validación y verificacion de metodos de examen cuantitativos
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7/29/2019 Validacin y verificacion de metodos de examen cuantitativos
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Validacinyverificacindemtodosdeexamencuantitativos
IgnacioReyesRamrez
entidad mexicana de acreditacin, a.c.
TemasselectosdeCalidadenSerologa
(aplicacinen
el
banco
de
sangre)
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Introduccin
Sedescribirnlospuntosaconsiderarparalavalidacinyverificacindelos
procedimientosdeexamencuantitativos,paraelcumplimientoyevaluacindelpunto
5.5.2 delanormaNMXEC151892008.
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Conformealasdirectricesestablecidasenla
Gua
para
la
validacin
y
la
verificacin
de
los
procedimientosdeexamencuantitativosempleadosporellaboratorioclnico.
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AlcancedelaGua
Ladebenaplicarloslaboratoriosclnicosqueseencuentranenalgunaetapadelprocesode
acreditacinantelaentidadmexicanadeacreditacin,a.c. atodoslosprocedimientosdeexamencuantitativosdelalcancedelaacreditacin
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Descripcin
Yaqueexistendiversostipodemtodosanalticos
disponiblesenelmercado.
Esimportantequeellaboratorioevale losdiferentesmtodosyseleccioneaquelquemejorseadecuealasnecesidadesyrecursos.
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Validacin
Sedefinecomo:
LaConfirmacinmedianteelsuministrode
evidenciaobjetivadequesehancumplidolosrequisitosdelmtodoparaunautilizacinoaplicacinespecificaprevista.
(NMXCH152IMNC2005)
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Losdatosdelavalidacindelmtodolosinformaelfabricanteensusinstructivosyestospuedencomprenderporsuaplicacin:
Linealidad.
Precisin. Veracidad.
Limitededeteccin.
Selectividad. Sensibilidadanaltica.
Intervalo
de
trabajo. Especificidadanaltica.
Incertidumbre.
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Siseutilizanmtodosdesarrolladosporellaboratoriooalgunofuemodificado,sedeberealizarlavalidacincompletaypresentarlasevidencias
correspondientes.
Linealidad.
Precisin. Veracidad.
Limitededeteccin.
Selectividad. Sensibilidadanaltica.
Intervalodetrabajo.
Especificidadanaltica.
Incertidumbre.
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Lavalidacin compruebalaaptituddelosprocedimientos
de
examen yreflejalascondicionesrealesdelaaplicacindelosmismos.
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Verificacin
Laconfirmacinmediantelaaportacindeevidenciaobjetivadequesehancumplidolos
requisitosespecificadosparaunmtodo.
(NMXCC9000IMNC2005)
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Laverificacinconsisteenevaluareldesempeodelmtodo
parademostrarque
cumpleconlosrequisitosparaelusoprevisto,quefueronespecificadoscomoresultadode
suvalidacin.(NMXCH152IMNC2005)
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VE= Valor Esperado del Reactivo.
VO= Valor Observado del Reactivo.
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Parmetrosdedesempeo
Ellaboratoriodebe
realizar
la
verificacin
delosmtodosyevidenciarsicumplen
conlascaractersticasdedesempeoenlascondicionesdel
laboratorio.
Linealidad.
Precisin. Veracidad.
Incertidumbre.
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EvaluacindelosParmetros
Linealidad Evaluarelintervalo
analtico
del
mtodo
enellaboratorio.
Elcomportamiento
lineal. Laverificacindebe
tomarencuentalospuntosdedecisinclnica.
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Precisin.
Valordelamagnitud. Estimacindelvalor
delmensurando.
Errordemedida(aleatorioy
sistemtico).
Veracidad.
Concordanciaentrelamediaaritmticayelvalorverdaderoo
aceptadocomoreferencia.
Errorsistemtico(sesgo).
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Errorsistemtico. Mediaqueresultadeunnmeroinfinitodemedicionesdelmismomensurando,efectuadobajocondicionesderepetibilidad,menosunvalorverdaderodelmensurando.
(NMXZ055IMNC)
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Exactituddemedicin. proximidaddelaconcordancia
entre
el
resultado
de
una
medicin yunvalorverdaderodelmensurando.(NMXCH152IMNC2005)
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EjemplodeExactituddemedicin.
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EXACTITUD
ERROR DE MEDIDA
PRECISIN VERACIDAD
ERROR ALEATORIO ERROR SISTEMATICO
Relacin entre los distintos tipos de error y los correspondientesconceptos cualitativos
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Incertidumbre. Intervalodentrodelcualseesperaqueseencuentrelacantidad
medida,teniendoencuentatodaslasfuentesdeerror.
Incertidumbreestndar(u).
1DS
Incertidumbreexpandida(U).
U=u
xk
IncertidumbreCombinada(Uc).
Errorcuadrticomedio(ECM).
