov v %, prípadne ako stimulačný index (pomer aktivovaných granulocytov/k neaktivovaným). Indikácia:
testovanie precitlivelosti I. typu test dobre koreluje s testom uvoľnenia histamínu (histamín release test HRT) pri sporných (nejasných) výsledkoch kožných testov pri neúspešnej terapii ( skrížená reaktivita niektorých alergénov) k monitorovaniu imunoterapie
Odber a požiadavky laboratória:
laboratórium vykonáva test 2x týždenne, test je potrebné vopred objednať odber sa robí do 2ml skúmavky s heparínom – nutné dodržať odporúčaný objem
(po rysku) po odbere je treba skúmavku 8-10x jemne prevrátiť hore dnom a späť odobranú vzorku krvi uchovávať pri 2 – 8°C, do laboratória dopraviť v deň odberu vo výnimočných prípadoch je možné vzorku odobrať a dopraviť do laboratória deň
vopred odber sa odporúča robiť maximálne 12 mesiacov po akútnej alergickej reakcii najmenej 24 hodín pred odberom je vhodné vysadiť podávané antihistaminiká,
glukokortikoidy a kromony odporúča sa robiť odber pred zahájením kožných alebo provokačných testov
Hodnotenie pozitivity: ≥ 15 % aktivovaných bazofilov pre inhalačné a potravinové alergény ≥ 10% pre jed blanokrídleho hmyzu ≥ 5% pre lieky Poznámka: Hodnotenie testu nie je možné robiť, ak pozitívna kontrola (FMLP, anti IGE) vykazuje menej ako 10% aktivovaných bazofilov. Prečo je zmysluplné testovať aktivitu bazofilov?
bazofily nie sú priamym obrazom žírnych buniek v tkanivách, ale sú kľúčom ku klasickej a alternatívnej dráhe anafylaxie
bazofily sú dobre dostupné pre klinické testovanie bazofily dnes vieme identifikovať aj v malom množstve
(prietoková cytometria - CD63/CD203c/CD123/CDHLADR) bazofily hrajú ďalšie role v imunitnom systéme okrem vyvolania anafylaxie môžeme sledovať pomer špecifického IgE/IgG/IgD/IgM na povrchu bazofilov
vs. v plazme (exbio)
OKIA
73
TRYPTÁZA - špecifický marker mastocytov (žírnych buniek)
Tryptáza je jedna z najvýznamnejších proteáz mastocytov. Celková tryptáza zahŕňa proformy α- a β-tryptázy a taktiež enzymaticky aktívnu zrelú β-tryptázu. Proformy tryptázy sú nepretržite uvoľňované z mastocytov do krvného obehu, odzrkadľujúc tak počet mastocytov. Enzymaticky aktívna zrelá β-tryptáza je uchovávaná v granulách kľudových mastocytov a do krvného obehu je uvoľňovaná po aktivácii mastocytov. Ihneď po aktivácii mastocytov sa koncentrácia tryptázy výrazne zvýši, pričom následne dochádza k poklesu jej koncentrácie. Klinický význam Rizikový marker vzniku vážnych reakcií: Stabilne zvýšená hladina tryptázy v sére indikuje zvýšený počet mastocytov a poukazuje na zvýšené riziko vzniku závažných reakcií:
pri liekovej alergii a bodnutí hmyzom pred a počas SIT (špecifická imunoterapia)
počas anestézy a operácií Anafylaxia Dočasne zvýšená koncentrácia tryptázy po anafylaktickej reakcii:
potvrdzuje aktiváciu mastocytov umožňuje diagnostiku post-mortem
Marker hematologických nádorových ochorení a mastocytózy: Trvale zvýšená alebo rastúca koncentrácia tryptázy je užitočným monitorovacím a prognostickým nástrojom pre:
diagnózu a prognózu sledovanie priebehu liečby
Hodnoty tryptázy v sére: Koncentrácia celkovej tryptázy v sére u zdravých jedincov 1-15 μg/l.
Stabilne zvýšená koncentrácia môže, ale nutne nemusí byť spôsobená mastocytózou. Pri kutánnej mastocytóze je všeobecne hladina tryptázy <20 μg/l. U systémovej mastocytózy je hladina tryptázy vo väčšine prípadov > 20μg/l.
Prechodne zvýšená koncentrácia tryptázy poukazuje na aktiváciu mastocytov, ktorá je výsledkom anafylaxie, alebo alergickej reakcie. Najvyššia koncentrácia tryptázy je detekovateľná v sére 15 až 180 minút od začiatku reakcie. Následne hladina tryptázy pomaly klesá a návrat k pôvodnej, základnej koncentrácii nastáva po 24-48 hodinách.
Odber: na overenie aktivácie mastocytov je potrebné sledovanie koncentrácie tryptázy v sére vpriebehu času. Preto je vhodné nasledovné načasovanie odberu krvi:
1. Prvá vzorka by mala byť odobraná v rozmedzí 15-180 minút od začiatku symptómov 2. Druhá vzorka by mala byť odobraná 3-6 hodín po reakcii
OKIA
74
3. Na potvrdenie návratu na základnú úroveň koncentrácie by mala byť odobraná ďalšia vzorka po 24-48 hodinách
4. Pri podozrení na stabilne zvýšené hodnoty tryptázy alebo mastocytózu je vhodné odobrať ďalšiu vzorku o 1-2 týždne.
Typ odberu: venózna krv, skúmavka s EDTA alebo heparínom. Vzorky doručiť čo najskôr do laboratória. Ak ich nieje možné doručiť ihneď, vzorky scentrifugovať, sérum alebo plazmu zmraziť pri < -20°C a doručiť do laboratória (zabrániť ich rozmrazeniu). Metóda stanovenia: enzymatická imunoanalýza s fluorescenčnou detekciou na analyzátore PHADIA ImmunoCAP.
DAOF - D-HIT® ELISA (diaminooxidáza) - test funkčnej aktivity diaminooxidázy
Diagnostika histamínovej intolerancie D-HIT imunoenzymatické stanovenie (ELISA)
určené na meranie diamínooxidázy u pacientov s histamínovou intoleranciou nie je potrebné izotopové laboratórium
Indikácie
žalúdočno-črevné ťažkosti, hnačky bolesti hlavy, migréna bolesti kĺbov sčervenanie pokožky, svrbenie, opuchy nádcha, alebo podobné symptómy po požití potravín s vysokým obsahom histamínu ťažká únava
Histamínová intolerancia
Milióny ľudí trpí po požití určitých potravín ťažkosťami, akú sú žalúdočno-črevné problémy, migrény, podráždenia nosnej sliznice, alebo iné symptómy podobné alergiám. Za tento rozsiahly obraz príznakov môže byť zodpovedné príliš veľké množstvo histamínu v tele. Histamínová intolerancia (HIT) sa vyskytuje vtedy, keď organizmus nie je schopný dostatočne rýchlo odbúrať histamín prijatý v potrave alebo uvoľnený z vlastných buniek. Histamínovou intoleranciou trpí až 1% populácie.
Histamín, biogénny amín, vzniká dekarboxyláciou histidínu. Ako prenášač (mediátor) je zodpovedný za mnohé alergické a pseudoalergické reakcie. Histamín je prirodzená látka v organizme, ktorá sa však vyskytuje vo veľmi rozdielnych koncentráciách aj v mnohých potravinách, ako napr. červené víno, syr, rajčiny, tuniak alebo kyslá kapusta.
Diaminooxidáza (DAO) je dôležitý enzým vyskytujúci sa v organizme, ktorý je zodpovedný za odbúravanie histamínu. DAO sa prakticky vyskytuje v celom tele, ale najdôležitejšia oblasť pôsobenia je črevo. Enzýmová aktivita DAO určuje rýchlosť odbúrania histamínu. Potravinová intolerancia indukovaná histamínom nie je sprostredkovaná IgE. D-HIT (diaminooxidáza).
V prípade nedostatku enzýmu DAO, resp. ak je inhibovaná aktivita DAO, nemôže sa histamín v potrebnej miere odbúrať. Začnú sa objavovať symptómy histamínovej intolerancie, ktoré zahŕňajú početné prejavy ťažkostí. Ďalšia možnosť redukcie funkcie DAO je pri požití látok, ktoré inhibujú aktivitu enzýmu, ako napr. alkohol alebo niektoré liečivá. Stanovenie histamínu a aktivity diaminooxidázy predstavuje teda optimálny marker na diagnostikovanie histamínovej intolerancie a s tým spojených príznakov ochorenia. Pri novom D-HIT imunoenzymatickom stanovení diaminooxidázy (ELISA) sa jedná o aktivačný marker.
OKIA
75
Meranie spočíva v stanovení odbúrania určitého množstva histamínu aktivitou enzýmu v sére alebo v plazme. DAO, ktorá sa vyskytuje vo vzorke odbúra histamín. Nameraná hodnota je úmerná kapacite odbúrania histamínu. Výsledok sa udáva v HDU (Histamin Degrading Units) na ml a zodpovedá takej aktivite DAO, ktorá histamín vo vzorke odbúra.
DAO ELISA - (kvantitatívne stanovenie DAO)
Diagnostika histamínovej intolerancie imunoenzymatickým testom, v ktorom je stanovené množstvo DAO v sére, alebo v iných telových tekutinách pacienta. Na základe komplexnej diagnostiky histamínovej intolerancie (HIT), dopĺňame dg. HIT o novú diagnostickú metódu – stanovenie hladiny DAO v sére pacienta a v iných telových tekutinách.
Metóda – ELISA Výrobca – Immundiagnostik Vyšetrovaná vzorka – sérum pacienta Odber – ako na biochemické vyšetrenia, bez aditív. Rozdiely medzi aktivitou a koncentráciou DAO:
Aktivita DAO nezávisí od koncentrácie DAO Funkčná aktivita DAO závisí od prítomnosti kofaktorov, ako sú vitamín C, B6,
horečnaté a meďnaté ióny in vivo, alebo in vitro. Preto by bolo vhodné s aktivitou DAO stanovovať aj koncentráciu kofaktorov, aby ich prípadný nedostatok nebol nesprávne diagnostikovaný ako histamínová intolerancia
Kvantita DAO nie je závislá od kofaktorov Aktivitu DAO ovplyvňuje príjem liekov, niektoré lieky inhibujú DAO, alebo
podporujú vylučovanie histamínu. Laboratórnymi výsledkami sa zistila nízka aktivita DAO, aj keď je koncentrácia DAO v norme
Aktivita DAO môže byť falošne nízka – (výsledok dg. HIT falošne pozitívy) – ak došlo k nesprávnemu spracovaniu séra – opakované zmrazenie a rozmrazenie, nevhodné skladovanie vzoriek pri izbovej teplote počas dlhšieho obdobia
Aktivita DAO je vyjadrením množstva produktu enzymatického rozkladu putrescínu, alebo histamínu prostredníctvom DAO. V ľudskom organizme tieto amíny nie sú degradované len prostredníctvom DAO, ale aj prostredníctvom N-metyltransferázy, alebo GABA-dehydrogenázy. Preto pri testoch funkčnej aktivity DAO je potrebné vziať do úvahy, že vysoká aktivita DAO môže byť v dôsledku vysokej degradačnej aktivity, ale koncentrácia DAO môže byť nízka
Hladina DAO (ELISA Immundiagnostik) sa zvyšuje v sére pacienta po podaní heparínu
Zvýšená hladina DAO je aj u tehotných žien Kombinácia stanovení DAO koncentrácie a DAO funkčnej aktivity v sére pacienta
je odporúčanou voľbou testov na diagnostiku histamínovej intolerancie a asociovaných symptómov
Interpretácia výsledkov: < 3 U/ml - vysoká pravdepodobnosť HIT ( Histamínová intolerancia) 3– 10 U/ml - pravdepodobná histamínová intolerancia >10 U/ml - nízka pravdepodobnosť histamínovej intolerancie
OKIA
76
Fikolín 3 – ELISA metóda na stanovenie aktivity FCN3 Fikolíny predstavujú skupinu molekúl štruktúrovo a funkčne podobných kolektínom. Sú schopné opsonizovať mikroorganizmy a aktivovať lektínovú cestu komplementu v kooperácii s proteázami asociovanými s lektínom viažucim manán (Mannan binding lectin, MBL) - MASP1, MASP2, MASP3 - ktoré zohrávajú významnú úlohu v patogenéze ochorení.
Fikolín 1 (fikolín M) sa prevažne asociuje s monocytmi a neutrofilmi, Fikolín 2 (Fikolín L) a Fikolín 3 (Fikolín H – Hataka antigén) sú prevažne sérové molekuly. Charakteristickým znakom fikolínu 2 je súbor väzobných miest usporiadaných tak (do „rázštepu“), aby mohol rozpoznať širokú škálu ligandov – bakteriálne kapsulové polysacharidy, lipoteichová kyselina, 1,3-beta glukány (Kilpartick a Chalmers). Poznatky o mikrobiálnej špecifickosti Fikolínu 3 sa doposiaľ dostatočne nepreskúmali. Preukázala sa interakcia s polysacharidmi Aerococcus viridans (tento patogén sa opísal v súvislosti s výskytom ťažkých infekcií u neutropenických detí po chemoterapii) a s lipopolysacharidmi Hafnia alvei. Je známe, že Fikolín 2 a Fikolín 3 je schopný rozpoznať endogénne ligandy apoptických buniek a môže tak prispieť k ich odstraňovaniu a v dôsledku toho udržať homeostázu tkanív, čo je dôležité pri onkologických ochoreniach. Fikolín 3 sa syntetizuje predovšetkým v pečeni a v pľúcach a zúčastňuje sa na systémovej a lokálnej imunitnej odpovedi.
OKIA
77
Nízka hodnota fikolínu 3 sa asociuje s:
rekurentnými respiračnými infektami
neonatálnymi sepsami vyvolanými predovšetkým Gram pozitívnymi baktériami
ovariálnym karcinómom
SLE a inými autoimúnnymi ochoreniami
spolu s nízkym počtom CD4+ T-lymfocytov s výskytom CMV infekcie
zvýšeným výskytom atypických infekcií u HIV pozitívnych pacientov (mykobakteriálne, CMV, mykoplazmové...)
