Protozoe digestivnog trakta, urogenitalnog sistema i

protozoe krvi i tkiva

XI vežba

PROTOZOE DIGESTIVNOG TRAKTA

1. Giardia lamblia s. Lamblia intestinalis

• Parazit tankog creva čoveka, flagelat. • Morfologija: Vegetativni oblik (trofozoit) je kruškolik,

ima prednji deo koji je s jedne strane konveksan a sa druge konkavan. Konkavnom stranom pomoću sisaljke prijanja za epitelne ćelije sluzokože creva.

• U citoplazmi ima dva jedra koja su bliža prednjoj strani. Ima 4 para flagela i 8 blefaroplasta, dve aksoneme prolaze celom dužinom tela parazita. Ciste su okrugle i sadrže 4 jedra i 4 para aksonema.

• Bolest: lamblioza

Giardia lamblia

Parazitološka dijagnoza:

• materijal: stolica, duodenalni sok, žuč, materijal dobijen biopsijom

• nativan preparat:- u uzorku duodenalnog soka, žuči i neformirane stolice traže se pokretni, vegetativni oblici. -u formiranoj stolici traže se ciste.

• Mikroskopiranje u Foot-ovoj komori ili mikroskopom sa grejnim stočićem.

Entamoeba histolityca s. dysenteriae

Parazit debelog creva čoveka.

• Morfologija: • vegetativne forme:

forma hystolitica i forma minuta • forma cista:

(10-14 mikrometara): okrugla, dvoslojna membrana, zrela cista sadrži 4 jedra za razliku od ciste E. coli koja ima 8 jedara.

• trofozoit

jedra

jedra

Entamoeba histolityca s. dysenteriae• cista

Entamoeba coli

Parazitološka dijagnoza:

• materijal: stolica, materijal uzet biopsijom, aspirati.

• nativni preparat: mikroskop sa grejnim stočićem ili Futova komora.

• bojeni preparat: po Quenselu i po Heidenheinu

• kultivisanje: modifikovana Leflerova podloga, 72h.

• serologija: u slučaju ekstraintestinalne amebijaze (PHA, IIF, ELISA).

PROTOZOE UROGENITALNOG SISTEMA

Trichomonas vaginalis

• Flagelat, postoji samo vegetativni oblik.

Parazitološka dijagnoza: • materijal: vaginalni bris ili ispirak,

endocervikalni bris, sekret uretre, sediment urina.

• nativni preparat• bojeni preparat (po Giems-i), citoplazma

plavo, jedro crveno.• kultivisanje: Leflerova podloga.

Trichomonas vaginalis

PROTOZOE KRVI I TKIVA

Trypanosoma gambienseTrypanosoma rhodesiense

Izazivaju bolest spavanja u ekvatorijalnoj Africi.• Biološki vektor: muva roda Glossina.• Parazitološka dijagnoza:

materijal: serozna tečnost iz primarnog afekta, krv, punktat grudne kosti, limfnih žlezda, sediment likvora.

• nativni preparat, bojenje po Giems-i, osetljive životinje: miš i pacov

• RVK, IIF.

Trypanosoma cryzi Chagas

Izaziva američku tripanozomijazu.

• Biološki vektori: stenice rodova: Triatoma,

Rhodnius Panstrongylus

• Na mestu uboda razvija se primarna lezija (šagom) odakle se paraziti šire do regionalnih limfnih žlezda i udaljenih organa. Prodor parazita u krvotok – febrilno stanje. Bolest može imati akutan, subakutan i hroničan tok.

Parazitološka dijagnoza:

• materijal: krv, punktati sternuma, limf. žlezda, slezine, likvor.

• bojeni preparat (po Giems-i) • serološke reakcije: PHA, IIF, RVK• biološki ogled na zamorcu ili belom mišu

Trypanosoma spp.

Leishmania donovani

• Kala-azar (crna groznica)• Biološki vektor:

ženke insekta iz roda Phlebotomus

Parazitološka dijagnoza:

• materijal: krv, punktati sternuma , slezine, jetre.• bojeni preparat: fiksiranje metil-alkoholom i bojenje

po Giems-i• kultivisanje: NNN podloga, 7-14 dana• nespecifični testovi:

- formol-gel test (serum + 1 kap formalina, 30 min, gel koji podseća na belance),

- ureastibaminski test (precipitat)• intradermalni test: Ag je lajšmanin koji se daje i.d.,

nakon 72h, edem i induracija.• serološke reakcije (RVK, PHA, IIF, ELISA).