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Incertidumbredemedicin. Parmetroasociadoalresultadodeunamedicinquecaracterizaladispersindelosvaloresquepodranrazonablemente,seratribuidosalmensurando.(NMXCH152IMNC2005)
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Incertidumbre
de
medicin.
media
VRS
VRI
O
O
O
O
OO O
O O O O OO
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Aplicacindelaverificacin
Objetivo
Verificareldesempeodelmtodoanaltico
paralacuantificacindeAc.rico enunequipoautomatizadoconformealoestablecidoenlaGuadeValidacinde
mtodoscuantitativos.
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Caractersticasdelreactivo
IntervaloBiolgicodeReferencia:
2,0
a
7,0
mg/dL (hombre).2,0a5,0mg/dL (mujeres).Reproducibilidad:Nivel:3,7mg/dL,DS: 0,23mg/dL,CV%:0,61Nivel:6,2mg/dL,DS: 0,37mg/dL,CV%:0,60Nivel:10,0mg/dL, DS: 1,60mg/dL,CV%:1,60
Recuperacin:Entre97a101%paraunniveldeUricemia de10mg/dL.
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Lmitededeteccin:
Enespectrofotmetroelestndarde10,0mg/dL
proporcionaunalecturaaproximadade0,290D.O.
Loquesignificaqueelcambiomnimodeconcentracindetectableenesascondicionespara0,001D.O.ser aproximadamentede0,03mg/dL.Linealidad:
Lareaccineslinealhasta20mg/dL
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Linealidad
VERIFICACION DE LA LINEALIDAD DEL
AC. URICO
No. Dilucin %
Concentracin
minima y
maxima
(mg/dL)
Valor
obtenido
mg/dL
Valor
Teorico (X)
mg/ dL Sesgo % Error
1 0 20 17.83 20 2.17 0.11
2 25 8.66 10 1.34 0.13
3 50 4.57 5 0.43 0.09
4 75 2.28 2.5 0.22 0.09
5 100 1.25 1.21 1.25 0.04 0.03
Promedio 0.08
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Grafico de Linealidad
1.21 2.284.57
8.66
17.83
0.00
5.00
10.00
15.00
20.00
0 20 40 60 80 100 120
Dilucin
[]mg/dL
Ac.
Urico
Ensayo de Linealidad
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DatosdelaCorrelacinLineal Regresion Lineal
Valor obtenido
mg/dL
Constante [A] 0.060
coeficiente de
regresion [b] 0.884
coeficiente de
correlacin [r] 0.999
coeficiente critico
de correlacion [r2] 0.999
Ecuacin de la
recta y = (0.884)x + (0.60)
r2 = 0.999
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Grafico de Linealidad
0.00
5.00
10.00
15.00
20.00
0 5 10 15 20 25
Valor asignado [ ] mg/dL Ac. Urico
Valorobtenido[]mg/dL
Ac.
Urico
Ensayo de Linealidad
y = (0.884)x + (0.60)
r2 = 0.999
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Criteriosdeaceptabilidad
Calcularlapendiente(1)ylaordenadaalorigen(0).
Compararelsesgooelporcentajede
errorparacadadilucinycompararconelfabricante.
Tomarladecisindeaceptarorechazar.
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Decisin
Elmtodoanalticoenlascondicionesdeloptimasdellaboratoriopresentaunrangolinealconfiablede1,12a17,83mg/dL.
Elcoeficientedecorrelacinlineal(r2)de0,999
loqueindicaqueelintervalo
evaluado,lafuncindecalibracineslineal.
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VERIFICACION DE LA LINEALIDAD DEL AC. URICO
No.Dilucin
% Valor 1 Valor 2 Valor 3 Media DS
1 0 17.50 18.00 18.00 17.83 0.24
2 25 8.50 9.00 8.50 8.66 0.24
3 50 4.50 4.70 4.50 4.57 0.09
4 75 2.30 2.25 2.30 2.28 0.02
5 100 1.25 1.20 1.17 1.21 0.03
Promedi
o 0.08
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Alcompararladesviacinestndardecada
dilucinseobservaunpromediode0,08. El%Errornosuperael0,08%.
Por
lo
que
el
rango
evaluado
para
el
mtodo
eslinealsegnloestablecidoporelfabricante,yaqueaconcentracionesbajas
permiteunadesviacinde 0,23mg/dLyaltasa 1,60mg/dL.
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Precisin
SueroControldeAc.ricode5,25y9,01
mg/dL. 20datoscorrida
intrada.
Secalcula:media
desviacinestndar
%delcoeficientedevariacin
No. de Lectura
Ac. Urico
(mg/dL)
Normal
Ac. Urico
(mg/dL)
Patologico
Valor Asignado 5.25 0.91
x 5.1587756 8.98855357
DS 0.082078268 0.11357817
CV% 1.591041645 1.26358669
%Error relativo 1.737607617 0.23802924
%Recobro 98.26239238 99.7619708
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DeacuerdoconCLIAparaimprecisin
intraserialointrada,laDSobtenidadebeserigualomenora delErrorTotalpermitido.
ParaAc.ricoelerrortotalpermitido 5%.
