10.001 - PLANTAS MEDICINAIS INDICADAS PELOS VENDEDORES

DE ERVAS DO MERCADO SÃO JOSÉ- RECIFE/PE PARA O

TRATAMENTO DE DOENÇAS DO FÍGADO

Lima, I. R. , Silva, I. B. , Silva, T. M. S. , Maia, M. B. S. , Leite, S. P. ,

Departamento de Histologia e Embriologia - UFPE Departamento de

Fisiologia e Farmacologia - UFPE

Introdução:

A utilização de plantas medicinais é uma prática comum entre as populações.

Segundo a Organização Mundial da Saúde, 80% da população recorre a

medicina tradicional para atender suas necessidades primárias de assistência

médica (OMS, 1993). O conhecimento popular pode fornecer dados

importantes para novas descobertas científicas e as pesquisas acadêmicas

podem originar novos conhecimentos sobre as propriedades terapêuticas das

plantas (Simões, 1998).

Objetivos:

Realização de levantamento no Mercado São José- Recife/PE das espécies de

plantas utilizadas para doenças do fígado e verificar se existe comprovação na

literatura da atividade hepatoprotetora dessas espécies.

Métodos:

O estudo não realizou experimentos com animais nem com humanos. A coleta

de dados para este trabalho foi realizada no Mercado Público de São José em

Recife-PE. Proprietários dos quiosques que comercializavam ervas medicinais

foram entrevistados através de um questionário semi-estruturado e

responderam perguntas abrangendo modo de obtenção, finalidade terapêutica,

uso e parte da planta utilizada para doenças do fígado. O número de

questionários aplicados (11), foi feito em função do número de boxes (16) de

plantas medicinais ao redor do Mercado de São José e da disponibilidade dos

vendedores em responder os questionários.

Resultados:

As plantas mais citadas como indicadas para doenças do fígado foram: Quebra

faca, Alcachofra, Boldo, Macela do Reino, Carqueja, Capeba e Picão Preto.

As partes mais utilizadas são as folhas (80%) e 90% dessas preparações é

feita em forma de chá. Do total de plantas citadas apenas 19% tem atividade

hepatoprotetora confirmada e descrita na literatura.

Conclusão:

Os resultados mostram que mais de 70% das plantas medicinais para

tratamento de doenças do fígado comercializadas no Mercado público de São

José em Recife/PE, não têm atividade hepatoprotetora comprovadas

cientificamente. Este é um dado preocupante, um alerta para a comunidade

científica e a população que faz uso dessas plantas. É necessário intensificar

os estudos fitoterápicos desses produtos e fiscalizar sua comercialização, em

detrimento do uso inadequado pela população.

Apoio Financeiro:

Os resultados mostram que mais de 70% das plantas medicinais para

tratamento de doenças do fígado comercializadas no Mercado público de São

José em Recife/PE, não têm atividade hepatoprotetora comprovadas

cientificamente. Este é um dado preocupante, um alerta para a comunidade

científica e a população que faz uso dessas plantas. É necessário intensificar

os estudos fitoterápicos desses produtos e fiscalizar sua comercialização, em

detrimento do uso inadequado pela população.

Gerado em: 2014-5-21 16:21:30

10.002 - A TIBOLONA MELHORA O PERFIL LIPÍDICO, REVERTE

A ESTEATOSE E MELHORA O ESTADO REDOX DO FÍGADO DE

RATAS OVARIECTOMIZADAS

Campos-shimada, L. B. , Garcia, R. F., Maciel, E. R. M. , Ishii-iwamoto,

E. L. , Salgueiro, C. L. ,

Departamento de Ciências Fisiológicas - UEM Departamento de

Bioquímica - UEM

Introdução:

À semelhança do que ocorre com mulheres na pós-menopausa, ratas

ovariectomizadas (OVX) apresentam diversos distúrbios no metabolismo

lipídico, que resultam em maior incidência da síndrome metabólica (SM), um

conjunto de alterações que incluem obesidade, dislipidemias, hipertensão,

resistência à insulina, diabetes tipo I e esteatose hepática. A Tibolona é um

esteróide sintético, utilizado no tratamento dos sintomas da menopausa. Pouco

se sabe, no entanto sobre as suas ações sobre o metabolismo hepático de

lipídios.

Objetivos:

O objetivo deste trabalho foi investigar os efeitos da Tibolona sobre o perfil

lipídico, esteatose hepática e estado redox do fígado em ratas OVX,

portadoras de dislipidemia e esteatose.

Métodos:

Parecer 056/2011-CEAE Ratas Wistar OVX, após um período de 13 semanas

desenvolvem esteatose e dislipidemia e foram utilizadas neste estudo. Treze

semanas após a OVX, as ratas foram tratadas diariamente com Tibolona (0,16

mg/kg, OVX + T) ou veículo (goma arábica 1%, OVX), por um período de

três semanas. Os resultados foram comparados com aqueles obtidos em

animais sham-operadas para OVX e tratadas com goma arábica 1% (CONT).

O perfil lipídico e a glicemia foram avaliados por meio de kits de dosagens.

Os conteúdos hepáticos de lipídios foram avaliados por análises histoquímicas

(Sudam III) e gravimétricas, utilizando a técnica de extração em

clorofórmio:metanol (2:1). O estado redox do fígado foi avaliado por medidas

dos conteúdos de glutationa reduzida (GSH), níveis de proteínas carboniladas

e de lipoperoxidação, este último através da detecção de malondialdeído,

espécie reativa ao ácido tiobarbitúrico, utilizando a técnica de TBARS

(thiobarbituric acid reactive substances). Os procedimentos realizados foram

aprovados pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal (Parecer n°

056/2011-CEAE). Os resultados foram expressos como médias ± EP. A

existência de significância estatística foi avaliada por meio de realizados testes

“t” de Student não pareado ou one-way ANOVA (nível de significância, p <

0,05).

Resultados:

O tratamento de ratas OVX com Tibolona reduziu a glicemia destes animais

para valores próximos àqueles dos CONT. Além disso, o tratamento destes

animais reduziu o colesterol total, HDL e LDL, para valores que foram,

inclusive, significativamente menores do que aqueles dos CONT. Já os níveis

de VLDL e de triacilgliceróis, ambos aumentados em ratas OVX em cerca de

37%, não foram alterados pelo tratamento com a Tibolona (n = 10). As

análises histoquímicas (n = 3) e gravimétricas do fígado (n = 8) revelaram

que, em ratas OVX, os conteúdos de lipídios estavam aumentados, mas o

tratamento com a Tibolona reduziu estes conteúdos para níveis próximos

àqueles dos CONT. A reversão da esteatose pelo tratamento com a Tibolona

foi acompanhada por uma melhora no estado redox do fígado. Assim, os

conteúdos de GSH, diminuídos em ratas OVX, foram completamente

restaurados pelo tratamento dos animais (n = 6). Os danos oxidativos também

foram reduzidos nos fígados de animais tratados com Tibolona. Os níveis de

carbonilação de proteínas (n = 6) e de lipoperoxidação (n = 10), aumentados

em ratas OVX, reduziram para níveis semelhantes àqueles dos CONT, em

ratas OVX + T.

Conclusão:

A Tibolona exerceu efeitos benéficos sobre a glicemia, o perfil lipídico e

reverteu a esteatose, fenômeno que foi acompanhado por uma melhora no

estado redox do fígado.

Apoio Financeiro:

Capes e Fundação Araucária.

Gerado em: 2014-5-21 16:21:30

10.003 - DETERMINAÇÃO DE FENÓIS TOTAIS, FLAVONÓIDES E

ATIVIDADE ANTIOXIDANTE DE Euphorbia hirta L.

(EUPHORBIACEAE)

Almeida, J. R. G. S. , Bezerra, G. S. , Guimarães, A. L. , Macedo, S. K. S.

, Cruz, D. R. R. , Oliveira, A. P. , Araujo, E. C. C. ,

Programa de pós-graduação em Recursos Naturais do - UNIVASF

Introdução:

Euphorbia hirta é uma espécie comumente encontrada na região do vale do

São Francisco, sendo conhecida popularmente como “erva de Santa Luzia”,

pertence à família Euphorbiaceae. Seu uso tradicional tem sido relatado no

tratamento de tosse, coriza, asma, infecções nos brônquios, reclamações

intestinais, infestações por vermes, feridas, pedras nos rins e furúnculos.

Objetivos:

Quantificar fenóis totais, flavonóides totais e avaliar o potencial antioxidante

pelos modelos de seqüestro do radical DPPH e inibição da autooxidação do β

-caroteno da espécie em estudo.

Métodos:

Experimento que não utiliza animais ou humanos. O material vegetal (folhas,

flores e caule) foi coletado na cidade de Petrolina-PE, e a exsicata da espécie

E. hirta foi depositada no HVASF (número 10994). Após isto, realizou-se a

secagem, pulverização e preparação do extrato etanólico das partes aéreas

através da técnica de maceração. Em seguida o extrato etanólico foi submetido

a um sistema de cromatografia à vácuo com os solventes hexano, clorofórmio,

acetato de etila e metanol para obtenção das fases. Os teores de fenóis e

flavonóides totais foram determinados por interpolação da absorbância das

amostras contra uma curva de calibração construída com padrões de ácido

gálico e catequina, respectivamente. Para avaliação da atividade antioxidante

no modelo de seqüestro do radical DPPH foram preparadas soluções do

extrato, fases e padrões, em etanol, nas concentrações de 1, 3, 9, 27, 81 e 243

μg/mL. Os padrões utilizados foram BHT, BHA e ácido ascórbico. Para

avaliar a capacidade antioxidante, pelo modelo de inibição da autooxidação

do β -caroteno, foram preparadas soluções do extrato e fases e foram

utilizados os padrões quercetina, pirogalol e ácido ascórbico. Todos os

experimentos foram realizados em triplicata.

Resultados:

Na quantificação de fenóis totais a fração que apresentou melhor valor da

ordem de 102,9 mg/g, medidos através de curva de calibração em mg de

equivalente de ácido gálico/g da amostra (R2= 0,999) foi a metanólica (Eh-

MeOH). Através do experimento de flavonóides totais podemos presumir que

uma parte do conteúdo fenólico deve corresponder a metabólitos secundários

da classe dos flavonóides, sendo que neste experimento o extrato etanólico

bruto (Eh-EEB) apresentou melhor valor na ordem de 54,16 mg de

equivalente de catequina/g de extrato. Em relação às atividades antioxidantes

dos extratos e fases da espécie Euphorbia hirta verificou-se que no método do

seqüestro do radical DPPH o extrato etanólico bruto (Eh-EEB) apresentou

maior poder antioxidante com CI50 de 14,92 ± 0,55 µg/mL. No modelo da

inibição da autooxidação do β-caroteno a fração clorofórmica (Eh-CHCl3) foi

a que se mostrou com melhor atividade com um valor de 77,22 ± 2,484.

Conclusão:

Os resultados deste estudo demonstram que os materiais vegetais de

Euphorbia hirta coletados em Petrolina-PE nos permitem afirmar que o

emprego popular pode estar relacionado à proeminente capacidade

antioxidante explicitada nos resultados obtidos. Um estudo fitoquímico mais

aprofundado está sendo realizado para uma melhor discussão com relação aos

constituintes químicos desta planta e a atividade antioxidante observada.

Apoio Financeiro:

CAPES/ CNPq/BNB.

Gerado em: 2014-5-21 16:21:30

10.004 - POTENCIAL FOTOPROTETOR E ANTIRADICALAR DE

TRIPLARIS GARDNERIANA WEDD. (POLYGONACEAE)

Macedo, S. K. S. , Ferraz, C. A. A. , Oliveira, A. P. , Bezerra, G. S. ,

Anjos, V. H. A. , Almeida, J. R. G. S. , Nunes, X. P. ,

Pós-graduação em Recursos Naturais do Semiárido, - UNIVASF

Coordenação de Química - IF SERTÃO-Petrolina/PE.

Introdução:

O excesso de radicais livres produzidos na pele após a exposição à radiação

UV pode ser combatido por antioxidantes produzidos pelo corpo ou

absorvidos da dieta (Quim. Nova. 29:113, 2006), por isso a busca por

substâncias antioxidantes é tão promissora hoje em dia. Comprovada a

capacidade de absorver a radiação solar e antioxidante de substâncias naturais

pode-se intensificar a proteção final do produto empregado em formulações

associadas aos filtros UV (Rev. Ciênc. Farm. Básica Apl. 34:69, 2013).

Objetivos:

Avaliar o potencial fotoprotetor e antioxidante dos extratos da folha de

Triplaris gardneriana Wedd.

Métodos:

Os testes foram in vitro. As folhas foram coletadas no município de Santa

Maria da Boa Vista, Pernambuco em julho de 2013. Depois secas,

pulverizadas e maceradas em etanol para obtenção do extrato etanólico bruto.

Em seguida, fracionado em hexano, clorofórmio, acetato de etila e metanol

para obter os extratos. A atividade antioxidante foi feito segundo o método de

Mensor e colaboradores (Phytother. Res. 15:127, 2001) utilizando o 2,2-

difenil -1- picrylhydrazil (DPPH) e como padrões o ácido ascórbico, BHA e

BHT nas concentrações de 1, 3, 9, 27, 81 e 243 µg/mL. Os valores de CE50

foram calculados por regressão linear utilizando o programa GraphPad Prism

5.0. A determinação da atividade fotoprotetora dos extratos foi realizada de

acordo com a metodologia utilizada por Violante et al. (Braz. J. Pharmacogn.

19:452, 2009), nas concentrações de 5, 25, 50 e 100 mg/L. Posteriormente,

foi realizada a leitura espectrofotométrica em comprimentos de onda entre

260-400 nm. O cálculo do FPS foi obtido de acordo com a equação

desenvolvido por Mansur et al. (An Bras. Dermatol. 61:121, 1986). Os ensaios

foram realizados em triplicata e calculados a média e o erro padrão dos

valores.

Resultados:

Os dados mostraram que o extrato etanólico bruto (EBB), fase acetato de etila

e a fase metanólica exibiram excelente atividade antioxidante no sequestro do

DPPH com menor valor CE50 (2,27± 0,19; 5,42± 0,84 e 3,35± 0,15 µg/mL),

respectivamente. Porém, o EEB apresentou melhor atividade antioxidante do

que os padrões utilizados. O extrato bruto, as fases clorofórmica, acetato de

etila e metanólica apresentaram perfil de absorção espectrofotométrica dentro

da faixa da região UVC (100-290 nm). A fase clorofórmica e acetato de etila

absorveram na região do UVA (320- 400 nm), mas a clorofórmica mostrou-se

mais eficaz. Todas as amostras, exceto a fase hexânica exibiram FPS maiores

que 6,0 na concentração 100 mg/L. Nesta, os valores de FPS de 7,4± 0,13;

12,8± 0,16; 11,3± 0,12 e 11,9± 0,29 para EEB, fase clorofórmica, fase acetato

de etila e fase metanólica, respectivamente.

Conclusão:

Todas as amostras, exceto a fase hexânica exibiram efeito fotoprotetor. Essa

boa fotoproteção pode ser explicada pelo extraordinário potencial

antioxidante que os extratos exibiram. Portanto, a espécie vegetal testada, em

condições padronizadas, pode ser considerada como um ótimo fotoprotetor,

pois de acordo com a legislação brasileira RDC Nº 30 de 1º de junho de 2012

(Brasil, 2012), um produto adequado para utilização em cosméticos para

fotoproteger deve apresentar um FPS igual ou superior a 6.

Apoio Financeiro:

Todas as amostras, exceto a fase hexânica exibiram efeito fotoprotetor. Essa

boa fotoproteção pode ser explicada pelo extraordinário potencial

antioxidante que os extratos exibiram. Portanto, a espécie vegetal testada, em

condições padronizadas, pode ser considerada como um ótimo fotoprotetor,

pois de acordo com a legislação brasileira RDC Nº 30 de 1º de junho de 2012

(Brasil, 2012), um produto adequado para utilização em cosméticos para

fotoproteger deve apresentar um FPS igual ou superior a 6.

Gerado em: 2014-5-21 16:21:30

10.005 - Avaliação da atividade citotóxica de extratos de plantas do

gênero MICONIA (Melastomataceae).

Silva, B. I. M. , Lima, S. M. A. , Leite, T. C. C. , Borba, E. F. O. , Araújo,

L. C. C. , Silva, T. G. ,

Antibióticos - UFPE

Introdução:

O gênero Miconia é composto por mais de 1000 espécies e destaca-se por ser

o maior em número de espécies da família Melastomataceae. Diante da

abundância destas espécies e a escassez de registros, é de extrema importância

uma maior atenção ao estudo das mesmas. O uso de culturas de células em

pesquisas vem ganhando destaque nos últimos anos. Pois esses modelos de

experimentação permitem criar condições semelhantes às que ocorrem em

organismos, possibilitando a análise de alterações sofridas pelas células frente

à determinada substância.

Objetivos:

Investigar a citotoxicidade de extratos obtidos de três espécies vegetais do

gênero Miconia, utilizando o teste de viabilidade celular (MTT) em linhagens

de macrófagos J774 A1.

Métodos:

Trabalho não utilizou de animais ou humanos As espécies M. amacurensis

(MA), M. mirabilis (MM) e M. hypoleuca (MH) foram coletadas nos

municípios de Maceió e Satuba (AL) e na Zona da Mata Sul (PE).

Aproximadamente 300 g das partes aéreas de cada espécie vegetal foram

secas em estufa, moídas e extraídas com os solventes hexano, acetato de etila

e metanol. Os extratos foram concentradas por rotaevaporação. A viabilidade

celular foi determinada através do método do MTT, utilizando as células de

macrófagos da linhagem J774 A1, semeadas (3,5 x 104 células/poço) em

placas de 96 poços. Os extratos foram dissolvidos em DMSO (10 mg/mL) e

adicionado aos poços na concentração de 50 μg/mL. Após 72 h adicionou-se

MTT (5 mg/mL) e incubou-se a placa por 3 h. A absorbância foi medida em

espectrofotômetro (540nm) após dissolução do precipitado em DMSO. O

percentual de inibição do crescimento celular (IC%) foi determinado

considerando a média do controle negativo como 100% de proliferação e

calculado a partir da regressão não linear pelo programa GraphPad Prism

5.0.Uma escala de intensidade foi utilizada para avaliar o IC% das amostras

testadas. Amostras sem atividade, com pouca atividade (1-50%), com

moderada atividade (50-75%) e com alta atividade (75-100%).

Resultados:

Os extratos acetoetílicos das espécies MA e MM apresentaram alta atividade

citotóxica frente aos macrófagos (77,4±5,9 e 86,7±2,4 µg/mL)

respectivamente, o extrato acetoetílico da MH apresentou atividade moderada

(67,0±3,3 µg/mL), enquanto os extratos metanólicos e hexânicos

apresentaram baixa citoxicidade. A citotoxicidade para os extratos

metanólicos foi: MA (41,4±0,4 µg/mL), MM (19,0±0,0 µg/mL) e MH

(35,7±3,5 µg/mL); e para os extratos hexânicos foram: MA (40,1±0,4 µg/mL),

MM (21,8±2,5 µg/mL) e MH (10,5±00 µg/mL).

Conclusão:

Os extratos metanólicos e hexânicos das espécies de Miconia utilizados neste

trabalho foram os menos citotóxicos frente a células de macrófagos,

merecendo destaque para os extratos hexânico de M. hypoleuca e o

metanólico de M. mirabilis.

Apoio Financeiro:

FACEPE e CNPq.

Gerado em: 2014-5-21 16:21:30

10.006 - AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTINOCICEPTIVA DO

FITOL EM CAMUNDONGOS.

Santos, C. C. M. P. , Mota, V. G. , Salvadori, M. S. , Benedito, R. B. ,

Salgado, P. R. R. , Sousa, D. P. , Almeida, R. N. ,

Unidade Acadêmica de Saúde - UFCG Departamento de Fisiologia e

Patologia - UFPB

Introdução:

Fitol é um diterpeno presente na molécula da clorofila e, portanto, muito

abundante na natureza. Os terpenos, constituintes dos óleos essenciais,

possuem várias propriedades farmacológicas, tais como analgésica e anti-

inflamatória. Algumas atividades farmacológicas do fitol já foram

demonstradas, no entanto, há escassez de estudos sobre seu efeito analgésico.

Objetivos:

O presente estudo foi desenvolvido com a finalidade de traçar um perfil da

atividade antinociceptiva do fitol em modelos animais químicos e térmicos de

dor.

Métodos:

0104/11 Todos os experimentos foram previamente aprovados pelo CEPA-

UFPB, sob a certidão n0 0104/11. Foram utilizados camundongos swiss

machos albinos, pesando entre 25 a 35g, com 3 meses de idade. O fitol foi

administrado intraperitonealmente (i.p.) nas doses de 25, 50, 100 e 200 mg/kg

em todos os testes. A atividade antinociceptiva do fitol foi investigada em 3

testes: (1) no teste das contorções abdominais induzidas pelo ácido acético,

uma solução e 1% de ácido acético foi administrada i.p. após 30 min dos

tratamentos, sendo observado o número de contorções. (2) teste da formalina,

na qual a formlina (2,5%) foi administrada i.pl. e o tempo de lambida da pata

foi observado, e (3) teste da placa quente, onde o animal foi colocado sob uma

placa aquecida a 50 graus, e a latência foi contabilizada como nocicepção.

Resultados:

No teste das contorções abdominais induzidas pelo ácido acético, em todos os

grupos tratados com fitol ocorreu diminuição significativa das contorções,

quando comparado ao grupo controle [controle (43,8 ± 4,3), 25: 81,7% (8,0 ±

2,3); 50: 95,4% (2,0 ± 0,8); 100 e 200 mg/kg: 100% (0,0 ± 0,0) de inibição].

Nos grupos tratados com indometacina (10 mg/kg) e morfina (6 mg/kg), a

inibição foi de 56,0% (19,3 ± 2,0) e 98,6% (0,6 ± 0,3), respectivamente. Na 1a

fase do teste da formalina, apenas as doses de 50, 100 e 200 mg/kg de fitol

[50: 32,5% (51,6 ± 4,7), 100: 28,9% (54,3 ± 5,1), e 200: 52,9% (36,0 ± 3,9)] e

a morfina [10mg/kg: 53,0% (35,9 ± 4,7)] reduziram o parâmetro comparado

ao controle (76,4 ± 9,4). Já na 2a fase, todos os grupos reduziram o parâmetro

[25: 35,0% (165,8 ± 44,0), 50: 86,3% (34,9 ± 14,6), 100: 89,8% (26,0 ± 10,6),

200: 98,7% (3,3 ± 0,3), indometacina: 43,3% (165,4 ± 31,0) e morfina: 98,5%

(3,8 ± 1,6) de inibição do tempo de lambida da pata] em relação ao controle

(255,3 ± 24,3). No teste da placa quente, o fitol foi capaz de aumentar a

latência (em seg) dos animais em resposta ao estímulo térmico após 30 min de

sua administração: 25 (9,6 ± 0,9), 50 (11,0 ± 2,0), 100 (10,1 ± 1,0) e 200 (9,3

± 0,6) mg/kg, bem como o grupo tratado com morfina (15,0 ± 1,5), quando

comparados ao grupo controle (3,8 ± 0,4). Aos 60 min, apenas a dose de 50

mg/kg de fitol (10,3 ± 1,9) e morfina (13,6 ± 1,4) mantiveram o aumento da

latência de forma significativa (controle: 3,9 ± 0,4). Aos 120 min, a morfina e

todas as doses de fitol, exceto a de 25 mg/kg, apresentaram aumento deste

parâmetro (morfina: 7,2 ± 0,6; 50: 8,8 ± 1,0; 100: 8,0 ± 1,2 e 200: 7,3 ± 1,0;

controle: 3,7 ± 0,7).

Conclusão:

Portanto, podemos observar que, em todos os testes, o fitol apresentou um

efeito antinociceptivo significativo, que pode ser interpretado como atividade

tanto em nível central como periférica.

Apoio Financeiro:

CNPq.

Gerado em: 2014-5-21 16:21:30

10.007 - Constituintes químicos do óleo essencial de folhas e frutos de

Schinus terebinthifolius Raddi provenientes do município de Neópolis,

Sergipe.

Nunes, R. K. V. , Nascimento, P. E. S. , Alves, P. B. , Santos, A. L. L. M. ,

Dias, A. S. , Santos, D. T. V. , Moraes, S. Z. C. , Araujo, B. S. , Shan, A. Y.

K. V. , Estevam, C. S. ,

Fisiologia - UFS Quimica - UFS

Introdução:

A espécie Schinus terebinthifolius Raddi, conhecida popularmente por aroeira,

é muito conhecida por seus frutos, explorados pelas indústrias alimentícias

devido ao aroma e sabor característico, advindos do óleo essencial o qual

possui propriedades biológicas cientificamente comprovadas. Da mesma

forma, também foram comprovadas do óleo essencial presente nas folhas.

Entretanto, a produção quali-quantitativa desses óleos, depende das variações

genéticas e ambientais cujas interações, originam a expressão de quimiotipos

específicos bem como à variação resultante da ontogenia que define o estádio

de desenvolvimento específico para obtenção de metabólitos alvos em

maiores quantidades, sendo uma ferramenta muito útil para a seleção de

materiais genéticos promissores. Neste sentido, propôs-se estudar

quimicamente os óleos essenciais presentes em folhas e frutos.

Objetivos:

Avaliar as similaridades e ou diferenças químicas entre os óleos essenciais

presentes nas folhas e nos frutos maduros de S. terebinthifolius Radii

provenientes do município de Neópolis Sergipe.

Métodos:

O estudo não utilizou experimento com animais e humanos. Os óleos foram

extraídos por hidrodestilação, por um período de 90 min, a partir do material

vegetal fresco e água destilada (1:10 para folhas, 1:5 para frutos). Após, foram

coletados do tubo de separação e armazenados em local livre de umidade e luz

até a análise química, feita por cromatografia gasosa acoplada à

espectrometria de massas (CG/EM) cujos padrões de similaridades estruturais

e abundâncias relativas foram relacionados.

Resultados:

Os óleos essenciais apresentaram uma constituição mono e sesquiterpênica

sendo observada maior diversidade de compostos presentes nos frutos

(Quadro1). Entretanto em ambos, folhas e frutos, os constituintes majoritários

foram identificados como ?-pineno e o ?-3-careno, compostos monoterpênicos

isoméricos. Vale ressaltar que embora os majoritários sejam os mesmos, a

proporção é bastante diferente. Nos óleos das folhas, a proporção entre ?-

pineno e??-3-careno é de 76,05% e 16,12% e no óleo dos frutos, 38,54% e

43,93%. Quadro1. Constituintes químicos do óleo essencial de folhas e frutos

de S. terebinthifolius Raddi analisados por CG/EM. Amostra vegetal: Frutos

Amostra vegetal: Folhas TR (min) Composto %GC-MS TR (min) Composto

%GC-MS 10.957 α-pineno 38.54 10.960 α-pineno 76.05 11.430 NI 0.10

11.505 canfeno 0.62 11.506 canfeno 0.64 12.570 β-pineno 1.88 12.316 NI

0.14 12.995 miceno 0.75 12.569 β-pineno 1.45 13.835 δ-3-careno 16.12

12.985 mirceno 2.61 14.560 limoneno 1.17 13.873 δ-3-careno 43.93 29.530

NI 0.99 14.385 s-cimeno 0.77 31.805 viridifloreno 1.35 14.550 limoneno 2.55

32.075 NI 1.07 14.685 1,8-cineol 0.36 17.412 NI 0.21 21.003 α-terpineol

0.73 24.722 (trans)- acetato de penocarvila 0.59 24.846 (cis)-acetato de

verbenila 0.45 25.098 (cis)- acetato de penocarvila 0.33 25.658

piperitenona 0.91 26.300 (trans)-acetato de carvila 0.48 26.472 acetato de

mirtenila 0.93 27.509 NI 2.63 27.913 α-copaeno 0.20 29.525 (E)-

cariofileno 0.62 31.805 ??patchouleno 0.33 35.011 oxido de cariofeleno

0.50

Conclusão:

Ó óleo essencial de frutos e folhas possuem os mesmos constituintes

majoritários, ?-pineno e ?-3-careno, que variam quantitativamente nos órgãos

vegetais estudados.

Apoio Financeiro:

FAPITEC-SE/CNPq.

Gerado em: 2014-5-21 16:21:30

10.008 - ATIVIDADE ANTINOCICEPTIVA DO ÓLEO ESSENCIAL

DE Hyptis martiusii Benth (CIDREIRA-BRAVA) ATRAVÉS DO

MODELO DE CONTORÇÕES ABDOMINAIS

Oliveira, C. D. M. , Ramos, A. G. B. , Neto, L. J. L. , Amaro, E. N. , Cruz,

L. P. , Delmondes, G. A. , Oliveira, M. R. C. , Menezes, I. R. A. ,

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA BIOLÓGICA - URCA

Introdução:

A dor é uma realidade intrínseca à natureza das espécies de animais

superiores, cujo papel fisiológico é de grande importância para o nosso

organismo, funcionando como um sintoma clínico de alerta para a detecção de

ameaças à integridade física ao organismo. As plantas medicinais são de

grande importância para a saúde de toda população mundial por seu potencial

terapêutico, comprovado através de ensaios pré-clínicos, partindo de pesquisas

etnofarmacológicas sobre espécies vegetais utilizadas na medicina popular.

Dentre essas espécies, destaca-se o Hyptis martiusii Benth (cidreira-brava),

pertencente ao gênero Hyptis e família Lamiaceae, utilizada pelas

comunidades da Chapada do Araripe para o tratamento de doenças

inflamatórias e do trato gastrointestinal.

Objetivos:

Verificar o potencial antinociceptivo do óleo essencial de Hyptis martiusii

Benth (OEHM), a partir da redução da dor de origem central.

Métodos:

18/2012.2 O projeto submetido ao Comitê de Ética em Pesquisa Animal

(CEUA) da Universidade Regional do Cariri, sendo aprovado sob o número

18/2012.2. Foram utilizados cinco grupos de camundongos (n=6) (Mus

musculus), albinos, da linhagem Swiss de ambos os sexos, com massa

corpórea entre 20-30g Os grupos de camundongos foram pré-tratados com

solução salina (0,1 mL/10g), indometacina 10mg/kg e OEHM 50, 70 e

100mg/kg, todos por via oral. Após 1h, estes receberam injeção

intraperitoneal de ácido acético (6%) diluído em salina. Logo após, os animais

foram colocados sob funis de vidro individuais transparentes, sendo durante

30 minutos, o número de contorções abdominais quantificado

cumulativamente. A análise estatística utilizada foi ANOVA de uma via

utilizando o teste de post hoc de Tukey, utilizando o software Prisma para

Windows.

Resultados:

O número de contorções provocadas pelo ácido acético, foi reduzido em

68,24% na indometacina e 29,40%, 30% e 54,51% pelo OEHM,

respectivamente, nas concentrações de 50, 75 e 100mg/kg em relação ao

grupo salina, demonstrando o potencial antinociceptivo significativo do óleo,

apresentado principalmente na concentração de 100mg/kg.

Conclusão:

O OEHM na concentração de 100mg/kg apresenta atividade antinociceptiva,

através da redução da dor de origem central e periférica.

Apoio Financeiro:

CAPES, CNPq, FUNCAP.

Gerado em: 2014-5-21 16:21:30

10.009 - CONCENTRAÇÃO MÍNIMA INIBITÓRIA (CMI)

CONCENTRAÇÃO MINIMA BACTERICIDA (CMB) DO ÁCIDO

DIVARICÁTICO PURIFICADO DO LÍQUEN RAMALINA ASPERA

FRENTE À STAPHYLOCOCCUS AUREUS OXACILINA –

RESISTENTE (ORSA)

Cordeiro, B. M. P. C. , Gomes, N. M. F. , Martins, M. C. B. , Arruda, F.

V. F. , Filho, R. J. N. C. , Baptista, N. M. Q., Silva, T. F. , Natividade, C.

M. C. L. , Conceição, E. M. , Sena, K. X. F. R. , Gusmão, N. B. , Silva, N.

H.,

Departamento de Bioquímica e Fisiologia - UFPE Biomedicina - FACIPE

Departamento de Ciencias Geograficas - UFPE Departamento de

Antibioticos - UFPE

Introdução:

Devido à alta incidência de doenças infecciosas que vêm surgindo causadas

por bactérias e pela resistência destes micro-organismos a alguns antibióticos,

faz-se necessário o estudo de novos compostos. Neste contexto encontram-se

as substancias liquênicas, que possuem ação antibiótica comprovada.

Objetivos:

O objetivo deste trabalho foi avaliar a concentração mínima inibitória (CMI) e

concentração mínima bactericida (CMB) do ácido divaricático purificado do

líquen Ramalina aspera frente à bactéria Staphylococcus aureus oxacilina-

resistente (ORSA).

Métodos:

Foi feito um teste de difusão em meio sólido, com uma linhagem de

Staphylococcus aureus não resistente com o extrato etéreo do líquen que

continha em sua composição como composto majoritário o ácido divaricático.

Os discos foram impregnados com 50 µL do extrato a uma concentração de

1mg/ml diluído em DMSO. Após os resultados do teste de disco resolveu-se

fazer um teste de CMI do ácido divaricático purificado utilizando uma

linhagem Staphylcoccus aureus resistente a oxacilina. O teste foi realizado

segundo os critérios da Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).

Foi preparada uma suspensão da cultura bacteriana (UFPEDA 728 ORSA),

com uma turbidez equivalente ao tubo 0,5 da escala Marc- Farland (108

UFC/ml). Em placa de 96 poços foi distribuído 100 µL do meio liquido

Muller-Hinton (MH) Nas duas primeiras colunas foram realizados,

respectivamente, os controles negativos e positivos, e logo após foi adicionado

mais 80 µL do meio de cultura na coluna 3, e mais 20 µL do composto

liquênico (concentração inicial 1280 µg/mL de DMSO). A partir desta coluna

foram feitas diluições sucessivas de 1:2, logo após foi adicionado 10 µL da

suspensão bacteriana. A placa foi incubada a 35 ºC por 18 h para crescimento

bacteriano. Em seguida, foi adicionado 20 µL de resarzurina (0,001%) aos

poços (revelador da reação). As placas foram incubadas a 35 ºC e após 2 h foi

realizada a leitura da reação. Após a leitura, foram semeados os poços a partir

de onde foi detectado a CMI ate o da mais alta concentração para determinar

CMB, em meio ágar M.H. O mesmo teste de CMI foi feito para o antibiótico

oxacilina que serviu para a comparação dos resultados, pois a linhagem do

micronismo escolhido é resistente ao antibiótico citado.

Resultados:

: O extrato etéreo mostrou, no teste de difusão em meio sólido, um halo de

inibição de 17mm. O ácido divaricático purificado mostrou uma CMI de 32

µg/mL para a cepa UFPEDA 728 ORSA e uma CMB a cima de 128 µg/mL. O

antibiótico oxacilina mostrou uma CMI e CMB maior que 128 µg/ml, ou seja,

não se mostrou eficaz em nenhuma concentração testada.

Conclusão:

Os resultados mostram que o ácido divaricático purificado é mais eficaz que o

antibiótico oxacilina para o combate a bactéria resistente e pode ser um novo

protótipo de fármaco natural.

Apoio Financeiro:

Capes

Gerado em: 2014-5-21 16:21:30

10.010 - EFEITO DO EXTRATO DE FOLHAS DE Schinus

terebinthifolius NA SOBREVIVÊNCIA E NO DESENVOLVIMENTO

DE LARVAS DE Aedes aegypti A PUPAS E ADULTOS

Procopio, T. F., Oliveira, A. R. C. , Pontual, E. V. , Martins, G. F. ,

Navarro, D. M. A. F. , Paiva, P. M. G. , Napoleao, T. H. ,

Bioquímica - UFPE Química Fundamental - UFPE Biologia Geral - UFV

Introdução:

O mosquito Aedes aegypti é o principal alvo no controle da dengue. A busca

por novos larvicidas tem crescido, uma vez que populações desse inseto têm

apresentado resistência aos inseticidas atualmente utilizados, os quais são

tóxicos para organismos não-alvo além de persistentes. Atividade larvicida de

lectinas (proteínas que reconhecem carboidratos) contra A. aegypti tem sido

descrita. Extrato de folhas de Schinus terebinthifolius (aroeira da praia)

contêm a lectina SteLL.

Objetivos:

Avaliar o efeito do extrato de folhas de S. terebinthifolius contendo lectina na

sobrevivência de larvas de A. aegypti, bem como na passagem das larvas para

os estágios de pupa e adulto.

Métodos:

De acordo com a instrução normativa do IBAMA Nº 141, de 19 de dezembro

de 2006, não é necessária autorização para trabalhos visando controle

artrópodes nocivos (ex. mosquitos) Folhas de S. terebinthifolius secas a 28 °C

por 3 dias foram trituradas e a farinha obtida foi homogeneizada (16 h, 4°C)

com NaCl 0,15 M na proporção de 10% (p/v). O extrato foi obtido após

centrifugação (15 min, 3.500 g, 4°C) e avaliado quanto à concentração de

proteínas. Cada bioensaio consistiu em manter 20 larvas no quarto estágio em

contato com 20 mL do extrato (4,0 a 15,0 mg/mL de proteína) ou água de

torneira (controle), com ou sem adição de alimento (ração para gato). Os

ensaios foram conduzidos em triplicata, fotoperiodismo 12:12 e temperatura

de 25–27ºC. Os números de larvas vivas e mortas, pupas vivas e mortas, bem

como de adultos emergidos foram registrados diariamente.

Resultados:

Em ambos os ensaios, com ou sem adição de ração, a taxa de sobrevivência

das larvas não foi alterada pelo extrato após 24 h de exposição. Entretanto,

todas as larvas tratadas expeliram todo o bolo alimentar revestido pela matriz

peritrófica. Esse fenômeno não foi visualizado no controle. Nos ensaios sem

adição de ração, as taxas de mortalidade das larvas expostas ao extrato durante

8 dias foram de 10,2%, 17,5%, 20,9% e 82,2% nas concentrações de 4,0, 6,0,

8,0 e 10,0 mg/mL, respectivamente. No controle, não houve mortalidade

larval. O número de larvas que evoluíram a pupas ou adultos foi maior

(p<0,05) no controle que em todos os tratamentos. A quantidade de adultos

emergidos foi de 4,65% e 4,4% nos tratamentos com o extrato a 8,0 e 10,0

mg/mL, enquanto que nas demais concentrações e no controle esse valor

variou entre 11,1% e 12,5%. Nos testes com adição de ração, os efeitos foram

menos pronunciados. Após 8 dias, não houve emergência de adultos apenas

no tratamento a 10,0 mg/mL e as taxas de mortalidade (0%, 10%, 26,3% e

31,5% para 4,0, 6,0, 8,0 e 10,0 mg/mL, respectivamente) foram menores que

no ensaio sem ração. Foi realizado então ensaio com o extrato a 15,0 mg/mL

de proteínas e adição de ração. Após 8 dias, não houve emergência de adultos

e a mortalidade larval foi de 42,1%. O ensaio foi acompanhado até o 23º dia e

apenas 15,8% dos indivíduos emergiram como adultos enquanto o restante

morreu no estágio larval (78,9%) ou de pupa (5,3%). No controle, 73,7% dos

indivíduos emergiram como adultos.

Conclusão:

O extrato de S. terebinthifolius demonstrou um efeito crônico sobre larvas de

A. aegypti, interferindo na sobrevivência e desenvolvimento. A eliminação do

bolo alimentar com a matriz peritrófica indica que ocorrem danos ao nível do

trato digestivo das larvas. O extrato foi ativo tanto na ausência quanto

presença de alimento, sugerindo que pode funcionar no controle de larvas

presentes em ambiente natural com alimento disponível. Ensaios para

determinação dos efeitos de preparação pura contendo SteLL estão em

andamento.

Apoio Financeiro:

Gerado em: 2014-5-21 16:21:30

10.011 - Estudo da hidrofobicidade do ácido protocatecúico e seus ésteres

alquílicos na inibição do complexo NADPH oxidase e modulação de

citocinas

Faria, C. M. Q. G, Paracatu, L. C. , Quinello, C, Renno, C. , Palmeira, P.,

Fonseca, L. M. , Ximenes, V. F. ,

Análises Clínicas - UNESP Departamento de Pediatria - USP

Introdução:

A NADPH oxidase compreende uma família de complexos de subunidades

multienzimáticos que catalisa a redução do oxigênio molecular para radical

ânion superóxido (O2•-). Processos deletérios resultantes da ativação de

NADPH oxidase e da produção excessiva de espécies reativas de oxigênio

(EROs) estão envolvidos no desenvolvimento e progressão de uma variedade

de doenças inflamatórias, vasculares e degenerativas. Para tanto, inibidores

específicos e potentes de NADPH oxidase são potenciais agentes

terapêuticos.

Objetivos:

Considerando que determinados fenóis, como o ácido protocatecúico (P0),

além de apresentarem alto potencial antioxidante, apresentam maior

lipofilicidade e melhor interação com modelos celulares após sua

esterificação, avaliamos a relação do aumento da hidrofobicidade das

substâncias em estudo com relação aos efeitos no metabolismo oxidativo dos

leucócitos humanos (no que diz respeito a inibição de NADPH oxidase) e na

modulação de citocinas.

Métodos:

Protocolo: CEP/FCF/Car nº 26/2 Células polimorfonucleares (PMN) e

mononucleares (PBMC) foram separadas por gradiente de densidade

(Protocolo: CEP/FCF/Car nº 26/2011). Os ésteres etila (P2), butila (P4),

heptila (P7) e decila (P10) foram sintetizados e seu potencial de inibição do

O2•- e peróxido de hidrogênio (H2O2) intra e extracelular foram estudados

utilizando WST-1, DHR (citometria de fluxo) e Amplex Red,

respectivamente. A dosagem de citocinas pró (TNF-a) e anti-inflamatórias

(IL-10) foi realizada por Ensaio Imunoenzimático a partir do sobrenadante

resultante da cultura de monócitos. A diferença estatística foi determinada por

One-way Anova e teste de comparação múltipla de Tukey. Um valor de

p<0,05 foi considerado estatisticamente significativo.

Resultados:

Os ésteres apresentaram maior potencial de inibição de O2•- liberado por

PMN ativados quando comparados ao seu ácido precursor (10µM – P0,

1,10%; P2, 12,51%; P4, 35,63%; P7, 93,46%; P10, 81,09%). O mesmo

resultado foi observado em relação a inibição de H2O2 intracelular liberado

por neutrófilos ativados (200µM – P0, 12,17%; P4, 74,56%; P7, 56,92%; P10,

34,06%), (500µM – P0, 11,52%; P4, 87,74%; P7, 75,64%; P10, 47,60%) e

monócitos ativados (200µM – P0, 19,69%; P4, 31,94%; P7, 53,06%; P10,

33,73%), (500µM – P0, 22,70%; P4, 33,46%; P7, 58,87%; P10, 31,08%).

Com relação ao H2O2 extracelular liberado por PMN ativados (10µM – P0,

52,05%; P7, 94,18%). E PBMC ativados: (10µM – P0, 38,67%; P7, 76,83%).

Os ésteres também foram capazes de diminuir a produção de ambas citocinas

estudadas com maior eficiência, em relação ao P0: TNF-a pg/mL (70µM – P0,

1588,4; P2, 886,7; P4, 449,2; P7, 183,5; P10, 87,36; C+, 2814,9). IL-10

pg/mL (70µM – P0, 460,2; P2, 35,7; P4, 10,7; P7, 23,6; P10, 11,3; C+,

1075,5).

Conclusão:

Os resultados mostraram que o aumento da hidrofobicidade provocado pela

esterificação do precursor P0 pode ser um fator determinante no que diz

respeito ao aumento do potencial de inibição da enzima NADPH oxidase e das

EROs produzidas a partir da sua ativação. E que mesmo não apresentando

diferenças significativas entre os ésteres em relação a diminuição da produção

das citocinas estudadas, os resultados evidenciam que os ésteres do ácido

protocatecúico são substâncias promissoras no tratamento de doenças crônicas

inflamatórias.

Apoio Financeiro:

Os resultados mostraram que o aumento da hidrofobicidade provocado pela

esterificação do precursor P0 pode ser um fator determinante no que diz

respeito ao aumento do potencial de inibição da enzima NADPH oxidase e das

EROs produzidas a partir da sua ativação. E que mesmo não apresentando

diferenças significativas entre os ésteres em relação a diminuição da produção

das citocinas estudadas, os resultados evidenciam que os ésteres do ácido

protocatecúico são substâncias promissoras no tratamento de doenças crônicas

inflamatórias.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:04

10.012 - Relação entre Estrutura Química e Inibição do Complexo

NADPH oxidase: Ácido cafeico versus Ester Fenetílico do Ácido Cafeico.

Paracatu, L. C. , Faria, C. M. Q. G. , Fonseca, L. M. , Ximenes, V. F. ,

Analises Clinicas - UNESP Quimica - UNESP

Introdução:

Inúmeras patologias têm a sua gênese e/ou progressão relacionadas à

produção desregulada de intermediários oxidantes. O complexo

multienzimático NADPH oxidase é um dos componentes de maior relevância

neste contexto, pois é uma das principais fontes de ânion superóxido, expresso

em inúmeros tecidos, incluindo leucócitos e células do tecido vascular. O

desenvolvimento de inibidores eficientes deste complexo enzimático poderá

significar uma nova terapêutica para o tratamento de doenças inflamatórias

crônicas e vasculares.

Objetivos:

Neste trabalho estudamos como a hidrofobicidade molecular poderia

influenciar no desenvolvimento de novos inibidores do complexo NADPH

oxidase. Para isso, o ácido fenólico conhecido como ácido cafeico (CA) foi

estudado e comparado com o seu derivado éster fenetílico do ácido cafeico

(CAPE), o qual além de apresentar maior hidrofobicidade, apresenta inúmeras

propriedades biológicas relatadas na literatura científica.

Métodos:

CAAE: 21496413.8.0000.5426 Neutrófilos humanos foram coletados e

separados por gradiente de densidade (comitê de ética: CAAE:

21496413.8.0000.5426). A capacidade sequestradora de radicais livres das

substâncias testadas foi determinada pelo seu potencial de redução sobre o

radical livre 2,2-difenil-1-picril-hidrazila (DPPH) e de radical peroxila gerado

pela decomposição térmica de 2,2`-azobis 2-amidinopropane (AAPH). No que

diz respeito aos estudos celulares, a capacidade de produção de ânion

superóxido pelos neutrófilos ativados foi avaliado pela redução do sal de

tetrazólio solúvel (WST-1) e a produção de peróxido de hidrogênio pela sonda

fluorescente Amplex Red. As análises estatísticas foram feitas pelo método

ANOVA.

Resultados:

Para o teste de redução de DPPH, não observamos diferenças em suas

capacidades de sequestro de radicais livres (IC50: CAPE = 16,46 µM e CA =

15,67µM. O CAPE foi mais efetivo como supressor de radicais peroxila,

embora a diferença foi pouco expressiva (TEAC CAPE: 1.43±0,12 versus

TEAC CA: 1.77±0,12). Por outro lado, o Cape foi significativamente mais

eficiente como inibidor da geração de ânion superóxido pelos neutrófilos

ativados (CAPE 90% ±0,94 versus CA 11%±5,54, quando utilizados na

concentração de 10 µM). Tanto o CAPE quanto o CA não foram capazes de

neutralizar ânion superóxido produzidos quimicamente, portanto os resultados

obtidos com células sugerem a inibição da atividade enzimática do complexo

NADPH oxidase e não a simples ação scavenger. O mesmo padrão se repetiu

quando avaliados suas capacidade como inibidores da produção de peróxido

de hidrogênio (CAPE 95%±0,38 versus CA 56%±6,59).

Conclusão:

Pode-se concluir que a alteração de hidrofobicidade desses ácidos fenólicos

não alterou significativamente suas capacidades como espécies anti-

radicalares. No entanto, a maior hidrofobicidade do CAPE propiciou seu

acesso ao interior da célula e provocou a inibição do complexo NADPH

oxidase. Esta propriedade pode ser relevante no desenvolvimento de

inibidores do complexo NDPH oxidase.

Apoio Financeiro:

CAPES e Fapesp.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:04

10.013 - Atividade antinociceptiva e anti-inflamatória do derivado

aminoguanidínico substituído com grupamento 3,5-di-terc-butil-fenol.

Silva, J. P. N. , Ferro, J. N. S. , França, P. H. B. , Ribeiro, E. A. N. ,

Ferreira, E. , Araujo-Junior, J. X. , Barreto, E. O. ,

Biologia Celular e Molecular - ICBS Famácia - ESENFAR Química - IQB

Introdução:

As modificações moleculares fazem parte de estratégias de planejamento

para o desenvolvimento de novos fármacos. Diferentes estudos reportam as

atividades antitumorais, antidiabéticas, antimaláricas e angiogênicas dos

derivados da aminoguanidina. Considerando que o radical guanidina mostra-

se como um ponto chave para a atividade biológica, decidimos substituir o

anel imidazol por um anel de fenilo uma vez que esta oferece a vantagem de

modificação do núcleo. Este processo resultou o derivado aminoguanidínico

2-[(3,5-di-terc-butil-4-hidroxifenil)metileno]-

hydrazinecarboximidamidecloridrato, chamado de WE10. Porém, até o

momento não foram descritos os efeitos deste composto, WE10, sobre a dor e

inflamação.

Objetivos:

Assim, decidimos avaliar a atividade antinociceptiva e anti-inflamatória do

WE10.

Métodos:

CEUA (nº 009481/2011-21) O derivado WE10, foi obtido a partir da reação

direta do aldeído aromático com cloridrato de aminoguanidina em etanol a

95%, sob refluxo. A reação foi monitorada por CCD. O solvente foi removido

sob pressão reduzida e a trituração do resíduo com acetato de etila forneceu o

derivado WE-10 como pó amorfo branco, com 90% de rendimento, e sua

estrutura foi devidamente elucidada através de espectros de RMN de 13C e

1H, e Infravermelho. Camundongos Swiss (20–35 g, n = 6) machos foram

tratados por via intraperitoneal com salina (NaCl; 0,9%) ou WE10 (0,1–10

mg/kg) e, 1 h após, submetidos ao estímulo nociceptivo. O efeito

antinociceptivo do WE-10 foi avaliado pelos testes de contorção abdominal

induzida por ácido acético (0,6%; 10 μl/g, i.p.), formalina (2,5% em 20 μl),

capsaicina (2 μg/pata) e placa-quente (54 ± 1ºC). O teste do rota-rod foi

utilizado para avaliar a atividade motora. Os antagonistas ioimbina (1 mg/kg),

atropina (5 mg/kg) e glibenclamida (10 mg/kg) foram utilizados para elucidar

os mecanismos de ação do WE10 sobre a resposta nociceptiva. Em outro

experimento, a atividade anti-inflamatória foi avaliada utilizando o modelo de

edema de pata induzido por carragenina. In vitro, a citotoxicidade foi avaliada

pelo ensaio de MTT com macrófagos expostos ao WE10 por 24 h. Os

resultados foram analisados estatisticamente por ANOVA. Este estudo foi

realizado em estrita conformidade com as recomendações do Guia para o

Cuidado e Uso de Animais de Laboratório da Sociedade Brasileira de

Laboratório de Ciência Animal (SBCAL). Cabe destacar ainda que os efeitos

antinociceptivo e anti-inflamatório do composto WE10 foram previstos no

projeto apresentado ao Comitê de Ética em Pesquisa da UFAL (nº

009481/2011-21).

Resultados:

No modelo de contorção abdominal o tratamento com WE10 (0,1; 1; 5 e 10

mg/kg) reduziu respectivamente em 53,3; 89,4; 90,1 e 97,5 % o número de

contorções. No teste de formalina, o WE10 (10 mg/kg) inibiu apenas a

resposta nociceptiva da segunda fase quando comparado ao controle (de 221,8

± 35,06s para 102,8 ± 5,17s). No modelo de contorção, nenhum dos

antagonistas utilizados foi capaz de reverter os efeitos antinociceptivos

apresentados pelo WE-10. Na nocicepção induzida por capsaicina, o WE10

(10 mg/kg) reduziu a resposta nociceptiva para 27±5 s quando comparado ao

controle (48±3,8 s). Nos testes de placa quente e rota-rod, animais tratados

com WE10 não exibiram alteração na percepção ao estímulo térmico ou no

desempenho motor. Na inflamação induzida por carragenina, o tratamento

com WE10 (10 mg/kg) inibiu a formação do edema em 46% após 4 h do

estímulo. Em adição, a viabilidade de macrófagos expostos ao WE10 (10 ou

100 μM) por 24h não foi alterada.

Conclusão:

Estes resultados indicam que o derivado aminoguanidínico WE10 possui

efeitos antinociceptivos periféricos dependentes de receptores vaniloides,

além da atividade anti-inflamatória. Além disso, este derivado não apresentou

efeitos citotóxicos in vitro.

Apoio Financeiro:

CAPES, CNPq e FAPEAL.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:04

10.014 - AVALIAÇÃO DA CITOTOXICIDADE E ATIVIDADE

LEISHMANICIDA E TRIPANOCIDA in vitro DOS EXTRATOS

HIDROALCOÓLICOS DE Passiflora cincinnata Mast L.

Rodrigues, C. K. S. , Felipe, C. F. B. , Coutinho, H. D. M. , Costa, J. G. M.

, Coronel, C. , Gomez, M. C. V. , Nascimento, E. P. , Delmondes, G. A. ,

Figueiredo, F. R. S. D. N. , Tintino, S. R. , Oliveira, L. R. , Sales, V. S. ,

Menezes, I. R. A. , Kerntopf, M. R. ,

Departamento de Química Biológica - URCA Centro para el Desarrollo

de La Investigación Cent - CEDIC

Introdução:

A doença de Chagas, causada pelo Trypanosoma cruzi, pode ser transmitida

aos humanos através das fezes dos insetos triatomíneos infectados, alimentos

contaminados, transfusão sanguínea e transplante de órgãos a partir de

doadores infectados e por via transplacentária (WHO. 2013. Disponível em:

http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs340/en/). A leishmaniose é uma

doença causada por protozoários do gênero Leishmania, podendo ser

transmitida ao hospedeiro definitivo pela picada de flebotomíneos fêmeas

infectadas, podendo apresentar-se sob a forma visceral, cutânea ou

mucocutânea (Parasitol., Guan. Koogan, 3ª ed.; 241, 2001). Atualmente os

fármacos disponíveis para a terapia convencional, tanto da leishmaniose

quanto da doença de Chagas, são altamente tóxicos, sendo esse um dos

motivos que dificultam à adesão terapêutica e, assim, levando à busca e

desenvolvimento de novas drogas eficazes e seguras para o tratamento dessas

enfermidades.

Objetivos:

Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antiparasitária in vitro

contra as formas promastigota dos parasitas Leishmania braziliensis e

Leishmania infantum e epimastigota de Trypanosoma cruzi, utilizando os

extratos hidroalcoólicos das folhas, casca, sementes e caule da espécie

Passiflora cincinnata Mast L., além de avaliar a atividade citotóxica em

fibroblasto.

Métodos:

Não se aplica, pois não fizemos o uso de animais nem de humanos. Nos testes

in vitro para a avaliação da atividade antipromastigota e antiepimastigota, bem

como a citotoxicidade, foram realizados em microplacas com 96 cavidades,

com culturas na fase exponencial, na qual cada concentração foi testada em

triplicata, seguindo a metodologia descrita por Vega et al. (2005). Para a

avaliação da atividade leishmanicida foram utilizadas as linhagens

promastigotas de L. braziliensis (MHOM/CO/88/UA301) e L. infantum

(MHOM/ES/92/BCN83), cultivadas a 22° C em meio Schneider’s Drosophila,

suplementado com soro fetal bovino a 20%. No tocante a avaliação da

atividade tripanocida, realizamos testes in vitro de T. cruzi utilizando o clone

CL-B5 (BUCKNER et al., 1996). Nos ensaios de citotoxicidade utilizamos a

linhagem de fibroblastos NCTC929, cultivada em Minimal Essential Medium

(Sigma).

Resultados:

Os resultados demonstram que os extratos das folhas, casca e sementes não

foram eficazes contra L. brasiliensis e T. cruzi, porém, o Extrato

Hidroalcoólico do Caule de P. cincinnata (EHCPC) promoveu uma inibição

de 29,12% contra T. cruzi numa concentração de 500 µg/mL, entretanto,

contra a L. infantum, o EHCPC foi ineficaz em todas as doses testadas. O

extrato da casca de P. cincinnata foi o que apresentou a melhor atividade

contra as formas parasitárias de L. infantum, causando um percentual de

morte >20% nas concentrações de 250 a 1000 µg/mL. Referente à toxicidade,

o extrato das folhas foi o que apresentou maior citotoxicidade, quando

comparado com os demais extratos, causando a mortalidade de 68,63% dos

fibroblastos numa concentração de 1000 µg/mL.

Conclusão:

O presente estudo revelou que os extratos testados não apresentam atividades

leishmanicida e tripanocida clinicamente relevante. Entretanto, devido à

pequena citotoxicidade revelada, a P. cincinnata abre espaço para novos

estudos biológicos in vivo.

Apoio Financeiro:

URCA, CEDIC, CAPES, FUNCAP e CNPq.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:04

10.015 - EFEITO FOTOPROTETOR DO 3-CUMARINOL SOBRE

GAMETAS E EMBRIÕES DE OURIÇOS-DO-MAR EXPOSTOS À

UVB

Leite, J. C. A. , Junior, F. J. B. M. , Araujo, R. S. A. , Barbosa-filho, J. M.

, Siqueira-junior, J. P. , Marques-Santos, L. F.,

DBM - UFPB PgPNSB - UFPB

Introdução:

Nos últimos anos, a incidência de várias patologias relacionadas à radiação

UVB, incluindo o câncer, tem aumentado em níveis alarmantes e a tendência é

continuar crescendo até o fim do século. Pesquisas recentes têm identificado

produtos naturais de diversas classes com atividade fotossensibilizante ou

fotoprotetora à radiação UVB. Entre esses compostos, destacam-se os

derivados cumarínicos que podem ser utilizados como drogas na

fotoquimioterapia de certas patologias. O desenvolvimento embrionário de

ouriços-do-mar tem sido utilizado na prospecção de produtos naturais com

propriedades fotoativas, uma vez que a obtenção dos gametas é realizada de

forma não invasiva e milhões de gametas maduros são obtidos a partir de um

único indivíduo. Além disso, a fertilização in vitro ocorre com alta eficiência e

o desenvolvimento embrionário é rápido e sincrônico.

Objetivos:

Desta forma, o objetivo do presente trabalho foi investigar a fotoatividade do

3-cumarinol, um derivado sintético da cumarina, contra os efeitos danosos da

UVB sobre gametas e embriões do ouriço-do-mar Echinometra lucunter.

Métodos:

Não é necessária a submissão do presente projeto ao Comitê de Ética em

Pesquisa, uma vez que a LEI Nº 11.794, de 8 de outubro de 2008, que

regulamenta o inciso VII do §1o do art. 225 da Constituição Federal,

estabelecendo procedimentos para o uso científico de animais, aplica-se

somente aos animais das espécies classificadas como filo Chordata, subfilo

Vertebrata (§3o, art. 2). Os animais foram coletados no litoral de João Pessoa,

Paraíba – Brasil (código de autorização do ICMBio: 32105-1) e os gametas

foram obtidos por injeção intracelomática de KCl. Os gametas ou embriões

(10 minutos após a fertilização) foram irradiados, com diferentes doses de

UVB (0,056 a 0,9 kJ m-2), na presença ou ausência do 3-cumarinol (1 µM). Os

embriões foram mantidos na ausência de luz branca e o desenvolvimento

embrionário foi monitorado sob microscopia óptica comum.

