validacion del metodo analítico para nimesulida por uv-vis

7/23/2019 Validacion Del Metodo Analtico Para Nimesulida Por UV-Vis

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INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA

VALIDACIN DEL MTODO ANALITICO PARA NIMESULIDA PORESPECTROFOTOMETRIA U.V

INFORME TCNICO DE LA OPCION CURRICULAR EN LA MODALIDAD DE:

ESTANCIA INDUSTRIAL

QUE PARA OBTENER EL TITULO DEINGENIERO FARMACEUTICO

PRESENTA:

ALONSO CHVEZ GUADALUPE

ASESORES:

EXTERNO: QFB BEATRIZ GONZLEZ SNCHEZINTERNO: QFB MA. ESTHER BAUTIZTA R

Mxico, D.F. a 19 mayo de 2008.


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INSTITUTO POLITCNICO NACIONALpg 1


INDICE

I. HISTORIA DE LA EMPRESA .2

2. SIMBOLOS Y ABREVIATURAS .7

3.INTRODUCCION .8

3.1 Ficha tcnica de Nimesulida .8

3.2 Validacin de Mtodos Analticos 10

3.3 Clasificacin de Mtodos

Analticos

11

3.4Parmetros a Evaluar 12

3.5 Informe del proceso de

Validacin

17

4.JUSTIFICACION 18

5. OBJETIVOS 19

6. METODOLOGIA 20

6.1 Mtodo Potenciomtrico 20

6.2Mtodo Espectrofotometrico 22

7. RESULTADOS 26

7.1 Mtodo Potenciomtrico 26

7.2 Mtodo Espectrofotometrico 36

8. COMPARACION DE METODOS 50

9.ANALISIS DE RESULTADOS 53

10.CONCLUSIONES 54

11. BIBLIOGRAFIA 55

12.ANEXOS 56

1


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I. HISTORIA DE LA EMPRESA.

El 7 de enero de 1953 nace Mavi Farmacutica en la ciudad de Mxico, con el objeto de

fabricar medicamentos de uso humano, de calidad reconocida y a precio accesible para

la mayora, buscando la formacin integral y el bienestar de sus empleados.

Es fundada por la familia Alonso Vilatela, es una empresa mexicana financiada en sutotalidad por capital nacional. Despus de 8 exitoso aos, en 1961 los socios fundan una

segunda empresa llamada Laboratorios Euromex, con el objetivo de proveer un mayor

numero de especialidades farmacuticas. En le ao de 1980, se forma un grupo

industrial Farmex como empresa controladora de laboratorios Euromex y Mavi

Farmacutica. Ese mismo ao se adquiere la empresa Corporacin Farmacutica.

De esta manera, Grupo Industrial Farmex se convierte en un conglomerado fuerte y

solid. Buscando una mayor integracin, en 1984 crea Qumica Fina Farmex, empresaproductora de principios activos farmacuticos. Estas materias primas se comercializan

tanto en el mercado nacional como internacional.

Atendiendo los siguientes sectores.

* Lnea comercial (Mavi farmacutica, laboratorio Euromex)

* Sector Salud (Mavi farmacutica, laboratorio Euromex)

* Lnea frmaco qumica (qumica fina Farmex)

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I:I LOCALIZACIN DE LA PLANTA:

Direccin:

Calle Triangulo esquina con Osa Menor, Colonia Prado Churubusco, S/N, CP 04370,Delegacin Coyoacn.

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I.2 MISION:

Desarrollar, producir y comercializar medicamentos para atender la salud humana, de

calidad reconocida y a precio accesible, impulsando la formacin integral y el bienestar

de sus empleados y generando una retribucin justa para los accionistas que asegure la

permanencia y Crecimiento de la organizacin.

I.3 POLITICA DE CALIDAD:

En nuestra organizacin la calidad se demuestra:

* Desarrollando y produciendo medicamentos conforme a lo que dispone la Ley

General de Salud.

* Desempeando actividades dando cumplimiento a La NOM 059 y la ISO

9001:2000

* Esforzndose continuamente en mejora de procesos, y el ambiente de trabajo,

la comunicacin con clientes, proveedores y empleados.

* Verificando la satisfaccin de nuestros clientes, la capacidad de proveedores y

eficacia de los procesos.

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I.4 LINEA DE PRODUCTOS GENERALES DE LA EMPRESA:

1.

ANALGESICOS

2.

ANTIBIOTICOS

3. ANTIMICROBIANOS

LINEA DE PRODUCTOS ESPECIFICOS DE LA EMPRESA.

NOMBRE COMERCIAL SUSTANCIA ACT IVA PRESENTACINACITAB Acido acetil saliclico Caja c/20 tabletasAMIKAVI Amikacina Caja c/ 1 ampolletaARTROBEN CREMA Bencidamina Caja c/1 tubo de 60 gARTROBEN SPRAY Bencidamina Caja c/frasco de 30 mLAXTIN Fluoxetina Caja c/14 cpsulasBACTOKINA Lincomicina Caja c/ 6 ampolletasBIOTAxIL Amoxicilina Caja c/ frasco 75 mLCATONA Captopril Caja c/30 tabletas

DALATINA Clindamicina Caja c/1 tubo de 30 gDISTENTAL Bromuro de pinaverio Caja c/14 tabletasEUFLUXIN Ciprofloxacino Caja c/12 comprimidosEURIFAM Rifampicina Caja c/16 cpsulasEUROLOL Metoprolol Caja c/20 tabletasFENAGEL Diclofenaco dietil amonio Caja c/1 tubo 60gFLUOSEP Ofloxacino Caja c/10 grageasFLUXIBIT Loratadina/ambroxol Caja c/1 frasco de 120 mLINFLANOX Naproxeno Caja c/12 tabletasITAMOL Subsalicilato de bismuto Caja c/24 tabletas

masticables

LESACLOR SUSPENSION Aciclovir Caja c/ 1 frasco 125 mLLESIDEN Nimesulida Caja c/ 1 frasco 60 mLMACROFURIN Nitrofurantona Caja c/40 cpsulasMAVICAM Meloxicam Caja c/ 14 tabletasMAVIDOL Ketorolaco Caja c/10 tabletas

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6

ORTOCOL FORTE DICLOFENACO/COMPLEJOB CAJA C/30 GRAGEASSINFRAC Alendronato sdico Caja c/30 tabletasTAXENAN Naproxeno/Paracetamol Caja c/10 tabletas

UREZOL Fenazopiridina Caja c/20 tabletasVIKROL Claritromicina Caja c/10 tabletasXINAMIN Complejo B Caja c/30 tabletas

GNERICOS INTERCAMBIABLES

SUSTANCIA ACTIVA PRESENTACION

CINARIZINA Caja c/60 tabletasCLARITROMICINA Caja c/10 tabletasCLINDAMICINA Caja c/ 16 capsulasDICLOFENACO Caja c/ 2 ampolletasDIFENHIDRAMINA Caja c/ 1 frascoFLUCONAZOL Caja c/ frascoHIDRALAZINA Caja c/5 ampolletasKETAMINA Caja c/ 1 frascoKETOROLACO Caja c/ 3 ampolletasLORATADINA Caja c/ 1 frascoMICONAZOL Caja c/ 1 tubo

ONDANSETRON Caja c/ 3 ampolletasTERBUTALNA Caja c/ 3 ampolletasENALAPRIL Caja c/10 tabletasFENAZOPIRIDINA Caja c/ 20 tabletasFENOBARBITAL Caja c/1 frascoPEROXIDO DE BENZOILO Caja c/ 1 frascoRIFAMPICINA Caja c/ 1 frascoSULFATO FERROSO Caja c/ 1 frasco


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2. SIMBOLOS Y ABREVIATURAS:

Cuando se haga referencia a los siguientes smbolos o abreviaturas se entera:

S Desviacin estndar

S2 Varianza

S12 Varianza del mtodo 1

S22 Varianza del mtodo 2

F0.025,n2-1,n1-1 Valor de la distribucin F de fisher asociado a una

confianza del 2.5% y agrados de libertad

establecidos.

