a novel 5′ (40^41insa) mutation in a patient with numerous manifestations of cowden disease

2
In conclusion, we present evidence that the trait for autosomal dominant hereditary hypotrichosis (MUHH) maps to human chromosome region 8p21. Mutation analysis of Hr, which localizes to the same region, failed to reveal a mutation. The localization of MUHH in the vicinity of Hr at 8p21 underscores the importance of this chromosomal region in hair growth control and could perhaps harbor other genes related to hair growth. We are grateful to Deanna Henry, CCRC, North-west Cutaneous Research Specialists, Portland, Oregon for her expert help in collecting the biological samples and photographs and to the members of this family for their generous and enthusiastic cooperation. G.P. Sreekumar, Janet L. Roberts,* Ching-Q. Wong, Kurt S. Stenn, Satish Parimoo Skin Biology Research Center, Johnson and Johnson, Skillman, New Jersey, U.S.A. *North-west Cutaneous Research Specialists, Portland, Oregon, U.S.A. REFERENCES Ahmad W, Faiyaz ul Haque M, Brancolini V, et al: Alopecia universalis associated with a mutation in the human hairless gene. Science 79:720±724, 1998 Cichon S, Anker M, Vogt IR, et al: Cloning, genomic organization, alternative transcripts and mutational analysis of the gene responsible for autosomal recessive universal congenital alopecia. Hum Mol Genet 7:1671±1679, 1998 Dib C, Faure S, Fizames C, et al: A comprehensive genetic map of the human genome based on 5,264 microsatellites. Nature 380:152±154, 1996 Lathrop GM, Lalouel JM: Easy calculations of lod scores and genetic risks on small computers. Am J Hum Genet 36:460±465, 1984 Sobel E, Lange K: Descent graphs in pedigree analysis: applications to haplotyping, location scores, and marker-sharing statistics. Am J Hum Genet 58:1323±1337, 1996 Solomon LM, Esterly NB, Medenica M: Hereditary trichodysplasia: Marie Unna's hypotrichosis. J Invest Dermatol 57:389±400, 1971 Sprecher E, Bergman R, Szargel R, et al: Atrichia with papularlesions maps to 8p in the region containing the human hairless gene. Am J Med Genet 80:546±550, 1998 van Steensel M, Smith FJ, Steijlen PM, et al: The gene for hypotrichosis of Marie Unna maps between D8S258 and D8S298: exclusion of the hr gene by cDNA and genomic sequencing. Am J Hum Genet 65:413±419, 1999 Unna M: Ueber Hypotrichosis congenita hereditaria. Dermatol Wochenschr 32:1167± 1178, 1925 A Novel 5¢ (40 Ã 41insA) Mutation in a Patient with Numerous Manifestations of Cowden Disease To the Editor: We report a patient with a novel mutation (40Ã41insA) resulting in total disruption of the PTEN gene. The patient shows numerous manifestations of Cowden disease including oral papillomas, bowel polyps, nodular goitre, lipomas, acanthosis nigricans, and a large number of cutaneous ®broepthelial polyps over much of the trunk. Cowden disease (OMIM 158350), also known as multiple hamartoma syndrome, involves a single locus on 10q23 (Nelen et al, 1996) at which PTEN (Genbank AF000734), a tumor suppressor gene with tyrosine phosphatase and tensin homology, has been identi®ed (Li et al, 1997; Steck et al, 1997). The tyrosine phosphatase domain, residues 82±142, is thought to be critical for tumor suppression. An exploratory genotype/phenotype association has been previously described (Marsh et al, 1998), although the effect of the nature and/or position of the mutation in relation to the phosphatase core motif remains unclear. Most mutations hitherto reported in Cowden disease involve the phosphatase core where phosphatase activity is disrupted but the ability to bind substrate through the 5¢ tensin domain is maintained. In these cases, substrates could be sequestered by binding to mutant PTEN molecules, but without the ability to dephosphorylate. The patient, a 52-y-old male, was referred for an opinion regarding oral papillomata, which involved the entire oral mucosa. The cranial circumference was enlarged at 62 cm. Multiple facial papules measuring 1±2 mm in diameter were also noted. Histologically, one of these was a trichilemmoma. Large numbers of skin tags were found around the neck, in the axilla, the groin, upper thigh, perineum, and peri-anally. Histologically these were ®broepithelial polyps (acrochordon). Acanthosis nigricans was also noted in the axillae. Palmo-plantar pitting was observed and he also had a moderate number of banal melanocytic nevi. Other features consistent with Cowden disease included kypho-scoliosis, lipomata, gastrointestinal polyps and ganglioneuromata, and nodular goitres. An MRI scan showed no signi®cant intracranial abnormalities. The patient has one female sibling. Manuscript received May 6, 1999; revised December 14, 1999; accepted for publication December 15, 1999. Reprint requests to: Dr. Peter M. George, Department of Clinical Biochemistry, Christchurch Hospital, Christchurch, New Zealand. Email: [email protected] Figure 1. Genetic analysis of a family with Cowden disease. (a) Exon 1 sequence (Genbank AF000730) analysis of the PTEN gene. Exon 1 was ampli®ed by PCR with primers, forward 5¢-TCTGCCATC- TCTCTCTCCTCCT-3¢ and reverse 5¢-TCCGTCTACTCCCACGT- TCT-3¢. DNA was sequenced using the forward primer and the proband is heterozygous for an A insertion at nucleotides 40±41 (asterisk). (b) Restriction analysis of the PTEN mutation 40Ã41InsA. To con®rm the base substitution, a restriction enzyme assay was designed using a forward mutagenic primer 5¢-CAAAGAGATCGTTAGCAG CCACAA-3¢. To generate a BslI restriction site ``CCN 7 GG'' speci®c for the mutation, nucleotides 33±34 ``AA'' were replaced by ``CC'' (underlined above) such that BslI cleaves the mutant (40Ã41InsA) allele, where the number of nucleotides between ``CC'' and ``GG'' is seven, as opposed to six in the wild-type allele. The 132 bp PCR product produced was analyzed by PAGE electrophoresis after incubation and digestion with 5 U of BslI. Genomic DNA from the mother and father was extracted from tissue obtained from paraf®n blocks. BslI cleaves the mutant allele to obtain a 108 bp fragment (arrowed left). Lane 1 contains an unaffected control and other lanes are as indicated in the family tree. The proband is arrowed. VOL. 114, NO. 3 MARCH 2000 LETTERS TO THE EDITOR 597

