1 microsoft power point - metodos de estudo

5/8/2018 1 Microsoft Power Point - Metodos de Estudo - slidepdf.com

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11

Citologia e HistologiaCitologia e Histologia

Ana Maria Valado

António José Gabriel

2009/2010

Departamento de Radiologia

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HISTOLOGIAHISTOLOGIA::

11 -- MÉTODOS DE ESTUDO HISTOLÓGICOMÉTODOS DE ESTUDO HISTOLÓGICO

22 -- CLASSIFICAÇÃO DOS TECIDOSCLASSIFICAÇÃO DOS TECIDOS

2.12.1 -- TECIDO EPITELIALTECIDO EPITELIAL

2.22.2 -- TECIDO CONJUNTIVOTECIDO CONJUNTIVO

MORFOLOGIA E FUNÇÃO DAS FIBRAS E MACROMOLÉCULASMORFOLOGIA E FUNÇÃO DAS FIBRAS E MACROMOLÉCULAS

2.2.12.2.1 -- TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO: FROUXO,TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO: FROUXO,

DENSO MODELADO E NÃO MODELADODENSO MODELADO E NÃO MODELADO

2.2.22.2.2 -- TECIDO CONJUNTIVO COM PROPRIEDADES ESPECIAISTECIDO CONJUNTIVO COM PROPRIEDADES ESPECIAIS

2.32.3 -- TECIDO CARTILAGÍNEOTECIDO CARTILAGÍNEO

2.42.4 -- TECIDO ÓSSEOTECIDO ÓSSEO

2.52.5 -- TECIDO MUSCULARTECIDO MUSCULAR

2.62.6 -- TECIDO NERVOSOTECIDO NERVOSO



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22

BIBLIOGRAFIABIBLIOGRAFIA

DEDE ROBERTIS,ROBERTIS, EE.. EE DEDE ROBERTIS,ROBERTIS, EE..MM.. BIOLOGIABIOLOGIA CELULARCELULAR EEMOLECULARMOLECULAR.. EDIÇÃOEDIÇÃO FUNDAÇÃOFUNDAÇÃO CALOUSTECALOUSTE GULBENKIANGULBENKIAN..LISBOALISBOA..

JUNQUEIRA,JUNQUEIRA, LL..CC.. EE CARNEIRO,CARNEIRO, JJ.. HISTOLOGIAHISTOLOGIA BÁSICABÁSICA..EDITORAEDITORA GUANABARAGUANABARA KOOGANKOOGAN SS..AA.. RIORIO DEDE JANEIROJANEIRO..

AZEVEDO,AZEVEDO, CC.. BIOLOGIABIOLOGIA CELULARCELULAR EE MOLECULARMOLECULAR.. LIDELLIDEL..

WHEATER,WHEATER, PP..RR..,, ETET ALAL.. HITOLOGIAHITOLOGIA FUNCIONALFUNCIONAL.. EDITORAEDITORAGUANABARAGUANABARA KOOGAN,KOOGAN, SS..AA..

BRUCE,BRUCE, AA..,, BRAY,BRAY, DD..,, LEWIS,LEWIS, JJ..,, RAFF,RAFF, MM..,, ROBERTIS,ROBERTIS, MM..,, KK.. EEWATSON,WATSON, JJ.. DD.. BIOLOGIABIOLOGIA MOLECULARMOLECULAR DADA CÉLULACÉLULA.. EDITORAEDITORAARTMEDARTMED.. SÃOSÃO PAULOPAULO..

3

HistologiaHistologia

Estuda as células e o material

extracelular que constituem os tecidos do

organismo.