život ohrozujúcimi infekciami
u pacientov so symptomatickým kardiálnym zlyhaním
aktiváciou C3 a jeho následným poklesom
zvýšenou aktiváciou komplementu (doposiaľ nedostatočne objasnený mechanizmus)
Ďalšie možné oblasti využitia fikolínu 3:
fikolín 3 zohráva významnú rolu v proliferatívnej diabetickej retinopatii – tiež ako potenciálny terapeutický cieľ
v gynekológii – Preeklampsie
inhibuje replikáciu vírusu pandemickej chrípky A
autizmus
perinatálna nekrotizujúca enterokolitída
Odber:
‐ do skúmavky bez protizrážanlivých additív (ako na biochémiu) – napr. červená Vacutainer
‐ po odbere nenechať stáť viac ako 1 h pri teplote do 28°C, aby sa predišlo spontánnej aktivácii komplementu
‐ centrifugovať a sérum uložiť pri -20°C/-70°C dlhodobé uskladnenie
Žiadanka – FCN3 (ako samostatná metóda, v komplexe skríningu komplementu je označená WF3)
Normálne hodnoty: 23 – 176 % aktivity Kontakt: Laboratórium tel. 02/32249595, Ing. Zuzulová 02/32249540, mzuzulov@ousa.sk Ambulancia tel. 02/32249610, Doc. MUDr. Martin Hrubiško, PhD. mahrubis@ousa.sk Dispečing na zvoz materiálu: 02/32249438, p. Luknárová 0905 936 219 Marketing: RNDR. Špaček Ľuboš 02/32248413, RNDr. Jozef Tóth, CsC. 02/32248414
OKIA
78
Ústav patológie SZU a OUSA – ÚP
Ústav patológie SZU a OUSA (ďalej len Ústav patológie) je akreditovaným poskytovateľom zdravotnej starostlivosti v Slovenskej republike na úrovni bioptickej aj cytologickej diagnostickej činnosti. Túto činnosť zabezpečuje pre kliniky a ambulancie OUSA, s.r.o., ako aj pre ďalšie zdravotnícke zariadenia na Slovensku. Ústav patológie sa skladá z histopatologického, imunohistochemického a cytologického úseku. V štádiu prípravy je budovanie úseku tkanivovej biobanky, ktorá bude v súčasnosti jediným zariadením tohto druhu na Slovensku.
Ústav patológie je najväčším pracoviskom v SR zabezpečujúcim komplexnú
diagnostiku karcinómov prsníka vrátane vyšetrenia všetkých relevantných biologických prediktívnych ukazovateľov, najmä stavu ER, PR a HER2. Zhodnotenie nadmernej expresie HER2 proteínu, ako aj amplifikácie HER2 génu poskytuje podľa požiadaviek pre ďalšie onkologické pracoviská v Slovenskej republike. Pracovisko je zároveň jedným z konzultačných centier pre bioptickú diagnostiku neuroendokrinných tumorov GITu a zabezpečuje vyšetrenie stavu EGFR, KRAS a MSI pri kolorektálnych karcinómoch v súčinnosti s Oddelením lekárskej genetiky OUSA.
Náplňou histopatologického úseku je aj komplexná konzultačná činnosť onkologickej
diagnostiky pre ostatné pracoviská patológie na Slovensku, a to najmä testikulárnych nádorov, nádorov močového mechúra a osteoartikulárneho aparátu. Ústav patológie SZU a OUSA je pracovisko založené na bohatej tradícii onkologickej diagnostiky. Z významných patológov s medzinárodnou autoritou tu pôsobili primári P. Kossey a J. Maťoška. Viac ako 7 rokov bolo Oddelenie klinickej patológie a cytológie (OKPC) súčasťou Ústavu laboratórnych vyšetrovacích metód LF UK, od ktorého sa v roku 2011 OKPC odčlenilo a pretransformovalo na Ústav patológie pod gesciou SZU a OUSA, s.r.o. Súčasné personálne obsadenie pracoviska je zárukou kvalitnej diagnostiky, ktorú Ústav patológie zabezpečuje. Lekársky tím je tvorený uznávanými odborníkmi v oblastiach mamárnej a urogenitálnej patológie, lézií ženského genitálu, neuroendokrinných tumorov a patológie kostných lézií. Zároveň všetci lekári majú bohaté pedagogické skúsenosti z pôsobenia na iných Ústavoch patológie.
V súčinnosti s Oddelením lekárskej genetiky sa Ústav patológie podieľa na realizácii
programu analýzy nádorovej rezistencie, je partnerom Jednotky translačného výskumu NOÚ a spolupracuje v oblasti experimentálnej mammárnej karcinogenézy a jej terapeutického ovplyvnenia s Ústavom lekárskej biológie JLF UK v Martine. Pracovisko je otvorené akejkoľvek spolupráci a vytváraniu partnerských vzťahov umožňujúcich rozvoj biomedicínskeho poznania. Ústav patológie SZU a OUSA je zároveň výučbovou bázou pre potreby postgraduálneho aj pregraduálneho štúdia v lekárskych a nelekárskych odboroch na SZU, čo zabezpečuje v súčinnosti s Ústavom patológie SZU na Kramároch vedenom doc. MUDr. Dušanom Danišom, CSc.
ÚP
79
Pracovníci ÚP
Pracovník: Kategória/ funkcia: Tel. č.: e-mail:
Karol KAJO, doc. MUDr., PhD. prednosta ÚP 3224 9536 kkajo@ousa.sk
Dušan MACÁK, MUDr., PhD. primár 3224 9517 dmacak@ousa.sk
Štefan GALBAVÝ, prof. MUDr.,DrSc. lekár 3224 9579 sgalbavy@ousa.sk
Katarína MACHÁLEKOVÁ, MUDr., PhD. lekár 3224 9518 kmachale@ousa.sk
Jaroslava JOZEFÁKOVÁ, MUDr., MIAC vedúci lekár úseku
cytológie 3224 9581 jjozefak@ousa.sk
Peter KULIFFAY, RNDr. samostat.odborný prac. 3224 9516 pkulif@ousa.sk
Miroslava VALLOVÁ, Mgr. samostat.odborný prac. 3224 9516
Božena BÓDYOVÁ dokumentácia 3224 9515 bbodyova@ousa.sk
Jana PAULENOVÁ, AnnaFELDINSZKÁ, Martina ŠTEFEKOVÁ, Andrea TRNKOVÁ, Mgr., Tomáš LABOŠ, Bc.
laboranti - biopsia 3224 9516
Svetlana HUDECOVÁ, Mgr., Helena FUSEKOVÁ, Kristína MELICHERÍKOVÁ, Bc.
laboranti - cytolóia 3224 9583
3224 9580
Terézia BARICOVÁ sanitárka
Zoznam vykonávaných laboratórnych vyšetrení (skúšok):
V nasledujúcej tabuľke je uvedený zoznam všetkých skúšok vykonávaných na OKPC ÚLVM
akreditovaných – A neakreditovaných – N
P.č. A/N Materiál Skratka Názov vyšetrenia Metóda
1. A tkanivo
Histologické vyšetrenie tkaniva : - peroperačná biopsia - histochémia - imunohistochémia (IHC) - spracovanie tvrdých tkanív - mikroskopické hodnotenie
2. A moč, výpotok, odtlačok, ascitická tekutina
Cytologické vyšetrenie negynekologické : - farbenie náterov polychromatickou metódou podľa Papanicolaua - mikroskopické hodnotenie
3. A gynekologický ster
Cytologické vyšetrenie gynekologické: - farbenie náterov polychromatickou metodou podľa Papanicolaua - LBC - mikroskopické hodnotenie v Bethesda systéme
4. N sérum
ANA EMA ARA ASMA ASKMA ATA AMA APCA
Autoprotilátky - proti bunkovým jadrám - proti endomýziu - proti retikulínu - proti hladkému svalu - proti kostrovému svalu - proti štítném žľaze - proti mitochondriám
NIF
5. N tkanivo Laserová skenovacia cytometria LSC 6. N tkanivo Fluorescenčná in situ hybridizácia FISH Vysvetlivky: IHC – Imunohistochémia, LBC – Liquid based cytology , NIF - Nepriama imunofluorescencia , LSC – Laserová skenovacia cytometria , FISH – Fluorescenčná in situ hybridizácia
ÚP
80
Zoznam histochemických farbiacich a impregnačných metód
1. Farbenie Hematoxylin- eozín 2. Farbenie HP podľa Giemsu 3. Farbenie kolagenových vlákien podľa van Giesona 4. Farbenie kolagenových vlákien podľa Massona 5. Dôkaz fibrínových vlákien podľa Malloryho 6. Dôkaz polysacharidov PAS reakciou podľa McManusa 7. Farbenie PAS – diastáza 8. Farbenie kyslých mukopolysacharidov Alciánovou modrou 9. Farbenie lipidov olejovou červeňou 10. Farbenie Mucikarmínu podľa Mayera 11. Dôkaz amyloidu kongočerveňou podľa Puchetlerovej 12. Farbenie na Mastocyty 13. Dôkaz baktérií podľa Gramma 14. Dôkaz Mycobacterium tuberculosis podľa Ziehl- Neelsena 15. Dôkaz železa Perslovou reakciou 16. Dôkaz žlčových pigmentov Fouchetovou reakciou 17. Impregnácia retikulárnych vlákien podľa Gomoriho 18. Dôkaz melanínu podľa Lignaca 19. Dôkaz pliesní modifikovanou metódou podľa Gomoriho 20. Impregnačná metóda podľa Grimeliusa na dôkaz spojivového tkaniva
Zoznam antigénov vyšetrovaných imunohistochemickou metódou
Protilátka proti antigénu Skratka Výrobca
Aktín (smooth muscle) ASM Dako
Aktín sarkometrický ASR Dako
Alfa-1-fetoproteín AFP Dako
Beta-Catenín βCAT Dako
CD10 CD10 Dako
CD20y CD20, L26 Dako
CD30 CD30 Dako
CD31 CD31 Dako
CD34 Class II CD34 Dako
CD44 CD44 Dako
CD45 CD45, LCA Dako
CD45RO CD45RO, UCHL1 Dako
CD56 CD56 Dako
CD68 CD68 Dako
CD99 CD99 Dako
CD117 CD117 Dako
c-erbB-2 onkoproteín CE Dako
Cytokeratín 7 CK7 Dako
Cytokeratín 8 CK8 Dako
Cytokeratín 18 CK18 Dako
Cytokeratín 20 CK20 Dako
Cytokeratín AE1/A3 AE1/3 Dako
ÚP
81
Protilátka proti antigénu Skratka Výrobca
Cytokeratín HMW CKHW Dako
Dezmín DEZ Dako
EGFR EGFR Dako
E-kadherín CAD Dako
Epitelový membránový antigén EMA Dako
Estrogénový receptor ER Dako
FVIII (von Willebrand factor) FVIII Dako
Gastrin GAST Dako
Glukagon GLUK Dako
ľudský choriogonadotropín HCG Dako
Hepatocyte HEP Dako
HER2 HER2 Dako
Chromogranín A CHROM Dako
Inhibín INHIB Dako
Inzulín INZ Dako
Kacitonín KALCIT Dako
Kaldesmon CDES Dako
Kalretinin CRT Dako
Karcinoembryonálny antigén CEA Dako
Ki-67 Ki-67 Dako
Melan A Melan Dako
Melanozóm HMB45 Dako
MLH1, MSH2, MSH6, PMS2 MMR Dako
Enoláza špecifická pre neuróny NSE Dako
Proliferačný bunkový jadrový antigén PCNA BeckmanCoulter
Placentárna alkalická fosfatáza PLAP Dako
p16 p16 CINtec
p53 p53 Dako
P504S (α-metylacyl CoA racemáza) p504S Dako
Progesterónový receptor PR Dako
Prostatický špecifický antigén PSA Dako
Serotonin SRT Dako
Somatostatin SOM Dako
Survivín SURV Dako
S-100 S-100 Dako
Synaptofyzín SYN Dako
Tyreoglobulín THG Dako
Tyreoidný transkripčný fatkor -1 TTF-1 Dako
Vimentín VIM Dako
ÚP
82
Požiadavky na odber a doručenie vzoriek biologického materiálu
Táto kapitola obsahuje pokyny týkajúce sa správneho odberu, fixácie a manipulácie s materiálom pre cytologické (gynekologické a negynekologické) a bioptické vyšetrenie. Riadia sa nimi ako zamestnanci pracoviska, tak isto sú tieto pokyny poskytnuté aj odosielajúcim lekárom a zdravotníckym pracovníkom zodpovedným za odbery, fixáciu a značenie materiálov a preparátov.
1. Sprievodný list (Žiadanka) Každý materiál určený na cytologické a histologické vyšetrenie musí mať riadne vyplnený
sprievodný list ! Sprievodný list musí obsahovať tieto povinné údaje: meno a priezvisko pacienta rodné číslo, príp. dátum narodenia (novorodenci, cudzinci) kód zdravotnej poisťovne pacienta, resp. informácia o spôsobe úhrady identifikáciu objednávateľa: ústav, klinika, oddelenie, pracovisko, meno lekára,
kód lekára lokalizáciu (tkanivový pôvod vzorky) – predmet vyšetrenia klinickú diagnózu, príp. stručný klinický priebeh požiadavky na rýchlosť uskutočnenia vyšetrenia (CITO) pečiatku a podpis odosielajúceho lekára na origináli a kópii sprievodného listu.
Povinné podmienené údaje: predchádzajúce histologické vyšetrenie popis odobratého materiálu, príp. anatomická špecifikácia miesta odberu dátum a čas odberu adresa miesta pobytu vyšetrovanej osoby v SR telefón alebo iný kontakt na odosielajúceho lekára v prípade urgentného alebo
závažného výsledku Požiadavky na urgentné vyšetrenie: Požiadavky na vyšetrenie CITO (akútne vyšetrenie) sa zasielajú na rovnakých sprievodkách ako pre bežné vyšetrenia, avšak sú navyše označené slovom CITO a zvýraznené červenou farbou. Sprievodka musí obsahovať vyššie uvedené povinné údaje.