F0.975,n2-1,n1-1 Valor de la distribucin F de fisher asociado a una

confianza del 97.5% y agrados de libertad

establecidos.

SB2 Varianza del mtodo 2

SA2 Varianza del mtodo 1

b Pendiente

r2 Coeficiente de determinacin

CV Coeficiente de variacin

LD Limite de deteccin

LC Limite de cuantificacin

x Media aritmtica de xy Media aritmtica de y

n Numero de mediciones o recobros o blancos o

muestras o determinaciones.

SRf Sustancia de referencia

22/1

2 Razn de varianzas poblacionales

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3 INT RODUCCION:

3.1 FICHA TECNICA DE NIMESULIDA

Nimesulida es una molcula derivada de la sulfonanilida con accin antiinflamatoria,

antipirtica y analgsica que pertenece al grupo de los antiinflamatorios no esteroideos.

ESTRUCTURA

Nimesulida difiere de otros AINES por poseer una sulfonanilida, como su grupo acdico

funcional, que le dota de un perfil farmacolgico nico. Nimesulida inhibe la

prostaglandina sintetasa, tambin conocida como ciclooxigenasa, que modifica los

lmites de produccin de prostaglandina. Su potencia inhibitoria de la ciclooxigenasa se

considera intermedia cuando se compara con otros AINES. Se ha demostrado

recientemente que la ciclooxigenasa existe en dos formas isomorfas en el organismo,

denominadas COX-1 y COX-2. La COX-1 es una enzima constitutiva que produce

prostaglandinas que son esenciales para el mantenimiento de la homeostasis vascular ylas funciones gstricas y renales normales. La COX-2 es una enzima inducible que es

responsable de la liberacin de prostaglandinas durante la inflamacin. Segn esto,

parece positivo que la actividad antiinflamatoria positiva de los AINES se puede atribuir

a su capacidad para inhibir la COX-2, mientras que las reacciones adversas asociadas se

deben a su capacidad para inhibir la COX-1.

Nimesulida posee un efecto "scavenger" que interfiere con la produccin de radicales

libres por los leucocitos sin inhibir la quimiotaxis y la fagocitosis. Los productos de losradicales libres directa e indirectamente lesionan los tejidos del husped y contribuyen

al mantenimiento del proceso inflamatorio.

Nimesulida protege la lesin tisular que ocurre durante la inflamacin y "cortacircuita"

el proceso inflamatorio. De esta manera, ejerce un potente efecto antiinflamatorio in

vivo.

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Pr opi edades f ar macoci nt i cas

Nimesulida es bien absorbido por va oral y alcanza la concentracin plasmtica mximaen 1-3 horas; tiene una semivida de 2-3 horas y una duracin de accin de 6-8 h; por va

rectal el pico plasmtico se alcanza en aproximadamente 4 h con un tiempo de

eliminacin de alrededor de 5 horas.

La administracin diaria de 1 comprimido, cada 12 horas, con 100 mg de Nimesulida,

que es la dosis usual en las patologas con un componente inflamatorio, logra el estado

de equilibrio en 24-36 horas. La administracin reiterada no da lugar a fenmenos de

acumulacin.

Nimesulida se une ampliamente (99%) a las protenas plasmticas y posee un volumen de

distribucin aparente estimado de 0,19 a 0,35 l/kg tras la administracin oral.

Nimesulida se metaboliza en gran medida (1 a 3 % de la dosis se excreta invariable en la

orina) en varios metabolitos que se excretan principalmente en la orina (aprox. 70%) o

en heces (aprox. 20%). El frmaco es casi completamente biotransformado en 4-hidroxi-

nimesulida en ambas formas libre y conjugada, metabolito que parece contribuir a laactividad antiinflamatoria del compuesto.

Nimesulida se excreta principalmente por va urinaria (80%) y en menor cuanta por

heces (20%).

Indicaciones Teraputicas

Tratamiento sintomtico de la artropata degenerativa (artrosis).

Tratamiento de procesos inflamatorios y dolorosos agudos de diversas etiologas tales

como postoperatorio y traumatismos musculoesquelticos.

Dismenorrea primaria y como antipirtico.

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3.2 VALIDACIN DE MTODOS ANALITICOS:

En la industria farmacutica siempre acta buscando la calidad de los medicamentos y

de los procesos de fabricacin, por lo que es plenamente importante garantizar que el

medicamento es seguro, eficaz y eso se garantiza mediante la validacin.

Es por eso que los mtodos analticos deben cumplir con las exigencias de:

La Direccin general de medicamentos insumos y drogas (Digemid)

Reglamento de Insumos para la Salud, publicado en el diario Oficial el 4 de Febrero de

1988 referente a los establecimientos que destinen la fabricacin de insumos

(medicamentos, frmacos, materias primas y aditivos).

La Norma Oficial Mexicana NOM-059-SSA-1993 Buenas Prcticas de Manufactura de

productos farmacuticos, que establece los siguientes puntos:

1.

NUMERAL DE LA NORMA (5.6.3): Que se lleven acabo estudios de validacin de

los procesos de fabricacin y de los sistemas involucrados.

2.

NUMERAL DE LA NORMA (9.11.3): Los Mtodos Analticos deben ser validados, de

acuerdo con lo establecido en el apartado 9.12 Control de Laboratorio

Analtico

3. NUMERAL DE LA NORMA (9.12.3): Se debe contar con mtodos de anlisis

validados para producto a granel, terminado y materia prima en caso de no

aparecer en cualquier farmacopea internacional ni en la FEUM.

Norma Oficial Mexicana NOM-164-SSA1-1998 Buenas Prcticas de Fabricacin para

Frmacos que establece:

1. NUMERAL DE LA NORMA (16.1): Los controles de laboratorio e inspecciones deben

apoyarse en normas, PNOs o manuales que contengan las especificaciones para

garantizar la confiabilidad de sus resultados.

2.

NUMERAL DE LA NORMA (16.1.5): Validacin de Mtodos Analticos utilizados por

la empresa, NO farmacopeicos o farmacopeicos que tengan desviaciones frente a

la farmacopea de referencia.

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Buenas Prcticas de Laboratorio.

Un laboratorio de anlisis debe tener como principal propsito la produccin de datosanalticos de alta calidad por medio de uso d mediciones analiticas que sean precisas,

confiables y adecuadas para tal fin. Esto puede alcanzarse si se cuenta con un sistema

planificado y documentado de la calidad de las actividades, para esto el laboratorio

necesitara operar bajo un sistema de garanta de calidad que incluya una extensa

documentacin de sus actividades.

La validacin de un mtodo analtico, garantiza la calidad del medicamento, as mismo

es necesaria por que:

1.

proporciona alto grado de confianza, seguridad den mtodo y calidad en los

resultados.

2.

permite el conocimiento profundo del mtodo, si como las caractersticas.

