astımlı annelerden doğan yavru farelerin akciğerlerindeki histopatolojik değişiklikler

Astımlı Annelerden Doğan Yavru Farelerin Akciğerlerindeki Histopatolojik Değişiklikler

Tuba Tuncel1, Meral Karaman2, Pınar Uysal1, Müge Kiray3, Alper H. Bağrıyanık3, Osman Yılmaz2, Nevin Uzuner1, Özkan Karaman1

1Dokuz Eylül Üniversitesi Hastanesi, Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları ABD, Çocuk Allerji BD

2Dokuz Eylül Üniversitesi Hastanesi, Deney Hayvanlarının Sağlık Bilimlerinde Kullanımı ABD, Multidisipliner Laboratuvarları

3Dokuz Eylül Üniversitesi Hastanesi, Histoloji ve Embriyoloji ABD

Hiçbir araştırıcının herhangi bir çıkar çatışması

bulunmamaktadır.

GirişAstım tüm dünyada önemli bir

morbiditeve mortalite nedenidir ve özelliklegelişmekte olan ülkelerde ve çocuklukçağında görülme sıklığı giderekartmaktadır.

• Astım patogenezi komplekstir ve hem genetik hem de çevresel faktörler ile ilişkilidir.

• Yapılan çalışmalarda özellikle annenin astım olmasının çocukta astım gelişimi açısından risk faktörü olduğu gösterilmiştir.

• Bu etkinin mekanizmaları ve ayrıntıları henüz açıklanamamıştır.

• Bu mekanizmaların anlaşılması astım gelişiminin engellenmesi ve doğal gidişin değiştirilebilmesi açısından önemlidir.

Çalışmanın Amacı Astımlı annelerden doğan yavru

farelerinakciğerlerinde olan histolojikdeğişiklikleri, bunların geçici olupolmadığını ve annenin gebelik

sırasındaaldığı tedaviden etkilenipetkilenmediğini değerlendirmektir.

Materyal Metod:• Anne fareler ve bu

anne farelerden doğan yavru fareler olmak üzere toplam 63 adet BALB/c fare çalışmaya alındı.

• Tüm işlemler için etik kurul kararı alındı.

Anne fareler;Grup I: (kontrol grubu) %0,9 NaCl uygulandı.Grup IV: (astım grubu) Ovaalbumin ile duyarlaştırılarak astım modelioluşturuldu.Grup VII: (tedavi verilen astım grubu )Ovaalbumin ile duyarlaştırılarak astım modelioluşturuldu ve çalışmanın son haftasında 1

mg/kgdexametazon tedavisi uygulandı.Tüm fareler çalışmanın son dört haftasındasağlıklı erkek fareler ile çiftleştirildi.

Astım modeli oluşturulmasının şematik görünümü

Çiftleştirme

deksametazon

Yavru fareler;• Kontrol grubu annelerden doğan fareler Grup II (Grup I’deki annelerin bir günlük

yavruları), Grup III (Grup I’deki annelerin 6. haftalık

yavruları), • Astım oluşturulan tedavi verilmeyen

annelerden doğan farelerGrup V (Grup IV’deki farelerin bir günlük

yavruları), Grup VI (Grup IV’deki farelerin altı haftalık

yavruları),• Astım oluşturulan ve tedavi verilen

annelerden doğan farelerGrup VIII (Grup VII’deki farelerin bir günlük

yavruları), Grup IX (Grup VII’deki farelerin altı haftalık

yavruları).

• Yavru fareler ve anneleri belirtilen günlerde sakrifiye edilerek akciğer histolojileri ışık ve elektron mikroskopi ile incelendi.

Grup II (kontrol)(Ort±SE)

Grup V(Astımlı anne)Ort±SE

Grup VIIITedavi alan anne)(Ort±SE)

subepiteliyal düz kas kalınlığı, µm

6,688 ± 0,46 10,845±1,30*

6,823 ± 0,54#

epitel yüksekliği, µm

13,102 ±0,91

24,784±0,95*

17,108±1,73#

goblet hücre sayısı, 100 µm

0,776 ± 0,07 1,474 ± 0,19

0,747 ± 0,16

mast hücre sayısı, 20000 µm2

0,188 ± 0,07 0,6799±0,09*

0,269 ± 0,08#

Bazal membran kalınlığı

257,96±17,17

808,07±35,64*

382,13±19,41#

Bulgular I

(Bir günlük yavru fareler)

P<0.05

* kontrol grubuna göre anlamlı olarak farklı

# astım grubuna göre anlamlı olarak farklı

• Grup V, Grup II ile karşılaştırıldığında subepitelyal düz kas tabakası, epitel yüksekliği, bazal membran kalınlığı ve mast hücre sayısı anlamlı yüksek saptanmıştır.

• Grup VIII, Grup V ile karşılaştırıldığında aynı parametrelerde anlamlı bir düzelme gözlenmiştir.

A B

C D

A B

C D

Grup V Grup VIII

A-B; Hematoksilen&eozin. * mononükleer hücre infiltrasyonu, ok;düz kas tabakası (A;40X, B;100X).C; PAS. Oklar; goblet hücreleri. D; toluidin blue. Oklar mast hücreleri (40X)

A-B; Hematoksilen&eozin. Ok; düz kas tabakası. C; PAS. Ok; goblet hücresi. D; Toluidin blue. Ok; mast hücresi (40X)

Grup III(kontrol)Ort±SE

Grup VI(Astımlı anne) Ort±SE

Grup IXTedavi alan anne)Ort±SE

subepiteliyal düz kas kalınlığı, µm

6,262 ± 0,34 12,780±1,04*

8,611± 0,82#

epitel yüksekliği, µm

14,816 ±1,05

27,460±2,02*

20,585 ±1,33

goblet hücre sayısı, 100 µm

0,350 ± 0,06 1,178 ± 0,24*

0,371± 0,14#

mast hücre sayısı, 20000 µm2

0,125 ± 0,07 0,732 ± 0,06*

0,376 ± 0,11

Bazal membran kalınlığı

263,49±15,73

670,50±22,95*

386,54±14,63#P<0.05

* kontrol grubuna göre anlamlı olarak farklı

# astım grubuna göre anlamlı olarak farklı

Bulgular IIAltı haftalık yavru fareler

• Grup VI, Grup III ile karşılaştırıldığında subepitelyal düz kas tabakası, epitel yüksekliği, goblet hücre sayısı ve mast hücre sayısında anlamlı yüksek saptanmıştır.

• Grup IX, Grup VI ile karşılaştırıldığında aynı parametrelerde anlamlı bir düzelme gözlenmiştir. (p<0,05)

A B

C D

A B

C D

. A-B; Hematoksilen&eozin. Ok; düz kas tabakası. C; PAS. Oklar; goblet hücreleri. D; Toluidin blue. mast hücresi (40X)

A-B; Hematoksilen&eozin. * Mononükleer hücre infiltrasyonu, Ok; düz kas tabakası. C; PAS. Oklar; goblet hücreleri. D; Toluidin blue. Oklar; mast hücreleri (40X)

Grup VI Grup IX

Sonuç• Astımlı annelerden doğan yavru

farelerin akciğerlerde prenatal dönemde değişikliklerin başladığı, bunların geçici olmadığı ancak annenin aldığı tedaviden etkilendiği gözlenmiştir. Astımlı annelerin çocuklarında akciğerdeki histopatolojik değişiklikleri ve bu değişiklikleri etkileyen faktörleri belirleyecek daha ileri araştırmalara ihtiyaç vardır.