2. Odber vzoriek pre gynekologickú cytológiu a) Odber - Odber cytologickej vzorky uskutočňuje lekár – gynekológ najlepšie v prvej
polovici menštruačného cyklu. Je dôleţité odobrať vzorky z tzv. transformačnej zóny. Reprezentatívny ster má obsahovať bunky ektocervixu a endocervixu, t. j. dlaždicový a žľazový epitel. Odber sa uskutočňuje štetcom (brush), príp. vatovou štetkou alebo špachtľou. Za bezpečnú likvidáciu materiálov použitých pri odbere je zodpovedný lekár, ktorý odber vykonal. Odber pre LBC sa robí do špeciálnych odberových súprav, ktoré Vám dodáme na požiadanie.
b) Fixácia - Po odbere gynekológ rovnomerne rozotrie materiál po celej dĺžke podložného skla tak, aby bolo v celom rozsahu pokryté náterom. Potom ho okamžite ponorí do fixačného roztoku (90 % metanol). Takto fixovanú a riadne označenú vzorku je potrebné uložiť tak, aby nedošlo ku kontaktu so žiadnou ďalšou chemikáliou, ktorej prítomnosť by následne mohla ovplyvniť spracovanie vzorky v laboratóriu, napr. dezinfekčné roztoky, osviežovače vzduchu, formaldehyd. Rovnako je dôležité, aby s takýmito chemikáliami neprišli do styku čisté sklá určené na odber materiálu. Na tento účel je možné použiť vhodné uzatvárateľné prepravné škatuľky. Takto uložená fixovaná
ÚP
83
vzorka je v ambulancii uchovávaná pri izbovej teplote a je vhodné, aby sa vzorka spracovala do 1 až 2 týždňov.
c) Označenie - Sklo a sprievodka musia byť označené zhodne. Jednoznačnú identifikáciu pacienta na sprievodke určuje aspoň jeden z nasledujúcich parametrov:
– meno a priezvisko pacienta – rodné číslo pacienta – poradové číslo alebo označenie pridelené ošetrujúcim lekárom V prípade, že je zhoda v označení, materiál sa spracuje, v opačnom prípade sa sklo spolu
so sprievodkou odkladá do nekompletných vyšetrení a laborant telefonicky alebo písomne informuje odosielajúceho lekára a požaduje doplnenie údajov a spresnenie informácií.
d) Chyby pri odbere Nesprávna fixácia: V prípade, že sa materiál okamžite po odbere nezafixoval, materiál
sa znehodnotí!!! Kontaminácia čistého skla alebo náteru : Podložné sklo, na ktoré sa cytologická
vzorka nanáša, musí byť čisté. V prípade, že sa dostane do styku s akýmkoľvek aerosólom (dezinfekcia, dezodorant a pod.) používaným v ambulancii, dochádza k rozkladu buniek vplyvom zmeny pH prostredia a v takom prípade nie je možné náter v laboratóriu správne ofarbiť a hodnotiť.
Nesprávny odber gynekológom: V prípade, že náter z cervixu neobsahuje endocervikálny alebo ektocervikálny epitel, vzorka je nedostatočná. Medzi ďalšie limitujúce faktory patrí malobunkový odber, masívna prítomnosť erytrocytov alebo ťažký zápal.
3. Odber telových tekutín a ich fixácia pre negynekologickú cytológiu
a) Odber a fixácia moču - Vždy sa vyšetruje stredný prúd moča; pacient o tom musí byť vopred poučený. Určenie minimálneho množstva vzorky je vždy individuálne. V prípade neistoty konzultuje lekár vykonávajúci odber s lekárom z nášho pracoviska. Na sprievodke k materiálu je nutné označiť charakter vzorky: spontánny, katetrizovaný, a iné. Na odber moču sú určené plastové skúmavky s uzáverom. Na fixáciu sa používa roztok 1 % mertiolátu sodného (etylmerkuritiosalicylan sodný). K 10 ml odobratého moču sa pridá 5 kvapiek tohto roztoku.
b) Ostatné telesné tekutiny (výpotok, punktát) - Odbery iných telových tekutín vykonáva vždy lekár. Ide napr. o tenkoihlové biopsie, odber tekutín z telových dutín. Naše pracovisko nemá žiadne špeciálne požiadavky na výkon odberov takýchto telových tekutín. Určenie minimálneho množstva je vždy individuálne. V prípade neistoty konzultuje lekár uskutočňujúci odber s lekárom nášho pracoviska. Ak sa odobraté tekutiny dodávajú v stave, v akom boli odobraté, je nutné ich čo najskôr (do 15min) dopraviť do laboratória na spracovanie. Ak nie je možné ich do tohto času doručiť, je potrebné tekutinu fixovať pridaním 50-70% etanolu v pomere 1:1. Takto fixovanú tekutinu je možné dodať aj neskôr, pričom nemusí byť uskladnená v chladničke.
c) Zhotovenie náterov z telových tekutín a ich fixácia - Nátery na podložnom sklíčku je nutné po odbere označiť číslom, ktoré priradí spolu so svojou identifikačnou značkou v ambulancii lekár. Mierne zasušený náter sa ponorí do roztoku metanolu na čas 10 až 30 min.
d) Označenie vzorky - Skúmavka a sprievodka musia byť označené zhodne. Jednoznačnú identifikáciu pacienta na sprievodke a vzorke určuje aspoň jeden z týchto parametrov: – meno a priezvisko pacienta – rok narodenia.
ÚP
84
V prípade, že je prítomná zhoda v označení, materiál sa spracuje. Pokiaľ tomu tak nie je, sklo a sprievodka sa odložia do nekompletných vyšetrení a laborant telefonicky informuje odosielajúceho lekára a žiada o doplnenie a spresnenie informácií o pacientovi.
4. Manipulácia s materiálom pre peroperačné vyšetrenie
a) Odber a fixácia – Materiál odobratý počas operačného výkonu dopraví okamžite po jeho odbere sanitár na naše pracovisko v označenej nádobe spolu so sprievodným lístkom. Materiál môže byť orientovaný a fixovaný na špeciálnej podložke. Výsledky peroperačného vyšetrenia hlási lekár – patológ telefonicky operujúcemu lekárovi. Po spracovaní zmrazovacou technikou je zvyšok materiálu fixovaný 4 % formaldehydom a spracovaný štandardným spôsobom.
b) Označenie – Spolu s materiálom sanitár prinesie aj vyplnenú sprievodku. Nádoba s materiálom, ako aj sprievodka musia byť označené zhodne. Jednoznačnú identifikáciu pacienta na žiadanke a vzorke určuje aspoň jeden z týchto parametrov: – meno a priezvisko pacienta – rodné číslo pacienta/rok narodenia.
Akákoľvek nezhoda v označení nádoby s materiálom a sprievodky sa rieši telefonicky.
Požiadavku vykonania rýchlej peroperačnej biopsie oznámi odosielajúce oddelenie jeden deň pred vykonaním rýchlej biopsie doručením operačného plánu. Podľa plánovaného rozpisu služieb v uvedený termín poverený lekár spolu s určeným zdravotníckym laborantom zabezpečí vykonanie rýchlej biopsie. O vykonaní rýchlej peroperačnej biopsie (čas vyšetrenia, počet vyšetrení, orgánová špecifikácia, výsledok) urobí lekár záznam do NIS.
5. Odber a fixácia tkaniva na histologické vyšetrenie a) Odber vykonáva vždy špecializovaný lekár na jednotlivých klinikách, oddeleniach
a ďalších zdravotníckych zariadeniach. Materiál, ktorý ošetrujúci lekár odoberie pri operačnom vyšetrení (ambulantnom a nemocničnom), posiela patológovi celý, a to vždy na jedno pracovisko. Pri väčších vzorkách je vhodné označiť patologické lézie, napr. stehom, farebným tušom. Za bezpečnú likvidáciu materiálov použitých pri odbere zodpovedá lekár, ktorý odber vykonal.
b) Fixácia - Tkanivo určené na histologické vyšetrenie je nutné OKAMŽITE FIXOVAŤ. Ako fixačná tekutina sa používa 4 % formaldehyd.
Upozornenie: Pri nedodržaní nasledujúcich zásad dochádza k autolýze materiálu!!! 1) Odobraté tkanivo musí byť v nádobe s dostatočným množstvom fixačnej tekutiny
(10 násobok objemu vzorky). 2) Fixačná tekutina musí mať v nádobe dostatočný prístup k tkanivu. Najprv je nutné
do nádoby naliať tekutinu a potom vložiť tkanivo, nie naopak! 3) Plošné orgány sa pred vkladaním do nádoby napínajú na polystyrénové podložky,
čím sa zabráni ich pokrúteniu (konizáty). 4) Malé a viacpočetné materiály (b. žalúdka, čreva, čapíka maternice) sa orientujú
na papierik. 5) Väčšie orgány, napr. maternica, je nutné narezať, aby fixačná tekutina rýchlejšie
prenikala tkanivom. 6) Materiály treba ukladať do nádob, ktoré zodpovedajú ich veľkosti, nikdy sa nesmú
do nej natlačiť! 7) Nádoby je nutné riadne uzatvoriť, aby sa fixačný roztok nevylial! 8) Materiál do času prepravy do laboratoria nie je potrebné skladovať v chladničke.
ÚP
85
Takto uložené a fixované tkanivo je z hľadiska času kvalitatívne nemenné až do doby spracovania. Pracovisko uchováva vyšetrený materiál do času konečného stanovenia výsledku. Preparáty a parafínové bločky z jednotlivých vyšetrení sa uchovávajú počas 20 rokov.
c) Špecifické požiadavky na odber a fixáciu Biopsia prsníka: Vzorka musí byť kompaktná, bez narezania, aby bolo možné presne sa vyjadriť k okrajom excízie. Najvhodnejšie je dodať materiál v jednom kuse. V prípade, že je rozdelený na viac vzoriek, musia byť jednotlivé vzorky označené s dôrazom na vzájomnú súvislosť. Vzorky je potrebné pre potreby topografickej orientácie vždy označiť aspoň dvoma stehmi, napr. krátky alebo modrý steh ventrálne a dlhý alebo biely steh laterálne. V prípade tkaniva po predchádzajúcej punkcii musí byť spoľahlivo označené miesto pôvodného výkonu – grafitom, svorkou alebo vodičom. Resekát čreva: V prípade resekátu čreva je nutné ho rozstrihnúť, zbaviť zvyškov stolice a následne vložiť do fixačnej tekutiny. Peroperačná biopsia: Veľkosť lézie pre peroperačnú biopsiu by nemala byť menšia ako 10mm. V praxi to znamená, že peroperačná biopsia by sa mala realizovať len v prípade veľkosti patologickej lézie cca 6 až 7mm, kedy je možné jednu polovicu technicky spracovať a druhú ponechať pre definitívny parafínový blok.
Peroperačne je možné vyšetriť len hmatné lézie!!
Fluorescenčná in situ hybdridizácia (FISH) Metódou fluorescenčnej in situ hybridizácie (FISH) sa vyšetruje HER2 a ALK génu. HER2 HER2 (receptor ľudského epidermálneho rastového faktora 2) je gén, ktorý hrá úlohu pri vzniku rakoviny prsníka. HER2 receptory kontrolujú rast a delenie zdravých buniek mliečnej žľazy. Približne u 25% pacientok s rakovinou prsníka je pozorovaný väčší počet kópií génu HER2 (tzv. amplifikácia HER2 génu), čo vedie k nekontrolovanému deleniu buniek mliečnej žľazy. ALK gén Približne 3-5 % nemalobunkových pľúcnych karcinómov (NSCLC) má prestavbu v ALK géne (kináza anaplastických lymfómov). ALK gén sa spája s ďalšími génmi, čím sa aktivuje a to ovplyvňuje dôležité bunkové procesy. Pacienti s nemalobunkovým karcinómom pľuc a prestavbou v ALK géne reagujú na terapiu inhibítorom ALK kinázy.
ÚP
86
Oddelenie klinickej farmakológie – OKF
OKF na Onkologickom ústave sv. Alžbety v Bratislave pracuje od r. 1996. Jeho úlohou je sledovanie antibiotickej liečby v nemocnici, monitorovanie spotreby antibiotík, sledovanie vývoja rezistencie a na základe výsledkov vypracovanie odporúčaných postupov antimikrobiálnej chemoterapie. Oddelenie analyzuje účinnosť antibiotík podávaných v ústave a vykonáva odbornú konziliárnu činnosť zameranú na liečbu infekcií onkologických pacientov. Aj napriek pokrokom v diagnostike a liečbe predstavujú infekčné komplikácie stále závažnú hrozbu pre pacientov s nádorovou chorobou. Správne a včasné rozpoznanie infekcie, poznanie osobitostí priebehu infekcií u onkologicky chorých a adekvátne diagnostické a terapeutické kroky tak môžu zachrániť životy mnohým pacientom.
Od januára 2004 sa činnosť OKF rozšírila o terapeutické monitorovanie hladín
niektorých liečiv (TDM). TDM zaznamenáva rozvoj v posledných dvadsiatich rokoch a súvisí s rozvojom špecifických laboratórnych metód umožňujúcich stanoviť koncentráciu liečiva v biologických tekutinách. Cieľom monitorovania sérových hladín lieku je dosiahnuť optimálne terapeutické koncentrácie lieku, zlepšiť efektivitu liečby a zredukovať možnú toxicitu na minimum. Aby jej využitie bolo skutočným prínosom pre klinika, musia byť splnené viaceré podmienky – správna indikácia TDM, správne načasovanie odberu vzorky, jej spracovanie, použitie vhodnej analytickej metódy, zhodnotenie výsledku a jeho skoré hlásenie. Prvé 2 podmienky zabezpečuje ošetrujúci lekár. Naše oddelenie potom vzorky spracuje a vyhodnotí, výsledky spojené s farmakologickou konzultáciou hlásime telefonicky ešte v deň odberu, aby sa podľa nich mohla liečba prípadne upraviť. Zo skupiny antibiotík (ATB) na oddelení monitorujeme ATB s nefrotoxickým a ototoxickým účinkom, ako sú aminoglykozidy (amikacín, a gentamicín) a vankomycín, z imunosupresívnych látok monitorujeme cyklosporín.