Resultados:

O 3-cumarinol induziu um aumento do percentual de desenvolvimento em

embriões derivados de espermatozoides irradiados em comparação com o

controle irradiado e não tratado. A percentagem de embriões, submetidos à

dose de 0,056 kJ m-2, que realizaram a primeira clivagem, foi de

52,75 + 1,71%; enquanto que no grupo tratado com 3-cumarinol o percentual

foi de 80,05 + 2,20%. O 3-cumarinol também induziu um aumento no

percentual de desenvolvimento em embriões derivados de óvulos irradiados

em comparação com o controle irradiado e não tratado. A percentagem de

embriões, submetidos à dose de 0,45 kJ m-2, que realizaram a primeira

clivagem, foi de 52,13 + 2,66%; enquanto que no grupo tratado com 3-

cumarinol o percentual foi de 92,53 + 2,93%. De forma semelhante, o

percentual de desenvolvimento dos embriões irradiados (0,9 kJ m-2) e tratados

com 3-cumarinol foi maior que o apresentado pelo grupo controle irradiado e

não tratado: 48,46 + 1,21% e 89,10 + 1,41%, respectivamente. Resultados

semelhantes foram obtidos na progressão para o estágio de 4-células.

Conclusão:

Esses dados demonstram um relevante efeito fotoprotetor do 3-cumarinol.

Estudos prévios relataram atividade antioxidante do 3-cumarinol (Bioorg Med

Chem, 12:5611, 2004), o que pode explicar os efeitos observados em nosso

trabalho. Entretanto, estudos adicionais devem ser conduzidos para investigar

os mecanismos moleculares envolvidos na fotoproteção atribuída ao 3-

cumarinol.

Apoio Financeiro:

CAPES/CNPq.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:04

10.016 - Atividade citotóxica de um derivado tiazólico contra célula HEP-

2 (carcinoma de cólon-humano)

Silva, T. G. , Silva, I. M. , Gadelha, G. C. M. , Albuquerque, J. F. C. ,

Departamento de Antibióticos-UFPE - UFPE

Introdução:

Os tiazois são compostos heterocíclico que apresentam um átomo de

nitrogênio, outro de enxofre e duas ligações duplas no anel aromático de cinco

membros com amplo espectro de atividade biológica tais como: anticâncer,

antibacteriana, antidepressiva, anti-inflamatória entre outras Quím. Nova, 28;

77, 2005. O tiazol é utilizado como intermediário na fabricação de drogas

sintéticas, fungicidas e corantes. O anel tiazólico é encontrado naturalmente

na vitamina B1 (tiamina) Intern.J.Pharm.Sci & Drug Res., 1; 136-143, 2009.

Por apresentar diferentes atividades biológicas descritas, o núcleo tiazólico

atrai interesse no desenvolvimento de compostos farmacologicamente ativos,

E.J.Med.Chem. 45; 651-660, 2010.

Objetivos:

Sintetizar e testar um derivado tiazólico para determinar a possível atividade

citotóxica.

Métodos:

O experimento foi feito em células, por isso não tem código. O composto

sintetizado foi o 4-nitro-benzilideno-[4-(4-cloro-fenil)-tiazol-2-il]-amina (Ju-

433). A síntese procedeu reagindo por 2 horas quantidades equimoleculares de

4-(4-clorofenil)-2-aminotiazol e 4-nitro-benzaldeido dissolvido em Metanol e

adicionado HCl(conc.). O produto foi cristalizado, pesado, determinado a

estrutura química e submetido ao teste para verificar a citoxicidade in vitro da

substância pura. A linhagem celular tumoral utilizada foi HEP-2 (carcinoma

de cólon-humano). Esta linhagem foi cultivada em meio RPMI 1640,

suplementado com 10 % de soro fetal bovino e 1 % de antibiótico e mantido

em estufa a 37 °C sob atmosfera contendo 5 % de CO2. A amostra foi diluída

em DMSO puro estéril e testada a viabilidade celular na concentração de 25

µg/mL. Análise da citotoxicidade pelo método do MTT-brometo de 3-(4,5-

dimetil-2-tiazol)-2,5-difenil-2-H-brometo de tetrazolium, é uma análise

colorimétrica que converte o sal 3-(4,5-dimetil-2-tiazol)-2,5-difenil-2-H-

brometo de tetrazolium (MTT) em azul de formazan, a partir de enzimas

mitocondriais presentes somente nas células metabolicamente ativas. O estudo

citotóxico pelo método MTT permite definir facilmente a citotoxicidade, mas

não o mecanismo de ação. As células foram plaqueadas na concentração de

1x105 células/mL. A substância dissolvida em DMSO foi diluída em série no

meio RPMI para obtenção das concentrações finais e adicionada em placa de

96 poços (100 μL/poço). As placas foram incubadas por 72 horas em estufa a

5 % de CO2 a 37 °C. Em seguida, foram adicionados 25 mL da solução de

MTT, as placas incubadas por três horas. A absorbância foi lida após

dissolução do precipitado em DMSO puro em espectrofotômetro.

Resultados:

O experimento foi testado em triplicata e analisado no programa GraphPad

Prism pela média e desvio. O produto apresentou ação citotóxica significante

(acima de 50%) para células HEp-2. O potencial de inibição da linhagem foi

84,4±0,6%. Para avaliação do resultado foi considerado o parâmetro: amostras

sem atividade (1 a 20 % de inibição do crescimento celular), com pouca

atividade (inibição de 20 a 50 %), com atividade moderada (inibição de 50 a

70 %), com muita atividade (inibição de 70 a 100 %).

Conclusão:

O derivado tiazólico apresentou atividade antiproliferativa frente à célula

neoplásica derivada de carcinomas humanos HEP-2 (epidermóide de laringe)

com 84,4±0,6% de inibição.

Apoio Financeiro:

CNPq

Gerado em: 2014-5-21 16:22:04

10.017 - LEVANTAMENTO DE PLANTAS MEDICINAIS

COMERCIALIZADAS EM UM MERCADO PUBLICO DE RECIFE/PE

UTILIZADAS NO TRATAMENTO DE AMIDALITE

Silva, I. B. , Lima, I. R. , Silva, T. M. S. , Leite, S. P. ,

Departamento de Histologia e Embriologia - UFPE

Introdução:

Desde a antiguidade, o homem utiliza conhecimento popular para obtenção de

cura das doenças, de forma empírica ou intuitiva, onde acredita-se, por

exemplo, que determinada planta pode eliminar um determinado mal físico

(SANTOS; DIAS; MARTINS, 1995). Muitas espécies são utilizadas para

tratamento de infecções e processos inflamatórios, sem ter, contudo eficácia

comprovada cientificamente (Santos, et al. 2013). A amigdalite aparece

geralmente como parte de uma infecção generalizada da faringe, pode ser

causada por vírus ou bactérias, geralmente da família dos estreptococos, sendo

os sintomas normalmente semelhantes. Quando causada por bactérias deve ser

tratada com antibióticos. No entanto, é possível verificar que diversas plantas

são utilizadas, na medicina popular, para tratamento dessa afecção. (Catão, et

al.2012).Trabalhos reportando o estudo com plantas medicinais utilizadas no

tratamento de afecções bucais são escassos, no entanto Catão, et al.(2012)

apresenta uma análise de algumas ervas utilizadas para tratamento de

infecções desses gêneros, as mesmas apresentaram resultado satisfatório,

sugerindo assim, uma alternativa de tratamento. Nesse trabalho não houve

experimentação com humanos ou animais.

Objetivos:

Realizar um levantamento no Mercado São José - Recife/PE das espécies de

plantas comercializadas com a finalidade de tratar infecções de gargantas

(amidalites) causadas por bactérias.

Métodos:

Não houve experimentação com animais ou humanos A coleta de dados para

este trabalho foi realizada no Mercado Público de São José em Recife-PE.

Proprietários dos boxes que comercializam ervas medicinais foram

entrevistados através de um questionário semi-estruturado e responderam

perguntas abrangendo modo de obtenção, finalidade terapêutica, uso e parte

da planta utilizada para tratamento de infecções. O número de questionários

aplicados (10) foi feito em função do número de boxes (16) de plantas

medicinais ao redor do Mercado de São José e da disponibilidade dos

vendedores em responder os questionários.

Resultados:

Os resultados mostraram que as plantas mais citadas para tratar processos

infecciosos da garganta foram: Gengibre (28%); Romã (21%); Transagem

(18%); Aroeira (15%); Babatenon (9%); outras (9%). As partes mais

utilizadas são caule e folhas (62%), frutos e sementes (38%). A preparação

prevalente das ervas foi chá, sendo utilizado como gargarejo. Após

levantamento na literatura foi constatado que 50% das plantas acima citadas

apresentam ação anti-inflamatória e 38% tem efeito antibiótico.

Conclusão:

Nesse estudo foi possível verificar que a maioria das plantas utilizadas no

tratamento de processos infecciosos possui atividade anti-inflamatória. Este é

um dado preocupante, um alerta para a população que faz uso dessas plantas.

Evidenciando a necessidade de fiscalização dos órgãos competentes, e a

atuação dos mesmos nas feiras e mercados públicos.

Apoio Financeiro:

CAPES; UFPE

Gerado em: 2014-5-21 16:22:04

10.018 - GESTATIONAL EXPOSURE TO GENISTEIN INHIBITS THE

DELETERIOUS EFFECTS OF BISPHENOL-A ON UTERINE

DEVELOPMENT OF SPRAGUE-DAWLEY RATS OFFSPRING

Romualdo, G. R. , Grassi, T. F. , Fragoso, M. F. , Barbisan, L. F. ,

Departamento de Patologia - FMB Departamento de Morfologia - IBB

Introdução:

Bisphenol A (BPA), a component of epoxy resins and polycarbonate plastics,

is a hormonally active chemical and a potential endocrine disruptor

(Endocrinology, 147:56, 2006). Previous studies showed that BPA caused

long-term adverse effects on female reproductive tract when exposure

occurred during critical periods of sex organ development (Reprod. Toxicol.

24:253, 2007). Genistein, one of the major soy isoflavones, has showed

protective effects against mammary and prostate cancers by regulating

specific sex steroid receptors pathways (J. Nutr. 132:552, 2002)

Objetivos:

Evaluate the modifying effects of gestational exposure to BPA alone or

associated with genistein on uterine morphogenesis in female Sprague-

Dawley (SD) rats offspring.

Métodos:

447-CEUA Pregnant Sprague Dawley females were fed basal diet or diets

containing genistein (250 mg/kg) during all the gestational period. Pregnant

SD females also received BPA (25 µg/kg or 250 µg/kg body weight) by

gavage from GD (Gestacional Day) 10 until GD 21. Female SD offspring

were euthanized on PND (Post-natal Day) 21 and PND 226 (n=15 per group).

On PDN 21, uteri were removed for immunohistochemical analysis for

Estrogen Receptor-α [ER-α] and Progesterone Receptor [PR]. On PND 226,

uteri were removed for histological analysis and determination of incidence of

uterine proliferative lesions. Data from immunohistochemical analysis were

analyzed by one-way analysis of variance (ANOVA) followed by the Tukey

test (p<0.005). Data from incidence of proliferative lesions were analyzed by

Chi-Square test or Fisher’s exact probability test (p<0.005). Protocol Number

447-CEUA.

Resultados:

On PND 21, BPA treatment alone (250 μg/kg) significantly reduced (p=0.021)

uterine epithelial ER-α expression (positive cells/epithelial area) when

compared to control group (0.62 ± 0.19 vs. 1.27 ± 0.46). Moreover, BPA

treatment alone (25 μg/kg) significantly reduced (p=0.046 and p=0.030,

respectively) uterine epithelial PR expression (positive cells/epithelial area)

when compared to control and genistein and BPA (25 μg/kg)-treated groups

(0.30 ± 0.13 vs. 0.71 ± 0.17; 0.73 ± 0.21). On PND 226, BPA treatment alone

(250 μg/kg B.W.) significantly increased (p=0.002) the incidence of uterine

proliferative papillary lesions when compared to control group (5/12 (41,67

%) vs. 0/12 (0%)). Genistein treatment significantly reduced (p<0.001) the

incidence of proliferative papillary lesions in BPA-exposed (250 μg/kg B.W.)

offspring when compared to the group treated with BPA alone (0/12 (0 %)

(both) vs. 5/12 (41,67 %)).

Conclusão:

The results suggest that gestacional exposure to BPA promotes uterine

disruption in offspring. However, gestational exposure to genistein inhibits of

noxious effects of BPA on uterine development of offspring.

Apoio Financeiro:

FAPESP

Gerado em: 2014-5-21 16:22:04

10.019 - AVALIAÇÃO DOS EFEITOS VASCULARES E RENAIS DE

Aspidosperma subincanum Mart.

Ribeiro, E. F. , Reis, C. F. , Andrade, D. M. L. , Garrote, C. F. , Carvalho,

F. S. , Rocha, M. L. ,

Laboratório de Farmacologia Cardiovascular - UFG Laboratório de

Pesquisa em Produtos Naturais - UFG

Introdução:

O guatambu (Aspidosperma subincanum Mart.) é uma espécie utilizada

popularmente no tratamento de doenças cardiovasculares como dislipidemias,

hipertensão e impotência sexual. Porém, seus efeitos biológicos foram pouco

elucidados cientificamente.

Objetivos:

Determinar in vitro o efeito vasodilatador do Extrato Etanólico de

Aspidosperma subincanum Mart. (EEAS) em artérias aorta isoladas de ratos.

Ainda, verificar, se o EEAS produz efeito diurético em ratos normotensos.

Métodos:

187/2011 Foram utilizados ratos Wistar fêmeas (180-210g; n=5 por grupo; 5-

6 semanas) mantidos em biotério climatizado com ciclo claro-escuro de 12h e

livre acesso à água e ração. O projeto foi aprovado pelo comitê de ética no uso

de animais (CEUA/UFG 187/2011, com ementa para experimentação in vivo).

Para os experimentos, foram isoladas as artérias aorta dos ratos e montadas

em forma de anéis com e sem endotélio em banho para órgãos isolados para

análise da reatividade vascular e mecanismos relacionados. Para análise do

efeito diurético, animais foram pesados e confinados individualmente em

gaiolas semi-metabólicas. Após jejum de 8h, todos os animais receberam

solução salina (NaCl 0,9%, 1mL/100g) via oral. Após 45min, os animais

foram divididos em 4 grupos e receberam por gavagem intra-gátrica volumes

iguais de: 1) veículo (NaCl 0,9%); 2) EEAS 60mg/Kg; 3) EEAS 120mg/Kg;

4) furosemida 20 mg/Kg. O volume urinário foi coletado e medido nos

períodos de 1, 2, 4, 6, 8, 12, 24h após o tratamento dos animais e análises

físico-químicas foram realizadas (fita reagente Accu-Tell). Para análise dos

dados utilizou-se software GraphPad Prism® versão 5.01, empregando-se

ANOVA e Newman-Keuls (p<0,05). Resultados expressos como média ± erro

padrão da média.

Resultados:

Em artérias isoladas pré-contraídas com fenilefrina, o EEAS (0-27μg/mL)

induziu relaxamento concentração-dependente de forma independente do

endotélio. O pré-tratamento das artérias com CPA (ácido ciclopiazônico), um

inibidor da bomba Ca2+ do retículo sarcoplasmático, reduziu o relaxamento.

O EEAS reduziu o efeito contrátil da fenilefrina e do Bay K 8644 (ativador

dos canais para Ca2+ do tipo L) de forma concentração-dependente. No teste

de diurese, o volume urinário foi aumentado (p<0,001) na 1ª hora após o

tratamento com EEAS 60, 120mg/Kg e furosemida (7,54±0,66; 10,35±0,93; e

10,62±0,84mL, respectivamente) vs. grupo controle (4,26±0,44mL). A

administração de EEAS 60 e 120mg/Kg causou incremento relativo do

volume urinário de 24h na ordem de 77% e 142,95%, respectivamente. Não

houve diferença estatística entre o tratamento com furosemida e EEAS 120.

Com relação ao consumo hídrico, EEAS 120 e furosemida causaram aumento

de 75,5% e 85,7%, respectivamente (p<0,001), vs. grupo controle.

Conclusão:

Estes achados mostram que o EEAS induz relaxamento vascular de forma

independente do endotélio vascular. A capitação de Ca2+ pelo retículo

sarcoplasmático e a inibição do influxo de Ca2+ pela membrana plasmática

estão envolvidos neste relaxamento. O estudo evidenciou um provável efeito

diurético do EEAS. Estes resultados aumentam o corpo de evidências que

comprovam a indicação popular da espécie.

Apoio Financeiro:

FAPEG

Gerado em: 2014-5-21 16:22:04

10.020 - Bloqueio da excitabilidade do nervo isquiático de ratos pelo óleo

essencial de Lippia alba e seu constituinte majoritário citral

Morais, L. P. , Sousa, D. G. , Sousa, S. D. G. , Alves, K. S. S. , Silva, F. W.

F. , Silva, R. E. R. , Matos, D. F. , Silva, A. A. , Mendonça, M. R. K. ,

Menezes, I. R. A. , Leal-cardoso, J. H. , Carvalho, P. M. M. , Barbosa, R.

,

Ciências Biológicas - URCA Instituto superior de ciências biomédicas -

UECE

Introdução:

Lippia alba é um vegetal aromático, conhecido popularmente como erva-

cidreira, suas folhas são utilizadas pela população em infusões, chás,

macerados e extratos hidroalcoolicos por apresenta entre outras atividades

ação calmante, antiespasmódica leve, analgésica, sedativa, ansiolítica. O citral

é uma mistura do trans-isômero geranial e o cis-isômero neral, é o principal

constituinte do óleo essencial extraído das folhas de Lippia alba (OELa),

apresenta atividade analgésica, ansiolítica, anticonvulsivante e sedativa.

Objetivos:

O presente estudo avaliou o efeito do OELa e do citral sobre o potencial de

ação composto (PAC) do nervo isquiático de ratos.

Métodos:

01/2013.1 O projeto com protocolos relativos à pesquisa foi submetido e

aprovado pelo Comitê de Experimentação e Uso de Animais CEUA/URCA

com parecer nº 01/2013.1. Foram utilizados ratos Rattus novergicus (Wistar)

de ambos os sexos, com massa corpórea variando entre 200-250 g, de onde

foram dissecados os nervos isquiáticos, mantidos a uma temperatura entre 18º

C e 24º C, numa solução de Locke com pH = 7,4. As concentrações utilizadas

tanto para óleo como citral foram (3, 10, 30, 60, 100, 300, 1000, µg/mL). Para

o registro do potencial de ação composto (PAC) no nervo isquiático, foi

evocado pulso de onda quadrada, com amplitude de 40 V, duração de 100 μs a

uma frequência de 0,2 Hz.

Resultados:

O OELa e o citral inibiram o PAC de maneira concentração-dependente, visto

que na concentração de 300 μg/mL de ambas as drogas foi possível observar o

bloqueio total do 1º e 2º componente, com recuperação parcial do 1º

componente aos 180 minutos de lavagem, e os valores de CI50 para o OELa e

para o citral foram 53,19 µg/mL e 35,05 µg/mL respectivamente. A

amplitude pico-a-pico (APP) foi bloqueada de forma estatisticamente

significante pelo OELa, a partir da concentração de 30, 60, 100 e 300 µg/mL,

sendo seus valores respectivos 62,83 ± 7,10, 49,51 ± 8,34, 38,11 ± 8,43 0, 00

± 0,00 e pelo citral a partir de 10, 30, 60, 100, 300 µg/mL e seus valores

respectivamente 84,09 ± 5,38, 61,62 ± 4,91, 39,17 ± 6,58, 2,95 ± 2,54, 0,00 ±

0,00 todos os dados foram comparando com a porcentagem do controle. As

concetrações de 60 µg/mL do OELa e 30 µg/mL de citral foram as que mais

se aproximaram dos valores de CI50, e portanto, utilizadas na coleta da

reobase e cronaxia. Um aumento na reobase e na cronaxia foi demonstrado

para ambos no OELa a reobase aumentou de 3,10± 0,08 V para 3,70± 0,09 V

(n=7), e a cronaxia de 45,71± 2,98 µs para 61,14± 6,80µs (n=7) e no citral a

reobase variou de 3,83±0,40 V (n=9) para 4,66±0,54 V e a cronaxia de

55,33±3,15µs (n=9)para 65,22±5,26 µs. A velocidade de condução dos dois

componentes foi reduzida a partir de 10 µg/mL do OELa, alterando de forma

significante o primeiro componente de 100% para 85,85 ± 3,87 % e segundo

componente para 86,93 ± 2,68 %, em presença de 300 μg/mL a amplitude foi

totalmente bloqueada. E em todas as concentrações utilizadas do citral, houve

redução na velocidade de condução, sendo o segundo componente mais

afetado pela ação do OELa e do citral.

Conclusão:

Esse estudo mostra que o OELa inibe a excitabilidade do nervosa, efeito esse

atribuído ao citral, e tanto o OELa quanto o citral exercem atividade

depressora em menor concentração que em outros óleos essenciais, e

constituintes com potencial anestésico, descritos na literatura, mostrando que

Lippia alba e seu constituinte citral são compostos promissores para o

desenvolvimento de novas drogas com ação anestésica.

Apoio Financeiro:

Cnpq e Funcap

Gerado em: 2014-5-21 16:22:04

10.021 - Síntese e atividade citotóxica do composto 4-(4-cloro-fenil)-

tiazol-2-il-amina-2-nitro-benzilideno (Ju- 419)

Silva, H. M. M. , Silva, I. M. , Egito, M. S. , Gadelha, G. C. M. , Silva, T.

G. , Albuquerque, J. F. C. ,

Departamento de Antibióticos - UFPE

Introdução:

Os tiazóis são compostos que possuem duas duplas ligações no anel

heterocíclico e por isso diferem das tiazolidinas tanto na estrutura química

quanto nas propriedades. Este núcleo também está sendo estudado por nosso

grupo em relação as atividades farmacológicas. O núcleo tiazólico está

presente em diversas moléculas biologicamente ativas, como a do sulfatiazol,

um importante fármaco antimicrobiano, o ritonavir (Norvir®) utilizado no

combate ao vírus HIV, as epotilonas A e B produtos naturais com potente

atividade antitumoral e o pirofosfato de tiamina, presente em uma variedade

de descarboxilases e de aldolases, Quím. Nova, 28, 77, 2005. Devido aos

crescentes casos surgidos por meio de proliferação celular, as pesquisas têm

assumido importante papel em detectar novas substâncias antitumorais.

Objetivos:

Sintetizar um novo derivado tiazólico e avaliar in vitro sua atividade

citotóxica.

Métodos:

O derivado tiazólico (Ju-419) foi sintetizado a partir de quantidades

equimolares 0,483 g (2,3×10-3 mol) de 4-(4-clorofenil)-2-aminotiazol e 0,350

g (2,3×10-3 mol) de 2-nitro-benzaldeido dissolvidos em 15 mL de MeOH,

adicionado 0,08 mL de HCl(conc.) e aquecidos a 75 °C por 5 horas. O produto

foi cristalizado e submetido a testes citotóxicos em duas linhagens, células

neoplásicas derivadas de carcinomas humanos como: HT29 (de cólon), e NCI

H-292 (de pulmão). A avaliação citotóxica foi feita pelo método do MTT

utilizado no programa de Screening baseado na colorimetria por meio da

conversão do sal 3-(4,5-dimetil-2-tiazol)-2,5-difenil-2-H-brometo de

tetrazolium (MTT) em azul de formazan, a partir de enzimas mitocondriais

presentes somente nas células metabolicamente ativas, J. Nat. Cancer Inst., 82,

1107-1112, 1990. As células foram plaqueadas na concentração de 1x105

células/mL e as substâncias previamente dissolvidas em DMSO foram

diluídas em série no meio RPMI para obtenção das concentrações finais e

adicionadas em placa de 96 poços (100 μL/poço), incubadas por 72 horas em

estufa a 5 % de CO2 a 37 °C. A seguir foram adicionados 25 µL da solução de

MTT (sal de tetrazolium), as placas novamente foram incubadas por mais 3 h.

Resultados:

O composto sintetizado apresentou PF=203-204 ºC, rendimento 40 % e Rf 0,5

sistema Hex/Acetato etila (0,7:0,3). A leitura do resultado foi analisado

segundo suas médias e respectivos desvios padrão usando o programa

computacional GraphPad Prism. Os resultados consideram determinação da

Cl50, (concentração que inibe 50 % da proliferação celular em relação ao

controle). A leitura do resultado obedeceu a classificação adotada: sem

atividade (1 a 20 % de inibição do crescimento celular observado), com pouca

atividade (inibições de crescimento celular variando de 20 a 50 %), com

atividade moderada (inibição de crescimento celular variando de 50 a 70 %),

com muita atividade (inibição de crescimento variando de 70 a 100 %). A

célula HT 29 apresentou índice de inibição de crescimento de 46,1±5,5. A

célula NCI-H292 apresentou índice de inibição de 65,7±5,1 considerado

índice de inibição de crescimento celular com moderada atividade de acordo

com a escala de intensidade empregada nesse experimento.

Conclusão:

O rendimento da reação foi considerado razoável. As constantes PF e Rf estão

dentro dos padrões internacionais. A atividade citotóxica para a célula HT29

apresentou índice de inibição de crescimento na faixa de 20 a 50 %. Este

resultado foi considerado com pouca atividade. A célula NCI-H292

apresentou índice de inibição variando entre 50 a 70 % que foi considerado

moderado.

Apoio Financeiro:

CNPq

Gerado em: 2014-5-21 16:22:16

10.022 - AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIPARASITÁRIA E

CITOTÓXICA DO EXTRATO HIDROALCOÓLICO DAS FOLHAS

DE ZIZIPHUS JOAZEIRO MART.

Oliveira, M. R. C. , Brito, S. M. O. , Coutinho, H. D. M. , Costa, J. G. M. ,

Miriam, M., Coronel, C. , Gomez, M. C. V. , Figueredo, F. G. , Tintino, S.

R. , Lima, L. F. , Boligon, A. A., Athayde, M. L. , Menezes, I. R. A. ,

Química Biológica - URCA Farmácia Industrial - UFSM Microbiologia -

CEDIC

Introdução:

A utilização das plantas pela população como fontes medicinais é uma prática

antiga e que tem despertado cada vez mais o mundo científico para a

investigação das atividades que as plantas possuem e a comprovação dos seus

potenciais. A Chapada do Araripe abriga diversas espécies com potenciais

medicinais, dentre as plantas destaca-se o Ziziphus joazeiro Mart., conhecida

popularmente como juazeiro. Esta espécie que já apresenta atividade

farmacológica descritas na literatura, como atividade antimicrobiana,

antifúngica, antisséptico bucal entre outras. Popularmente, o gênero Ziziphus

apresenta atividade antiparasitária e antihelmintica já descritas. Porém, não há

relatos sobre a atividade antiparasitária descrita para Ziziphus joazeiro Mart.

Objetivos:

Esse trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antiparasitária e

citotóxica do extrato hidroalcoólico das folhas de Ziziphus joazeiro Mart.

Métodos:

Nos testes realizados não foram utilizados animais ou humanos. Para o teste

da atividade antiparasitária in vitro foram utilizados parasitas Trypanossoma

cruzi (clone CL-B5) (Buckner et al., 1996). Os parasitas transfectados com

gene da β-galactosidase de Escherichia coli (lacZ), os quais foram fornecidos

pelo Dr. Buckner do Conmemorativo Gorgas Instituto (Panamá). Os parasitas

foram cultivados a 28°C em meio de cultura caldo de infusão de fígado

triptose (Difco, Detroit, MI), suplementado com 10% soro bovino fetal (SFB)

(Gibco, Carlsbad, CA), penicilina (Ern, S.A., Barcelona, Espanha) e

estreptomicina (ReigJofr e S.A., Barcelona, Espanha), como descrito por Le

Senne et al. (2002). As células foram coletadas para testes em fase de

crescimento exponencial. Culturas de Leishmania braziliensis foram obtidas

do Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud, Assunção, Paraguai-

IICS e identificadas pela análise da isoenzima. A manutenção de linhas,

formas de cultivo e isolamento de formas promastigotas de Leishmania spp.

seguiram os procedimentos descritos por Roldos et al. (2008). Testes de

inibição de formas promastigotas foram realizados utilizando uma cepa de

L.braziliensis (MHOM/BR/75/M2903) e L. infantum (MCAN/ES/92/BCN83)

cultivadas a 22°C suplementadas com SFB Drosophila Schneider 20%. Foram

realizados testes de citotoxicidade usando a linhagem de fibroblastos

NCTC929, cultivadas em meio essencial mínimo (Sigma). O meio de cultura

foi suplementado com SFB inativado pelo calor (10%), penicilina G (100

U/mL) e estreptomicina (100 mg/mL). As culturas foram mantidas a 37° C

numa atmosfera úmida com 5% de CO2. A viabilidade destas estirpes foi

avaliada através da utilização de resazurina como método colorimétrico

(Rolón et al., 2006). O teste de atividade anti-epimastigota foi realizado em 96

microplacas bem, com culturas a crescer exponencialmente conforme descrito

por Vega Vega et al. (2005). Cd39 foi inoculado com uma concentração de 1

x 105 mL-1 em 200 μL de caldo fígado triptose. As placas foram incubadas

em seguida com os extrato em concentrações de 100 e 500 μg/mL a 28° C por

72 horas. Após este tempo 50 μL da solução CPRG foi adicionada e incubado

por 6 horas a 37° C. após este período as placas foram lidas utilizando leitora

com filtro a 595 nm. Cada experimento foi realizado três vezes e de forma

independente, e cada concentração testada em triplicata em cada experimento.

A eficiência de cada composto foi estimada através do cálculo da percentagem

de atividade anti-epimastigota (AE). O teste da atividade anti promastigota foi

realizado com promastigotas de L. braziliensis que foram cultivadas até uma

concentração de 106 células/mL e logo após transferidas para o teste. A

atividade dos compostos foi avaliada após 72 horas pela contagem direta das

células após diluições em série e em comparação com um controle não

tratado. No teste de citotoxicidade foram usados fibroblastos NCTC929 que

foram banhados em placa 96 poços com concentração final de 3x104 células.

As células foram cultivadas a 37° C em uma atmosfera de 5% de CO2. Depois

disso, o meio de cultura foi removido e, 200 μL das diferentes concentrações

do extrato foram adicionados e incubado por 24 h. Seguida esta incubação,

20μL de solução resazurina foi adicionado a cada poço. As placas foram

incubadas por 3 horas e a redução de resazurina foi determinada pela

absorbância em dois comprimentos de onda de 490 e 595 nm. Todos os

ensaios foram realizados em triplicata e os resultados foram expressos como a

média de repetições. Para calcular o IC50, as equações foram determinadas

por regressão linear, utilizando o software prisma.

Resultados:

O EHFZJ apresentou uma atividade citotóxica com IC50 = 119.34 µg/mL

contra fibroblastos, que atesta a sua baixa toxicidade. Sobre a avaliação da

atividade antiparasitária contra epimastigotas de T. cruzi apresentou um valor

de IC50 = 316.28 µg/mL. Para atividade antileishimania mostrou uma IC50 de

214.12 µg/mL e 174 µg/mL para L. brasiliensis e L. infantum,

respectivamente. Estes resultados demonstram que o EHFZJ é eficaz contra

todos os protozoários testados, já que, demonstram valor de IC50 menor que

500 µg/mL que são considerados clinicamente relevantes.

Conclusão:

Durante os testes EHFZJ mostrou um potencial antiparasitário significativo

contra as formas promastigota de L. braziliensis e L. infantum e epimastigota

de T. cruzi, além de demonstrar baixa citotoxicidade contra fibroblastos.

Apoio Financeiro:

CNPq

Gerado em: 2014-5-21 16:22:16

10.023 - TRIAGEM FITOQUÍMICA E ATIVIDADE

FOTOPROTETORA DE EXTRATOS OBTIDOS DE DIFERENTES

PARTES DE HYMENAEA MARTIANA HAYNE (FABACEAE)

Oliveira, F. G. S. , Rabêlo, S. V. , Nunes, X. P. , Almeida, J. R. G. S. ,

Programa de pós-graduação em Recursos Naturais do - UNIVASF

Introdução:

Hymenaea martiana, conhecida popularmente como “jatobá”, é uma espécie

utilizada na medicina tradicional no tratamento de inflamações, reumatismo, e

com atividade antinociceptiva e anti-inflamatória.

Objetivos:

O objetivo desta pesquisa foi realizar uma triagem fitoquímica e estudar o

potencial fotoprotetor dos extratos etanólicos obtidos de diferentes partes de

H. martiana.

Métodos:

Ensaios in vitro O material vegetal (cascas, folhas, frutos e sementes) foi

coletado na cidade de Petrolina-PE, e a exsicata da espécie foi depositada no

HVASF (número 6444). Foi realizada extração por maceração, utilizando

etanol 95%, e o solvente foi evaporado em evaporador rotativo. Os extratos

obtidos foram avaliados em placas de cromatografia em camada delgada para

verificação da presença das principais classes de metabólitos secundários. A

absorbância dos extratos etanólicos secos foram medidas em diferentes

concentrações entre os comprimentos de onda de 260 a 400 nm, para verificar

a absorção nas regiões ultravioleta A e B, e o foi realizado o cálculo de FPS,

segundo método de Mansur. As análises foram realizadas em triplicata.

Resultados:

A análise do extrato das cascas indicou a presença de naftoquinonas,

derivados antracênicos, terpenoides, esteroides, saponinas e flavonoides, o que

está de acordo com outros estudos realizados com outras espécies do gênero.

Já a análise do extrato das folhas mostrou resultado positivo para antracenos,

naftoquinonas, flavonoides e saponinas, porém outras espécies do gênero

apresentaram diterpenos e esteroides. A análise do extrato dos frutos indicou

forte presença de monoterpenos, diterpenos, antracenos, flavonoides,

naftoquinonas e saponinas, resultado compatível com estudos anteriores de

outras espécies do gênero, e reação negativa para cumarinas, porém em

estudos anteriores é relatada a presença desta classe de substâncias em

sementes de outras espécies de Hymenaea. Os extratos apresentaram

absorbância máxima entre 260 e 285 nm, e o maior valor de FPS foi

encontrado no extrato da casca, na concentração de 100 mg/L, com 20,27 ±

5,21, seguidos pelo extrato das folhas, na concentração de 50 mg/L, com valor

10,44 ± 0,72. Os valores de FPS para o extrato dos frutos foi de 0,66 ± 0,41, e

de 4,54 ± 0,11 para o extrato das sementes, na maior concentração. Alguns

autores mostram que as plantas que absorvem na região ultravioleta

apresentaram uma complexidade de substâncias, destacando-se metabólitos

secundários como flavonoides, taninos, antraquinonas, alcaloides e compostos

fenólicos, o que está de acordo com a triagem fitoquímica realizada com os

extratos obtidos com os materiais vegetais de Hymenaea martiana.

Conclusão:

Os resultados deste estudo demonstram que os materiais vegetais de

Hymenaea martiana coletados em Petrolina-PE possuem um perfil fitoquímico

semelhante a outras espécies do gênero Hymenaea e apresentam potencial

fotoprotetor. Um estudo fitoquímico mais aprofundado torna-se necessário

para uma melhor discussão em relação aos constituintes químicos desta

planta, bem como suas atividades biológicas, evidenciando o seu potencial

terapêutico.

Apoio Financeiro:

CNPQ/FACEPE/CAPES

Gerado em: 2014-5-21 16:22:16

10.024 - AVALIAÇÃO DE CITOXICIDADE DO ÓLEO ESSENCIAL

DE Rhaphiodon echinus (Nees & Mart.) Schuaer (LAMIACEAE) NO

SARCOMA 180

Lavor, A. L. , Nogueira, S. H. C. , Lavor, E. M. , Silva, M. G. , Mendes, R.

L. , Maia, G. L. A. ,

Núcleo de Estudos e Pesquisas de Plantas Medicinai - UNIVASF

Introdução:

A família Lamiaceae é amplamente distribuída pelo Brasil e possui várias

espécies produtoras de óleos essenciais (OEs). Uma de suas representantes, a

Raphiodon echinus (Re) é uma planta típica da Caatinga formando grandes

populações nas áreas irrigadas do Vale do São Francisco cujo óleo essencial é

constituído por uma complexa mistura de substâncias terpênicas. Os

Terpenoides são descritos com importantes atividades farmacológicas:

antimicrobiana, antifúngica, antitumoral e espasmolítica associadas

frequentemente a inibição ou regulação proteica, por isso, não só estes, como

os produtos naturais em geral, tem representado grande interesse para

desenvolvimento de novos fármacos,sobretudo para as neoplasias. Essas

patologias consistem no crescimento e proliferação celular autônoma e

contínua, por vezes resultante de vários eventos genéticos deletérios e

constituem a segunda causa de morte da população mundial e no Brasil.

Diante da gravidade e, às vezes, de um mal prognóstico aliados a uma

quimioterapia de alta toxicidade, faz-se necessária a busca por novos

tratamentos mais eficazes e com menos efeitos colaterais.

Objetivos:

Avaliar a atividade citotóxica do óleo essencial extraído da Re frente a

linhagem de Sarcoma 180.

Métodos:

O OE foi extraído de 0,5Kg de folhas frescas por hidrodestilação em aparelho

de Clevenger. Foi realizado o ensaio de MTS para avaliação do potencial

citotóxico frente a células do sarcoma S-180. Em uma placa de 96 poços,

foram plaqueadas 1x106 células/poço em meio RPMI suplementado com 10%

Soro Fetal Bovino. Após 3h, o OE de Rhaphiodon echinus (OE-Re) foi

adicionado em três diluições diferentes à cultura celular que ficou incubada

em estufa por 24 horas à 37°C. Após a incubação, foram adicionados 20μL de

MTS em uma concentração de 5 mg/mL aos poços. A placa foi incubada

durante 3h em estufa, sendo posteriormente a absorbância lida a 492 nm em

leitora de microplacas Thermoplate®. O cálculo da porcentagem de

viabilidade celular foi dado pela razão da absorbância dos poços tratados

menos a absorbância do branco pela absorbância do controle negativo menos

a absorbância do branco multiplicado por 100. Os dados foram analisados

pelo programa GraphPad Prism® versão 5.0 por ANOVA seguido de teste de

Tukey.

Resultados:

Foi obtido aproximadamente 1mL OE-Re, apresentando cor amarela, de odor

agridoce picante característico. O percentual de viabilidade celular para a dose

de 10μL/mL foi de 41,07% (±0,85), para a dose de 20μL/mL 23,33% (±1,7) e

para a dose de 50μL/mL 14,71% (±2,5). A análise no ANOVA mostrou a

inibição do crescimento estatisticamente significantes (p>0,05) para todas as

doses testadas.

Conclusão:

Os resultados obtidos indicam atividade de inibição do OE-Re frente ao

crescimento da linhagem tumoral de Sarcoma 180 in vitro.

Apoio Financeiro:

CNPq.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:16

10.025 - Avaliação da Atividade antiparasitária e citotóxica in vitro de

Extrato hidroalcoólico de Annona Muriata L., contra Trypanossoma

cruzi, Leishmania brasiliensis, Leishmania Infantum

Rodrigues, C. K. S. , Coutinho, H. D. M. , Menezes, I. R. A. , Felipe, C. F.

B. , Costa, J. G. M. , Lemos, I. C. S. , Figuêiredo, F. R. S. D. N. , Sales, V.

S. , Coronel, C. , Gomez, M. C. V. , Tintino, S. R. , Monteiro, Á. B. ,

Amaro, E. N. , Kerntopf, M. R. ,

DEPARTAMENTO QUIMICA BIOLOGICA - URCA

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA - CEDIC

Introdução:

Doenças infecciosas e parasitárias estão presentes em todo mundo ocorrendo

com maior frequência em países em desenvolvimento, sendo elas a causa da

morte de milhões de pessoas. (WHO, 2003). Um grupo destas são transmitidas

por protozoários e transmitida por vetores, porém seu tratamentos é

inexistente, precário ou desatualizado (OLIVEIRA, 2009). As leishmanioses

são doenças infecciosas, não contagiosas, causadas por protozoários do gênero

Leishmania e a doença de Chagas, causada pelo Trypanossoma cruzi. Plantas

utilizadas tradicionalmente para o tratamento de doenças causadas por

protozoários vêm recebendo considerável atenção em pesquisas na procura de

novas drogas com atividade antiparasitária (TEMPONE et al, 2005).

Objetivos:

Tem como objetivo avaliar a potencial atividade antiparasitária in vitro do

extrato hidroalcoólico das folhas de Annona muricata, com o intuito de

pesquisar novos fármacos com atividade Leischmanicida e Trypanocida.

Métodos:

Não foi utilizado humanos e nenhuma espécie de animal. Foram cultivadas

formas epimastigostas cultivadas a 28ºC em meio de cultura Liver Infusion

Tryptose Broth (Difco, Detroit, MI), suplementado com Soro Fetal Bovino

10%, penicilina e estreptomicina conforme descrito por LE SENNE et al.,

(2002. As culturas de Leishmania spp. foram identificadas por análise

isoenzimática seguiram os procedimentos descritos por ROLDOS et al.,

(2008). O teste de citotoxicidade foi realizado utilizando fibroblastos

NCTC929 plaqueados em microplacas de 96 cavidades a uma concentração

final de 3 x 104 células/cavidade. Cada concentração foi testada em triplicata.

A viabilidade destas linhagens foi avaliada através do uso da resazurina como

método colorimétrico (ROLÓN et al., 2006).

Resultados:

Os resultados observados na avaliação da atividade citotóxica, leishmanicida e

tripanocida do extrato hidroalcoólico das folhas de Annona muricata,

demonstraram que o EHFAM apresentou toxicidade moderada nas

concentrações de 31,2 e 62,5 µg/ml. o EHFAM na concentração de 125

µg/ml apresentou um percentual de inibição de 21% da atividade

antipromastigota de L. Infantum e 1,72% para L. brasiliensis .

Conclusão:

Annona Muricata L. na forma de extrato hidroacóolico apresentou baixa

atividade antipromastigota contra Leishmania infantum e toxicidade

moderada. No presente estudo os resultados demonstraram que Annona

Muricata L. na forma de extrato hidroacóolico apresentou baixa atividade

antipromastigota contra Leishmania infantum e toxicidade moderada. Em

relação a sua ação epimastigota tripanocida não obtiveram atividade

clinicamente relevante, novos testes devem ser realizados tendo em vista

futuros ensaios in vivo.

Apoio Financeiro:

FUNCAP, CAPES, URCA e CNPq.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:16

10.026 - AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTI-Leishmania E ANTI-

Trypanosoma DO EXTRATO ETANÓLICO DAS FOLHAS DA

Duguetia furfuracea

Rodrigues, C. K. S. , Coutinho, H. D. M. , Menezes, I. R. A. , Costa, J. G.

M. , Coronel, C. , Tintino, S. R. , Fernandes, C. N. , Macedo, M. C. C. ,

Felipe, C. F. B. , Sales, V. S. , Gomez, M. C. V. , Figuêiredo, F. R. S. D. N.

, Cruz, L. P. , Kerntopf, M. R. ,

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA BIOLÓGICA - URCA

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA - CEDIC

Introdução:

As doenças negligenciadas predominam em condições de pobreza e

constituem um obstáculo no desenvolvimento dos países. Como exemplos,

podemos citar a doença de Chagas e a leishmaniose (Rev. Saúde Públ. 200,

2010), estando bem prevalentes. Cerca de 7 a 8 milhões de pessoas estão

infectadas pelo Tripanosoma cruzi e há cerca de 1,3 milhões de novos casos

de leishmaniose a cada ano (WHO, 2013). A terapêutica atual para essas

doenças é bem limitada e possui alta toxicidade. A pesquisa com plantas

medicinais em busca de princípios ativos constitui uma das alternativas para o

tratamento dessas parasitoses, podendo revelar compostos que serão uteis no

desenvolvimento de novas drogas e com preços mais acessíveis para grande

parte da população (Acta bot. Bras. 815, 2006).

Objetivos:

Avaliar a atividade anti-Tripanosoma e anti-Leishmania in vitro do extrato

etanólico das folhas de Duguetia furfuracea (EEDF), bem como o grau de

toxicidade.

Métodos:

Não foi realizada nenhuma experimentação animal/humana. Nos testes in

vitro para a avaliação da atividade antipromastigota e antiepimastigota, bem

como a citotoxicidade, utilizamos o EEDF nas concentrações de 125, 250, 500

e 1000 µg/mL, em microplacas com 96 cavidades, com culturas na fase

exponencial, na qual cada concentração foi testada em triplicata, seguindo

metodologia descrita por Vega e colaboradores (2005). Para a avaliação da

atividade leishmanicida foram utilizadas as linhagens promastigotas

de Leishmania braziliensis (MHOM/CO/88/UA301) e Leishmania

infantum (MHOM/ES/92/BCN83), cultivadas a 22° C em meio Schneider’s

Drosophila, suplementado com soro fetal bovino a 20%. No tocante a

avaliação da atividade tripanocida, realizamos testes in vitro de T.

cruzi utilizando o clone CL-B5 (BUCKNER et al., 1996). Nos ensaios de

citotoxicidade utilizamos a linhagem de fibroblastos NCTC929, cultivada em

Minimal Essential Medium (Sigma).

Resultados:

O EEDF apresentou uma melhor atividade antiparasitária na concentração de

1000 µg/mL, causando a de morte de 100% das formas promastigotas de L.

infantum e L. brasiliensis e 54,75% das formas epimastigotas de T. cruzi. Na

concentração de 125 µg/mL o EEDF não foi eficaz contra nenhuma das

formas dos parasitas estudados. Nas concentrações de 250 e 500 µg/mL o

extrato apresentou os melhores resultados contra L. brasilienses causando uma

inibição de 31,96% e 62,81%, respectivamente. Referente a citotoxicidade, a

concentração de 1000 µg/mL foi a que apresentou o maior percentual de

inibição dos fibroblastos, causando a morte de 67% dessas células.

Conclusão:

O presente estudo demonstrou que o EEDF apresenta atividade

antiprotozoária (antipromastigota e antiepimastigota). Com relação a

citotoxicidade novos testes deverão ser realizados possibilitando futuros

ensaios in vivo.

Apoio Financeiro:

FUNCAP, CAPES, URCA E CNPq

Gerado em: 2014-5-21 16:22:16

10.027 - EFEITOS DO β-CITRONELOL EM TRAQUEiA DE RATOS:

POTENCIAL AÇÃO inibitória NA HIPERREATIVIDADE por

DESAFIO ANTIGÊNICO

Vasconcelos, T. B. , Filho, H. V. R. , Magalhães, P. J. C. ,

Departamento de Fisiologia e Farmacologia - UFC

Introdução:

O β-citronelol é álcool monoterpênico de ocorrência natural em vários óleos

essenciais como no óleo de citronela. Recentemente, a esta molécula tem sido

atribuídas outras propriedades que envolvem atividade antibacteriana,

antiespasmódica, hipotensora e vasorrelaxante.

Objetivos:

Estudar suas possíveis ações no comportamento motor do músculo liso

traqueal de ratos Wistar, assim como, verificar qual seu efeito em modelo

experimental mimetizando asma.

Métodos:

(CEUA nº: 28/12) Ratos Wistar machos (200 - 300 g) foram divididos em 04

grupos: Controle, Sensibilizado, Desafiado e Tratado. Após eutanásia pós

anestesia (pentobarbital sódico; 40 mg/kg, i.p.) e exsanguinação (CEUA nº:

28/12), anéis de traqueia foram obtidos para registro isométrico de contrações

in vitro. Para isso, os anéis de traqueia foram dispostos em banho para órgão

isolado contendo 5 mL de solução fisiológica de Krebs-Henseleit com os

seguintes parâmetros: pH 7,4, 37°C e aeração constante com 5% CO2 em O2;

a tensão basal foi de 1 g. As respostas contráteis observadas foram registradas

através de transdutores de força conectados a sistema de aquisição de dados

(PowerLab™ 8/30, AD Instruments, Austrália). A comparação dos resultados

foi realizada através de análise de variância (ANOVA) e testes post-hoc.

Resultados:

Inicialmente, avaliamos o efeito do β-citronelol (30, 200 ou 600 µM) na curva

concentração-efeito (CCE) para K+ (10 a 120 mM) - acoplamento

eletromecânico, construída em preparações isoladas de traqueia, e observamos

que, nas concentrações de 200 e 600 µM, o β-citronelol foi capaz de inibir a

resposta máxima do K+ (p < 0,001; two-Way ANOVA, seguida de teste

Holm-Sidak) para 52,26 ± 6,7% de contração induzida por 60 mM K+ que

serviu como referência. Na concentração de 600 µM, β-citronelol inibiu por

completo o efeito contraturante da adição de K+. Em seguida, com o intuito

de anular o recrutamento de canais de Ca2+ operados por voltagem na

resposta induzida pela acetilcolina (ACh) – acoplamento farmacomecânico,

CCE para ACh (0,01 a 104 µM) foram construídas na presença de verapamil

(1 µM), assumindo que a força contrátil envolve recrutamento dos canais de

Ca2+ ativados por receptor. Assim, observou-se que, mesmo na concentração

de 600 µM, o b-citronelol não foi capaz de reduzir a resposta máxima para

ACh na presença de verapamil. No grupo de animais submetidos ao modelo

de asma através do antígeno sensibilizante ovalbumina, a inalação prévia de b-

citronelol (300 µM) preveniu a hiperreatividade traqueal a K+ (Emax

desafiado = 31,33 ± 3,98 vs. Emax tratado = 20,66 ± 4,2 g/mg de tecido) ou

ACh (Emax desafiado = 52,56 ± 5,9 vs. Emax tratado = 28,02 ± 4 g/mg de

tecido) na cuba para órgãos isolados.

Conclusão:

O β-citronelol possui efeito inibitório e antiespasmódico em músculo liso

traqueal de ratos Wistar. A administração prévia de β-citronelol, por via

inalatória (in vivo) ou na cuba para órgãos isolados (in vitro), preveniu a

hiperreatividade traqueal ocasionada pela adição de estímulos eletromecânicos

e farmacomecânicos, sendo potencialmente agente anti-inflamatório em

animais que mimetizam a asma.

Apoio Financeiro:

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico – CNPq;

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior – Capes,

Fundação Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico –

FUNCAP.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:16

10.028 - EFEITO GASTROPROTETOR DO EXTRATO ETANÓLICO

DA MAYTEUS ERYTHROXYLON REISSEK (CELASTRACEAE)

CONTRA ÚLCERAS INDUZIDAS POR ANTIINFLAMATÓRIO NÃO

ESTEIRODAL EM CAMUNDONGOS.

Formiga, R. O. , Sousa, C. G. B. L. , Silva, A. K. M. , Souza, S. S. ,

Quirino, Z. G. M. , Batista, L. M. ,

DCF/CCS - UFPB CCAE/DEMA - UFPB

Introdução:

Maytenus Erythroxylon Reissek é uma planta que pertence à família

Celastraceae, rica em metabolitos bioativos como terpenos e flavonoides, já

referenciados na literatura como antiulcerogênicos (Gutierrez, F., J. Nat.

Prod., 70, 1049, 2007).

Objetivos:

Avaliar a atividade gastroprotetora do extrato etanólico bruto obtido das partes

aéreas da Maytenus erythroxylon frente o modelo agudo de indução de úlceras

por anti-inflamatório não esteiroidal (AINE).

Métodos:

São utilizados apenas modelos animais no presente projeto de pesquisa Para a

realização desse trabalho foram utilizados Camundongos Swiss machos (Mus

musculus) pesando entre 25–35 g e todos os procedimentos experimentais

foram aprovados pelo Comitê de Ética em Uso Animal (CEUA) com certidão

número 2205/13. Os animais foram pré-tratados com o veículo (NaCl a 0,9%

v.o. - controle negativo), 100 mg/kg de cimetidina (controle positivo) e o

extrato etanólico - EEtOH-Me nas doses de 62,5; 125; 250 e 500 mg/kg - v.o.,

respectivamente. Após 30 min os animais foram submetidos ao agente lesivo

(piroxicam 20 mg/kg – s.c.) e 4 horas após foram eutanasiados e foi avaliada

a atividade gastroprotetora a partir da determinação do Índice de Lesão

Ulcerativo (Puscas, I. Arzneimittelf., 47, 568, 1997). Os resultados foram

analisados ??por ANOVA, seguido pelo teste de Dunnett.

Resultados:

Os resultados para esse modelo mostram que as doses do EEtOH-Me (62.5;

125; 250 e 500 mg/kg) apresentaram efeito protetor da mucosa gástrica, com

ILU de 86.00 ± 12.39, 54.00 ± 6,63, 41,33 ± 6.80 e 44.83 ± 8.45

respectivamente, quando comparado com o grupo de controle negativo (117,9

± 34,74).

Conclusão:

Os resultados do presente estudo mostram que o extrato etanólico de

Maytenus erythroxylon apresenta atividade gastroprotetora nas doses testadas

frente ao modelo de AINE.

Apoio Financeiro:

CNPq.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:16

10.029 - AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE HIPOGLICEMIANTE E

CICATRIZANTE DA Bauhinia holophylla e da Cleome spinosa EM

RATOS DIABÉTICOS INDUZIDO POR ESTREPTOZOTOCINAS

Miranda, J. L. , Silva, N. M. B. , Magnata, S. S. L. P. ,

Biofísica e Radiobiologia - UFPE

Introdução:

A espécie Bauhinia holophylla é usada na medicina popular como

hipoglicemiante, já a Cleome spinosa conhecida popularmente por mussambê,

é usada no tratamento da gripe, tosse e inflamações. O Diabetes mellitus (DM)

é caracterizado pela hiperglicemia, causada pela deficiência e/ou resistência à

insulina. A cicatrização de feridas consiste em uma perfeita e coordenada

cascata de eventos celulares e moleculares que interagem para que ocorra a

reepitelização e a reconstituição do tecido.

Objetivos:

Tendo em vista a procura por substâncias mais adequadas que possam

interferir no processo cicatricial e no processo hipoglicemiante, substituindo

os tradicionais tratamentos que demandam alto custo, esta pesquisa visou

comparar o processo de cicatrização, em feridas abertas, sob influencia do

tratamento com gel de Bauhinia e Cleome, assim como a atividade

hipoglicemiante dos extratos aquosos das duas espécies.

Métodos:

23076020842/2011-16 Bauhinia holophylla e a Cleome spinosa utilizadas no

estudo foram coletadas no Instituto Agronômico de Pernambuco (IPA). O

estudo foi realizado com camundongos albinos suíços, fêmeas, com 60 dias de

idade, pesando entre 30 e 35g. Os animais foram pesados e separados em 4

grupos contendo 5 animais cada. Foram pesados, marcados e anestesiados.

Após a anestesia foi feita a indução a ferida cirúrgica. Para tratamento das

feridas os animais foram distribuídos aleatoriamente em 4 grupos de 5

animais: GRUPO I ( Controle negativo), GRUPO II (Gel de Bauhinia ),

GRUPO III (Gel de T. Cleome) e GRUPO IV ( Controle positivo). Os animais

foram induzidos ao diabetes, após o tempo de comprovação do diabetes os

ratos receberam o tratamento destinado ao grupo a que pertence. Os animais

com diabetes comprovada foram distribuídos aleatoriamente em 3 grupos de 5

animais para tratamento: GRUPO I (Controle negativo), GRUPO II (Extrato

de Bauhinia) e GRUPO III (Extratto de T. Cleome). A glicemia foi mensurada

uma vez na até completar 35 dias de experimento. Os animais foram

anestesiados e a gota de sangue retirada da cauda e colocada na fita, fazendo-

se a leitura da glicemia. Os extratos foram administrados por via oral. Esse

procedimento foi executado todos os dias até completar 35 dias de

experimento.

Resultados:

Foi observada uma melhora significativa na cicatrização com o uso do extrato

da Cleome spinosa, o que não aconteceu nas mesmas proporções com a

Bauhinia holophylla, no ponto de vista macroscópico, quando comparados aos

controles positivo e negativo. O tratamento com extrato da Bauhinia

holophylla apresentou uma redução significativa dos níveis glicêmicos, da

ordem de 30 a 35%.

Conclusão:

Mediante os resultados obtidos no teste de cicatrização, pode-se sugerir que a

utilização de gel da Cleome spinosa, permitiu a ocorrência do processo de

reparação cutânea de feridas cirúrgicas em camundongos. Associado a isso, os

tratamentos foram biocompatíveis, uma vez que não induziram nenhum tipo

de reação imunológica, num aspecto macroscópico. Quanto a avaliação do

potencial hipoglicemiante, a Bauhinia holophylla foi a espécie que apresentou

melhor resultado, contudo as duas espécies merecem ser melhor estudadas,

com um número maior de amostras posteriormente.

Apoio Financeiro:

Propesq-UFPE

Gerado em: 2014-5-21 16:22:16

10.030 - AÇÃO BACTERIOSTÁTICA DE EXTRATO DE FLORES DE

Moringa oleifera CONTRA PATÓGENOS HUMANOS

Souza, C. S. , Procopio, T. F., Coelho, L. C. B. B. , Napoleao, T. H. ,

Paiva, P. M. G. , Pontual, E. V. ,

Bioquímica - UFPE

Introdução:

Bactérias de importância médica podem causar infecções graves em humanos.

Enterococcus faecium, Shigella sonnei e Klebsiella pneumoniae, por exemplo,

são bactérias patogênicas que podem causar doenças como meningite

neonatal, shigelose (desinteria acompanhada de febre e dor abdominal) e

pneumonia, respectivamente. Pseudomonas aeruginosa é responsável por

infecções pulmonares, urinárias e sanguíneas, sendo uma importante causa de

infecções hospitalares. O desenvolvimento de resistência por bactérias aos

quimioterápicos atualmente utilizados tem sido descrito, o que estimula a

busca por novos agentes antibacterianos. Extrato de flores de M. oleifera,

obtido com água destilada, contém um inibidor de tripsina, denominado

MoFTI (do inglês M. oleifera flower trypsin inhibitor). Inibidores de tripsina

têm sido descritos como agentes antimicrobianos.

Objetivos:

Avaliação do efeito de extrato aquoso de flores de M. oleifera, contendo

atividade inibidora de tripsina, sobre o crescimento e sobrevivência de E.

faecium, S. sonnei, K. pneumoniae e P. aeruginosa.

Métodos:

O presente trabalho não inclui experimentos com animais ou seres humanos.

O extrato de flores de M. oleifera foi obtido a partir da homogeneização de

flores frescas (50 g) com água destilada (100 mL) por 5 min, utilizando

liquidificador. Em seguida, a mistura foi filtrada em gaze e centrifugada

(3.000 x g; 15 min) e o sobrenadante correspondeu ao extrato de flores. A

estimativa da concentração de proteínas foi realizada de acordo com Lowry et

al.(J. Biol. Chem. 193:265, 1951). Atividade inibidora de tripsina foi avaliada

de acordo com Pontual et al. (Arch. Insect Biochem. Physiol. 79:135, 2012),

utilizando tripsina bovina (0.1 mg/mL) e o substrato N-α-benzoil-DL-

arginina-p-nitroanilida (BApNA). Uma unidade de atividade enzimática da

tripsina foi definida como a quantidade de enzima que hidrolisa 1 μmol de

BApNA por minuto. Cada unidade de tripsina reduzida na presença do extrato

correspondeu a uma unidade de atividade inibidora de tripsina. As cepas

bacterianas utilizadas foram fornecidas pelo Departamento de Antibióticos do

Centro de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Pernambuco.