Upload: peter-m

Post on 06-Jul-2016

213 views

Category:

Documents


1 download

TRANSCRIPT

� ��������% , �� � �� ��� �� ���� �� ����� � ����$���$����� � � ������ ����������� �4L��� $��� � ��$�����$�$ � "�� (��&* 4������ �������� ��% ,���� �����1 �� �� ��$ � "��% ��� � � � � �� � $������* �� �����1���� 4L�� �� �� �������� �� �� (��& ��� ���� � �� �$������ ���� ���$�$�� � "�� �� ���� "�,�� ����� ��� ����� ����� ���!� �� � " � � � ��� � � ���� "�,��*

�� ��� ����!�� �� ����� �����" ����" #����$%��� ��������� ������ �

��� �������" &�������" '�� �� !�� ��� �(���� ���� �� ���� ��� ��� ����� � �� �������

��� ����� ����� ��� �� ��� ������� �! ���� !����� !�� ����� ������� ��� �����������

����������)

B*>* �� ��$��% J�� � �* �! ���%� #���"�S* ;�"%9��� �* �� ��% ������ >���$

���� +��"� � � ���� # �� �% J���� ��� J����%�����$��% E , J �� �% L*�*/*

�E����, �� #���� �� � � ���� �� ��������% >������%�� "�% L*�*/*

��3���E#��

/�$�� ;% 3����1 �� ��:� 4% +�������� F% �� ��� /�� ��� ���� ������ ������� �,��� � $������ �� �� ��$�� ����� �� " � * � ��� � A'�A�?<A�)% &''(

#���� �% /�� � 4% F"� �% �� ��� #����"% " �$�� �"���1����% ��� ������ ����������� ��� $�������� �������� �� " � � �����!� � ����$��� � ���� ���� ���� ��" ����� ��� ���* ��� *�� ����� A�&0A&<&0A'% &''(

��! #% 3��� �% 3�1�$ � #% �� ��� / �$�� � ���� " � ��� $�� �� ��$��" �$ !�� � � 6%�0) $������ ���� �* #����� =(?�&6�<&6)% &''0

������ B4% ���� � J4� ���� ����������� �� ��� � ��� " � ��� ����� � �$����$��� ��* �� ��� ����� =0�)0?<)06% &'()

�! � �% ���" 9� � �� �� "����� �� � ��"� ��������� ����������� � ���������"%������ ��� �% ��� $��� ��������" ����������) �� ��� ����� 6(�&=�=<&==A%&''0