3.

este conocimiento y seguridad ayuda a la disminucin de fallas y repeticiones,

por que lleva al ahorro de costos asociados y a cumplir con los tiempos previstos

de anlisis.

3.3 CLASIFICACION DE MTODOS ANALITICOS:

1.- En funcin de su estado Regulatorio:

* Mtodos farmacopeicos.

* Mtodos No farmacopeicos.

2.- En funcin de su aplicacin:

* Mtodos para producto a granel.

* Mtodos para producto terminado.

* Mtodos para Materia Prima.

* Mtodos indicadores de Estabilidad.

3.- En funcin de la Naturaleza de la respuesta analtica:

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* Mtodos fsico-qumicos.

* Mtodos Biolgicos.

4.- En funcin de propsito analtico:

* Mtodos para cuantificar el analito.

* Mtodos para establecer la presencia del analito a un lmite.

* Mtodos para identificar el analito.

5.- En funcin de la naturaleza del sistema de medicin:

* Mtodos en los cuales el instrumento de medicin de la respuesta analtica,

permite medir el ruido (cromatogramas, espectrofotmetro).

* Mtodos en los cuales el instrumento de medicin de la respuesta analtica, no

permite medir el ruido (potencimetros, buretas, etc.).

3.4 LAS CARACTERSTICAS DEL DESEMPEO DEL MTODO SE EXPRESA EN

FUNCIN DE LOS SIGUIENTES PARMETROS:

Selectividad

Capacidad de un mtodo analtico para determinar nicamente los componentes que se

pretenden medir.

Sensibilidad

Es la pendiente de la recta de calibracin que se obtiene cuando el resultado (o seal)

de la medida o una funcin de la misma se representa frente a la cantidad o

concentracin del analito.

Linealidad del sistema:

Criterios de aceptacin:

El valor del coeficiente de determinacin r2 deber ser 0.98

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El intervalo de confianza para la pendiente debe incluir la unidad

El coeficiente de variacin CV deber ser:

3% Si es qumico o espectrofotomtrico.

2% Si es volumtrico o cromatografico.

5% Si es microbiolgico

El porcentaje de recobro deber ser:

98-102% Si el mtodo es cromatografico, volumtrico.

97-103% Si el mtodo es qumico o espectrofotomtrico.

95-105% Si el mtodo es microbiolgico.

Linealidad del mtodo analtico:

Es su capacidad para demostrar que los resultados de la prueba son directamente

proporcionales a ala concentracin del analito dentro de un rango dado. Se clasifica en

dos:

1.

Cuando se conocen los componentes de la muestra y es posible preparar un

placebo analtico.

2.

No se conocen los componentes de la muestra.



El intervalo de confianza para la pendiente debe incluir la unidadEl coeficiente de variacin CV deber ser:

3% Si es qumico o espectrofotomtrico.

2% Si es volumtrico o cromatografico.

5% Si es microbiolgico

El porcentaje de recobro deber ser:

98-102% Si el mtodo es cromatografico, volumtrico.

97-103% Si el mtodo es qumico o espectrofotomtrico.

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95-105% Si el mtodo es microbiolgico.

Linealidad en el intervalo de aplicacin

La pendiente de la recta de calibracin debe ser constante en todo el intervalo de

aplicacin del procedimiento de medida. El lmite inferior de dicho intervalo vendr

determinado por el valor obtenido para el lmite de cuantificacin del mtodo. El lmite

superior del intervalo estar condicionado, en general, por la prdida de linealidad en

la curva de calibracin.

Exactitud:

Es la proximidad entre los resultados obtenidos por este mtodo y el valor real. La

exactitud del mtodo analtico se debe establecerse a lo largo de todo un rango.


El intervalo de confianza para la diferencia de las dos medias poblacionales del

porcentaje de recobro, debe incluir el valor de cero. Cualquier otro criterio debe ser

justificado.

Rango:

Es el intervalo entre los niveles superior e inferior, en el que se ha demostrado un nivel

adecuado de precisin, exactitud y linealidad del mtodo tal cual esta escrito.

Repetibilidad:

a.

Cualitativamente

Es el grado de concordancia entre resultados sucesivos obtenidos con el mismo

mtodo sobre una materia idntica sometida al ensayo, en las mismas

condiciones (siempre el mismo operador, igual aparato, igual laboratorio y en

pequeos intervalos de tiempo).

b.

Cuantitativamente

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Es el valor por debajo del cual est situado, con una probabilidad especificada,

el valor absoluto de la diferencia entre dos resultados individuales obtenidos en

las condiciones anteriormente expuestas.

En ausencia de otra indicacin se entender que la probabilidad es del 95%.


El intervalo d confianza para la razn de varianzas, deber incluir el valor de 1.

Cualquier otro criterio debe ser justificado.

Reproducibilidad:

a.

Cualitativamente

Es el grado de concordancia entre dos resultados individuales obtenidos con el

mismo mtodo sobre una materia idntica sometida al ensayo, pero en

condiciones diferentes (operadores distintos, aparatos diferentes, distintos

laboratorios y/o pocas diferentes).

b.

Cuantitativamente

Es el valor por debajo del cual est situado, con una probabilidad especificada,

el valor absoluto de la diferencia entre dos resultados individuales obtenidos en

las condiciones anteriormente expuestas.

En ausencia de otra indicacin se entender que la probabilidad es del 95%.

Lmite de deteccin:

Es la menor cantidad de analito que puede ser detectada y diferenciada de un blanco,

pero no necesariamente cuantificada con un nivel aceptable de exactitud y precisin.


El LD debe ser menor a la especificacin.


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El intervalo de confianza para la pendiente no debe incluir el cero.

Lmite de cuantificacin:

Es la cantidad o concentracin mnima que puede determinarse con un nivel aceptable

de exactitud y precisin.


El LC debe ser menor a la especificacin.


El intervalo de confianza para la pendiente no debe incluir el cero

Incertidumbre de la medida:

Estimacin que caracteriza el intervalo de valores en el que se sita generalmente, con

una alta probabilidad, el valor verdadero de la magnitud medida.

La incertidumbre de la medida incluye, en general, varios componentes. Algunos

pueden estimarse a partir de la distribucin estadstica de los resultados de una serie de

mediciones y pueden caracterizarse por la desviacin tpica muestral. La estimacin de

otros componentes solamente puede basarse en la experiencia o en otras informaciones.

Incertidumbre global:

Es una cantidad utilizada para caracterizar, como un todo, la incertidumbre del

resultado dado por un equipo o un procedimiento de medida.

Precisin:

Es el grado de concordancia entre los resultados obtenidos aplicando el mtodo

repetidas veces, bajo condiciones determinadas. La precisin slo depende de la

distribucin de errores aleatorios.


El intervalo de confianza para la pendiente debe incluir el valor de 1.

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3.5 INFORME DEL PROCESO DE VALIDACIN

El protocolo de validacin deber incluir al menos la siguiente informacin:

a.

Titulo

b. Propsito u objetivo.

c. Responsabilidades

d. Plan de prueba

e. Criterios de aceptacin

El informe de validacin deber incluir al menos la siguiente informacin:

a.

Descripcin completa de la muestra, especificando.

o Tiempo y condiciones de muestreo.

o Cantidad mnima necesaria.

o Instrumental y recipientes adecuados para la toma y conservacin

de las muestras.

o Aditivos cuando sean necesarios.

o Precauciones a tomar una vez recogida la muestra (por ejemplo:

tiempo y temperatura de conservacin).

b. Descripcin completa del mtodo analtico.

c. Concentraciones ensayadas.

d.