Ensaio de atividade antibacteriana foi realizado em microplacas de acordo

com Gomes et al. (J. Appl. Microbiol. 114:672, 2013). A concentração

mínima inibitória (CMI) foi determinada correspondendo à menor

concentração em que ocorreu diminuição igual ou maior que 50% em relação

ao crescimento (medido pela densidade óptica a 490 nm) no poço controle. A

concentração mínima bactericida foi definida como a menor concentração

capaz de reduzir o crescimento bacteriano em 99,9%. Os ensaios foram

realizados em triplicata.

Resultados:

O extrato de flores apresentou uma concentração de proteínas de 2,87 mg/mL

e atividade inibidora de tripsina específica de 0,128 U/mg de proteínas. O

extrato inibiu o crescimento de colônias das bactérias S. sonnei e P.

aeruginosa, com CMI de 1.44 mg/mL de proteínas para ambas as bactérias.

Não foi detectado nenhum efeito sobre o crescimento de E. faecium e P.

aeruginosa (CMI > 2,81 mg/mL). Atividade bactericida não foi detectada

contra nenhuma das bactérias testadas.

Conclusão:

Extrato aquoso de flores de M. oleifera apresentou efeito bacteriostático sobre

P. aeruginosa e S. sonnei. A investigação da atividade antibacteriana de

MoFTI, bem como outros estudos visando identificar o(s) princípio(s)

antibacteriano(s) do extrato estão em andamento.

Apoio Financeiro:

CNPq, FACEPE, CAPES, MCTI.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:16

10.031 - ATIVIDADE INSETICIDA DE PREPARAÇÃO LECTÍNICA

DE RIZOMA DE Microgramma vaccinifolia CONTRA O GORGULHO

DO MILHO (Sitophilus zeamais).

Guedes, C. C. S. , Albuquerque, L. P. , Pontual, E. V. , Napoleão, T. H. ,

Paiva, P. M. G. ,

Bioquímica - UFPE

Introdução:

Sitophilus zeamais (Coleoptera) é responsável por danos a grãos de milho,

trigo e arroz, bem como alimentos processados como macarrão e biscoito. A

elevada toxicidade dos inseticidas sintéticos e o desenvolvimento de

resistência pelos insetos aos compostos químicos atualmente utilizados

estimulam a busca por inseticidas derivados de plantas para controle de

pragas. Lectinas são proteínas ou glicoproteínas que possuem a capacidade de

se ligar reversivelmente a carboidratos e apresentam atividade inseticida.

Rizoma de Microgramma vaccinifolia contêm uma lectina (MvRL) com

atividade inseticida sobre cupins Nasutitermes corniger.

Objetivos:

Avaliar a toxicidade por ingestão de preparação lectínica de rizoma de M.

vaccinifolia sobre S. zeamais através da determinação da taxa de mortalidade,

parâmetros nutricionais (taxa de crescimento relativo, taxa de consumo

relativo e eficiência de conversão do alimento ingerido) e do índice de

deterrência alimentar.

Métodos:

O trabalho não envolveu experimentos com animais e humanos, não

necessitando de aprovação do comitê de ética. A colônia de S. zeamais é

mantida de acordo com autorização (nº 36301-2) do Instituto Chico Mendes

de Conservação da Biodiversidade (ICMBiO), IBAMA. Extrato (10%, p/v) foi

obtido por homogeneização da farinha de rizoma em NaCl 0,15 M durante 16

h a 4 ºC. Após filtração e centrifugação (3000 g, 15 min), as proteínas do

extrato foram precipitadas com sulfato de amônio (60% de saturação) e o

precipitado obtido (F0-60) foi dialisado durante 4 h em NaCl 0,15 M e

avaliado quanto à concentração protéica e presença de lectina (atividade

hemaglutinante, AH). Cada bioensaio consistiu em uma placa de Petri com

cinco discos de farinha de trigo contendo F0-60 nas concentrações de 30, 40,

90, 110 ou 130 mg/g (mg de proteínas por g de farinha de trigo), preparados

de acordo com Napoleão et al. (J. Stor. Prod. Res. 54: 26-33, 2013). No grupo

controle foi utilizado NaCl 0,15 M em substituição a F0-60. Em seguida, 20

insetos adultos foram transferidos para a placa. Os bioensaios foram

realizados em quadruplicata a 28 ºC ± 2 ºC. Após 7 dias, foram determinadas

as taxas de mortalidade, o valor de biomassa adquirida pelos insetos e a massa

ingerida. Os seguintes índices nutricionais foram calculados: 1) taxa relativa

de ganho de biomassa: (biomassa adquirida)/(biomassa inicial dos insetos x

dias); 2) taxa de consumo relativo: (massa ingerida)/(biomassa inicial dos

insetos x dias) e 3) eficiência de conversão do alimento ingerido (ECAI):

([biomassa adquirida / massa ingerida] x 100).

Resultados:

As taxas de mortalidade dos insetos que ingeriram dieta contendo F0-60

variaram de 18,4±2,9% a 36,2±6,0%, enquanto no controle o valor foi de

9,3±3,3%. A taxa de consumo relativo foi maior em todos os tratamentos

(entre 0,067 e 0,144 mg/mg/dia) que no grupo controle (0,036 mg/mg/dia),

aumentando de acordo com a concentração de F0-60 na dieta. Contudo, a

ingestão de F0-60 foi prejudicial para os insetos, uma vez que além das taxas

de mortalidade terem aumentado, os valores de taxa relativa de ganho de

biomassa e de ECAI foram negativos, variando de -0,030 a -0,043 mg/mg/dia

e de -30,2% a -94,6%, respectivamente.

Conclusão:

F0-60, uma preparação de rizoma de M. vaccinifolia enriquecida em MvRL

apresentou atividade inseticida contra adultos de S. zeamais, induzindo

mortalidade e promovendo perda de peso, mesmo tendo estimulado o

consumo da dieta artificial pelos insetos.

Apoio Financeiro:

CNPq, FACEPE, CAPES, MCTI.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:31

10.032 - AVALIAÇÃO DE CITOXICIDADE DO EXTRATO

ETANÓLICO BRUTO DOS CAULES DE Rhaphiodon echinus (Nees &

Mart.) Schuaer (LAMIACEAE) NO SARCOMA S-180

Mendes, R. L. , Lavor, E. M. , Silva, M. G. , Lavor, A. L. , Nogueira, S. H.

C. , Maia, G. L. A. ,

NEPLAME- Núcleo de Estudos e Pesquisas em Plantas - UNIVASF

Introdução:

O câncer pode ser entendido como uma falha nos processos homeostáticos

normais relacionados com a proliferação, diferenciação, quiescência celular e

apoptose. A maioria (60%) dos fármacos anticâncer introduzidos na

terapêutica nas últimas décadas tem sua origem nos produtos naturais. A

Caatinga é um bioma exclusivamente brasileiro, ocorrendo quase que

exclusivamente na região Nordeste. No entanto, apresenta poucos estudos

químicos e biológicos. A família Lamiaceae é amplamente encontrada nesse

bioma, testes realizados com espécies dessa família mostraram atividade

antitumoral, antimicrobiana, antifúngica e espasmolítica. A espécie

Rhaphiodon echinus encontra-se distribuída nas regiões irrigadas do Vale do

São Francisco, seu óleo essencial apresenta majoritariamente mono e

sesquiterpenos, já os extratos são positivos para a presença de saponinas,

taninos e flavonoides.

Objetivos:

Avaliar a atividade citotóxica do extrato etanólico bruto dos caules de

Rhaphiodon echinus (EEB -Re) frente à linhagem tumoral sarcoma S-180.

Métodos:

Não se aplica o código de experimentação animal, pois os testes foram

realizados in vitro. Foi realizada à maceração exaustiva de 121,4g de pó dos

caules da planta, em etanol 95%, obtendo-se (EEB -Re). Para avaliação do

potencial citotóxico foi realizado o ensaio de MTS frente a células do sarcoma

S-180. Em uma placa de 96 poços foram incubadas 1x106 células/poço em

meio RPMI suplementado com 10% Soro Fetal Bovino. Após 3h, o EEB-Re

foi adicionado nas concentrações de 100, 200 e 400 µg/mL à cultura celular

que ficou incubada em estufa por 24 horas à 37°C. Após a incubação, foram

adicionados 20μL de MTS em uma concentração de 5 mg/mL aos poços. A

placa foi incubada durante 3h em estufa, sendo posteriormente a absorbância

lida a 492nm em leitora de microplacas Thermoplate®. O cálculo da

porcentagem de viabilidade celular foi dado pela razão da absorbância dos

poços tratados menos a Absorbância do branco pela Absorbância do controle

negativo menos a Absorbância do branco multiplicado por 100. Os dados

foram analisados pelo programa GraphPad Prism® versão 5.0 por ANOVA

seguido de teste de Tukey.

Resultados:

A massa de EEB concentrado foi 12,33g. O percentual de viabilidade celular

para a dose de 100μg/mL foi de 31,075% (±1,7), para a dose de 200μg/mL

26,287% (±0,4) e para a dose de 400μg/mL 22,011%(±0,45). A análise

mostrou inibição do crescimento estatisticamente significantes (p>0,005) para

todas as doses testadas.

Conclusão:

O EEB-Re apresenta ação inibitória de crescimento in vitro sobre a linhagem

tumoral de Sarcoma 180.

Apoio Financeiro:

CNPq.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:31

10.033 - PURIFICAÇÃO PARCIAL DE INIBIDOR DE TRIPSINA A

PARTIR DAS FOLHAS DE IPEZINHO (TECOMA STANS)

Patriota, L. L. S. , Procopio, T. F., Paiva, . P. M. G. , Pontual, . E. V. ,

Napoleão, T. H.,

Bioquímica - UFPE

Introdução:

Inibidores de tripsina de natureza proteica têm sido isolados de plantas e

apresentam diversas atividades biológicas, tais como inseticida,

antimicrobiana e antitumoral. Esses inibidores são capazes de causar bloqueio

ou redução da capacidade catalítica por se ligarem ao sítio ativo, atuando

como inibidores competitivos, ou interagirem com outras regiões da molécula

da enzima.

Objetivos:

O presente trabalho descreve a purificação parcial de inibidor de tripsina, a

partir do extrato salino das folhas de Tecoma stans (ipezinho), através de

precipitação proteica com sulfato de amônio e cromatografia em coluna de

troca iônica.

Métodos:

O presente trabalho não envolveu experimentos com animais ou humanos.

As folhas foram coletadas no campus da UFPE e secas durante 2 dias a 28 ºC.

O pó das folhas (10 g) foi homogeneizado com NaCl 0,15 M (100 mL)

durante 16 h a 28 ºC, utilizando agitador magnético. Após centrifugação

(9.000 g, 15 min, 28 ºC) e filtração, o sobrenadante correspondeu ao extrato

de folhas. O extrato foi tratado com sulfato de amônio (80% de saturação)

durante 4 h a 28 ºC. A fração de proteínas precipitadas (FP) e a fração

sobrenadante (FS) obtidas após centrifugação (9.000 g, 15 min, 28 ºC) foram

dialisadas contra água destilada (2 h) e NaCl 0,15 M (2 h) e avaliadas quanto à

concentração de proteínas (Lowry et al., J. Biol. Chem. 193: 265-275, 1951) e

atividade inibidora de tripsina (Pontual et al., Arch. Insect Biochem. Physiol.

79:135-152, 2012) utilizando tripsina bovina (0,1 mg/mL) e o substrato N-α-

benzoil-DL-arginina-p-nitroanilida (BApNA). Uma unidade de atividade

enzimática da tripsina foi definida como a quantidade de enzima que hidrolisa

1 μmol de BApNA por minuto. Cada unidade de tripsina reduzida na presença

da amostra correspondeu então a uma unidade de atividade inibidora de

tripsina. FP foi então dialisada contra tampão Tris-HCl 0,1 M pH 8,0 (2 h) e

cromatografada em coluna de troca iônica (DEAE-celulose) equilibrada com

esse mesmo tampão. A eluição foi realizada com tampão Tris-HCl 0,1 M pH

8,0 contendo NaCl 1,0 M e as frações contendo as proteínas adsorvidas

(frações 16 a 28) foram avaliadas quanto à concentração de proteínas e

atividade inibidora de tripsina.

Resultados:

O extrato apresentou elevada concentração protéica (23,5 mg/mL) e atividade

inibidora de tripsina de 9,3 U/mg. FP e FS apresentaram atividade inibidora de

150 e 60 U/mg, respectivamente. FP foi então escolhida para utilização na

próxima etapa devido a sua maior atividade específica. Cromatografia de FP

em coluna DEAE-celulose resultou em um único pico contendo proteínas que

adsorveram à matriz, o qual apresentou atividade inibidora de tripsina de

183,3 U/mg, indicando um fator de purificação de 19,7 vezes em relação ao

extrato. A adsorção em coluna trocadora de ânions indica que a(s) proteína(s)

inibidora(s) de tripsina de T. stans apresenta(m)-se carregada(s)

negativamente em pH 8,0.

Conclusão:

Folhas de T. stans contêm inibidor de tripsina proteico de natureza aniônica, o

qual foi purificado parcialmente pelo protocolo utilizado. Ensaios para

determinação da homogeneidade e caracterização do inibidor estão em

andamento.

Apoio Financeiro:

CNPq, FACEPE, CAPES, MCTI.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:31

10.034 - ISOLAMENTO, PURIFICAÇÃO E CARACTERIZAÇÃO

PARCIAL DA LECTINA DA BAUHINIA CHEILANTHA (Bong.)

Steud. NATIVA DO BIOMA CAATINGA.

Cruz, D. R. R. , Moraes, L. M. A. , Bezerra, G. S. , Felix, W. P. ,

Programa de Pós-graduação em Recursos Naturais do - UNIVASF

Introdução:

Lectinas são proteínas que se ligam especificamente e reversivelmente a mono

ou oligossacarídeos, mas são destituídas de atividade catalítica e, em

contraste, com anticorpos, não são produtos de uma resposta imune. O gênero

Bauhinia é muito utilizado com fins medicinais e, para algumas espécies, são

atribuídas propriedades antifúngicas, antibacterianas, antiinflamatórias e

antidiabética.

Objetivos:

Isolar, purificar e caracterizar parcialmente lectina da Bauhinia

cheilantha (Bong.) Steud., espécie nativa do Bioma Caatinga ainda não

plenamente estudada na região do Vale do Rio São Francisco.

Métodos:

protocolo nº 0002/210114 O material vegetal (folhas) de Bauhinia cheilantha

foi coletado na cidade de Petrolina-PE. O extrato bruto foi obtido após a

maceração mecânica de 48 g de folhas frescas em 200 mL de tampão Tris-

HCl pH 8,0 com PVP 2% (v/v). Deixou-se sob agitação por 30 min e filtrou-

se em gaze dupla. A seguir, centrifugou-se a 2.500 × g por 20 min a 4° C e

descartou-se o resíduo, obtendo assim o Extrato bruto, que foi usado nos

ensaios de hemaglutinação. Para os ensaios de atividade hemaglutinante

(U.H.) foram empregadas amostras de eritrócitos de coelho (Oryctolagus

cuniculus), da raça Nova Zelândia, cor branca, sexo masculino com 4 kg e 4

meses de idade. Para determinação da U.H. no extrato bruto foram utilizadas

soluções a 2% (v/v) de eritrócitos de coelho tratados e não tratados

enzimaticamente (pepsina e tripsina). Os ensaios foram realizados com

volumes iguais do extrato bruto, diluídos seriadamente com solução salina

(NaCl 0,15M) com e sem a adição de Mn++ e Ca++), incubando-os por 30

min a 38°C e deixado-os em repouso por mais 30 min a temperatura ambiente

e a determinação da U.H. foi observada macroscopicamente.

Resultados:

A ligação da lectina oriunda do extrato bruto das folha de Bauhinia

cheilantha aos carboidratos da superfície dos eritrócitos de coelho, tratados e

não tratados, promoveu a formação de uma rede que foi visível a olho nu. Os

resultados foram positivos na presença e na ausência de íons Ca2+ e Mn2+.

Conclusão:

A capacidade de hemaglutinação verificada no extrato bruto aponta para a

presença de lectina nas folhas de Bauhinia cheilantha e que essa lectina é

independentes de Ca2+ e Mn2+, e também do tratamento enzimático.

Apoio Financeiro:

FACEPE/CNPq/FABESB/CAPES/UNIVASF

Gerado em: 2014-5-21 16:22:31

10.035 - EFEITO DO COMPOSTO SINTÉTICO A2CN SOBRE A

CORRENTE TOTAL DE POTÁSSIO DE CÉLULAS DE LEUCEMIA

MIELÓIDE CRÔNICA (K562)

Vasconcelos, A. P. , Faheina-martins, G. V. , Vasconcellos, M. L. A. A. ,

Junior, C. G. L. , Araujo, D. A. M. ,

Departamento de Biotecnologia - UFPB Departamento de Quimica -

UFPB

Introdução:

O efeito do composto A2CN tem sido demostrado pelo nosso grupo na

indução de citotoxicidade em células de tumor humano, tais como, leucemia

aguda e crônica. O A2CN é um composto sintético que faz parte do grupo de

moléculas Morita-Baylis-Hillman adutos (MBHA). No entanto, a mecanicista

envolvida no processo de morte realizado pelo composto A2CN e consequente

relação com apoptose ainda não está totalmente esclarecida. Adicionalmente,

a literatura relata que os canais de K+ são importantes no desenvolvimento de

tumores, além de estarem envolvidos com os processos de morte celular.

Objetivos:

Analisar a corrente total de K+, na ausência e presença do composto A2CN.

Métodos:

Os experimentos foram realizados com a linhagem celular K562 que foi

adquirida do banco de celulas do rio de janeiro As células da linhagem K562

(leucemia mielóide crônica) foram cultivadas e as correntes iônicas foram

registradas utilizando a técnica de patch-clamp, configuração “whole-cell”. O

protocolo de voltagem para obtenção das correntes consistiu de pulsos

despolarizantes, entre -50mV a +70mV, com incremento de 20mV e 3

segundos de duração, que eram disparados a cada 20s. A partir deste

protocolo, foi obtida a relação corrente-voltagem (I/V), bem como, a

condutância ao K+ (gK). Os registros controles eram gerados na ausência de

incubação e de perfusão da molécula, e os registros tratados, eram traçados

durante a perfusão com o composto A2CN. A aquisição foi obtida por meio de

amplificador de “patch clamp” (HEKA Electronics, versão 10) e análise feita

utilizando o programa FitMaster (HEKA Electronics). Os dados foram

avaliados por meio dos ajustes dos pontos experimentais, seguindo o método

dos quadrados mínimos.

Resultados:

O composto A2CN aumentou a corrente total de potássio dependente de

voltagem (IKtotal). A amplitude da corrente na ausência e presença do A2CN

verificada no pulso de -70mV foi aumentada de 38,67 ± 2,83 pA/pF para

59,74 ± 3,7 pA/pF na concentração de 120 µM de A2CN. A curva de ativação

da IKtotal foi deslocada para esquerda na presença do A2CN (120 µM).

Conclusão:

Nós concluímos que o A2CN promoveu um aumento na IKtotal e que gK foi

alterada para valores mais negativos, indicando abertura do canal de potássio

em potenciais nos quais estes canais estariam fechados.

Apoio Financeiro:

CNPQ e CAPES

Gerado em: 2014-5-21 16:22:31

10.036 - Estudo da atividade cicatrizante da β-ionona [4-(2,6,6-trimetil-1-

ciclohexeno)-3-buten-2-ona] em úlceras cutâneas experimentais.

Souza, T. F. G. , Figueiredo, I. S. T. , Carmo, L. D. , Couto, T. S. , Paiva,

Y. T. C. N. , Nunes, M. O. , Sousa, D. P. , Alencar, N. M. N. ,

Fisiologia e Farmacologia - UFC Ciências Farmacêuticas - UFPB

Introdução:

Apesar dos recentes avanços na busca de novas substâncias químicas para o

tratamento de enfermidades, os produtos naturais continuam sendo a principal

fonte delas. A β-ionona é um sesquiterpeno presente em óleos essenciais de

uma variedade de plantas, vários estudos com este composto já foram

relatados, mas ainda são escassos. A cicatrização de feridas é um processo

complexo e dinâmico, compreendido pelas fases inflamatória, proliferativa e

de remodelação.

Objetivos:

Este estudo teve como objetivo a investigação do efeito do tratamento tópico

com creme de β-ionona no modelo de cicatrização por segunda intenção de

úlceras cutâneas experimentais em camundongos.

Métodos:

CEPA UFC 08/2012 Foram utilizados camundongos swiss machos (peso: 20-

25 g; n=10/grupo) para a indução da lesão dorsal (1,5 cm2) e distribuídos

aleatoriamente em quatro grupos experimentais, de acordo com o tratamento

tópico estabelecido: grupo controle (creme base) e três grupos experimentais

tratados com creme base incorporado com β-ionona (BI) a 1%, 5% e 10%. Os

tratamentos foram realizados diariamente e as feridas clinicamente avaliadas

durante 14 dias, de acordo com parâmetros macroscópicos dos sinais

inflamatórios e proliferativos da cicatrização. Os resultados foram expressos

como a média ± erro padrão da média (EPM), a mediana e variações, além

de porcentagem de tecido cicatricial e reepitelização de cada grupo

experimental, sendo aplicados os resultados ao testes de ANOVA, seguido do

pós-teste de Bonferroni (comparações múltiplas), teste Mann Whitney

(medianas) e teste do qui-quadrado (porcentagem), onde a diferença estatística

foi encontrada considerando p<0,05.

Resultados:

Os resultados obtidos demonstraram que feridas tratadas com BI 1% e BI 5%,

no 2º e 4º dia de avaliação, respectivamente, apresentaram edema de forma

mais intensa em relação ao grupo controle (p<0,05). Neste mesmo período, o

grupo BI 10% apresentou feridas moderadamente hiperêmicas em relação ao

grupo controle (p<0,05). A área das lesões foi avaliada para se estimar o efeito

pró-cicatricial da β-ionona. A redução na área das lesões do grupo BI 1%

(0,31 ± 0,017) foi significativamente diferente do grupo controle (0,50 ±

0,07), no 8º dia de avaliação. Enquanto que no 12º dia, os grupos BI 5% e BI

10% apresentaram uma redução significativa (0,012 ± 0,006) e (0,020 ±

0,008), respectivamente, em relação ao grupo controle (0,46 ± 0,012)

(p<0,05). Quanto aos parâmetros da fase proliferativa, o grupo BI 1%

apresentou tecido cicatricial já no 9º dia (100% das lesões), em relação a 71%

de animais do grupo controle (p<0,05). Quanto à reepitelização, no 12° dia,

uma maior frequência foi observada em animais tratados com BI 1% (55%),

em relação ao grupo controle (14%) (p<0,05). Nos dias subsequentes, todos

os grupos tratados com creme β-ionona apresentaram reepitelização de forma

significativa em relação ao grupo controle (p<0,05).

Conclusão:

Esses resultados demonstram que a β-ionona possui atividade cicatrizante em

lesões cutâneas experimentais. Porém, é necessária a realização de mais

estudos pra se compreender melhor o seu mecanismo de ação.

Apoio Financeiro:

CNPQ, Capes, Funcap

Gerado em: 2014-5-21 16:22:31

10.037 - AVALIAÇÃO DA GENOTOXIDADE DO MALEATO DE

ROSIGLITAZONA (AVANDIA) PELO TESTE DE MUTAÇÃO E

RECOMBINAÇÃO SOMÁTICA (SMART).

Cardoso, M. N. , Alves, M. V. , Bispo, L. M. , Valadares, B. L. B. ,

Departamento de Biologia - UFS Departamento de Medicina - UFS

Introdução:

Avandia (AVA - maleato de rosiglitazona), membro da classe das

tiazodinedionas, é um antidiabético oral produzido pela GlaxoSmithKline, que

age aumentando a sensibilidade do organismo à insulina. A partir desse

mecanismo melhora o controle da glicemia enquanto reduz os níveis de

insulina circulante no sangue. AVA é usada no tratamento dos pacientes com

diabetes mellitus tipo 2. Pode ser usada sozinha ou associada a outros

antidiabéticos pertencentes a outras classes, como exemplo, a metformina e a

glibenclamida.

Objetivos:

Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos mutagênicos e

recombinogênicos do AVA por meio do Teste de Mutação e Recombinação

Somática (SMART) e eventuais efeitos moduladores da ação mutagênica do

uretano (URE).

Métodos:

Para testar potencial genotóxico, larvas de Drosophila melanogaster no

terceiro estágio, obtidas dos cruzamentos padrão (ST) (fêmeas flr3 / TM3,

BdS cruzadas com machos mwh) e de alta capacidade de ativação metabólica

(HB) (fêmeas ORR; flr3 / TM3, BdS cruzadas com machos mwh), foram

tratadas com AVA nas concentrações 0,2; 0,1; 0,05; 0,025 e 0,0125 mg/mL,

isoladamente e em associação com URE (0,891mg/mL). Como controle

positivo e negativo foram utilizados, respectivamente, URE (0,891mg/mL) e

água destilada. Indivíduos de ambos os cruzamentos foram coletados e

armazenados em etanol 70%. Suas asas foram extraídas e fixadas entre lâmina

e lamínula. Durante a análise das lâminas foi registrado o número de manchas

mutantes, assim como o tipo e tamanho (número de células mutantes na

mancha). A análise estatística dos experimentos de genotoxicidade foi feita de

acordo com o teste do X2 para proporções, bicaudal, com nível de

significância: α=β=0,05 de acordo com Frei e Würgler (1988), comparando as

frequências obtidas com os grupos tratados e controle.

Resultados:

Os resultados obtidos não apresentaram diferença estatisticamente

significativa entre o controle negativo e os tratados com AVA nas condições

experimentais utilizadas. Na avaliação de antigenotoxicidade, foram

encontrados resultados estatisticamente significativos nas associações de

AVA com URE mais expressivos nos descendentes do cruzamento HB,

representando uma relação com a ativação metabólica pelo P450.

Conclusão:

Sendo assim, AVA não apresenta ação genótóxica, bem como a ativação do

P450 não exerce influência na sua genotoxidade. Por outro lado, a Avandia

apresentou efeito inibidor da ação mutagênica do Uretano.

Apoio Financeiro:

COPES, CNPq, Fapitec e UFS.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:31

10.038 - ANÁLISE COMPARATIVA DA ATIVIDADE

ANTIMICROBIANA DOS EXTRATOS CICLOHEXANO E

CLOROFÓRMIO DE Commiphora leptophloeos FRENTE A

MICROORGANISMOS DE INTERESSE HOSPITALAR.

Pereira, A. P. C. , Pereira, J. J. S. , Jandú, J. J. B. , Silva, M. V. , Correia,

M. T. S. ,

1Departamento de Bioquímica - UFPE

Introdução:

Commiphora leptophloeos, conhecida popularmente como Umburana,

pertence a família Burseraceae. É amplamente usual na medicina popular no

tratamento de diversos processos patológicos, sendo uma importante fonte de

compostos bioativos. Alguns patógenos são naturalmente resistentes a

determinados fármacos quimioterápicos, gerando uma crescente necessidade

na produção de novos agentes antimicrobianos para abordagens terapêuticas.

Nesse cenário, o interesse na investigação do potencial farmacológico das

plantas medicinais torna-se imprescindível na ampliação dessas terapias

antibacterianas.

Objetivos:

Neste contexto, objetivou-se na elaboração deste trabalho, analisar a atividade

antimicrobiana dos extratos de Clorofórmio (CL) e Ciclohexano (CH) da

casca de Commiphora leptophloeos, através dos estudos da Concentração

Mínima Inibitória (MIC) e Concentração Mínima Bactericida (CMB).

Métodos:

Para elaboração do presente trabalho não foi necessária a aprovação do

Comitê de Ética Experimental da Instituição no local. O material vegetal foi

coletado no PARNA do Catimbau-PE, processado, identificado e incorporado

ao acervo do Herbário do Instituto Agronômico de Pernambuco. Em seguida,

as cascas foram secas e processadas para obtenção da farinha. Para produção

dos extratos, foram utilizadas 5g da casca para cada solvente (Clorofórmio e

Ciclohexano) na proporção de 1:10, mantidos sob agitação por 24 horas; em

seguida o material foi filtrado, evaporado e mantido em diferentes

concentrações para estudos posteriores. Os microorganismos: Klebsiella

pneumoniae (UFPEDA 396), Bacillus subtilis (UFPEDA 86), Escherichia coli

(UFPEDA 224) e Enterococcus faecalis (UFPDA 138) foram disponibilizadas

pelo Departamento de Antibióticos da UFPE (UFPEDA). Para análise da CMI

foi realizada a diluição em série do extrato, em meio de cultura MHC

(Mueller-Hinton Caldo) e 100 mL de uma suspensão microbiana

(aproximadamente 1,5 x 108 UFC/mL) foram adicionados. As amostras foram

incubadas por 24 horas a 37 °C. Solução de resazurina (0,01%) foi usada

como um indicador de mudança na coloração de visualização: qualquer

alteração de cor variando de púrpura a rosa foi registrado como crescimento

bacteriano. A menor concentração em que nenhuma mudança de cor ocorreu,

foi tomado como o MIC.

Resultados:

Os resultados mostraram que os extratos apresentaram amplo espectro de

atividade antibacteriana. Para K. pneumoniae os extratos inibiram com MIC:

12,5 mg/mL (CL) e 12,5 mg/mL (CH); B. subtilis apresentou MIC: 3,125

mg/mL (CL) e 1,56 mg/mL (CH); E. coli apresentou MIC: 3,125 mg/ml (CL)

e 3,125 mg/ml (CH); E. faecalis demonstrou MIC: 25 mg/ml (CL) e 25mg/ml

(CH). Nos testes de Concentração Mínima Bactericida (CMB), obteve-se

atuação contra K. pneumoniae em 25 mg/ml em Ciclohexano e, E. coli de

25mg/ml (CL) e 12,5mg/ml (CH).

Conclusão:

Como conclusão, observamos que ambos os extratos se comportaram de

maneira semelhante, apresentando resultados mais significativos em suas

atividades antibacterianas contra Escherichia coli com elevado potencial

bacteriostático.

Apoio Financeiro:

FACEPE, CAPES, CNPQ

Gerado em: 2014-5-21 16:22:31

10.039 - Identificação da atividade lectínica em sementes de Schinopsis

brasiliensis (ANACARDIACEAE)

Ramos, B. A. , Melo, M. C. L. V. , Arcoverde, J. H. V. , Silva, M. V. ,

Correia, M. T. S. ,

Departamento de Bioquímica - UFPE

Introdução:

Na região Nordeste a presença das plantas medicinais faz parte da rotina

popular onde as receitas tradicionais são repassadas de geração em geração.

Desta forma estudos com plantas da caatinga, vem crescendo muito, não só

para confirmar os ditos populares, mas também para procurar substâncias que

possam ser utilizadas em aplicações médicas. Essas substâncias são geradas

de metabólitos primários e secundários que sofrem interferência da natureza.

Por possuírem aplicações biotecnológicas as Lectinas vêm sendo pesquisadas

também nessas plantas. Lectinas são proteínas ou glicoproteínas que se ligam

a carboidratos, sendo capazes de induzir a aglutinação de células ao

interagirem com glicoconjugados presentes na superfície celular e são

encontradas em todos os tecidos vegetais, porém sabe-se que geralmente a

maior quantidade se encontra armazenada nas sementes.

Objetivos:

Desta forma o presente trabalho tem como objetivo pesquisar a presença de

lectinas inéditas nas sementes de Schinopsis brasiliensis e, posteriormente

purificar, caracterizar com vista a aplicações biológicas.

Métodos:

O presente trabalho não fez uso de experimentos em humanos nem em

animais. O Extrato protéico foi obtido a partir da homogeneização da farinha

da sementes de Schinopsis brasiliensis em solução salina (NaCl 0,15 M) por

16 h à 4° C na proporção de 10% (p/v), utilizando agitador magnético. O

extrato foi obtido após filtração em gaze e centrifugação (9000 x g; 15 min, 4

°C). A presença de lectinas nas preparações ao longo do processo foi avaliada

através de ensaio de atividade hemaglutinante (AH) em placas de

microtitulação. Alíquota de 50 mL da amostra foi serialmente diluída em

NaCl 0,15 M antes da adição de 50 mL de suspensão (2,5% v/v) de eritrócitos

humanos (Tipo B, AB e O ) e de coelho tratados com glutaraldeído. Uma

unidade de atividade hemaglutinante é definida como o inverso da maior

diluição da amostra que promoveu total hemaglutinação (AH = Título-1) a

atividade hemaglutinante específica (AHE) é razão entre o título e a

quantidade de proteínas (mg/mL). O ensaio de inibição da AH por

carboidratos foi realizado incubando a preparação lectínica com Glicose,

Galactose, Frutose, Maltose, e N-acetil-glicosamina por 15 min a 28 °C antes

da determinação da AH.

Resultados:

A AH de sementes de S. brasiliensis foi de 512 frente aos eritrócitos de

coelho, sendo esta utilizada como padrão. A AH nos tipos sanguíneos B, AB e

O de humanos foi 8, 4 e 8, respectivamente. A concentração protéica da

semente foi de 16,8 mg/mL e assim sua AHE foi de 30,47. O extrato salino foi

inibido parcialmente por N-Acetil-Glicosamina, Maltose e Frutose, porém não

sendo inibida por glicose e galactose.

Conclusão:

O presente trabalho mostra a presença de lectinas em sementes de S.

brasiliensis. De acordo com os resultados a purificação parcial da lectina

poderá ser efetuada por cromatografia por afinidade em coluna de quitina.

Apoio Financeiro:

FACEPE, CAPES e CNPQ.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:31

10.040 - Pesquisa de lectinas nas sementes de Pseudobombax marginatum

(MALVACEAE)

Melo, M. C. L. V. , Ramos, B. A. , Arcoverde, J. H. V. , Silva, M. V. ,

Correia, M. T. S. ,

Departamento de Bioquímica - UFPE

Introdução:

Pseudobombax marginatum, também conhecida como Embiratanha, possui

uma distribuição ampla, em Pernambuco ocorre exclusivamente na região

semi-árida. Estudos com plantas da caatinga vêm crescendo cada vez mais, já

foi comprovado que o extrato hidroalcoólico da Embiratanha apresenta

atividade biológica antiinflamatória e também analgésica periférica (Paiva,

Dayane Carla Costa, Mossoró, RN, 2013). Lectinas são proteínas ou

glicoproteínas de origem não imunológica, capazes de interagir de forma

reversível com carboidratos, e possuem a capacidade de aglutinar eritrócitos.

Essas proteínas são amplamente distribuídas, estão em vários organismos

vivos, porém nas plantas se encontram em geralmente em maior quantidade

nas sementes. No entanto, a presença de lectinas nas sementes de P.

marginatum, nunca foram descritas.

Objetivos:

O presente trabalho tem como objetivo identificar a presença de lectinas na

semente de Pseudobombax marginatum, para posterior purificação,

caracterização e aplicações biológicas.

Métodos:

O presente trabalho não fez uso de experimentos em animais nem em

humanos. O extrato foi obtido da farinha de sementes de P. marginatum,

através da a partir da homogeneização (16 h a 4° C) em solução salina (NaCl

0,15 M), na proporção de 10% (p/v), utilizando agitador magnético.

Posteriormente foi filtrado em gaze centrifugado (9000 x g, 15 min, 4 °C). A

atividade hemaglutinante (AH) é feita para detecção de lectinas em placas de

microtitulação. 50 mL da amostra foi serialmente diluída em NaCl 0,15 M

antes da adição de 50 mL de suspensão (2,5% v/v) de eritrócitos de coelho

tratados com glutaraldeído. Uma unidade de atividade hemaglutinante (AH =

Título-1) foi definida como o inverso da maior diluição da amostra que

promoveu total hemaglutinação depois a atividade hemaglutinante específica

(AHE) foi determinada pela razão entre o título e a quantidade de proteínas

(mg/mL). Ensaios de inibição da AH por carboidratos são feitas para

confirmação da presença de lectinas e foram feitos incubando a solução

contendo lectina com monossacarídeos ou dissacarídeos por 15 min a 28 °C.

Resultados:

As sementes de P. marginatum possuem AH igual a 64, frente aos eritrócitos

de coelho glutarizados. Sua concentração protéica foi de 2,8 mg/mL e a AHE

foi de a 22,8. A inibição da AH foi realizada com os açúcares Glicose,

Galactose, Frutose, Maltose e N-Acetil-Glicosamina e foi inibida por todos

esses.

Conclusão:

De acordo com os resultados observamos a presença de lectinas nas sementes

de P. marginatum e sua purificação parcial se fará através de cromatografia

por afinidade usando coluna de quitina.

Apoio Financeiro:

CAPES, FACEPE e CNPQ.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:31

10.041 - ATIVIDADE ANTI-INFLAMATÓRIA DE Croton adamantinus

Müll. Arg. (CARRASCO).

Albuquerque, J. F. C. , Santos, S. M. , Rodrigues, T. B. , Mendes, R. F. V.

, Silva, Y. K. D. , Nogueira, L. M. , Martins, R. D. , Ximenes, R. M. ,

Departamento de Antibióticos - UFPE Departamento de Fisiologia e

Farmacologia - UFC Centro Acadêmico de Vitória - UFPE

Introdução:

Croton adamantinus, conhecido na medicina popular como carrasco, é

utilizado para o tratamento de problemas inflamatórios, dor, cicatrização de

feridas e distúrbios gastrointestinais.

Objetivos:

O objetivo deste trabalho foi avaliar se a atividade anti-inflamatória atribuída

a planta pela população realmente existe.

Métodos:

23076.020508/2010-26 As cascas de C. adamantinus foram coletadas em

Salgueiro/PE, secas e trituras, e extraídas com etanol P.A. O extrato foi

evaporado até a secura e utilizado para realização dos experimentos. Foram

utilizados camundongos Swiss (n = 6), machos, com aproximadamente 60

dias de idade, aclimatados a 22ºC com ciclo circadiano de 12h e água e

comida ad libitum. Para avaliação da atividade anti-inflamatória, foi utilizado

o teste de edema de orelha induzido por óleo de cróton a 3%. Foram

realizados dois grupos para avaliar a atividade tópica e sistêmica. Nos dois

grupos, o edema foi induzido pela aplicação de 20uL de óleo de cróton a 3%

diluído em acetona na orelha direita. A orelha esquerda recebeu somente

acetona como controle negativo. No grupo tópico, os animais foram tratados

imediatamente com o carrasco (1 mg/orelha) ou dexametasona (0,1

mg/orelha), ambos diluídos em acetona. No grupo sistêmico, os animais

receberam o carrasco (10, 30, 100 e 300 mg/kg, i.p.) ou indometacina (10

mg/kg, i.p.) trinta minutos antes da indução do edema. Após 6 horas, os

animais foram sacrificados por deslocamento cervical e amostras de 6 mm de

diâmetro foram retiradas de cada orelha e pesadas em balança analítica. A

diferença entre os pesos das orelhas esquerda e direita foi utilizada como

indicativo de edema. Os resultados foram expressos como média ± EPM e

analisados por ANOVA com pós-teste de Dunnet, considerando p < 0,05.

Resultados:

Tanto o carrasco quanto a dexametasona foram capazes de inibir a formação

de edema quando aplicados por via tópica (Controle 10,03 ± 0,52; Carrasco

3,38 ± 0,47*; Dexa 1,85 ± 0,20*). Por via sistêmica, o carrasco nas doses de

100 e 300 foi capaz de inibir a formação do edema (Controle 10,03 ± 0,52;

Carrasco100 6,36 ± 0,94*; Carrasco300 4,73 ± 0,79*; Indo 8,36 ± 1,14).

Conclusão:

O extrato etanólico das cascas de C. adamantinus foi eficaz, por via tópica e

por via sistêmica, em inibir a formação de edema induzida pela aplicação

tópica de óleo de cróton.

Apoio Financeiro:

Propesq/UFPE.

Gerado em: 2014-5-21 16:22:31

10.042 - Tratamento tópico com o triterpeno friedelina acelera a

cicatrização de feridas cutâneas em camundongos.

Ferro, J. N. S. , Aquino, F. L. T. , Carvalho, P. S. M. , Conserva, L. M. ,

Barreto, E. O. ,

Laboratório de Biologia Celular - ICBS Laboratório de Pesquisa em

Química de Produtos Nat - IQB

Introdução:

Os triterpenos apresentam diversos efeitos de interesse para a saúde humana,

incluindo efeitos cicatrizantes. A friedelina, um triterpeno pentacíclico, exibe

uma ampla gama de propriedades farmacológicas, porém, não há registros na

literatura cientifica de que a friedelina possa apresentar efeitos de cura em

lesões cutâneas.

Objetivos:

Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da friedelina no

processo de cicatrização de feridas cutâneas em camundongos.

Métodos:

CEUA (009481/2011-21). Camundongos Swiss machos (n=5; 25-30 g)

foram anestesiados e submetidos a uma cirurgia com lâmina de bisturi estéril

na região dorsal para indução da ferida. O tratamento ocorreu por via tópica

com 200 µl friedelina (0,001%; 0,01% e 0,1%) ou solução salina (NaCl,

0.9%). Foram avaliados nos dias 4, 8 e 11 após a indução da ferida parâmetros

macroscópicos (área de contração da ferida e tempo de epitelização avaliada

pelo registro diário de imagens obtidas por meio de uma câmera digital) e

microscópicos (morfologia tecidual utilizando coloração de H&E e deposição

de colágeno através da coloração de tricrômico de Masson). Todos os

protocolos experimentais foram aprovados pelo CEUA (009481/2011-21).

Resultados:

No dia 11º dia após a indução da ferida, o tratamento com friedelina

(0,001%; 0,01% e 0,1%) reduziram significativamente a área da ferida (em

83,92±2,87; 82,88±2,84 e 72,83±4,2%, respectivamente) quando comparados

ao veículo (49,15±2,57%). A análise histológica revelou que o tratamento

local com a friedelina proporcionou uma melhor organização tecidual com

epitélio hiperplásico estruturado na borda da ferida, presença de estruturas

semelhante a vasos, um aumento na deposição de colágeno e com menor

infiltrado inflamatório quando comparado ao grupo tratado com veículo.

Conclusão:

Em conjunto, estes resultados, demonstram pela primeira vez o potencial

cicatrizante promovido pelo tratamento tópico do triterpeno friedelina sobre

feridas cutâneas. Estudos estão em andamento para esclarecer as vias que a

FD promove tais reparos e os efeitos sobre fibroblastos.

Apoio Financeiro:

CAPES e CNPq

Gerado em: 2014-5-22 10:06:12

10.043 - SÍNTESE E ATIVIDADE CITOTÓXICA DO DERIVADO

TIAZOLIDÍNICO 5-(2-HIDROXI-3-BROMO-5-

CLOROBENZILIDENO)-TIAZOLIDINA-2,4-DIONA 1Santiago,

P.B.G.S., 1Egito, M.S., 2Militão, G.C.G., 1Silva,T.G., 1Albuquerque,

J.F.C., 1Departamento de Antibióticos, 2Departamento de Farmacologia

e Fisiologia, UFPE, Recife/PE

Santiago, P. B. G. S. , Egito, M. S. , Militao, . G. C. G. , Silva, T. G. ,

Albuquerque, J. F. C. ,

Departamento de Antibióticos - UFPE Departamento de Farmacologia e

Fisiologia - UFPE

Introdução:

A síntese de novos fármacos tem contribuído decisivamente para a evolução

da terapêutica, através do uso de novas metodologias sintéticas e dos estudos

relação estrutura-atividade. Os derivados tiazolidínicos e seus análogos

estruturais, substituídos nas diversas posições do anel heterocíclico se

destacam por possuírem propriedades com amplo espectro de ação em

diversos alvos biológicos, são moléculas potencialmente ativas. Estes

compostos vêm despertando o interesse de vários pesquisadores nas diversas

parte do mundo devido as suas propriedades farmacológicas. Neste contexto,

foi sintetizado um novo composto a partir da condensação da tiazolidina-2,4-

diona com 2-Hidroxi-3-Bromo-5-clorobenzaldeído. O produto obtido foi

enviado para avaliação da atividade citotóxica utilizando as células de

linhagem MCF-7 (adenocarcinoma mamário).

Objetivos:

Sintetizar e testar o composto 5-(2-Hidroxi-3-Bromo-5-clorobenzilideno)-

tiazolidina-2,4-diona (Ju-604) contra a linhagem celular MCF-7.

Métodos:

O presente trabalho não utilizou para suas pesquisas, em qualquer etapa,

nenhuma experimentação humana ou animal. O composto Ju-604 foi

sintetizado partindo da tiazolidina-2,4-diona (Ju-32) 0,100g (0,85 mmol)

dissolvida em 4 mL de Etanol e 2 gotas de piperidina. A mistura foi mantida

sob agitação magnética à temperatura ambiente por 10 min. Em seguida, foi

adicionado 0,2010g (0,85 mmol) do 2-Hidroxi-3-Bromo-5-clorobenzaldeído

aquecido a 75 °C. Após 24 horas de reação, o produto foi purificado por

cristalização em etanol, filtrado, seco e determinada suas constantes físicas.

Os testes para a determinação da atividade citotóxica foram realizados com

células de linhagem MCF-7 pelo método colorimétrico do MTT conforme

protocolo usado e aprovado pelo Instituto Internacional do Câncer. Uma

suspensão celular (105 células/mL) foi distribuída em placa de cultura com 96

poços (100 µL em cada poço). A placa foi incubada a 37 °C, com atmosfera

úmida enriquecida com 5% de CO2 por 24 h. Em seguida, foi adicionada a

substância teste (100 µL/poço) e a placa foi reincubada a 37 °C. Após 72 h de

contato das células com o produto teste, foi adicionado 0,25 µL de MTT

(brometo (3-[5,4-dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazólio), 5 mg/mL em PBS

(p/v) em cada poço e a placa foi deixada por duas horas em estufa 37° C. Ao

final desse período o meio de cultura, juntamente com o excesso de MTT

foram aspirados e em seguida, 100 µL de DMSO foi adicionado a cada poço

para dissolução dos cristais de formazano. A leitura óptica foi feita em leitor

automático de placas do tipo Multiskan (490 nm) e a densidade óptica (DO)

média dos poços foi comparada com a DO média do poço controle.

Resultados:

Rendimento 43 %, Rf 0,47 (CHCl3/MeOH - 0,96:0,04) e Ponto de Fusão 197

ºC. A estrutura química foi comprovada por meio de métodos físicos

espectroscópicos de RMN1H, RMN13C, Massas e Infravermelho. No teste

inicial o composto tiazolidínico (Ju-604) evidenciou capacidade de inibir o

crescimento da célula tumoral testada em 69% e apresentando IC50 de

17,98µg/ml.

Conclusão:

O composto Ju-604 foi obtido puro, com rendimento razoável e suas

constantes físicas definidas comprovando assim, a pureza do composto. O

teste de atividade citotóxica desse derivado apresentou inibição em relação ao

crescimento desordenado das células da linhagem testada, MCF-7. O

resultado da IC50 foi considerado baixo.

Apoio Financeiro:

CNPq.

Gerado em: 2014-5-22 10:06:12

10.044 - EFEITO CITOTÓXICO INDUZIDOS POR FITOTERÁPICOS

NAS LINHAGENS MACL-1 E MGSO-3 DE CÂNCER DE MAMA

PRIMÁRIO

Dias, M. T. S. , Gontijo, M. R. , Gonsalves, I. V. , Cruz, J. S. , Almeida, G.

P. , Pôssas, N. A. A. , Goes, A. M. , Rodrigues, A.L.P. , Tafuri, L. S. A. ,

Faculdade de Ciências Humanas e da Saúde - FUMEC Departamento de

Bioquímica e Imunologia - UFMG

Introdução:

O câncer de mama é considerado o segundo tipo de câncer mais freqüente no

mundo, e o mais comum entre as mulheres. Apesar dos avanços no tratamento

e nos estudos sobre a biologia do câncer de mama, a taxa de mortalidade ainda

é alta. Diversas substâncias derivadas de produtos naturais parecem exercer

várias ações celulares, como regulação do ciclo celular, indução de apoptose e

modulação de vias de transdução de sinais, tornando-se alternativas

interessantes para estudos que visam identificar substâncias fitoterápicas para

prevenção e tratamento alternativo para o câncer.

Objetivos:

Investigar efeitos citotóxicos de alguns fitoterápicos em células das linhagens

MACL-1 e MGSO-3 de câncer de mama primário.

Métodos:

Porque nossos experimentos são realizados em linhagens celulares isoladas e

mantidas em cultura. Os fitoterápicos testados foram: Linalool, Eugenol,

Carvacrol, LABDA e Warifteína. As células foram tratadas com cada

composto em diferentes concentrações por 24 e 48 horas. A citotoxicidade foi

avaliada pelo ensaio de MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-

diphenyltetrazolium bromide]. Os resultados foram calculados como

porcentagem de viabilidade celular em relação a células controle não tratadas.

Os resultados foram expressos como média ± DP de quatro experimentos

independentes. A análise estatística foi feita utilizando-se o teste T de student.

As células foram também fotografadas ao microscópio para observação da

morfologia.

Resultados:

Os experimentos preliminares demonstraram que dos cinco compostos

testados, o Eugenol e a Warifteína foram os que apresentaram maiores ações

citotóxicas celulares. A substância Warifteína foi a que apresentou os maiores

efeitos. Os resultados demonstram que foi possível observar uma redução

significativa na viabilidade celular induzida pela Warifteína nas duas

linhagens celulares após 24 horas de tratamento, nas doses de 50, 100 e 200

µg/mL (p<0,05). Após 48 horas de tratamento, todas as concentrações foram

capazes de reduzir a viabilidade celular (p<0,05), de maneira dependente de

concentração. A avaliação morfológica demonstra uma menor quantidade de

células aderidas, e muitas células em suspensão, com alterações na morfologia

original, após o tratamento com Warifteína.

Conclusão:

Os resultados sugerem um importante efeito citotóxico de compostos

derivados de plantas, em especial a Warifteína, em células de câncer de

mama. Outros experimentos estão sendo realizados para investigar as ações de

outros fitoterápicos, bem como os mecanismos moleculares envolvidos no

processo de citotoxicidade.

Apoio Financeiro:

ProPIC/FUMEC e CNPq

Gerado em: 2014-5-22 10:06:12

10.045 - SÍNTESE DE DERIVADO TIOSSEMICARBAZÔNICO E

DETERMINAÇÃO DE SUA ATIVIDADE CITOTÓXICA.

Egito, M. S. , Santiago, P. B. G. S. , Souza, C. C. S. , Militao, G. C. G. ,

Albuquerque, J. F. C. ,

Farmácia - UFPE Antibióticos - UFPE Farmacologia e Fisiologia - UFPE

Introdução:

O câncer, doença caracterizada pelo crescimento descontrolado de células, é a

segunda maior causa de mortes no mundo. As pequenas moléculas são fontes

para a descoberta de novos candidatos a fármacos (Bioorg. Medic. Chem.

18:5090–5102, 2010). As tiossemicarbazonas consitem em bases de Schiff.

São compostos versáteis e muito estudados pelos pesquisadores, devido ao

grande perfil farmacológico que apresentam. Algumas das atividades

apresentadas por esses compostos são: antitumoral, antimicrobiana e

antiparasitária (Quim. Nova 28:1030-1037, 2005). Estas moléculas são

consideradas um dos mais importantes núcleos na Química Medicinal.

Objetivos:

Sintetizar o composto tiossemicarbazônico e determinar sua atividade

citotóxica frente a diferentes linhagens celulares.

Métodos:

Neste trabalho não foram realizados testes in vivo. O composto 2-Nitro-

tiossemicarbazona (Ju-729) foi obtido a partir da reação de condensação entre

a tiossemicarbazida e o 2-Nitro-benzaldeído. Nesta reação foram utilizados

ácido clorídrico como catalizador e iso-propanol como solvente. A reação foi

processada sob refluxo e aquecimento a 70 °C por 11 minutos. O produto foi

vertido para um béquer e filtrado em funil sinterizado. Para determinação da

atividade citotóxica foram utilizadas células da linhagem Hep-2 (carcinoma de

epidermóide de laringe) e da linhagem NCI H-292 (carcinoma muco

epidermóide de pulmão). A atividade foi avaliada pelo método MTT, baseado

na conversão do sal 3-(4,5-dimetil-2-tiazol)-2,5-difenil-2-H-brometo de

tetrazolium (MTT) em azul de formazan. Foi utilizada uma suspensão celular

(105 células/mL), distribuída nas placas de cultura com 96 poços (200 µL em

cada poço) e incubadas a 37 °C por 24 h. Posteriormente, a substância teste

foi adicionada (10 µL/poço) e as placas reincubadas a 37 °C. Após 72 horas,

foi adicionado 0,25 µL de MTT em cada poço e as placas foram deixadas por

duas horas em estufa a 37 °C. Em seguida, o meio de cultura e o excesso de

MTT foram aspirados e 100 µL de DMSO foi adicionado a cada poço para

dissolução dos cristais de formazan.

Resultados:

Os resultados apresentados pelo produto reacional puro foram: Ponto de

Fusão. 173-174 ºC, Rf: 0,54 (Hexano/Acetato de etila 0,6:0,4). O rendimento

foi de 68,14%. Esse rendimento foi considerado bom em relação aos demais

compostos sintetizados em nosso laboratório. O composto apresentou inibição

de 49,41 % para as células Hep-2 e de 29,83 % para as células da linhagem

NCI H-292 na concentração de 25 µg/mL. A inibição destes compostos para

estas células está abaixo do percentual inibitório do controle positivo que foi

utilizado, a doxorrubicina, e abaixo do valor preconizado pelo protocolo

adotado, que é de 50 % em concentrações menor ou igual a 30 µg/mL (Canc.

Chemoter. Rep. 3:2, 1972).

Conclusão:

O composto foi sintetizado dentro das normas planejadas. As constantes

físicas foram taxativas para determinar a pureza do composto. O derivado

tiossemicarbazônico apresentou fraca atividade citotóxica frente às células

NCI H-292 e atividade um pouco melhor frente à linhagem Hep-2. Logo, se

faz necessário a realização de modificações na molécula, sejam elas em

relação a substituintes ou ciclizações, para, assim, potencializarmos a sua

atividade citotóxica.

Apoio Financeiro:

CNPq.

Gerado em: 2014-5-22 10:06:12

10.046 - VENENO DA SERPENTE Bothrops jararacussu INDUZ A

MIGRAÇÃO DE NEUTRÓFILOS POR UM MECANISMO

QUIMIOTÁTICO DIRETO

Wanderley, C. W. S. , Silva, C. M. S. , Wong, D. V. T. , Cosker, F. , Colon,

D. F. , Ximenez, R. M. , Palheta-Jr, R. C. , Cunha, F. Q., Ribeiro, R. A. ,

Lima-Junior, R. C. P. ,

1 Departamento de Fisiologia e Farmacologia - UFC 2 Departamento de

Farmacologia - FMRP - USP 3 Colegiado de Medicina Veterinária -

UNIVASF

Introdução:

Os efeitos locais do envenenamento produzido por serpentes da espécie

Bothrops jararacussu são resultantes das lesões induzidas pela ação direta do

veneno e da resposta inflamatória associada. Neste contexto, os mecanimos de

interação entre o veneno e a resposta imune e a contibuição destes para a

indução das lesões ainda são pouco compreendidos.

Objetivos:

Investigar a participação dos neutrófilos nos danos locais induzidos pelo

veneno da serpente Bothrops jararacussu (VBj) em camundongos e avaliar a

ação direta do VBj sobre a migração e a ativação de neutrófilos humanos.

Métodos:

CEPA: 62/2012 Para avaliar o efeito local do VBj in vivo utilizaram-se

camundongos swiss fêmeas (25 ± 2g, n=7/grupo, CEPA: 62/2012). Para isso

foi realizada a aplicação intraplantar (i.pl.) de solução salina ou VBj (0,125 - 8

µg/pata) e mensurado o edema de pata porpletismografia, a cada hora por 24h.

Outros grupos foram pré-tratados com solução salina ou Fucoidina (um

inibidor de P- e L-selectinas, Fuco 25 mg/kg, i.p.) uma hora antes da injeção

do VBj (8 µg/pata i.pl.). Após a eutanásia, amostras de tecido foram obtidas

para dosagem da atividade da mieloperoxidase (MPO, U/mg tecido) e exame

histopatológico. Para obtenção dos neutrófilos humanos, 2 mL de sangue de

voluntários sadios (Homens, 20-25 anos, CEP:543.774) foi adicionado sobre

gradientes de Percoll (72, 63, 54 e 45%). Após a centrifugação (650xg por

30min) a camada inferior contendo neutrófilos foi separada e ressuspensa em

meio RPMI. Na Câmara de Boyden, o VBj (10, 30, 100 ng/poço), IL-8 (100

ng/poço), ou meio RPMI, foram adicionados aos poços da placa inferior,

separados por uma membrana de policarboneto dos poços superiores onde

foram adicionados os neutrófilos (5 x 104 cél/poço, 25 ul/poço). Após 1 h de

incubação o número de células atraídas para a membrana foi contado. Para

avaliar a ativação dos neutrófilos, as células foram incubadas com o Fluo4

(marcador de Ca2+) e após o período de observação basal foi adicionado o

VBj (30 ng/mL), ou fMLP (10 nM), ou IL-8 (100 ng/ml). A dinâmica

intracelular de Ca2+ foi monitorada a 488 nm por meio da microscopia

confocal (intensidade de fluorescência, F1/F0). Os valores foram expressos

como média ± S.E.M. e analisados por teste t, ou one- ou two- way

ANOVA/Bonferroni. Um P<0,05 foi aceito.

Resultados:

A injeção do VBj (8 µg/pata) na pata de camundongos causou uma rápida

resposta edematogênica, dose e tempo dependente, com um pico as 0,5 h que

manteve-se estável até 4,5 h acompanhado pelo aumento da atividade da MPO

vs. grupo controle, (edema: 62,6±8,0 vs. 0±0 %; MPO:31,5±3,6 vs. 2,1±0,3,

respectivamente). No exame histopatológico a injeção do VBj causou um

precoce aumento do infiltrado neutrofílico observado 1,5 h após a injeção do

veneno. Entretanto, o edema e o aumento da MPO induzidos pelo veneno

foram marcadamente inibidos pela Fuco (edema: Fuco+VBj

[46,2±8,5]vs.VBj[72,4±6,6] %; MPO: Fuco+VBj [5,1±3,0]vs.VBj [31,5±3,6],

respectivamente).Na Câmara de Boyden, o VBj(10 e 30 ng/poço) ou a IL-8

atraíram diretamente os neutrófilos em comparação ao RPMI (10,1±1,3,

13±1,4 ou 10,5± 0,8 vs. 1,2±0,4, respectivamente). Além disso, o veneno

ativou os neutrófilos aumentando o influxo de Ca2+ assim como observado

com o fMLP ou IL-8 vs. controle negativo (1,6±0,1; 2,2±0; 1,6±0,1 vs.

0,8±0,1, respectivamente).

Conclusão:

O VBj induz uma rápida resposta edematogênica dependente da ativação

direta de neutrófilos.

Apoio Financeiro:

CNPQ, CAPES e FUNCAP

Gerado em: 2014-5-22 10:06:12

10.047 - A ISOFLAVONA FORMONONETINA DE PRÓPOLIS

VERMELHA É RESPONSÁVEL PELA ATIVIDADE ANTIGÚNGICA

SOBRE O GÊNERO Candida.