��$� �4% ��� ��� E+% 4 � ���� 4� � � ������ ��������������� 4��� L���2������������* ������ ������� 6A�=('<)??% &'A&

��� �� � �% + �"$�� �% �1��" � �% �� ��� /������� ,��� �������� ���� $��� � (� ���� � "�� ��������" �� ��$�� ����� �� " � * �� *�� ����� (?�6)0<66?%&''(

��� �� �� � 4% �$��� 3J% �� �C� � >4% �� ��� �� " � � ����������� 4��� L��� $��� ! �, � �(��6( ��� �(��'(� .������ �� �� " � !� ��E/��� " �$�� � :� ����"* �� ��� ����� 06�)&=<)&'% &'''

L��� 4� L ! � ����������� ��" ���� � � �������* ������� �� ���� �� =��&&0A<&&A(% &'�6

$ 1�4�� �� �*7 8*(���$� �������� �� � &������ ,��� 1�������������������� �� ��,"�� �������

� �� ������

; � ��� � ���� �� ,��� � �� � $������ �)?T)&���/� � ������" ������ ��������� �� >��E " � * �� ���� �� ��,� ��$ ���$��� ������� #,� � ��� �� ��������" ��� ������$��% !, ������% ������ "��� % ���$��% ��������� ��"������% ��� � ���" ��$! � ����� �� 8!� ��� ���� ����� � � $��� �� �����*

#,� � ��� �� ��44 &6(=6?�% ��� ��,� �� $������ ��$���$� �����$ % ����� � � ���"� ���� � &?:�= �E � � �� ��%&''0� �� ,���� >��E �B �!��� /3???A=)�% � ��$� ����� ���" � ,��� ������ ��������� ��� � ���� �$�"�% ��� ! ��� ���8 � ��� �� ��% &''A7 �� �� �� ��% &''A�* �� ������ ��������� �$���% � ���� � (�<&)�% �� ���"�� � ! �������� ���$� ����� ����*

/� .������� " ���� -�� ���� ��������� ��� ! ��� ������ � ����! � �4���� �� ��% &''(�% �����"� �� �� �� ����� ���-� ������ �� $������ �� � ����� � �� ��������� �� $�� � $���� ���� ��* 4�� $������� ���� ��� ��� � �� #,� � ��� �� ����� �� ��������� �� ,� � ��������� �������� �� ������� � !�� �� �!����� � !��� ��!����� ����"� �� 6� � ���� �$��� �� $������� �* � �� � ��� �%��!����� � ���� ! � :� �� � � !� !�����" � $����� >��E$� ��� �% !�� ,����� �� �!����� � � ���������� *

�� ���� ��% � 6������ $�� % ,�� � �� � � �� ������ "�����" ��� ������$���% ,���� ����� � �� ���� ��� $����*�� ������� �����$ � �� ,�� ����" � �� 0� �$* 4������ ���������� � $ ������" &<� $$ �� ���$ � � , � ��� �� �*�����"������% � �� � ,�� � ������� $$$�* ���" ��$! �� ���� ��"� , � ��� ����� �� � ��% �� �� �.����% �� "���%��� � ���"�% � ��� �$% ��� � ���������* �����"������ �� � , � 8!� ���� ���� ����� ����������* /�������� ��"������ ,�� ����� � �� �� �.���� * >��$�������� ������" ,�� !� �� � ��� � ���

��� � $� ��� ��$! � !���� $ �������� � ��* ��� � ���� ������� �� ,��� #,� � ��� �� ������ � ������������% ���$���%"������� ������ ����� ��� "��"��� ��$���% ��� ������ "��� �*/� 4� ���� ��, � � ��"��8���� ������������ �!��$����� �* �� ���� �� ��� � $�� ��!���"*

4��������� � � �� � 4�� 0% &'''7 � ��� � � � $! � &)% &'''7 ��� �� � � ��!������� � � $! � &6% &'''*

� ����� � :� ��� �� ��* > � � 4* B �" % � ����$ �� #�������+��� $�����% #����������� �������% #�����������% E , P �����* �$����� � �*" �" N��$ ��*��*�1