Microscopia óptica

Microscopia electrónica

Microscópio óptico

Microscópio electrónico

4Ana Valado - ESTeSC



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Ana Valado - ESTeSC 5

Técnicas de estudo (cultura de células,

imunohistoquímica)

Conhecimentos obtidos em áreas como: bioquímica,

fisiologia, imunologia, patologia

Permite um estudo no contexto da histofisiologia,

histoquímica, imunohistoquímica, histopatologia

Técnica HistológicaTécnica Histológica

Aumentar o contrasteColoração

Facilitar a adesão do corte aovidro

Colagem

Extensão

Ténia de cortesCorte (6 a 8 µm)

Bloco de parafina; corte nomicrótomo

InclusãoParafina

30 min a 6 hPenetração da parafina nos

vasos e espaçosintercelulares

Impregnação

Parafina fundida (60º )

1 a 6 horasEmbeber a amostra emsubstância miscível

DiafanizaçãoXilol, tuluol

6 a 24 hRemover a água dos tecidosDesidrataçãoÁlcool etílico (70 % - absoluto)

Aprox. 12 hPreservar a morfologia ecomposição dos tecidos

FixaçãoFormaldeído; líquido de Bouin

DuraçãoFinalidadesEtapas




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HISTOQUÍMICAHISTOQUÍMICA

Os processos histoquímicos de coloração

permitem observar os componentes dos tecidos,

segundo técnicas de preparação, devido ao

contraste que produzem ao ligarem-sedistintamente a eles.


É importante que o método utilizado seja

específico para a substância ou grupo químico

que está a ser analisado, para que não ocorram

conclusões pouco precisas


HISTOQUÍMICAHISTOQUÍMICA



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HematoxilinaHematoxilina--Eosina (HE)Eosina (HE)

A hematoxilina é básica, ou seja, tem afinidade

para substâncias ácidas (substâncias basófilas).

Assim, costuma corar os núcleos, chamando-se

por isso corante nuclear

Diferencia porções basófilas e acidófilas do

tecido em estudo9Ana Valado - ESTeSC

Hematoxilina-Eosina (HE)

A eosina é ácida, tem afinidade pelo

citoplasma, fibras de colagénio e outras

substâncias básicas das células (substânciasacidófilas).




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Coloração pela HE


Material para a técnica HEMaterial para a técnica HE

Epitélio prismático. Coloração HE

Localização de lípidos

São utilizados corantes que possuem alto graude dissolução em gorduras

• Exemplos:

– Sudão IV – Negro de Sudão


Tecido adiposo



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Polissacarídeos (PAS)

Pode ser determinada pela técnica do PAS(Periodic Acid - Schiff).

Na reacção o reagente de Schiff, origina umcomposto de adição, violeta e insolúvel.

É possível visualizar polissacarídeos simples ouassociados a proteínas.


Vilosidades intestinaisColoração pelo PAS




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Ortocromasia

Capacidade que certas substâncias apresentam mantendo a cor

original do corante, pelo qual foram coradas


Células linfóides coradas comazul de metileno

Capacidade que certas substâncias apresentam de alterar a cor

original do corante pelo qual foram coradas

Metacromasia

Fibras reticularesImpregnação pela prata




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Impregnação pela PrataComplexo de Golgi


Métodos de imunofluorescênciadirecta e indirecta




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Membranas CelularesMembranas Celulares

Composição

Transporte

A passagem de pequenas partículas ou iões não implicamodificações morfológicas da membrana.

A entrada na célula de macromoléculas e partículasmaiores, envolve modificações visíveis da membranaplasmática e designa-se endocitoseendocitose. O processoequivalente, mas em direcção oposta é a exocitoseexocitose.


Zona deadesão

Desmossomas

Microvilo-sidades

Zona deoclusão

Junçõestipo gap

Interdi-gitações

Junçõesintercelulares

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Ana Valado - ESTeSC



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1111

Especializações de membranaEspecializações de membrana

Funções das junções intercelulares

Junções de adesão

Zona de adesão

Desmossomas

Hemidesmossomas

Junções impermeáveis Zona de oclusão

Junções de comunicação Zona de comunicação


Estruturas de revestimento celularEstruturas de revestimento celular

Microvilosidades

Estereocílios

Cílios

Flagelos

Glicocálice

Camada glicoprotéica que reveste as células

Adesão celular; pinocitose

Ocorre em células não epiteliais 22Ana Valado - ESTeSC

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