Neves, M. V. M. D. , Cunha, E. V. L. , Lima, E. O. , Oliveira, E. J. ,

Oliveira, E. J. ,

Departamento de Biotecnologia - UFPB Departamento de Ciências

Farmacêuticas - UFPB

Introdução:

A própolis é um produto resinoso e que geralmente contém bálsamos vegetais,

ceras, óleos essenciais e aromáticos, pólen e outros. A própolis brasileira foi

classificada em 12 grupos, com base na sua composição química e atividades

biológicas. O tipo 13, chamado de própolis vermelha, possui diversas

atividades biológicas relatadas, tais como antimicrobiana, anti-inflamatória,

antitumoral, entre outras. Entre as substâncias isoladas de amostras de

própolis, destacam-se os flavonoides e os ácidos fenólicos, pois a eles é

atribuída grande parte das atividades biológicas.

Objetivos:

Realizar um fracionamento biomonitorado de própolis vermelha, a fim de

determinar os compostos responsáveis pela atividade antimicrobiana,

especialmente contra Candida sp.

Métodos:

O trabalho foi desenvolvido sem a utilização de experimentação animal ou

humana. As amostras de própolis vermelha foram coletadas em Igarassu-PE,

na forma in natura bruta. Em seguida foram trituradas e extraídas em etanol

96% por 30 minutos em ultrassom e filtrada. O sobrenadante foi concentrado

obtendo-se o extrato etanólico bruto seco. Esse extrato foi suspenso em uma

mistura de metanol-água (1:1) e fracionado por separação líquido-líquido com

hexano e acetato de etila. Após a evaporação dos solventes, obtiveram-se as

frações hexano, acetato e metanol. A avaliação da atividade antimicrobiana foi

feita através das concentrações: inibitória mínima (CIM), bactericida mínima

(CBM) e fungicida mínima (CFM).

Resultados:

Observou-se que a própolis in natura bruta triturada e o extrato etanólico bruto

seco da amostra 1 e 2 apresentaram 100% de atividade sobre os 12

microrganismos, com CIM de 256µg/mL. Ambas as frações hexano, acetato e

metanol da amostra 1 apresentaram 100% de atividade, com CIM’s de 128-

512µg/mL sobre as seis bactérias e 32-1024µg/mL sobre as seis leveduras.

Ambas as frações hexano e acetato da amostra 2 apresentaram 100% de

atividade, com CIM’s de 512µg/mL sobre as seis bactérias e 32µg/mL sobre

as seis leveduras. A fração metanol da amostra 2 apresentou 41,6% de

atividade, com CIM de 32µg/mL sobre cinco das seis leveduras. A

formononetina foi o componente encontrado majoritariamente, na própolis in

natura bruta triturada, no extrato etanólico bruto seco e nas frações hexano,

acetato e metanol, não sendo encontrada apenas na fração metanol da amostra

2, apresentando 100% de atividade, com CIM de 200µg/mL sobre as seis

bactérias e 25µg/mL sobre as seis leveduras. Apenas a fração acetato da

amostra 2 apresentou atividade bactericida sobre quatro bactérias, com CBM

de 1024µg/mL. Verificou-se que as seguintes amostras apresentaram atividade

fungicida: extrato etanólico bruto seco da amostra 2 sobre as seis leveduras; as

frações hexano, acetato e metanol da amostra 1 sobre três, três e uma

leveduras, respectivamente; as frações hexano e acetato da amostra 1 sobre

três e seis leveduras, respectivamente e formononetina sobre cinco leveduras.

Conclusão:

Formononetina é uma isoflavona presente na própolis vermelha como um dos

principais constituintes responsáveis pela atividade sobre Candida sp. Esta

molécula pode servir como um protótipo para a síntese de análogos mais

potentes e para a investigação do mecanismo de ação contra a Candida sp.

Apoio Financeiro:

CNPq

Gerado em: 2014-5-22 10:06:12

10.048 - EFEITO MIORELAXANTE DO ÓLEO ESSENCIAL DE Lippia

alba E SEU CONSTITUINTE MAJORITÁRIO CITRAL SOBRE A

MUSCULATURA LISA DA TRAQUEIA DE RATOS WISTAR.

Silva, A. A. , Carvalho, P. M. M. , Morais, L. P. , Matos, D. F. , Souza, D.

G. , Souza, S. D. G. , Silva, R. E. R. , Menezes, I. R. A. , Kerntopf, M. R. ,

Barbosa, R. ,

Ciências Biológicas e da Saúde - URCA Quimica Biológica - Urca

Introdução:

A espécie em estudo é a Lippia alba conhecida também como erva-cidreira, tem

o seus efeitos comprovados como excelente expectorante nas tosses causadas

por gripes e resfriados. Os constituintes majoritários do óleo essencial da L.

alba são o citral e mirceno, com ação espasmolítica e analgésica

respectivamente. Devido a sua ação espasmolíticas a L. alba e o citral tornam-

se grande alvo de estudo para as doenças respiratórias, como exemplo as

doença pulmonar obstrutiva (DPOC).

Objetivos:

Dessa forma objetivou-se com este estudo, avaliar o efeito do óleo essencial de L.

alba (OELa) e do seu componente majoritário citral, sobre a contração da

musculatura lisa da traqueia de ratos.

Métodos:

O projeto foi aprovado dentro das normas de ética em pesquisa animal e

registrado no número acima.

Para a realização dos experimentos utilizou-se 62 ratos Wistar (machos, com peso de180-250 g), mantidos com água e ração a vontade. Os animais foram eutanasiados em câmara de CO2 seguido de pneumotórax para a dissecação da traqueia, que foi cortada em anéis com aproximadamente 3 mm de diâmetro e colocados nas cubetas do banho de órgão contendo 10 ml de solução nutridora (Tyrode modificado), com pH ajustado para 7.4 e uma temperatura de 37°C, permanecendo em estabilização por 1 hora. Decorrido este tempo, foram feitas

administração dos agentes contraturantes: KCl na concentração de 60 mM (paraa via

eletromecânica), ACh 10 μM (para via farmacomecânica) e

BaCl (cumulativas 0,1-30 mM). Após a aplicação dos agentes contracturantes

foram administradas concentrações crescentes e cumulativas de OELa e citral

(1–10.000 μg/ml).

Resultados:

Na via eletromecânica verificamos que a redução com o OELa começou em 30 μg/ml,

mas foi estatisticamente significante nas concentrações de 300 μg/ml, sendo

esta também a concentração que o citral apresentou relaxamento e

significância (66,22 ± 3,63 e 15, 19± 2,51, respectivamente) o limiar de

relaxamento para ambos foi com a concentração de 1000 μg/ml, obtendo os valores

de 31,70±5,48 e 7,95±3,28, (p< 0,001 OELa e p< 0,01 citral) comparando

com a porcentagem do controle. O OELa foi mais potente do que seu

constituinte majoritário citral, tendo como IC50 374 µg/ml e IC50 651.2 µg/ml

respectivamente. Quando foi utilizado a ACh observou-se que OELa e o citral

não promoveram um relaxamento estatisticamente significante na musculatura

lisa traqueal, logo, ambos não agem sobre a via farmacomecânica

(p<0,09). Para confirmar se o relaxamento da musculatura lisa na via

eletromecânica é dependente dos canais catiônicos operados por voltagem

(VOCCs), utilizou-se bário (30 mM) e nifedipina (10 μm) resultando em um

relaxamento total da musculatura lisa da traqueia. O OELa relaxou a

musculatura lisa e foi estatisticamente significante na concentração de

bário 30 μg/ml com valores 29 ± 0,8 e 19 ± 0,82, OELa e Citral

respectivamente, comparando com a porcentagem do controle. Quando

utilizamos a nifedipina verificamos que também houve um relaxamento da

musculatura lisa, por meio desta e pelo OELa (p< 0,005) comparando com a

porcentagem do controle(54± 2.6% e 52 ± 3,5 ).

Conclusão:

Concluímos o efeito miorelaxante do OELa na musculatura lisa da traquéia de ratos, esse efeito se dá pelo acoplamento eletromecânico e tanto o OELa quanto o citral promove o relaxamento

via VOCCs e que ambos relaxaram a musculatura lisa de maneira concentração dependente. O

que confere ao OELa e o citral um potencial como agente terapêutico.

Apoio Financeiro:

FUNCAP, CNPq e URCA

Gerado em: 2014-5-22 10:06:12

10.049 - TOXICIDADE AGUDA E EFEITO GASTROPROTETOR DO

p-CIMENO EM ÚLCERAS GÁTRICAS INDUZIDAS POR

HCl/ETANOL EM CAMUNDONGOS

Paulo, L. L. , Formiga, R. O. , Sousa, C. G. B. L. , Castello Branco, M. V.

S., Batista, L. M.,

DCF/CCS - UFPB PgPNSB/CCS - UFPB

Introdução:

p-cimeno (p-isopropiltolueno) é um composto orgânico aromático de

ocorrência natural, presente em muitos óleos de plantas gimnospermas e

angiospermas. É classificado como monoterpeno, presente em óleos voláteis

de mais de 100 plantas e ocorre naturalmente em mais de 200 alimentos.

Objetivos:

Avaliar a toxicidade aguda e a atividade gastroprotetora do p-cimeno em

úlceras induzidas por HCl/Etanol em camundongos.

Métodos:

Os modelos experimentais deste trabalho não se aplicam a humanos. Os

protocolos experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética no Uso de

Animais (CEUA/CBIOTEC/UFPB) com o número 0110/13. A avaliação da

toxicidade aguda foi realizada de acordo com a OECD 423 em que

camundongos Swiss fêmeas (Mus musculus) (25-30g, n=3-6) as quais foram

tratadas por via oral (v.o) com o veículo, uma solução de Tween 80 (5%)

(controle negativo) e o p-cimeno (300 e 2000 mg/kg) e posteriormente foi

realizada uma avaliação comportamental (ALMEIDA, R. N. Rev Bras Far, 80,

72, 1999). Os animais foram observados durante um período de 14 dias. Na

avaliação da atividade gastroprotetora camundongos Swiss machos foram

tratados (v.o) com o veículo (controle negativo), a carbenoxolona 100 mg/kg

(controle positivo) e p-cimeno (25, 50, 100 e 200 mg/kg) e posteriormente

foram submetidos ao agente lesivo (HCl/Etanol 60 % - 0,2 mL). A atividade

gastroprotetora foi avaliada a partir da determinação do Índice de Lesão

Ulcerativo (ILU) (Puscas, I. Arzneimittelf., 47, 568, 1997). Os resultados

foram analisados por ANOVA, seguido pelo teste de Dunnett ou teste t

student.

Resultados:

Camundongos tratados com a dose de 2000 mg/kg do p-cimeno apresentaram

analgesia e diminuição da ambulação. Não foi observada morte de animais

tratados com 300 mg/kg do p-cimeno, já na dose de 2000 mg/kg um animal

morreu. Assim a DL50 (Dose Letal 50%) do p-cimeno é de aproximadamente

2500 mg/kg de acordo com OCDE 423. O tratamento com o p-cimeno (300

mg/kg) não alterou o ganho de peso, nem o peso dos órgãos quando

comparado com o grupo de controle negativo. No modelo de úlcera induzida

por HCl/Etanol, o p-cimeno (25, 50, 100 e 200 mg/kg) mostrou um efeito

protetor da mucosa gástrica, com ILU de 93.80 ± 13.59, 38.29 ± 8.75, 35.67 ±

9.68 e 33.67 ± 11.74 respectivamente, quando comparado com o grupo de

controle negativo (126.4 ± 29.56).

Conclusão:

Os resultados do presente estudo mostram que o p-cimeno apresenta baixa

toxicidade e atividade gastroprotetora nas condições experimentais avaliadas.

Apoio Financeiro:

Capes/CNPq

Gerado em: 2014-5-22 10:06:12

10.050 - Avaliação da atividade anti-inflamatória do ácido rosmarínico,

frente aos modelos de permeabilidade vascular e peritonite.

Nascimento, R. F. , Lima, G. R. M. , Andrade, F. H. D. , Barbosa-filho, J.

M. , Batista, L. M. ,

Programa de Pós Graduação em Produtos Naturais e S - UFPB

Departamento de Ciências Farmacâuticas - UFPB

Introdução:

O ácido rosmarínico (AR) é um metabólico secundário presente em várias

espécies vegetais, sendo caracterizado quimicamente como um éster do ácido

caféico e do 3,4-dihidroxifenillático, seu nome é derivado da Rosmarinus

officinalis, primeira planta da qual foi isolado.

Objetivos:

Avaliar a atividade anti-inflamatória do AR frente aos modelos de

permeabilidade vascular e peritonite.

Métodos:

Não foi realizada pesquisa com humanos Em ambos os modelos foram

utilizados camundongos Swiss fêmeas, com idade de 8 semanas, pesando

entre 25-30g, divididos em seis grupos (n=5-7). O grupo I foi tratado com

salina, grupo II com indometacina (25 mg/Kg), grupo III não recebeu nada

(Sham) e os demais grupos (IV, V, VI) foram tratados com AR (25, 50, 100

mg/Kg, v.o.), respectivamente. No modelo de permeabilidade vascular

injetou-se, após 1 h do tratamento, 0,3 mL de azul de Evans (10 mg/mL, i.v.),

decorridos 30 min os animais foram desafiados com 0,4 mL de ácido acético

(0,7%, i.p.) e após 30 min os mesmos foram eutanasiados e a lavagem do

peritônio foi realizada utilizando 5 mL de água destilada, em seguida o lavado

foi centrifugado a 1500 rpm por 10 min e o sobrenadante foi lido em um

espectrofotômetro no comprimento de onda de 590 nm.. No ensaio de

peritonite, após 1h do tratamento, foi administrado 0,5 mL de carragenina

(1%, i.p.) e após 4h foi realizado eutanásia dos animais, seguido da lavagem

do peritônio com 2 mL de PBS (solução de tampão fosfato), na sequência foi

realizada a contagem dos leucócitos totais em câmara de Neubauer. Os dados

obtidos foram analisados por ANOVA seguido do teste de Dunnett (p <0,05) e

expressos como média + dp. Os protocolos experimentais foram aprovados

pelo CEUA/CBIOTEC/UFPB (2205/13).

Resultados:

No modelo de permeabilidade vascular o AR nas três doses avaliadas 25, 50 e

100 mg/Kg (0,06742 ± 0,001**; 0,0778 ± 0,001**; 0,07264 ± 0,004**;

respectivamente) diminuiram, significativamente, o extravasamento de líquido

para o peritônio quando comparado ao grupo controle negativo (0,1082 ±

0,018). Enquanto no modelo de peritonite, o tratamento com o AR nas três

doses (25, 50 e 100 mg/kg) reduziu o número de leucócitos totais no líquido

peritoneal significativamente (349,0 ± 33,96**; 355,0 ± 28,90**; 243,0 ±

34,64***; respectivamente), quando comparado ao controle negativo (582 ±

34,70).

Conclusão:

Portanto, o AR tem efeito anti-inflamatório por redução da permeabilidade

vascular e diminuição do número de leucócitos totais para o local inflamado.

Apoio Financeiro:

CNPq, Universidade Federal da Paraíba

Gerado em: 2014-5-22 10:06:12

10.051 - AVALIAÇÃO IN VITRO DA ATIVIDADE LEISHMANICIDA

DO ÁCIDO ÚSNICO ISOLADO DA Cladonia substellata Vainio SOBRE

FORMAS PROMASTIGOTAS DE L. chagasi

Luz, J. S. B. , Santos, F. A. , Oliveira, E. B. , Martins, M. C. , Silva, N. H. ,

Silva, L. L. S. , Alves, L. C. , Silva, E. C. , Medeiros, P. L. ,

Histologia e Embriologia - UFPE Laboratório de Imunopatologia Keizo

Asami - LIKA Bioquímica - UFPE

Introdução:

A leishmaniose é considerada pela Organização Mundial da Saúde como uma

das cinco doenças infecto-parasitárias endêmicas de grande relevância e um

problema de saúde pública mundial, sendo enquadrada no rol das doenças

negligenciadas. Os pentavalentes antimoniais utilizados para tratamento

dessa doença apresentam-se limitados com relação ao uso; especialmente,

devido à toxidez e/ou ineficácia dos mesmos. Logo, a busca por novos

fitofármacos com ação antiparasitária, surge como uma alternativa aos

tratamentos existentes, em função da baixa toxicidade e redução de

custos. Alguns estudos mostraram que o ácido úsnico, metabólito secundário

do líquen Cladonia substellata Vainio, apresenta atividades biológicas como

antineoplásica, antioxidante, antimicrobiana e antiprotozoário.

Objetivos:

Avaliar a atividade leishmanicida in vitro do ácido úsnico sobre formas

promastigotas da Leishmania chagasi.

Métodos:

As formas promastigotas de Leishmania chagasi foram cultivadas em estufa

a 26°C em meio LIT suplementado com soro fetal bovino a 20%, 0,2% de

hemina e mistura de antibióticos. Para obtenção da IC50, os parasitas foram

distribuídos em placa de 96 poços na concentração de 2x106 parasitas/mL e o

ácido úsnico dissolvido em DMSO foi utilizado nas concentrações de 100 a

0,195 µg/mL. A anfotericina B (fármaco de referência) foi utilizada como

controle positivo e o DMSO como controle negativo. Foi realizado o teste do

MTT, com leitura das placas em espectrofotômetro (585 nm). Os ensaios

foram feitos em triplicata. Os valores de IC50, foram calculados utilizando o

teste da análise de variância, um critério, seguido pelo teste a posteriore de

Tukey.

Resultados:

O IC50 do ácido úsnico frente os parasitas foi de 18,30 ± 2,00 µg/mL e da

anfotericina B foi de 1,36 ± 0,067 µg/mL.

Conclusão:

Concluímos que o ácido úsnico apresentou atividade leishmanicida frente às

formas promastigotas de L. chagasi. Logo, serão necessários maiores estudos

para elucidação dos mecanismos de ação desse produto no intuito de sugeri-lo

como alternativa atrativa no tratamento de Leishmania chagasi e demais

espécies do gênero.

Apoio Financeiro:

Gerado em: 2014-5-22 10:06:12

10.052 - Atividade toxicológica e vasorrelaxante do extrato etanólico das

folhas de Zanthoxylum rhoifolium Lam. em ratos.

Silva, J. C. , Carvalho, G. D. , Miranda, V. C. , Morais, I. C. P. S. ,

Chaves, M. H. , Arcanjo, D. D. R. , Silva-Filho, J. C., Oliveira, A. P.,

Núcleo de Pesquisas em Plantas Medicinais - NPPM Universidade

Federal do Piauí - UFPI Departamento de Quimica - UFPI

Introdução:

Zanthoxylum rhoifolium Lam. (Rutaceae Juss), espécie encontrada nos

estados do Piauí e Ceará. Conhecida como, “mamica-de-cadela” e usada

popularmente como: relaxante muscular, analgésico, diurético, antiagregante

plaquetário e anti-inflamatório (Eur. J. Pharmacol. 576:180, 2007; Quim.

Nova, 51:2071, 2008).

Objetivos:

Avaliar a toxicidade aguda e o efeito vasorrelaxante do extrato etanólico das

folhas de Zanthoxylum rhoifolium.

Métodos:

CEEA/UFPI Nº 008/12 Foram utilizados ratos wistar (Rattus norvegicus)

(250- 300 g - 12 semanas) e camundongos machos (Mus musculus 25-30g -

12 semanas). Os protocolos foram aprovados (CEEA/UFPI Nº 008/12). O

estudo de toxicidade seguiu o OECD 423 – (2001). Os camundongos

receberam dose única de (2 g/kg v.o.) do extrato etanólico das folhas de

Zanthoxylum rhoifolium (EtOH-Zr/folhas) e observados por até 14 dias. Após

o 14º dia os animais foram anestesiados com xilazina-cetamina (0,2

mL/100g), para coleta de sangue por punção plexo orbital e posterior análise,

em seguida os animais foram eutanasiados (tiopental sódico 100 mg/kg, i.p. -

Resolução Nº 1000, de 2012 – CFMV) para retirada dos órgãos e observação

morfológica e macroscópica. Em outros experimentos a artéria mesentérica de

rato foi removida, e seccionada em anéis (1- 2 mm) e mantidos em Tyrode

(37º C - 95 % O2 + 5 % CO2 a 0,75 g/f). As tensões isométricas foram

obtidas através de transdutores acoplados ao sistema (AQCAD 2.3.9., AVS

Projetos-SP). Após estabilização (60 minutos) os anéis com e sem endotélio

foram pré-contraídos com fenilefrina (10 µM) e, na fase tônica da contração,

adicionou-se EtOH-Zr/folhas (0,1 – 750 μg/mL). Para a reatividade vascular

os anéis de artéria mesentérica dos ratos tratados com ETOH-Zr/folhas (50

mg/kg/7 dias. v.o.), foram estimulados com Fenilefrina (10-9 – 10-5 M)

obtendo-se uma curva concentração-resposta. Os resultados foram expressos

como média ± EPM. Significativos quando p<0,05 - “t Student” pós-teste de

Tuckey – PRISM 5.03.

Resultados:

O EtOH-Zr/folhas não provocou morte e nem demonstrou toxicidade

evidente, não sendo possível determinar a DL50. O extrato não alterou o peso

corporal e dos órgãos (coração, fígado, pulmão e rins). Na análise bioquímica,

não houve diferença significativa entre o grupo controle e o grupo EtOH-

Zr/folhas, indicando ausência de toxicidade. Na análise do efeito

vasorrelaxante os anéis de artéria mesentérica, o EtOH-Zr/folhas induziu

vasorrelaxamento dependente de concentração, na presença (pD2 = 2,17 ±

0,05 µg/mL; n=6) e na ausência (pD2 = 2,14 ± 0,05 µg/mL; n=6) do endotélio

vascular. Em anéis de artéria mesentérica dos ratos tratados com EtOH-

Zr/folhas/7 dias, observou-se menor reatividade à fenilefrina (Emáx = 0,99 ±

0,02 g/f **, p<0,05 vs controle, n=5) quando comparados com grupo controle

(Emáx = 1,17 ± 0,03 g/f, n=5).

Conclusão:

EtOH-Zr/folhas não apresentou toxicidade aguda. O EtOH-Zr/folhas promove

vasorrelaxamento independente do endotélio, e a administração prolongada do

extrato altera a resposta contrátil da Fenilefrina.

Apoio Financeiro:

FAPEPI/CNPq

Gerado em: 2014-5-22 10:06:46

10.053 - SÍNTESE, elucidação estrutural e possível AVALIAÇÃo

biológica frente ao modelo do air-pouch DE UM NOVO DERIVADO

TIAZOLIDÍNICO.

Souza, E. R. , Oliveira, T. B. , Carneiro, B. D. L. , Jacob, I. T. T. , Silva,

W. L. , Lima, M. C. A. ,

Antibióticos - UFPE Ensino - IFAL

Introdução:

Inflamação é uma resposta de defesa que ocorre após dano celular causado por

micróbios, agentes físicos, químicos, necrose tecidual e/ou reações

imunológicas. A resposta inflamatória conta com a participação de várias

células, tais como neutrófilos, macrófagos, mastócitos, linfócitos, plaquetas,

células dendríticas, células endoteliais e fibroblastos. E desde os tempos

remotos que as doenças de cunho inflamatório são um preocupante problema

para o homem. Um grupo de moléculas que apresentam atividade

antiinflamatória são as tiazolidinas. A tiazolidina-2,4-diona é um heterociclo

pentagonal que apresenta dois heteroátomos (um nitrogênio na posição 3 e um

enxofre na posição 1) e dois grupamentos oxo (posições 2 e 4), que lhes

conferem a características de ser um grupo farmacofórico presente em

moléculas antiiflamatórias. Com isso, faz-se necessária a busca por novos

fármacos tiazolidínicos mais ativos e menos tóxicos frente as mais diversas

doenças de cunho inflamatório.

Objetivos:

Sintetizar nova molécula das séries 5-arilideno-3-(4-tercbutil-benzil)-

tiazolidina-2,4-diona (GQ-143), caracterizar físico-quimicamente e comprovar

estruturalmente as duas séries de compostos utilizando diferentes técnicas

espectroscópicas e espectrométricas.

Métodos:

A área desse trabalho é química medicinal e se encontra descrita apenas a

parte química. O derivado tiazolidínico GQ-143 foi sintetizado por meio de

duas etapas reacionais. Na primeira etapa foi obtido o intermediário

substituído na posição 3 do anel tiazolidínico. O mecanismo é concertado e

SN2, ou seja a partir no mesmo momento que o nucleófilo ataca o carbono

positivo o halogênio, por ser um bom grupo de partida sai do molécula e se

forma o produto final da reação. Na segunda etapa reacional temos o grupo

metilênico em posição 5 da tiazolidina-2,4-diona que apresenta uma

reatividade característica frente a vários reagentes. Esse carbono metilênico

comporta-se como um nucleófilo, e as reações ocorrem normalmente em

presença de uma base, a tiazolidina-2,4-diona reage como um ânion. Enfim,

nesta etapa ocorrerá uma reação de Michael para a formação do composto

final.

Resultados:

O composto sintetizado (GQ-143) se apresentou como um sólido de cor

branca, ponto de Fusão: 155-157 °C, rendimento: 56%, razão de frente e

sistema: 0,44, n-Hex./AcOEt. 6:4. As descrições espectroscópicas RMN 1H

(DMSO, 300MHz) δ: 3,28 (s, 3H, CH3); 4,85 (s, 2H, CH2); 7,33 (dd, 1H,

hidrogênio benzílico, J1= 8,4Hz e J2= 1,8Hz); 7,63 (d, 1H, hidrogênio

benzílico, J=8,4Hz); 7,65 (d, 1H, hidrogênio benzílico, J=1,8Hz); 7,88 (d, 2H,

hidrogênios benzilidênicos, J=8,7Hz); 8,06 (d, 2H, hidrogênios

benzilidênicos, J=8,7Hz); 8,05 (s, 1H, -HC=).

Conclusão:

O composto apresentou um bom rendimento, pois sua rota de síntese estava

bem elucidada. A próxima etapa diz respeito à atividade biológica que será o

método do air-pouch. Segundo Uchôa e colaboradores (J Pharm Pharmacol. v.

61(3), p. 339-45, 2009) que sintetizaram tiazolidinonas substituídas na posição

5 por benzilidenos, comprovaram que compostos análogos ao GQ-143 que

foram testados pelo método air pouch apresentaram inibição das

ciclooxigenase 1 e 2 in vitro.

Apoio Financeiro:

CAPES-PIBIC/CNPq/UFPE

Gerado em: 2014-5-22 10:06:46

10.054 - AVALIAÇÃO TOXICOLÓGICA DO COMPLEXO

BETACICLODEXTRINA/(-)-BORNEOL

Silva-filho, J. C. , Morais, I. C. P. S. , Carvalho, G. D. , Miranda, V. C. ,

Sousa, F. . M. , Santos, M. R. V. , Lima, S. G. , Rocha, M. S. , Oliveira, A.

P. ,

Núcleo de Pesquisas em Plantas Medicinais - UFPI

Introdução:

(-)-Borneol (BOR) (C10H18O) é um monoterpeno presente em óleos

essenciais de várias plantas medicinais. Em estudos prévios, BOR apresentou

atividade antioxidante e induziu vasorrelaxamento em aorta torácica de ratos

(J Sci Food Agric., 53: 9452, 2005, Basic Clin. Pharmacol. Toxicol., 37: 2,

2011). A fim de melhorar a estabilidade e solubilidade do (-)-Borneol, o

mesmo foi adicionado a um complexo de inclusão com β-ciclodextrinas.

Objetivos:

Avaliar a toxicidade aguda do complexo BETACICLODEXTRINA/(-)-

BORNEOL.

Métodos:

008/12 Foram utilizados camundongos (Mus musculus 25 - 30g - 12

semanas). Os protocolos foram aprovados pelo Comitê de Ética em

Experimentação Animal da UFPI Nº 008/12). O estudo de toxicidade seguiu o

OECD 423 – (2001). Os camundongos receberam dose única de (2g/kg v.o.)

do complexo BETACICLODEXTRINA/(-)-BORNEOL e foram observados

por até 14 dias. Após o 14º dia os animais foram anestesiados com xilazina-

cetamina (0,2 mL/100g), para coleta de sangue por punção plexo orbital e

posterior análise, em seguida os animais foram eutanasiados (tiopental sódico

100 mg/kg, i.p. - Resolução Nº 1000, de 2012 – CFMV) para retirada dos

órgãos e observação morfológica e macroscópica. Os resultados foram

expressos como média ± EPM e significativos quando p<0,05 - “t Student”–

PRISM 5.03.

Resultados:

O complexo BETACICLODEXTRINA/(-)-BORNEOL não provocou morte e

nem demonstrou toxicidade evidente, não sendo possível determinar a DL50.

O complexo não alterou o peso corporal e dos órgãos (coração, fígado,

pulmão e rins). Na análise bioquímica, ocorreu uma diminuição da glicose do

grupo tratado com o complexo BETACICLODEXTRINA/(-)-BORNEOL em

relação ao grupo controle, não havendo diferença significativa entre o grupo

controle e o grupo tratado com o complexo BETACICLODEXTRINA/(-)-

BORNEOL no restante dos parâmetros bioquímicos analisados, indicando

ausência de toxicidade.

Conclusão:

O complexo BETACICLODEXTRINA/(-)-BORNEOL não apresentou

toxicidade aguda.

Apoio Financeiro:

FAPEPI/CNPq

Gerado em: 2014-5-22 10:06:46

10.055 - AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE DE DOSES REPETIDAS DO

EXTRATO HIDROALCOÓLICO DE Zornia brasiliensis Vog.

(FABACEAE) EM CAMUNDONGOS

Silva, B. L. , Branco, M. V. S. C. ,

Departamento de Ciências farmacêuticas - UFPB

Introdução:

Zornia brasiliensis (Fabaceae), popularmente conhecida como “urinária” e

“urinana carrapicho`, é usada pela população como diurético e contra doenças

venérea (AGRA; FREITAS; BARBOSA-FILHO, 2007), entretanto, não há

relatos na literatura sobre sua possível toxicidade. Dessa forma, a avaliação da

toxicidade de Z. brasiliensis é essencial para a utilização segura pela

população. Poucos estudos fitoquímicos e biológicos de Z. brasiliensis são

relatados.

Objetivos:

Avaliar a toxicidade de doses repetidas do extrato hidroalcoólico das partes

aéreas de Z. brasiliensis (EHZB) em camundongos.

Métodos:

1105/13 Todos os procedimentos experimentais foram aprovados pelo Comitê

de Ética no uso de animais do CBiotec /UFPB (CEUA), sob a certidão

1105/13.Foram utilizados camundongos albinos Swiss (Mus musculus)

pesando entre 25 e 30 g, com faixa etária próxima de 60 dias. Os animais

foram divididos em quatro grupos (n=10 machos e 10 fêmeas), sendo um

controle (tween 80, 5%), e três grupos tratados com EHZB (250, 500 e 1000

mg/kg), durante 28 dias (v.o.). Os seguintes parâmetros foram avaliados:

consumo de água, evolução ponderal, temperatura corporal, glicemia,

atividade exploratória e atividade motora, parâmetros hematológicos e os

índices dos órgãos.

Resultados:

Dentre os parâmetros avaliados, pode-se observar que não houve alterações

significantes no peso corporal, temperatura corporal, no tempo de

permanência dos animais na barra giratória, em nenhuma dose e independente

do gênero, em relação ao grupo controle. Pode-se observar uma diminuição

significativa no consumo de água no grupo dos machos tratados nas doses de

500 e 1000 mg/kg, quando comparados ao grupo controle. No entanto, as

fêmeas tratadas com a dose 1000 mg/kg apresentaram um aumento no

consumo de água. Apenas o tratamento das fêmeas na dose de 1000 mg/kg

induziu variação da glicemia, na segunda quinzena de tratamento. O EHZB na

dose de 1000 mg/kg induziu um aumento significativo da ambulação das

fêmeas, quando comparada a do grupo controle. Ainda, a maior dose (1000

mg/kg), produziu diminuição do número de bolos fecais das fêmeas, quando

comparado ao grupo controle, apenas na primeira quinzena de avaliação.

Quanto à avaliação hematológica, nos machos, houve uma diminuição

significativa nos parâmetros de Concentração Hemoglobínica Corpuscular

Média (CHCM) no grupo tratado com EHZB na dose de 1000 mg/kg. Houve

ainda um aumento significativo no número de hemácias, na quantidade de

hemoglobina e no hematócrito nos grupos tratado com EHZB nas doses de

250 e 500 mg/kg, em relação ao grupo controle. Em relação às fêmeas, a única

alteração significante foi uma redução nos valores do Hematócrito no grupo

tratado EHZB na dose de 500 mg/kg. Nenhuma alteração significante no

índice de coração, rins, fígado, baço e timo foi observada entre os grupos de

animais controle e tratados com EHZB independente da dose e do gênero.

Conclusão:

Portanto, é possível inferir que o extrato hidroalcoólico das partes aéreas de Z.

brasiliensis possui baixa toxicidade, após tratamento de 28 dias, fornecendo

perspectivas para estudos farmacológicos posteriores.

Apoio Financeiro:

Gerado em: 2014-5-22 10:06:46

10.056 - Efeito de FAFCS sobre a função erétil de ratos

Alves, M. A. S. G. , Passaglia, R. C. A. T. , Carneiro, F. S. , Silva, M. S. F.

, Neves, K. B. , Lopes, R. A. M. , Veras, R. C. , Filho, J. M. B. , Medeiros,

I. A. ,

Unidade Acadêmica de Ciências Biológicas - UFCG Faculdade de

Medicina de Ribeirão Preto - USP Centro de Biotecnologia - UFPB

Departamento de Ciências Farmacêuticas - UFPB

Introdução:

A disfunção erétil pode ser definida como a incapacidade de um homem para

alcançar e manter a ereção do pênis o suficiente para permitir uma relação

sexual satisfatória. Estudos prévios demonstram que FAFCS aumentou os

níveis de AMPc em células musculares lisas de traqueia de cobaia por inibição

fosfodiesterases 4 e 5.

Objetivos:

Investigar o efeito e os possíveis mecanismos de ação de FAFCS sobre a

função erétil de ratos.

Métodos:

0311/10 Os protocolos experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética

(certidão 0311/10). Foram utilizados ratos Wistar machos pesando entre 250-

350 g, com 12-24 semanas. Os ratos foram eutanasiados e os tecidos

cavernosos foram dissecados, isolados e mantidos em cubas contendo solução

Krebs-Ringer, gaseificadas com uma mistura carbogênica (95% de O2 e 5%

de CO2), à 37° C (pH 7,4). O tecido foi suspenso e ligado a um transdutor de

força sob uma tensão de 5 mN. As alterações de tensão foram registradas em

sistema PowerLab™ de aquisição de dados. Os níveis de GMPc foram

determinados por enzima imunoensaio. O diabetes foi induzido por uma

injeção i.p. de estreptozotocina (STZ) (60 mg/kg). Os ratos foram divididos

em 5 grupos: controle (não diabéticos), STZ (diabéticos), dois grupos STZ

tratados com FAFCS (50 ou 100 mg/kg) e um grupo STZ tratado com

sildenafila (1,5 mg/kg). Os tratamentos duraram 24 dias. A função erétil foi

avaliada pela medida da relação ICP/MAP após estimulação elétrica do

gânglio pélvico maior. A quantificação de PDE-5 foi realizada utilizando a

técnica de Western-Blot. Os valores de Log da CE50 e de Emáx foram

expressos como média ± erro padrão da média. Foram realizados os testes “t”

de Student e análise de variância com o pós-teste de Bonferroni ou Tuckey.

Valores de p < 0,05 foram considerados significantes. Foi utilizado o

programa Graph Pad Prism versão 5.0 para as análises estatísticas.

Resultados:

No corpo cavernoso de rato pré-contraído com fenilefrina (10 µM), FAFCS

(1-3000 µg/mL) causou relaxamento dependente de concentração (Log CE50

= 2,54±0,06 µg/mL; Emáx = 93,40±6,73%, n = 5). O relaxamento não foi

atenuado na presença de L-NAME. O efeito máximo foi significantemente

atenuado na presença de ODQ (Log CE50 = 2,48±0,07 µg/mL; Emáx =

70,97±1,67% n = 3) e KT-5823 (Log CE50 = 1,90±0,21 µg/mL; Emáx =

53,05±9,73%, n = 5). Na concentração de 3000 µg/mL, FAFCS aumentou

significantemente o conteúdo de GMPc no tecido cavernoso (38,50±4,70

pmol/g, n = 4) comparado ao grupo controle (16,93±1,32 pmol/g, n = 4). Esse

efeito foi inibido na presença de ODQ (8,69±0,54 pmol/g, n = 4). A relação

ICP/MAP nos grupos diabéticos foi significantemente diminuída (0,43±0,09,

n = 4; 16 Hz) comparada ao grupo controle (0,72±0,03, n = 7; 16 Hz). Essa

relação foi significantemente aumentada nos grupos tratados com FAFCS 50

mg/kg (0,67±0,05, n = 5; 16 Hz), 100 mg/kg (0,62±0,06, n = 8; 16 Hz) e

sildenafila (0,62±0,07, n = 6; 16Hz). A expressão de PDE-5 foi

significantemente aumentada no grupo STZ (328,50±26,78% , n = 6) quando

comparado ao controle (considerado 100%). Os tratamentos com FAFCS na

dose de 100 mg/kg (143,70±52,85% , n = 5) assim como sildenafila (159,20

±48,60% , n = 4) reduziram significantemente a expressão de PDE-5 quando

comparados ao grupo STZ.

Conclusão:

FAFCS induz relaxamento do corpo cavernoso isolado de rato pela ativação

da via CGs-GMPc-PKG. Além disso, FAFCS causa uma diminuição da

expressão de PDE-5, melhorando a resposta erétil de animais com diabetes

induzidos por STZ.

Apoio Financeiro:

CNPq

Gerado em: 2014-5-22 10:06:46

10.057 - EUGENOL ALTERA A EXCITABILIDADE DO NERVO

VAGO DE RATOS

Nunes-Guimaraes, M. V., Silva-Sampaio, T., Silva-Alves, K. , Ferreira-

da-Silva, F. W. , Coelho-de-Souza, A. N. , Leal-Cardoso, J. H. ,

Laboratório de Eletrofisiologia - UECE

Introdução:

O eugenol(EUG) é o constituinte majoritário do óleo essencial da Eugenia caryophyllus (cravo-da-índia),

sendo amplamente usado em consultórios odontológicos por apresentar propriedades antimicrobiana e inflamatória, anestésica e analgésica. É relatado na literatura que o EUG reduz a amplitude pico-a-pico do potencial de ação composto(PAC) do nervo vago(NV) e ciático de ratos e que sua ação anestésica local se deve ao bloqueio das correntes de Na

+. O NV é responsável por comunicar o estado das vísceras ao

cérebro. Apresenta todos os tipos de fibras (A, B e C), predominando fibras do tipo C. Os trabalhos na literatura apresentam apenas uma concentração de EUG (0,8mM) sobre as fibras do NV.

Objetivos:

Assim, este trabalho visa levantar a curva concentração-resposta do EUG e comparar seus efeitos nas

fibras C (amielinizadas) e A (mielinizadas) do NV.

Métodos:

06379067-0

Foram utilizados ratos Wistar, de ambos os sexos, com massa entre 200-350g e 11-13 semanas. O

projeto foi aprovado pelo CEUA-UECE sob o nº06379067-0. O NV foi dissecado, acondicionado em uma

câmara de registro, estimulado com pulsos elétricos (frequência de 0,2Hz) de 60V e 1,5ms para o registro

extracelular do PAC das fibras C e 40V e 0,1ms para fibras A. O EUG foi utilizado nas concentrações de

0,03;0,1;0,3;0,6;1 e 3mM diluído em DMSO(0,2% v/v) e em solução de Locke. Após uma hora de

estabilização, o nervo foi exposto ao EUG durante uma hora e em seguida, foi feita a lavagem (retirada da

droga) com duração de uma hora. Os dados estão representados como média ±E.P.M e número de

experimentos entre parênteses. Foram avaliadas as velocidades de condução, amplitudes positivas do

PAC, reobase e cronaxia.

Resultados:

O registro do PAC das fibras C apresentou três picos que foram denominadas de 1ª, 2ª e 3ª componente,

com velocidades de condução de 1,62±0,08(39), 0,65±0,02(38) e 0,3±0,01m/s(28), respectivamente. As

amplitudes para os mesmos componentes foram 1,66±0,19(37), 1,63±0,14(37) e 0,5±0,06mV(35),

respectivamente e a obtenção desses três picos é totalmente original, não tendo sido descrita antes na

literatura. Para as fibras A, a velocidade de condução foi de 17,44±2,22m/s(41) e a amplitude de

0,84±0,1mV(38). A reobase e cronaxia das fibras C na situação controle foram 12±1,6V(2) e 450±50μs(2),

respectivamente. Para fibras A a reobase e cronaxia foram respectivamente 3,3±0,067V(3) e

52,3±6,3μs(3). 3mM de EUG bloqueou completamente as componentes do PAC das fibras A e C. Na

concentração de 1mM houve um bloqueio de 84,65±4,34(12) e 93,29±3,08%(13) para a 1ª e 2ª

componentes C, respectivamente. Na concentração de 0,6mM, o bloqueio foi de 66,01±3,2(6),

81,71±3,24(5) e 72,88±7,11%(4) para a 1ª, 2ª e 3ª componentes C do controle, respectivamente. Ainda na

concentração de 0,6mM o EUG bloqueou 91,14±2,5%(4) do PAC das fibras A. Nas concentrações de 0,03

e 0,1mM, não houve bloqueio significativo das três componentes C. Contudo, para fibras A houve um

bloqueio de 37,65±4,2%(7) do controle na concentração de 0,1mM. Todos os efeitos do EUG foram

reversíveis após lavagem. Com relação à reobase e cronaxia, parâmetros ligados à excitabilidade

nervosa, o EUG também elevou esses parâmetros para 14,3±1,7V(2) e 530±40μs(2), respectivamente

nas fibras C e para 3,6±0,12V(3) e 59±8μs(3) nas fibras A.

Conclusão:

Os dados demonstram que o EUG reduz a excitabilidade e bloqueia a condução nervosa das fibras A e C

do NV. Esse efeito apresentou-se dependente de concentração e mais pronunciado nas fibras A.

Apoio Financeiro:

CAPES, FUNCAP, CNPq, UECE.

Gerado em: 2014-5-22 10:06:46

10.058 - AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE AGUDA EM

CAMUNDONGOS TRATADOS COM TRACHYLOBANO-360

Mangueira, V. M. , Santos, S. G. , Silva, M. S. , Abrantes, R. A. , Gomes,

I. F. , Xavier, A. L., Tavares, J. F. , Batista, T. M. , Moura, A. P. G. ,

Castello Branco, M. V. S. ,

Departamento de Ciências Farmacêuticas - UFPB

Introdução:

O estudo fitoquímico de Xylopia langsdorffianaSt. Hil. &Tul.permitiu o

isolamento do Trachylobano-360 (T-360), um diterpeno que possui

importantes atividades farmacológicas (Nat. Prod. Res. 26: 2335, 2012;

Molecules. 17: 9573, 2012). No entanto, não há relatos sobre estudos

toxicológicos deste promissor produto natural.

Objetivos:

Este trabalho teve como objetivo avaliar a toxicidade aguda do T-360 em

camundongos Swiss, pelas vias endovenosa (e.v.) e intraperitoneal (i.p.).

Métodos:

certidão Nº 1009/12 Este ensaio, aprovado pelo Comitê de Ética (certidão Nº

1009/12), foi realizado de acordo com o protocolo da OECD n. 423, com

modificações. Camundongos Swiss (Mus musculus), fêmeas, pesando entre

28 e 32 g, com faixa etária próxima de 60 dias, foram submetidos a doses i.p.

(300 mg/kg, n=3) ou e.v. (50, n=3; 300 mg/kg, n=6) únicas, e ao grupo

controle (n=3) foi administrado apenas o veículo (0,5% de Tween 80). Com o

objetivo de mapear possíveis alterações comportamentais do Sistema Nervoso

Central (SNC) ou Autônomo (SNA), após administração do T-360 i.p. ou e.v.,

foi realizada observação para se detectar sinais tóxicos de caráter geral nos

intervalos: 0, 15, 30 e 60 minutos; após 4 horas; e diariamente durante 14 dias

(Rev. Bras. Farmacogn. 80: 72, 1999). Ao fim do período de observação todos

os animais sobreviventes foram anestesiados com tiopental sódico (50 mg/kg)

para coleta do sangue em tubos contendo heparina (25 UI/mL) para avaliação

hematológica dos seguintes parâmetros: volume corposcular médio (VCM),

hemoglobina corpuscular média (HCM), concentração da hemoglobina

corpuscular média (CHCM), hemoglobina, hematócrito, número de hemácias

e leucócitos. Os resultados obtidos foram expressos como média ± erro padrão

da média (e.p.m.) e analisados empregando-se teste de Mann Whitney. Os

resultados foram considerados significativos quando p< 0,05.

Resultados:

A dose de 300 mg/kg (i.p.) não provocou mortes. Nestes animais, observou-se

moderados efeitos depressores do SNC (ataxia e resposta diminuída ao toque),

de curta duração (até 30 min). Com relação às mudanças autonômicas,

diarreia esteve presente em todos os animais desse grupo experimental. Como

a dose de 300 mg/kg i.p. já é 12 vezes maior que sua dose

farmacologicamente ativa em relação à atividade antitumoral na mesma

espécie animal (25 mg/kgi.p.) (Molecules. 17: 9573, 2012) e esta não causou

mortes nem mudanças comportamentais significantes e duradouras, não

realizou-se avaliação toxicológica com a doses maiores. Para a via e.v., a dose

de 50 mg/kg não provocou nenhuma desordem central nem autonômica. Na

dose de 300 mg/kg e.v., não se observou nenhuma alteração e dois terços dos

animais morreram imediatamente após administração. Com isso, baseado no

guia 423 da OECD, o valor da DL50 foi estimado em 200 mg/kg para o T-360

(e.v.). Nenhum dos animais apresentou alterações hematológicas.

Conclusão:

O T-360 apresentou baixa toxicidade na dose de 50 mg/kg (e.v.) e 300 mg/kg

(i.p.), e alta toxicidade nos animais submetidos ao tratamento com 300 mg/kg

e.v. do T-360.

Apoio Financeiro:

Apoio financeiro:CNPq.

Gerado em: 2014-5-22 10:06:46

10.059 - O 1,8-CINEOL REDUZ A EXCITABILIDADE NERVOSA DO

GÂNGLIO CERVICAL SUPERIOR DE RATOS ATRAVÉS DO

BLOQUEIO PARCIAL DA CORRENTE DE NA+.

Ferreira-da-Silva, F. W. , Silva-Alves, K. S. , Coelho-de-Souza, A. N. ,

Leal-Cardoso, J. H. ,

Centro de Ciências da Saúde - ISCB/UECE

Introdução:

O 1;8-cineol (CIN) é um terpeno constituinte de diversos óleos essenciais de

plantas utilizadas na medicina popular. Este constituinte apresenta várias

ações farmacológicas como antiinflamatória, antitumoral e gastroprotetora.

Trabalho de nosso grupo de pesquisa (Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 36:11,

2009) demonstrou que o CIN (0,1-6 mM) bloqueia o potencial de ação (PA)

dos neurônios do Gânglio Cervical Superior (GCS), com despolarização da

membrana. Levantamos a hipótese de que esse bloqueio pode ser,

possivelmente, pela ação do composto diretamente sobre os canais de sódio

dependentes de voltagem, pelo mecanismo indireto de despolarização da

membrana celular ou pela ação de ambos os mecanismos.

Objetivos:

Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a ação do 1,8-cineol sobre a

corrente de Na+ dependentes de voltagem (INa+) do GCS de ratos.

Métodos:

06379067 -0 Ratos Wistar, idade 12 semanas e massa 200 – 300g, foram

sacrificados por concussão cerebral, seus GCS’s dissecados e realizada a

dissociação neuronal por meio de etapas enzimáticas e mecânicas. A técnica

do whole-cell patch clamp, clampeamento de voltagem, foi utilizada para o

registro da INa+ e utilizada soluções apropriadas para a obtenção dessa

corrente. Pulsos despolarizantes de 100 ms de duração e para 0 mV a

frequência de 2 Hz foram aplicados para deflagrar a INa+ a partir do

potencial de holding de – 80 mV. O CIN foi dissolvido em dimetilsulfóxido

(0,2% v/v) e foi utilizada a concentração que bloqueou o PA de todas as

células do GCS intacto (6 mM). Os registros foram feitos entre 6 –24 h após

dissociação e os dados estão expressos como média ± E.P.M, onde o valor

entre parênteses representa o número de experimentos. Duas médias foram

consideradas significantes pelo teste-t quando p < 0,05 e todos os protocolos

experimentais foram submetidos e aprovados pelo CEUA da UECE.

Resultados:

A capacitância das células utilizadas foi 28,48 ± 1,52 pF, resistência de acesso

de 4,91 ± 0,58 Mohm, vazamento de -120,64 ± 35,68 pA e resistência de

entrada de 719,40 ± 142,26 Mohm (11). A média da INa+ no controle foi de

3445,05 ± 262,68 pA e densidade de corrente de 133,78 ± 7,15 pA/pF (11). A

exposição ao CIN (~150 s) provocou redução de ~20% na INa+ e densidade

de corrente e os valores foram 2928,85 ± 135,00 pA e 106,94 ± 5,74 pA/pF

(11), respectivamente, e houve diferença estatística significante entre os

valores. A resistência de entrada também foi reduzida após a exposição ao

CIN para 591,98 ± 149,31 Mohm (11). Com o intuito de verificar alterações

na cinética da corrente após a droga, o tempo até o pico e as constantes

temporais do decaimento da corrente foram medidas. Os valores controle do

tempo até o pico e das constantes de decaimento lenta e rápida foram 1,05 ±

0,04 ms, 2,68 ± 0,23 ms e 0,58 ± 0,03 ms (11), respectivamente. Após a

exposição ao CIN, não houve alterações significantes nos parâmetros da

cinética da corrente e os valores foram 1,02 ± 0,05 ms, 2,64 ± 0,41 ms e 0,54

± 0,03 ms (11), respectivamente.

Conclusão:

Os dados mostram que a concentração de 6 mM de CIN bloqueia parcialmente

a INa+ sem provável alteração na cinética da corrente e com redução da

resistência de membrana. Os dados corroboram com os achados no GCS

intacto e comprovam a hipótese de que o bloqueio do PA pode, em parte, ser

explicado pela redução da corrente de Na+ no GCS.

Apoio Financeiro:

CNPq, CAPES, FUNCAP, UECE.

Gerado em: 2014-5-22 10:06:46

10.060 - AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE CITOTÓXICA DA

CUMARINA FRENTE À LINHAGEM DE CÉLULAS VERO IN

VITRO

Oliveira, E. B. , Barbosa-Filho, J. M. , Araujo, R. S. A. , Silva, L. L. S. ,

Silva, E. C. , Medeiros, P. L. ,

Programa de Pós-graduação em Inovação Terapêutica - UFPE

Laboratório de Tecnologia Farmacêutica - UFPB Departamento de

Histologia e Embriologia - UFPE

Introdução:

As plantas usadas na medicina popular têm sido alvo constante pela indústria

farmacêutica na busca de novos protótipos úteis para a fabricação de fármacos

direcionados ao tratamento de variadas doenças. Isso tem levado ao

ressurgimento do interesse por metabólitos secundários produzidos por

vegetais como os compostos fenólicos, dentre os quais se ressaltam as

cumarinas. Essas substâncias purificadas exibem atividades biológicas

potentes e relevantes, além de apresentarem baixa toxicidade em mamíferos.

Esse conjunto de benefícios mantém as cumarinas como alvo de investigação

nas pesquisas atuais e fomenta o interesse farmacêutico a nível mundial.

Objetivos:

Avaliar a atividade citotóxica da cumarina (1,2-benzopirona) sobre a linhagem

de células Vero in vitro e analisar as características morfológicas decorrentes

desse ensaio.

Métodos:

As células Vero foram mantidas em meio DMEM suplementado com 10%

de Soro Fetal Bovino, 0,1 % de antibióticos em estufa de 5% de CO2 e 95%

de umidade a 37°C. A citotoxicidade foi determinada através do teste

colorimétrico do MTT. As células foram adicionadas na concentração de

2x105 células/mL em placas de 96 poços onde a substância-teste estava nas

concentrações de 6,25 a 100 µg/mL. O DMEM foi utilizado como controle

positivo. A leitura da absorbância foi realizada após dissolução do precipitado

com DMSO absoluto (100μL/poço) em espectrofotômetro no comprimento de

595nm. Cada amostra foi testada em triplicata. Os dados foram submetidos ao

teste não paramétrico de Kruskal-Wallis (p < 0,05). A morfologia das células

foi avaliada com auxílio de microscópio invertido com contraste de fase e

foram realizados registros fotográficos referentes a cada concentração testada.

Resultados:

A cumarina (1,2-benzopirona) apresentou atividade citotóxica em todas as

concentrações testadas (6,25; 12,5; 25; 50 e 100 µg/mL), sendo

estatisticamente significativo (p < 0,05) quando comparado ao controle. As

alterações morfológicas foram mais evidentes nas concentrações de 25, 50 e

100 µg/mL, tendo sido observado inicialmente confluência reduzida com

desprendimento de algumas células e formação de agrupamentos celulares na

maior concentração (100 µg/mL). A morfologia das células sob efeito das

menores concentrações (6,25 e 12,5 µg/mL) comportaram-se semelhante ao

controle.

Conclusão:

A cumarina (1,2-benzopirona) apresentou atividade citotóxica frente ao

crescimento de células Vero in vitro, culminando com a formação de

agrupamentos celulares na concentração mais elevada (100 µg/mL).

Apoio Financeiro:

Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco

(FACEPE) e Universidade Federal de Pernambuco (UFPE).

Gerado em: 2014-5-22 10:06:46

10.061 - Titulo: AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE DE DOSES

REPETIDAS DO EXTRATO LIOFILIZADO DE Pedilanthus

tithymaloides EM CAMUNDONGOS

Guimarães, A. R. B. V. , Branco, M. V. S. C. ,

Departamento de Ciências farmacêuticas - UFPB

Introdução:

Pedilanthus tithymaloides (Euphorbiaceae), popularmente conhecido como

“Sapatinho-do-diabo” e “Dois-amores”, tem uma variedade de propriedades

curativas relatadas na literatura como anti-inflamatório, antimicrobiano,

antiséptico, dentre outras (Life Sciences 78; 1578, 2006). Entretanto, não há

dados de avaliação da toxicidade na literatura que respaldem seu uso popular.

Objetivos:

Avaliar a toxicidade de doses repetidas do extrato liofilizado de Pedilanthus

tithymaloides (EPT) em camundongos.

Métodos:

0508/13 Todos os procedimentos experimentais foram analisados e

previamente aprovados pelo Comitê de Ética em Uso de Animais do

CBiotec/UFPB (CEUA), sob a certidão Nº 0508/13. Foram utilizados 80

camundongos albinos Swiss (Mus musculus), sendo 40 machos e 40 fêmeas,

pesando entre 28 e 32 g, com faixa etária aproximada de oito semanas, obtidos

do biotério Prof. Thomas George (ANVISA/CBiotec/UFPB). Os animais

foram divididos em quatro grupos de 20 animais cada (10 machos e 10

fêmeas), sendo um grupo controle, no qual os animais foram tratados

diariamente, durante 28 dias, por via oral (gavagem), apenas com o veículo de

dissolução da amostra (Tween 80, 5% em salina), e três grupos tratados (v.o.,

28 dias) com as doses de 250, 500 e 1000 mg/kg do EPT. Os seguintes

parâmetros foram observados: consumo de água, evolução ponderal,

temperatura corporal, glicemia, atividade exploratória (Campo Aberto) e

atividade motora (Rota Rod) e índices dos órgãos. Os dados estão expressos

como média ± erro padrão da média e foram analisados por ANOVA seguido

de Tukey. Os resultados foram considerados significativos quando p < 0,05.

Resultados:

Dentre os parâmetros avaliados, não foram observadas alterações significantes

no evolução ponderal, temperatura corporal, glicemia, atividade exploratória e

atividade motora, em relação ao grupo controle. Pode-se observar que houve

uma diminuição significativa no consumo de água, nos animais machos

tratados com a dose 250 mg/kg do EPT (47,96 ± 0,97a mL) em relação ao

grupo controle (53,90 ± 1,98 mL), bem como no peso final dos animais

machos tratados com a dose de 1000 mg/kg (37,89 ± 1,18a g), em relação ao

grupo controle (41,78 ± 0,96 g). Observa-se que houve uma redução

significante apenas no índice de fígado de animais machos após tratamento de

28 dias com a menor dose 250 mg/kg de EPT (51,02 ± 0,42a mg/g), em

relação ao grupo controle (Machos: 55,92 ± 0,41 mg/g).

Conclusão:

Portanto, é possível inferir que o extrato liofilizado de Pedilanthus

tithymaloides possui baixa toxicidade, após tratamento de 28 dias fornecendo

perspectivas para futuros estudos e uso medicinal.

Apoio Financeiro:

Gerado em: 2014-5-22 10:06:46

10.062 - CARACTERIZAÇÃO TÉRMICA E FITOQUÍMICA PARA

EXTRATO SECO DE Morinda citrifolia 1,2Ribeiro, A.G., 1Gouveia,

A.L.A, 1Brasileiro, W. B., 2Freitas Neto, J. L., 1Lima, M. C. A., 2Rolim

Neto, P. J., 2Silva, R.M.F. 1Departamento de Antibióticos 2Departamento

de Ciências Farmacêuticas, UFPE, Recife/PE.

Gouveia, A. L. A. , Brasileiro, W. B. , Neto, P. J. R. , Lima, M. C. A. ,

Neto, J. L. F. , Silva, R. M. F. ,

Departamento de Antibióticos - UFPE Departamento de Ciências

Farmacêuticas - UFPE

Introdução:

O suco de Morinda citrifolia (noni) vem sendo utilizado pela população por

seu poder de controlar uma gama de enfermidades. Porém, recentemente a

ANVISA vedou a comercialização dos produtos oriundos dessa fruta, pois não

há comprovação científica de que o fruto não seja nocivo à saúde. Faz-se

necessário então, o desenvolvimento de um produto que cumpra os requisitos

de qualidade, efetividade e segurança exigidos. Assim, o caráter inovador

deste trabalho estará suportado na obtenção de produtos intermediários

integrados, com funcionalidade superior a uma simples mistura dos

componentes, garantindo assim uma maior viabilidade tecnológica e

econômica.

Objetivos:

Obter o perfil térmico e realizar a prospecção fitoquímica do extrato

hidroalcoólico liofilizado de M. citrifolia (EHLMC).

Métodos:

Não trabalhamos com experimentação animal e nem com experimentação

humana. Os frutos de M. citrifolia foram coletados no município do Cabo de

Santo Agostinho/PE e uma exsicata foi depositada no Herbário Geraldo Mariz

(UFP), sob o nº do protocolo 74.792. Eles foram cortados e triturados em uma

solução hidroalcóolica numa proporção de 70% de álcool. Após a extração, o

produto foi filtrado, rotaevaporado e liofilizado. Para obtenção das curvas

termogravimétricas (TG e DTA) do EHLMC, utilizaram-se cerca de 6 mg,

sendo submetida a uma faixa de temperatura entre 25 e 900ºC, no analisador

térmico ShimadzuÒ. Os cálculos de perda de massa (%) e diferença de

temperatura (ΔT) foram feitos no programa TA-60WS da ShimadzuÒ. Para a

prospecção fitoquímica, utilizou-se a cromatografia de camada de delgada. No

teste de triterpenos e esteróides, foi utilizado o padrão β-sitosterol, o sistema

Tolueno/Acetato (9:1) e o revelador Liberman. Para flavonóides, os padrões

foram a quercetina, rutina e o ácido gálico, o sistema foi o acetato de

etila/ácido acético/ácido fórmico/água (100:11:11:27) e para a revelação

aplicou-se o Neu. Para taninos, o ácido gálico foi utilizado como padrão, uma

solução de acetato de etila/ácido acético/ácido fórmico/água (100:11:11:27)

como sistema e o revelador aplicado foi a vanilina clorídrica. Para saponinas,

foram dissolvidos 50 mg do EHLMC em 5 mL de água destilada. Em seguida,

diluiu-se para 15 mL e agitou-se vigorosamente durante 2 min em tubo

fechado.

Resultados:

A partir da análise das curvas TG e DTA do EHLMC, observaram-se dois

eventos. O primeiro, endotérmico, iniciou-se em 123,92ºC e terminou em

144,54ºC. Neste, houve uma perda de massa de 0,415 mg (6,665%),

possivelmente equivalente à perda de água e solventes voláteis. O segundo,

exotérmico, iniciou-se em 180,32ºC e terminou em 213,80ºC, no qual houve

uma perda de massa de 1,746 mg, equivalente a 28,039%, representando uma

etapa de decomposição. Foi verificado que não houve a presença de taninos,

triterpenos e esteróides, porém, há flavonóides e saponinas no EHLMC.

Conclusão:

Os resultados obtidos contribuem para a elaboração de uma monografia

farmacopeica para este insumo vegetal, e um futuro desenvolvimento de

produtos farmacêuticos derivados a partir de M. citrifolia.

Apoio Financeiro:

PROPESQ –UFPE, CNPq

Gerado em: 2014-5-22 10:09:09

10.063 - A CITOTOXICIDADE DO COMPOSTO C2 É MEDIADO

PELA PRODUÇÃO DE ROS INTRACELULAR EM HL-60.

Camara, C. A. , Coulidiati, T. H. , Dantas, B. B. , Faheina-martins, G. V. ,

Goncalves, J. C. R. , Oliveira, R. N. , Oliveira, E. J. , Araujo, D. A. M. ,

Departamento de Biotecnologia - UFPB Departamento de Ciências

Moleculares - UFRPE

Introdução:

O triazole e seus derivados têm atraído uma atenção considerável nessas

últimas décadas devido aos seus valores quimioterápicos. O interesse em

moléculas que contêm o grupo 1,2,3-triazole como agentes quimioterapêuticos

para várias doenças tem aumentado, isto porque esta classe de heterocíclicos é

conhecida por exibir uma vasta gama de atividades biológicas, tais como, anti-

proliferativo e anti-neoplásico. O composto C2 é um derivado 1,2,3-triazole a

partir do 1,4-naftoquinona.

Objetivos:

No presente trabalho, avaliou-se a formação das espécies reativas de oxigênio

(ROS) intracelular, associada ao efeito citotóxico do composto C2 em HL-60.

Métodos:

05878712.7.0000.5183 O nível de ROS intracelular foi avaliado por

citometria de fluxo, após 24 horas de tratamento das células com o composto

C2 usando a sonda fluorescente DCFH2-DA. O n-acetil cisteina (NAC) foi

usado como antioxidante para inibir o efeito das ROS. A citotoxicidade foi

avaliada pelo ensaio do MTT, após um período de incubação de 24 horas do

composto C2. Usamos células mononucleares normais do sangue periférico

(PBMC), como modelo não cancerígeno humano e assim, avaliar o efeito

tóxico do composto C2.

Resultados:

Após 24 horas de tratamento com o composto C2, utilizando a IC50 de 10

µM, verificou-se um aumento do nível de ROS intracelular comparado com o

controle (as células não tratadas). Esse aumento do nível de ROS intracelular

é diminuído quando as células foram tratadas com o NAC (1 mM). O ensaio

de MTT mostrou que o composto C2 não apresenta citotoxicidade enfrente

das células tratadas com o NAC. O nível de ROS intracelular nas células

PBMC não foi alterado quando tratadas durante 24 horas com C2, não sendo

verificado citotoxicidade.

Conclusão:

Concluímos que o aumento do nível de ROS intracelular na linhagem HL-60

pode ser um dos responsáveis pelo efeito citotóxico do composto C2.

Apoio Financeiro:

CNPq, CAPES e TWAS.

Gerado em: 2014-5-22 10:09:09

10.064 - Avaliação da atividade esquistossomicida in vitro de derivados

imidazolidínicos (RH-40 e FZ-24).

Júnior, A. S. A. A. , Oliveira, S. A. , Silva, A. L. , Oliveira, J. F. , Santiago,

E. F. , Silva, P. R. , Botelho, S. P. S. , Lima, M. C. A. ,

Antibióticos - UFPE Imunologia - FIOCRUZ

Introdução:

A esquistossomose é reconhecida pela OMS, como um grave problema de

saúde pública, acometendo os países da África, América Latina, Caribe e

Oriente Médio (IVR -

www.who.int/vaccine_research/diseases/soa_parasitic/en/index5.html. 2013).

No Brasil, é encontrada a espécie Schistosoma mansoni, com estimativas de 6

a 8 milhões de indivíduos infectados (Guia da Vig Epid e Cont da Esquist.

2007). O fármaco utilizado para a quimioterapia desta parasitose é o

praziquantel (Int J of Ant Agents, 29, 570–575, 2007). Contudo, são relatados

na literatura casos de possíveis cepas de S. mansoni resistentes a esse

tratamento (Acta Trop,111:82– 85.2009). Desde então, novas alternativas

quimioterápicas devem ser desenvolvidas para que cepas de S. mansoni não

apresentem evidências de resistência e que outros medicamentos possam fazer

parte da quimioterapia dessa parasitose. O núcleo imidazolidínico é um

heterociclo pentagonal, farmacóforo importante presente em vários compostos

biologicamente ativos (Tetra Let. 45, 7049–7051. 2004), conhecido na

literatura pelo seu amplo espectro de atividades biológicas, inclusive a

atividade esquistossomicida (The Sc World J., vol 2012. 2012).

Objetivos:

Avaliar o potencial esquistossomicida dos derivados imidazolidínicos RH-40

((Z)-3-(4-cloro-benzil)-5-(4-bis-benzilóxi-benzilideno)-4-tioxo-imidazolidin-

2-ona) e FZ-24 ((Z)-3-(4-cloro-benzil)-5-(4-benzilóxi-benzilideno)-

imidazolidina-2,4-diona).

Métodos:

38/2012 Este trabalho foi aprovado pelo Comitê de Ética no Uso de Animais

do Centro de Pesquisa Aggeu Magalhães/Fundação Oswaldo Cruz

(CPqAM/FIOCRUZ) autorizado pela licença No. 38/2012. Foram utilizados

camundongos machos albinos Swiss Mus musculus com 25 dias de idade

pesando 50 gramas. Os derivados imidazolidínicos (FZ-24 e RH-40) foram

sintetizados no LPSF/UFPE e após isso, foram analisados quanto a sua

citotoxicidade através de células de linhagem macrofágica J774. O valor da

concentração inibitória (LC50) foi determinada por regressão não linear,

utilizando o GraphPad Prism versão 5.01. Em seguida, o composto foi

avaliado in vitro frente aos vermes adultos do S. mansoni nas concentrações

100 a 5 µg/mL. O PZQ foi o controle positivo do experimento.

Resultados:

O composto FZ-24 apresentou LC50 de >100µM e o composto RH-40

apresentou LC50 de >100µM. Na avaliação in vitro foi verificada uma melhor

resposta biológica com o derivado RH-40 apresentando uma taxa de

mortalidade de 83,33% nas concentrações de 80 e 10 μg/mL no último dia de

observação (144h). O derivado LPSF/FZ-24 apresentou uma taxa de

mortalidade de 16,66% nas concentrações de 40 μg/mL e 20 μg/mL, no último

de dia observação. Foi possível observar, que ambos os compostos,

impediram a oviposição das fêmeas, aderência nas placas de cultura e o

pareamento entre os casais, além da redução expressiva da motilidade dos

vermes adultos de S. mansoni.

Conclusão:

o derivado imidazolidínico RH-40 apresentou uma atividade

esquistossomicida in vitro promissora. O derivado imidazolidínico FZ-24

apesar de não apresentar mortalidade expressiva na atividade biológica, eles

mostraram ação sobre os movimentos corporais dos parasitos de S. mansoni,

provocando a diminuição de seus movimentos. Porém, ainda é necessária a

realização de ensaios in vivo frente à esquistossomose mansônica.

Apoio Financeiro:

FACEPE, CNPq e FIOCRUZ

Gerado em: 2014-5-22 10:09:09

10.065 - SÍNTESE DO COMPOSTO 4-AMINO-2-(FENIL)-6-(p-OC2H5-

FENIL)-5-CARBONITRILA-PIRIMIDINA E AVALIAÇÃO DE SUA

ATIVIDADE IN VITRO FRENTE A BACTÉRIA Pseudomonas

aeruginosa

Lira, M. A. C. , Rocha, T. A. , Nunes, A. B. , Falcao, E. P. S. ,

Departamento de Biologia - UFPE Departamento de Bioquímica - UFPE

Introdução:

Compostos heterocíclicos são descritos por uma gama de pesquisados, por

apresentarem diversas propriedades biológicas. Entre as várias classes deste

composto destacam-se, as pirimidinas, apresentando uma enorme

aplicabilidade farmacológica. Pirimidinas são aminas heterocíclicas

aromática, isoeletrônicas ao benzeno Heter. Chem. 4th ed. 2000., nas quais se

observam dois átomos de Carbono substituídos pelo Nitrogênio, nas posições

1 e 3 do anel benzênico. O núcleo pirimidínico tem atraído cada vez mais a

atenção de Químicos Medicinais e Sintéticos, por possuir uma vasta gama de

atividades biológicas. Diante os dados é possível se verificar que compostos

orgânicos contendo o núcleo pirimidínico apresentam um grande potencial de

atividades biológicas.

Objetivos:

Sintetizar o novo composto 4-amino-2-(fenil)-6-(p-OC2H5-fenil)-5-

carbonitrila-pirimidina e avaliar a eventual atividade in vitro frente a bactéria

Pseudomonas aeruginosa.

Métodos:

O trabalho a ser apresentado não necessita da aprovação do comitê de ética

para ser realizado por não haver experimentação animal e humana. O derivado

pirimidínico foi produzido a partir de reações consecutivas, principiando com

aldeído aromático, que reage com a malononitrila, resultando assim na p-

OC2H5-bisnitrila. Em seguida esta reage, em metanol e a temperatura de

refluxo, e na presença de quantidades catalíticas de trietilamina, com

benzamidina, originando o composto 4-amino-2-(fenil)-6-(p-OC2H5-fenil)-5-

carbonitrila pirimidina. A reação foi acompanhada pelo método de

Cromatografia em Camada Delgada e ao término os produtos foram

recristalizados em metanol. Sua estrutura química foi confirmada por técnicas

usuais de espectrometria de massas, infravermelho e ressonância magnética

nuclear de prótons. O composto sintetizado foi submetido a testes de atividade

antibacteriana através do método de difusão em meio sólido utilizando discos

de papel. Os ensaios foram realizados em triplicata e a atividade avaliada

através da mensuração dos halos de inibição comparando-os àqueles

observados para o padrão comercial de Gentamicina. Os ensaios foram

desenvolvidos em meio de cultura Müeller – Hinton e as placas foram

incubadas a 37°C por 18 horas. Os resultados foram expressos em

milímetros. Foi selecionado para os testes a bactéria P. aeruginosa. O ensaio

foi feito em triplicata.

Resultados:

O composto pirimidínico 4-aminado obtido mostrou-se como composto

sólidos e cristalino. Estável, apresentou temperaturas elevadas de fusão,

203°C - 225°C, com um rendimento de 46%. Sua pureza foi avaliada através

de Cromatografia em Camada Delgada. Os dados obtidos mostraram que o

composto sintetizado apresentou atividade antibacteriana, com um halo de

inibição de 13 mm frente a P. aeruginosa. Os resultados obtidos mostram o

controle positivo testado, a Gentamicina com um halo de inibição de 16 mm.

Conclusão:

A abordagem sintética utilizada mostrou-se adequada, sendo obtido o

compostos de interesse em rendimentos adequados e em bom nível de pureza;

O composto mostrou propriedades antibacteriana, sendo que a cepa testada

mostrou-se sensível ao composto 4-aminado.

Apoio Financeiro:

Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco –

FACEPE.

Gerado em: 2014-5-22 10:09:09

10.066 - AÇÃO ESPASMOLÍTICA DE Zornia brasiliensis Vogel.

(LEGUMINOSAE) ENVOLVE BLOQUEIO DO INFLUXO DE

CÁLCIO EM ÍLEO DE COBAIA

Oliveira, F. R. M. B. , Silva, B. A. , Moreno, G. T. A. , Ferreira, S. R. D. ,

Silva, M. S. , Tavares, J. F. , Silva, A. D. S. , Cavalcante, F. A. ,

Departamento de Ciências Farmacêuticas - UFPB Departamento de

Fisiologia e Patologia - UFPB

Introdução:

O gênero Zornia (Leguminosae) contém cerca de 80 espécies distribuídas

nas regiões tropicais e subtropicais do mundo (Legumes of the World, p. 307.

Royal Botanic Gardens, Kew, 2005). Zornia brasiliensis é uma espécie

herbácea, conhecida popularmente como “urinária”, “urinana” e “carrapicho”,

utilizada na medicina popular como diurética e para tratamento de doenças

venéreas (Brazilian Journal of Ethnopharmacology, v. 111, p. 383, 2007) e foi

relatado que o extrato etanólico bruto das partes aéreas de Zornia brasiliensis

(ZB?EtOHPA) apresenta atividade antidiarreica (IX Simpósio Brasileiro de

Farmacognosia, Goiânia, C-45, p. 42, 2013).

Objetivos:

Investigar uma possível atividade espasmolítica do ZB-EtOHPA em íleo de

cobaia.

Métodos:

Comissão de Ética no Uso de Animais da UFPB (CEUA) nº 3206/13 Eram

utilizados cobaias (Cavia porcellus) de ambos os sexos, pesando entre 300 e

500 g (3 meses), o íleo era isolado e suspenso em cubas de banho para órgão

isolado sob condições apropriadas. Eram obtidas contrações isotônicas e

isométricas Os resultados (n = 4-5) foram expressos como a média e o e.p.m.

empregando-se o teste “t” ou análise de variância (ANOVA) “one-way”

seguido do pós-teste de Bonferroni, onde os valores de p < 0,05 foram

considerados significantes. Toda metodologia foi aprovada pela Comissão de

Ética no Uso de Animais da UFPB (nº 3206/13).

Resultados:

O extrato ZB-EtOHPA inibiu as contrações fásicas induzidas por 10?6 M de

carbacol (CI50 = 73,6 ± 19,5 μg/mL) e de histamina (CI50 = 53,5 ± 13,6

μg/mL) de maneira dependente de concentração e equipotente, sugerindo que

o extrato pode estar agindo por um mecanismo de ação comum à via de

sinalização dos agonistas testados. O extrato ZB-EtOHPA (1–729 μg/mL)

também relaxou de maneira dependente de concentração o íleo de cobaia pré-

contraído com 40 mM de KCl (CE50 = 38,3 ± 4,1 μg/mL), com 10-5 M de

carbacol (CE50 = 65,1 ± 8,2 μg/mL) ou com 10-6 M de histamina (CE50 =

39,9 ± 4,4 μg/mL), sendo cerca de 1,6 vezes mais potente para KCl e

histamina, quando comparado ao carbacol. Como o passo comum à via de

sinalização destes agentes contráteis são os canais de Ca2+ dependentes de

voltagem (CaV), hipotetizou-se que o ZB-EtOHPA estaria impedindo o

influxo de Ca2+ através destes canais. E foi observado que o ZB-EtOHPA

(27, 81 e 243 µg/mL) antagonizou as contrações induzidas por CaCl2 em

meio despolarizante nominalmente sem Ca2+ forma não paralela e com

redução do Emax de 100% (controle) para 79,4 ± 6,7; 42,8 ± 6 e 11,1 ± 2%,

respectivamente. Os valores de CE50 do CaCl2 passaram de 0,6 ± 0,1 x 10-

3 M (controle) para 4,6 ± 0,7 x 10-3; 2,0 ± 0,3 x 10-2 e 1,0 ± 0,04 x 10-1 M,

respectivamente, confirmando que o ZB?EtOHPA estaria interferindo com o

influxo de Ca+2 através dos CaV para exercer seu efeito espasmolítico.

Conclusão:

O extrato ZB-EtOHPA apresenta atividade espasmolítica em íleo de cobaia e

seu mecanismo de ação envolve o bloqueio do influxo de Ca2+ através dos

CaV.

Apoio Financeiro:

CNPq, CAPES, UFPB.

Gerado em: 2014-5-22 10:09:09

10.067 - RIPARINA A, UM COMPOSTO OBTIDO A PARTIR DA

Aniba riparia, ATENUA A RESPOSTA INFLAMATÓRIA POR

MODULAR A MIGRAÇÃO DE NEUTRÓFILOS

Silva, R. O. , Damasceno, S. R. B. , Silva, V. G. , Brito, C. F. C. , Silva, I.

S. , Aragão, K. S. , Gutierrez, S. J. C. , Barbosa, A. L. R. , Freitas, R. M. ,

Souza, M. H. L. P. , Medeiros, J-V. R. ,

1. Departamento de Fisiologia e Farmacologia - UFC 2. Programa de Pós-

graduação em Biotecnologia - UFPI 3. Laboratório de Química de

Produtos Sintéticos e - UFPI 4. Laboratório de Pesquisa em

Neuroquímica Experim - UFPI

Introdução:

A resposta inflamatória é uma série de eventos coordenados que depende do

aumento da permeabilidade vascular e liberação seqüencial de mediadores

inflamatórios. As drogas comumente usadas para o tratamento das condições

inflamatórias, como os AINES, são associadas com importantes efeitos

colaterais e baixa eficácia terapêutica.

Objetivos:

Investigar as propriedades antiinflamatórias da Riparina A, um derivado semi-

sintético isolado a partir da Aniba riparia, em camundongos.

Métodos:

0066/09 Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal

da UFPI (protocolo n° 0063/09). A atividade antiinflamatória da Riparina A

foi avaliada usando diversos agentes inflamatórios (carragenina, composto

48/80, serotonina e histamina) para induzir edema na pata e o modelo de

peritonite em camundongos swiss machos (n=6). Amostras do fluido

peritoneal foram removidas para dosagem de mieloperoxidase (MPO),

glutationa (GSH), malondialdeído (MDA) e níveis de TNF-α e IL-1β.

Resultados:

Nossos resultados mostraram que o pré-tratamento com Riparina A, reduziu

marcadamente a resposta edematogênica causada pela administração de

carragenina de uma maneira dose-dependente, com efeito máximo na dose de

10 mg/kg, reduzindo em todos os tempos avaliados, incluindo o pico a 4h

(57% de redução) e 72h (73% de redução). Similarmente, a Riparina A (10

mg/kg) inibiu efetivamente o edema induzido por composto 48/80 (50% de

redução), serotonina (71% de redução) e histamina (80% de redução). A

administração de carragenina induziu um aumento na atividade de MPO

(7.69±0.80 U/ml), concentração de MDA (25.1 ± 4.4 nmol/ml), níveis de

TNF-α (208.7±39.2 pg/ml) e IL-1β (1073.0±180.1 pg/ml), e reduziu os níveis

de GSH (44.2 ± 8.8 μg/ml) no fluido peritoneal, quando comparado com o

grupo controle. No entanto, o pré-tratamento com Riparina A (10 mg/kg, i.p.)

reduziu significativamente a atividade de MPO (2.80 ± 0.75 U/ml), a

concentração de MDA (15.7 ± 2.8 nmol/ml), os níveis de TNF-α (90.4 ± 32.8

pg/ml) e IL-1β (635.2 ± 65.9 pg/ml), e aumentou os níveis de GSH (95.6 ± 9.7

μg/ml). Além disso, o pré-tratamento com Riparina A inibiu a contagem total

(1.97 ± 0.36×103 cells/ml) e diferencial (0.68 ± 0.11 × 103 cells/ml) de

leucócitos, quando comparados com o grupo carragenina (4.83 ± 0.99×103

cells/ml e 3.55 ± 0.32 × 103 cells/ml, respectivamente).

Conclusão:

Riparina A exerce seus efeitos anti-inflamatórios através de mecanismos

dependentes da inibição de eventos vasculares, migração de neutrófilos para o

sítio inflamado, redução da produção de citocinas pró-inflamatórias e do

estresse oxidativo.

Apoio Financeiro:

CNPq e FAPEPI

Gerado em: 2014-5-22 10:09:09

10.068 - AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE DO ÁCIDO CAPERÁTICO

EXTRAÍDO DA PARMOTREMA PRAESOREDIOSUM SOBRE

EMBRIÕES DE BIOMPHALARIA GLABRATA E LARVAS DE

ARTEMIA SALINA

Carvalho, A. N. , Falcão, E. P. S. , Martins, M. C. B. , Pereira, E. C. ,

Silva, H. A. M. F. , Amâncio, F. F. , Melo, A. M. M. A. , Silva, N. H. ,

Bioquímica - UFPE Ciências Geográficas - UFPE Centro Acadêmico de

Vitória de Santo Antão - UFPE Biofísica e Radiobiologia - UFPE

Introdução:

A esquistossomose constitui um sério problema de saúde pública, uma

estratégia promissora para o controle da doença é o combate ao hospedeiro

intermediário com o uso de substâncias moluscicidas. A procura pelos

produtos biodegradáveis aumenta o interesse pelo uso de moluscicidas

naturais. Os compostos extraídos de liquens têm chamado atenção, visto que

estes organismos são formados pela simbiose entre algas e fungos,

responsáveis pela produção de metabólitos secundários que são encontrados

depositados sobre as hifas corticais e medulares do talo liquênico, sob forma

de cristais cujas propriedades biológicas são amplamente descritas na

literatura.

Objetivos:

Avaliar o efeito moluscicida do ácido caperático purificado a partir do extrato

etéreo de Parmotrema praesorediosum sobre embriões dos moluscos da

espécie Biomphalaria glabrata e o ensaio de letalidade com as larvas do

microcrustáceo Artemia salina.

Métodos:

Neste estudo foram utilizados animais invertebrados da espécie Biomphalaria

glabrata e larvas do microcrustáceo Artemia salina para os testes biológicos

não sendo necessário a submissão do projeto para o Comitê de Ética em

Pesquisa. O líquen foi coletado no município de Serra Talhada/PE e

acondicionado em sacos de papel. O talo foi macerado e submetido a

sucessivas extrações a frio com éter dietílico sendo o extrato etéreo evaporado

até a secura em rotaevaporador acoplado a banho maria a 40°C. Para obtenção

do ácido caperático o extrato etéreo foi dissolvido no éter para separar as

frações solúveis e insolúveis. A porção solúvel em éter foi tratada com

carbonato de sódio a 10% até atingir o pH 9.0, sendo em seguida, adicionado

ácido clorídrico a 20% até chegar ao pH 1.0. O precipitado formado após a

reação foi dissolvido em etanol gelado e deixado em repouso (-4°C) até a

formação de cristais do ácido caperático. Para os ensaios biológicos, os

embriões B. glabrata, foram expostos por 24 horas ao ácido caperático nas

concentrações de 0 (controle), 125, 250 e 500ppm. Após a exposição, foram

observados por oito dias consecutivos e classificados como inviáveis

(embriões mortos e malformados) e viáveis (embriões eclodidos). Os

experimentos foram realizados em triplicata com 100 embriões por grupo. O

bioensaio com Artemia salina foi realizados com dez larvas incubadas em

tubos ensaio contendo o extrato etéreo de P. praesorediosum nas

concentrações de 0 (controle) ; 200, 125; 62,5 ppm. A exposição foi realizada

por 24 horas e os testes feitos em quadruplicata. Os grupos foram analisados

quanto à frequência de letalidade e sobrevivência. Os testes estatísticos

utilizados foram o ANOVA e o Newman- keuls com p<0,05.

Resultados:

Os embriões expostos ao ácido caperático apresentaram 99,0% de

inviabilidade embrionária na concentração de 500 ppm, as demais

concentrações (250 e 125 ppm) apresentaram 52,60% e 10,30% de

inviabilidade respectivamente, significativamente diferente do controle. No

bioensaio com A. salina foi observado nas concentrações de 200, 125, 12,5

ppm uma toxicidade relativamente baixa de 9,25%, 9,50% e 9,50%

respectivamente sobre as larvas do microcrustáceo expostas ao extrato.

Conclusão:

O ácido caperático obtido do extrato etéreo de P. praesorediosum pode ser

considerado um potente agente moluscicida, uma vez que causou significativa

letalidade sobre embriões de B. glabrata e apresentou baixa toxicidade as

larvas de A. salina.

Apoio Financeiro:

CNPq

Gerado em: 2014-5-22 10:09:09

10.069 - A LIGNANA JUSTICIDINA B APRESENTA ATIVIDADE

ANTIAMASTIGOTA PARA Leishmania (L.) amazonensis associada à

síntese de óxido nítrico

Dias, C. N. S. , Rodrigues, K. A. F. , Néris, P. L. N. , Figueredo, S. L. ,

Rocha, J. C. , Silva, M. S. , Tavares, J. F. , Oliveira, M. R. ,

1 Departamento de Biologia Molecular - UFPB 2 Departamento de

Ciências Farmacêuticas - UFPB

Introdução:

As leishmanioses são um complexo de doenças inseridas no grupo de doenças

tropicais negligenciadas. As drogas utilizadas em seu tratamento são

principalmente os antimoniais pentavalentes e a anfotericina B, usados há

muitos anos nessa terapêutica. Contudo, estão associados a sérios efeitos

colaterais. Portanto, torna-se necessário a busca por novas drogas para serem

empregadas na terapêutica das leishmanioses.

Objetivos:

Investigar a atividade da lignana Justicidin B sobre formas amastigotas

intracelulares de Leishmania (L) amazonensis.

Métodos:

1210/13 Este projeto foi aprovado pelo comitê de ética em pesquisa animal do

Centro de Biotecnologia da UFPB–CEUA com o seguinte número de certidão

1210/13. A atividade de Justicidina B foi avaliada frente a formas amastigotas

intracelulares. Macrófagos murinos foram coletados de camundongos machos

ou fêmeas em idade de 30 a 60 dias e peso entre 25-30g. Os macrófagos

foram coletados da cavidade intraperitoneal dos animais através da injeção de

PBS suplementado com 3% de SBF. O lavado peritoneal foi centrifugado e os

macrófagos foram quantificados. Utilizando placas de 24 poços 1x106

macrófagos foram aderidos em lamínulas e infectados com 5x106

promastigotas de Leishmania (L.) amazonensis em fase estacionária de

crescimento, na ausência (controle) e na presença de Justicidina B nas

concentrações de 1,25 µg/ml, 2,5 µg/ml, 5 µg/ml, 10 µg/ml e 20µg/ml. As

lamínulas foram coletadas após 24h e 72h e coradas. Os sobrenadantes desses

ensaios foram quantificados quanto à presença de nitrito pela reação de

Griess, como uma medida da síntese de óxido nítrico. A análise estatística foi

realizada com análise de variância onde p<0.05 com nível máximo de

significância estatística, utilizando o programa GraphPad Prism 5.0.

Resultados:

As concentrações da Justicidina B apresentaram uma diminuição na

porcentagem de infecção dos macrófagos nas concentrações de 10 µg/ml e

20µg/ml. Nos controles as taxas de infecção dos macrófagos foram de 72% e

71% após 24h e 72 h de incubação, respectivamente. O tratamento com

20µg/ml por 24 horas resultou em 67% de macrófagos infectados,

apresentando uma redução de 33% da infecção, em relação ao controle. Após

72h de tratamento com 20µg/ml de Justicidina B, essa atividade

antiamastigota foi ainda maior, apresentando 83% de redução em relação ao

controle. O número de amastigotas por macrófago infectado também foi

mensurado, observando-se uma diminuição no número de parasitas após 72h

de tratamento nas concentrações de 10 µg/ml e 20µg/ml de Justicidina B. A

síntese de NO pelos macrófagos infectados foi aumentada na presença de

Justicidina B. Foram realizados no mínimo três experimentos independentes

com dois a quatro animais por experimento.

Conclusão:

A lignana Justicidina B possui atividade contra formas amastigotas

intracelulares de L. (L.) amazonensis associada à síntese de NO.

Apoio Financeiro:

Capes, PPgPNSB.

Gerado em: 2014-5-22 10:09:09

10.070 - Síntese e caracterização estrutural de novo derivado indólico

tiazolidínico.

Nascimento, P. H. B., Oliveira, T. B. , Amorim, C. A. C. , Segundo, M. Â.

S. P. , Silva, V. B. R. , Silva, W. L. , Pitta, I. R. , Lima, M. C. A. ,

Antibióticos - UFPE Ensino - IFAL

Introdução:

Tiazolidinonas são derivados dos heterocíclicos pentagonais, contendo um

grupo carbonila nas posições 2, 4 e/ou 5 que pertencem a um importante

grupo de compostos. Sua utilização em síntese orgânica é de grande

importância, tendo em vista as diversas atividades biológicas relacionadas a

seus análogos estruturais, tais como anticancerígena, anti-inflamatória,

anticonvulsivante, hipoglicemiante e antiviral, dentre outras (Bioorg. Med.

Chem., v. 18, p. 3805-3811, 2010). Devido a esta vasta aplicabilidade de suas

atividades biológicas, o presente trabalho propõe a obtenção de um novo

derivado das tiazolidinonas juntamente com o indol que possui uma

similaridade estrutural com a indometacina, também conhecida por seu

potencial terapêutico.

Objetivos:

Promover a síntese do novo derivado 5-(1H-indol-3il-metileno)-3-benzil-

tiazolidina-2,4-diona da série SF-39.

Métodos:

Este trabalho é da área de química medicinal e apenas está descrita a parte

química. O composto SF-39 foi sintetizado por meio de duas etapas. Primeira

foi obtido o intermediário substituído na posição 3 do anel da tiazolidina-2,4-

diona. Na segunda etapa, a mistura reacional de quantidades equimolares da

3-benzil-tiazolidina-2,4-diona e do éster 3-(1H-indol-3-il-metileno)-2-ciano-

acrilato de etila (IP) dissolvido em etanol seco, em presença de morfolina

como catalisador, foi aquecida a refluxo durante 4 horas. A mistura reacional

foi filtrada ainda quente e lavada com água destilada. A purificação do

composto final foi através de lavagens sucessivas com etanol.

Resultados:

O composto sintetizado (SF-39) se apresentou como um sólido de cor branca,

ponto de Fusão: 259-260ºC, rendimento: 50%, razão de frente e sistema: 0,74,

n-Hex./AcOEt. 7:3. As descrições espectroscópicas RMN 1H (DMSO,

300MHz) δ: 5.0 (2H, s, CH2), 7.3 (1H, m, ArH), 7.5 (2H, d, ArH, J = 9 Hz),

7.59 (2H, d, ArH, J = 9 Hz), 7.8 (1H, s, HC=, metileno), 8.1 (1H, d, ArH, J =

5.4 Hz) , 8.2 (1H, d, ArH, J = 4.8 Hz), 8.4 (1H, s, HC=, indol), 12.1 (1H, s, N-

H, indol). IV (KBr 1 %, υ cm-1) NH: 3407,10; C=O: 1729,04; C=O: 1673,11;

C=C: 1599,77.

Conclusão:

O composto SF-39 apresentou um rendimento considerado bom, pois sua rota

de síntese estava bem elucidada. Por meio da interpretação dos dados

espectroscópicos é possível elucidar a estrutura química do composto SF-39 e

assim comprovar a ocorrência da reação entre o intermediário substituído na

posição 3 do anel da tiazolidina-2,4-diona e o éster 3-(1H-indol-3-il-

metileno)-2-ciano-acrilato de etila.

Apoio Financeiro:

CAPES-PIBIC/CNPq/UFPE

Gerado em: 2014-5-22 10:09:09

10.071 - ALTERAÇÕES MORFOLÓGICAS E GENOTOXICA DE

HEMÓCITOS DE Biomphalaria glabrata EXPOSTO AO

OXIFLUORFEN.

Lima, M. V. , Silva, H. A. M. F. , Silva, L. R. S. , Melo, A. M. M. A. ,

Departamento de Biofísica e Radiobiologia - UFPE

Introdução:

O herbicida Oxifluorfen (Goal*BR) é indicado para o controle de gramíneas e

ervas daninhas de folhas largas nas diferentes culturas na região Nordeste.

Entretanto, a contaminação de ecossistemas aquáticos por agrotóxicos, mesmo

em baixas concentrações, é um fato preocupante, por colocar em risco

diversas espécies de organismos aquáticos, provocando sérios danos às

moléculas de DNA, tanto nos processos de duplicação como de transcrição

gênica, induzindo efeitos que podem ter ação imediata, ocasionando morte, ou

tardiamente, causando mutações que poderão se manifestar após várias

gerações. A utilização de sistemas biológicos capazes de detectar tais efeitos é

de suma importância. Moluscos da espécie Biomphalaria glabrata vem sedo

utilizados em trabalhos de monitoramento ambiental por serem bons

bioindicadores, possuirem um curto ciclo de desenvolvimento, reproduzirem-

se com facilidade e possuírem baixo custo de manutenção laboratorial. O teste

de micronúcleo e alterações nucleares têm se mostrado um ótimo meio de

identificação dos efeitos de genotoxicidade.

Objetivos:

Quantificar o número de células hemocitárias, e a frequência de alterações

celulares como micronúcleos, células binucleadas e apoptose, em hemolinfa

de Biomphalaria glabrata expostos ao herbicida Oxifluorfen.

Métodos:

Este trabalho não se faz necessário a aprovação do comitê de ética, por se

tratar de um experimento com animal invertebrado. Moluscos da espécie B.

glabrata foram expostos ao herbicida Oxifluorfen nas concentrações de 0,125;

e 0,5 ppm, durante 48 horas. Um grupo controle com apenas água foi

submetido às mesmas condições dos grupos expostos. Após a exposição, 100

µL da hemolinfa dos moluscos foram coletadas em lâminas de microscopia,

em seguida foi acrescentada a mesma quantidade de EDTA. Após esse

procedimento, cada lâmina foi colocada por 30 minutos em câmara úmida.

Passado este tempo, as células foram fixadas com 200 µL gluteraldeído. Em

seguida as lâminas foram enxaguadas com Ringer, coradas com Giemsa e

analisadas no microscópio óptico.

Resultados:

O número total de hemócitos de B. glabrata expostos e não expostos ao

herbicida oxifluorfen foi de 4.300 células para dose de 0 (controle água),

2.921 células para dose de 0.125 ppm e 3.846 células para dose de 0.5 ppm.

Quanto às alterações nucleares sofridas pelas células pode verificar que a

frequência de MNs, binucleação e apoptose celular ampliaram com o aumento

da concentração de Oxifluorfen. Somando as três alterações verificou-se os

seguintes valores 0,046 % (controle); 0,513 e 7,722% para as concentrações

de 0,125 e 0,5 respectivamente.

Conclusão:

A análise dos resultados evidencia que o herbicida Oxifluorfen, nas

concentrações de 0,125 e 0,5 ppm, interferiu no número de hemócitos de B.

glabrata diminuindo sua produção, bem como causando surgimento de

micronúcleo, células binucleadas e apoptose celular sugestivo de alta

toxicidade. Hemócitos mostraram-se sensíveis a ação do herbicida testado.

Este ensaio colabora para o início da padronização da utilização dos

hemócitos de B. glabrata como um bioindicador ambiental da ação de agentes

genotóxicos.

Apoio Financeiro:

PIBIC/CNPq – UFPE

Gerado em: 2014-5-22 10:09:09

10.072 - DERIVADOS 2-AMINO-TIOFENOS COMO POTENCIAIS

AGENTES ANTI-Leishmania: EFEITOS SOBRE Leishmania

amazonensis

Rodrigues, K. A. F. , Rocha, J. C. , Dias, C. N. S. , Neris, P. L. N. , De

Lima, M. C. A., Oliveira, T. B. , Mendonca-Junior, F. J. B. , Moura, R. O.

, Oliveira, M. R. ,

1PpPNSB-CBiotec - UFPB 2Programa de Pós-Graduação em Biologia

Molecular - UFPB 3Laboratório de Síntese e Vetorização de Moléculas -

UEPB

Introdução:

As leishmanioses compreendem um espectro de doenças infecciosas causadas

por parasitos do gênero Leishmania, que são responsáveis por altas taxas de

morbidade e mortalidade em todo o mundo. A terapêutica atual é limitada,

com alto potencial para resistência, de custo elevado e com graves efeitos

colaterais, necessitando a descoberta de novos fármacos mais eficazes, mais

acessíveis e seguros para o paciente. Uma nova abordagem na busca de

agentes quimioterápicos mais baratos e menos tóxicos é o screening de novas

substâncias sintéticas ou de origem natural. Nesse contexto, os derivados 2-

amino-tiofenos, que são uma importante classe de heterocíclicos, têm ganhado

atenção pelas suas diversas propriedades farmacológicas como anti-

inflamatória, antitumoral, antibacteriana, antifúngica, dentre outros, tornando

essas moléculas atraentes para outras atividades como a anti-Leishmania

Objetivos:

Avaliar a atividade anti-Leishmania de 10 derivados 2-amino-tiofenos

(representados pelas siglas SB-44, SB-83, SB-200, SB-80, SB-81, SB-63, SB-

68, 6CN01, 6CN09 e 6CN10) sobre formas promastigotas de L. amazonensis

e a citotoxicidade frente à macrófagos peritoneais murinos

Métodos:

CEUA Nº 0312/12 - CBiotec/UFPB Neste trabalho foram utilizados

macrófagos de camundongos Swiss (20-30g), machos e/ou fêmeas de 6 a 8

semanas de vida. Para avaliação da atividade anti-Leishmania, formas

promastigotas de L. amazonensis foram cultivadas em meio Schneider (1x106

células/mL) na ausência (controle) ou presença de diferentes concentrações

das substâncias-teste por 72h a 26ºC e foi avaliado o crescimento e viabilidade

por microscopia óptica. Na determinação da citotoxicidade sobre macrófagos

peritoneais murinos, foi utilizado o método colorimétrico do brometo de 3-

[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazolio (MTT), no qual os macrófagos

foram expostos a diferentes concentrações das substâncias por 24h, depois

adicionado MTT na concentração de 5mg/mL e realizada a leitura em

espectrofotômetro a 550nm.

Resultados:

Todos os derivados 2-amino-tiofenos mostraram atividade in vitro sobre

promastigotas de L. amazonensis, com concentrações inibitórias de 50% do

parasito (CI50) de 187,1μM (6CN10), 88μM (6CN09), 61,5μM (6CN01),

139,44μM (SB-80), 164,66μM (SB-68), 189,3μM (SB-63), 49,12μM (SB-81),

3,65μM (SB-200), 7,37μM (SB-44) e 3,37μM (SB-83). Os compostos SB-

200, SB-44 e SB-83, mais efetivos, apresentam um anel indólico terminal, que

pode estar envolvido no incremento da atividade anti-Leishmania. Em

comparação, os compostos da série 6CN apresentam um grupamento amino-

benzilideno, que parece está envolvido numa atividade intermediária. Na

avaliação da citotoxicidade, todas as moléculas demonstraram menor

toxicidade aos macrófagos do que ao parasito, com concentrações citotóxicas

em 50% dos macrófagos e índice de seletividade (CC50/IS) de

228,86μM/1,22 (6CN10), 211,43μM/2,4 (6CN09), 141,1μM/2,29 (6CN01),

540,44μM/3,87 (SB-80), 438,46μM/2,66 (SB-68), 721,76μM/3,81 (SB-63),

196,01μM/3,99 (SB-81), 32,02μM/8,77 (SB-200), 49,08μM/6,65 (SB-44) e

113,4μM/33,64 (SB-83). As moléculas com anel indólico também

apresentaram os melhores índices de seletividade, sendo, portanto, as mais

promissoras e escolhidas para os futuros estudos sobre a forma amastigota e

de mecanismos de ação da atividade anti-Leishmania.

Conclusão:

Os derivados 2-amino-tiofenos apresentam atividade anti-Leishmania in vitro,

demonstrando uma potencialidade na terapêutica das leishmanioses.

Apoio Financeiro:

Gerado em: 2014-5-22 10:09:43

10.073 - AVALIAÇÃO DA TOXICIDADE AGUDA DA ASSOCIAÇÃO

DE NANOPARTICULAS DE ÓXIDO DE CÉRIO E ÓXIDO DE ZINCO

Xavier, A. L. , Keyson, D. , Sampaio, F. C. , Albuquerque, A. J. R. ,

Farias, . I. A. P. , Santos, C. C. L. , Gonzaga, J. C. O. , Brito, M. T. ,

Sousa, A. G. , Sobral, M. V. ,

Departamento de Farmácia - UFPB Departamento de Química - UFPB

Departamento de Biotecnologia - UFPB

Introdução:

Nanopartículas de óxidos de metais têm sido amplamente utilizados em

indústria química, indústrias relacionadas a semicondutores, a indústria em

cosméticos e na biomedicina (Química de (nano) materiais. Química Nova, v.

30, n. 6, p. 1469, 2007.), contudo existem poucas informações a respeito

dessas partículas tanto do ponto de vista farmacológico quanto toxicológico.

Objetivos:

Avaliar a toxicidade oral aguda associação de nanoparticulas de óxido de

cério e óxido de zinco em camundongos.

Métodos:

CEPA Nº 0812/10 O ensaio toxicológico agudo foi realizado em

camundongos fêmeas (Mus Musculus), pesando entre 28 - 32 g, com 8

semanas de vida, utilizando-se uma dose única de 2000 mg/kg (v.o., n = 5) de

acordo com o protocolo experimental número 415 da OECD (2001). O

experimento foi aprovado pelo comitê de ética em pesquisa animal

(CEUA/CBiotec) sob nº 0812/10. Comportamento geral, efeitos adversos e

mortalidade foram avaliados ao longo de 14 dias. Foram avaliados ainda: peso

corporal, consumo de água e ração, parâmetros hematológicos, parâmetros

bioquímicos e índices de órgãos (coração, fígado, rins, baço e timo).Os

resultados obtidos foram expressos como média ± erro padrão da média

(SEM) e analisados pelo teste t de Student não pareado, com pós-teste de

Mann-Whitney. Os resultados foram considerados significativos quando

p < 0,05.

Resultados:

Não foram observadas mortes nem alterações comportamentais nos animais

tratados no estudo após administração da amostra. Não houve alteração

significativa no consumo de água, no entanto observou-se uma redução

significativa no consumo de ração pelos animais tratados com a amostra em

estudo (48,1 ± 5,07 g), quando comparados ao grupo controle (69,8 ± 3,79 g),

redução esta não considerada clinicamente relevante uma vez que não levou a

uma alteração significativa no peso dos animais, mesmo após 14 dias de

observação. Também não foram observadas diferenças significativas nos

parâmetros bioquímicos analisados. Em relação à avaliação hematológica,

houve aumento na contagem de leucócitos totais no grupo tratado com com

associação de nanoparticulas de óxido de cério e óxido de zinco (6,6 ± 0,7

103/mm3), em relação do grupo controle (3,7 ± 0,7 103/mm3), no entanto a

contagem total de leucócitos, em ambos os grupos, se manteve dentro dos

parâmetros normais para camundongos (Animal Models in Toxicology 2nd

ed; p. 815 ; 2007.).Não foram observadas alterações significativas no índice

dos órgãos.

Conclusão:

O estudo de toxicidade aguda da associação de nanopartículas de óxido de

cério e óxido de zinco demonstrou uma baixa toxicidade oral da substância

quando administrada a camundongos.

Apoio Financeiro:

CNPq e CAPES.

Gerado em: 2014-5-22 10:09:43

10.074 - ATIVIDADE LARVICIDA DO USNATO DE POTÁSSIO

SOBRE O AEDES AEGYPTI

Silva, R. C. S. , Albuquerque, B. N. L. , Navarro, D. M. A. F. , Martins,

M. C. B. , Silva, N. H. ,

Bioquímica - UFPE Química Fundamental - UFPE

Introdução:

O mosquito Aedes aegypti é o principal vetor de doenças virais como dengue

e febre amarela. A dengue ocorre em mais de 100 países e segundo a

Organização mundial de saúde cerca de 2,5 bilhões de pessoas estão sob risco

de contrair a doença. O uso de inseticidas químicos têm sido a forma mais

frequente de combate, porém a resistência à estes tem despertado para a busca

de novos compostos. O ácido úsnico é um composto liquênico já descrito por

apresentar atividade contra larvas de A. aegypti, porém a sua solubilização em

água depende do uso de solventes orgânicos, o que torna difícil a sua

aplicabilidade pela população.

Objetivos:

Avaliar o efeito do sal usnato de potássio, obtido através da modificação do

ácido úsnico isolado da Cladonia substella Vainio (Líquen).

Métodos:

Náo se aplica. nao foi utilizado animais nos experimentos O ácido único

(USN) foi obtido através de extrações sucessivas com éter dietílico em

Soxhlet a 40 °C por 16 h. o extrato foi filtrado e concentrado até a secura em

rotaevaporador acoplado a banho maria 40 °C. Para purificação o extrato foi

fracionado em coluna de sílica gel (70-230 porosidade) eluída com

clorofórmio:hexano (80:20 v/v). Para obtenção do usnato de potássio, o USN

(500 mg) foi parcialmente dissolvido em água destilada a 40 °C (40 mL), em

seguida uma solução de hidróxido de potássio (KOH 10%), previamente

preparada foi adicionada (2 mL) até a completa solubilidade do USN. O USN

purificado foi confirmado através de RMN H1 e o usnato foi analisado através

de Infravermelho. Os ensaios larvicidas sobre A. aegypti foram feitos a partir

de uma solução estoque de 100 ppm preparada com 0,005 g do usnato de

potássio dissolvido em 50 mL de água e em seguida foram feitas diluições

para obtenção das demais concentrações. Foram testadas concentrações

preliminares, e em seguida as concentrações de 1,4, 1,2, 1,0, 0,8 e 0,4 ppm

foram estabelecidas para o cálculo da concentração letal média (CL50). Foram

utilizadas 20 larvas para cada teste e realizadas quatro repetições por

concentração. A mortalidade das larvas foi avaliada após 24 e 48h e foi

analisada pelo teste de Probit, através do programa StatPlus2008.

Resultados:

O RMN H1 e o IV mostram os seguintes resultados para o USN purificado e

usnato, respectivamente: RMN H1 (300 MHz, DMSO-d6) δH (H; mult.; int.):

1,73 (3H; s, CH3-13), 2,08 (3H; s, CH3-16), 2,64 (3H; s, CH3-15), 2,65 (3H;

s, CH3-18), 5,92 (1H; s, C-4-H), 11,04 (1H; s, C-10-OH), 13,29 (1H; s, C-8-

OH), 18,89 (1H; s, C-3-OH). IV (KBr): 3454, 2982, 2929, 1687, 1631, 1540,

1480, 1460, 1382, 1330, 1291, 1240, 1140, 1188, 1136, 1073, 1038, 980, 940,

880, 840, 820, 770, 730, 700 cm-1. Os ensaios larvicidas mostraram que após

48 h, a mortalidade das larvas foi de 88,6%, 77,2%, 71,9%, 56,4% e 8,3%

para as concentrações de 1,4, 1,2, 1,0, 0,8 e 0,4 ppm, respectivamente. A

CL50 de 0,76 ppm foi obtida para as larvas do A. aegypti.

Conclusão:

Esse resultado sugere que o usnato de potássio pode ser utilizado como um

promissor agente larvicida, além de auxiliar futuros estudos para elaboração

de compostos sintéticos úteis no controle de larvas do mosquito transmissor

da dengue e febre amarela.

Apoio Financeiro:

CNPq, CAPES, FACEPE

Gerado em: 2014-5-22 10:09:43

10.075 - Envolvimento das prostaglandinas no efeito gastroprotetor do

extrato de folhas de Caryocar coriaceum Wittm.

Sousa, S. D. G. , Kerntofp, M. R. , Lacerda Neto, L. J., Ramos, A. G. B. ,

Morais, L. P. , Matos, D. F. , Sousa, D. G. , Barbosa, R. , Sales, V. S. ,

Meneses, I. R. A. ,

DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS - URCA

Introdução:

As úlceras pépticas atingem cerca de 10 % da população mundial, sendo os

agentes causadores das lesões o H+ e a pepsina. A principal defesa contra

estes é uma barreira física formada por muco, bicarbonato e fosfolipídeos

surfactantes que recobrem a camada superficial. Esta barreira sofre grande

influencia da ação das prostaglandinas, principalmente PGE2. Alguns anti-

inflamatórios não esteroidais, a exemplo da indometacina, são utilizados como

indutores de lesão gástrica, por inibirem a cicloxigenase (COX) e impedirem

assim a síntese de prostaglandinas. Uma fonte para buscar novas substancias

ativas e mais eficazes no tratamento de tais afecções é a biodiversidade, na

qual encontramos o Caryocar coriaceum, espécie típica do cerrado e de

ocorrência na Chapada do Araripe, que é utilizado popularmente para

tratamento de gripes, resfriados, bronquites, controle de tumores e tem

comprovada atividade anti-inflamatória e antibacteriana.

Objetivos:

Verificar a participação das prostaglandinas no efeito gastroprotetor do extrato

hidroalcoólico das folhas de Caryocar coriaceum (EHFCC) e determinar a

ação do extrato em relação à produção de muco.

Métodos:

01/2011 Foram utilizados camundongos Swiss (Mus musculos) de ambos os

sexos (n =6), com idade média entre 100 e 120 dias (20-30 g), autorizado pelo

Comitê de Experimentação e Uso de Animais da Universidade Regional do

Cariri CEUA/URCA, sob o número de protocolo 01/2011. Foram realizados

testes de indução de lesão gástrica por etanol e indometacina, mensurado por

método de pontuação, também realizados experimentos para verificação do

efeito de barreia promovido pelo EHFCC, além da participação das

prostaglandinas e a influencia do extrato na secreção de muco, utilizando

Alcian Blue. Os dados foram expressos em valores de média ± erro padrão da

média. A diferença entre os grupos foi avaliada pela análise de variância de

uma via (ANOVA). Quando o valor de F foi significativo, comparações post

hoc foram feitas pelo teste de Newman-Keuls.

Resultados:

Notou-se que a dose de 100 mg/kg do EHFCC foi mais eficiente em relação a

gastroproteção diante das lesões induzidas por indometacina e etanol, com

redução de 69,43%. O teste de barreira física revelou uma diminuição de

80,97% para administração intraperitoneal em relação ao grupo salina. O

inibidor não específico das COXs, antes da aplicação de misoprostol e

EHFCC, resultaram em valores com média de 19,28 ± 1,98 e 20,67 ± 0,99,

respectivamente. O misoprostol e o EHFCC via intraperitoneal e oral

apresentaram aumento da produção de muco em 291% e 184% se comparado

ao grupo salina, respectivamente.

Conclusão:

As lesões induzidas por indometacina resultam tanto por ação tópica, como

pelo bloqueio da síntese das prostaglandinas pela inibição das COX, sendo a

redução das lesões explicada pelos polifenois, taninos e flavonoides presentes

no extrato. O teste de barreira física evidenciou uma maior proteção do extrato

pela administração intraperitoneal devido a um aumento da biodisponibilidade

dos seus componentes. A reversão parcial dos efeitos protetores promovida

pela indometacina indica o envolvimento das prostaglandinas no mecanismo

utilizado pelo EHFCC, e o aumento da produção de muco supõe o possível

envolvimento de receptores EP3.

Apoio Financeiro:

Funcap

Gerado em: 2014-5-22 10:09:43

10.076 - Atividade antimicrobiana do Extrato da Buchenavia tetraphylla

frente isolados clínicos de Staphylococcus aureus

Filho, J. R. N. C. , Cordeiro, B. M. P. C. , Arruda, F. V. F. , Silva, M. V. ,

Baptista, N. M. Q. , Silva, T. F. , Gusmão, N. B. , Silva, L. C. N. , Correia,

M. T. . S. ,

Antibioticos - UFPE Bioquimica e Fisiologia - FACIPE Departamento de

Biologia - UK

Introdução:

Staphylococcus aureus é considerado um dos principais patógenos causadores

de inúmeras manifestações clínicas que compreendem: infecções em

ferimentos, pneumonias, endocardites e até septicemias, sendo importante a

busca de novas fontes de moléculas bioativas anti-S. aureus. Buchenavia

tetraphylla (Combretaceae) é uma espécie neotropical, distribuída desde Cuba

ao Rio de Janeiro, sendo uma planta etnomedicinal utilizada por comunidades

tradicionais da região Nordeste do Brasil.

Objetivos:

Neste contexto, o objetivo des trabalho foi avaliar atividade antimicrobiana de

extratos obtidos de folhas de B. tetraphylla frente a isolados clínicos recentes

de S. aureus.

Métodos:

Folhas de B. tetraphylla foram coletados no Parque do Camtimbau (Buíque,

Pernambuco, Brasil) foram secas, moídas através do equipamento Macsalab

mil (Model 200 LAB). O material obtido (25g) foi misturado com hexano

(100 mL) e submetido à agitação constante em mesa agitadora com rotação de

125 rpm, durante 72 horas em temperatura de 25° C. Em seguida, o extrato foi

filtrado e o sobrenadante foi rotaevaporado, o resíduo foi misturado em 100

mL de cada um dos seguintes solventes em ordem sequencial: clorofórmio,

acetato de etila e mentanol. O resíduo de cada solvente foi dissolvido em

dimetilsulfóxido e armazenado (4° C). A atividade antimicrobiana foi

determinada pela determinação das Concentrações Mínima Inibitória (CMI) e

Mínima Bactericida (CMB) (método de microdiluição) contra a linhagem

padrão de S. aureus (UFPEDA02), e cepas clínicas recentes. Resazurina

(0,01%) foi utilizada como indicador do crescimento bacteriano.

Resultados:

Todos os extratos apresentaram ação anti-S. aureus. Os valores de CMI para a

linhagem UFPEDA02, foram de 1,25 mg/mL, 5 mg/mL, 2,5 mg/mL e 5

mg/mL; e CMB de 2,5 mg/mL, >5mg/mL, 5mg/mL e >5 mg/mL,

respectivamente para metanol, hexano, clorofórmio e acetato de etila. Para as

linhagens clínicas o extrato metanólico obteve CMI variando de 0,01953125

mg/mL a 2,5 mg/mL e CMB de 0,078125 mg/mL a 5mg/mL. Os valores de

CMI do extrato hexânico variaram de 0,15625 mg/mL a 5mg/mL, e os de

CMB de 0,3125 mg/mL a >5 mg/mL. Para o extrato clorofórmico observou-se

uma variação de 0,0390625 mg/mL a 2,5 mg/mL (CMI) e de 0,078125

mg/mL a >5 mg/mL (CMB). Por fim, o extrato de acetato de etila no extrato o

CMI foi de 0,0390625 mg/mL a 5mg/mL e CMB de 0,15625 mg/mL a >

5mg/mL. Dos quatros extratos testados o metanólico foi mais ativo para a

maioria das linhagens, apresentando um maior potencial bactericida (Relação

CMB/CMI entre 1 e 4), seguido pelo extrato acetato de etila. Utilizando o

Coeficiente de Correlação de Pearson (ρ) foi possível observar que o extrato

metanólico não apresentou correlação significativa (ρ= 0,05) com os índices

de Múltipla Resistência à antibióticos (MAR; Multiple antibiotic resistance),

sugerindo que a ação do mesmo foi independente do perfil de resistência das

linhagens estudadas. Adicionalmente, foi encontrada uma correlação

moderada negativa entre os valores de CMI (ρ= -0,45) do extrato metanólico e

cloramfenicol, indicando que o mesmo foi ativo para as linhagens mais

resistentes à ação da droga.

Conclusão:

O metanólico da B. tetraphylla apresentou os melhores resultados, mostrando-

se ativo contra linhagens multirresistentes de S. aureus, e representando uma

alternativa sustentável na utilização dos recursos naturais da Caatinga como

fonte de moléculas para o tratamento de infecções causadas por este micro-

organismo.

Apoio Financeiro:

Capes, FACEPE e CNPQ

Gerado em: 2014-5-22 10:09:43

10.077 - AVALIAÇÃO DA GENOTOXICIDADE DO

TRACHYLOBANO-360, UM POTENCIAL AGENTE

ANTITUMORAL.

Abrantes, R.A., Pita, J. C. L. R. , Fernandes, I. G. , Xavier, A. L. , Batista,

T. M. , Mangueira, V. M. , Tavares, J. F. , Silva, M. S. , Santos, S. G. ,

Branco, M. V. S. C. ,

Departamento de Ciências Farmacêuticas - UFPB

Introdução:

O trachylobano-360 (T-360), um diterpeno isolado de Xylopia langsdorffiana

St. Hil. & Tul. (Annonaceae), apresenta importantes atividades

farmacológicas: espasmolítica (Nat. Prod. Res. 26: 2335, 2012) e antitumoral

sem causar alterações em parâmetros bioquímicos, hematológicos e

histopatológicos que frequentemente estão associadas ao uso clínico de

antineoplásicos (Molecules. 17: 9573, 2012). Além disso, no desenvolvimento

de novos medicamentos, os estudos de genotoxicidade desempenham um

papel importante já que substâncias genotóxicas causam dano ao material

genético podendo levar a mutações críticas e, portanto, a um aumento do risco

de câncer e outras doenças (J. Ethnopharmacol. 122: 136, 2009).

Objetivos:

Diante disto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial genotóxico do T-

360, utilizando o ensaio do micronúcleo in vivo.

Métodos:

CEUA N° 1009/12 Todos os procedimentos experimentais foram analisados e

previamente aprovados pelo Comitê de Ética em Uso de Animais do

CBiotec/UFPB (CEUA), sob a certidão Nº 1009/12. O ensaio do micronúcleo

em camundongos foi realizado de acordo com o OECD “Guidelines for

testing of chemicals” n. 474. Para isso, grupos de 5 camundongos Swiss (Mus

musculus), fêmeas, pesando entre 28 e 32 g, com faixa etária de 60 dias,

foram tratadas intraperitonealmente (i.p.) com três diferentes doses do T-360

(25, 150 e 300 mg/kg). Os grupos controles positivo (ciclofosfamida – 50

mg/kg) e negativo (0,5% de Tween 80) foram incluídos. Após 48 horas, os

animais foram anestesiados com tiopental sódico (50 mg/kg), e o sangue

periférico foi coletado pelo plexo orbital para a produção das distensões

sanguíneas. Depois de secas, as lâminas foram coradas com a coloração

panótica para análise em microscopia de luz. Para cada animal, três distensões

foram preparadas e um mínimo de 2.000 eritrócitos foram contados para

determinação da frequência de eritrócitos micronucleados. Os resultados

obtidos foram expressos como média ± erro padrão da média (e.p.m.) e

analisados empregando-se o teste de análise de variância (ANOVA) one-way

seguido do teste de Bonferroni (para variáveis paramétricas). Os resultados

foram considerados significativos quando p < 0,05.

Resultados:

O tratamento dos animais com as doses 25 (2,59 ± 0,19), 150 (3,27 ± 0,99) e

300 (2,95 ± 0,56) mg/kg do T-360 (i.p.) não induziu aumento na frequência de

eritrócitos micronuclados no sangue periférico quando comparados ao grupo

controle (2,92 ± 0,43).

Conclusão:

O T-360 não foi capaz de provocar lesões cromossômicas, não apresentando

ações clastogênicas nem aneugênicas. Dessa forma, o T-360 se mostra como

uma droga de baixa toxicidade, contribuindo para sua aplicabilidade

farmacológica.