Leishmania donovani-amastigot

Leishmania donovani-promastigot

Toxoplasma gondii

• Do infekcije ljudi dolazi unosom oocisti, konzumiranjem termički nedovoljno obrađenog mesa, sirovih jaja, direktnim kontaktom sa sekretima inficiranih životinja, transfuzijom krvi, transplacentarno.

• Intracelularan parazit sa izraženim afinitetom za ćelije retikuloendotelnog sistema, CNS-a, poprečno-prugaste muskulature.

Toksoplazmoza

• stečena (akvirirana) toksoplazmoza,

• toksoplazmoza imunokompromitovanih osoba

• kongenitalna toksoplazmoza

Parazitološka dijagnoza:

• materijal: krv, likvor, kostna srž, urin, amnionska tečnost, delovi posteljice, itd.

• bojeni preparat po Giems-i• serološke reakcije (antitoksoplazmatska IgA,

IgM i IgG At) IIF, RVK, ELISA• Sabin-Feldman-ov (Dye) test: Ag su žive

toksoplazme• Intradermalni test (10x10 mm)• PCR• biološki ogled na belom mišu

Toxoplasma gondii

Toxoplasma gondii

Plasmodium vivaxPlasmodium ovalePlasmodium malariaePlasmodium falciparum

• Biološki vektor: ženka komarca iz roda Anopheles.

• U svom razvoju plasmodijum ima dva ciklusa:

-aseksualni u čoveku (šizogonija koja se sastoji iz eritrocitne E i egzoeritrocitne,

EE faze) i

-seksualni u komarcu (sporogonija).

Životni ciklus Plasmodium falciparum

• Infektivne oblike, sporozoite, prenosi ženka komarca roda Anopheles i oni ostaju u krvotoku 30 min, zatim ulaze u ćelije parenhima jetre, zaokruže se i počnu da se hrane njihovom citoplazmom.

• Za oko sedam dana ispune napadnute ćelije deleći se u veći broj merozoita koji posle prskanja parazitirane ćelije dospeju u krvotok i napadaju eritrocite.

• U eritrocitu parazit prolazi kroz stadijume trofozota, šizonta, merozoita i gametocita.

• Kada uđe u eritrocit merozoit raste, vakuola ispunjava parazit a jedro se potiskuje ka pariferiji (stadijum prstena). Posle nekoliko sati prodire u stromu eritrocita i u parazitu se pojavljuje pigment nastao digestijom hemoglobina (malarični pigment).

• Sve ove faze obuhvataju stadijum trofozoita.

• Jedro se sada deli na manja zrnca čiji je broj karakterističan za svaku vrstu (šizonti), od kojih nastaje nova generacija merozoita koji, kada sazru, dovode do prskanja eritrocita i prodora parazita u krv i napada na nove eritrocite.

• Razvojem novih generacija merozoita broj napadnutih eritrocita se povećava.

• Posle nekoliko ciklusa u eritrocitu počnu da se razvijaju i gametociti odnosno neki merozoiti ne prelaze u stadijum prstena već od njih nastaju okrugli oblici, mladi gametociti kod koji se jedro diferencira na jedan od dva načina: hromatin se zadrži u sredini i formira rastresito jedro mikrogametocita ili nastaje kompaktno jedro, smešteno periferno u makrogametocitu.

• Dalji razvoj gametocita odvija se u želudcu komarca. Tu dolazi do oplođenja makrogametocita sa mikrogametocitom i nastaje zigot koji se kreće prema zidu želudca, u kome se začauri i taj oblik se naziva oocista.

• U oocisti se razvijaju sporozoiti do njenog prskanja kada prelaze u limfu, putem koje dolaze do pljuvačnih žlezda komarca.

Dijagnoza:

• uzorak krvi ili punktat kostne srži

• PREPARAT:

Gusta kap i krvni razmaz

- fiksiranje metil ili etil alkoholom

- bojenje Giemsa bojom

Gusta kap i krvni razmaz

PLASMODIUM FALCIPARUM