Pracovníci OKF Pracovník: Funkcia: Tel. č.: e-mail:
Doc.MUDr. Andrea Demitrovičová,PhD. primár 02/32249585 ademitro@ousa.sk
Doc. Ing. Margaréta Kačmariková,PhD. lab. pracovník 02/32249585
OKF
87
Odporúčania pre terapeutické monitorovanie aminoglykozidov
Indikácie TDM: – 3.deň liečby: reziduálne a píkové sérové koncentrácie sú odporúčané merať u všetkých
pacientov (okrem výnimiek) – len 3. deň liečby: ak je známa kultivácia a citlivosť a ďalšia liečba nebude trvať dlhšie
ako 4 dni – Týždenné monitorovanie: 1 x týždenne sa hladiny odporúča merať:
– vysoká MIC – pacient sa klinicky nezlepšuje – zmeny v obličkových funkciách – pacient dostáva liečbu viac ako 10 dní
Rutinne sa nevyšetrujú pacienti: s nekomplikovanou infekciou močových ciest, nekomplikovanou apendektómiou pri užívanie AMG v synergii s iným ATB liečení menej ako 72 hod pri dávkovaní raz denne sa reziduálna koncentrácia meria 3. deň a raz týždenne
sa monitoruje, či nedochádza k akumulácii liečiva
Opakované merania - každú 3-4 dávku sa odporúča meraťv nasledujúcich prípadoch: známa alebo predpokladaná obličková insuficiencia novorodenci domáca intravenózna liečba febrilná neutropénia cystická fibróza imunodeficientný stav septický šok vysoká horúčka
Odber sa vykonáva do biochemickej skúmavky v presne stanovenom čase!!!! Reziduálna koncentrácia – krv sa odoberá tesne pred podaním nasledujúcej dávky lieku do biochemickej skúmavky, ktorá sa označí ako reziduálna hladina (alebo „pred podaním“) Vrcholová koncentrácia – krv sa odoberá do biochemickej skúmavky:
a) pri intravenóznom podávaní 30-60 min po skončení i.v. infúzie gentamicínu b) pri intramuskulárnom podávaní - 60-90 min po podaní
Skúmavka sa označí ako vrcholová hladina ( alebo „po podaní“) Odobratú krv treba čo najskôr transportovať do príjmu RIA oddelenia na OUSA
(č.d. 157 v bloku K). Ak nie je možný okamžitý transport, vzorka sa uloží do chladničky, kde môže zostať max 24 hodín.
OKF
88
Odporúčania pre terapeutické monitorovanie vankomycínu
Indikácie TDM Pri normálnych funkciách obličiek a krátkodobej liečbe (do 7 dní) nie je
monitorovanie hladiny nevyhnutné. Sérové koncentrácie vankomycínu sa monitorujú:
– pri dlhodobej liečbe – hemodynamicky nestabilného pacienta – pri nelepšení klinického obrazu napriek cielenej liečbe na základe kultivácií – pri súčasnej liečbe inými nefrotoxickými liečivami – u pacientov s porušenou alebo meniacou sa funkciou obličiek – u pacientov s popáleninami – u hemodialyzovaných pacientov – u novorodencov a detí – u tehotných – u pacientov s nádorovou chorobou – u pacientov so zmeneným distribučným objemom – pri podávaní dennej dávky viac ako 2g.
Odber sa vykonáva do biochemických skúmaviek. Hladina sa stanovuje zo séra pacienta
po ustálení hladiny, t.j. po 3. až 4. podaní . Na zabezpečenie optimálneho dávkovania sa stanovuje reziduálna a vrcholová koncentrácia. Pri kontinuálnom podávaní sa stanovuje jedna hladina, odber sa však nesmie urobiť z toho istého venózneho prístupu, ktorým sa antibiotikum podáva.
Čas odberu:
Reziduálna koncentrácia – krv sa odoberá tesne pred podaním nasledujúcej dávky lieku do biochemickej skúmavky, ktorá sa označí ako reziduálna hladina (alebo „pred podaním“) Vrcholová koncentrácia – krv sa odoberá do biochemickej skúmavky 60 min po skončení i.v. infúzie vankomycínu. Skúmavka sa označí ako vrcholová hladina (alebo „po podaní“).
Odporúčania pre terapeutické monitorovanie cyklosporínu Indikácie TDM:
– transplantačné obdobie: každých 24-48 hodín – po transplantácii 3-6 mesiacov : 2-3x týždenne – u stabilizovaných pacientov po Tx - pravidelné časové intervaly – kontrola imunosupresívnej liečby (vybrané hematologické choroby, endogénna
uveitída, nefrotický syndróm, reumatoidná artritída, atopická dermatitída, psoriáza). Odber – Štandardne sa u pacientov liečených cyklosporínom vyšetruje hladina C0, u transplantovaných pacientov sa v po transplantačnom období odporúča vyšetrovať aj C2. Hladiny cyklosporínu sa stanovujú z plnej krvi. Odber cca 1,5 ml krvi sa uskutočňuje do skúmavky s heparínom alebo EDTA. Skúmavku je nutné po odobratí premiešať, aby sa krv nezrazila a označiť C0 alebo C2. Čas odberu: C0: krv sa odoberá nalačno, 12 hodín po podaní poslednej dávky lieku. C2: krv sa odoberá presne 2 hodiny po podaní lieku. Čas je potrebné dodržať!
OKF
89
Uskladnenie vzorky a transport - označenú skúmavku s odobratou krvou a riadne vypísanú žiadanku je treba čo najskôr transportovať do príjmu RIA oddelenia na OUSA (č.d. 157 v bloku K). Ak nie je možný okamžitý transport, vzorka sa uloží do chladničky, kde môže zostať max 24 hodín do vyšetrenia.
Oddelenie klinickej farmakológie – referenčné hodnoty
Gentamicín / vyšetrenie len po dohode /: Reziduálna koncentrácia – ľahšie infekcie < 1 ug/ml ťažšie infekcie < 2 ug/ml dávkovanie raz denne -< 1 ug/ml Vrcholová koncentrácia – ľahšie infekcie 5-8 ug/ml ťažšie infekcie 8-12 ug/ml Vankomycín Reziduálna koncentrácia- 5-10 (12-15) ug/ml Vrcholová koncentrácia – 20-40 ug/ml Podávanie v kontinuálnej infúzii 15-25 ug/ml Cyklosporín - Optimálne sérové koncentrácie pre C0:
Transplantovaný orgán Optimálne rozpätie (ng/ml) Typ liečby Obličky 150- 225
100-150 do 3 mes. po Tx udržiavacia liečba
Pečeň 225-300 100-150
do 3. mes. po Tx udržiavacia liečba
Srdce 250-350125-175
do 3. mesiacov po Tx udržiavacia liečba
Optimálne sérové koncentrácie pre C2: do 3 mesiacov po Tx: 1400-1800 ng/ml, 3-6 mesiacov po Tx: 1000-1400 ng/ml, 6-12 mesiacov po Tx: 800-1000 ng/ml, udržiavacia liečba: 700-800 ng/ml
OKF
90
Oddelenie lekárskej genetiky – OLG
Oddelenie lekárskej genetiky (OLG) vzniklo na Onkologickom ústave sv. Alžbety v roku 1998 pod vedením RNDr. Evy Weismanovej, CSc. Pôvodne sa oddelenie zameralo na genetické analýzy dedičných nádorových syndrómov ako napr. dedičná forma karcinómu prsníka/vaječníkov, či medulárny karcinóm štítnej žľazy a dôkaz HPV DNA. Počas desiatich rokov existencie sa oddelenie rozrástlo personálne, priestorovo, prístrojovo a najmä množstvom ponúkaných vyšetrení a testov. V súčasnosti na OLG OUSA pracuje jeden lekár, 7 vysokoškolákov/biológov a 6 laborantiek.
Jednotlivé vyšetrenia a analýzy sa uskutočňujú využitím vysoko špecializovaných zariadení, ako napr. 4-kapilárový automatický genetický analyzátor ABI 3130, Real-Time PCR systém ABI 7500 FAST, Lightcycler 480 či sekvenátor novej generácie Junior GS. Z molekulárno-genetických postupov sa využívajú metódy: PCR amplifikácia, priama sekvenácia DNA, „next generation sequencing analýza, MLPA, SNaPshot analýza, qPCR, in vitro prepis RNA, atď..
Kvalita všetkých vyšetrení na OLG OUSA je garantovaná pravidelnou akreditáciou pracoviska v rámci Ústavu laboratórnej medicíny, a to podľa normy ISO 17025, certifikáciou podľa normy ISO 9001 a každoročnými externými kontrolami kvality vyšetrení. Pracovníci OLG
Pracovník: Funkcia: Tel. č.: e-mail: RNDr. Michal Konečný, PhD. vedúci odd. 322 48 574 mkonecny@ousa.skRNDr. Katarína Závodná, PhD. sam. odb. pracovník
zástupca vedúceho odd.322 48 584 kzavodna@ousa.sk
RNDr. Eva Weismanová, CSc. sam. odb. pracovník 322 48 582 eweisman @ousa.skRNDr. Zdena Bartošová, CSc. sam. odb. pracovník 322 48 583 zbartoso@ousa.skMgr. Ján Markus, PhD. sam. odb. pracovník 322 48 572 jmarkus@ousa.skIng. Ľudmila Vavrová,PhD. sam. odb. pracovník 322 48 573 lvavrova@ousa.skRNDr. Miriam Milly, PhD. sam. odb. pracovník 322 48 573 mmilly@ousa.skMUDr. Olívia Hamidová lekár - klinický genetik 322 48 575 ohamidov@ousa.sk Beatrix Jánošová vedúca laborantka 322 48 579, 576 bjanosov@ousa.skIveta Glozneková laborant
zástupca ved. laborantky322 48 578
Mgr. Jaroslava Gregorová laborant 322 48 578 Jana Štohlová laborant 322 48 578 Ružena Kozlová laborant 322 48 576 Mgr. Žofia Szabóová laborant 322 48 578 Adresa pracoviska: Oddelenie lekárskej genetiky, Ústav laboratórnej medicíny, OUSA, Heydukova 10, 812 50 Bratislava
Ambulancia lekárskej genetiky Ambulancia lekárskej genetiky bola založená na Onkologickom ústave sv. Alžbety
v roku 2011. Ambulancia poskytuje pacientom poradenstvo a konzultácie zamerané na dedičné nádorové ochorenia/syndrómy, ktoré sú geneticky podmienené.
Na genetickú konzultáciu pacienta s viacnásobným výskytom nádorových ochorení v rodine, alebo s výskytom nádorového ochorenia v nízkom veku (napr. pod 50 rokov), odporúča lekár prvého kontaktu, príp. lekár špecialista (napr. gynekológ, mamológ, gastroenterológ, chirurg atď.).
OLG
91
Klinický genetik v ambulancii zhodnotí osobnú a rodinnú anamnézu a v prípade ak pacient spĺňa medzinárodné indikačné kritéria žiada molekulárne vyšetrenie DNA. Nasleduje samotná molekulárna analýza v genetickom laboratóriu. Po ukončení analýzy DNA je pacient opäť pozvaný na konzultáciu ku klinickému genetikovi, a tu sa mu interpretuje výsledok molekulárnej analýzy. Úlohou klinického genetika je aj spolupráca s inými odbornými lekármi, ktorí sa starajú o pacientov s predispozíciou k nádorovým ochoreniam, pri zostavovaní preventívnych prehliadok. Ambulancia: MUDr. Olívia Hamidová objednávanie denne od 7:30 - 15:00 na tel č.: +421 2 32 248 575, 76, 74, 72, 73, 82-84
Aktuálne genetické vyšetrenia I. Dedičné syndrómy
1. Dedičná forma karcinómu prsníka/vaječníkov (HBOC, gény BRCA1, BRCA2) 2. Dedičná forma medulárneho karcinómu štítnej žľazy (MEN II, gén RET) 3. Dedičná forma malígneho melanómu (HMM, gén CDKN2A) 4. Vyšetrenie mikrosatelitovej instability pri karcinómoch kolorekta (MSI) 5. Dedičná forma nepolypózneho karcinómu kolorekta (Lynchov syndróm, gény MLH1,
MSH2, MSH6) 6. Dedičná chronická pankreatitída (HCP, gény PRSS1, SPINK1) 7. Dedičný difúzny karcinóm žalúdka (HDGC, gén CDH1) 8. Dedičný angioedém (HAE, gén SERPING1) 9. Dôkaz vysokorizikových (HR) HPV vírusov
II. Predikcia onkologickej liečby – sporadické nádory 10. Analýza kodónov 12 a 13 génu KRAS pri metastatických karcinómoch kolorekta 11. Analýza kodónu 600 génu BRAF pri papilárnych nádoroch štítnej žľazy 12. Analýza mutácií génu EGFR v exónoch 18-21 pri nemalobunkovom karcinóme pľúc 13. Analýza prestavieb génu ALK pri nemalobunkovom karcinóme pľúc 14. Analýza génov IDH1 (kodón 132) a IDH2 (kodón 172) u pacientov s glioblastómom 15. Test na predikciu závažnej až letálnej toxicity na liečbu fluoropyrimidínmi (analýza génu
DPYD) 16. Neinvazívny skríning malignít hrubého čreva z periférnej krvi – vyšetrenie metylácie
génu SEPTÍN9. III. Predikcia onkologickej liečby – génová expresia
17. Expresia génov rezistencie na chemoterapiu (MDR) 18. Predikcia odpovede na liečbu antracyklínmi a inhibítormi topoizomeráz
IV. Onkogynekologické genetické markery 19. Dôkaz vysokorizikových HPV vírusov 20. Dôkaz a typizácia HPV vírusov 21. Dôkaz malígnych prekurzorov pomocou expresie onkogénov E6/E7 HR-HPV a génov
molekulového podpisu 22. Dôkaz cirkulujúcich nádorových buniek v lymfovaskulárnom systéme
Všetky žiadanky na genetické vyšetrenia nájdete na našej web stránke:
http://www.ousa.sk/sk/odborna-verejnost/laboratorna-medicina-v-ousa/oddelenie-lekarskej-genetiky/ziadanky-na-vysetrenia
www.ousa.sk/genetika
OLG
92
I. DEDIČNÉ SYNDRÓMY: Dedičná forma karcinómu prsníka/vaječníkov (HBOC, gény BRCA1, BRCA2)
Dedičná, alebo hereditárna forma karcinómu prsníka a vaječníkov predstavuje okolo 10% zo všetkých diagnostikovaných karcinómov prsníka a vaječníkov. Charakteristickým znakom uvedeného syndrómu je zvýšený výskyt karcinómov prsníka a vaječníkov v rodine a nízky vek nástupu ochorenia (okolo 40-50 rokov).
Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v génoch BRCA1 (24 exónov) a BRCA2 (27 exónov). Mutácie génov BRCA1/2 ovplyvňujú funkciu proteínov, ktoré sú dôležité v bunkových procesoch, ako je napr. oprava poškodenej DNA. Vo väčšine prípadov sa genetické testovanie začína analýzou génu BRCA1. V prípade negatívneho výsledku sa pristupuje k analýze génu BRCA2 a následne k analýze dlhých génových delécií v spomínaných génoch.
Ak sa podarí nájsť zárodočnú mutáciu u pacienta postihnutého nádorovým ochorením, je možné analyzovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu (predispozíciu na ochorenie). Na základe toho je možné vypočítať riziko vzniku spomínaných nádorových ochorení.
Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď.)
odosiela pacienta na genetickú konzultáciu ku klinickému genetikovi 2. na genetickej konzultácii u klinického genetika sa zhodnotí osobná a rodinná anamnéza
pacienta a v prípade ak pacient spĺňa medzinárodné indikačné kritéria indikuje sa molekulárne vyšetrenie DNA
3. molekulárna analýza DNA (génu) 4. genetická konzultácia u klinického genetika, kde lekár interpretuje pacientovi výsledok
molekulárnej analýzy. Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jednej pacientky približne 2 mesiace/1 gén. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 6 mesiacov. Uvedený časový interval sa môže meniť v závislosti od počtu prijatých vzoriek a od použitia metódy sekvenovania novej generácie. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.
OLG
93
Dedičný karcinóm prsníka/vaječníkov (HBOC), Li-Fraumeni syndróm, Familiárny karcinóm prostaty (gén CHEK2)
V rodinách so silnou rodinnou anamnézou, t.j. so zvýšeným výskytom karcinómu prsníka, ovárií, prostaty či osteosarkómov, kde nebola nájdená patologická zárodočná mutácia v géne BRCA1/2 (viď. Dedičná forma karcinómu prsníka/vaječníkov) analyzujeme gén CHEK2.
Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) vo všetkých exónoch génu CHEK2 (14 exónov).
V prípade ak sa podarí nájsť zárodočnú patologickú mutáciu u jedného člena rodiny, väčšinou už postihnutého nádorovým ochorením, je možné detegovať túto mutáciu aj u ostatných príbuzných a jednoznačne určiť, kto ju zdedil, a tak stanoviť riziko vzniku nádorových ochorení. Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď.)
odosiela pacienta na genetickú konzultáciu ku klinickému genetikovi 2. na genetickej konzultácii u klinického genetika sa zhodnotí osobná a rodinná anamnéza
pacienta a v prípade ak pacient spĺňa medzinárodné indikačné kritéria indikuje sa molekulárne vyšetrenie DNA
3. molekulárna analýza DNA (génu) 4. genetická konzultácia u klinického genetika, kde lekár interpretuje pacientovi výsledok
molekulárnej analýzy. Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jednej pacientky trvá približne 2 mesiace/1 gén. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 3 mesiace. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.
OLG
94
Dedičný karcinóm prsníka/vaječníkov (HBOC) – detekcia najčastejších patologických mutácií v génoch BRCA1/2
Uvedené vyšetrenie umožňuje rýchlu a spoľahlivú detekciu najčastejších patologických mutácií v génoch BRCA1/2 vyskytujúcich sa v slovenskej HBOC populácii, pričom dokáže identifikovať až 77% takýchto mutácií. Konkrétne môžeme sledovať prítomnosť 13 rôznych mutácií v géne BRCA1 a 4 v géne BRCA2. Test neposkytuje komplexnú informáciu o všetkých exónoch oboch génov a teda všetkých mutáciách. Vyšetrenie je určené najmä: 1. pre prípady rýchleho skríningu pri urgentnej analýze, a tak môže predchádzať komplexnej
analýze génov 2. pre samoplatcov, t.j. zdravých jedincov bez rodinnej záťaže, ktorý majú záujem o takúto
genetickú analýzu. Upozornenie: V prípade vyšetrenia pre samoplatcov je nutné vyplniť správny typ žiadanky určenej samoplatcom a odoslať vzorku. Po prijatí vzorky v laboratóriu je vystavená faktúra zaslaná vyšetrovanému jedincovi a po jej zaplatení je vykonaný samotný test. Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jednej pacientky približne 1 mesiac. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 1 mesiace. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.
Dedičná forma medulárneho karcinómu štítnej žľazy (MEN 2, gén RET) Mnohopočetná endokrinná neoplázia typu II (MEN2) je zriedkavé dedičné ochorenie
sprevádzané výskytom medulárneho karcinómu štítnej žľazy, feochromocytómov (PHEO) a inými typmi hyperplázií a/alebo neoplázií endokrinných tkanív u jedného pacienta. Rozoznávame sporadickú (náhodne sa vyskytujúcu) a familiárnu formu uvedeného syndrómu. Charakteristickým znakom familiárnej formy je výskyt daného ochorenia v rodine a nízky vek nástupu ochorenia.
Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v géne RET (exóny 8, 10, 11, 13-16), ktorý kóduje tyrozín kinázový receptor. Jeho úloha je v dôležitých bunkových procesoch ako je napr. proliferácia, diferenciácia a bunkový transport. Mutácie v géne RET majú za následok neustálu aktivitu spomínaných procesov v bunkách.
Ak sa podarí nájsť zárodočnú mutáciu u pacienta postihnutého nádorovým ochorením, je možné analyzovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu. Na základe toho je možné vypočítať riziko vzniku spomínaných nádorových ochorení. Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď..)
odosiela pacienta na genetickú konzultáciu ku klinickému genetikovi 2. na genetickej konzultácii u klinického genetika sa zhodnotí osobná a rodinná anamnéza
pacienta a v prípade ak pacient spĺňa medzinárodné indikačné kritéria indikuje sa molekulárne vyšetrenie DNA
3. molekulárna analýza DNA (génu)
OLG
95
4. genetická konzultácia u klinického genetika, kde lekár interpretuje pacientovi výsledok molekulárnej analýzy
Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jedného pacienta trvá približne 1 mesiac. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 2-3 mesiace. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.
Dedičná forma malígneho melanómu (HMM, gén CDKN2A)
Malígny melanóm patrí medzi najagresívnejšie nádorové ochorenia kože. Dedičná, alebo hereditárna forma malígneho melanómu predstavuje okolo 10% zo všetkých diagnostikovaných malígnych melanómov. Charakteristickým znakom uvedeného syndrómu je zvýšený výskyt malígnych melanómov, karcinómov pankreasu a nádorov prsníka v rodine a nízky vek nástupu ochorenia.
Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v géne CDKN2A (exóny 1A, 2, 3, 1B a promótor).
V prípade ak sa podarí nájsť zárodočnú patologickú mutáciu u jedného člena rodiny, väčšinou už postihnutého nádorovým ochorením, je možné detegovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a jednoznačne stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu a stanoviť riziko vzniku spomínaných nádorových ochorení. Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď.)
odosiela pacienta na genetickú konzultáciu ku klinickému genetikovi 2. na genetickej konzultácii u klinického genetika sa zhodnotí osobná a rodinná anamnéza
pacienta a v prípade ak pacient spĺňa medzinárodné indikačné kritéria indikuje sa molekulárne vyšetrenie DNA
3. molekulárna analýza DNA (génu) 4. genetická konzultácia u klinického genetika, kde lekár interpretuje pacientovi výsledok
molekulárnej analýzy. Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jedného pacienta trvá približne 1 mesiac. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 2-3 mesiace. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno.
OLG
96
Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.
Vyšetrenie mikrosatelitovej instability pri karcinóme kolorekta (MSI) Pri kolorektálnych nádoroch okrem sporadických foriem rozoznávame aj dedičné
formy (12-15%), z ktorých najznámejší a najlepšie popísaný je hereditárny nepolypózny karcinóm kolorekta (HNPCC, Lynchov syndróm).
Vyše 90% HNPCC nádorov vykazuje MSI pozitivitu v porovnaní s cca 15% sporadických kolorektálnych nádorov. Pacienti s MSI pozitívnym nálezom by mali absolvovať genetickú konzultáciu u klinického genetika za účelom zhodnotenia osobnej a rodinnej anamnézy. V prípade ak klinický genetik zhodnotí, že pacient spĺňa medzinádorné kritéria na testovanie HNPCC syndrómu indikuje molekulárno-genetické vyšetrenie génov MLH1, MSH2, MSH6 (viď. Dedičná forma nepolypózneho karcinómu kolorekta).
Na Oddelení patológie OUSA sa vykonáva aj imunohistochemická analýza génov
MLH1, MSH2, MSH6, PMS2. Strata expresie niektorého z uvedených proteínov je tiež znakom, že môže ísť o HNPCC.
Indikujúci lekár: Klinický genetik, klinický onkológ, prípadne patológ Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie sa uskutočňuje cca raz za 2-3 týždne, pričom samotná analýza trvá 3-4 pracovné dni Materiál na vyšetrenie, transport: Do prázdnej 2 ml skúmavky narezať približne 30 mg fixovaného tkaniva (parafínového bločku), optimálne 10 ks 10μm rezov. Skúmavka so vzorkou sa označí rodným číslom pacienta, príp. histologickým číslom bločku a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na OLG, OUSA. Ako materiál na vyšetrenie možno prípadne zaslať i celý parafinový blok s daným fixovaným tkanivom, pričom vyšetrený blok následne zašleme spolu s výsledkom analýzy späť žiadajúcemu lekárovi. Pri vyšetrení MSI odporúčame zasielať vzorku fixovaného tkaniva z primárneho nádoru kolorekta s maximálnou infiltráciou tumoru. Odporúčame zaslať sprievodnú informáciu o histologickom náleze príslušnej vzorky.
Rezy fixovaného tkaniva môžu byť uskladnené pri izbovej teplote, t.j. nepodliehajú špeciálnym podmienkam transportu a uskladnenia. V prípade dlhodobého vystavenia materiálu teplote nad 50°C môže dôjsť k znehodnoteniu tkaniva, resp. DNA. Dedičná forma nepolypózneho karcinómu kolorekta (HNPCC, Lynchov syndróm, gény
MLH1, MSH2, MSH6) Pri kolorektálnych nádoroch okrem sporadických foriem rozoznávame aj dedičné
formy (12-15%), z ktorých najznámejší a najlepšie popísaný je hereditárny nepolypózny karcinóm kolorekta (HNPCC, Lynchov syndróm). Charakteristickým znakom uvedeného syndrómu je nízky vek nástupu ochorenia (okolo 45 rokov) a zvýšený výskyt nádorov kolorekta v rodine, prípadne výskyt iných extrakolonických nádorov (adenokarcinómy endometria, žalúdka, karcinómy vaječníkov, močového traktu, tenkého čreva, nádory mozgu a kože).
OLG
97
Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v génoch MLH1 (19 exónov), MSH2 (16 exónov) a MSH6 (10 exónov). Uvedené gény kódujú proteíny, ktoré majú úlohu v oprave DNA. Vo väčšine prípadov sa pri HNPCC suspektnej rodine začína analýzou MSI (mikrosatelitovej instability) z nádorového tkaniva a v prípade pozitivity, alebo v prípade nedostupného nádorového materiálu a pozitívnej rodinnej anamnézy sa pristupuje k analýze génov MLH1, MSH2, MSH6.
V prípade ak sa podarí nájsť zárodočnú patologickú mutáciu u jedného člena rodiny, väčšinou už postihnutého nádorovým ochorením, je možné detegovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a jednoznačne stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu a stanoviť riziko vzniku spomínaných nádorových ochorení. Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď.)
odosiela pacienta na genetickú konzultáciu ku klinickému genetikovi 2. na genetickej konzultácii u klinického genetika sa zhodnotí osobná a rodinná anamnéza
pacienta a v prípade ak pacient spĺňa medzinárodné indikačné kritéria indikuje sa molekulárne vyšetrenie DNA
3. molekulárna analýza DNA (génu) 4. genetická konzultácia u klinického genetika, kde lekár interpretuje pacientovi výsledok
molekulárnej analýzy Indikujúci leká: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jednej pacientky približne 1 mesiace/1 gén. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 2 mesiace. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.
Dedičná forma akútnej/chronickej pankreatitídy Dedičná, alebo hereditárna forma chronickej pankreatitídy predstavuje okolo 10%
zo všetkých diagnostikovaných chronických pankreatitíd. Niektoré formy chronickej pankreatitídy môžu byť asociované so zvýšeným rizikom vzniku karcinómu pankreasu.
Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v génoch PRSS1 (5 exónov) a SPINK1 (4 exóny). Mutácie génu PRSS1 spôsobujú predčasnú aktiváciu trypsinogénu, čo vedie k poškodeniu pankreasu. Gén SPINK1 kóduje proteín, ktorý inhibuje približne 20% aktivity trypsínu v pankrease a jeho mutácie spôsobujú zníženie inhibície.