Apoio Financeiro:

CNPq

Gerado em: 2014-5-22 10:09:43

10.078 - AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTILEUCÊMICA DO

COMPOSTO SINTÉTICO DNT 18

Dantas, B. B. , Coulidiati, T. H. , Faheina-martins, G. V. , Peixoto, R. F. ,

Vasconcellos, M. L. A. , Silva, F. P. L. , Araujo, D. A. M. ,

Departamento de Biotecnologia - UFPB Departamento de Química -

UFPB

Introdução:

O câncer tornou-se uma das principais causas de morte do mundo. Em

paralelo ao avanço dessa patologia, houve um avanço na química medicinal

que permite a síntese de uma variedade de compostos, favorecendo a busca

por novas estruturas com rico potencial terapêutico. A síntese de derivados do

núcleo tetraidropirano (DNT) vem recebendo atenção, considerando a ampla

atividade biológica dessas estruturas já descritas, tais como, efeito antibiótico,

analgésico e antitumoral.

Objetivos:

O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito antileucêmico do composto inédito

DNT 18.

Métodos:

Protocolo de aprovação pelo CEP/HULW nº 655/10, folha de rosto n° 378119

Após o tratamento com o composto DNT 18 (3-100 µM) por 24 e 72h, a

viabilidade celular de células leucêmicas (K562, HL-60 e cultura primária de

células humanas de leucemia mieloide crônica), bem como de células não-

cancerígenas (L929 e células mononucleares de sangue humano periférico) foi

analisada pelo ensaio de redução do MTT e de captação de vermelho neutro

(CNV). Em seguida, avaliou-se, por citometria de fluxo, a capacidade do

composto DNT 18 (2,5-13 µM) induzir alterações moleculares associadas a

características de morte celular, nas linhagens HL-60 e K562.

Resultados:

O composto DNT 18 induziu um potente efeito citotóxico de forma não

seletiva e dose-dependente. Para a linhagem HL-60, os valores de CI50 foram

12,54 ± 4,5 e 14,94 ± 5,4 µM respectivamente, para os tempos de 24 e 72h e

para a linhagem K562, os valores de CI50 foram 8,97 ± 4,1 e 29,07 ± 4,9 µM;

respectivamente, para os tempos de 24 e 72h. Na linhagem de leucemia

mieloide aguda (HL-60), este composto induziu fragmentação do DNA

(30%), despolarização do potencial transmembrânico mitocondrial (15%), não

estimulou a produção de espécies reativas de oxigênio e desencadeou

externalização da fosfatidilserina associada a danos na membrana plasmática

(14%). Na linhagem de leucêmia mieloide crônica (K562), o composto

induziu fragmentação do DNA (10%) e parada do ciclo celular na fase G1

(15%), mas não foi capaz de alterar as demais características analisadas.

Conclusão:

O composto DNT 18 possui um potente efeito citotóxico, desencadeando

morte celular por apoptose na linhagem HL-60 e efeito citostático na

linhagem K562.

Apoio Financeiro:

CNPq e CAPES

Gerado em: 2014-5-22 10:09:43

10.079 - ESTUDOS PRELIMINARES DO EFEITO

VASORRELAXANTE DO LIOFILIZADO DO SUCO DA Syzygium

jambolanum (Lam) EM RATOS

Assis, K. S. , Goncalves, I. G. A. , Azevedo, F. L. A. A. , Almeida, M. M. ,

Silva, T. A. F. , Maciel, P. M. P. , Assis, V. L. , Machado, N. T. ,

Fernandes, L. F. , Medeiros, I. A. ,

Ciências Farmacêuticas - UFPB

Introdução:

Vários estudos epidemiológicos têm sugerido uma associação entre dietas

ricas em polifenóis e menor risco de doenças cardiovasculares.

Objetivos:

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos cardiovasculares induzidos pelo

liofilizado do suco da fruta Syzygium jambolanum (Lam) (LSFSJ).

Métodos:

Comissão de ética no uso de animal; nº 1405/13. Foram utilizadas abordagens

in vivo (medida direta da pressão arterial e frequência cardíaca de ratos não

anestesiados) e in vitro (medida da tensão isométrica em anéis de artéria

mesentérica superior) utilizando ratos Wistar (12 a 14 semanas, 250 - 300 g).

Foi realizada a análise fitoquímica do LSFSJ para a determinação de taninos,

saponinas, esteroides, alcaloides e flavonoides.

Resultados:

O LSFSJ apresentou alto teor de polifenóis (988,55 ± 5,41 mg de ác. Gal/100

g) e presença de esteroides e flavonoides. O LSFSJ (10; 30 e 50 mg/kg,

intravenoso) induziu hipotensão seguida de taquicardia. Em anéis de artéria

mesentérica superior pré-contraídos com fenilefrina (FEN) (1 μM), o LSFSJ

(10 - 10000 µg/mL) induziu relaxamento dependente de concentração na

presença e ausência do endotélio funcional, sem diferença significativa no

efeito máximo (Emáx = 110,72 ± 3,30 % e 115,79 ± 2,88 %, respectivamente)

e na concentração da substância que induz 50% de seu Emáx (CE50 =

1183,94 ± 149,40 µg/mL e 1694,55 ± 242,16 µg/mL; n = 7 e 6,

respectivamente), sugerindo que a resposta induzida pelo LSFSJ parece ser

independente dos fatores liberados pelo endotélio vascular. Para investigar o

envolvimento dos canais para potássio utilizou-se solução de tyrode com 20

mM de KCl (KCl 20) ou Cloreto tetraetilamônio (TEA) (1, 3 ou 5 mM). A

resposta induzida pelo LSFSJ foi significativamente atenuada na contração

induzida por KCl 20 (Emáx = 103,72 ± 2,66 %; CE50 = 2864,80 ± 341,95

µg/mL; n = 5) e na presença de TEA nas concentrações de 1 mM (Emáx =

80,29 ± 10,03 %; n = 6); 3 mM (Emáx = 59,30 ± 4,55 %; n = 8) e 5 mM

(Emáx = 11,36 ± 2,95 %; n = 7). Para investigar os subtipos de canais para

potássio envolvidos na resposta foram utilizados: 4-aminopiridina, bloqueador

seletivo dos canais para K+ dependentes de voltagem (KV), glibenclamida (10

µM), bloqueador seletivo dos canais para K+ sensíveis ao ATP (KATP),

BaCl2 (30 µM), bloqueador seletivo dos canais para K+ retificadores de

entrada (KIR) e iberiotoxina (100 nM), bloqueador seletivo dos canais de K+

de grande condutância ativados por cálcio (BKCa). A resposta induzida pelo

LSFSJ foi significativamente atenuada na presença de 4-aminopiridina (Emáx

= 34,26 ± 7,35 %; n = 5) ou glibenclamida (Emáx = 87,71 ± 2,96 %; n = 7).

Na presença de BaCl2 (CE50 = 2953,71 ± 457,20 µg/mL; n = 7) ou

iberiotoxina (CE50 = 2318,16 ± 138,31 µg/mL; n = 6) teve sua potência

significativamente reduzida. Na contração induzida por solução despolarizante

de tyrode com 60 mM de KCl ou por ácido 3-piridinacarboxilico-1,4-diidro-

2,6-dimetil-5-nitro-4-[2-(trifluorometil)fenil]-metil ester (S(-) Bay K8644)

(100 nM), ativador de canais para cálcio sensíveis à voltagem do tipo L (CaV

1.2), a resposta induzida pelo LSFSJ foi significativamente menor (Emáx =

38,43 ± 3,65 e 31,83 ± 16,01 %, respectivamente, n = 6 ) do que aquela

observada nas contrações induzidas por FEN.

Conclusão:

Estes resultados sugerem que o LSFSJ induz hipotensão e vasorrelaxamento,

por mecanismo não totalmente esclarecido que leva à ativação de canais Kv,

KATP, KIR e BKCa. Estudos adicionais são necessários para esclarecer o

mecanismo envolvido na resposta do LSFSJ.

Apoio Financeiro:

CNPq e CAPES.

Gerado em: 2014-5-22 10:09:43

10.080 - AVALIAÇÃO DO EFEITO DA PECTINA PRESENTE NA

FARINHA DA CASCA DO MARACUJÁ AMARELO (PASSIFLORA

EDULIS F. FLAVICARPA DEG.) SOBRE O CONTROLE DO

DIABETES MELLITUS TIPO 2

Queiroz, M. S. R. , Janebro, D. I. , Santos, S. C. ,

BIOTECNOLOGIA - RENORBIO FARMÁCIA - UFPB

Introdução:

As fibras alimentares podem ser classificadas por duas propriedades de

solubilidade em água sendo denominada fibra solúvel e fibra insolúvel. As

solúveis formam misturas de consistência viscosa (presença de géis), sendo

estas compostas por pectinas, gomas, mucilagens, algumas hemiceluloses e

polissacarídeos modificados. À pectina é atribuído o efeito de retardar o

esvaziamento gástrico e diminuir o incremento da área sob a curva de

tolerância à glicose contribuindo assim para o controle da glicose pós

prandial.

Objetivos:

Avaliar o efeito da pectina presente na farinha da casca do maracujá amarelo

(Passiflora edulis f. flavicarpa Deg.) no controle do Diabetes Mellitus tipo 2

(DMT2).

Métodos:

A pesquisa foi aprovada pelo Comitê de Ética em Pesquisa (CEP) da

Universidade Estadual da Paraíba (nº 0146.0.133.000-07) e tratou-se de um

ensaio clínico fase II transversal e intervencionista realizado em usuários do

Programa de Hipertensão e Diabetes Mellitus da Prefeitura Municipal de

Campina Grande. A seleção seguiu critérios da American Diabetic

Association, sendo incluídas 60 pessoas (36 mulheres e 24 homens), com

idade entre 57 e 73 anos. Destes 43 voluntários permaneceram até o final do

experimento, cada um deles serviu como seu próprio controle. O estudo foi

realizado antes (T0), durante T30 a T60 dias e após (três meses) da

suplementação diária de 30g farinha da casca do maracujá amarelo (Passiflora

edulis f. flavicarpa Deg.). Os parâmetros avaliados foram: glicemia de jejum,

insulina, índice HOMA, hemoglobina glicada (HbA1c) e frações lipídicas. A

análise estatística descritiva dos dados foi realizada utilizando-se os

programas Epi-Info, nas versões 6.04 e 3.4 e SPSS versão 14, aplicando-se o

teste t de Student pareado. Para todos os testes estatísticos realizados

considerou-se o intervalo de confiança de 95%, nível de significância 5% (p ≤

0,05) e os resultados foram relatados como Média ± DP.

Resultados:

Com relação à glicemia de jejum, observou-se uma diminuição

estatisticamente significante (p = 0,000) após a suplementação. Esta redução

foi observada nas primeiras quatro semanas do estudo (p = 0,000). A HbA1c

também apresentou diferença (p = 0,032), acompanhando a redução nos

valores médios da glicemia em jejum. Quanto aos teores de colesterol total e

LDL-c através do teste t para amostras independentes, aos 30 e 60 dias do

ensaio clínico, não foi verificado diferença estatística significante. Enquanto,

que ao ser comparado os valores médios basais dos triglicerídeos (TG)

(211,98 ± 119,31), observou-se redução dessa variável, após o término do

estudo (161,21 ± 91,09). Na avaliação do índice HOMA RI, foi visto que,

mesmo após a suplementação, os valores de insulina se mantiveram

constantes (p > 0,05) enquanto HOMA RI mostrou níveis reduzidos com

diferença significativa (p = 0,005) aos 60 dias do estudo. O HOMA Beta

apresentou médias mais elevadas durante todo o ensaio com valores de p =

0,001 e p = 0,000, respectivamente.

Conclusão:

A ingestão da pectina através do consumo diário da farinha da casca do

maracujá amarelo (Passiflora edulis f. flavicarpa Deg.), ou de outro alimento

rico neste tipo de fibra sugere efeito favorável na sensibilidade à insulina e no

controle de lipídeos. Diante dos resultados obtidos é um desafio elaborar

produtos funcionais com propriedade de saúde capazes de contribuir para o

tratamento do DMT2 consequentemente das Doenças Cardiovasculares.

Apoio Financeiro:

Gerado em: 2014-5-22 10:09:43

10.081 - AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE DO EXTRATO ETANÓLICO

BRUTO DAS CASCAS DE Cnidoscolus quercifolius Pohl.

(EUPHORBIACEAE) EM CAMUNDONGOS COM METÁSTASES DE

SARCOMA-180.

Silva, M. G. , Lavor, E. M. , Santos, O. G. N., Cavalcanti, I. M. L. ,

Oliveira, V. R. , Almeida, J. R. G. S. , Mendes, R. L. ,

Colegiado de Ciências Farmacêuticas - UNIVASF

Introdução:

Câncer pode ser entendido como uma condição anormal dos processos

homeostáticos relacionados à proliferação, diferenciação, quiescência celular

e apoptose. A capacidade da célula cancerosa de se transportar para outros

locais e originar um tumor secundário chama-se metástase, que é tida como

mal prognóstico. Nessa perspectiva, vários agentes naturais e sintéticos que

possuem propriedades antitumorais são propostos para redução ou inibição do

crescimento tumoral. Devido à presença de compostos bioativos, vários

produtos naturais têm demonstrado efeito antitumoral, revelando-se assim,

como uma importante alternativa terapêutica.

Objetivos:

Investigar o efeito do extrato etanólico bruto de Cnidoscolus quercifolius

(EEB-Cq) em camundongos com metástases de Sarcoma-180.

Métodos:

nº 0012/040713 Utilizou-se 25 camundongos fêmeas da espécie Mus

musculus, com 6 semanas de idade e peso entre 25 e 30 gramas, divididos em

cinco grupos experimentais: Grupo 1: Controle normal - recebeu apenas o

veículo; Grupo 2: Controle negativo - recebeu o veículo durante os sete dias

posteriores a inoculação do tumor; Os grupos 3,4 e 5 foram tratados

respectivamente com as doses de 100, 200 e 400mg/kg do EEB-Cq 24h após a

indução das metástases, durante 7 dias. Durante os dias de tratamento, os

animais foram pesados diariamente, assim como a água e a ração consumida

nos grupos. No oitavo dia, os animais foram anestesiados, o sangue foi

recolhido e processado para contagem da série leucocitária. Órgãos como o

coração, pâncreas, estômago, baço, fígado, pulmão e os rins foram retirados e

pesados, processados para análise histopatológica. Os dados foram plotados

no programa estatístico GraphPad Prism® 5, pelo teste ANOVA seguidos por

teste t de student, considerando as diferenças significativas quando p<0,05.

Resultados:

A partir do estudo observou-se macroscopicamente a presença de metástases

pulmonares nos animais submetidos a inoculação. A partir da avaliação

ponderal notou-se que não houve redução estatisticamente significativa dos

pesos dos animais assim como do consumo de água e ração de todos os grupos

tratados. Considerando os valores de media ± e.p.m dos parâmetros

hematológicos observou-se um aumento de linfócitos (95.00 ± 0.7071) e

neutrófilos (4.000 ± 0.7071) nos grupos 2 e 5 se comparados com o controle

normal respectivamente (90.40 ± 1.077 e 9.600 ± 1.077). As análises

demonstraram ainda um aumento de monócitos (4.000 ± 1.354) no grupo

tratado coma dose de 100 mg/Kg quando comparado ao grupo controle

negativo (1.000 ± 0.3162).

Conclusão:

A partir das análises realizadas pode-se observar que o tratamento não

interferiu na avaliação ponderal dos animais. A contagem diferencial revelou

presença de células leucocitárias, majoritariamente de linfócitos, nos grupos

tratados, o que se pode alvitrar que o extrato pode agir de modo a estimular ou

potencializar a ação das células de defesa contra o tumor metastático.

Apoio Financeiro:

CNPq, UNIVASF.

Gerado em: 2014-5-22 10:09:43

10.082 - DESENVOLVIMENTO DE FILTRO SOLAR ORGÂNICO A

PARTIR DO ÁCIDO SULFANÍLICO Santos, M. C. S.1; Santos, V. L.

A.1; Gonsalves, A. A.1; Araújo, C. R. M.1. 1- Colegiado de Ciências

Farmacêuticas, UNIVASF, Petrolina-PE.

Santos, M. C. S. , Gonsalves, A. A. , Anjos, V. L. S. , Araújo, C. R. M. ,

Colegiado de Ciências Farmacêuticas - UNIVASF

Introdução:

A neoplasia de pele é tratada no Brasil pelo Ministério da Saúde (MS) como

um problema de saúde pública, em razão do elevado número de casos deste

tipo de câncer no país. Dentre os fatores de riscos que estão associados ao

câncer de pele, a Radiação Ultravioleta (RUV) é considerada o principal,

diante disto, o uso diário de protetor solar (PS) é recomendo como medida de

prevenção. Os PSs são qualquer preparação cosmética designada ao uso

tópico na pele humana com finalidade principal ou exclusiva de proteger

contra a RUV. Sendo os filtros solares (FS) os constituintes dos PSs que

podem refletir, dispersar ou absorver a radiação UVA e UVB, as mais nocivas

a pele humana. De acordo com a RDC nº 47 de 16 de março de 2006 da

ANVISA há apenas 38 FS que podem fazer parte das formulações

fotoprotetoras. Ao observar a estrutura molecular dos fotoprotetores orgânicos

é possível notar que se trata de compostos com um ou dois anéis aromáticos

substituídos ou não. Diante disso, o presente projeto propõe a síntese do ácido

2-hidroxi-5-((4-sulfofenil)diazenil)benzóico (1), um diazo aromático, que

apresenta substituintes comuns aos fotoprotetores orgânicos, e em seguida,

será avaliada a sua capacidade fotoprotetora in vitro.

Objetivos:

O presente trabalho pretende sintetizar o ácido 2-hidroxi-5-((4-

sulfofenil)diazenil)benzóico (1) e em seguida, determina o se Fator de

Proteção Solar UVB (FPS-UVB) in vitro.

Métodos:

Os tesfes de fotoproteção foram realizados in vitro. O ácido 2-hidroxi-5-((4-

sulfofenil)diazenil)benzóico (1) foi obtido através do azoacoplamento entre

sal de diazônio do ácido sulfanílico e o ácido salicílico, em meio básico. Em

seguida, o seu FPS-UVB foi determinado utilizando o método

espectrofotométrico in vitro desenvolvido por Mansur e colaboradores (An.

Bras. Dermatol., 61, 167, 1986). Inicialmente foram preparadas soluções

etanólicas de (1) nas concentrações de 0,5 e 0,3 mmol/L. As soluções tiveram

suas absorbâncias determinadas na faixa de 260 a 400 nm, com intervalos de 5

nm, sendo usado etanol absoluto como branco. Cada experimento foi

realizado em triplicata, e por fim, o FPS-UVB foi determinado empregando-se

a seguinte equação: FPS = FC • S 290320 EE(l) • I(l) • Abs(l).

Resultados:

O ácido 2-hidroxi-5-((4-sulfofenil)diazenil)benzóico foi obtido da reação de

acoplamento azo entre o ácido sulfanílico e o ácido salicílico com 60% de

rendimento. O produto da reação (1) apresentou melhor absorção na região do

UVB (290-320 nm) do que na região UVA (320-400 nm). O FPS-UVB do

azocomposto (1) nas concentrações de 0,5 e 0,3 mmol/L foram 27,97±0,71 e

14,28±0,87, respectivamente, valores superiores ao determinado pela

ANVISA (FPS de 6,0).

Conclusão:

O ácido 2-hidroxi-5-((4-sulfofenil)diazenil)benzóico foi sintetizado e o

mesmo se mostrou uma molécula promissora, visto que, o FPS-UVB exibido

nas concentrações de 0,5 e 0,3 mmol/L estão acima do mínimo aceitável pela

ANVISA.

Apoio Financeiro:

: UNIVASF e CNPq.

Gerado em: 2014-5-22 10:09:43

10.083 - Efeito cardiodepressor do β-citronelol em preparações atriais

isoladas de ratos

Veras, H. R. F. , Nobrega, F. C. , De Siqueira, R. J. B. , Magalhaes, P. J.

C. ,

Departamento de Fisiologia e Farmacologia - UFC

Introdução:

β-Citronelol (BCT), monoterpeno acíclico, é encontrado no óleo de citronela,

termo que denomina óleo essencial obtido de espécies de plantas aromáticas

do gênero Cymbopogon, várias delas utilizadas na medicina popular como

anti-hipertensivas. BCT produz efeito hipotensor quando administrado a ratos

normotensos, porém o possível envolvimento cardíaco nesse efeito ainda não

foi esclarecido.

Objetivos:

Avaliar em preparações atriais isoladas se BCT produz efeito cardíaco direto.

Métodos:

28/2012 Após eutanásia, o átrio esquerdo ou direito de ratos Wistar foi

rapidamente dissecado e isolado em placa contendo solução Krebs-Henseilet

resfriada (4 ºC). Cada átrio foi acomodado em câmara preenchida com

solução de Krebs-Henseilet (pH 7,4, 37ºC, aerado continuamente com 5%

CO2/95% O2). Ao átrio direito foi permitido o registro dos batimentos

espontâneos, enquanto que o átrio esquerdo foi estimulado eletricamente (5V;

frequência de pulso: 5 Hz; duração do pulso: 0,5 ms). Alterações na tensão

contrátil gerada pelas preparações foram registradas isometricamente

utilizando transdutor de força (ML870B60/CV, AD Instruments, Austrália)

ligado a sistema de aquisição de dados (PowerLabTM 8/30 Instruments, AD).

Foi estabelecido um período de estabilização de 30 min para todas as

preparações atriais mantidas em tensão basal de 0,5 g. Curvas concentração-

efeito cumulativas (0,1uM – 1000uM) do BCT foram construídas para

estabelecer seus efeitos nos comportamentos inotrópico (átrio esquerdo) e

cronotrópico (átrio direito) na ausência e na presença de atropina (1 ou 10

µM). Curvas concentração-efeito cumulativas de isoproterenol (0,01 nM –

100 nM) ou Ca2+ (3 – 5 mM) foram construídas em ausência e presença de

BCT (200 ou 600 µM).

Resultados:

A adição de BCT (0,1 µM – 1000 µM) causou efeito cronotrópico negativo no

átrio direito, estatisticamente significativo a partir da concentração de 100 µM

com redução máxima de 45,3 ± 18,8% da frequência cardíaca basal na maior

concentração (1000 µM) empregada (p<0,05; One Way ANOVA, teste de

Dunn; n = 6). No átrio esquerdo, BCT reduziu significativamente a amplitude

de contração a partir da concentração de 1 µM (10,7 ± 1,9%; p<0,05; one Way

ANOVA, Holm-Sidak; n = 6) e efeito máximo de 44,6 ± 5,7% da amplitude

basal na maior concentração (1000 µM). A estimulação β-adrenérgica

induzida pelo isoproterenol provocou aumento tanto da frequência (Emax de

81,1 ± 12,9%; n = 6) quanto da amplitude (Emax de 113,8 ± 16,5%, n = 6) de

contração atrial. Esses efeitos estimuladores cardíacos não foram alterados de

maneira significativa em presença de 200 µM de BCT (p > 0,05; two way

ANOVA, Holm-Sidak; n = 6). O pré-tratamento com BCT (200 µM ou 600

µM) não alterou o incremento da amplitude de contração promovido pela

elevação da concentração extracelular de Ca2+ (Emax de 49,3 ± 5,8%; n = 6)

em preparações atriais esquerdas (p > 0,05; one way ANOVA). Os efeitos

cronotrópico e inotrópico negativos induzidos pelo BCT (0,1 µM – 1000 µM)

não foram significativamente modificados (p > 0,05; two way ANOVA,

Holm-Sidak) em presença de atropina (1 e 10 µM).

Conclusão:

BCT exerce efeito cardiodepressor reduzindo a frequência e a amplitude da

atividade cardíaca atrial. Não há envolvimento de estimulação colinérgica

muscarínica ou inibição beta-adrenérgica nos efeitos cardiodepressores

induzidos pelo BCT. Além disso, o BCT não interfere no efeito inotrópico

positivo induzido pelo aumento nos níveis extracelulares de Ca2+.

Apoio Financeiro:

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq

Gerado em: 2014-5-22 11:30:09

10.084 - AÇÕES VASCULARES DE CARVACROL ENVOLVEM

MECANISMOS DE AÇÃO DISTINTOS EM ANIMAIS

NORMOTENSOS E ANIMAIS COM HIPERTENSÃO ESSENCIAL:

UM FOCO PARA OS CANAIS TRP

Reis, M. R. , Albuquerque, J. , Simoes, L. O. , Alves, Q. L. , Ferreira, J.

M. , Silva DF,

Departamento de Biorregulação - UFBA

Introdução:

Carvacrol, um monoterpeno fenólico, é um produto natural isolado de óleos

essenciais de várias plantas utilizadas na medicina alternativa e apresenta

ações previamente descritas em alguns canais TRP, do inglês “Transient

Receptor Potential”.

Objetivos:

Investigar as diferenças entre o efeito vasodilatador induzido por carvacrol em

ratos normotensos Wistar-Kyoto (WKY) e ratos espontaneamente hipertensos

(SHR), comparando o envolvimento dos canais potencial receptor transiente

(TRP) nestas respostas.

Métodos:

CEUA/UFBA nº 012/2011 Os animais WKY e SHR(machos; peso entre 250-

300g; e com 13-16 semanas de idade) foram eutanasiados de acordo com as

normas do CEUA/UFBA nº 012/2011. Ensaios in vitro foram realizados com

anéis de artéria mesentérica superior isolados (1-2mm), suspensos por linhas

de algodão para o registro das tensões isométricas em solução fisiológica de

Tyrode, a 37ºC, aerados com uma mistura de 95% de O2 e 5% de CO2 e

submetidos a uma tensão constante de 0,75g. Análises estatísticas foram feitas

utilizando teste t de Student ou análise de variância one-way (ANOVA)

seguido de teste de Bonferroni, quando apropriado.

Resultados:

Em anéis de artéria mesentérica pré-contraídos com fenilefrina (FEN, 1 uM) e

na ausência do endotélio funcional, carvacrol (10-8 – 10-3M) induziu

relaxamento dependente de concentração (pD2 = 4,64 ± 0,09; Emáx= 127,70

± 6,97 %; N=8) e este efeito não foi alterado estatisticamente quando

comparado com o efeito de carvacrol em animais SHR (pD2= 4,9 ± 0,1;

Emáx= 112,80 ± 5,39 %; N=9), sugerindo que carvacrol induz vasodilatação

independente das alterações fisiopatológicas existentes entre estes animais.

Em preparações pré-incubadas com vermelho de rutênio (10-5 M, inibidor

não-seletivo de canais TRP), a curva concentração resposta do carvacrol não

foi modificada significantemente, não havendo alteração na potência nem

eficácia de carvacrol (pD2 = 4,36 ± 0,07; Emáx= 116,93 ± 5,17%; N=7)

quando comparado ao controle na ausência do inibidor. Este resultado foi

semelhante ao observado em animais SHR, onde a presença deste inibidor

também não alterou a resposta mediada por carvacrol (pD2 = 5,17 ± 0,07;

Emáx= 115,59 ± 7,28%; N=6). Entretanto, na presença de outros inibidores de

canais TRP, os íons lantânio (10-4 M), gadolínio (10-4 M) e magnésio (2

mM), o efeito vasodilatador do monoterpeno foi alterado significantemente

em relação ao controle sem os inibidores, com mudança significante na

potência farmacológica de carvacrol (pD2 = 4,8 ± 0,1; N=5, p<0.05; pD2=

4,20 ± 0,09; N=6, p<0.01; pD2= 3,97 ± 0,07; N=7, p<0,001;

respectivamente). Estes resultados foram diferentes dos obtidos em animais

SHR, onde a presença destes inibidores não alterou a curva concentração

resposta induzida por carvacrol (pD2 = 4,8 ± 0,1; N=8; pD2 = 4,69 ± 0,10;

N=10; pD2 = 4,90 ± 0,03; N=6; respectivamente).

Conclusão:

Os efeitos vasculares induzidos por carvacrol em animais WKY

provavelmente envolvem a participação de canais TRP sensíveis aos íons

lantânio, gadolínio e magnésio, porém, estes efeitos não foram observados em

animais SHR, sugerindo que há diferenças no padrão de resposta

farmacológica do carvacrol em animais hipertensos quando comparados a

animais normotensos, o que pode ser decorrente das alterações funcionais dos

canais TRP envolvidos na fisiopatologia da hipertensão.

Apoio Financeiro:

Fundação de amparo à pesquisa do estadoda Bahia - FAPESB e CNPq.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:09

10.085 - Avaliação da atividade citotóxica in vitro de Novo Heterociclo 4-

amino-pirimidínico 2-6-Bissubstituído

Rocha, T. A. , Lira, M. A. C. , Nunes, A. B. , Falcao, E. P. S. , Silva, N. H.

,

Departamento de Bioquímica - UFPE Departamento de Biologia - UFPE

Introdução:

Os compostos Pirimidínicos apresentam uma grande variedade de atividades

biológicas descritas na literatura tais como atividade antiinflamatória,

antineoplásicas dentre outras. Em geral, compostos contendo este heterocíclo

constituído de seis membros que contém dois átomos de nitrogênio estão

largamente distribuídos na natureza, fazendo parte de estruturas químicas

fundamentais para a vida. A busca de novos compostos pirimidínicos com

relevantes propriedades biológicas e farmacológicas é a meta principal da

presente pesquisa.

Objetivos:

Este trabalho descreve a síntese e a avaliação da atividade citotóxica de um

novo composto 4-amino-2-(cloro-fenil)-6-(p-etox-fenil)-5-carbonitrila-

pirmidina.

Métodos:

Este trabalho não necessita da aprovação do comitê de ética pois não utiliza

experimentação animal ou humana O composto foi produzido a partir de

reações consecutivas, principiando com o p-etox-benzaldeído que reagiu com

malononitrila. A bisnitrila resultante reage, em metanol, a temperatura de

refluxo com a benzamidina em presença de quantidades catalíticas de

trietilamina. A reação foi acompanhada por cromatografia em camada delgada

(CCD) e o composto pirimidínico resultante foi recristalizado em metanol. A

atividade citotóxica foi determinada através do método colorimétrico do MTT

sendo utilizadas as linhagens celulares K562 (leucemia mielocitica crônica) e

HEp-2 (derivadas de tumor primário de laringe humana) sendo 105células/mL

(HEp-2) e 0,3x106células/mL (K562). O material foi distribuído em placas de

cultura com 96 poços e incubadas a 37ºC, em atmosfera úmida (5% de CO2),

durante 24h.

Resultados:

O composto pirimidínico é cristalino e estável. Sua pureza foi avaliada por

cromatografia em camada delgada (n-hexano/acetato de etila, 8:2 v/v) e

apresentou um rendimento satisfatório de 63 %. O seu ponto de fusão foi

determinado Pf= 204-207ºC, sendo sua estrutura confirmada através de

espectrometria de massas, RMN-H1, espectrometria em Infravermelho. O

composto não apresentou atividade citotóxica frente às linhagens celulares

HEp-2 e K562, apresentando uma porcentagem de inibição abaixo de 70%,

sendo assim a CI50 não foi determinada.

Conclusão:

Os dados espectrais e os ensaios de atividade citotóxica demonstraram que o

composto não apresentou toxidez nas condições de ensaio. A abordagem

sintética utilizada apresentou bons resultados e a baixa atividade citotóxica

pode indicar baixa toxidez in vivo o que é interessante para futuros ensaios

farmacológico.

Apoio Financeiro:

A Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco -

FACEPE, pelo suporte financeiro.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:09

10.086 - EFEITO PROTETOR DA N-ACETILCISTEÍNA NOS

EVENTOS INFLAMATÓRIOS E FUNCIONAIS DA

ESTEATOHEPATITE EXPERIMENTAL INDUZIDA POR

IRINOTECANO

Lopes, C. D. H. , Aragao, K. S. , Leal, R. M. L. V. , Júnior, R. C. P. L. ,

Almeida, P. R. C. , Pereira, V. B. M. , Ribeiro, R. A. ,

Serviço de Cirurgia Gastrointestinal - ICC Departamento de Fisiologia e

Farmacologia - UFC Departamento de Patologia e Medicina Legal - UFC

Introdução:

O câncer colorretal (CCR) é um dos mais comuns tumores malignos

atualmente. Na evolução natural da doença, o fígado é o principal sítio de

metástases. Regimes à base de irinotecano (IRI) têm sido utilizados no

tratamento do CCR metastático, permitindo muitas vezes a conversão de

metástases hepáticas irressecáveis em ressecáveis. Contudo, tais regimes estão

associados ao surgimento de esteatohepatite (STH) não alcoólica (NASH),

muitas vezes limitante do tratamento. A patogênese da STH por IRI ainda é

desconhecida. Recentemente, nosso grupo desenvolveu um modelo inédito de

STH induzida por IRI em camundongos no qual a participação de IL-1, iNOS

e receptor Toll-4 foi evidenciada. N-acetilcisteína (NAC) é um derivado

acetilado da L-cisteína que apresenta na sua estrutura química o grupo

sulfidrila(-SH), o qual pode reagir e neutralizar radicais livres, além de

restabelecer os protetores celulares do estresse oxidativo, como a glutationa.

NAC é utilizada na prática clínica para o tratamento da lesão hepática

induzida por paracetamol.

Objetivos:

Avaliar o efeito protetor da NAC sobre a STH induzida por IRI.

Métodos:

21/2012 Camundongos Swiss machos (25g, n=8) receberam salina (5 mL/Kg,

i.p), NAC (1000 mg/Kg, s.c), IRI (50 mg/Kg, i.p) ou NAC (10, 100 ou

1000mg/Kg)+IRI 3x/semana/7semanas. Avaliou-se a variação ponderal e a

sobrevida. Ao final do tratamento, o sangue foi coletado para dosagem sérica

de ALT e AST (U/L) e realizou-se o sacrifício dos animais para coleta do

fígado e pesagem (mg/30g de animal), análise histopatológica de acordo com

os Critérios de Kleiner para NASH(inflamação lobular[0-3],esteatose[0-3] e

vacuolização[0-3]), mensuração da atividade da citocina Interleucina-1 (IL-

1β, pg/mL), e ensaio imunoistoquímico (IMQ) para IL-1β e Óxido Nítrico

Sintase induzida (iNOS). Na análise estatística utilizou-se ANOVA/Student

Newman Keul ou Kruskal Wallis/Dunn. Um nível de significância menor que

5% foi aceito (p<0,05). (CEPA 21/12).

Resultados:

O IRI induziu uma significativa (p<0,05) redução de sobrevida (44%), um

marcante aumento das concentrações séricas de ALT (48,99±13,4), AST

(90,55±19,7), da citocina IL1-β (288,5±35,86), do peso do fígado

(1814±159,3) e aumento dos escores de Kleiner [5,5 (4 - 7)] vs o grupo salina

(sobrevida: 100%; ALT: 17,31±5,2; AST: 44,58±5,4; citocina IL1-β

(104±36,9); peso hepático: 1425±39,5; Kleiner: 0(0-0). Tais alterações, foram

prevenidas (p<0,05) pelo tratamento com NAC. NAC aumentou a sobrevida

de animais injetados com IRI (10 mg/kg: 90%; 100 mg/kg: 80%). NAC 10

mg/Kg preveniu a elevação das enzimas ALT: 26,95±7 e AST: 56,42±4,8;

NAC (10mg/Kg e 1000mg/Kg) inibiram o aumento da citocina IL-1 em

(152±23,92 e 149±17,21, respectivamente); NAC (10mg/Kg e 100mg/Kg)

reverteram o aumento do peso hepático (1375±68,2 e 1467±28,6,

respectivamente) e NAC 10mg/Kg reverteu o aumento dos escores de Kleiner:

2[1-4]) vs o grupo IRI. Na IMQ do grupo IRI, observou-se um significativo

aumento da imunomarcação para IL-1(3[1-3]), iNOS(3[3-3]) quando

comparado ao grupo salina (IL-1: 0[0-1]; iNOS: 1[1-2]; NAC na dose de

10mg/Kg previne o aumento da imunomarcação (IL-1: 1[1-1]; iNOS: 2[1-2]

vs o grupo IRI.

Conclusão:

NAC na dose de 10mg/kg previne as alterações dos parâmetros clínicos,

histopatológicos, bioquímicos e inflamatórios no modelo de NASH induzida

por IRI. Estudos adicionais estão sendo realizados para identificar os

mecanismos envolvidos nessa proteção.

Apoio Financeiro:

CNPq, CAPES, FUNCAP.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:09

10.087 - EFEITO DO ÁCIDO ÚSNICO PURIFICADO DE Cladonia

substellata (AHTI) SOBRE O DESENVOLVIMENTO EMBRIONÁRIO

EM FÊMEAS WISTAR.

Silva, C. R. , Oliveira, A. P. , Rocha, A. C. , Ferreira, D. K. S. , Aguiar, G.

M. , Sena, N. S. , Santos, K. R. P. , Santos, N. P. S. , Barroso, . M. C. M. ,

Silva, N. H. ,

Departamento de Bioquímica - UFPE Departamento de Biotecnologia e

Fármacos - UFPE

Introdução:

Diversas propriedades são relatadas para o ácido úsnico (USN), como:

antiviral, antimicrobiana, antiinflamatória, antitumoral, antioxidante e

cicatrizante. Quando comparado às pesquisas científicas relacionadas à

toxicidade as publicações de artigos científicos não acompanharam o ritmo de

pesquisas como a de atividades biológicas, com isso não elucidando o

potencial tóxico que esses produtos podem desenvolver no organismo. De

acordo com a ANVISA, ensaios pré-clínicos sobre o ciclo reprodutivo são

necessários para novas moléculas, pois determina situações que pode

ocasionar potenciais riscos para a reprodução humana de ordem maior, menor

ou igual a aquelas visualizadas em modelos experimentais.

Objetivos:

Esse estudo teve o objetivo de investigar o potencial toxicológico do (USN)

purificado e isolado de C. substellata (ATHI) em ratas Wistar no período da

organogênese.

Métodos:

nº 23076.029828/2013-94 Os protocolos experimentais foram aprovados pelo

Comitê de Ética da UFPE (nº 23076.029828/2013-94). Foram utilizados 27

ratos com 90 dias e pesando 300 g. 18 fêmeas foram submetidas ao estudo do

ciclo estral no intuito de se determinar o período fértil. Em seguida foram

pareadas com 9 machos (2:1), após a confirmação da gestação, foram

distribuídas aleatoriamente nos grupos controle (n=6), tratado I (n=6) e tratado

II (n=6). As do grupo controle receberam solução fisiológica e as dos grupos

tratados receberam o (USN) purificado nas doses de 15 e 25mg/kg,

respectivamente. Ao 20° dia as fêmeas foram sacrificadas por overdose de

anestésico Urethame (1,25g/kg). O peso dos fetos e suas placentas foram

mensurados. As implantações foram identificadas por Lugol.

Resultados:

Nas fêmeas tratadas com o (USN) purificado nas doses de 25 e 15mg/kg o

número de reabsorções foi maior 5±1,0 e 3,5±0,5, respectivamente quando

comparado com o grupo controle 1,1±0,4. Foi observada uma redução no

número de feto viáveis 8±1,4 e 10±1,0 nas fêmeas tratadas com o (USN)

purificado nas doses de 25 e 15mg/kg, respectivamente quando comparado

com o grupo controle 12± 0,51 e redução no peso corporal dos fetos onde o

controle apresentou 5,7± 0,3 e 3,5±0,1 e 4,1±0,1 para os tratamentos com 25 e

15mg/kg, respectivamente. Na dose de 25mg/kg os fetos apresentaram

alterações morfológicas como exposição do globo ocular, presença de uma

massa celular na região superior do feto e atrofia dos membros superiores e

inferiores, essas alterações não foram observadas na dose de 15mg/kg.

Conclusão:

O modelo experimental utilizado no presente estudo demonstrou que o

composto apresentou toxicidade no período da organogênese onde a dose mais

tóxica foi a de 25mg/kg. A dose de 15mg/kg é uma candidata a novos

experimentos. Estes estudos revelam a importância de se avaliar os efeitos

tóxicos de substâncias naturais a fim de elucidar os cuidados na sua utilização

ou indicação com potencial fármaco.

Apoio Financeiro:

FACEPE

Gerado em: 2014-5-22 11:30:09

10.088 - EFEITO DA LECTINA DE TESTA DE Punica granatum L. NO

CRESCIMENTO E SOBREVIVÊNCIA DE ESPÉCIES DE Candida

Silva, P. M. , Barros, L. C. P. B. , Gomes, F. S. , Paiva, P. M. G. ,

Departamento de Bioquímica - UFPE

Introdução:

Lectinas são proteínas hemaglutinantes que ligam carboidratos livres ou

imobilizados na superfície celular. A interação das lectinas a carboidratos e

glicoconjugados presentes na parede celular de fungos pode promover efeitos

deletérios no crescimento e sobrevivência dos mesmos. A romãzeira (Punica

granatum L.) é uma espécie frutífera pertencente à família Lythraceae que é

bastante utilizada pela medicina popular contra diversos tipos de infecções

que acometem a cavidade oral. Espécies do gênero Candida são

frequentemente encontradas na cavidade bucal e a busca por novos agentes

anti-Candida tem crescido devido ao desenvolvimento de resistência aos

agentes antifúngicos atualmente utilizados.

Objetivos:

Avaliar o efeito da lectina isolada da testa de P. granatum (PgTeL) contra

Candida albicans, C. krusei, C. parapsilosis, C. pelliculosa e C. tropicalis.

Métodos:

O experimento não envolveu testes com animais e humanos. Sementes de

romã foram passadas em peneira de plástico e a testa (90 mL) foi misturada a

NaCl 0,15 M (10 mL). O extrato salino da testa foi tratado com sulfato de

amônio (30% de saturação) e a fração sobrenadante 30% (FS30%) foi

submetida à coluna cromatográfica de quitina equilibrada com NaCl 0,15 M.

PgTeL foi eluída com ácido acético 1,0 M e dialisada contra água destilada e

NaCl 0,15 M. PgteL foi avaliada quanto a dosagem protéica e atividade

hemaglutinante (AH) bem como foram definidas as concentrações mínima

inibitória (CMI, concentração que inibiu em 50% ou mais o crescimento) e

mínima fungicida (CMF, menor concentração que causa morte do fungo).

Resultados:

PgTeL (AH específica: 19.430; 3,5 mg de proteína; fator de purificação:

1.061) foi agente fungistático e fungicida contra C. albicans (CMI e CMF de

22 µg/mL) e C. parapsilosis (CMI 9 µg/mL e CMF de 75 µg/mL). PgTeL não

apresentou atividade antifúngica contra C. krusei, C. pelliculosa e C.

tropicalis.

Conclusão:

A lectina da testa de P.granatum (PgTeL), isolada por cromatografia em

coluna de quitina em quantidades miligramas, foi agente fungicida contra duas

espécies de Candida. Os valores de CMI de PgteL (9 e 22 µg/mL) indicam

potencial para uso como antifúngico, uma vez que são menores que os valores

considerados de relevância clínica (entre 64 e 100 µg/mL).

Apoio Financeiro:

CAPES, CNPq, FACEPE e MCTI.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:09

10.089 - AVALIAÇÃO GENOTÓXICA DE ÓLEOS ESSENCIAIS DE

SACATINGA (Croton argyrophylloides Mull. Arg.) PELO TESTE DE

MUTAÇÃO E RECOMBINAÇÃO SOMÁTICA.

Alves, M. V. , Cardoso, M. N. , Valadares, B. L. B. ,

Departamento de Biologia - UFS

Introdução:

Estudos etnobotânicos realizados em regiões da caatinga revelam diversas

aplicações de Croton argyrophylloides Mull. Arg. no tratamento de várias

doenças, entre elas disfunções do sistema respiratório, diabetes, distúrbios do

trato gastrintestinal e infecções fúngicas.

Objetivos:

Devido a sua ampla utilização e ausência de estudos relacionados a possíveis

efeitos genotóxicos, o objetivo desse trabalho foi verificar a presença de tais

efeitos.

Métodos:

Como disposto na a Lei nº 11.794, de 2008, define-se ‘Animal: qualquer

vertebrado vivo não humano, das espécies classificadas no filo Chordata,

subfilo Vertebrata’. De acordo com o disposto, o presente trabalho não

necessita da autorização e/ou quaisquer documentação do Comitê de Ética. A

avaliação de genotoxicidade foi realizada através do Teste para Detecção de

Mutação e Recombinação Somática (SMART) de asas de Drosophila

melanogaster, no qual larvas de terceiro estágio resultantes dos cruzamentos

padrão (ST) e de alta bioativação metabólica (HB) foram tratadas com

diferentes concentrações (0,5; 0,125; 0,03125 mg/mL) do óleo essencial

diluído de C. argyrophylloides. Os cruzamentos ST e HB foram realizados

simultaneamente, de modo que posteriormente, as larvas obtidas de ambos os

cruzamentos fossem tratadas sob idênticas condições.

Resultados:

Os resultados obtidos com os dois diferentes cruzamentos foram bastante

similares, e em ambos não foram observados efeitos mutagênicos ou

recombinogênicos. Sob as condições experimentais, o SMART de asas de D.

melanogaster não detectou efeitos genotóxicos por parte dos compostos

presentes no óleo essencial de sacatinga, mesmo metabolizado pelas enzimas

do citocromo P450.

Conclusão:

A partir dos resultados obtidos, juntamente com suas diversas propriedades

descritas na literatura, nota-se que esse composto apresenta diversos fatores

favoráveis ao desenvolvimento de novos fármacos, necessitando de mais

estudos específicos, incluindo uma possível atividade anti-genotóxica.

Apoio Financeiro:

Gerado em: 2014-5-22 11:30:09

10.090 - Efeito vasorrelaxante do extrato e frações da casca do caule de

Platonia insignis Mart. em aorta isolada de rato

Carvalho, E. F. , Martins, H. B. , Silva, N. C. B. , Costa, I. C. G. , Chaves,

M. H. , Santos, R. F. , Oliveira, A. P. , Oliveira, R. C. M. ,

Núcleo de Pesquisa em Plantas Medicinais - UFPI Departamento de

Química - UFPI

Introdução:

Platonia insignis Mart. (Clusiaceae), conhecida como bacurizeiro é uma

espécie arbórea da região Norte e Nordeste, utilizada na alimentação e como

medicinal. Estudos relatam que a espécie possui diferentes fitoquímicos,

muitos dos quais possuem propriedades antioxidantes (Food Res. Intern. 44:

2072, 2011).

Objetivos:

Investigar o efeito vasorrelaxante do extrato e frações da casca do caule de P.

insignis Mart. em aorta isolada de rato.

Métodos:

008/2012 Os protocolos foram aprovados pelo Comitê de Ética em

Experimentação Animal da UFPI (008/12). Ratos Wistar (250-350 g),

machos, com 8 a 12 semanas de idade, mantidos em ciclo claro-escuro de 12

horas, temperatura de 24 ± 1º C e livre acesso à alimentação e água. Após

eutanásia (100 mg/kg, i.p. de tiopental sódico), a artéria aorta torácica foi

seccionada em anéis (2-3 mm) livres de tecido conectivo e adiposo, que foram

incubados a 37° C em solução de Krebs Normal (pH 7,4) aerados com

carbogênio (95% O2, 5% CO2), suspensos por linhas de algodão e fixados a

transdutores de força acoplados a um sistema de aquisição (AQCAD/AVS

Projetos), para registro das tensões isométricas. As preparações foram

estabilizadas por 60 min, sob tensão de repouso de 1 g. Renovou-se a solução

nutritiva a cada 15 min, para prevenir a interferência de metabólitos. Após

estabilização (1,0 gf, 1h), verificou-se a integridade do endotélio vascular,

pela adição de acetilcolina (10-6 M) sobre contração com fenilefrina (10-6

M), considerando sua ausência (E-) em relaxamento inferior a 10% e sua

presença (E+) quando deste superior a 50%. Durante a fase tônica de uma

segunda resposta ao agonista, o extrato etanólico (Pi-EtOH) e frações aquosa

(Pi-AQ) e acetato de etila (Pi-AcOEt) de P. insignis Mart. foram adicionados

cumulativamente à cuba (0,1 a 1000 µg/mL). O relaxamento foi expresso

como a percentagem reversa da contração induzida por fenilefrina. Para

comparações entre médias, foi usado o teste t de Student não-pareado,

considerando significantes valores de *p<0,05 e **p<0,001(GraphPad Prism,

5.03).

Resultados:

O extrato Pi-EtOH apresentou efeito vasorrelaxante dependente de endotélio

e de concentração em anéis de aorta pré-contraídos com fenilefrina 10-6 M

(E+: pD2 = 4,69 ± 0,47, n=4; E-: pD2 = 3,05 ± 0,07*, n=3;), sem atingir o

efeito máximo. A fração Pi-AcOEt apresentou efeito vasorrelaxante

dependente de endotélio e de concentração em anéis aórticos pré-contraídos

por fenilefrina 10-6 M (E+: pD2 = 2,68 ± 0,07, n=4; E-: pD2 = 4,66 ± 0,82**,

n=3;). A fração Pi-AQ não apresentou efeito vasorrelaxante em anéis de aorta

pré-contraídas por fenilefrina 10-6 M (n=6).

Conclusão:

Os resultados obtidos indicam o que o extrato Pi-EtOH e a fração Pi-AcOEt

apresentaram efeito vasorrelaxante dependente de endotélio sobre contrações

induzidas por fenilefrina (10-6 M) em anéis de artéria aorta torácica isolada de

ratos sugerindo que a casca do caule da espécie objeto de estudo têm

metabólitos especiais, responsáveis pelo efeito evidenciado.

Apoio Financeiro:

CAPES;FAPEPI;CNPq

Gerado em: 2014-5-22 11:30:09

10.091 - SÍNTESE DE AZOCOMPOSTO DERIVADO DO ÁCIDO

SALICÍLICO E POSTERIOR AVALIAÇÃO in vitro DA ATIVIDADE

FOTOPROTETORA

Santos, V. L. A. , Santos, M. C. S. , Bastos, M. D. M. , Gonsalves, A. A. ,

Araujo, C. R. M. ,

Colegiado de Ciências Farmacêuticas - UNIVASF

Introdução:

Dentre as radiações emitidas pelo sol, a mais nociva é a radiação ultravioleta

(RUV), devido ao seu alto poder energético. O uso de protetores solares

tornou-se uma necessidade, uma vez que estes funcionam como medida de

prevenção contra os efeitos deletérios da radiação solar. Os filtros solares

orgânicos são compostos por moléculas capazes de absorver e converter a

RUV em uma energia de menor intensidade, o que reduz os danos na pele

humana. Estes são principalmente compostos aromáticos com grupos

carboxílicos apresentando, em geral, grupos retiradores de elétrons e

moléculas que apresentam sistemas de duplas conjugadas. Azocompostos são

caracterizados por uma dupla ligação entre os nitrogênios (R–N=N–R) e

podem ser preparados através de reações de azoacoplamento. Esta reação

possibilita a formação de estendidos sistemas de duplas conjugadas o que

potencializa a absorção da radiação, sendo considerado, o uso destes

compostos como filtros solares orgânicos.

Objetivos:

Diante do exposto, o presente trabalho pretende sintetizar a Salazosulfamida

(AZ) e posteriormente determinar in vitro o seu Fator de Proteção Solar UVB

(FPS-UVB).

Métodos:

Não foram realizados experimentação em animais nem em humanos. A AZ foi

obtida através da reação de azoacoplamento entre o sal de diazônio, produzido

in situ a partir da sulfanilamida (SN), com o ácido salicílico (AS) em meio

básico. Posteriormente o seu Fator de Proteção Solar UVB (FPS-UVB) foi

determinado in vitro pelo método de Mansur et al., no qual foram preparadas

soluções etanólicas da AZ obtida e dos reagentes empregados na síntese, a SN

e o AS, nas concentrações de 0,5; 0,3; 0,2 e 0,1 mmol/L para realização da

análise espectrofotométricas entre 260-400 nm em triplicata e empregando o

etanol como branco. Por fim, o FPS-UVB foi determinado empregando-se a

seguinte equação: FPS = FC • S 290320 EE(l) • I(l) • Abs(l). (An. Bras.

Dermatol., 61, 167, 1986).

Resultados:

O AS e a SN, apresentaram absorbância maior na região do UVB e UVC,

respectivamente, enquanto que a AZ apresentou maior absorbância na região

do UVA e UVB. O FPS-UVB da AZ na concentração de 0,3 mmol/L foi de

28,15±2,02, sendo este muito superior ao FPS da SF e do AS que na

concentração de 0,5mmol/L foram 9,21±0,9 e 14,98±0,4, respectivamente.

Todas as substâncias analisadas apresentaram FPS acima do mínimo

preconizado pela ANVISA, por meio da RDC Nº 30 de 1º de junho de 2012,

no qual se encontra determinado que o FPS de protetores solares deve ser

maior que 6. O AZ apresentou FPS-UVB, na concentração de 0,3mmol/L

(28,15±2,02), comparável ao da Benzofenona (28,97±0,69), um filtro solar

químico comercial.

Conclusão:

Inicialmente verificou-se que o produto de azoacoplamento permitiu a

obtenção de uma molécula com atividade fotoprotetora superior a dos seus

reagentes. E em adição, o AZ se mostrou uma molécula com potencial

fotoprotetor promissor, visto que a mesma absorveu a radiação UVA e UVB,

e o seu FPS-UVB foi similar ao da Benzofenona, na mesma concentração.

Apoio Financeiro:

UNIVASF e CNPq.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:09

10.092 - Efeito anti-hipertensivo da administração oral do extrato bruto

de Solanum capsaicoides All. em animais espontaneamente hipertensos.

Simoes, L. O. , Ribeiro, T. S. , Conceicao Filho, G. , Silva, A. Q. G. ,

Fregoneze, J. B. , Silva, D. F. ,

Biorregulação - UFBA Programa de Pós-Graduação em Farmácia -

UFBA

Introdução:

Estudos realizados com extratos de plantas são de extrema importância para o

desenvolvimento de novos fármacos. O Solanum capsaicoides All. (Sc),

conhecido popularmente como “mata-cavalo”, é utilizado por conter

propriedades medicinais, dentre elas, potencial anti-hipertensivo.

Objetivos:

Investigar o efeito da administração venosa de Sc em ratos espontaneamente

hipertensos (SHR) e seus controles normotensos (WKY) bem como,

investigar os efeitos do tratamento sub-crônico oral com Sc em animais SHR.

Métodos:

CEUA/UFBA (030/2012) Ratos SHR e WKY pesando 250-300g e com 12-16

semanas foram anestesiados e neles foram implantados cateteres de

polietileno na artéria e veia femoral para medida direta da pressão arterial

(PA) e freqüência cardíaca (FC). O extrato de Sc foi administrado

intravenosamente em doses de 5, 10, 20 e 40 mg/kg. Em outro conjunto de

experimentos, Sc foi administrado oralmente (100 mg/kg) por 21 dias

consecutivos. Peso corpóreo, volume urinário, PA e FC dos animais, foram

medidos no início do tratamento e a cada 5 dias. Todos os procedimentos

experimentais foram aprovados pelo - CEUA/UFBA (030/2012).

Resultados:

Injeções intravenosas de Sc em ratos SHR e WKY induziram hipotensão em

ambas linhagens de animais de forma dose-dependente (n=5). A redução da

pressão sanguínea foi proeminente em SHR em relação ao WKY com a dose

de 40 mg/ kg, (Δ PAM = -39,7 ± 1,7 (SHR) e Δ PAM = -20,2 ± 2,9 (WKY)

mmHg) (**p < 0,01). Este efeito hipotensor foi associado a um aumento da

frequência cardíaca que foi significantemente maior (*p < 0,05) nos animais

WKY em relação aos SHR (Δ FC=16,7 ± 3,0; 23,0 ± 4,5; 25,4 ± 4,3 (SHR) e

(Δ FC = 33,1 ± 3,4; 43,8 ± 4,8; 47,9 ± 3.3 (WKY) bpm) nas doses de 10, 20 e

40 mg/kg respectivamente (n = 5). Em outra serie de experimentos, animais

que receberam Sc oralmente, foi observado um efeito anti-hipertensivo

significante ( PAM= 138,13 ± 1,70, n=5), em comparação a Salina (152,2 ±

3,0 mmHg, n=7) . Um aumento de peso corporal equivalente entre os três

grupos experimentais foi observado (113,7%, 115,1% e 108,2±1,8%, Salina,

Sc e Captopril (n=6), respectivamente). Adicionalmente foi observado que o

tratamento com Captopril e Sc impediram o desenvolvimento da hipertrofia

cardíaca em relação aos animais tratados com Salina (453,9±7,8 e 437,5±7,6

mg/100g Peso Corporal, respectivamente vs 487,4±10,1 mg/100g Peso

Corporal do grupo controle). Já o volume urinário dos animais tratados com

Captopril, sofreu um aumento significante (**p < 0,01) no final do tratamento

em relação ao grupo controle (26,1 ± 0,89 ml/kg/24hrs vs 17,0 ± 1,8

ml/kg/24hrs, Captopril e Salina respectivamente), enquanto em animais

tratados com Sc, foi observado um aumento significante (**p<0,001 e

*p<0,05) apenas no quinto dia (27,4 ± 2,9 vs 16,9 ± 1,4 ml/kg/24hrs, Sc e

Salina, respectivamente) e décimo quinto dia de tratamento (21,7 ± 1,6; vs

15,4 ± 1,5 ml/kg/24hrs, Sc e Salina respectivamente).

Conclusão:

Esses resultados sugerem que a administração oral sub-crônica de Sc inibe,

pelo menos em parte, o desenvolvimento da hipertensão em animais SHR,

com diminuição da hipertrofia cardíaca além de uma potencial atividade

diurética.

Apoio Financeiro:

CNPq e FAPESB.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:09

10.093 - PARTICIPAÇÃO DOS CANAIS TRP NA FUNÇÃO

CARDÍACA DE RATOS ESPONTANEAMENTE HIPERTENSOS

Alves, Q. L. , Jesus, R. L. C. , Santos, P. V. S. , Vasconcelos, . D. F. S. A. ,

BIOREGULAÇÃO - UFBA

Introdução:

A correlação funcional entre os canais TRP, do inglês Transient Receptor

Potential, e alterações da pressão sanguínea na hipertensão torna esses canais

potenciais alvos terapêuticos. Os canais TRPM (melastatina) estão

relacionados com enfermidades cardiovasculares tais como arritmias e

hipertrofia cardíaca. No entanto, o papel destes canais em função cardíaca no

estado hipertensivo ainda permanece pouco esclarecido.

Objetivos:

Investigar o papel dos canais TRPM no cronotropismo e inotropismo

cardíaco.

Métodos:

FOI UTILIZADOS ANIMAIS DE LABORATORIO (RATOS). Ratos

espontaneamente hipertensos (SHR) e os seus controles normotensos Wistar

Kyoto (WKY), entre 12-16 semanas e 250-300g, foram eutanasiados, e os

átrios direito (AD) e esquerdo (AE) foram removidos, isolados e mantidos em

solução de Krebs a 37°C e gaseificados com 95% de O2 e 5% de CO2. O AE

foi continuamente estimulado eletricamente por pulsos quadrados de voltagem

com frequência de 3Hz, por 3ms à 1,5 vezes o limiar de excitação do tecido

cardíaco. O AD, por apresentar o nó sinoatrial, não foi estimulado

eletricamente, permitindo medidas de ritmicidade e contrações espontâneas.

Foram considerados significantes valores de p<0,005 e todos os resultados

foram comparados aos seus respectivos controles (100% ± 0,0). Todos os

protocolos experimentais foram aprovados pelo CEUA/UFBA (019/2011).