Valores obtenidos en los ensayos realizados.

e.

Valores calculados para la precisin, r2 y CV para cada concentracin.

f.

Justificacin tcnica de la omisin de algn ensayo.

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4.JUSTIFICACIN:

Hoy en da la competencia cada vez es ms fuerte en la Industria Farmacutica. Es por

eso que el contar con mtodos validados para el anlisis de materia prima, producto a

granel y terminado confiere alto grado de confiabilidad en la elaboracin de un

producto, proporcionando as la calidad del producto para quien lo consuma,

garantizando el fin para el cual fue creado.

La validacin de un procedimiento de medida, certifica mediante estudios de

laboratorio, que las caractersticas de dicho procedimiento cumplen las especificaciones

relativas al uso previsto de los resultados analticos.

La validacin permite el conocimiento de las caractersticas de funcionamiento del

mtodo y proporciona un alto grado de confianza en el mismo y en los resultados

obtenidos al aplicarlo mediante evidencia documentada y aprobada por el sistema de

calidad de la empresa.

La validacin de un Mtodo Analtico constituye un instrumento importante para

garantizar la calidad de un medicamento, puesto que confiere la fiabilidad a los

resultados obtenidos en el anlisis, asegurando as que cumplan con los parmetros de

calidad establecidos.

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5. OBJETIVOS:

OBJETIVO GENERAL:

Validar el mtodo analtico para la valoracin de Nimesulida

materia prima:

* Por UV

* Por titulacin potenciomtrica.

Realizar la comparacin de mtodos mediante la validacin para

demostrar que se pueden utilizar indistintamente y que se puede

reemplazar el mtodo espectrofotomtrico por el potenciomtrico.

OBJETIVOS ESPECIFICOS:

Comprobar mediante los resultados obtenidos de la validacin, que

el mtodo espectrofotomtrico se puede reemplazar como mtodo

rutinario de control de calidad.

Demostrar la aplicabilidad del mtodo a las instalaciones y

equipo con el que se cuenta en la empresa.

Comprobar que se cumplen con las especificaciones para dichomtodo.

Demostrar que el mtodo por UV sea reproducible, lineal, exacto.

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6 METODOLOGIA:

6.1 T ITULACIN POTENCIOMETRICA

a) Mt odo de anl i sis de la va lor aci n:

Pesar con exactitud aproximadamente 240 mg de la muestra, transferir a un matraz

erlenmeyer de 250 y disolver en 30 ml. de Acetona RA y 20 ml de Agua purificada.

Titular con solucin 0.1 M de hidrxido de sodio. Determinar en punto de equivalencia

potencio mtricamente. Cada mililitro de solucin de 0.1M de hidrxido de sodio

equivale a 30.83 mg de Nimesulida.

REACTIVOS:

Agua purificada.

Acetona RA

Nimesulida MP lote: NM/3330107

Hidrxido de sodio 0.1 M SV

cido clorhdrico 0.1M SV

EQUIPO Y MATERIAL:

Parrilla de agitacin Thermolyne

Bureta Kimax de 50 ml.

Balanza analtica Sartorius BP 2215

Matraz erlenmeyer Kimax de 250 ml.

Pinzas para bureta.

Pipetas de 20,10 ml.

Agitador magntico

Esptula de acero inoxidable.

Soporte universal.

Perilla de succin.

Potencimetro Sicnno.

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b)

Ensayos de val id acin:

1.- LINEALIDAD DEL SISTEMA DE MEDICION:

Construir una curva de calibracin a los niveles 40, 60, 80, 90, 100,110 %, por medio de

pesadas independientes, transferir a un matraz erlenmeyer y adicionar 30 ml. de

Acetona RA y 20 ml de Agua purificada. Titular con solucin 0.1 M de hidrxido de sodio.

Determinar en punto de equivalencia potenciomtricamente.

NIVEL% CANTIDAD ADICIONADA

(mg)

NO. DE REPLICAS

40 96 3

60 144 3

80 192 3

90 216 3

100 240 6

120 288 3

Criterios de aceptacin: se determinaran evaluando los resultados obtenidos por

regresin lineal.

Calcular la pendiente

El intercepto en y deber ser cercano a 0

El valor del coeficiente de correlacin r deber ser 0.99 o mayor

El intervalo de confianza para la pendiente no debe incluir el cero

El coeficiente de variacin CV deber ser menor al 1.5%

2.-PRECISION DEL SISTEMA:

Tomar los resultados obtenidos en el nivel al 100% y calcular los valores de , SD, y el

CV. El criterio de aceptacin es: CV 1.5%

3.- LINEALIDAD DEL METODO:

No aplica debido a que es materia prima y se toma la linealidad del sistema.

Calcular la pendiente

Calcular la ordenada al origenEl valor del coeficiente de determinacin r2 deber ser 0.98 o mayor

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El intervalo de confianza para la pendiente debe incluir la unidad

El coeficiente de variacin CV deber ser 2%

4.- EXACTITUD Y REPETIBILIDAD AL 100%:

No aplica debido a que es materia prima y se toma el la linealidad del sistema al nivel

100%. Determinar el CV total

El criterio de aceptacin es para el porcentaje de recobro: 98 al 102%

5.- REPRODUCIBILIDAD DEL METODO:

Realizar el anlisis como se indica en la parte a) de este protocolo. Con 2 analistas, endos das diferentes, por triplicado. Calcular el CV y realizar el anlisis de varianza.

El criterio de aceptacin para el porcentaje de recobro es: 2% .

6.2 ESPECTROFOTOMETRA U.V

REACTIVOS:

Nimesulida SRef. Lote No: 117H1019

Nimesulida Lote No: NM/3330107 (materia prima)

Agua Purificada

Hidrxido de sodio SV

EQUIPO, INSTRUMENTOS Y MATERIAL:

Espectrofotmetro Hawlett Packard

Perilla de succin

Esptula de acero inoxidable

Balanza analtica (Sartorius)

Matraces aforados de 50, 100 y 200 mL

Pipeta volumtrica de 2, 3, 4, 5, 6 y 7mL

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a)

Mt odo de anl i sis de l a va lor aci n:

Preparacin de la referencia:

Transferir alrededor de 50 mg Nimesulida SRef a un matraz volumtrico de 100 mL.

disolver y aforar con hidrxido de sodio 0.1 N, transferir una alcuota de 2 mL. de

solucin a un matraz volumtrico de 100 mL, diluir a volumen con agua y mezclar.

Preparacin de la muestra:

Seguir el tratamiento de la preparacin de la referencia pero con la muestra.

Procedimiento:

Determinar las absorbancias de ambas preparaciones en celdas de 1cm, a la longitud de

onda mxima de absorbancia, utilizando como blanco de ajuste Hidrxido de sodio 0.1

N. Calcular el porcentaje de Nimesulida en la muestra por medio de la siguiente

frmula:

(Am/Aref)(Cref/Cm)100

Donde:

Am/Aref = Las absorbancias de la preparacin de la muestra y la preparacin de la

referencia, respectivamente.

Cref/Cm = Las concentraciones en miligramos por mililitro de la preparacin de la

referencia y de la preparacin de la muestra, respectivamente.

b) Ensayos de val id acin:

1. LINEALIDAD DEL SISTEMA DE MEDICIN:

Construir una curva de calibracin de la respuesta del equipo contra la cantidad

adicionada de principio activo, a los niveles 40, 60, 80, 100,120 y 140 %, partiendo de

una solucin patrn (Stock). Tomar el volumen de alcuota de acuerdo con la siguiente

tabla y llevar aforo a 50 mL con agua.

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NIVEL%

VOL. ALICUOTAmL

No. REPLICAS

40 2 360 3 380 4 3100 5 6120 6 3140 7 3

Leer todas las muestras a 392 nm en celdas de 1.0 cm. Registrar los resultados y

calcular los valores de m, b, mr, br, r y r

2

.

El valor del coeficiente de determinacin r2 deber ser de 0.98 o mayor.

El coeficiente de variacin CV deber ser menor al 1.5%

2.-PRECISIN DEL SISTEMA:

Tomar los resultados obtenidos con el nivel al 100 % de la linealidad del sistema y

calcular los valores de x, y el C.V.

El criterio de aceptacin es: CV 1.5%

3. LINEALIDAD DEL MTODO:

Construir una curva de calibracin a los niveles 40, 60, 80, 100, 120, 140 mezclar y

llevar al aforo con Hidrxido de sodio 0.1 N. Transferir una alcuota de 2 mL de la

solucin a un matraz volumtrico de 100 mL, diluir a volumen con agua y mezclar.

Analizar por sextuplicado y en das diferentes, al azar, incluyendo en cada da la

preparacin de reactivos y soluciones de referencia.

NIVEL % CANTIDAD (mg) No. REPLICAS

40 20 6

60 30 6

80 40 6

100 50 6

120 60 6

24


26/69



140 70 6

Calcular:

Calcular el porcentaje de recobro.

El valor del coeficiente de determinacin r2 deber ser 0.98 o mayor

El coeficiente de variacin CV deber ser 3%

4.-EXACTITUD Y REPETIBILIDAD:

Emplear los resultados obtenidos en la linealidad del mtodo, en nivel 100% y

determinar el coeficiente de variacin del % recuperado.

El criterio de aceptacin para el porcentaje de recobro es: 97-103%.

5. REPRODUCIBILIDAD DEL MTODO:

Realizar el anlisis como se indica en la parte A) de este protocolo, con 2 analistas, en

dos das diferentes, Calcular los % recuperados, C.V. y realizar el anlisis de varianza

con el porcentaje recuperado.

El criterio de aceptacin para el porcentaje de recobro es: 3%.

6. LIMITE DE DETECCIN Y CUANTIFICACIN:

Con lo s resultados obtenidos en la curva de calibracin de la linealidad del sistema

calcular el valor de la pendiente (b1), el coeficiente de determinacin (r2) y la

desviacin estndar de la regresin (Sx/y) y con ellos obtener el limite de deteccin y

cuantificacin.

25


27/69



7 RESULTADOS:

7.1 MTODO POR T ITULACIN POTENCIOMETRICA

LINEALIDAD DEL SISTEMA

Para determinar el volumen real de titulacin se realizo el mtodo de la segunda

derivada, por el que se determino el volumen real ocupado por cada muestra y en cada

nivel. Este volumen es necesario para el calculo del porcentaje recuperado en cada

muestra ya que cada 1 mL de NaOH es equivalente a 30.83 mg de Nimesulida.

Ejemplo de clculo (M5 del nivel al 100%): obtencin de 2da derivada, hoja de

calculo exel.

MUESTRA 5 NIVEL 100 % 2 DA DERIVADAV(mL) volts E V Vr E/V (E/Vra) Vda Vda 2E/V2)

0 109 -33 0.2 0.1 -165 100 0.2 0.2 5000.2 76 -13 0.2 0.3 -65 -5 0.2 0.4 -25

0.4 63 -14 0.2 0.5 -70 25 0.2 0.6 1250.6 49 -9 0.2 0.7 -45 0 0.2 0.8 00.8 40 -9 0.2 0.9 -45 -20 0.2 1 -1001 31 -13 0.2 1.1 -65 35 0.2 1.2 175

1.2 18 -6 0.2 1.3 -30 10 0.2 1.4 501.4 12 -4 0.2 1.5 -20 0 0.2 1.6 01.6 8 -4 0.2 1.7 -20 0 0.2 1.8 01.8 4 -4 0.2 1.9 -20 5 0.2 2 252 0 -3 0.2 2.1 -15 -5 0.2 2.2 -25

2.2 -3 -4 0.2 2.3 -20 5 0.2 2.4 252.4 -7 -3 0.2 2.5 -15 -5 0.2 2.6 -25

2.6 -10 -4 0.2 2.7 -20 0 0.2 2.8 02.8 -14 -4 0.2 2.9 -20 5 0.2 3 253 -18 -3 0.2 3.1 -15 0 0.2 3.2 0

3.2 -21 -3 0.2 3.3 -15 0 0.2 3.4 03.4 -24 -3 0.2 3.5 -15 5 0.2 3.6 253.6 -27 -2 0.2 3.7 -10 0 0.2 3.8 03.8 -29 -2 0.2 3.9 -10 -5 0.2 4 -254 -31 -3 0.2 4.1 -15 0 0.2 4.2 0

4.2 -34 -3 0.2 4.3 -15 -5 0.2 4.4 -254.4 -37 -4 0.2 4.5 -20 0 0.2 4.6 04.6 -41 -4 0.2 4.7 -20 10 0.2 4.8 50

4.8 -45 -2 0.2 4.9 -10 5 0.2 5 255 -47 -1 0.2 5.1 -5 -5 0.2 5.2 -25

5.2 -48 -2 0.2 5.3 -10 -5 0.2 5.4 -25

26


28/69



5.4 -50 -3 0.2 5.5 -15 15 0.2 5.6 755.6 -53 0 0.2 5.7 0 -30 0.2 5.8 -150

5.8 -53 -6 0.2 5.9 -30 15 0.2 6 756 -59 -3 0.2 6.1 -15 0 0.2 6.2 0

6.2 -62 -3 0.2 6.3 -15 -10 0.2 6.4 -506.4 -65 -5 0.2 6.5 -25 0 0.2 6.6 06.6 -70 -5 0.2 6.7 -25 0 0.2 6.8 06.8 -75 -5 0.2 6.9 -25 -5 0.2 7 -257 -80 -6 0.2 7.1 -30 0 0.2 7.2 0

7.2 -86 -6 0.2 7.3 -30 -5 0.2 7.4 -257.4 -92 -7 0.2 7.5 -35 -15 0.2 7.6 -757.6 -99 -10 0.2 7.7 -50 -75 0.2 7.8 -3757.8 -109 -25 0.2 7.9 -125 -520 0.2 8 -2600

8 -134 -129 0.2 8.1 -645 540 0.2 8.2 27008.2 -263 -21 0.2 8.3 -105 55 0.2 8.4 2758.4 -284 -10 0.2 8.5 -50 10 0.2 8.6 508.6 -294 -8 0.2 8.7 -40 5 0.2 8.8 258.8 -302 -7 0.2 8.9 -35 10 0.2 9 509 -309 -5 0.2 9.1 -25 -35 0.2 9.2 -175

9.2 -314 -12 0.2 9.3 -60 -20 0.2 9.4 -1009.4 -326 -16 0.2 9.5 -80 35 0.2 9.6 1759.6 -342 -9 0.2 9.7 -45 -15 0.2 9.8 -759.8 -351 -12 0.2 9.9 -6010 -363

