Contagem Total em Placas

(Contagem Padrão em Placas)

Contagem

total

de

bactérias

mesófilas

Contagem

total

de

bactérias

psicrófilas

Contagem

padrão de

micro-organimos

mesófilos

aeróbios estritos

e facultativos

viáveis

Regra Geral Contagem Seleciona-se aquela ou aquelas cujo número

de colônias estejam entre 25 e 250 colonias.

Multiplica-se o número total de colônias ou o valor médio das placas (se existe duplicata da placa com a mesma diluição) pelo valor recíproco da diluição usada.

EXEMPLO 1

Diluição = 10-3

Número de colônias contadas = 220

Inverso da diluição = 103

Ao se multiplicar o número de colônias pelo inverso da diluição, temos:

220 x 1000 = 220.000

2,2x105UFC/mL ou g

EXEMPLO 2 Placas em duplicata

Diluição = 10-2

Placa n° 01: numero de colônias contadas = 40 Placa n° 02: numero de colônias contadas = 45 Valor médio = 4000 + 4500 = 4250

Resultado: 4.250 = 4,25 x 103

Obs: para não dar falsa ideia de exatidão aos resultados do cálculo

de contagem padrão, anotar somente os dois primeiros algarismos da esquerda.

Exemplo: 32150 deverá ser expresso como 32000 ou 3,2x104

4,2x103UFC/mL ou g

Cálculo e Contagem de casos especiais

Diluições consecutivas (25 a 250 colônias)

Se as placas de duas diluições decimais consecutivas apresentarem entre 25 e 250 colônias cada uma, calcular a contagem por mililitro para cada diluição, multiplicando o número de colônias por placa pela diluição usada e informar a média aritmética como contagem padrão por mL ou grama do produto;

EXEMPLO

Diluição 10-2 = 243 colônias x 100 = 24.300

Diluição 10-3 = 41 colônias x 1000 = 41.000

24.300 + 41.000= 65.3000 = 32.650 = 3,3x104

Resultado: 3,3x104 UFC/g ou mL do produto

Cálculo e Contagem de casos especiais

Ausência de placas com 25 a 250 colônias

Se nenhuma das placas apresentarem contagem capaz de ser enquadrada na regra de seleção de placas de 25 a 250 colônias e uma ou mais placas apresentarem mais do que 250 colônias, considerar a placa que apresenta contagem mais próxima a 250.

Exemplo: Diluição 10-2 = 325 Diluição 10-3 = 20 Resultado: 325 x 100 = 32.500 = 32.000 =

3,2x104 UFC/g ou mL do produto

Cálculo e Contagem de casos especiais

Todas as placas com menos de 25 colônias

Se as placas de todas as diluições apresentarem menos de 25 colônias cada, informar o número estimado de colônias na diluição mais baixa.

Exemplo:

Diluição 10-2 = 18

Diluição 10-3 = 3

Resultado: 18 x 100 = 1.800 UFC/g ou mL

1,8x103 UFC/g ou mL do produto

Cálculo e Contagem de casos especiais

Placas sem colônias

Se as placas de todas as diluições não apresentam colônias e não se detectou substâncias inibidoras, informar a contagem como menor que a menor diluição correspondente.

Exemplo: Se não aparecerem colônias na diluição 10-2 nem na 10-3, informar a contagem como “menor que 100 na contagem estimada por mL ou por grama.

Diluição 10-2 = 0

Diluição 10-3 = 0

Resultado: menor que 100 = <102 UFC/g ou mL

Cálculo e Contagem de casos especiais

Placas com mais de 250 colônias

Se o número de colônias por placa exceder a 250, contar as colônias de uma parte da placa que seja representativa da distribuição de colônias e calcular a contagem padrão estimada.

Cálculo e Contagem de casos especiais

Colônias disseminadas

No caso de haver presença de colônias disseminadas em uma área menos que a metade da placa, contar a outra metade.

Exemplo:

Diluição 10-2 : placa 1 (metade) = 60 x 2 = 120

placa 2 = 180

Média 120 + 180 = 300/2 = 150

Resultado: 150 x 102 = 15.000 = 1,5x104 UFC/mL ou g

• Corante TTC - 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride