ДИАГНОСТИКА ПЕРОКСИСОМНЫХ НАРУШЕНИЙ У ДЕТЕЙ
DESCRIPTION
ДИАГНОСТИКА ПЕРОКСИСОМНЫХ НАРУШЕНИЙ У ДЕТЕЙ. И.С. Мамедов, Ю.А. Смолина, В.С. Сухоруков НИЛ общей патологии ФГУ МНИИ педиатрии и детской хирургии. Функции пероксисом. катаболизм полиаминов «пероксисомное дыхание» синтез плазмологенов - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
. . , . . , . . ИС Мамедов ЮА Смолина ВССухоруков
НИЛобщей патологииФГУМНИИ педиатрии и детской хирургии
1
катаболизм полиаминов
« »пероксисомное дыхание
синтез плазмологенов
- (β окисление длинноцепочечных С24-26 ) и более и
( разветвлённых жирных кислот С 26 )и более
биосинтез эфиросодержащих липидов
α- окислениежирных кислот
детоксикация глиоксилата
2
: морфологический отсутствие или наличие пероксисом в печени
: биохимический нарушение одной или нескольких функций
пероксисом
Критерии Критерии:разделения:разделения
3
Пероксисомы в печени отсутствуют или их количество , .значительно уменьшено полное нарушение биогенеза
1- ая1- аягруппагруппа
4
( )СиндромЦелльвегера СНЦ
Инфантильная форма болезни Рефсума
Неонатальная адренолейкодистрофия
Точечная остехондродисплазия
Ряд форм амавроза Лебера
Гиперпипеколовая ацидемия
( ) Ризомиелическая точечная хондродисплазия РТОХД
первого типа
целльвегероподобный синдром
синдром недостаточности D- бифункциональных белков
синдром псевдоцелльвегера
2- ая2- аягруппагруппа
5
, Нарушение нескольких биологических функций нормальное количество пероксисом в печени
Пероксисомные нарушения β-окисления: X- ( - )сцепленная адренолейкодистрофия Х АЛД -Недостаточность ацил КoA-оксидазы Недостаточность D- бифункциональных белков , ( )Недостаточность белка транспортирующего стирол СТБ 2- - - - (Недостаточность метил ацил КоА редуктазы МАКo )АР :Нарушения биосинтеза эфиросодержащих липидов РТОХД второго типа РТОХД третьего типа Нарушения α- :окисления фитановой кислоты Болезнь Рефсума Нарушение детоксикации глиоксилата Гипероксалурия первого типа
3- ая3- аягруппагруппа
6
Нарушение одной биологической функции нормальное количество пероксисом в печени
7
ДЦЖК Пристановая к-та Фитановая к-та
Спектр нарушений Целльвегера (СНЦ) ↑ N-↑* N-↑*
Ризомиелическая точечнаяхондродисплазия (РТОХД) первого типа
N N-↑* N-↑*
Пероксисомные нарушения β-окисления
X-сцепленная адренолейкодистрофия ↑ N N
Недостаточность ацил-КoA-оксидазы ↑ N N
Недостаточность D-бифункциональныхбелков
↑ N N-↑*
Недостаточность белка,транспортирующего стирол (СТБ)
N N-↑* N-↑*
Недостаточность 2-метил-ацил-КоАредуктазы (МАКoАР)
N N-↑* N-↑*
Нарушения биосинтеза эфиросодержащих липидов
РТОХД второго типа N N N
РТОХД третьего типа N N N
Нарушения α-окисления фитановой кислоты
Болезнь Рефсума N N-↓ N-↑*
Нарушение детоксикации глиоксилата
Гипероксалурия первого типа N N N
Фитановая кислота (C19H39COOH)
Пристановая кислота
Гексакозаеновая кислота ( 26:0С )
( 24:0)Лигноцериновая кислота С
( 22:0)Бегеновая кислота С
C24/C22
C26/C22
8
9
10
11
Agilent 6850/5375
12
Shimadzu GS 17A/GSMS-QP 5050
13
14
Rf/DC Voltage
, Материалом для исследования служит плазма , собранная аспирацией венозной крови как детей
.так и взрослых пациентов
, Для длительного хранения чтобы исключить изменения уровней содержания исследуемых
, .соединений плазма замораживается
, Большое число образцов плазмы пациентов поступающих в лабораторию из различных
, клинических баз РГМУ объединяются и . тщательно перемешиваются Для каждой серии
, анализа используются образцы полученные из . смеси плазмы одной выборки
15
1) Кислотный гидролиз
2) Щелочной гидролиз
3) Экстракция гексаном
4) Упаривание эстрагента в токе гелия
5) Дериватизация ацилирующим
реагентом MBTFA
16
17
КонцентрацииДЦЖК в плазме , / .контрольных образцов в мкмоль л
18
Определяем ые
соединения
Среднеезначение
5-95% доверительныйинтервал
22:0С 75 40-119
24:0С 56 33-84
26:0С 0,79 0,45-1,32
C24/ 22С 0,75 0,57-0,92
C26/ 22С 0,01 0,01-0,02
Верхние эталонные значения фитановой и 2- пристановой кислот для людей в возрасте х лет и
:более
– 10 /фитановая кислота мкмоль л
– 3 / пристановая кислота мкмоль л
19
. Рис 1. 26:0 Уровни содержанияжирной кислоты С в плазме крови пациентов с различными наследственными
пероксисомными заболеваниями и контрольной группы вмкмоль/ .л
С 26:0С
мкмоль/л
20
. 2. 24Рис Значение соотношения С /C22 -для пациентов с Х сцепленной адренолейкодистрофией и контрольной
.группы
24С / 22С
21
. 3. Рис Уровни содержания фитановой кислоты в плазме крови , пациентов с болезнью Рефсума РТОХД первого типа и
контрольной группы в мкмоль/ .л
С -Фитановой к ты
мкмоль/л
, Нами показано что концентрация длинноцепочечных жирных кислот в плазме контрольной группы не зависит
, от возраста в то время как для фитановой и пристановой кислот корреляция прослеживается в определённой
.степени
, Верхний эталонный уровень для фитановой кислоты 10 / , - 3 равен мкмоль л тогда как для пристановой
/ 2- .мкмоль л для пациентов в возрасте от х лет и более
, Совместный анализ длинноцепочечныхжирных кислот пристановой и фитановой кислот является действенным
методом для выявления больных с пероксисомными, нарушениями что особенно важно на ранних стадиях
.заболевания
22