Ak sa podarí nájsť zárodočnú mutáciu u pacienta postihnutého chronickou pankeatitídou, je možné analyzovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu. Na základe toho je možné vypočítať riziko vzniku spomínaných nádorových ochorení. U pacientov s mutáciu v géne PRSS1 je zvýšené riziko karcinómu pankreasu o 50%.
OLG
98
Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď.)
odosiela pacienta na genetickú konzultáciu ku klinickému genetikovi 2. na genetickej konzultácii u klinického genetika sa zhodnotí osobná a rodinná anamnéza
pacienta a v prípade ak pacient spĺňa medzinárodné indikačné kritéria indikuje sa molekulárne vyšetrenie DNA
3. molekulárna analýza DNA (génu) 4. genetická konzultácia u klinického genetika, kde lekár interpretuje pacientovi výsledok
molekulárnej analýzy Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jednej pacientky približne 1 mesiace/1 gén. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 2 mesiace. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.
Dedičná forma difúzneho karcinómu žalúdka (HDGC, gén CDH1) Dedičná forma difúzneho karcinómu žalúdka sa vyskytuje asi u 1% pacientov
postihnutých karcinómom žalúdka. Napriek tomu, že je to veľmi zriedkavé ochorenie, predstavuje pre nositeľov mutácie závažný problém pre problematickú diagnostiku a skorý nástup (priemerný vek nástupu 38 rokov). Okrem karcinómu žalúdka je tento syndróm charakteristický aj výskytom lobulárneho karcinómu prsníka v rodine.
Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v géne CDH1 (16 exónov). Mutácie v tomto géne ovplyvňujú funkciu proteínu E-cadherín, ktorý je zodpovedný za vzájomnú interakciu buniek. V prípade negatívneho výsledku sa pristupuje k analýze dlhých génových delécií v tomto géne (v prípravnej fáze).
Ak sa podarí nájsť zárodočnú mutáciu u pacienta postihnutého nádorovým ochorením, je možné analyzovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu. Na základe toho je možné vypočítať riziko vzniku spomínaných nádorových ochorení.
Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď.)
odosiela pacienta na genetickú konzultáciu ku klinickému genetikovi 2. na genetickej konzultácii u klinického genetika sa zhodnotí osobná a rodinná anamnéza
pacienta a v prípade ak pacient spĺňa medzinárodné indikačné kritéria indikuje sa molekulárne vyšetrenie DNA
3. molekulárna analýza DNA (génu) 4. genetická konzultácia u klinického genetika, kde lekár interpretuje pacientovi výsledok
molekulárnej analýzy
OLG
99
Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jedného pacienta trvá približne 2 mesiace/1 gén. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 6 mesiacov. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.
Dedičný angioedém (HEA, gén SERPING1) Dedičný angioedém je zriedkavé ochorenie (cca 1:10 000-150 000 obyvateľov), ktoré
sa prejavuje spontánnymi opuchmi kože, hrtana, prípadne tráviaceho systému. Závažným prejavom je hlavne opuch horných dýchacích ciest, ktorý môže spôsobiť asfyxiu a následne ohroziť život pacienta.
Genetickým vyšetrením dokazujeme prítomnosť zmeny (mutácie) v géne SERPING1, ktorý kóduje C1 inhibítor.
Ak sa podarí nájsť zárodočnú mutáciu u pacienta postihnutého nádorovým ochorením, je možné analyzovať mutáciu aj u ostatných príbuzných a stanoviť, kto zdedil/nezdedil mutáciu. Na základe toho je možné vypočítať riziko vzniku spomínaných ochorení.
Postup pri genetickom vyšetrení: 1. lekár prvého kontaktu (všeobecný lekár, gynekológ, mamológ, gastroenterológ, atď.)
odosiela pacienta na genetickú konzultáciu ku klinickému genetikovi 2. na genetickej konzultácii u klinického genetika sa zhodnotí osobná a rodinná anamnéza
pacienta a v prípade ak pacient spĺňa medzinárodné indikačné kritéria indikuje sa molekulárne vyšetrenie DNA
3. molekulárna analýza DNA a genetická konzultácia u klinického genetika, kde lekár interpretuje pacientovi výsledok molekulárnej analýzy
Indikujúci lekár: Klinický genetik Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jedného pacienta trvá približne 2 týždne. Čas od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 1 mesiac. V prípade cieleného vyšetrenia prítomnosti už známej patologickej mutácie v rámci rodiny trvá vyšetrenie približne 1 mesiac. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.
OLG
100
II. PREDIKCIA ONKOLOGICKEJ LIEČBY – SPORADICKÉ KARCINÓMY
Analýza kodónov 12 a 13 génu KRAS pri metastatických karcinómoch kolorekta Dôkaz prítomnosti somatických mutácií v géne KRAS (v kodónoch 12, 13) slúži ako
predikčný marker odpovede na biologickú terapiu, inhibítormi tyrozín kináz u pacientov s metastazujúcim karcinómom hrubého čreva (mCRC). Pacienti s mCRC a mutovaným KRAS génom nereagujú na liečbu pomocou EGFR inhibítorov (Panitumumab - Vectibix, Cetuximab - Erbitux), naopak pacienti s nemutovaným KRAS génom, t.j. wild-type sú vhodní na takúto liečbu. Celkovo sa predpokladá, že približne 40% pacientov s mCRC nesie somatické mutácie v géne KRAS.
Indikujúci lekár: Klinický onkológ, príp. patológ. Vyšetrenie je podmienkou pre liečbu pomocou Cetuximabu a Panitumumabu. Dĺžka vyšetrenia: Vzorky na vyšetrenie sa zbierajú vždy 1 týždeň, pričom samotná analýza trvá 3-4 pracovné dni. Doba od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 5-9 pracovných dní. Materiál na vyšetrenie, transport: Do prázdnej 2 ml skúmavky narezať približne 30 mg fixovaného tkaniva (parafínového bločku), napr. optimálne 10 ks 10 μm rezov do jednej eppendorfky. Skúmavka so vzorkou sa označí rodným číslom pacienta, príp. histologickým číslom bločku a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na OLG ÚLM, OUSA. Prípadne možno zaslať ako materiál na vyšetrenie i celý parafinový blok s daným fixovaným tkanivom, pričom narezanie týchto blokov vyriešime interne a vyšetrený blok následne zašleme spolu s výsledkom analýzy späť žiadajúcemu lekárovi. Pri vyšetrení KRAS odporúčame zasielať vzorku fixovaného tkaniva z primárneho nádoru kolorekta s maximálnou infiltráciou tumoru. Odporúčame zaslať sprievodnú informáciu o histologickom náleze príslušnej vzorky. V prípade zaslania iného typu tkaniva (napr. tukové tkanivo, uzlina, metastáza) nemusia výsledky analýzy kodónov 12, 13 génu KRAS súhlasiť so stavom uvedených mutácií v primárnom tumore.
Rezy fixovaného tkaniva môžu byť uskladnené pri izbovej teplote, t.j. nepodliehajú špeciálnym podmienkam transportu a uskladnenia. Avšak v prípade dlhodobého vystavenia materiálu teplote nad 50°C môže dôjsť k znehodnoteniu tkaniva, resp. DNA.
Analýza kodónu 600 génu BRAF pri papilárnych nádoroch štítnej žľazy Mutačný status v géne BRAF pri papilárnych karcinómoch štítnej žľazy môže slúžiť
ako prognostický marker. Zistilo sa, že jedinci s mutáciou p.V600E v géne BRAF majú agresívnejšie tumory, pre ktoré je typický vznik metastáz, perzistencia choroby, návrat choroby a celkovo zhoršené prežívanie pacientov. Analýza mutácií v géne BRAF, tak predstavuje dôležitú informáciu o predpokladanom priebehu choroby nielen pre samotného pacienta ale aj pre lekára a môže byť užitočná pri voľbe samotnej iniciálnej terapie a pri následnom monitoringu pacienta.
Indikujúci lekár: Endokrinológ, príp. patológ pričom analýza prebieha pooperačne z parafínových bločkov primárneho tumoru. Dĺžka vyšetrenia: Vzorky na vyšetrenie sa zbierajú vždy 1 týždeň, t.j. od pondelka do piatka, pričom samotná analýza trvá 3-4 pracovné dni. Doba od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 5-9 pracovných dní. Materiál na vyšetrenie, transport: Do prázdnej 2 ml skúmavky narezať približne 30 mg fixovaného tkaniva (parafínového bločku), optimálne 10 ks 10 μm rezov. Skúmavka so vzorkou sa označí rodným číslom pacienta, príp. histologickým číslom bločku a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na OLG, OUSA.
OLG
101
Ako materiál na vyšetrenie je možné zaslať celý parafinový blok s daným fixovaným tkanivom, pričom vyšetrený blok následne zašleme spolu s výsledkom analýzy späť žiadajúcemu lekárovi. Pri vyšetrení odporúčame zasielať vzorku fixovaného tkaniva z primárneho nádoru kolorekta s maximálnou infiltráciou tumoru. Odporúčame zaslať sprievodnú informáciu o histologickom náleze príslušnej vzorky.
Rezy fixovaného tkaniva môžu byť uskladnené pri izbovej teplote, t.j. nepodliehajú špeciálnym podmienkam transportu a uskladnenia. V prípade dlhodobého vystavenia materiálu teplote nad 50°C môže dôjsť k znehodnoteniu tkaniva, resp. DNA.
Analýza mutácií v exónoch 18-21 génu EGFR pri nemalobunkovom karcinóme pľúc Prítomnosť mutácií v onkogéne EGFR u pacientov s nemalobunkovým karcinómom
pľúc súvisí s lepšou odpoveďou na inhibítory EGFR. V dôsledku mutácie dochádza k lepšej väzbe malých molekúl k receptoru, čo prináša benefit pacientov s mutovaným EGFR receptorom. V slovenskej populácii sa celkovo nachádza približne 2 600 prípadov karcinómov pľúc ročne, z toho približne 2 000 prípadov pripadá na nemalobunkový karcinóm pľúc. Približne 10% pacientov s nemalobunkovým karcinómom pľúc nesie somatické mutácie v géne EGFR, čiže môžu profitovať z liečby pomocou malých molekúl (napr. Gefitinib).
Indikujúci lekár: Onkológ, pneumológ (bronchoskopista), príp. patológ Dĺžka vyšetrenia: Vzorky na vyšetrenie sa zbierajú vždy 1 týždeň, pričom samotná analýza trvá 3-4 pracovné dni. Doba od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 5-9 pracovných dní. Materiál a transport: Bunkové bronchiálne stery (nátery na sklíčko): Odber materiálu sa uskutočňuje pomocou bronchoskopickej kefky z nádoru počas bronchoskopie, pred odobratím bioptickej vzorky. Po odbere materiálu sa ster rozotrie na cytologické podložné sklíčko. Po nátere sa sklíčka nechajú zaschnúť a následne sa zafixujú 70% etanolom 5 minút. Pre analýzu je vhodné poslať 2-3 nezafarbené zafixované sklíčka. Biopsia: Počas bronchoskopie možno odobrať pomocou bronchoskopiálnych nožničiek natívne tkanivo z miesta nálezu do PBS, alebo fyziologického roztoku, prípadne získanú biopsiu poslať na patológiu, kde dochádza k fixácii materiálu.
Odporúčame zaslať sprievodnú informáciu o cytologickom/histologickom náleze príslušnej vzorky.
Sklíčka sa transportujú na OLG, OUSA bez špeciálnych nárokov na podmienky transportu. Natívne tkanivo v 2 ml skúmavkách sa skladuje a transportuje pri 4°C. Fixované tkanivo alebo rezy fixovaného tkaniva môžu byť uskladnené pri izbovej teplote, t.j. nepodliehajú špeciálnym podmienkam transportu a uskladnenia. Avšak v prípade dlhodobého vystavenia materiálu teplote nad 50°C môže dôjsť k znehodnoteniu tkaniva, resp. DNA.
OLG
102
Analýza prestavieb génu ALK pri nemalobunkovom karcinóme pľúc V slovenskej populácii sa celkovo nachádza približne 2 600 prípadov karcinómov
pľúc ročne, z toho približne 2 000 prípadov pripadá na nemalobunkový karcinóm pľúc. Približne 3-5 % nemalobunkových pľúcnych karcinómov (NSCLC) má prestavbu
v ALK géne (kináza anaplastických lymfómov). ALK gén sa spája s ďalšími génmi, čím sa aktivuje a to ovplyvňuje dôležité bunkové procesy. Pacienti s nemalobunkovým karcinómom pľuc a prestavbou v ALK géne reagujú na terapiu inhibítorom ALK kinázy.
Analýza prestavieb prebieha metódou FISH (fluorescenčná in situ hybridizácia) na Oddelení patológie OUSA. Indikujúci lekár: Onkológ, pneumológ (bronchoskopista), príp. patológ . Dĺžka vyšetrenia: Vzorky na vyšetrenie sa zbierajú vždy 1 týždeň, pričom samotná analýza trvá 3-4 pracovné dni. Doba od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 5-9 pracovných dní. Materiál a transport: Biopsia: Počas bronchoskopie možno odobrať pomocou bronchoskopiálnych nožničiek natívne tkanivo z miesta nálezu do PBS, alebo fyziologického roztoku, prípadne získanú biopsiu poslať na patológiu, kde dochádza k fixácii materiálu. Odporúčame zaslať sprievodnú informáciu o histologickom náleze príslušnej vzorky. Fixované tkanivo alebo rezy fixovaného tkaniva môžu byť uskladnené pri izbovej teplote, t.j. nepodliehajú špeciálnym podmienkam transportu a uskladnenia. Avšak v prípade dlhodobého vystavenia materiálu teplote nad 50°C môže dôjsť k znehodnoteniu tkaniva, resp. DNA.
Analýza génov IDH1 (kodón 132) a IDH2 (kodón 172) u pacientov s glioblastómom Gény IDH1 a IDH2 kódujú proteíny, ktoré sa podieľajú na oprave poškodení v bunke.
Mutácie v týchto génoch sa často nachádzajú v nádoroch mozgu, najmä glioblastómoch. Špecifické mutácie sú u tohto typu nádorov dobrým prognostickým markerom. Pacienti, ktorí nesú mutáciu majú výrazne dlhšie prežívanie ako pacienti bez mutácie. Informácia o prítomnosti mutácií v IDH1/2 je dôležitá aj pri diferenciálnej diagnostike mozgových nádorov.
Mutácie môžu postihovať kodón 132 v géne IDH1 a 172 v géne IDH2. V slovenskej populácii je ročne zachytených približne 300 prípadov glioblastómov. Indikujúci lekár: Klinický onkológ, príp. patológ. Dĺžka vyšetrenia: Vzorky na vyšetrenie sa zbierajú vždy 1 týždeň, pričom samotná analýza trvá 3-4 pracovné dni. Doba od príjmu vzorky po ukončenie analýzy je približne 5-9 pracovných dní. Materiál na vyšetrenie, transport: Do prázdnej 2 ml skúmavky narezať približne 30 mg fixovaného tkaniva (parafínového bločku), optimálne 10 ks 10 μm rezov. Skúmavka so vzorkou sa označí rodným číslom pacienta, príp. histologickým číslom bločku a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na OLG, OUSA. Ako materiál na vyšetrenie možno prípadne zaslať i celý parafinový blok s daným fixovaným tkanivom, pričom vyšetrený blok následne zašleme spolu s výsledkom analýzy späť žiadajúcemu lekárovi. Pri vyšetrení odporúčame zasielať vzorku fixovaného tkaniva z primárneho nádoru kolorekta s maximálnou infiltráciou tumoru. Odporúčame zaslať sprievodnú informáciu o histologickom náleze príslušnej vzorky.
Rezy fixovaného tkaniva môžu byť uskladnené pri izbovej teplote, t.j. nepodliehajú špeciálnym podmienkam transportu a uskladnenia. V prípade dlhodobého vystavenia materiálu teplote nad 50°C môže dôjsť k znehodnoteniu tkaniva, resp. DNA.
OLG
103
Test na predikciu závažnej až letálnej toxicity na fluoropyrimidíny (analýza génu DPYD)
Približne u 16% onkologických pacientov sa vytvorí po podaní chemoterapeutických režimov obsahujúcich fluoropyrimidíny (5-FU) a jeho orálny prekurzor kapecitabín (napr. v režimoch Xeloda, Xelox, FUFA, FOLFOX, FOLFIRI, FAM, FAMTX, ELF, atď..) toxicita stupňa GIII-IV, ktorá môže v niektorých prípadoch končiť smrťou. Dôležitú úlohu pri vývoji takejto toxicity zohráva gén DPYD. U pacientov s chýbajúcou funkciou DPD enzýmu je mortalita takmer 100%, pričom smrť môže nastať po podaní jednej dávky fluoropyrimidínu. Výsledok testu selektuje: 1. pacientov, u ktorých by sa s vysokou pravdepodobnosťou vyskytla letálna reakcia na liečbu fluoropyrimidínmi 2. pacientov, ktorým je postačujúce znížiť dávku fluoropyrimidínu na 50% pri zachovaní terapeutickej dávky. Indikujúci leká: Onkológ, klinický genetik pred zahájením liečby fluoropyrimidínmi. Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie vzorky DNA jedného pacienta trvá približne 7-10 dní. Materiál na vyšetrenie, transport: Do skúmavky typu Vacutainer s EDTA (ružový vrchnák, ako na krvný obraz) sa odoberú 2 ml periférnej krvi. Vzorka sa následne označí menom, rokom narodenia pacienta a spolu s riadne vyplnenou žiadankou sa zašle na adresu OLG OUSA. Odber nemusí byť realizovaný nalačno. Pri vzorkách určených na DNA analýzu sa periférna krv môže bez zmeny kvality DNA transportovať 1-2 dni, príp. aj poštou. Vzorka musí byť dostatočne zabezpečená proti poškodeniu, resp. vyliatiu a znehodnoteniu. V prípade zmrazenia vzorky periférnej krvi sa vzorka následne skladuje a transportuje výlučne zmrazená pri -15°C v mraziacom boxe až do izolácie DNA.
Neinvazívny skríning malignít hrubého čreva z periférnej krvi – vyšetrenie metylácie génu SEPTÍN 9
Nádory kolorekta (CRC) patria medzi najčastejšie nádorové ochorenia na Slovensku. Preventívne kolonoskopické vyšetrenia umožňujú odhaliť nádory CRC v skorom štádiu, ale „ochota“ ľudí podstúpiť kolonoskopiu je pomerne nízka.
Gén SEPTÍN9 kóduje proteín, ktorý má úlohu pri bunkovom delení a funguje ako tumor supresor. V CRC je gén SEPTÍN9 inaktivovaný metyláciou promótora. Metylovaný promótor je možné detegovať v nádorovej DNA izolovanej z krvnej plazmy. Jedná sa o alternatívu skríningu na skorú detekciu asymptomatických nádorov hrubého čreva z periférnej krvi. Prítomnosť metylácie génu SEPT9 je markerom suspektnej kolorektálnej malignity.
- vyšetrenie je primárne určené pre zdravých jedincov a môže v tomto prípade nahradiť kolonoskopické vyšetrenie, a to za priamu platbu 220 Eur.
- V prípade negatívneho výsledku je možné s takmer 90% pravdepodobnosťou vylúčiť prítomnosť kolorektálnej malignity.
- V prípade pozitívneho výsledku vyšetrenia absolvuje pacient následne kolonoskopické vyšetrenie.
Metóda sa vyznačuje špecificitou 88% a senzitivitou 67%. Výhodou testovania je, že prebieha z periférnej krvi, a získanie materiálu je neinvazívne. Vyšetrenie nie je vhodné pre osoby so zvýšeným rizikom CRC (napr. nositeľov dedičnej predispozície pri HNPCC) a pacientov, ktorým bol v minulosti odstránený polyp alebo mali CRC nález.
OLG
104
Indikácia: Osoby, u ktorých je indikovaný preventívny skríning CRC. Dĺžka vyšetrenia: Približne 7-14 pracovných dní. Materiál na vyšetrenie, transport: 10 ml periférnej krvi v EDTA (skúmavky s ružovým vrchnákom), krv musí byť transportovaná a dodaná na OLG čerstvá, max. do 24 hodín pri skladovaní na 4°C. Upozornenie: Aktuálne nie je vyšetrenie hradené zdravotnými poisťovňami. V prípade vyšetrenia pre samoplatcov je nutné vyplniť správny typ žiadanky určenej samoplatcom a odoslať vzorku. Po prijatí vzorky v laboratóriu je vystavená faktúra zaslaná vyšetrovanému jedincovi a po jej zaplatení je vykonaný samotný test.
III. PREDIKCIA ONKOLOGICKEJ LIEČBY – GÉNOVÁ EXPRESIA, SPORADICKÉ NÁDORY:
Dôkaz patologickej expresie génov zodpovedných za vývoj rezistencie na
chemoterapiu (MDR) Jednou z najväčších komplikácií pri liečbe onkologického pacienta je rezistencia
na anti-tumorovú liečbu. Medzi najčastejšie príčiny rezistencie patrí patologicky zvýšená expresia génov patriacich do rodiny ABC a SLC transportérov. ABC transportéry exportujú anti-tumorové látky z bunky von, čo zvyšuje toxicitu pre organizmus a zároveň zvyšuje riziko recidívy choroby a pod. Informácia o type nadexprimovaného ABC transportéra/transportérov dovolí lekárovi vybrať také liečivá, ktoré nie sú vylučované z bunky von, a preto pri liečbe bude možné očakávať benefit pre pacienta. Kedy indikovať dôkaz liekovej rezistencie: 1. v čase prvej a ďalšej recidívy ochorenia 2. v prípade dôkazu MTS v LU a na vzdialených miestach Použitie testu je určené na nasledujúce účely:
1. Dôkaz rizika vývoja rezistencie na určitý typ chemoterapie 2. Dôkaz rizika návratu choroby 3. Sledovanie efektívnosti chemoterapie 4. Umožňuje výber vhodnejšieho typu chemoterapie v prípade možnej voľby medzi
rôznymi typmi terapeutík Indikujúci lekár: Onkológ, hematoonkológ. Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie trvá približne 1-2 týždne od prevzatia vzorky. Odber materiálu a transport: 1. v prípade hematopoetických malignít sa odoberá cca 10 ml periférnej krvi alebo časť kostnej
drene do roztoku EDTA 2. v prípade pokročilého ochorenia s MTS v LU a na vzdialených miestach sa odoberá 15 ml
periférnej krvi do roztoku EDTA (dôkaz liekovej rezistencie v cirkulujúcich nádorových bunkách)
3. tkanivo z tumoru a paralelne časť zdravého tkaniva sa odoberá do ochranného roztoku RNAlater.
OLG
105
Predikcia odpovede na liečbu antracyklínmi a inhibítormi topoizomeráz Kamptotecíny (inhibítory topoizomerázy 1) sa viažu na komplex TOP1-DNA,
čo vedie k bunkovej smrti. Čím je vyšší počet komplexov TOP1-DNA, tým je liečba kamptotecínmi účinnejšia. Zvýšený počet komplexov TOP1-DNA súvisí z nadexpresiou génu pre topoizomerázu 1. Ak je expresia génu pre TOP1 v nádorových bunkách na úrovni zdravých buniek, potom nie je možné očakávať inhibičný účinok liečby a ani benefit pre pacienta. V prípade topoizomerázy 2A a 2B (TOP2A a TOP2B) sa zistilo, že čím je vyššia expresia génov pre TOP2A a TOP2B, tým je efekt liečby vyšší a možno očakávať benefit pre pacienta.
Pri predikcii odpovede na anti-topoizomerázovú liečbu je potrebné sledovať aj expresiu génov pre liekovú rezistenciu, pretože kamptotecíny, epipodofilotoxíny ako aj antracyklíny sú ich substrátom, môžu byť preto z bunky exportované von a liečba nebude optimálna (viď. Sledovanie liekovej rezistencie).
Kedy indikovať analýzu expresie topoizomeráz? Pred podaním liečby založenej na kampotecínoch, epipodofilotoxínoch alebo antracyklínoch. Indikujúci lekár: Onkológ, hematoonkológ. Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie trvá približne 1-2 týždne od prevzatia vzorky. Odber materiálu a transport: 1. v prípade hematopoetických malignít sa odoberá cca 10 ml periférnej krvi alebo časť kostnej
drene do roztoku EDTA 2. v prípade pokročilého ochorenia s MTS v LU a na vzdialených miestach sa odoberá 15 ml
periférnej krvi do roztoku EDTA (dôkaz liekovej rezistencie v cirkulujúcich nádorových bunkách)
3. tkanivo z tumoru a paralelne časť zdravého tkaniva sa odoberá do ochranného roztoku RNAlater.
OLG
106
IV. ONKOGYNEKOLOGICKÉ GENETICKÉ MARKERY:
Dôkaz vysokorizikových HPV vírusov
Karcinóm krčka maternice je jedným z najčastejších nádorových ochorení u žien. V prevažnej väčšine toto ochorenie spôsobujú niektoré typy vírusu ľudských papilomavírusov (HPV). HPV je bežný vírus, ktorý infikuje ženy aj mužov. Z viac ako 100 známych genotypov HPV vírusov je s karcinómom krčka maternice asociovaných doposiaľ 14, nazývaných ako vysoko rizikové (high risk) HR-HPV genotypy.
cobas® 4800 HPV Test: kvalitatívny test na použitie in vitro na detekciu ľudského papilomavírusu v steroch z exocervixu. Test využíva amplifikáciu cieľovej DNA pomocou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) na detekciu všetkých 14 známych vysokorizikových (HR) typov HPV v jednej analýze. Test špecificky identifikuje HPV16 a HPV18, a súčasne deteguje ostatné vysokorizikové typy (31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 a 68) na klinicky merateľných stupňoch infekcie. cobas® 4800 HPV test sa používa:
Na detekciu HR-HPV: HP16/18/31/33/35/39/45/51/52/56/58/59/66/68 pri ktorých bolo dokázané, že sú primárnym príčinným faktorom pre vznik rakoviny krčka maternice.
Ako test pre pacientky so zhoršeným cytologickým nálezom alebo
s cervikánym ochorením.
Na skríning u pacientok s ASC-US (Atypical squamous cells of undetermined significance = atypickými šupinkovitými bunkami neurčeného významu) výsledkami pap testu pre určenie potreby referencie ku kolposkopii.
U žien vo veku nad 30 rokov môže byť test použitý s pap testom na súčasný skríning a odhad prítomnosti alebo neprítomnosti vysokorizikových typov HPV. Táto informácia, spolu s lekárskym ohodnotením cytologického stavu, ostatných rizikových faktorov a profesionálnych postupov môže byť súčasťou manažmentu pacientky.
U žien vo veku nad 30 rokov môže byť test použitý na stanovenie prítomnosti alebo neprítomnosti HPV genotypov 16 a 18. Táto informácia, spolu s lekárskym ohodnotením cytologického stavu, ostatných rizikových faktorov a profesionálnych postupov môže byť súčasťou manažmentu pacientky.
Ako skríningový test všeobecnej populácie.
Cervikálne vzorky, ktoré majú byť testované metódou cobas® 4800 HPV testu musia spĺňať nasledujúce požiadavky:
- vzorky bunkovej suspenzie z krčka maternice v roztoku PreservCyt® (ThinPrep system, Hologic) odoberané s použitím kefky
- vzorky bunkovej suspenzie z krčka maternice v roztoku cobas® PCR Cell Collection Media (Roche) odoberané s použitím kefky
OLG
107
Indikujúci lekár: Gynekológ, onko-gynekológ, urológ Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie HR-HPV trvá približne 1-2 týždne. Materiál na vyšetrenie, transport: Bunkový ster z exocervixu sa odoberá do odberových médií PreservCyt ® alebo cobas® PCR Cell Collection Media pomocou dodávanej kefky, ktorú je potrebné dôkladne vypláchnuť v odberovom médiu aj niekoľkonásobným pritlačením o dno odberovej skúmavky. Vzorky je možné skladovať a transportovať pri teplote 2-30°C a sú stabilné maximálne 6 mesiacov od odberu. O zaslanie skúmavok na vyšetrenie HR-HPV metódou a o zabezpečenie transporu je možné požiadať na OLG OUSA na t. č. 02/32248576.