Resultados:

Para análise da participação dos canais TRP na Força de Contração Cardíaca

(FCC), os AE foram incubados com bloqueadores de canais TRP. Com a

utilização de Vermelho de Rutênio (VR) (10uM), bloqueador não seletivo de

canais TRPA1, TRPM6, TRPV1, V2, V3, V4 e V6 não houve alteração

significante da FCC em SHR (87,4%±7,9, n=6), nem em WKY (87%± 4,3,

n=5). Na presença de Lantânio (Lan)(10uM), bloqueador não seletivo de

canais TRPC1, C3, C5, C7, M3, M1 e M4 houve alteração significante da

FCC em SHR (73,9% ± 3,6), mas não em WKY (85,5%±3,8). A adição de

Ácido Flufenâmico (Ac.FF) (10uM), bloqueador não seletivo dos canais

TRPC5, TRPM2, M4 e M5, levou a uma alteração significante da FCC

(78,7% ± 5,8, n=6) em SHR, mas não em WKY (64,6% ± 8,8, n=5). A

incubação com BCTC (2uM), bloqueador não seletivo dos canais TRPV1 e

TRPM8, não alterou significantemente a FCC de SHR (87,8% ± 4,6, n=6)

mas alterou em WKY (75,4% ± 6,7, n=6). A ritmicidade cardíaca foi avaliada

com os AD frente aos bloqueadores e foi observado que na presença de VR, a

RC de SHR não sofreu alteração significante (92,8% ± 2,4, n=5), assim como

WKY (93,6% ± 3,8, n=5). Com a adição de Lan, a RC de SHR não foi

alterada significantemente (89,2%± 1,25, n=3), de maneira semelhante ao

WKY (91,4% ± 5,6; n=5). A incubação com Ac.FF não alterou de forma

significante a RC de SHR (92,2% ± 2,0, n=5), nem a de WKY (92% ± 2,1;

n=5). A utilização de BCTC não alterou significantemente a RC de SHR

(93,7% ± 3,3, n=6) e em WKY a resposta foi semelhante (92% ± 3,8, n=3).

Conclusão:

Estes resultados sugerem que os canais que, quando bloqueados levaram a

alterações no inotropismo e cronotropismo cardíacos, parecem influenciar

estas funções e podem estar envolvidos em mecanismos fisiopatológicos da

hipertensão. Entretanto mais ensaios serão realizados com bloqueadores

seletivos no intuito de melhor caracterizar a participação dos canais TRP no

coração.

Apoio Financeiro:

CNPq/FAPESB.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:35

10.094 - SÍNTESE DE OXIMA TERPÊNICA COM POTENCIAL

ANTIMICROBIANO A PARTIR DO ÓLEO DE CITRONELAL

Bastos, M. D. M. , Santos, V. L. A. , Gonsalves, A. A. , Araujo, C. R. M. ,

Colegiado de Ciências Farmacêuticas - UNIVASF

Introdução:

Com o crescente aumento da resistência bacteriana a maioria dos

antimicrobianos disponíveis, observa-se um interesse pela busca de agentes

terapêuticos alternativos para este fim. Encontram-se, na literatura, várias

publicações a respeito da atividade antimicrobiana dos óleos essenciais. O

gênero Cymbopogo, ao qual pertence o óleo de citronela, inclui cerca de 140

espécies e encontra-se amplamente distribuído nas regiões de climas semi-

temperado a tropical em todo o mundo. Duas espécies principais de citronela

são conhecidas e têm importância industrial na área farmacêutica, cosmética e

de perfumaria: C. nardus (citronela do Ceilão) e C. winterianus (citronela de

Java). Dentre suas atividades biológicas, destacam-se a ação repelente de

insetos, apresentando atividade contra larvas do mosquito Aedes aegypti e a

atividade antimicrobiana. As oximas (RR’=NOH) compõem um grupo

funcional orgânico que apresenta inúmeras atividades farmacológicas.

A gemifloxacina é um antimicrobiano com atividade contra bactérias gram-

negativas que possui em sua estrutura o grupamento oxima.

Objetivos:

Desta forma, considerando o potencial antimicrobiano do citronelal,

constituinte majoritário do óleo de citronela, assim como das oximas propõe-

se a síntese da 7-cloro-6-(oxima)-3,7-dimetiloctanal oxima têrpenica inédita

com potencial antimicrobiano.

Métodos:

O trabalho realizado não realiza exeperimentos com animais. A obtenção da

oxima terpênica procedeu a partir de uma reação entre o citronelal,

pentilnitrito e ácido clorídrico. O NOCl gerado in situ reagiu com citronelal,

obtendo um líquido de coloração esverdeada.

Resultados:

A oxima terpênica inédita foi obtida com um rendimento de 58%.O sucesso

da síntese foi confirmada pelo espectro de UV, RMN 1H e 13C do produto

purificado.

Conclusão:

A 7-cloro-6-(oxima)-3,7-dimetiloctanal foi sintetizada e segue para avaliação

do seu potencial antimicrobiano.

Apoio Financeiro:

CNPq e UNIVASF.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:35

10.095 - Efeito hipotensor do extrato etanólico das inflorescências de

Mimosa caesalpiniifolia Benth. (Mimosaceae) em ratos.

Santos, M. E. P. , Morais, I. C. P. S. , Citó, A. M. D. G. L. , Arcanjo, D. D.

R. , Mendes, M. B. , Avelino, L. D. , Carvalho, G. D. , Oliveira, A. P. ,

Núcleo de Pesquisas em Plantas Medicinais - UFPI Departamento de

Química - UFPI

Introdução:

Mimosa caesalpiniifolia Benth. é uma planta nativa da Caatinga e do Cerrado

brasileiro (Rev. Caatinga 20:152, 2007). A espécie é utilizada pela população

do semi-árido para o tratamento da hipertensão (J Ethnopharmacol 114, 325,

2007) e do derrame (Rev. Bras. Pl. Med 12:282, 2010).

Objetivos:

Determinar o efeito do extrato etanólico das inflorescências de Mimosa

caesalpiniifolia (Mc-EtOH) sobre a PAM e FC em ratos.

Métodos:

CEEA/UFPI Nº 008/12 Todos os protocolos foram aprovados pelo Comitê de

ética em experimentação animal (008/12). Foram utilizados ratos (Rattus

norvegicus), entre 250-350g com idade a partir de 12 semanas. Após

anestesiados com tiopental sódico (45 mg/kg, i.p.) inseriu-se cateteres de

polietileno na aorta abdominal e a veia cava inferior, via artéria e veia femoral

esquerdas, respectivamente, para registros da PAM e FC e quando realizado

administração intragástrica, foi implantado um cateter na aorta abdominal, via

artéria femoral. A pressão arterial foi registrada após 24 h, conectando o

catéter arterial a um transdutor de pressão pré-calibrado (Statham P23 ID,

Gould, Cleveland, OH, EUA), acoplado a um computador equipado com

software AQCAD 2.3.9 (AVS Projetos, São Paulo, Brasil). Após estabilização

dos parâmetros hemodinâmicos utilizou-se NPS 10 μg/Kg i.v. E ao retorno

dos valores basais os animais foram tratados com atropina (2 mg/kg, i.v.) ou

hexametônio (20 mg/kg, i.v.) por 30 min e administrou-se Mc-EtOH (6,25;

12,5 e 25 mg/kg, i.v.). Por via oral, o primeiro grupo recebeu salina (0,3 ml)

mais cremofor e o segundo recebeu uma dose de 100 mg/kg do Mc-EtOH. Os

valores da PAM e FC foram registrados nos tempos 0 a 240 min após

administração. Os valores foram expressos como média ± e.p.m. Foram

utilizados ANOVA “one-way” com medidas repetidas, seguida do teste de

Newman-Keuls ou Teste-t de Student não pareado. Significantes valores de

p<0,05, GraphPad Prism 5.0.

Resultados:

A administração venosa do extrato, promoveu uma hipotensão (-9,98 ± 0,79; -

28,55 ± 6,56; -38,87 ± 6,09 mmHg) seguido de bradicardia (9,47 ± 1,00; -

19,12 ± 7,33; -36,68 ± 5,75 bpm) nas maiores doses. O pré-tratamento com

atropina aboliu tanto a hipotensão (0,51 ± 0,29; -4,73 ± 4,73; 4,21 ± 2,12

mmHg, n=4) quanto à bradicardia (1,29 ± 0,61; 3,55 ± 1,00; 2,09 ± 0,62 bpm),

já com o hexametônio (n=5) a hipotensão foi revertida (17,39 ± 5,77; 18,22 ±

5,51; 12,21 ± 12,30 mmHg) e bradicardia atenuada (-2,83 ± 0,46; -7,83 ±

0,87; -7,50 ± 1,97 bpm) e por via oral (n=5), o Mc-EtOH, promoveu uma

diminuição da PAM a partir dos 90 min, sem alterar a frequência cardíaca.

Conclusão:

O Mc-EtOH induz uma hipotensão e bradicardia, envolvendo a ativação

indireta dos receptores muscarínicos cardíacos. Por via oral o Mc-EtOH

diminui a pressão arterial sem alterar a frequência cardíaca.

Apoio Financeiro:

CAPES/FAPEPI/CNPq

Gerado em: 2014-5-22 11:30:35

10.096 - AVALIAÇÃO DO POTENCIAL HEMOLÍTICO DOS

EXTRATOS DE MICONIA PRASINA (MELASTOMATACEA)

Borba, E. F. O. , Araujo, L. C. C. , Leite, T. C. C. , Silva, B. I. M. , Silva,

T. G. ,

Antibióticos - UFPE

Introdução:

O gênero Miconia destaca-se pela diversidade do número de espécies arbóreas

e arbustivas, com mais de 1.056 espécies descritas. Diversos estudos tem

indicado uma diversidade de atividades biológicas para o gênero, como

antimicrobiana, anti-inflamatória e analgésica. Entretanto, o gênero ainda é

pouco estudado, evidenciando a necessidade de estudos farmacológicos com

espécies de Miconia.

Objetivos:

Investigar a atividade hemolítica dos extratos metanólico (MeOH), hexânico

(HEX) e acetato de etila (AcEOt) de Miconia prasina sobre eritrócitos

murinos.

Métodos:

23076.03756/2010-66 Foram utilizados camundongos swiss provenientes do

Biotério do Departamento de Antibióticos- UFPE. O protocolo experimental

foi aprovado pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal da UFPE (nº

23076.03756/2010-66). Os animais (n=3) foram anestesiados e o sangue foi

coletado através de punção cardíaca. Os eritrócitos foram lavados com

solução salina (NaCl 0,85% + CaCl2 10 mM), após centrifugação (3000 rpm,

5 min) o sobrenadante foi descartado e as células ressuspendidas em solução

salina para se obter uma suspensão de eritrócitos a 2%. O experimento foi

realizado em microplaca de 96 poços. Foram plaqueados: 100 µL de solução

salina (controle negativo); 50 µL da solução salina + 50 µL do veículo

(branco); 80 µL de solução salina + 20 µL de Triton X- 100 a 1% (controle

positivo); 100 µL de solução salina + 100 µL dos extratos em DMSO a 10 %

(teste). Em seguida, 100 µL da suspensão de eritrócitos foi plaqueada em

todos os poços. Após incubação por 1 h sob agitação constante a 28 °C, a

placa permaneceu em repouso por um período de 1 h, após o qual o

sobrenadante foi analisado. A leitura óptica (450 nm) foi realizada em leitor

automático de microplacas e os dados analisados usando o software GraphPad

Prism v.5.0. Para este ensaio, considera-se tóxico o produto que apresenta

valor de concentração efetiva 50% (CE50) < 200 µg/mL.

Resultados:

Os extratos MeOH , HEX e AcEOt M. prasina apresentaram CE50 de

558,9; 279,8 e 267,4 respectivamente. Estes resultados indicam que os

extratos não são capazes de promover a hemólise celular, sendo considerados

não tóxicos para as hemácias.

Conclusão:

Os extratos em MeOH, HEX e AcEOt de Miconia prasina não possuem

toxicidade sobre eritrócitos murinos.

Apoio Financeiro:

FACEPE, CNPq.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:35

10.097 - ATIVIDADE ANTINOCICEPTIVA DO ÓLEO ESSENCIAL

DE Croton cordiifolius Baill. (QUEBRA-FACA): POSSÍVEL

MECANISMO DE AÇÃO.

Santos, S. M. , Mendes, R. F. V. , Silva, Y. K. D. , Nogueira, L. M. ,

Martins, R. D. , Albuquerque, J. F. C. , Havt, A. , Ximenes, R. M. ,

Departamento de Antibióticos - UFPE Departamento de Fisiologia e

Farmacologia - UFC Centro Acadêmico de Vitória - UFPE

Introdução:

Croton cordiifolius, conhecido na medicina popular no interior de

Pernambuco como quebra-faca, é utilizado para o tratamento de problemas

inflamatórios, dor e distúrbios gastrointestinais. A atividade antinociceptiva

do óleo essencial desta espécie foi relatada nos modelos de contorções

abdominais induzidas por ácido acético e no teste da formalina.

Objetivos:

O objetivo deste trabalho é avaliar o possível mecanismo de ação do efeito

antinociceptivo do óleo essencial de C. cordiifolius em modelos químicos de

nocicepção.

Métodos:

23076.020508/2010-26 Foram utilizados camundongos Swiss (n = 6),

machos, com aproximadamente 60 dias de idade, aclimatados a 22ºC com

ciclo circadiano de 12h e água e comida ad libitum. Os experimentos foram

aprovados pela Comissão de Ética para Uso de Animais (CEUA/UFPE). Para

avaliação do possível mecanismo de ação foram utilizados o teste da

capsaicina e do glutamato. No primeiro teste, os animais receberam o óleo

essencial (50 e 100 mg/kg, i.p.) ou veículo (10 mL/kg, i.p.) e após trinta

minutos, 20 uL de uma solução de capsaincina recém preparada em PBS (1,6

ug/pata) foi injetada na região plantar da pata traseira direita de cada animal.

No segundo teste, o mesmo tratamento foi realizado e após 30 minutos, 20 uL

de uma solução de glutamato (20 umol/pata) foi injetada na região plantar da

pata traseira direita de cada animal. Em ambos os testes, o tempo gasto pelo

animal lambendo ou balançando vigorosamente a pata foi cronometrado e

utilizado como indicativo de nocicepção. Os animais foram observados por 5

min no teste da capsaicina, e por 15 min no teste do glutamato. Além disso,

para eliminar a possibilidade de efeitos falso-positivos por ação no sistema

nervoso central (SNC), foi realizado o teste do campo aberto. Os resultados

foram expressos como média ± EPM e analisados por test t de Student,

considerando p < 0,05.

Resultados:

Nenhuma das doses do óleo essencial foi capaz de inibir a nocicepção

induzida pela capsaicina, indicando que este não age através dos receptores

TRPV1. No entanto, o óleo essencial (EO) na dose de 100 mg/kg inibiu

significativamente a nocicepção induzida pelo glutamato (veículo 101,03 ±

3,26, EO50 85,81 ± 7,88; EO100 66,33 ± 3,70*) sugerindo a participação do

sistema glutamatérgico no efeito antinociceptivo do óleo essencial de C.

cordiifolius. No teste do campo aberto, o óleo essencial (100 mg/kg) não

alterou os parâmetros de avaliados quando comparado ao veículo.

Conclusão:

O efeito antinociceptivo do óleo essencial de C. cordiifolius pode ser

explicado, pelo menos em parte, pela inibição do sistema glutamatérgico.

Apoio Financeiro:

CNPq, Capes, Propesq/UFPE.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:35

10.098 - AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DE

Miconia mirabilis (MELASTOMATACEA)

Leite, T. C. C. , Borba, E. F. O. , Sena, A. R. , Nerys, L. L. A. , Chagas, E.

C. O. , Santos, R. H. S. , Silva, T. G. ,

Antibióticos - UFPE Agroindustria - IFPE Herbário - IMA

Introdução:

Miconia é o maior gênero da família Melastomataceae com cerca de 1000

espécies, sendo que 274 são encontradas no Brasil e destas 120 são

endêmicas. A espécie vegetal Miconia mirabilis é conhecida popularmente

como capa de xangô é utilizada na forma de banhos ou cataplasmas para tratar

os sintomas do reumatismo.

Objetivos:

avaliar a atividade antimicrobiana de extratos de Miconia mirabilis.

Métodos:

O presente trabalho não fez de uso de animais ou humanos Foram utilizados

os extratos em hexano (HEX), acetato de etila (AcEOt) e metanol (MeOH) de

M. mirabilis frente aos microrganismos testes Staphylococcus aureus,

Micrococcus luteus, Bacillus subtilis, Enterococcus faecalis, Escherichia coli,

Serratia marcescens, Pseudomonas aeruginosa, Mycobacterium smegmatis e

Candida albicans, obtidos da coleção UFPEDA. Para avaliar a atividade

antimicrobiana utilizaram-se os métodos difusão em ágar com disco de papel,

segundo o CLSI e a microdiluição em caldo segundo o NCCLS. No ensaio de

difusão em ágar os extratos estéreis foram testados na concentração de 300

mg/mL e o meio, Ágar Mueller hinton, inoculado com 100 µL de suspensão

bacteriana na concentração de 2x108 UFC/mL. Os microrganismos que se

mostraram sensíveis frente aos extratos de M. mirabilis foram avaliados pelo

método da microdiluição em caldo, adicionados 90 µL de meio Caldo Mueller

hinton na placa de 96 poços e 90 µL de extrato na concentração inicial de

32mg/mL. Realizaram-se diluições seriadas do extrato e por ultimo foi

adicionado 10 µL do microrganismo em cada poço. A placa foi incubada por

24 horas para determinação da Concentração Mínima Inibitória (CMI) e

posteriormente por mais 24 horas para a Concentração Mínima Bactericida

(CBM)

Resultados:

No teste de difusão em ágar o extrato HEX não inibiu o crescimento de

nenhum microrganismo, o extrato AcEOt inibiu S. aureus (média do halo de

14,7 mm), M. luteus (14,3) e B. subtilis (10,7). O extrato MeOH inibiu S.

aureus (14,0), M. luteus (24,3) e B. subtilis (13,0), M. smegmatis (21,3) e C.

albicans (22,0). Na Microdiluição em Caldo o extrato em HEX mostrou-se

eficaz frente a vários microrganismos, destacando-se M. luteus, B. subtilis e

M. smegmatis com CMI de 0,5 mg/mL, já os extratos AcEOt e MeOH foram

ativos frente a todos os microrganismos testados e alguns se destacaram

apresentando CMI igual a 0,06 mg/mL frente a M. luteus e CMB igual a 0,5

mg/mL para o extrato MeOH frente a P. aeruginosa e M. smegmatis

Conclusão:

O extrato HEX de M. mirabilis não foi ativo no ensaio de Difusão em Agar já

na Microdiluição foram ativos frente a praticamente todos os microrganismos

testados. Comparando a eficiência na inibição dos extratos pode se inferir que

dentre os três, o extrato metanólico foi o melhor em ambos os ensaios seja no

maior número de microrganismos inibidos no ensaio da difusão em ágar ou

nos valores menores encontrados de CMI e CMB frente a todos os

microrganismos testados e isto pode estar relacionado à presença de

compostos mais polares característicos deste extrato.

Apoio Financeiro:

Facepe e CNPQ.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:35

10.099 - INFLUENCIA DA RADIÇAO GAMA SOBRE A PRODUÇÃO

DE FENÓIS EM CLADINA KALBII AHTI.

Filho, L. O. , Santo, B. C. E. , Lima, M. J. G., Martins, M. C. B. , Silva, N.

H. , Pereira, E. C. ,

Bioquímica - UFPE Geografia - UFPE

Introdução:

A atividade biológica das substancias liquênicas tem sido amplamente

estudada, entretanto para o isolamento e purificação destas quase sempre e

necessário uma quantidade expressiva de biomassa, de difícil renovação, pois

o crescimento do talo liquênico é lento. Uma das alternativas para produção

dos compostos produzidos pelos liquens inclui a técnica de imobilização de

fragmentos do talo em biorreatores, afim de produzir seus compostos

biologicamente ativos. Em adição alguns autores observaram que quando

submetidos aos efeitos da radiação, os liquens podem aumentar a produção

dos compostos fenólicos, já que estes têm importante papel ecológico na

proteção do talo contra os excessos de luminosidade.

Objetivos:

Avaliar o efeito da radiação gama sobre a produção dos fenóis de Cladina

Kalbii Ahti.

Métodos:

a pesquisa tem como objetivo principal apenas produçao dos compostos,

portanto nao tendo no momento aplicabilidade em ensaios com animais ou

humanos. Cladina kalbii (100 g) foi coletada na serra de Itabaiana, Sergipe,

Nordeste do Brasil. Parte do material (40 g) foi submetida à radiação Gama

nas doses de 10, 50 e 100 Gy. Estas amostras foram distribuídas em

erlenmeyer (125 mL), 3 g para cada e mesclados com 30 g de caulinita

previamente hidratada com água deionizada, e adicionados 50 mL do

precursor biossintético acetato de sódio (NAOAc) nas concentrações de 0,1;

1,0 e 10 mM para cada amostra do líquen irradiado nas diferentes doses.

Uma alíquota de 50 mL foi coletada (a cada coleta foi reposto o mesmo

volume do NAOAc em cada reator) nos quatro primeiros dias e depois

semanalmente até completar 4 meses. As alíquotas foram submetidas a

extrações em sistema de solventes com éter/acetato de etila (S1) (65:35, v/v) e

clorofórmio/acetonitrila (S2) (60:40, v/v) e subsequentemente fora lidas em

espectrofotômetro nos comprimentos de onda de 210, 252 e 312 nm. Uma

amostra de 10 g da C. kalbii foi submetida à extração com éter, clorofórmio e

acetona, a fim de obter os extratos: etéreo, clorofórmio e acetônico (controle

de campo). Todas as amostras irradiadas, não irradiadas (controle laboratório)

e campo foram analisadas através de cromatografia em camada delgada

(CCD), a fim de se verificar o perfil fenólico de cada um.

Resultados:

Os resultados nos mostraram o talo da C. kalbii imobilizado produziu

compostos fenólicos durante todo o período do experimento (4 meses). O

sistema de solvente S1 mostrou-se ser mais eficiente em extrair os compostos

fenólicos que o sistema S2 para amostras irradiadas em todas as doses,

entretanto, para as amostras controle (não irradiadas) o sistema S2 foi mais

eficaz. Houve um aumento na produção dos fenóis nas amostras irradiadas

com 50 e 100 Gy nas concentrações de 0,1;1,0 e 10 mM NAOAc, com

destaque para dose de 50 Gy que mostrou os maiores picos de produção,

entretanto este aumento não foi significativamente diferente entre as

concentrações utilizadas. A analise de CCD mostrou um perfil fenólico

semelhante entre as amostras irradiadas e não irradiadas, ou seja, além de

apresentarem atranorina (Rf-95) pode-se observar a presença de outras

substancias não identificadas (Rfs 0,65; 0;67; 0;85 e 0,88) que estavam

ausentes nos extratos etéreo, clorofórmio e acetônico obtidas da amostra

controle de campo.

Conclusão:

A C. kalbii quando imobilizados foram capaz de produzir atranorina. A dose

de radiçao de 50 Gy estimulou a produção dos compostos fenólicos.

Apoio Financeiro:

CAPES, FACEPE, CNPq

Gerado em: 2014-5-22 11:30:35

10.0100 - SÍNTESE DE NOVA TIAZOLHIDRAZONA E

DETERMINAÇÃO DE SUA ATIVIDADE CITOTÓXICA.

Egito, M. S. , Santiago, P. B. G. S. , Souza, C. C. S., Militao, G. C. G. ,

Albuquerque, J. F. C. ,

Farmácia - UFPE Antibióticos - UFPE Farmacologia e Fisiologia - UFPE

Introdução:

Os compostos heterocíclicos são bastante estudados para diversas atividades

biológicas, uma vez que são descritos na literatura como fármacos

promissores. Neste contexto, são evidenciadas as tiazolhidrazonas, moléculas

que possuem dois grupos bioativos, a hidrazona e o anel tiazólico. Os tumores

malignos são uma das mais graves ameaças contra a saúde humana no mundo.

O grande desafio para o tratamento dessa doença continua sendo encontrar

uma molécula seletiva, ou seja, que atue apenas nas células tumorais (Bioog.

Medic. Chem. Let. 19:5661–4, 2009).

Objetivos:

Sintetizar uma nova tiazolhidrazona e determinar sua atividade citotóxica

frente a uma linhagem celular.

Métodos:

Neste trabalho não foram realizados testes in vivo. O 4-{2-[N’-(3-Cloro-

benzilideno)-hidrazina]-tiazol-4-il}-fenol (Ju-735) foi obtido em duas etapas.

Na primeira, ocorreu a reação entre a tiossemicarbazida e o 3-

Clorobenzaldeído, obtendo-se o derivado tiossemicarbazônico e na segunda,

ocorreu a condensação entre a molécula obtida na etapa anterior e 2-Bromo-

4’-hidroxiacetofenona em ácido clorídrico e iso-propanol. A reação foi

processada no ultrassom com aquecimento. O produto foi vertido para um

béquer e filtrado, pesado e submetido à atividade citotóxica. Para

determinação desta atividade foram utilizadas células da linhagem NCI H-292

(carcinoma muco epidermóide de pulmão). A atividade foi avaliada pelo

método MTT, baseado na conversão do sal 3-(4,5-dimetil-2-tiazol)-2,5-

difenil-2-H-brometo de tetrazolium (MTT) em azul de formazan, a partir de

enzimas mitocondriais presentes apenas nas células metabolicamente ativas.

Foi utilizada uma suspensão celular (105 células/mL), distribuída na placa de

cultura com 96 poços (200 µL em cada poço) e incubada a 37 °C por 24 horas.

Posteriormente, a substância teste foi adicionada (10 µL/poço) e a placa

reincubada a 37 °C. Após 72 h, foi adicionado 0,25 µL de MTT em cada poço

e a placa foi deixada por duas horas em estufa a 37 °C. Em seguida, o meio de

cultura e o excesso de MTT foram aspirados e 100 µL de DMSO foi

adicionado a cada poço para dissolução dos cristais de formazan.

Resultados:

Os resultados apresentados pelo produto puro foram: Ponto de Fusão. 172-173

ºC, Rf. 0,43 no sistema (Hexano e Acetato de etila 0,55:0,45). O rendimento

foi de 35,81 %. Esse rendimento não foi considerado bom. O composto

sintetizado Ju-735 apresentou atividade antitumoral relevante frente às células

NCI H-292. Na concentração de 25 µg/mL apresentou inibição de 69,93%. O

valor percentual é menor quando comparado ao controle positivo

Doxorrubicina, mas é superior ao que preconiza o protocolo adotado. Segundo

este, são considerados ativos compostos que inibem 50 % da proliferação

celular em concentrações menor ou igual a 30 µg/mL (Canc. Chemoter. Rep.

3:2, 1972).

Conclusão:

O composto sintetizado apresentou rendimento baixo, sendo necessária a

repetição da reação para otimização desse resultado. A molécula apresentou

bom percentual de inibição, porém por ser mais baixo que o demonstrado pelo

padrão, fica a perspectiva de testar o potencial desta molécula frente a outras

linhagens e sintetizar outros derivados com diferentes substituintes.

Apoio Financeiro:

CNPq.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:35

10.0101 - ATIVIDADE ANTIRRADICALAR E DETERMINAÇÃO DO

TEOR DE FENÓLICOS TOTAIS DE EXTRATOS DE Miconia prasina

(Melastomataceae).

Oliveira, T. B. , Silva, B. I. M. , Carrazzoni, A. S. H. S. G. G. , Lima, S. M.

A. , Leite, T. C. C. , Tenório, J. A. B. , Aguiar, J. S. , Silva, T. G. ,

Departamento de Antibióticos - UFPE

Introdução:

O gênero Miconia é exclusivamente neotropical nas Américas, ocorre desde o

sul do México até o norte da Argentina e Uruguai. Existem poucos estudos

sobre este gênero, entretanto, algumas atividades biológicas já foram descritas

como antioxidante, antimicrobiana, antitumoral, antiviral e analgésica.

Objetivos:

Quantificar o teor de fenólicos totais de extratos de M. prasina e sua

correlação com a atividade antirradicalar.

Métodos:

No seguinte trabalho, não foram utillizados animais ou material de origem

humana. Os extratos das partes aéreas de M. prasina foram obtidos em

aparelho extrator automático, utilizando os solventes acetato de etila (MPA),

hexano (MPH) e metanol (MPM), e concentrados por rotaevaporação. O teor

de fenólicos totais foi determinado de acordo com o método de Folin-

Ciocalteu, empregando-se o ácido gálico como composto fenólico padrão. Os

extratos foram solubilizados em EtOH com concentração final de 1 mg/mL.

Uma alíquota de 30 µL de cada amostra foi transferida para a placa de 96

poços, seguido da adição de água, carbonato de sódio 15% m/v e o reativo de

Folin-Ciocalteu, resultando na concentração final de 100 µg/mL. Após 2 h, a

absorbância das amostras foi medida em espectrofotômetro a 760 nm. As

análises foram realizadas em triplicata e o teor de fenólicos totais (FT) foi

determinado por interpolação da absorbância das amostras contra uma curva

de calibração construída com soluções do padrão de ácido gálico e expressos

como miligramas equivalentes de ácido gálico por grama de extrato (mg

EAG/g). Os extratos para avaliação da atividade sequestradora do radical

DPPH foram preparados em concentrações variando de 1 a 5 mg/mL. Através

de triagem preliminar, quantidades apropriadas dos extratos foram

transferidas, em triplicata, para a placa de 96 cavidades e adicionado à solução

de DPPH• (23,6 µg/mL em EtOH). O ácido ascórbico foi utilizado como

controle positivo. Após 30 min de agitação, a absorbância foi lida em

espectrofotômetro a 517 nm. A atividade sequestradora foi expressa em

percentagem de acordo com a equação: AS% = 100 x [(Abs controle - Abs

amostra) / Abs controle] e a CE50 foi estabelecida utilizando a análise de

regressão linear, obtido pelo programa GraphPad Prism 5.0.

Resultados:

O teor de FT foi maior no extrato MPM (580,25 0,10 mg EAG/g), seguido do

MPA (320,80±1,36 mg EAG/g) e MPH (90,96±0,24 mg EAG/g). Na

atividade antirradicalar foi encontrado um efeito de inibição dose-dependente

para ambos os extratos com CE50 para MPM (7,94±0,04 µg/mL), MPA

(34,04±1,58 µg/mL), MPH (> 500 µg/mL) e ácido ascórbico (4,82±0,06

µg/mL). Ao comparar os resultados do teor de fenólicos totais com a atividade

antirradicalar dos extratos, é possível observar que o maior conteúdo de

compostos fenólicos em MPM resultou em um aumento da capacidade

sequestradora do radical DPPH.

Conclusão:

Nossos resultados demonstram o potencial de M. prasina como fonte de

compostos fenólicos com elevada capacidade antirradicalar frente ao radical

DPPH. Outras metodologias devem ser aplicadas para isolamento e

caracterização dessas biomoléculas presentes nos extratos.

Apoio Financeiro:

CAPES e FACEPE

Gerado em: 2014-5-22 11:30:35

10.0102 - EFEITOS PSICOFARMACOLÓGICOS DOS EXTRATOS

METANÓLICOS BRUTOS ISOLADOS DE ESPÉCIES DO GÊNERO

ERYTHROXYLUM EM CAMUNDONGOS.

Silva, F. D. , Barbosa, C. C. , Albuquerque, C. H. , Tavares, J. F. , Silva,

M. S. , Almeida, R. N. , Nobrega, F. F. F. ,

Ciências Farmacêuticas-Centro de Ciências da Saúde - UFPB Fisiologia e

Patologia-Centro de Ciências da Saúde - UFPB Programa de Pós-

Graduação em Produtos Naturais e S - UFPB Unidade Acadêmica de

Tecnologia do Desenvolvimento - UFCG

Introdução:

Com sua riquíssima biodiversidade, o Brasil se destaca como fornecedor de

produtos naturais e já é visível a importância da busca de novos fármacos a

partir de produtos naturais. A família Erythroxylaceae compreende quatro

gêneros com distribuição em regiões tropicais, sendo o Bioma Caatinga um

dos centros de diversidade de espécies pertencentes ao gênero Erythroxylum.

Objetivos:

Nesse contexto, este trabalho teve como objetivo realizar uma triagem

farmacológica, bem como a observação das atividades psicofarmacológicas

dos extratos metanólicos das espécies do gênero Erythroxylum: E. caatingae

(ECCA), E. revolutum (EREV), E. pauferrense (EPAU), E. simonis (ESIM) e

E. pulchrum (EPUL).

Métodos:

Experimentação animal Foram utilizados camundongos Swiss albinos

(machos e fêmeas), pesando entre 20-40 g (2-3 meses de idade). Estes foram

divididos em grupos (n=6) e tratados por via intraperitoneal com doses de 200

mg/Kg (extratos). Os grupos controle receberam a solução de Tween 80 a

0,2%, via i.p. (veiculo). O grupo padrão para o teste de nocicepção induzida

por formalina foi tratado com Morfina (6 mg/Kg, i.p.) e o grupo padrão para o

teste de convulsões induzidas pelo Pentilenotetrazol (PTZ) recebeu o

Diazepam (DZP) na dose de 5 mg/Kg (i.p.). Os procedimentos metodológicos

foram aprovados pela Comissão de ética no Uso de Animais

(CEUA/CBIOTEC/UFPB), certidão Nº 0505/13. Os valores foram analisados

através da ANOVA one-way seguidos pelo pós-teste de Dunnett, expressos

como média ± e.p.m., sendo considerados como significativos os resultados

com p< 0,05.

Resultados:

Na triagem farmacológica, após a administração dos respectivos extratos,

foram observados os seguintes efeitos: sedação e analgesia no grupo ECCA;

ptose palpebral, aumento da micção, contorções abdominais e diminuição da

ambulação no grupo tratado com EREV; ato de levantar, escalar e contorções

abdominais no grupo EPAU; ptose palpebral, aumento da micção, sedação,

diminuição da ambulação, aumento da defecação, diminuição do tônus

muscular e da força para agarrar no grupo tratado com ESIM; e cauda de

Straub no grupo que recebeu EPUL. Na 1ª fase do teste da formalina todos os

extratos (ECAA: 78,5±11,8; EREV: 64,0±10,3; EPAU: 77,8±11,1; ESIM:

71,7±10,9; EPUL: 84,2±7,5), foram capazes de diminuir significativamente

(p<0,05) o tempo de lambida da pata em relação ao grupo controle

(114,3±4,9) de forma semelhante ao grupo tratado com a morfina (52,7±6,3,

p<0,01). Na segunda fase do mesmo teste, os animais administrados com

ECCA (75,8±33,5) EREV (24,0±16,0) e ESIM (49,7±32,2) evidenciaram

redução significativa (p<0,05) do tempo de lambida da pata se comparado ao

grupo controle (196,0±32,1) e de forma semelhante ao Padrão Morfina

(48,8±16,9). No teste das convulsões induzidas por PTZ, apenas o grupo

tratado com o extrato EPAU (269,2±113,5) houve aumento significativo

(p<0,05) da latência para o início de convulsões em relação ao grupo controle

(70,0±5,3).

Conclusão:

Os resultados sugerem que todos os extratos apresentam efeitos relacionados

ao Sistema Nervoso Central e que os extratos EREV e ESIM apresentaram

efeito antinociceptivo no modelo estudado. Por outro lado, apenas um dos

extratos apresentou efeito anticonvulsivante. Outros estudos se tornam

necessários para uma melhor compreensão dos resultados.

Apoio Financeiro:

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico-CNPq.

Gerado em: 2014-5-22 11:30:35

10.0103 - Microscopia eletrônica de varredura e transmissão de vermes

fêmeas de Schistossoma mansoni tratados com o derivado tiazol LPQM-

45.

Alves, L. C. , Brayner, F. A. , Padilha, R. J. R. , Oliveira, J. F. , Júnior, A.

S. A. A. , Santiago, E. F. , Oliveira, S. A. , Filho, G. B. O. , Silva, A. L. ,

Leite, A. C. L. ,

Departamento de Farmácia - UFPE Departamento de Imunologia -

FIOCRUZ Parasitologia - FIOCRUZ

Introdução:

A esquistossomose mansônica é uma doença crônica debilitante ocasionada

por um trematódeo do gênero Schistossoma mansoni e afeta mais de 230

milhões de pessoas no mundo (Plos Med. 4:1071). A droga de escolha para o

tratamento desta doença é o praziquantel, o qual apresenta eficácia contra

todas as espécies de Schistossoma que infecta o homem, contudo não é efetivo

contra a forma imatura do verme (Parasitol Res. 110:2465, 2012; Mem. Inst.

Oswaldo Cruz 103:561, 2008) e tem apresentado relatos de possíveis casos de

resistência (Am J Trop Med Hyg. 60: 932, 1999). Diante deste contexto,

diversas moléculas vêm sendo testadas como alternativas para o

desenvolvimento de novos fármacos esquistossomicidas, dentre estas, muitas

têm provocado significativas alterações no tegumento do verme como a

oxaminiquine (Am J Trop Med Hyg 53: 61, 1995), a mefloquina (parasitol

137:85, 2010) e o próprio praziquantel (J Egypt Soc Parasitol. 36:197, 2006).

O tegumento representa uma estrutura vital para a evasão do sistema imune,

absorção de nutrientes e sobrevivência do parasito (Exp Parasitol 127:270,

2011).

Objetivos:

Avaliação ultraestrutural de vermes fêmeas de Schistosoma mansoni após

exposição in vitro ao derivado tiazol LPQM-45 por um período de 48h.

Métodos:

22/2011 Este projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética no Uso de Animais

do Centro de Pesquisa Aggeu Magalhães/Fundação Oswaldo Cruz

(CPqAM/FIOCRUZ) autorizado pela licença Nº 22/2011. Foram utilizados

camundongos fêmeas albinos Swiss Mus musculus com 25 dias de idade,

pesando 50 gramas. Estes camundongos foram infectados com 120 cercárias e

submetidos à eutanásia por perfusão do sistema porta, sessenta dias após a

infecção para recuperação dos vermes. Os parasitas recuperados foram

incubados com o derivado tiazol LPQM-45 na dose de 80 μg/mL, em meio

RPMI completo a uma temperatura de 37 °C com 5% de CO2 por um período

de 48h. Após este período os vermes foram analisados por meio da

microscopia eletrônica de varredura e transmissão para a observação de

alterações na sua ultraestrutura.

Resultados:

Na microscopia eletrônica de varredura 100% das fêmeas analisadas

apresentaram sérios danos no tegumento com extensa descamação,

desintegração de algumas áreas do tegumento com exposição e lesão da

musculatura. A microscopia eletrônica de transmissão confirmou os resultados

observados na varredura demonstrando destruição com ausência do tecido

tegumentar em algumas áreas, presença de vacúolos na região da matriz

sincicial, na região subtegumentar e próximo à musculatura circular e

longitudinal de 100% das fêmeas analisadas. Cem por cento (100%) dos

vermes do grupo controle apresentaram região tegumentar, subtegumentar e

da musculatura sem alterações.

Conclusão:

Os resultados obtidos demonstram que o composto LPQMC-45 apresenta

atividade esquistossomicida atuando como protótipo para a obtenção de

fármacos esquistossomidas, sendo necessários ensaios subsequentes e triagens

clínicas.

Apoio Financeiro:

CNPq e FIOCRUZ.

Gerado em: 2014-5-22 11:31:08

10.0104 - Licarina A apresenta atividade antipromastigota e

antiamastigota para Leishmania chagasi

Neris, P. L. N. , Leite, J. A. , Mascarenhas, S. R. , Rodrigues, L. C. ,

Oliveira, M. R. ,

Departamento de Biologia Celular e Molecular - UFPB Departamento de

Biotecnologia - UFPB

Introdução:

As principais drogas utilizadas no tratamento das leishmanioses no Brasil

(antimoniais pentavalentes e anfotericina B) apresentam elevada toxicidade,

sendo necessária a busca por novas moléculas com atividade antileishmania.

Nesse contexto temos Licarina A (LCA), uma neolignana encontrada na

natureza, a exemplo da espécie Nectandra glabrescens, mas que também

possui síntese viável.

Objetivos:

Avaliar a atividade antileishmania in vitro da LCA sobre formas

promastigotas de Leishmania chagasi, analisando se este tratamento interfere

nos níveis de cálcio intracelular ([Ca2+]i) e/ou induz fragmentação do DNA

genômico dos parasitas, assim como investigar sua atividade sobre

macrófagos (MØs) infectados com L. chagasi.

Métodos:

Formas promastigotas de L. chagasi (1x106 cel/mL) foram expostas a LCA

por 72h à 26ºC, e quantificadas em câmara de Neubauer. Essas células foram

expostas a LCA durante 1h para análise do [Ca2+]i através da sonda Fluo

3AM, sendo os resultados avaliados em citômetro de fluxo BD FACSCalibur.

Para análise de fragmentação de DNA, as formas promastigotas foram

expostas à LCA overnight à 26°C, o DNA genômico foi extraído pelo método

clorofórmio/fenol e analisado em gel de agarose (1%). MØs de camundongos

suíços fêmeas (Mus musculus) (8-10 semanas; 25-30g), foram infectados com

promastigotas de L. chagasi, incubados com LCA à 37°C em 5% CO2, e após

24 e 72h, as células foram quantificadas sob microscopia óptica. Os

sobrenadantes destas culturas foram analisados quanto à produção de óxido

nítrico (NO) através da reação de Griess. Os dados de [Ca2+]i são

representativos de um experimento (WinMDI 2.9) e os demais dados,

expressos como média ± erro padrão da média, foram analisados pelo teste t-

student (GraphPad Prisma 5.0) e significativos quando p<0,05. Este trabalho

foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal da UFPB sob o

número de protocolo 0410/10.

Resultados:

A LCA apresentou atividade sobre formas promastigotas de L. chagasi (IC50

9,83 ± 1,13µg/mL), induzindo fragmentação do DNA genômico após

tratamento com a concentração de 8x IC50. Foi observado um aumento no

número de células com níveis de [Ca2+]i detectáveis após uma hora de

exposição à LCA, sendo este aumento de 25,4; 23,4 e 25,8% para as

concentrações de 1x, 2x e 4x IC50, respectivamente, quando comparados ao

controle. A LCA reduziu o índice de infecção de MØs infectados com L.

chagasi após 24 horas tratamento com a concentração de 20µg/mL (81,67%),

assim como após 72 horas de tratamento, tanto para a concentração de

5µg/mL (93,38%) quanto para a de 20µg/mL (99,54%), quando comparadas

ao controle. Esta atividade antiamastigota foi independente da produção de

NO.

Conclusão:

A LCA possui atividade antileishmania in vitro sobre a espécie L. chagasi,

especialmente sobre as formas amastigotas, que são aquelas presentes no

hospedeiro mamífero. Portanto, esta neolignana apresenta uma potencialidade

na terapêutica das leishmanioses.

Apoio Financeiro:

CNPq e CAPES.

Gerado em: 2014-5-22 11:31:08

10.0105 - PERFIL CROMATOGRAFICO POR CLAE-DAD E

ATIVIDADE BIOLOGICA DAS FRAÇÕES POLARES DA

ENTRECASCA DE Caesalpinia pyramidalis (Poincianella pyramidalis

(Tul.) L.P.Queiroz var. pyramidalis).

Moraes, S. Z. C. , Santos, A. L. L. M. , Dias, A. S. , Shan, A. Y. K. V. ,

Estevam, C. S. ,

Fisiologia - UFS

Introdução:

Poincianella pyramidalis, planta endêmica da caatinga, denominada

popularmente como catingueira e caracterizada pelo valor medicinal (folhas,

flores e casca para febre, doenças estomacais e diuréticos). Sabe-se que as

plantas constituem uma importante fonte de compostos bioativos com

constituições químicas diferentes, e diversas propriedades biológicas com

eficácia comprovada por isso, o presente estudo utilizou o saber popular como

base, para analisar a atividade antioxidante do extrato e frações das

entrecascas da P. pyramidalis bem como analisar o perfil cromatográfico por

CLAE-DAD da fração mais ativa. Também foi feita uma triagem

antimicrobiana do extrato etanólico (EHE) a fim de revelar a inibição de

organismos frente à microorganismos.

Objetivos:

Traçar o perfil fitoquímico, avaliar a atividade antioxidante, biológica e

analisar o perfil cromatográfico por CLAE-DAD das frações polares da

entrecasca de P. pyramidalis.

Métodos:

Os experiementos foram realizados in vitro, sem a utilização de animais e

pessoas. O extrato hidroetanólico foi obtido por maceração com etanol 90% e

as frações hexânica (FHX), clorofórmica (FCL), acetato de etila (FAE) e

hidrometanólica (FHM) foram obtidas através de partição líquido-líquido. A

atividade antioxidante foi medida através dos métodos de redução do radical

livre DPPH (2,2-difenil-1-picrildridrazila) e TBARS (reação dos metabólitos

do ácido tiobarbitúrico). Os dados foram expressos em percentagem de

inibição (PI) do radical DPPH e índice de atividade antioxidante (IAA), e os

valores de CE50 (concentração do extrato que consome 50% de radical livre)

foram calculados a partir de curvas cinéticas. A quantificação de fenóis totais

foi realizada pelo método de Folin Ciocautel. Para determinação da atividade

antimicrobiana utilizou-se a cepa ATCC 43504 de Helicobacter pylori,

mantida em TSB (Tripic soy broth) e congelada à -20ºC, doada pelo Instituto

Nacional de Controle de Qualidade em Saúde (INCQS), Fiocruz/RJ e a

cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-DAD) foi utilizada a fim de

presumir a composição química dos extratos e frações da espécie. Os dados

foram apresentados como média + desvio padrão e as diferenças entre os

grupos foram determinadas por ANOVA seguida do teste de Tukey (p<0,05).

Resultados:

Dentre todas as amostras obtidas, a FAE foi a que apresentou o maior índice

de atividade antioxidante (IAA) para os dois modelos de inibição, sendo 90%

e 50% respectivamente. Esta fração também apresentou maior teor de fenóis

totais, 3,65 ± 1,32 mg EAG/g extrato. O cromatograma e o espectro de UV

dos picos majoritários nos tempos de retenção de 30,83 min e 34,59 min

sugerem a presença de flavonas na FAE. Frente aos microorganismos

Escherichia coli e Sthaphylocous aureus o EHE da P. pyramidalis possui

atividade antimicrobiana com halos de inibição do crescimento bacteriano

respectivamente de 10,6 mm±0,57 e 12,6 mm ± 0,57 e a tetraciclina,

antibiótico utilizado como controle positivo na concentração 30 μg /mL,

apresentou halos de inibição de 40,0 ±0,5mm.

Conclusão:

O extrato e frações de Poincianella pyramidalis apresentam efeito

antioxidante, que está relacionado com a quantidade de metabólitos

secundários presentes no seu extrato bruto e frações, o que embasa

cientificamente o uso medicinal desta planta pela população.

Apoio Financeiro:

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq e

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES.

Gerado em: 2014-5-22 11:31:08

10.0106 - DETERMINAÇÃO DO PERFIL CROMATOGRAFICO E

ATIVIDADE BIOLÓGICA DAS FRAÇÕES POLARES DA

ENTRECASCA DE Croton blanchetianus Baill E Caesalpinia ferrea.

Santos, P. A. L. , Santos, A. L. L. M. , Santos, L. C. , Silva, A. , Moraes, S.

Z. C. , Dias, A. S. , Santos, D. T. V. , Shan, A. Y. K. V. , Antoniolli, A. R. ,

Estevam, C. S. ,

Fisiologia - UFS

Introdução:

As plantas Croton blanchetianus Baill e Caesalpinia ferrea, endêmicas do

bioma caatinga, denominadas como marmeleiro e pau-ferro respectivamente

são caracterizadas pelo valor medicinal, populações locais utilizam partes

como folhas, flores e casca para febre, doenças estomacais e como diuréticos,

sabe-se que a presença de metabólitos secundários como taninos, flavonóides

estão associados as sua propriedades medicinais.

Objetivos:

O presente estudo visou a análise do potencial antioxidantedas frações da

entrecasca das C. blanchetianus Baill e C. ferrea e o potencial antimicrobiano

dos extratos etanólicos das duas plantas.

Métodos:

O presente estudo foi realizado in vitro. A prospecção fitoquímica e a

cromatografia líquida de alta eficiência foram realizadas a fim de presumir a

composição química dos extratos e frações, os índices de fenóis totais foram

medidos pela reação de Folin Ciocalteu, para avaliação da atividade

antioxidante foram usados o modelo de captura do 1,1 difenil-2-picril

hidrazina e a reação de metabólitos do ácido tiobarbitúrico (lipoperoxidação),

para atividade antimicrobiana foi feita a difusão em ágar. Os dados foram

tratados com ANOVA seguido pós-teste de Tukey p<0,05.

Resultados:

Os resultados obtidos na prospecção fitoquímica sugeriram a presença dos

flavonoides, taninos e terpenos que já estavam descritos na literatura para esta

planta. As frações hidrometanólica e acetato de etila das duas plantas

apresentaram captura do radical livre semelhante ao controle positivo ácido

gálico (p<0,05%). Estas frações foram as mesmas que apresentaram os

maiores índices de fenóis totais.Quanto à atividade de lipoperoxidação

somente a fração acetato de etila do Caesalpinia ferrea apresentou uma

inibição de 60%. No teste antimicrobiano somente o C. ferrea demostrou

resultado positivo frente aos microrganismos escherichia coli e

Sthaphylococcus aureus com halos de inibição do crescimento bacteriano

respectivamente de 10,3 mm±0,57 e 11,3 mm ± 0,57. O espectro de UV dos

picos majoritários dos tempos de retenção de 30,83 min e 34,59 min sugerem

um perfil de flavonas na fração acetato de etila.

Conclusão:

Os estudos embasam o uso popular destas plantas, porém nota-se a

necessidade de estudos complementares para relacionar os metabólitos

secundários aos efeitos citados.

Apoio Financeiro:

CNPq-CAPES.

Gerado em: 2014-5-22 11:31:08

10.0107 - EFEITO ANTI-HIPERTENSIVO DO EXTRATO SECO DE

Schinus terebinthifolius, Raddi (Anacardiaceae).

Santos, J. D. , Valença, V. B. , Costa, C. P. , Wanderley, A. G. , Araújo, A.

V. ,

Fisiologia e Farmacologia - UFPE

Introdução:

As alterações que ocorrem durante a hipertensão arterial são, em parte, devido

ao estresse oxidativo. Evidências epidemiológicas sugerem a existência de

uma correlação negativa entre a incidência de doenças cardiovasculares e o

consumo de alimentos ricos em polifenóis, devido a sua propriedade

antioxidante. Schinus terebinthifolius, Raddi, conhecida popularmente como

aroeira, é rica nestes componentes polifenólicos.

Objetivos:

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito anti-hipertensivo do extrato seco

da casca do caule de Schinus terebinthifolius, Raddi, em ratos hipertensos 2R-

1C.

Métodos:

23076.055205/2011-13 Foi determinado o conteúdo total de fenóis e de

flavonoides e taninos hidrolisáveis e condensados. Foi realizada também uma

análise dos constituintes por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE).

Foram utilizados ratos Wistar machos (180-200g) que foram submetidos à

cirurgia para implantação de um clipe de prata na artéria renal (hipertensão

2R-1C). Os animais do grupo controle (Sham) foram submetidos ao mesmo

procedimento cirúrgico, mas sem a implantação do clipe. Quatro semanas

após a cirurgia, os ratos tiveram sua pressão arterial aferida e aqueles que

apresentavam pressão arterial sistólica ≥ 150 mmHg foram considerados

hipertensos e incluídos no estudo. Os animais foram tratados durante 4

semanas com água ou extrato seco de S. terebinthifolius (ESSt 400 mg/kg/dia,

v.o.) e tiveram sua pressão arterial medida semanalmente. Os protocolos

experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética em Experimentação

Animal da UFPE (055205/2011-13). A diferença estatística entre os grupos

foi verificada através da análise de variância (ANOVA), seguida, quando

necessário, pelo teste de Newman-Keuls. O nível de significância para

rejeição da hipótese de nulidade foi sempre ³ 5%.

Resultados:

Na análise fitoquímica, foram encontradas grandes quantidades de compostos

fenólicos (conteúdo total de fenóis: 320,21 ± 9,48 mgEAT/g; taninos

hidrolisáveis: 319,74 ± 9,45 mgEAT/g; taninos condensados: 358,13 ± 3,48

mgEC/g e flavonóides: 2,72 ± 0,15 mgER/g). Os animais 2R-1C tratados com

água tiveram sua pressão arterial sistólica elevada (oitava semana: 213,92 ±

8,08, n=9, p<0,001) quando comparados ao grupo Sham (oitava semana:

129,96 ± 5,16, n=8). O tratamento por 28 dias com o ESSt reduziu os níveis

de pressão arterial dos animais (PAS na oitava semana: 178,55 ± 11,34, n=12,

p<0,001) quando comparados ao grupo 2R-1C.

Conclusão:

o tratamento por 28 dias com o ESSt apresenta efeito anti-hipertensivo em

ratos hipertensos 2R-1C, efeito que pode ser atribuído à presença de

compostos fenólicos encontrados no extrato.

Apoio Financeiro:

FACEPE e CNPq.

Gerado em: 2014-5-22 11:31:08

10.0108 - Síntese e avaliação das atividades citotóxicas e anti-microbiana

de novas moléculas tiazolidina-2,4-dionas. ¹Santos, K. L., ¹Alcântara,

S.C., ¹Lima, G. S. A., ¹Silva, G. P., ¹Silva, A.L, ¹Ribeiro, A. G. ¹Pitta, I.

R., ¹Lima, M. C. A. - Departamento de Antibióticos, UFPE, Recife/PE.

Santos, K. L. , Lima, G. S. A., Alcantara, S. C. , Silva, A. L. , Silva, G. P. ,

Ribeiro, A. G. , Pitta, I. R. , Lima, M. C. A. ,

Departamento de Antibióticos - UFPE

Introdução:

As tiazolidinonas são derivados tiazolidínicos contendo um grupo carbonila

nas posições 2,4 e/ou 5 que pertecem a um importante grupo de compostos

heterocíclicos. Sua utilização de síntese orgânica é de grande importância,

tendo em vista as diversas atividades biológicas relacionadas a seus análogos

estruturais, tais como anticancerígena, antiinflamatória, anticonvulsivante,

hipoglicemiante, antiviral e antibacteriana. Devido ao aumento do número de

infecções a ação antimicrobiana é um forte aliado no combate a resistência

adquirida por esses microrganismos. Neste contexto encontram-se os

compostos tiazolidínicos, cuja literatura descreve excelentes resultados como

antibacterianos.

Objetivos:

Verificar a citoxicidade in vitro de novos derivados ATZDs da série 5-

benzilideno-3-benzil-tiazolidina-2,4-diona (LPSF/RA) pelo método MTT e

avaliar a atividade antimicrobiana in vitro pela técninca de difusão em disco.

Métodos:

Não trabalhamos com experimentação animal, nem com experimentação

humana. Para realização do MTT (3-(4,5-dimetil-2-tiazol)-2,5-difenil-2-H-

brometo de tetrazolium) foram utilizadas três linhagens tumorais tais como

HT29 (carcinoma de cólon-humano), HEp-2 (carcinoma de laringe-humano) e

NCI H-292 (câncer de pulmão-humano) que foram obtidas do Banco de

células do Rio de Janeiro, tendo sido cultivadas em meio DMEN,

suplementados com 10% de soro fetal bovino e 1% de antibióticos, mantidas

em estufa a 37 °C e atmosfera contendo 5% de CO2. Na avaliação in vitro da

atividade antimicrobiana das amostras foi inicialmente aplicada a técnica de

difusão em disco onde as cepas selecionadas para o teste foram

Staphylococcus aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922,

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853.

Resultados:

As amostras apresentaram baixa citotoxicidade frente às células testadas na

concentração de 25µg/mL. Após 24 horas de cultivo não se observou a

formação de halo de inibição de crescimento com os derivados testados,

demostrando que as substâncias não apresentaram atividade antibacteriana

para nenhuma das cepas testadas. Embora o teste de Disco Difusão seja um

método qualitativo e na prática seja utilizada para realizar uma triagem, a

sensibilidade da técninca foi confirmada pela observação de halo de inibição

para o controle positivo e ausência de halo para o controle negativo.

Conclusão:

Estes resultados demonstram que esta série química possui baixa ou nenhuma

atividade frente às linhagens celulares tumorais humanas com exceção dos

derivados LPSF/RA-12 (Linhagem HT29) e LPSF/RA-24 (Linhagem NCI H-

292 e HEP-2) que apresentaram moderada ação citotóxica. Por outro lado,

investigações estruturais a cerca dessas moléculas podem ser importantes para

aumentar as chances dessas substâncias se tornarem antimicrobianos.

Apoio Financeiro:

CNPq

Gerado em: 2014-5-22 11:31:08

10.0109 - AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE ANTITUMORAL IN VIVO

DE ANÁLOGOS FENÓLICOS SINTETICOS

Xavier, A. L. , Simões, S. M. Q. , Brito, M. T. , Moura, A. P. G. , Beltrão,

D. M. , Emery, F. S. , Almeida, R. N. , Sobral, M. V. ,

Programa de Pós-Graduação em Produtos Naturais e S - UFPB Curso de

Graduação em Farmácia - UFPB Programa de Pós Graduação em

Ciências Farmacêutica - USP

Introdução:

Os produtos naturais estão disponíveis em abundância e oferecem as melhores

possibilidades para o encontro de substâncias com interesse terapêutico. A

partir disso, pesquisas vêm mostrando a importante atividade antitumoral de

compostos fenólicos, por interagirem com a via do fator de transcrição nuclear

NF-κB, que tem sua atividade excessiva sendo atribuída a doenças

oncológicas. O estudo de um potencial fármaco que atue nesta via e leve à

morte celular programada das células doentes será muito útil. Então, três

compostos fenólicos obtidos por síntese (MTB03, MTB06 e MTB07) foram

encaminhados para uma triagem antitumoral.

Objetivos:

Realizar a triagem antitumoral in vivo no modelo de Carcinoma Ascítico de

Ehrlich dos compostos sintéticos selecionados.

Métodos:

Comitê de Ética em Pesquisa Animal do CBiotec/UFPB sob Nº CEPA N°

1311/11. Foram utilizados camundongos suíços, fêmeas, com 8 semanas de

vida e pesando de 28 a 42 gramas. O experimento teve como primeiro dia para

o implante das células do carcinoma ascítico de Ehrlich, na cavidade

peritoneal dos camundongos, seguido de 9 dias de tratamento e o 11º dia para

a eutanásia dos animais. Como inóculo, ou seja, a concentração tumoral

administrada na ocasião do implante, utilizou-se a 2x106 células/ 500 µL,

coletadas de um camundongo com 7 dias de implante, cujo inóculo inicial foi

de 2x106 células/ mL. A droga padrão utilizada (correspondente ao “controle

positivo”), foi a substância 5-Fluorouracila (5-FU), na dose de 25 mg/kg. Já os

parâmetros analisados foram: massa tumoral (em gramas), variação ponderal

(em gramas – variação negativa correspondendo a perda de peso), volume

tumoral (drenado, em mL), viabilidade celular (contagem de células, na

unidade x 106 células/mL). Foram testados quatro animais por grupo, uma vez

que o presente experimento corresponde a uma triagem. Os resultados obtidos

foram expressos como média ± erro padrão da média (SEM) e analisados pelo

teste ANOVA, com pós-teste de Dunns. Os resultados foram considerados

significativos quando p < 0,05. O projeto foi aprovado no Comitê de Ética em

Pesquisa Animal do CBiotec sob Nº CEPA N° 1311/11.