MUESTRAS DEL NIVEL 40%

2da DERIVADA M1,M2,M3 NIVEL 40%DETERMINACION DEL PUNTO DE EQUIVALENCIA

METODO POTENCIOMETRICO

-5000

-4000

-3000

-2000

-1000

0

1000

2000

3000

4000

0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0

Vr

2E/V2)

Muestra 1

Muestra 2

Muestra 3

3.3

Gr af ica 1. Muest ra 1,2,3-40% det erminacin del punt o de equivalencia para

Nimesuli da , mt odo po t enci omt r i co

27


29/69






-3000

-2000

-1000

0

1000

2000

3000

0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0

Vr

2E/V2)

Muestra 1

Muestra 2

Muestra 3

4.9

Graf ica 2. Muest r a 1,2,3-60% det erminacin del punt o de equivalencia para

Nimesuli da , mt odo pot enci omt r i co




-2500

-2000

-1500

-1000

-500

0

500

1000

1500

2000

0 1 2 3 4 5 6 7

Vr

2E/V2)

8

Muestra 1

Muestra 2

Muestra 3

6.6

6.7

Gra f ica 3. Muestr a 1,2, 3-80% det ermi nacin del punt o de equival encia par aNimesuli da , mt odo pot enci omt r i coMUESTRAS DEL NIVEL 90%

28


30/69




2da DERIVADA M2 100%DETERMINACIN DEL PUNTO DE EQUIVALENCIA

MTODO POTENCIOMETRICO

-2500

-2000

-1500

-1000

-500

0

500

1000

1500

2000

2500

0 2 4 6 8 10

Vr

2E/V2)

12

8.3

Gra f ica 4. Muest ra 2-100% deter minacin del punto de equival encia par a

Nimesuli da , mt odo po t enci omt r i co


2da DERIVADA M1 120%DETERMINACIN DEL PUNTO DE EQUIVALENCIA

MTODO POTENCIOMETRICO

-1000

-500

0

500

1000

1500

0 2 4 6 8 10 12

Vr

2E/V2)

14

9.7

Gra f ica 5. Muest ra 1-120% deter minacin del punto de equival encia par a

Nimesuli da , mt odo po t enci omt r i c

29


31/69




Linealidad del sistema de medicin para Nimesulida.

NIVEL(%)

mgAdicionados

Replicanmero

RESPUESTAvolumen

Media SD CV ( %)

40 96.0000123

3.300003.300003.30000

3.300 0.0 0.0

60 144.0000123

4.900004.900004.90000

4.900 0.0 0.0

80 192.0000123

6.600006.700006.60000

6.633 0.0577 0.87

90 216.0000 123

7.300007.400007.30000

7.333 0.05774 0.79

100 240.0000

123456

8.300008.300008.100008.300008.100008.30000

8.233 0.10328 1.25

120 288.0000123

9.700009.700009.70000

9.700 0.0 0.0

Tabla 1 Lineali dad d el sist ema de medici n par a Nimesuli da, mt odo

pot enci omt r i co

30


32/69



GRAFICA: LINEALIDAD DEL SISTEMA

LINEALIDADDE

LSISTEMA

PARA

NIMESULID

A

METODO

POTENCIOMETRICO

y=0.0

336x+0.1

R2

=0.9

992

0246810

12

0

50

100

150

200

250

300

350

mgAdicionados

VolumenmL

Graf ica 6 Lineali dad del sist ema de medicin par a Nimesuli da, mt odo

pot enci omt r i co.

b= 0.1 m= 0.0336 r=0.9996

br= 0.011 mr=0.9850 r2= 0.9992

Cumple con los criterios de aceptacin: SI

31


33/69



PRECISIN DEL SISTEMA AL 100%

Precisin del sistema para Nimesulida

# RE RESPUESTA (VOLUMEN)PLICA

12345

6

8.300008.400008.100008.300008.10000

8.30000T abl a 2. Pr eci si n de st ema par a Ni mesul i d o pot enci omt r ico.

x= 8.250 = 0.12274 C.V.= 1.48


XACTITUD AL NIVEL100%

xactitud del mtodo para Nimesulida

NO.REPLICA

% RECU RADO X DESVIACION C.V.

l si a , mt od

E

E

PE

12

3456

101.72

100 35 3. 4 1. 5

101.46

99.22101.6799.221 01.72

.8

0

2

Tab la 3 . Exact mt odo pa ra Nimesul i da , mt odo po tenci omt r i co

% de Recobro= 98-102% = 100.835% C.V.= 1.25


i t ud del

x

32


34/69



LINEALIDAD DEL MTODO

Linealidad del mtodo para Nimesulida.

Nivel Replica mg (x)adicionados

mg (y)rec s

uperado(%) nmero

%rec.

Media Media CVX Y Y

4096.000 97.06 101.10

96.03 97.06 0.003123

96.10096.000

97.0697.06

101.00101.10

60144.200 144.11 99.94

144.23 144.08 0.041123

144.200144.300

144.11144.01

99.9499.80

80192.400 194.11 100.89

192.63 199.09 0.870123

192.500192.500

197.05194.12

102.1100.84

90216.400 214.71 99.22

216.17 215.68 0.78123

216.300215.800

217.69214.70

100.6299.49

100

240.000 244.13 101.72

240.18 242.16 1.257

123456

240.600240.100240.100240.100240.000

244.11238.23244.11238.23244.13

101.4699.22101.6799.22101.72

120288.000 285.29 99.06

288.20 285.29 0.001123

288.200288.400

285.29285.29

98.9998.92

Tabla 4 Lineal i dad del o t odo pot enci omt r i co. mt od par a Nimesul ida, m

33


35/69



GRAFICA: LINEALIDAD DEL METODO

Grf i ca 7 Lineal i dad del mt odo pa r a Nimesul i da , mt odo pot enci omt r i co

b= 2.764 m= 0 876 r=0.9997

r2= 0.9993


LINEALIDADD

ELMETODO

PARANIMESULIDAMETODO

POTENCIOMETRICO

y=0.9

876x+2.7

643

R

2=

0.9

993

050

100

150

200

250

300

350

0

50

100

150

200

250

300

350

mgAdicionados

.9

34


36/69



REPRODUCIBILIDAD DEL METODO

Analista

Resultados en %

Da 1 2

199.22

101.631101.631

101.588101.71599.26

101.631 99.262 101.588

101.631101.67101.631

Tabl a 5. Reproducibi l idad del mt odo p Nimesul i da, mt odo potenciomt ri co

X= 101.04 = 1.08 C.V.= 1.07


TABLA DE ANALISIS DE VARIANZA

Fuente

variacin

Gra

ara

dosde de

Liber tad

Suma deCuadrados

Cuadrado F

calc da

F

tab lasmedio

u alde

Analista 1 0.38 0.38 0.78 18.51

Da 2 0.97 0.49 0.34 4.46

Error 8 11.5 1.44

Total 11 12.85

Tab nl i si s var i an a Nimesul i da, mt od pot enci omt ri co


l a 6 A de za par o

35


37/69



7.2 MTODO POR ESPECTROFOTOMETRIA UV.

INEALIDAD DEL SISTEMAL

Espect r o1. Lineali dad d el sist ema de medici n par a Nimesulida, mt odo

espect r of omt r i co

36


38/69




Linealidad del sistema de medicin para Nimesulida.