Dôkaz a typizácia vysokorizikových HPV vírusov Karcinóm krčku maternice je jedným z najčastejších nádorových ochorení u žien.
V prevažnej väčšine toto ochorenie spôsobujú niektoré typy vírusu ľudských papilomavírusov (HPV). HPV je bežný vírus, ktorý infikuje ženy aj mužov. S karcinómom krčka maternice je asociovaných len niekoľko typov HPV vírusov, nazývaných ako vysoko rizikové (high risk) HR-HPV.
Genotypizácia HPV je založená na PCR amplifikácii a je zameraná na stanovenie presného genotypu onkogénnych typov HPV (tzv. HR-HPV) a vírusov asociovaných s vývojom kondylómov a papilómov bez onkogénneho rizika (tzv. LR-HPV). Metódou genotypizácie HPV dokazujeme:
- HR-HPV 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 66, 68 - LR-HPV 6 a 11
Použitie testu je určené na nasledujúce účely: 1. prítomnosť konkrétneho typu HPV infekcie z rôzneho typu materiálu. 2. perzistenciu infekcie rovnakým typom HR-HPV 3. prítomnosť viacerých typov HPV u jednej pacientky 4. prítomnosť minimálnej reziduálnej infekcie po ablatívnom zákroku na krčku 5. prítomnosť HR-HPV 16 a 18 a LR-HPV 6 a 11 pred plánovanou vakcináciou 6. vyšetrenie je možné uskutočniť aj pre samoplatcov
Indikujúci lekár: Gynekológ, gynekológ-onkológ, dermatológ, otolaryngológ, urológ, chirurg-stomatológ, atď.. Dĺžka vyšetrenia: Genotypizácia HPV trvá približne 1-2 týždne od prevzatia vzorky. Odber materiálu a transport: Odber materiálu pre genotypizáciu HPV sa robí do sterilných skúmavok s vrchnákom so závitom. Skúmavky s roztokom PBS sa do použitia uchovávajú v chladničke. Po odbere materiálu je možné skúmavky krátkodobo (max. 1 deň) uchovávať v chladničke. Ak nie je zabezpečený denný transport vzorky, potom je potrebné vzorky zmraziť do doby transportu aspoň na cca -16°C. Skúmavky s označením genotyp poskytuje OLG OUSA, informácie na telefóne 02/32248576.
Spolu s materiálom je potrebné zaslať aj vyplnenú žiadanku s vyznačením požadovaného vyšetrenia. Pre genotypizáciu HPV je vhodné poznať aktuálny cytologický/histologický nález pre lepšiu klinickú interpretáciu výsledkov genotypizácie.
OLG
108
Dôkaz malígnych prekurzorov pomocou expresie onkogénov E6/E7 HR-HPV a molekulového podpisu
Vírusová DNA sa za určitých okolností môže stať súčasťou bunkového genómu. Takto integrovaný HR-HPV vírus ovplyvňuje bunkový cyklus, čo môže viesť až k malígnej transformácii bunky. Dôkaz integrovaného HPV genómu, ktorý je sprevádzaný expresiou vírusových onkogénov E6/E7, je možné považovať za genetický marker včasnej neoplastickej transformácie bunky a progresie k CIN vyšších stupňov.
V rámci uvedeného testu zisťujeme aj expresiu génov, ktoré majú úlohu v proliferácii bunky, tzv. gény molekulového podpisu (CDKN2A/p16, CDKN1/p21, KI67, TOP2A). Zvýšená expresia uvedených génov súvisí s transformáciou buniek a možno ju považovať za malígne prekurzory karcinómu.
Indikujúci lekár: Gynekológ, gynekológ-onkológ. Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie trvá približne 1-2 týždne od prevzatia vzorky. Použitie testu je určené na nasledujúce účely:
1. Odhalenie skrytých cervikálnych intraepiteliálnych neoplázií vyšších stupňov (CIN II-III až CIS) u pacientok s perzistujúcim OC nálezom H SIL, prípadne L SIL (ak sa vyskytuje dlhšie ako 24 mesiacov).
2. Odhalenie prítomnosti minimálnej reziduálnej choroby (MRCH) po ablatívnom zákroku.
3. Odhalenie prítomnosti viacerých klonov HR-HPV.
Odber materiálu a transport: Stery z exocervixu sa odoberajú paralelne s onko-cytologickým odberom. Bunky sa eluujú do roztoku RNAlater na ochranu RNA v špeciálnych skúmavkách. Materiál sa do doby transportu uchováva v chladničke alebo mrazničke. Skúmavky s označením „Expresia“ poskytuje OLG OUSA, informácie na telefóne 02/322 485 76. Spolu s materiálom je potrebné zaslať aj vyplnenú žiadanku s vyznačením požadovaného vyšetrenia. Pre dôkaz skrytých CIN vyšších stupňov je potrebné poznať aktuálny cytologický/histologický nález pre lepšiu interpretáciu výsledkov.
OLG
109
Dôkaz cirkulujúcich nádorových buniek (CTC) u pacientok s karcinómom krčka maternice v lymfovaskulárnom systéme
Proces metastázovania karcinómu krčka maternice sprevádza proces uvoľňovania nádorových buniek z primárneho tumoru a cirkulácia nádorových buniek (CTC) v periférnej krvi (PK) pacientky. V prípade generalizácie nádorovej choroby je možné v cca 7,5-10 ml PK dokázať desiatky až tisícky CTC. U zdravého človeka je dôkaz cirkulujúcich epiteloidných buniek sporadický.
Dôkaz genómu HR-HPV je jedinečným genetickým markerom na rozlíšenie CTC z karcinómu krčka maternice od zdravých buniek, ktoré neobsahujú genóm HR-HPV v PK. Detekcia CTC sa uskutočňuje pomocou genotypizácie HR-HPV v imunomagneticky zahustených epiteloidných bunkách s následným potvrdením viability nádorových buniek pomocou expresie onkogénov E6/E7 HR-HPV. Indikujúci lekár: Gynekológ, onkológ. Dĺžka vyšetrenia: Vyšetrenie trvá približne 1 týždeň od prevzatia vzorky. Použitie testu je určené na nasledujúce účely:
1. detekcia CTC na zachytenie generalizácie nádorovej choroby 2. hodnotenie efektívnosti terapie 3. odhalenie možnej rekurencii nádorovej choroby 4. odhalenie možnej rezistencie na terapiu
Odber materiálu a transport: Odber cca 8 ml PK sa robí do jednorázových skúmavok s EDTA (ružový vrchnák, ako pre krvný obraz). PK sa v deň odberu musí transportovať na naše OLG OUSA čerstvá, materiál sa nesmie zmraziť. Spolu s materiálom je potrebné zaslať aj vyplnenú žiadanku s vyznačením požadovaného vyšetrenia. Vyšetrenie je potrebné vopred telefonicky dohodnúť. Pre interpretáciu výsledkov je potrebné poznať aktuálny klinický nález, prípadne aj hodnoty sérových markerov SCCA a CA125.
OLG
Vec: Legislatívne usmernenie k preventívnym zdravotným prehliadkam
Vážený pán doktor/ Vážená pani doktorka,
pre zlepšenie našej vzájomnej spolupráce a vzhľadom k tomu, že zdravotné poisťovne určili pri preplácaní zdravotníckych výkonov isté indikačné obmedzenia, by sme Vás radi informovali, ktoré laboratórne vyšetrenia na Ústave laboratórnej medicíny SZU a OUSA je možné žiadať pri preventívnej starostlivosti (dg. Z00, Z34, Z40, Z41). Zdravotné poisťovne pravidelne kontrolujú laboratórne vyšetrenia indikované pri preventívnych prehliadkach a uhrádzajú len parametre podľa zákona č. 577/2004 Z.z. – zákon o rozsahu zdravotnej starostlivosti uhrádzanej na základe verejného zdravotného poistenia v znení neskorších predpisov určuje náplň preventívnych prehliadok z klinického hľadiska a aj z hľadiska rozsahu laboratórnych vyšetrení.
Preto Vás žiadame, aby ste venovali pozornosť správnemu vypĺňaniu diagnózy, ak si žiadate aj iné, ako sú nižšie uvedené vyšetrenia.
Pre informáciu Vám uvádzame prehľad laboratórnych výkonov podľa odborností, ktoré sú súčasťou preventívnych prehliadok.
Onkologický ústav sv. Alžbety, s.r.o., Heydukova 10, 812 50 Bratislava
111
Preventívna starostlivosť o dorast a dospelých Názov výkonu:
1. Odber kapilárnej krvi 2. Odber venóznej krvi (otvorený aj uzatvorený odberový systém) 3. Kreatinín (PHOT, ENZ)) 4. Kreatinin v kapilárnej krvi (REP) 5. Močový sediment (semikvantitatívne) 6. Základné patologické súčasti moču (nekompletný dôkaz) 7. Okultné krvácanie v stolici INDIKAČNÉ OBMEDZENIE: u poistencov starších
ako 50 rokov a u poistencov s pozitívnou rodinnou anamnézou karcinómu hrubého čreva a konečníka
8. Glukóza (ENZ, ECH) 9. Glukóza v kapilárnej krvi (REP) 10. Cholesterol celkový INDIKAČNÉ OBMEDZENIE: u poistencov, ktorí v danom
kalendárnom roku nadobudli vek 17 alebo 18, resp. 40 alebo 41 rokov 11. Cholesterol celkový v kapilárnej krvi (REP) INDIKAČNÉ OBMEDZENIE:
u poistencov, ktorí v danom kalendárnom roku nadobudli vek 17 alebo 18, resp. 40 alebo 41 rokov
12. Triacylglyceroly INDIKAČNÉ OBMEDZENIE: u poistencov, ktorí v danom kalendárnom roku nadobudli vek 17 alebo 18, resp. 40 alebo 41 rokov
13. Triacylglyceroly v kapilárnej krvi (REP) INDIKAČNÉ OBMEDZENIE: u poistencov, ktorí v danom kalendárnom roku nadobudli vek 17 alebo 18, resp. 40 alebo 41 rokov
14. Erytrocyty – počet (MICC) 15. Hemoglobín (PHOT) 16. Hemogram 5 parametrový 17. Leukocyty – počet (MICC) 18. Sedimentácia erytrocytov – FW 19. Trombocyty – počet (MICC)
112
Preventívna gynekologická prehliadka Názov výkonu:
1. Tumor marker Ca 125 INDIKAČNÉ OBMEDZENIA: U žien s pozitívnou mutáciou BRCA1 génu raz za 6 mesiacov vo veku do 30 rokov, u žien s pozitívnou rodinnou anamnézou karcinómu ovária raz za rok vo veku od 35 rokov
Preventívna starostlivosť v materstve Názov výkonu:
1. Odber venóznej krvi (otvorený aj uzatvorený odberový systém) 2. Močový sediment (semikvantitatívne) 3. Základné patologické súčasti moču (kompletný dôkaz) 4. Rubeola, protilátky triedy IgG (IMA) 5. Rubeola, protilátky triedy IgM (IMA) 6. Glukóza (ENZ, ECH) 7. Glukóza v kapilárnej krvi (REP) 8. Alfa-fetoproteín v sére 9. Alfa-fetoproteín v plodovej vode 10. Bilirubinoidy v plodovej vode (SPH) 11. Choriogonadotropný hormón 12. L/S pomer v plodovej vode 13. Zrelosť pľúc plodu z plodovej vody 14. Hemogram 5 parametrový 15. Hemogram 8 parametrový 16. Sedimentácia erytrocytov – FW 17. AB0 antigény krvných skupín kvantitatívne (MICC) 18. Rh-antigény (AGL) 19. HBsAg antigén (EIA) 20. Protilátky proti HIV 1+2 (EIA) 21. Protilátky proti Treponema pallidum (HA) 22. Kultivačné vyšetrenie moču kvantitatívne (CULT) 23. HBsAb – jednotlivo (EIA) 24. HBsAb – skupinovo (EIA) 25. HBsAg – kvalitatívny rýchlotest (EIA) 26. HIV protilátky – kvalitatívne (EIA ) 27. HIV protilátky – kvalitatívne (WB) 28. HIV protilátky – kvalitatívny rýchlotest (EIA) 29. HIV protilátky – kvantitatívne (WB) 30. Toxoplasma gondii IgG avidita (EIA) 31. Toxoplasma gondii – protilátky (CFR) 32. Toxoplasma gondii – protilátky (IF) 33. Toxoplasma gondii – protilátky kvalitatívne (LTX) 34. Toxoplasma gondii – protilátky semikvantitatívne (LTX) 35. Toxoplasma gondii IgA (EIA) 36. Toxoplasma gondii IgG (EIA) 37. Toxoplazma gondii IgM (EIA)
113
Preventívna urologická prehliadka Názov výkonu:
1. Odber venóznej krvi (otvorený aj otvorený odberový systém) 2. Odber kapilárnej krvi 3. Kreatinín (PHOT) 4. Kreatinín (ENZ) 5. Kreatinín v kapilárnej krvi (REP) 6. Základné patologické súčasti moču (nekompletný dôkaz) 7. Močový sediment (semikvantitatívne) 8. Prostatický špecifický antigén 9. Prostatický špecifický antigén voľný 10. Sedimentácia erytrocytov – FW
V prípade otázok nás prosím neváhajte kontaktovať
Kontakt:
Oddelenie manažérstva kvality a marketingu
Onkologický ústav sv. Alžbety, s.r.o. Heydukova 10
812 50 Bratislava
email: marketing@ousa.sk
tel: + 421 2 3224 8413 + 421 917 200 225 + 421 918 389 018
top related