DSIntrada 0,25ET, 1,25% SustituyendoSueroNormal: 0,082 1,25%SueroPatolgico: 0,113 1,25%
V id d
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Veracidad
Laveracidaddelmtodosepuedeestimarpormediodel
error
relativo.
%deErrorrelativo=[Valorreal Valordelamedicin
]x100
Valorreal
Criterio:Elvalordelerrorrelativoseamenoroigualalreportado.
Resultados:SueroNormal: 1,73%SueroPatolgico: 0,23%
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La veracidad del mtodo se puede estimar por medio del
calculo del porcentaje de recuperacin.
% Recuperacin = [___Valor obtenido___] x 100Valor de referencia
Criterio:
El % de recuperacin sean menor o igual alreportado por el fabricante.
Resultados:
Intervalo del fabricante de 97 al 101 %
Suero Normal: 98,26 %
Suero Patolgico: 99,76 %
b
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Incertidumbre
Mtodoenzimticoparalacuantificacindecidoricoespectrofotomtricoconuricasa.
Empleandouncalibradorconunvalorde10 0.005mg/dLconunfactordecoberturak=2para
un
nivel
de
confianza
del
95%.
C t d l i tid b
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Componentesdelaincertidumbre
Variabilidadpremetrolgica.
Incertidumbredelvalordelcalibrador.
Magnitudesinfluyentesendgenas.
Imprecisininterdiaria.
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Variabilidadpremetrolgica
Elconjuntodeactividadesrealizadasdesdelatomadelamuestrahastaquelamuestradesueroestalistaparalamedicinprovocaun
coeficientedevariacinpremetrolgicade0,8%.Estavariabilidadaplicadaalresultado
obtenido
(5,25
mg/dL)
corresponde
a
una
incertidumbreestandarde0,04mg/dL.
d b d l l d l l b d
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Incertidumbredelvalordelcalibrador
Elvalordelcalibradoresde10mg/dLylaincertidumbreexpandidaesde0,005mg/dL.Porlotanto,laincertidumbreestndar
relativadelvalorasignadoalcalibradores0.05%,queaplicadoalresultadoobtenido
(5,25
mg/dL)
corresponde
a
una
incertidumbreestndarde0,002mg/dL.
i d i fl d
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Magnitudesinfluyentesendgenas
Segnelfabricantedelosreactivoselcriterioparaaceptarqueunaconcentracindebilirrubinas,cidoascrbicoobromurodehioscinaenelplasmaproduzcaunainterferencia
significativa
es
que
no
altere
el
valor
del
mensurandoen 10%.
Losposiblescambiosdelvalorverdaderodel
mensurandoestarnenelintervalo[0%;10%] [10%;0%],aunqueesmsprobablequeest mscercade0%quedel10% del 0%.
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Considerandounadistribucintriangularrectangular:u=[(ba)2/18]0,5
dondeaybson,respectivamente,loslimitesinferiorysuperiordelintervalo;enestecaso:
u=[(100)2/18]0,5
=2,4%
queaplicadoalresultadode5,25mg/dL,correspondea0,126mg/dL;ycomoestoes
aplicableatresmagnitudesinfluyentes:Uc
=[3X(0,126mg/dL)2
]0,5=0,027mg/dL
I i i i t di i
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Imprecisininterdiaria
Esteprocedimientodemedidatieneun
comportamiento
heterocedstico
con
un
coeficientedevariacinmetrolgico,aproximadamenteconstantealolargodel
intervalodemedida,igualal1,6%.Estaimprecisininterdiariaaplicadaalresultado
5,25mg/dLy expresadacomoincertidumbreestndar,correspondea0,08mg/dL.
E ti i d l i tid b
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Estimacindelaincertidumbre
uc
=(0,042
+0,0022+0,0272
+0,082)0,5=
0,047
mg/dL U=uc
xk=0,047mg/dLx2=0,094mg/dL
Resultado:
5,25
0,094mg/dL
Intervalo:
5,15 a5,34 mg/dL
Datos de la verificacin
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Datosdelaverificacin
VerificacindelMtodoenzimticodeuricasaparaladeterminacindecidorico.
Linealidad:
Elmtodoeslinealde1,2a17.8mg/dL Precisin:
SueroNormal:DS=0,08;CV=1,59%SueroPatolgico:DS=0,11;CV=1,26%
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Veracidad:
ErrorRelativo
SueroNormal:1,73%
SueroPatolgico:0,230
%Recuperacin
SueroNormal:98,26%
SueroPatolgico:99,76%
Incertidumbre:
U=0,094mg/dL
Resultadodelamuestra:
5,25 0,094mg/dLIntervalo:5,15a5,34mg/dL
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Criteriosdeevaluacindela
normaNMX
EC
15189
IMNC
2008/ISO15189:2007MP-FE009-00
Entrada en vigor 2009-05-08
Requisitos tcnicos
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Requisitos tcnicos
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Requisitos tcnicos
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Requisitos tcnicos
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MUCHASGRACIAS