NIVEL Concentracin Replica RESPUESTA Media SD CV ( %)(%) [ mg / mL ] Abs

40 4.00000.18601

0.189 0.00258 1.37123

0.191120.18922

60 6.0000 0.28308 0.284 0.00078 0.28123

0.284590.28419

80 8.00000.37360

0.376 0.00372 0.99123

0.373420.37996

100 10.0000

0.46727

0.469 0.00231 0.49

123456

0.467850.470770.466960.471560.47209

120 12.00000.56365

0.561 0.00250 0.45123

0.558660.56084

140 14.00000.65360

0.655 0.00161 0.25123

0.655000.65682

Ta bla 6 Lineali dad del sistema de par a Nimesuli da, mt odomedicin

espect r of ot omt r ico.

37


39/69



GRAFICA: LINEALIDAD DEL SISTEMA

b= 0.004 m= 0.0465 r=1.00


E

SPECTROFOTOMETRIAUV

y

=

0.

0465x

+

0.

004

R2

=

1

0

0.

1

0.

2

0.

3

0.

4

0.

5

0.

6

0.

7

0

2

4

6

8

10

12

14

16

ug/mL

Abs

LINEALIDA

DDELSISTEMAPARANIMESULIDA

Gr af ica 8. Lineali dad d el sist ema de medici n par a Nimesuli da, mt odo


br= 0.0089 mr=0.9915 r2=1.00

38


40/69



PRECISIN DEL SISTEMA AL 100%

Precisin del sistema para Nimesulida

# RE RESPUESTA (ABS)PLICA

12345

6

0.467270.467850.470770.466960.47156

0.47209

T abl a 6. Pr esi ci n de st ema par a Ni mesul i d o pot enci omt r ico.

x= 0.469 = 0.00231 C.V.= 0.49


XACTITUD AL NIVEL100%

xactitud del mtodo para Nimesulida

NO.REPLICA

% RECU RADO X DESVIACION C.V.

l si a , mt od

E

E

PE

12

3456

100.5599.94

100.90101.0699.08100.52

100 34 0.728846 0.728846.

Tab la 7 . Exact mt odo pa ra Nimesul i da , mt odo po tenci omt r i co

% de Recobro= 97-103% x= 100.34% C.V.= 0.73

Cumple con los criterios de aceptacin: Si

i t ud del

39


41/69




Espect r o 2. Lineal id ad del mt odo par a Nimesuli da, mt odo espect r of omt r ico

muest ra s de los niveles 120, 140y 40 %

40


42/69




Espect r o 3. Lineal id ad del mt odo par a Nimesuli da, mt odo espect r of omt r ico

muest ras de los niveles 100, 80y 60 %

41


43/69




Linealidad del mtodo para Nimesulida.

Nivel Replica madicionados

g (X) Mg (Y) % Medirec.

a Media CVrec osuperad(%) nmero X Y Y

40102.15

20.16 20.18 1.50

123456

20.30020.20020.10020.10020.10020.000

20.7419.8520.1920.1420.1519.98

98.29100.46100.18100.2499.91

6028.70 30.65 0.52

123456

30.50030.50030.40030.40030.40030.000

30.7630.7830.6830.6830.6630.34

100.84100.92100.92100.91100.85101.14

8040.08 39.92 0.90

123456

40.40040.00040.10040.00040.00040.000

40.5439.6040.1239.6239.8839.75

100.3598.99100.0599.0699.7199.37

100100.551

23456

50.10050.00050.30050.30050.00050.000

50.3849.9750.7550.8349.5450.26

99.94100.90101.0699.08100.52

50.12 50.29 0.97

12060.03 59.08 0.30

1

23456

60.000

60.00060.00060.20060.00060.000

58.91

58.8759.2759.2159.0059.24

98.19

98.1198.7898.3698.3498.73

140102.15

70.08 70.23 1.19

123456

70.00070.10070.10070.10070.10070.100

71.5168.9070.4270.2370.2770.04

98.292100.46100.18100.2499.91

Tab la 7 Linea l idad de l mt odo p mesu l ida , mt odo espect ro f o tomt r ico .ara Ni

42


44/69



GRAFICA: LINEALIDAD DEL METODO

Grf i ca 9. Linea li dad del mt odo p ar a Nimesuli da , mt odo espect r of omt r i co

b= 0.2656 m= 0.9923 r=0.9997 r2= 0.9995


LINEALIDADD

ELMTODO

PARA

NIMESULID

A

MTODO

ESPECTROFOTOMETRICO

y=0.9

923x+0.2

656

R2

=0.9

995

010

20

30

40

50

60

70

80

0

20

40

60

8

mgAdicionados

0

43


45/69




Analista

Resultados en %

Da 1 2

1100.13 101.1999.86899.828

99.491101.29

99.373 99.752 99.54

99.43199.96100.0

Tabl a 8. Repr oduci bi li dad del mt odo par a Nimesuli da, mt odo

X= 99.99 = 0 3 C.V.= 0.63


TABLA DE ANALISIS DE VARIANZA

Fuente

variacin

Grado

espect r of ot omt r ico

.6

Suma de Cuadr adosCuadrados mediode de

Liber tad

F

calc da

F

tab lasu alde

Analista 1 0.38 0.38 1.69 18.51Da 2 0.97 0.49 2.26 4.46

Error 8 11.5 1.44

Total 11 12.85

Tabla l i si s d r i anza imesul i , mt odo pect r of ot t r i co


9 An e va par a N da es om

44


46/69




nalista 1: Da 1A

Espect r o 4. Repr oduci bi li dad del mt odo par a Nimesuli da , mt odo


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nalista 2: Da 1A

Espect r o 5. Repr oduci bi li dad del mt odo par a Nimesuli da, mt odo


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nalista 1: Da 2A

Espect r o 6. Repr oduci bi li dad del mt odo par a Nimesuli da , mt odo


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nalista 2: Da 2A

Espect r o 7. Repr oduci bi li dad del mt odo par a Nimesuli da, mt odo


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ESTNDAR UTILIZADO EN LA REPRODUCIBILIDAD DEL METODO-DIA 1

ESTNDAR UTILIZADO EN LA REPRODUCIBILIDAD DEL METODO-DIA 2

49


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8. COMPARACION DE LOS METODOS

REPETITIBILIDAD EN EXACTITUD:

METODO A(UV)

METODO B(POTENCIOMETRICO)

1 100.55 101.72

2 99.94 101.46

3 100.90 99.224 101.06 101.67

5 99.08 99.22

6 100.52 101.72

y 602.05 605.01

y2 054160413.3565 61014.

n 6 6

S2 0.53121 1.57415

S12 menor

S22 mayor

F0.025,n2-1,n1-1 0.14

F0.975,n2-1,n1-1 7.15

T a 9. Compar mt odos, r epet i t i b i l i dad en exact i t ud

valo de confianza

22/12 21.1875

Los parmet de desempe s mtodos son igua lo que se puede usar

indistintame Ya que el in e confianza incluye

Los clculos fectuaron de exo 1

abl acin de

Inter

0.4148

ros o de lo les por

nte. tervalo d el 1.