Resultados:

Os valores correspondentes à massa tumoral, variação ponderal, volume

tumoral e viabilidade celular estão apresentados respectivamente, para os três

compostos: MTB03: 0,0± 0,0g, 1,17±0,15 g, 0,0± 0,0 mL, 12,85±10,26 x 106

células/ mL; MTB06: 3,93± 0,43 G, 4,53±0,38 g, 2,33±0,85 mL,

162,00±33,32 x 106 células/ mL; MTB07: 5,78± 1,74 g, 2,82±0,97 g,

4,18±1,53 mL, 130,70±73,15 x 106 células/ mL.

Conclusão:

Pelos resultados observados, é possível verificar que a melhor substância

dentre os compostos testados foi a MTB03, analisando-se principalmente os

parâmetros volume tumoral e viabilidade celular. Sendo assim MTB03 será

selecionada para o estudo completo (com três doses para cada substância, e

com 10 animais por grupo).

Apoio Financeiro:

CNPq – Chamada Universal.

Gerado em: 2014-5-22 11:31:08

10.0110 - Investigação das atividades antimotilidade e antidiarreica de

Nanuza plicata (Mart.) L. B. Smith & Ayensu (Velloziaceae)

Machado, F. D. F. , Sousa, T. M. , Sales, I. R. P. , Tavares, J. F. , Batista,

L. M. ,

Centro de Ciências da Saúde CCS - UFPB

Introdução:

Introdução: Nanuza plicata pertence à familia Velloziaceae e é popularmente

conhecida como ‘’Canela d’ema’’. Estudos fitoquímicos com a espécie N.

plicata demonstraram o isolamento de dois derivados do 3-geranil-4-

hidroxibenzoato e três biflavonóides: amentoflavona, hinokiflavona e

podocarpusflavone. Também foram identificadas uma flavona e duas

biflavonas (luteolina, amentoflavona) e um novo biflavonóide, o qual foi

atribuído o nome trivial de nanuzoflavona.

Objetivos:

Objetivos: Esse trabalho teve por objetivo avaliar a atividade do extrato

etanólico bruto obtido das partes aéreas de Nanuza plicata (EEtOH-Np) frente

à motilidade gastrintestinal e a diarreia induzida por óleo de rícino.

Métodos:

CEUA- 0507/12 Métodos: Para isso foram utilizados Camundongos Swiss

machos (Mus musculus) pesando entre 25–35 g e todos os procedimentos

experimentais foram aprovados pelo Comitê de Ética em Uso Animal (CEUA)

com certidão número 0507/12. Para avaliação da atividade do EEtOH-Np no

esvaziamento gástrico e no trânsito intestinal normal, os animais foram

submetidos a um jejum de 12h, divididos em 6 grupos e tratados com controle

negativo (solução tween 80 a 12%); controle positivo (loperamida - 5 mg/kg )

e com o EEtOH-Np (62,5, 125, 250 e 500 mg/kg), respectivamente . Após 1h

do tratamento fez-se a administração de uma supensão de vermelho de fenol

0,05% em carboximetilcelulose 1,5% (v.o). Na sequência, foi realizada a

avaliação do EEtOH-Np frente ao modelo de diarreia induzida por óleo de

rícino, sendo os animais divididos conforme citados anteriormente. Após 1

hora do pré-tratamento, foi realizada a indução da diarreia por administração

do óleo de ricino (10ml/kg) (v.o.) e cada animal foi colocado em uma caixa

separada para avaliação dos bolos fecais durante 4 horas e posteriormente

foram eutanasiados para cálculo do índice de evacuação, que foi calculado de

acordo com a quantificação dos episódios sólidos, semi sólidos ou líquidos

IE=(sx1+ssx2+Lx3).

Resultados:

Resultados: observou-se que EEtOH-Np não alterou em nenhuma das doses

avaliadas, a porcentagem de esvaziamento gástrico, para o EEtOH- NP 62,5

(90,0 ± 3,4) ; EEtOH- NP 125 (91,2 ± 8,7); EEtOH-NP 250 (89,1 ± 7,7);

EEtOH-NP 500 (90,4 ± 7,0), quando comparado ao controle negativo (90,3 ±

5,0). O mesmo resultado foi observado para a porcentagem do trânsito em que

não houve diferença significativa das porcentagens das doses administradas

EEtOH- NP 62,5 (54,8 ± 5,3); EEtOH- NP 125 (57,5 ± 6,5); EEtOH-NP 250

(55,5 ± 9,0); EEtOH-NP P500 (52,1 ± 7,4) quando comparadas ao controle

negativo ( 54,3 ± 3,4), demonstrando que o extrato não alterou a motilidade

gastrintestinal. Em relação à atividade antidiarreica, todas as doses avaliadas

62,5 (5,4 ± 1,5); 125 (5,7 ± 1,6); 250 (5,7 ± 1,4); 500 (5,6 ± 1,0) não alteraram

o índice de evacuação quando comparadas ao controle negativo (11,3 ± 4,3).

Conclusão:

Conclusão: Diante dos resultados obtidos conclui-se que o EEtOH-Np não

alterou o esvaziamento gástrico e o trânsito intestinal e não apresentou

atividade antidiarreica.

Apoio Financeiro:

Apoio financeiro: UFPB, CAPES, PgPNSB

Gerado em: 2014-5-22 11:31:08

10.0111 - TRIAGEM FITOQUÍMICA E ATIVIDADE

FOTOPROTETORA DE Euphorbia hirta L. (EUPHORBIACEAE).

Bezerra, G. S. , Guimaraes, A. L. , Oliveira, A. P. , Oliveira, F. G. S. ,

Cruz, D. R. R. , Macedo, S. K. S. , Almeida, J. R. G. S. , Araujo, E.C.C.,

Programa de pós-graduação em Recursos Naturais do - UNIVASF

Introdução:

Euphorbia hirta é uma espécie pertencente à família Euphorbiaceae, conhecida

popularmente como “erva de Santa Luzia”, é uma planta medicinal cujo uso

tradicional tem sido relatado no tratamento de tosse, coriza, asma, infecções

nos brônquios, reclamações intestinais, infestações por vermes, feridas, pedras

nos rins e furúnculos.

Objetivos:

O presente estudo tem como objetivo realizar uma triagem fitoquímica e

avaliar a atividade fotoprotetora in vitro do extrato etanólico bruto (EtOH) das

partes aéreas de E. hirta, bem como das fases (Hex, CHCl3 AcOEt, MeOH).

Métodos:

Não se aplica a utilização de animais ou humanos. O material vegetal (folhas,

flores e caule) foi coletado na cidade de Petrolina-PE, e a exsicata da espécie

foi depositada no HVASF. O estudo iniciou-se com a secagem, pulverização e

preparação do extrato etanólico das partes aéreas através da técnica de

maceração. Em seguida o extrato etanólico foi submetido a um sistema de

cromatografia à vácuo com os solventes hexano, clorofórmio, acetato de etila

e metanol para obtenção das fases. Para a realização da triagem fitoquímica os

extratos foram avaliados em placas de cromatografia em camada delgada para

verificação da presença das principais classes de metabólitos secundários de

plantas. Para avaliar a atividade fotoprotetora os extratos foram previamente

secos e, em seguida, diluídos em etanol absoluto, obtendo-se concentrações de

5, 25, 50 e 100 mg/L. A leitura foi realizada através de varredura em

espectrofotômetro entre os comprimentos de 260 a 400 nm. Posteriormente,

foi calculado o Fator de Proteção Solar (FPS) das amostras. Os experimentos

foram realizados em triplicata.

Resultados:

A análise do Extrato etanólico bruto e demais fases na triagem fitoquímica

indicou a presença de terpenos, o que está de acordo com estudos realizados

com outras espécies do gênero. O material vegetal analisado também mostrou

resultado positivo para antracenos e derivados, cumarinas, naftoquinona e

flavonóides. Sobre a atividade fotoprotetora os valores obtidos nos extratos e

fases de E. hirta foram considerados razoáveis quando comparados ao valor

mínimo estabelecido pela ANVISA. Dentre estes valores, os maiores foram

observados nas concentrações mais altas como na fração Eh-MeOH com FPS

igual a 9,847±1,731 para a concentração de 100 mg/mL. Todos os resultados

demonstrados por E. hirta mostram que são necessárias doses relativamente

altas para que haja uma melhor fotoproteção.

Conclusão:

Os resultados deste estudo demonstram que as classes de metabólitos

secundários identificadas na triagem podem ter relação com a atividade

fotoprotetora da fase Eh-MeOH. Desta forma, percebe-se que os materiais

vegetais de Euphorbia hirta coletados em Petrolina-PE possuem um perfil

fitoquímico semelhante a outras espécies do gênero Euphorbia. Um estudo

fitoquímico mais aprofundado torna-se necessário para uma melhor discussão

em relação aos constituintes químicos desta planta, por fazer parte da cultura

da região e apresentar um enorme potencial terapêutico.

Apoio Financeiro:

CAPES/CNPq/BNB.

Gerado em: 2014-5-22 11:31:08

10.0112 - AVALIAÇÃO DO ENVOLVIMENTO DOS RECEPTORES

OPIÓIDES NA ATIVIDADE ANTINOCICEPTIVA DO ÓLEO

ESSENCIAL DE Hyptis martiusii Benth (CIDREIRA-BRAVA)

Oliveira, C. D. M. , Ramos, A. G. B. , Neto, L. J. L. , Tintino, S. R. , Silva,

A. A. , Morais, L. P. , Menezes, I. R. A. ,

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA BIOLÓGICA - URCA

Introdução:

A dor é definida como uma experiência sensorial desagradável, associada a

dano tecidual, sendo os receptores opióides um dos importantes receptores

que atuam na regulação normal da sensação da dor. A avaliação do potencial

terapêutico de plantas medicinais para este estímulo, foram comprovadas

através de ensaios pré-clínicos com animais, partindo de pesquisas

etnofarmacológicas sobre espécies vegetais utilizadas na medicina popular.

Dentre essas espécies, destaca-se o Hyptis martiusii Benth (cidreira-brava),

pertencente ao gênero Hyptis e família Lamiaceae, utilizada pelas

comunidades da Chapada do Araripe para o tratamento de doenças do trato

gastrointestinal, além de apresentar propriedades farmacológicas já descritas

na literatura como atividade antiulcerogênica, antimicrobiana, antitumoral,

citotóxica e inseticida.

Objetivos:

Verificar o envolvimento do sistema opióide no efeito antinociceptivo do óleo

essencial de Hyptis martiusii Benth (OEHM).

Métodos:

18/2012.2 O projeto submetido ao Comitê de Ética em Pesquisa Animal

(CEUA) da Universidade Regional do Cariri, sendo aprovado sob o número

18/2012.2. Foram utilizados cinco grupos de camundongos (n=6) Mus

musculus, albinos, da linhagem Swiss de ambos os sexos, com massa corpórea

entre 20-30g. Foram pré-tratados com morfina (5 mg/kg, s.c), salina

(0,1mL/10g v.o.) e o óleo essencial (OEHM 100mg/kg v.o.), administrados 1h

antes de receberem óleo de mostarda e após 1,5h aplicada a morfina é

aplicado o agente flogístico à 0,75% em salina 0,9% (50 μl/animal i.c.),

através de uma cânula de ponta arredondada. O papel do sistema opióide foi

avaliado pela administração em dois grupos de naloxona (2 mg/kg, i.p.) 30

min antes de receber morfina (5 mg/kg, s.c.) e concomitantemente OEHM

100mg/kg no outro grupo. Após 30 min da administração da morfina e 1,5 h

após a administração do óleo essencial, os animais receberam óleo de

mostarda e após 20 minutos os comportamentos como lamber abdômen,

arrastar-se contra o solo, contorção e retrações abdominais foram contados. A

análise estatística utilizada foi ANOVA de duas vias utilizando o teste de post

hoc de Bonferroni, utilizando o software Prisma para Windows.

Resultados:

O número de comportamentos relacionados a expressão da dor induzida pelo

óleo de mostarda, foi reduzido em 83,47% na morfina e 61,61% no OEHM

em relação ao grupo salina, comprovando sua ação antinociceptiva. No grupo

naloxona com morfina, o antagonista reverteu o efeito analgésico da morfina

aumentando em 1,13%, os comportamentos relacionados a dor,

assemelhando-se ao controle negativo. Na associação naloxona e OEHM,

também houve uma reversão do efeito antinociceptivo do óleo essencial pelo

antagonista, evidenciado pela redução de apenas 0,64% da expressão dos

comportamentos de dor.

Conclusão:

O OEHM na concentração de 100mg/kg apresenta atividade antinociceptiva,

atuando através dos receptores opióides.

Apoio Financeiro:

CAPES, CNPq, FUNCAP.

Gerado em: 2014-5-22 11:31:08

10.0113 - Estudo da Atividade Antimicrobiana da Spathodea

campanulata P. Beauv

Silva, A. T. , Sena, K. X. F. R. , Albuquerque, J. F. C. ,

Departamento de Antibióticos - UFPE

Introdução:

Spathodea campanulata (Bignoneaceae) é uma planta originária da África

tropical, de grande porte com altura de 20 a 25 metros, tem copa frondosa com

grandes folhas de verde intenso, é a única representante da sua espécie. Suas

flores são grandes e belas variando do vermelho, alaranjado ao amarelo, sendo

esta última cor mais rara. Popularmente é conhecida como bisnagueira,

tulipeira-do-gabão, tulipa africana, xixi de macaco ou chama-da-floresta. É

uma planta invasiva dependendo do terreno onde é plantada, muito usada na

ornamentação de ruas e casas. É uma espécie tóxica e pode causar a morte de

animais por isso consta da lista da IUCN como as cem piores espécies

invasoras do mundo Suas grandes vagens lenhosas comportam várias

sementes aladas, o que facilita a propagação pelo vento. Isto favorece a

perpetuação da espécie em diversas áreas urbanas ou florestais.

Objetivos:

Este estudo teve como finalidade determinar a atividade antimicrobiana das

flores da Spathodea campanulata.

Métodos:

NÃO TEM CÓDIGO PORQUE OS TESTES FORAM REALIZADOS COM

MICRO-ORGANISMOS As flores foram colhidas no jardim do Campus da

Universidade Federal de Pernambuco, foram secas à temperatura ambiente, à

sombra, em local arejado e protegido de insetos ou animais. Após secagem o

material foi moído, pesado e extraído com hexano, seguido de etanol retirando

assim, os componentes apolares. O resíduo foi extraído com etanol, evaporado

até secura e testado contra nove micro-organismos de diferentes classes:

Gram-positivos: Staphylococcus aureus, Micrococcus luteus, Bacillus subtilis,

e Enterococcus faecalis; Gram-negativos: Pseudomonas aeruginosa,

Esherichia coli, e Serratia marcescens; micro-organismo álcool ácido

resistente: Mycobacterium smegmatis e a levedura Candida albicans. A

atividade antimicrobiana foi avaliada qualitativamente pelo método de difusão

em disco. Discos de 6 mm de diâmetros foram impregnados com 10 µL/mL

de soluções dos produtos à concentração de 200 mg/mL. Os discos foram

colocados sobre a superfície do meio Müeller-Hinton, semeados com os

micro-organismos-teste e suspensos previamente em soro fisiológico até

turbidez de 0,5 da escala McFarland. DMSO foi o controle e ciprofloxacina e

cetoconazol a droga padrão. As placas foram incubadas a 37 °C durante 24

horas (bactérias) e 30 °C durante 24-48 horas (leveduras). Os testes foram

realizados em triplicatas e os resultados expressos em mm foram calculados

pela média aritmética do diâmetro dos halos de inibição formado ao redor dos

discos nas três repetições (Amer. J. Clin. Pathol, 45: 493-496, 1966).

Resultados:

A fração etanólica apresentou os seguintes resultados Staphylococcus aureus

(10 mm), Micrococcus luteus (13 mm), Enterococcus faecalis (8 mm) todos

Gram-positivos. Os micro-organismos Gram-negativos, os álcool ácido

resistente e a levedura Candida albicans não foram inibidos pelo respectivo

extrato. Entre os nove micro-organismos testados a fração etanólica inibiu o

crescimento de apenas três deles, sendo baixa para a maioria dos micro-

organismos testados.

Conclusão:

Neste teste foram considerados apenas os valores iguais ou acima de 10 mm.

Assim, a fração etanólica apresentou resultados inibitórios consideráveis

apenas para dois micro-organismos Gram-positivos, portanto menos de 30%

das espécies testadas.

Apoio Financeiro:

CNPq

Gerado em: 2014-5-22 11:31:08

10.0114 - POTENCIAL ANTIOXIDANTE E TEOR DE FENÓIS

TOTAIS DO EXTRATO DE Senna alata e Senna lechriosperma.

Pereira, J. J. S. , Pereira, A. P. C. , Silva, E. C. N. , Silva, M. V. , Correia,

M. T. S. ,

Departamento de Bioquímica - UFPE

Introdução:

A utilização das plantas com atividades terapêuticas é uma das práticas mais

antigas empregadas pelo homem. As espécies de Senna são amplamente

encontradas no bioma da caatinga e usuais na medicina popular no combate a

infecções bacterianas, fúngicas, como purgativas, além de propriedades

antialérgica e antinflamatória com grande presença de compostos

antracênicos.

Objetivos:

Diante da presença de uma variedade de compostos bioativos e da necessidade

de investigação de seus aspectos químicos, objetivou-se o estudo comparativo

do extrato metanólico das duas espécies de Senna frente ao potencial

antioxidante.

Métodos:

Para elaboração do presente trabalho não foi necessária a aprovação do

Comitê de Ética Experimental da Instituição no local. O material vegetal foi

coletado no Parque Nacional do Catimbau, PE-Brasil, processado,

identificado e incorporado ao acervo do Herbário do Instituto Agronômico de

Pernambuco (IPA). Em seguida, as cascas foram secas a temperatura

ambiente, e processadas em moinho de bancada para obtenção do extrato

metanólico (EM). Foi realizada a dosagem do teor de compostos fenólicos

pelo método de Folin–Ciocalteu, sendo os resultados expressos como μg de

equivalentes de ácido gálico (EAG). Posteriormente, foi testada a capacidade

antioxidante pelo método de fosfomolibdenio e Peróxido de Hidrogênio com

os padrões: ácido gálico (AG) ácido ascórbico (AA).

Resultados:

Senna alata (SA) e Senna lechriosperma (SL) apresentaram dosagem de fenóis

totais de 0,19449 ug/g e 0,26108 ug/g respectivamente. Pelo método

fosfomolibdenio SA apresentou 72.03± 1,33% e 84,67±2,81%, e uma IC50

para avaliação do peróxido de hidrogênio de 13,7± 2,03 e 15,53 ± 4,18, para

SA e SL respectivamente, demonstrando que Senna alata apresenta um

potencial antioxidante melhor do que Senna lechriosperma.

Conclusão:

Os resultados demonstram que ambas as espécies de Senna possuem elevado

potencial antioxidante bem como uma alta dosagem de polifenóis totais, sendo

duas espécies promissoras para produção de novos fármacos.

Apoio Financeiro:

FACEPE, CAPES, CNPQ.

Gerado em: 2014-5-22 11:31:32

10.0115 - SÍNTESE E AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE CITOTÓXICA

IN VITRO DO DERIVADO TIAZOLIDÍNICO 5-(2-BROMO-3-

HIDROXI-4-METOXIBENZILIDENO)-TIAZOLIDINA-2,4-DIONA

1Santiago, P.B.G.S., 1Egito, M.S., 2Militão, G.C.G., 1Silva,T.G.,

1Albuquerque, J.F.C., 1Departamento de Antibióticos, 2Departamento

de Farmacologia e Fisiologia, UFPE, Recife/PE

Santiago, P. B. G. S. , Egito, M. S. , Silva, T. G. , Militao, G. C. G. ,

Albuquerque, J. F. C. ,

Departamento de Antibióticos - UFPE Departamento de Farmacologia e

Fisiologia - UFPE

Introdução:

As tiazolidinas, de modo geral, possuem variadas propriedades

farmacológicas, como antimicrobiana, antiparasitária, antifúngica, anti-

inflamatórias, inclusive anticâncer. A variação ou modificação molecular

realiza mudanças estruturais na molécula original, permitindo avaliar a

influência exercida pela modificação de um átomo ou grupo de átomos, sobre

a atividade biológica da droga. Com vistas nas propriedades citotóxicas desses

compostos, uma nova substância foi sintetizada a partir da condensação da

tiazolidina-2,4-diona com o 2-Bromo-3-Hidroxi-4-metoxibenzaldeído. A

avaliação da atividade citotóxica foi realizada utilizando as células de

linhagem NCIH-292 (linhagem contínua de células muco epidermóides).

Objetivos:

Sintetizar, purificar e testar o composto 5-(2-Bromo-3-Hidroxi-4-

metoxibenzilideno)-tiazolidina-2,4-diona (Ju-623) contra a linhagem celular

NCIH-292.

Métodos:

O presente trabalho não utilizou para suas pesquisas, em qualquer etapa,

nenhuma experimentação humana ou animal. O composto Ju-623 foi

sintetizado partindo da tiazolidina-2,4-diona (Ju-32) 0,200g (1,7 mmol)

dissolvida em 5 mL de Etanol e 4 gotas de piperidina. A mistura foi mantida

sob agitação magnética e à temperatura ambiente por 10 min. Em seguida, foi

adicionado 0,3945g (1,7 mmol) do 2-Bromo-3-Hidroxi-4-metoxibenzaldeído e

por fim, o balão foi levado ao banho de óleo sob agitação magnética e

estabilizado a 75 °C. Após 28 horas de reação, o produto foi purificado por

cristalização em etanol, filtrado e seco. A atividade citotóxica foi

desenvolvida pelo método colorimétrico do MTT conforme protocolo usado e

aprovado pelo Instituto Internacional do Câncer. Uma suspensão celular (105

células/mL) foi distribuída em placa de cultura com 96 poços (100 µL em

cada poço). A placa foi incubada a 37 °C, com atmosfera úmida enriquecida

com 5 % de CO2 por 24 h. Em seguida, foi adicionada a substância teste (100

µL/poço) e a placa foi reincubada a 37 °C. Após 72 h de contato das células

com o produto teste, foi adicionado 0,25 µL de MTT (brometo (3-[5,4-

dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazólio), 5 mg/mL em PBS (p/v) em cada poço

e a placa foi deixada por duas horas em estufa 37 °C. Ao final desse período o

meio de cultura, juntamente com o excesso de MTT foram aspirados e em

seguida, 100 µL de DMSO foi adicionado a cada poço para dissolução dos

cristais de formazano. A leitura óptica foi feita em leitor automático de placas

do tipo Multiskan (490 nm) e a densidade óptica (DO) média dos poços foi

comparada com a DO média do poço controle.

Resultados:

Rendimento 79 % e Rf 0,51 (CHCl3/MeOH - 0,96:0,04). O ponto de fusão do

composto aconteceu por decomposição à temperatura de 245 °C. A estrutura

química foi comprovada por meio de métodos físicos de espectroscopia de

RMN1H, RMN13C, Massas e Infravermelho. O composto tiazolidínico (Ju-

623) evidenciou capacidade de inibir o crescimento da célula tumoral testada

em 54,6%, apresentando IC50 (21,35µg/ml).

Conclusão:

O composto Ju-623 foi obtido puro, com rendimento considerado elevado,

suas constantes físicas definidas de acordo com os padrões internacionais que

comprovaram a pureza do produto. O teste de atividade citotóxica desse

derivado apresentou, inibição em relação ao crescimento desordenado das

células da linhagem testada, considerado baixo.

Apoio Financeiro:

CNPq

Gerado em: 2014-5-22 11:31:32

10.0116 - Síntese e estudo da interação do DNA com derivado acridíníco

(LPSF/AC)

Lafayette, E. A. , Júnior, A. S. A. A. , Almeida, S. V. , Amorim, C. A. C. ,

Santos, R. L. M. , Pitta, I. R. , Júnior, L. B. C. , Lima, M. C. A. ,

Antibióticos - UFPE Bioquímica - UFPE

Introdução:

As informações oficiais da Organização Mundial da Saúde indicam que o

mundo registra, a cada ano, mais de 6 milhões de mortes devido ao câncer. O

câncer é a 2a causa de morte dos países industrializados, depois das doenças

cardiovasculares (Lancet Oncol. 4, 45-55. 2003). Em 2020, estima-se que

aproximadamente 15 milhões de pessoas sejam diagnosticadas com câncer. O

tratamento do câncer pode ser feito através de cirurgia, radioterapia,

quimioterapia ou transplante de medula óssea, em muitos casos, é necessário a

combinação com mais de uma modalidade. Com o envelhecimento da

população e o aumento do número de casos de neoplasias, a busca por

quimioterápicos mais seletivos e menos tóxicos tem crescido em todo o

Mundo. Os derivados acridínicos tais como a N-[2-

(dimetilamino)etil]acridina-4-carboxamina conhecida como DACA e seus

análogos são uma classe de agentes intercaladores de DNA com atividade

inibitória frente a enzimas reguladoras do DNA, as topoisomerases I e II

(Cancer Chemother. Pharmacol., v. 36, p. 244-248, 1995). A DACA apresenta

um amplo espectro de atividade frente a tumores sólidos em animais e não é

relativamente afetada pela MDR mediada pela glicoproteina-P devido as sua

alta lipolificidade (Eur. J. Cancer. 32A, 708-714. 1996). No Laboratório de

Planejamento e Síntese de Fármacos (LPSF/UFPE) já foram sintetizadas

algumas acridinas e avaliadas frente a tumores malignos e apresentaram

valores de inibição de 72,25 % e 71,48 %.

Objetivos:

Analisar o estudo da ligação DNA usando ctDNA e topoisomerase I humano

e inibição da atividade de derivados acridínicos.

Métodos:

O trabalho pertence a área da química medicinal e consta a parte química e

teste in vitro, sem haver necessidade da utilização de animais. A obtenção do

núcleo acridínico é realizada a partir da difenilamina, a qual, em presença do

ácido acético e cloreto de zinco, conduzem a 9-metil-acridina. Subseqüentes

reações de oxidação com clorocromato de piridínio (PCC), na presença de

sulfato de magnésio e de condensação do tipo Knoevenagel utilizando o

cianoacetato de etila, conduz à formação deste intermediário reativo. Pelo

aquecimento do éster da acridina com a 3amino-2-tioxo-tiazolidin-4-ona,

dissolvido em etanol anidro, na presença de morfolina a uma temperatura

50ºC por 4 horas, obtêm-se o composto final (LPSF/AC-127). A interação do

derivado acridínico (LPSF/AC-127) com DNA timo de bezerro (ctDNA) foi

monitorado por espectrofotometria em UV-visível, em tampão de Tris-HCl

(10mM, pH 7.6). Inicialmente, foi determinada a concentração do DNA

usando o seu coeficiente de extinção molar de 6.600 m-1 cm-1. O derivado

acridínico foi solubilizando em DMSO na concentração de 1mM, e posterior

diluição para concentrações de 10 a 50 μM, em tampão Tris-HCl. Após

analise das propriedades espectrais no Uv-vis do derivado tiazacridínico, foi

preparada soluções do composto a 50 μM na presença de DNA em

concentrações de 10 a 120 μM. Os dados do espectro de absorção para

construção do gráfico foram ajustados usando o software SigmaPlot 10.0.

Resultados:

O produto obtido apresentou uma coloração amarela e com rendimento

satisfatório. Quanto à síntese dos produtos intermediários, todos obtiveram

rendimento satisfatório, uma vez que as rotas sintéticas são comuns no

laboratório e amplamente utilizadas. O derivado apresentou um coeficiente de

extinção molar de 10.340 M-1, e absorção máxima em comprimento de onda

de 346 nm. Na presença do DNA, quando o mesmo não absorve luz nesta

região, o composto mostrou uma diminuição da intensidade do pico de

absorção, apresentando um hipocromismo de 40,43%, o que é indicativo da

interação ao DNA. A presença do grupamento amino na posição 3 do anel da

tiazolidin-4-ona pode explicar o efeito hipocrômico apresentado pelo

composto, devido às interações que ocorrem com o grupamento amino e os

pares de bases do DNA, o que causa desestruturação da dupla hélice do DNA.

Conclusão:

Os estudos de intercalação DNA foram realizados e nos permitiu indicar que a

provável interação ocorre nos pares de bases. O estudo de dicroísmo circular é

necessário para confirmar o tipo de interação.

Apoio Financeiro:

FACEPE, CNPq e UFPE

Gerado em: 2014-5-22 11:31:32

10.0117 - AVALIAÇÃO FARMACOCINÉTICA DO

TRACHYLOBANO-360.

Abrantes, R. A. , Pita, J. C. L. R. , Fernandes, I. G. , Lucena, H. F. S. ,

Tavares, J. F. , Silva, M. S. , Santos, S. G. , Branco, M. V. S. C. ,

Departamento de Ciências Farmacêuticas - UFPB

Introdução:

Observa-se que estudos farmacodinâmicos de produtos naturais precedem os

estudos farmacocinéticos. Nesse sentido, o trachylobano-360 (T-360), obtido

de Xylopia langsdorffiana St. Hil. & Tul. (Annonaceae), é um produto natural

promissor do ponto de vista farmacológico (Nat. Prod. Res. 26: 2335, 2012;

Molecules. 17: 9573, 2012) sem estudos farmacinéticos descritos na literatura.

Para estes, técnicas bioanalíticas apropriadas que permitam quantificar a

exposição e respostas são cruciais, como a cromatografia líquida de alta

eficiência acoplada ao espectrômetro de massas (CLAE-EM) que fornece

capacidade superior para análise de biofármacos (J. Pharm. Anal. 4: 53, 2014).

Objetivos:

Determinar, após administração endovenosa (e.v.) do T-360, parâmetros

farmacocinéticos: concentração sanguínea máxima (Cmax), Clearance

sistêmico (CLs), área sobre a curva de concentração versus tempo (ASC),

tempo de meia-vida (t1/2) e volume de distribuição aparente (Vd).

Métodos:

CEUA N° 1009/12 Camundongos albinos Swiss (Mus musculus), machos (28

– 32 g), foram divididos em oito grupos (n = 6) de acordo com o tempo de

coleta do sangue. Após a administração da dose de 25 mg/kg (e.v.) em todos

os camundongos, 400 µL de sangue foram coletados em cada tempo dos

respectivos grupos: 10, 15, 30 min; 1, 2, 4, 8 e 24 h. Para a coleta do sangue,

os animais foram anestesiados com tiopental sódico (50 mg/kg) pela via

intramuscular no trem posterior. As alíquotas de sangue foram transferidas

para tubos contendo heparina (25 IU/mL) e congeladas em N2 líquido. Após

descongelamento, as amostras foram processadas: adição do padrão interno

(PI), acidificação com ácido fórmico, agitação por 60 s, adição de CHCl3 para

extração do T-360 e PI. As amostras foram centrifugadas a 14.000 x g por 15

min. A fase orgânica foi coletada e o sedimento foi ressubmetido à extração.

Ao término do processamento, toda a fase orgânica coletada foi submetida à

secagem, insuflando N2 gasoso. Todas as amostras foram mantidas a -20 ºC

até sua análise por CLAE-EMn utilizando método previamente desenvolvido

e validado, sendo este seletivo, linear, preciso e exato para o estudo

farmacocinético. Os dados de concentração em função do tempo foram

analisados utilizando o modelo farmacocinético não-compartimentado,

obtendo-se os parâmetros farmacocinéticos concentração sanguínea máxima

(Cmax), a área sob a curva (ASC0–t), volume de distribuição aparente (Vd)

(Dosee.v./Cmax), clearance sistêmico (CLs) (Dosee.v./ASCe.v.) e tempo de

meia-vida de eliminação (t1/2) (0,693xVd/CLs). Os resultados estão expressos

como média ± desvio padrão da média.

Resultados:

Os valores dos parâmetros obtidos foram: Cmax = 321,34±52,33 µg/mL;

ASC0-t = 30,09±5,71 µg/mL.h; Vd = 0,08±0,01 L/kg; CLs = 830,97±173,77

mL/h/kg; t1/2 = 3,89±0,11 min.

Conclusão:

Imediatamente após a sua administração, o T-360 apresentou Cmax elevado,

pois toda a droga é injetada na corrente sanguínea. O T-360 possui um t1/2

muito curto. Isso pode ser devido à rápida distribuição tecidual (elevado Vd)

acompanhada da rápida biotransformação e/ou acúmulo e excreção renal já

que apresentou elevado CLs

Apoio Financeiro:

CNPq

Gerado em: 2014-5-22 11:31:32

10.0118 - INFLUÊNCIA DE UM HEPARINOIDE OBTIDO DO

CAMARÃO Litopenaeus vannamei SOBRE O PROCESSO

INFLAMATÓRIO EM MODELO DE PERITONITE AGUDA

Luz, J. R. D. , Brito, A. S. , Coelho, L. F. , Cavalcante, R. S. , Palhares, L.

C. G. F. , Silva, D. J. A. , Pedroso, V. M. A. , Souza, G. P. V. A. ,

Chavante, S. F. ,

Departamento de Bioquímica - UFRN Departamento de Bioquímica -

FACISA

Introdução:

O processo inflamatório é constituído por uma série complexa de eventos

celulares, submetidos a um forte controle, que evoluíram para eliminar ou

conter os agentes infecciosos e reparar danos teciduais. Entretanto, uma

resposta inflamatória ineficiente ou descontrolada contribui para a disfunção

celular, dano tecidual e reparo inadequado encontrados em muitas doenças

inflamatórias. A heparina é conhecido por possuir ação anti-inflamatória.

Apesar do grande potencial desse polissacarídeo como fármaco anti-

inflamatório, seu uso clínico é limitado pela sua forte atividade anticoagulante

e complicações hemorrágicas. Por essa razão considerável esforço tem sido

empregado na descoberta de análogos da heparina (heparinoides) com

reduzida atividade hemorrágica, que preservem suas propriedades anti-

inflamatórias.

Objetivos:

Avaliar a influência de um heparinoide extraído do cefalotórax do camarão

Litopenaeus vannamei sobre o processo inflamatório.

Métodos:

044/2010 O composto foi isolado mediante proteólise, fracionamento com

acetona e purificado após cromatografia de troca-iônica, seu efeito sobre a

inflamação e a atividade de Metaloproteinases (MMPs) de matriz foi avaliado

através do modelo de peritonite aguda induzida em ratos, aprovado pela

comissão de ética no uso de animais – CEUA da UFRN com o protocolo de

número 044/2010. E a capacidade inibitória da elastase neutrofílica foi

realizada In vitro com kit obtido comercialmente. Os resultados foram

expressos como média ± SD e analisados por ANOVA. A diferença entre os

grupos foi realizada pelo teste de Tukey-Kramer. O valor de p<0,001 foi

considerado extremamente significante.

Resultados:

Os animais tratados com o heparinoide obtido do camarão apresentaram uma

redução significativa do recrutamento de leucócitos ao sítio de injúria, bem

como uma efetiva inibição da atividade da MMP-9 e proMMP-2. A menor

dose de heparina testada (5µg/Kg de animal) foi capaz de reduzir mais de 80%

da infiltração celular, enquanto a maior dose do heparinoide (15µg/Kg de

animal) promoveu uma redução de cerca de 60%. Além disso, o composto do

camarão reduziu significativamente (p<0,001) mais de 50% da atividade das

metaloproteinases (MMP-9 e proMMP-2) em todas as doses testadas. Os

resultados ainda mostraram que o composto em teste, na menor concentração

(5nM) reduziu significativamente (p<0,001) em torno de 34% a atividade da

enzima elastase, enquanto a heparina promoveu uma redução maior (~43%).

Conclusão:

A eficácia antimigratória, bem como a inibição da atividade da elastase e de

MMPs, enzimas crucialmente envolvidas no processo de inflamação, fazem

do heparinoide obtido do camarão Litopenaeus vannamei, um modelo

estrutural interessante para novos estudos como agente anti-inflamatório no

tratamento de doenças.

Apoio Financeiro:

CAPES e CNPq

Gerado em: 2014-5-22 11:31:32

10.0119 - Avaliação da atividade antioxidante de diferentes extratos de

folhas de M. Rufula.

Arcoverde, J. H. V. , Paula, R. A. , Silva, A. G. , Ramos, B. A. , Correia,

M. T. S. , Silva, M. V. ,

Departamento de Bioquímica - UFPE

Introdução:

Os radicais livres apresentam diferentes funções no organismo humano e estão

envolvidos na produção de energia, fagocitose, regulação do crescimento e

sinalização celular. No entanto a interação destes radicais livres com o sistema

biológico, independentemente de sua fonte, pode, por vezes, resultar em

consequências significativas para a saúde, onde o seu excesso apresenta

efeitos deletérios, tais como danos ao DNA, proteínas e lipídios que causam

stress oxidativo, favorecendo o aparecimento de diversas patologias como

doenças cardíacas e neurodegenerativas; diabetes e câncer. Os

antioxidantes são moléculas que possuem a capacidade de proteger

o corpo contra deteriorações causadas ??pelos radicais livres induzidos pelo

estresse oxidativo. Elas podem retardar ou inibir o início e/ou propagação da

reação em cadeia oxidativa e assim prevenir ou reparar danos causados as

células do corpo pelas espécies reativas de oxigênio (EROs). Diversos estudos

têm relatado as atividades antioxidantes e de eliminação de radicais livres em

extratos e compostos puros, naturais de algumas espécies de plantas do gênero

Manilkara.

Objetivos:

Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade

antioxidante de diferentes extratos (clorofórmio, acetato de etila, metanol e

água) de folhas de Manilkara rufula.

Métodos:

O presente trabalho não fez uso de experimentos em humanos nem em

animais. O material botânico foi coletado no Parque Nacional da Serra do

Catimbau, localizado na região do Semi Árido do estado de Pernambuco. As

folhas de M. rufula foram submetidas à secagem em temperatura ambiente, e

posteriormente, moídas e armazenadas. Os diferentes extratos foram obtidos a

partir de 100 g de farinha das folhas de M. rufula, em aparelho soxhlet usando

solventes orgânicos em ordem eleutrópica. Estes solventes foram eliminados

utilizando um evaporador rotativo sob pressão reduzida. A atividade

antioxidante dos extratos foram determinadas pelo ensaio do radical 2,2-

difenil-1-picrilhidrazil (DPPH), adicionando-se em cada poço de uma

microplaca 250 μL da solução de DPPH e 40 μL de: metanol (controle

negativo), soluções padrões de ácido ascórbico e quercetina (controle

positivo) e os diferentes extratos nas concentrações de 10, 25, 50, 100, 200,

300, 400 e 500 µg/mL . As leituras das absorbâncias foram realizadas após 25

min de reação em espectrofotômetro de microplaca, em triplicatas, a 517 nm.

Resultados:

A atividade do DPPH revelou que o extrato metanólico teve o maior sequestro

de radicais livres (86,36%), seguido do extrato acetato de etila (84,15%),

correspondendo à inibição da oxidação do DPPH. Os extratos clorofórmico e

aquoso apresentaram atividades menores que 6,63%. Das concentrações que

foram testadas (500, 400, 300, 200, 100, 50, 25 e 10 microgramasg/mL) viu-se

que a atividade de sequestro de radicais ocorreu até a concentração de 100

microgramas/mL, dependendo do solvente utilizado para obtenção do extrato,

observando assim que a atividade antioxidante de M. rufula diminui a medida

que sua concentração também diminui.

Conclusão:

De acordo com estes resultados, o potencial antioxidante apresentado pode

estar relacionado com a presença de compostos bioativos presentes nas folhas

de M. rufula, tornando esta espécie uma promissora fonte de novas moléculas

com aplicações biotecnológicas.

Apoio Financeiro:

CAPES, FACEPE e CNPQ.

Gerado em: 2014-5-22 11:31:32

10.0120 - Alterações tegumentares em vermes adultos de Schistosoma

mansoni pelo derivado imidazolidínico RN-4A. 1Silva, A.L., 2Oliveira,

S.A., 1Oliveira, J.F., 2Santiago, E.F., 1Almeida Júnior, A.S.A., 2Peixoto,

C.A., 2Rocha, V.P.C., 2Soares, M.B.P., 1Pitta, I.R., 1Lima, M.C.A.

1Departamento de Antibióticos, Universidade Federal de Pernambuco

(UFPE). 2Departamento de Imunologia, Fundação Oswaldo Cruz

(FIOCRUZ/PE).

Pitta, I. R. , Soares, M. B. P. , Rocha, V. P. C. , Peixoto, C. A. , Junior, A.

S. A. A. , Santiago, E. F. , Oliveira, J. F. , Oliveira, S. A. , Silva, A. L. ,

Lima, M. C. A. ,

Antibióticos - UFPE Imunologia - FIOCRUZ

Introdução:

A esquistossomose mansônica é uma doença parasitária causada pelo

tremátoda Schistosoma mansoni responsável por afetar mais de 230 milhões

de pessoas distribuídas pelo mundo (Rev Bras Clin Med. 10; 39–45, 2012). O

tratamento dessa parasitose é baseado na monoterapia com a utilização do

praziquantel (PZQ). No entanto, a grande utilização desse fármaco vem

ocasionando possíveis casos de resistência relatados na literatura (Am Jour of

Trop Med and Hyg. 60; 932–935, 1999). A superfície externa dos vermes

adultos S. mansoni é composta de um tegumento recoberto por minúsculos

espinhos, tubérculos e membranas apicais. A integridade da superfície

tegumentar está envolvida na sobrevivência do parasito quando em contato

com o ambiente do hospedeiro infectado (Adv in Parasit. 11; 233-305, 1973).

Dessa maneira, a estrutura tegumentar torna-se um potencial alvo biológico

para a atuação de um candidato a fármaco esquistossomicida (Mem do Inst

Osw Cruz. 97; 717-724, 2002). Numerosas alterações na superfície

tegumentar dos vermes adultos S. mansoni vêm sendo observadas através de

estudos utilizando compostos esquistossomicidas, tais como o praziquantel

(PZQ) (The jour of Egy soc of parasit. 36; 197-220, 2006), mefloquina

(Parasit. 137; 85–98, 2010) e derivados tioxo-imidazolidínicos (Exp Parasitol.

128; 82–90, 2011). As imidazolidinas são compostos heterociclos que

apresentam várias atividades biológicas, como atividade antimicrobiana

(Quim. Nova. 31; 614-622, 2008), anti- Tripanossomoa cruzi (Bioor and Med

Chem. 16; 2226–2234, 2008) e vem se destacando por apresentar resultados

promissores na atividade esquistossomicida (Parasit Res. 107; 531-8, 2010).

Objetivos:

Verificar o potencial esquistossomicida do derivado imidazolidínico, (5Z)-3-

(4-bromo-benzil)-5-(4-cloro-benzilideno)-4-tioxo-imidazolidin-2-ona (RN-

4A).

Métodos:

21/2011 Este projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética no Uso de Animais

do Centro de Pesquisa Aggeu Magalhães/Fundação Oswaldo Cruz

(CPqAM/FIOCRUZ) autorizado pela licença No. 21/2011. Foram utilizados

camundongos machos albinos Swiss Mus musculus com 25 dias de idade

pesando 30 gramas. O composto RN-4A foi sintetizado no laboratório de

Química/UFPE e após isso, foi analisado quanto a sua citotoxicidade através

de células de linhagem macrofágica J774. O valor da concentração inibitória

(LC50) foi determinada por regressão não linear, utilizando o GraphPad Prism

versão 5.01. Em seguida, o composto foi avaliado frente aos vermes adultos

do S. mansoni através da realização da atividade in vitro nas doses de 100 - 20

µg/mL e investigação ultraestrutural por meio de Microscopia Eletrônica de

Varredura (MEV) nas doses de 100 e 60 µg/mL. O PZQ foi o controle

positivo do experimento.

Resultados:

O derivado RN-4A apresentou LC50 de 29.7±3.9 µM. O composto RN-4A foi

capaz de apresentar uma diminuição da motilidade do S. mansoni (12 vermes

adultos por dose) culminando com uma taxa de mortalidade de 100 % nas

doses de 60 e 100 µg/mL no quarto dia de observação do experimento. No

entanto, as outras doses, 80 μg/mL e 40 μg/mL, apresentaram uma taxa de

mortalidade de 100% no último dia de experimento (sexto dia) e a dose de 20

μg/mL causou uma mortalidade de 33,3% frente aos vermes adultos do S.

mansoni. O PZQ apresentou 100% de mortalidade dos parasitos nas primeiras

24 horas de experimentos em todas as doses testadas. Com relação à MEV, o

composto causou várias alterações tegumentares dos parasitos S. mansoni tais

como formação de bolhas, destruição do tegumento com perda de espinhos e

tubérculos, contração corporal e das ventosas.

Conclusão:

Em conclusão, o derivado imidazolidínico RN-4A apresentou uma atividade

esquistossomicida in vitro promissora. No entanto, é necessária a realização

de estudos mais aprofundados com a realização de trabalhos in vivo frente à

esquistossomose mansônica.

Apoio Financeiro:

FACEPE e FIOCRUZ

Gerado em: 2014-5-22 11:31:32

10.0121 - EFEITO VASORRELANTE DE Lippia origanoides H.B.K. EM

ANÉIS DE ARTÉRIA MESENTÉRICA SUPERIOR DE RATAS

Miranda, V. C. , Carvalho, G. D. , Xavier, V. S. , Campelo, R. T. ,

Mendes, M. B. , Silva, D. P. , Arcanjo, D. D. R. , Citó, A. M. D. G. L. ,

Oliveira, A. P. ,

Núcleo de Pesquisas em Plantas Medicinais - NPPM Departamento de

Química - UFPI

Introdução:

Lippia origanoides H.B.K. (Verbenaceae) é um arbusto aromático nativo da

América Central e América do Sul conhecida como “Orégano-del-Monte” ou

“Alecrim-d’Angola”. É utilizada na culinária como tempero e na medicina

popular no tratamento distúrbios gastrintestinais e como antimicrobianos

(Toxicon; 51:37, 2008).

Objetivos:

O objetivo desse estudo é de avaliar o efeito vasorrelaxante induzido pelo

extrato etanólico das folhas de L. origanoides (Lo-EtOH) em artéria

mesentérica superior isolada de ratas.

Métodos:

CEEA/UFPI Nº 008/2012 Foram utilizadas ratas Wistar (Rattus norvegicus)

(270- 300g- 12 semanas). Após eutanásia tiopental sódico (100 mg/kg, i.p. -

Resolução Nº 1000, de 2012 – CFMV). A artéria mesentérica superior foi

retirada, dissecada e anéis (2-3 mm) foram obtidos e mantidos em cubas

contendo 6,0 mL de solução de Tyrode (37 ºC) e aerados com mistura

carbogênica (95% O2 + 5% CO2). Os anéis foram acoplados em alças de aço

inoxidável, suspensas por linha de algodão e conectados a um sistema de

aquisição de dados (AECAD 1604, software AQCAD 2.3.9, AVS Projetos,

SP). Para a verificação da presença de endotélio, acetilcolina (10 μM) foi

adicionada em preparações pré-contraídas com fenilefrina (10 μM). As curvas

concentração-resposta foram obtidas através de adição cumulativa do Lo-

EtOH (0,1 – 243 μg/mL) sobre pré-contrações induzidas por fenilefrina (10

μM) ou KCl 80 mM. A participação da NO-sintase (eNOS) no efeito

vasorrelaxante foi analisada após o pré-tratamento com L-NAME (100 μM)

em preparações com endotélio intacto. Os protocolos foram aprovados pelo

Comitê de Ética em Experimentação Animal da UFPI (CEEA/UFPI Nº

008/2012). Os resultados foram expressos como média ± EPM. Significativos

valores de p<0,05 - “t Student” pós-teste de Tuckey e os valores de pD2 foram

obtidos por regressões não linear – PRISM 5.03.

Resultados:

O extrato Lo-EtOH apresentou efeito vasorrelaxante dependente de

concentração sobre pré-contrações induzidas por fenilefrina (10 μM) em

preparações com endotélio intacto (E+: pD2 = 1,40 ± 0,04, n=6). Este efeito

foi atenuado após a remoção do endotélio (E-: pD2 = 1,62 ± 0,02***;

p<0,001, n=6). Na presença do L-NAME, um inibidor da NO sintase, o efeito

vasorrelaxante de Lo-EtOH foi atenuado (pD2 = 1,66 ± 0,03**; p<0,01 versus

E+, n=6). Em preparações pré-contraídas com KCl 80 mM, o efeito

vasorrelaxante apresentou maior potência (pD2 = 1,35 ± 0,02***; p<0,001

versus E-, n=6).

Conclusão:

Conclui-se que o Lo-EtOH apresenta efeito vasorrelaxante dependente de

endotélio, com evidencias da participação da enzima NO-sintase, e

independente do endotélio, com provável inibição do influxo de cálcio através

dos canais para Ca2+ sensíveis a voltagem.

Apoio Financeiro:

FAPEPI/CNPq/CAPES

Gerado em: 2014-5-22 11:31:32

10.0122 - PROTECTIVE EFFECTS OF AÇAÍ PULP POWDER

INTAKE ON EARLY DNA DAMAGE AND ABERRANT CRYPT FOCI

DEVELOPMENT IN MALE SWISS MICE

Fragoso, M. F. , Romualdo, G. R. , Fernandes, A. A., Barbisan, L. F. ,

Departamento de Patologia - FMB Departamento de Morfologia - IBB

Departamento de Bioquímica - IBB

Introdução:

Açaí (Euterpe oleraceae) is an exotic fruit consumed and cultivated in Brazil.

It is known to possess strong antioxidant and antiinflammatory properties and

potential to reduce the risk for different human chronic diseases, including

cancer development.

Objetivos:

The present study aimed the evaluation of the potential protective effects of

dietary spray-dried açai pulp powder (AP) administered before and during

initiation stage of colon carcinogenesis induced by azoxymethane (AOM) in

male Swiss mice (CEEA 302/2011).

Métodos:

CEEA 302/2011 Mice (4 week old) were given two i.p. injections of AOM

(15 mg/kg b.w., weeks 3 and 4) and were fed with low fat diet (LFD) (G1),

LFD containing 2.5%, 5.0% AP (G2 and G3) or 0.1% indole-3-carbinol (I3C)

(G4, positive control) during weeks 1 to 4. After AOM administrations, all

mice were fed with high-fat diet (HFD) to accelerate the development of

aberrant crypt foci (ACF) until week 14. Animals were euthanized at weeks 3

and 14 (n=15 per group). At week 3, peripheral blood samples were collected

for single cell gel electrophoresis (SCGE) assay (Environ. Mol. Mutagen.

35:206, 2000) and liver samples were collected for glutathione (total and

reduced) determinations (Anal. Biochem. 27:502, 1968). At week 14, colons

were collected for aberrant crypt foci (ACF) analysis (Cancer Lett. 37:147,

1987).

Resultados:

At week 3, a significant reduction (p<0.001) in leucocytes DNA damage was

observed in 2.5 %, 5.0 % AP and I3C-treated groups (G2-G4) in SCGE assay

when compared to the control group (G1) (4.6 ± 1.1; 4.4 ± 0.6; 6.1 ± 1.4 vs.

9.2 ± 1.5, as % DNA in comet tail). Moreover, a significant increase

(p=0.002) in hepatic total glutathione was observed in 5.0 % AP and I3C-

treated group (G3 and G4, respectively) in comparison to the control group

(G1) (11.2 ± 1.4; 9.7 ± 2.2 vs. 5.8 ± 1.3 as nmol/mg total protein) At week 14,

a significant reduction (p=0.035) in ACF multiplicity (aberrant crypts per

ACF) was observed in 5.0% AP-treated group (G3) when compared to the

control group (G1) (1.79 ± 0.54 vs. 2.73 ± 0.59).

Conclusão:

The results of this present study indicate that AP feeding may attenuate the

initiation stage of chemically-induced mouse colon carcinogenesis by

reducing early induction of DNA damage and ACF development.

Apoio Financeiro:

CNPq (PIBIC) and CAPES.

Gerado em: 2014-5-22 11:31:32

10.0123 - INFLUÊNCIA DO ESTADO TIREOIDIANO SOBRE

EFEITOS LOCAIS INDUZIDOS PELO VENENO DE BOTHROPS

LEUCURUS. Saraiva, RM, Caldas, ASC, Casais-e-Silva, LL.

Departamento de Biorregulação, Instituto de Ciências da Saúde, UFBA,

Salvador/BA

Saraiva, R. M. , Caldas, A. S. , Silva, L. L. C. ,

Departamento de Biorregulação - UFBA

Introdução:

O envenenamento por serpentes é um problema de saúde pública

negligenciado em todo o mundo, principalmente em países tropicais e

subtropicais. A soroterapia neutraliza de forma eficiente os efeitos sistêmicos

do envenenamento, no entanto, o desenvolvimento dos sintomas locais é

irreversível e de grande relevância. Estes são caracterizados por formação de

edema, dermonecrose e mionecrose, além de dor local. As disfunções

tireoidianas atingem cerca de 300 milhões de pessoas em todo o mundo. Além

do papel dos hormônios tireoidianos sobre o metabolismo energético, a

associação entre eles e a cicatrização de feridas é bem conhecida. Baixos

níveis de T3 e T4 retardam o processo de reparo e cicatrização.

Objetivos:

Propõe-se neste trabalho investigar a influencia dos hormônios tireoidianos no

desenvolvimento do edema, dermonecrose e mionecrose provocados pelo

envenenamento por Bothrops leucurus.

Métodos:

033/2012 Foram utilizados venenos de Bothrops leucurus provenientes da

Bahia e ratos da linhagem Wistar (Rattus norvegicus). Para indução do

hipertireoidismo, os ratos receberam, durante 1 semana, injeções diárias i.p.

de T4 (300μg/kg, dose que induz uma tireotoxicose); o controle recebeu

mesmo volume de injeções i.p. com solução salina estéril. O hipotireoidismo

foi induzido através disponibilização de propiltiouracil (PTU) diluído nos

bebedouros (0,05g/100mL) durante 4 semanas. Os estados de hipo e

hipertireoidismo foram confirmados por acompanhamento do peso dos

animais e pelos níveis hormonais detectados através de ensaio de

quimioluminescência. O edema de pata foi induzido pela injeção subplantar

de 50µg/100µL de veneno em solução salina estéril. A medida do edema foi

feita com um paquímetro digital no pré-tratamento e no pós-tratamento nos

tempos 15’, 30’, 60’, 120’, 180’, 6h e 24h. A dermonecrose foi avaliada

através de injeções intradérmicas de 250 ou 300 µg/100µL de veneno e a

mionecrose avaliada pela liberação de CK plasmático, após a inoculação de

50µg/100µL de veneno em solução salina. Os dados foram analisados com

teste de Kruskal-Wallis e pós-teste de Dunn. Valores de p≤0,05 foram

admitidos como estatisticamente significantes. Os ensaios foram realizados

segundo normas éticas de utilização de animais de laboratório e o projeto

aprovado pela CEUA-ICS, Protocolo 033/2012.

Resultados:

Os resultados demonstraram que o estado hipotireoidiano diminui a resposta

do veneno nas três atividades testadas. Não houve diferença estatística entre

os animais eutireoidianos e hipertireoidianos. No edema, os animais

hipotireoidianos apresentaram menor resposta em relação ao grupo

eutireoidiano (controle) nos tempos de 15’ (162 ± 31,4mm – controle; 117,19

± 19mm - hipotireoidiano), 30’ (155,29 ± 27,46mm – controle; 105,48 ±

16,2mm - hipotireoidiano) e 60’ (132,38 ± 22,95mm – controle; 87,73 ±

14,57mm – hipotireoidiano). O halo de dermonecrose também foi menor com

0,4 ± 0,2mm para o grupo hipotireoidiano e assim como a liberação de CK,

indicativo da mionecrose.

Conclusão:

Mostramos que o estado hipotireoidiano atenua a atividade inflamatória local

desencadeada pelo envenenamento. E fato que o hipotireoidismo interfere no

processo de cicatrização que envolve migração de células inflamatórias

importantes no processo de reparo e que o quadro local no envenenamento

envolve a participação de células inflamatórias de forma particular. A

interrelação entre estas condições necessita de melhores esclarecimentos.

Apoio Financeiro:

FAPESB e CAPES

Gerado em: 2014-5-22 11:31:32

10.0124 - AVALIAÇÃO DE ATIVIDADES INIBIDORA DE TRIPSINA

E ANTIBACTERIANA EM PREPARAÇÃO OBTIDA DO CAULE DE

Cereus jamacaru

Santos, P. F. V. , Procopio, T. F., Pontual, E. V. , Napoleão, T. H. , Paiva,

P. M. G. ,

Bioquímica - UFPE

Introdução:

Estratégias de aproveitamento do potencial biotecnológico do semiárido

brasileiro ainda são relativamente escassas. As cactáceas são vegetais nativos

das Américas, com mais de 70% das espécies ocorrendo em regiões áridas e

semiáridas. Dentre as principais cactáceas presentes no semiárido brasileiro

está o mandacaru (Cereus jamacaru), o qual, na estação seca, é utilizado para a

alimentação animal. Diversas plantas produzem metabólitos primários (ex.

inibidores de tripsina) e secundários com atividade antibacteriana.

Objetivos:

O presente trabalho visou investigar preparação obtida a partir do extrato

salino do caule de C. jamacaru quanto às atividades inibidora de tripsina e

antibacteriana.

Métodos:

O estudo não incluiu experimentos com animais ou seres humanos. A farinha

(10 g) de mandacaru foi homogeneizada em agitador magnético (16 h a 4 °C)

com NaCl 0,15 M (100 mL). O extrato foi filtrado em papel de filtro e depois

centrifugado (9.000 g; 15 min, 4 °C). Em seguida, o extrato de mandacaru foi

aplicado (2 mL) em uma coluna de Sephadex G-100 equilibrada com NaCl

0,15 M. As frações coletadas foram avaliadas quanto à presença de proteínas

através da leitura da absorbância a 280 nm. O pool (P1) contendo as frações

com absorbância maior que 0,100 foi avaliado quanto à atividade inibidora de

tripsina (Pontual et al., Parasitol. Res. 113:727, 2014), concentração de

proteínas (Lowry et al., J. Biol. Chem. 193:265, 1951) e atividade

antibacteriana (Gomes et al., J. Appl. Microbiol. 114:672, 2013) contra

Staphylococcus aureus (ATCC-6538), Escherichia coli (ATCC-25922)e

Salmonella enteritidis (MM 6247). A concentração mínima inibitória (CMI)

correspondeu à menor concentração capaz de promover redução maior ou

igual a 50% no crescimento em comparação ao controle. A concentração

mínima bactericida (CMB) foi definida como a menor concentração capaz de

reduzir o crescimento bacteriano em 99,9%. Os ensaios foram realizados em

triplicata.

Resultados:

O extrato de caule de mandacaru apresentou alta viscosidade, impossibilitando

a avaliação da atividade inibidora de tripsina e dosagem de proteínas. A alta

viscosidade do extrato do caule de mandacaru se deve provavelmente à

elevada concentração de carboidratos complexos, o que é comum em plantas

cactáceas. Foi realizada então uma etapa de cromatografia de gel filtração, a

fim de separar os açúcares de elevado peso molecular dos demais

componentes. P1 apresentou-se livre de viscosidade e passível de avaliação

das atividades biológicas. P1, contendo 0,292 mg/mL de proteínas, foi capaz

de inibir totalmente a atividade de tripsina em ambas as quantidades testadas

(20 e 50 µl). P1 apresentou apenas atividade bacteriostática e somente contra

S. aureus (CMI: 0,146 mg/mL de proteínas).

Conclusão:

O caule do mandacaru é fonte de moléculas com atividade inibidora de

tripsina e ação bacteriostática contra S. aureus.

Apoio Financeiro:

CNPq, FACEPE, CAPES, MCTI.

Gerado em: 2014-5-22 11:31:32