�!��� (+/������ �������� �� � ����� ,��� ��,"�� "������+ ��� �.�& � :� �� �B �!��� /3???A=?� �������� �� >��E " � * �.� & ,���$���8 � !� >#� ,��� ���$ ��% �,��� 6���#�B##/�#��#�#�#�##�##��=� ��� � � �� 6���##B�#�/#�###/#B���#��=�* �E/ ,�� � :� �� � ����" �� �,��� ���$ � ��� �� ��!��� ��� � �1�"�� � �� / ��� ���� �� ���� ��� � )?<)& ���� �����* ���� �������� �������� �� >��E $������ )?T)&��/* � ��8�$ �� !�� ��!��������% � � �������� �1�$ ����� ,�� � ��"� � ����" � �,���$���" ��� ���$ � 6��#///B/B/�#B��/B#/B##/#//�=�* �" � ��� � +�� � �������� ��� UU##EABB22 �� ��8� � �� $������%���� ��� � ==<=) UU//22 , � � ���� � !� UU##22 ���� ���� � �!� � �������� +�� �� �� � �� $����� �)?T)&��/� ��� � % ,� � �� ��$! � ���� ��� � ! �, � UU##22 ��� UUBB22 �� � � �% �� ��� � � ��. �� �� ,������� ��� � * �� &=� !� >#� ������ ����� � ,�� �����1 � !�>/B� � ������ ��� � � � ����!���� ��� ��" ���� ,��� 6 L +��*B �$�� �E/ �$ �� $�� � ��� ��� � ,�� .����� � �$ ����� !���� � �$ ���� 8� !����* +�� �� �� � �� $����� ��� � � !���� �&?( !� ��"$ �� ����, � � ��* ���� + ������� �� ��� �� � ����� ����� � ��� � �� �� ������� � �� �� �$��� �� * �� ��!��� �� ���, �*

F��* &&)% E�* = 4/�#� �??? ������� �� ��� ����� �)9

��� �� �E/ � :� �� �������� �� >��E " � % .�� &<'%� � �� � ���� �� ���� �� ,�� � � �1�"�� � � !�� ��� ���� �� .� & � �! (��% ,���� ��$���� ��� � �0 �$�� ���������� ��� � &<&�(�* /� ��� ���� �� �� ���� ! �, ����� ��� � )? ��� )& � ����� �� � ��$ ��� � �� ��� &)* �� $������ ,�� ��8�$ � !� +�� � �������� �1�$ �������� !�� ,���� ��� �� ��� �� ���� ��2� ����� � � �! (��* �� �!� �� �� $������ �� �� $�� �% ��� �% ��� ���� � �� ������ �� ,��� �� >��E $������ ! ��" � ������ �� �� ���� $������ ���� ������ �� ����� �����*

�� >��E )?T)&���/ $������ � ����� �� � ��$ ��� � �� �� &)�� � ���� ��� ��������� � � � � ���� � �' �� � �$�� �������� ! � �������� �* � �� ��,� �" ���� �� �� $�� 6�$������ � ��� � �� �� >��E " � * �� $������ � ����� �� ������� �� ��������� ��� 6� � ���� �$����* /����"� �� �������� ���� � �� ���� ���� �� �� $���� ������� #,� � ��� �� % �� ����� � ����" ���� ���� ���� �� �������� � ���" ��$! � #,� ���� �� $��� ������� ���% �� ����������% � ���" ��$! � ����� �� � ����% �* *% 8!� ���� ���� ����� ��� �����������"������* � �������% ��� �� � ���� �$��� � ���� , ��� .�$�� �% ,� ��� ��� ������� ��� �� >��E " � ����1�� �� ��%&''(�% ��� � �� , ���� � ����* /�������� ��"������ �� � ����� �����$$� �� #,� � ��� �� !�� �� � � !� �� � �� �� ����� ��� ��� �� +����������� �<�������!� �����$ �+�������$ � �3��"��� �� ��% &''0�* �� �������� ��� �� ��������������� ���� � ����"�$��� +��* �� )?T)&���/ $�������% �, � �% �� � �� �� .�$�� �$�� � ��������� >��E��� �� �� ��� � �� ���� �� ��� �� � ���� �$��� � ���� , ��� .�$�� � ��� ���� � ,�� ���" #,� � ��� �� �� ��� � ���� �*

,��� %��� %�� ��������� �� ��� * �������� ,���� !���" ������ ��� �" #�%

-������) �� %���� ���� ���� �� ����� ���� ���� &��!����� ������ .� !��

����������� �(�� + ������ ��/��� ��)

/����� 4* ���1��%� 4����� 4* 3 �"���%� ����� �* E������%�� � � ;* B�����%� > � � 4* B �" �

� ����$ ��� �#������� +��� $����� ����� �$���"�% #����������� �������% #�����������% E , P �����

�� ����$ �� ��$���"�% L��� ����� ���"% ��� ���%E , P �����

��3���E#��

3��"��� 4#% ���, �J% � $ ��#�� ���� J% +�"��� J�� #����������"��8����"� �� �� +����������� �<�������!� �����$ * �� � �������% &''0&=��&�&(<&�&(

�� J% R � #% ���, �% �� ��� >��E% � ������� ��� �� ������ ��������� " � $���� � �� ��$�� !����% !� ���% ��� ������ ���� �* � ��� � �A6�&')=<&')A%&''A