se e acuerdo al an

50


52/69



REPETITIBILIDAD EN LINEALIDAD DEL METODO

A (UV) METODO B (POTENCIOMETRICO)METODOCantidad

adicionadmg mg

aCantidad

recuperada % de recobro % de recobroCantidad

adicionadaCantidad

recupmg

eradamg

20.3 20.74 102.15 101.1 96.0 97.0620.2 19.85 96.1 97.0698.29 101.020.1 20.19 96.0 97.06100.46 101.120.1 20.14 144.2 144.1100.18 99.9420.1 20.15 100.24 99.94 144.2 144.120.0 19.98 99.91 99.8 144.3 144.0130.5 30.76 100.84 100.89 192.4 194.1130.5 30.78 100.92 102.1 192.5 197.0530.4 30.68 100.92 100.84 19.5 194.12

30.4 30.68 100.91 99.22 216.4 214.7130.4 30.66 100.85 100.62 216.3 217.6430.0 30.34 101.14 99.49 215.8 214.740.4 40.54 100.35 101.72 240.0 244.1240.0 39.6 98.99 101.46 240.6 244.1240.1 40.12 100.05 99.22 240.1 238.2340.0 39.62 99.06 101.67 240.1 244.1240.0 39.88 99.71 99.22 240.1 238.2340.0 39.75 99.37 101.72 24.0 244.1350.1 50.38 100.55 99.06 288.0 285.2950.0 49.97 99.94 98.99 288.2 285.2950.3 100.9 98 950.75 .92 288.4 285.2

50.3 50.83 101.0650.0 49.54 99.0850.0 5 100.520.2660.0 58.91 98.1960.0 58.87 98.1160.0 59.27 98.7860.2 59.21 98.3660.0 59.0 98.3460.0 59.24 98.7370.0 71.51 102.1570.1 68.9 98.02970.1 70.42 100.46

70.1 70.23 100.1870.1 70.27 100.2470.1 70.04 99.91y 3598.1032 2108.02y2 359 53668.61 21 21629.75n 36 22S2 1.203381 459.1043801

F0.02 1-15,n2-1,n 0.32

F0.97 1-15,n2-1,n 3.36

Tabl a 10. Compar a e mt odo t i t i b i l i d i neal i dad del mt odo cin d s, r epe ad en l

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Intervalo de confianza no incluy idad, por que cumple con las especificaciones

puede hacer uso indistinto de los mto s.

122. 2

2/1

2

1.8806

Los clculos se efe n de ac l anexo 2

PRECISIN DEL MTODO

ETODO A METODO B

e la un lo

y se do

0838 128

ctuaro uerdo a

M

DIA A A1 A21 A2 DIA

1100.1399.868

99.828

101.19

101.29

99.22101.631

101.588

101.631101.715

99.26

99.491 1

99.373 99.75 101.631

2 99.54

99.431

99.96

100.0

2 101.588

101.631

99.26

101.67

101.631

y 1199.851 y 1212.456

y2

6.978119974.5958 y2

12251n 1 122 n

SA2 0.399448 SB2 1.1680627

F0.025,11,11 0.29 F0.975,11,11 3.47

Tabla 11. Compar acin de mt odos, r epet it ib i l id ad en pr ecisin del mt odo

tervalo de confianza

0.8480 22/

12 .146944

Como intervalo ianza l 1, los parmetros de desempeo

por lo tanto los m se pue indistintamente.

Los clculos se efectuar anexo 3

In

15 10

el de conf incluye e son iguales

todos den usar

on de acuerdo al

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9. ANALISIS DE RESULTADOS:

Linealidad del sist

MET .5

% y al compararlos con los criterios de a tacin, este parmetro cumple con las

especificaciones ya que la concentracin es directamente proporcional a la unidad de

respuesta del sistema de odo espectrofotometrico

umple con los criterios establecidos.

ema:

ODO POTENCIOMETRICO: De acuerdo a los resultados obtenidos, r2= 0.9992 , CV1

cep

medicin, de igual manera el Mt

c

Linealidad del mtodo:Se realizo un grafico de mg adicionados VS mg recuperados, al cual se determin el

le con los criterios ya que el valor de2= 0.9993, CV 1.5 % este parmetro asegura la proporcionalidad directa sobre el

tervalo de trabajo. Para el caso del Mtodo espectrofotometrico cumple con el

riterio de aceptacin.

coeficiente de correlacin, este coeficiente cump

r

in

c

Precisin del sistema al 100%

rico como el espectrofotomtrico, son precisos ya quembos cumplen con los criterios de aceptacin ya que ninguno sobrepasa el 1.5 % con

Tanto el mtodo potenciomta

respecto al CV.

Exactitud y Repetitibilidad:

METODO POTENCIOMETRICO: Es exacto ya que la media del porcentaje de recobro tiene

un valor de 100.84% y el rango para el criterio de aceptacin es de 98-102%, tambin

cumple con CV1.5 %

METODO ESPECTROFOTOMETRICO: Este mtodo tiene un rango mas amplio de 97-103%

el valor de la media cae dentro del rango al tener unpara el porcentaje de recobro,

valor de 100.34% y no sobrepasar el lmite del CV2%.

Reproducibilidad:

Ambos mtodos son reproducibles ya que al realizar el anlisis de varianza resulta que

los diferentes analistas no interfieren con la reproducibilidad del mtodo.

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Comparacin de mtodos:

Al realizar el anlisis de varianza para determinar si los parmetros de desempeo

son iguales, resulta que cumple con los criterios establecidos para dichos

parmetros, por lo tanto los mtodos se pueden usar indistintamente, ya que esta

armetros reales y documentados.

4.

Reproducible

usar indistintamente, ya que se cumple con los

por el mtodo

potenciomtrico.

El mtodo se puede usar como mtodo rutinario de control, ya que las

todo espectrofotomtrico ya que este facilita el anlisisacortando el tiempo y cantidad de muestra.

en la industria farmacutica se requiere de anlisis rpidos perosempeo y el mtodo espectrofotomtrico

ecesidades para la empresa.

justificada su comparacin con p

10. CONCLUSIONES:

Mediante los resultados obtenidos durante el proceso de validacin se puede

afirmar que se cumplen con las especificaciones sealadas de cada parmetropor que el mtodo es:

1. Lineal

2.

Preciso

3.

Exacto

Los mtodos se pueden

parmetros necesarios para el uso indistinto de ellos.

El mtodo espectrofotomtrico mediante la validacin y comparacin cumple

con las especificaciones sealadas, el cual se desea remplazar

instalaciones y equipos son adecuados para la reproducibilidad de este.

Se prefiere el uso del M

Como se sabe

de calidad aceptada para su desatisface esas n

54


56/69



11. BIBLIOGRAFIA:

xico (2000).

2.

Ley General de Salud (1997).

xicana NOM-059-SSAA-1993, Buenas Practicas de Fabricacin

para establecimientos de la industria qumico farmacutica dedicados a la

5. Gua de Validacin de Mtodos Analticos, 1 Edicin de Mayo2002.

Iberoamericana. 3 Ed. Mxico (1991).

8. European Pharmacopoeia, 5th Edicin, Vol. II, pp. 2101-2102

1. Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos, 7 Ed. M

3.

Reglamento de Insumos para la Salud.

4.

Norma Oficial Me

fabricacin de medicamentos.

6.

British Pharmacopoeia. Monograph Development: Methods of Analysis. Version en

CD-ROM, 1998.

7. Diseo y Anlisis de experimentos, Montgomery D.C. Grupo editorial

55


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12 . ANEXOS

Modelos de clculo.

ANEXO 1

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57


59/69



ANEXO 2

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59


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60


62/69



ANEXO 3

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62


64/69



TABLAS

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64


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validacion del metodo analítico para nimesulida por uv-vis

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