4���� �J% #��� F% ��� ��� 9�% �� ��� 4������ �� ����$ ��� " ���� ��� ���� ������ � �� #,� � ��� �� ��� +�������<P���� �����$ � ,��� " �$��� >��E $������* ��� *�� ����� A�6?A<6&6% &''(

E � � 4�% >��! �" B;% > � �� �/% �� ��� �����1���� �� " � � #,� ���� �� � ���$�$ &?:��<�=* #����� ����� &=�&&)<&&0% &''0

���1�� /4% 3 �"��� 44% �!���� +/% /������ #�% B �" >� � ���8����� � �� � >��E $������ ��&='G� �� � ���� �� ,��� #,� � ��� �� ����C"� � �����$ * ���� &��� 6&�=='<=)&% &''(

�� �� >/% > ����� 4/% J��� � �/% �� ��� � ���8����� � �������� ��$������� ��� " � % 44/#&% �� ���$�$ &?:�=*= ���� �� $���� � �� $������ ������ � ���� ��* #����� ����� &6�=60<=0�% &''A

��������� �� ���(0 �� .��� :������������

� �� ������

; � �� �� ������ UU#��� �� "������ ��� �� �����&( $�E/��� ��� �� .�� ���� �����" ����� �� ,��� � ���� �� $�� 22 !�9�V$� � �� �� �&'''� ,��� ��� � ��* �� ������2 !� ������� ���,� , ��"�� � �� � ��������� ! �, � � ����" ��� ��5�$$����%��� , ����� ,��� �� ��� �� ���� ��&( �� ��� �� � ! $�C��$������ �� ���� ���� !��"�7 �, � �% , � ���$ ���!� �!�� � !� ������ �� �� ��� �% ��$ �� ���� � �������� ��&(�� ���������� �� ��� ������!�� �� � �� �� �� ��� �� � &( ���$� ��� *

+�� �� "���� ��� ��� � �� ���� � � �$ � .� ��$ ������� �� �� � ����� ����$ ������ �� � �� �$ ��� ������ � ���� ��� � !� 9�V$� � �� ��) +� �� �$$��� � ���� � , �� ��!��% , ��� � $������ � ���� ������ ������ ��&( �� ��� ���$���� �������� �� �������� ��� � �������� � �� ��� � ���� , ��� ����� � ����� �� �� ����� �� � �) ��� �$ � �!� (% ��* �� ����� �� � �$ ,�� ��� � � �� � ��� �� $ ���$ !� ��#��� ��� ��� ���$��� � �������� �* � �� �, ��!����� � , � ��� �� �� � �� �� $� ����� , �"�� �4;� ! �, � � �$!�������$�� $���� ��&(% ,���� $�"��� � �� �� .� �� � &( ��� 4;%��� !�� �� ������ ������ ��� � � �� � ��&(% ,���� $�"��� ,��� �4; ����.�$�� �� �) ���* ���� �� �� ����� �� �� ��� �� ������2 , �� �� !��� ��� �� �� �� $ �� � �$!����� ��&(������&(� ��� � � �� �� �� ��������� ��1��" �����* ; ���� ��

4��������� � � �� � ���! � �0% &'''7 ��� �� � � ��!�������� � $! � A% &'''*

� ����� � :� ��� �� ��* �*;* B�� �% L#� # �� � � � �$���"�%�� ���� ������� % 6 L��� ����� ��� �% ���� ;#&� 0JJ% L9* �$�����*"�� �N���*��*��

�!��� �+ ���(0 ������� ���������� �� ����������" ������ �����������������+ ; �� �� !�� ,�� ��! � ,��� � "�� ������$�� ��&(�������� ����!�� ���0&AA�* ���� +% �����$���� � � �������� ����� 7 ����0% �����&( �6 �"�* ��1 � ������� � �� ���*

�!��� (+ ���(0 ������� ���������� �� ����������" .���2 �����+� � ���� � , �� �� !�� ,��� �� �������&( �� ��8� $������ ����!���4/+=&(� � , �� �� !��* ���� +% & �" �����&(7 ����� 012% � �� ���� ��%=% 0% &�% �)% )( ��� A� � ������ 7 ���� 3% & �" �����&(% $����� ���$��� ����!��7 ��� ���� 4% ��#�� � ��� = � ������ % $����� ���$�������!��* >����&(� �) ��� ��� $���� ��&(� &( ���*

�)0 ������� �� ��� ����� ��� J�L�E/� �3 EF���B/�F� ���4/����BR