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  • Validacin de mtodos analticos

    fisicoqumicos segn los requerimientos

    definidos en la gua ICH/FDA

    JUAN PABLO HERRERA SIERRA

    Qumico Farmacutico - Universidad de Antioquia

    Especialista en Desarrollo de Aplicaciones Mviles

    Nodo Interactivo

    Ciencia y conocimiento al alcance de todos!

    juanherrera@nodointeractivo.com

    www.nodointeractivo.com

  • Escenario

    El departamento de validaciones de un

    laboratorio farmacutico, segn el

    cronograma de implementacin definido

    en el plan maestro de validacin, debe

    validar de forma prospectiva el mtodo

    analtico fisicoqumico del producto

    piloto XYZ jarabe por 100 mL, con el

    propsito de iniciar los estudios de

    estabilidad acelerada y natural.

  • Plan Maestro

    de Validacin

    Calificaciones

    [DQ, IQ, OQ,

    PQ]

    Limpieza y

    Desinfeccin

    Mtodos

    Analticos

    Procesos de

    Fabricacin

    Sistemas

    Computarizados

    Sistemas de

    Apoyo Crtico

    Monitoreos

    Mantenimiento

    Preventivo Correctivo

    Metrologa

    Calibracin Verificacin

  • Protocolo calificacin / validacin

    Criterios de Aceptacin

    Metodologa Experimental

    Estimacin Estadstica

  • Ensayos

    Tipo de Anlisis IdentificacinImpurezas

    Cuantificacin*C *I

    Linealidad N/A SI N/A SI

    Especificidad SI SI SI SI

    Precisin N/A SI N/A SI

    Precisin intermedia N/A SI N/A SI

    Exactitud N/A SI N/A SI

    Estabilidad de la muestra SI SI SI SI

    Lmite de deteccin N/A N/A SI N/A

    Lmite de cuantificacin N/A SI N/A N/A

    Robustez: Opcional.

    *C: Cuantificacin.

    *I: Identificacin.

  • Frmula Maestra

    Componente Cantidad

    Analito XYZ 100 mg

    Excipiente 1 25 mg

    Excipiente 2 30 mg

    Excipiente 3 30 mg

    Agua c.s.p 100 mL

  • Linealidad

    Criterios de aceptacin:

    Coeficiente de variacin de los factores de

    respuesta (f) 5%.

    Coeficiente de correlacin (r) 0.990.

    Coeficiente de determinacin ajustado con g.l

    (r2) 98.01%.

    Prueba de hiptesis para la pendiente (b) 0.

    Prueba de hiptesis para el intercepto (a) = 0.

  • Linealidad

    Metodologa experimental:

    80%-90%-100%-110%-120% (Triplicado).

    Concentracin del 100%: Pesar exactamente

    cerca de 20.0 mg de Analito XYZ materia

    prima y transferir a un baln volumtrico de

    100.0 mL, adicionar 50 mL de solucin

    diluente y 20 mL de SM, agitar hasta completa

    disolucin, ajustar volumen con solucin

    diluente, homogenizar y filtrar por membrana

    de 0.45 m.

  • Linealidad

    Estimacin estadstica:

    Relaciones de proporcin atpicas.

    Modelos de calibracin.

    Pruebas de hiptesis.

  • Especificidad

    Criterios de aceptacin:

    No se presenta interferencia por componentes

    de la matriz, productos de degradacin o

    compuestos relacionados para cinticas de

    primer orden con relacin al analito

    (degradaciones mayores al 5% y menores al

    30%).

  • Especificidad

    Metodologa experimental:

    1 Matriz, 5 Matriz, 5 Analito y 5 Analito Matriz

    Evaluar cada muestra durante cuatro veces el

    tiempo de retencin obtenido para el Analito

    XYZ, para interferencia de la matriz,

    degradaciones con hidrlisis cida, hidrlisis

    bsica, termlisis, fotlisis y agentes

    oxidantes, para matriz, el analito y la mezcla

    de matriz con analito.

  • Especificidad

    Estimacin estadstica:

    Grficos de comportamiento.

  • Precisin Criterios de aceptacin:

    Coeficiente de variacin 2%.

    Metodologa experimental:

    100% (Seis rplicas).

    Concentracin del 100%: Pesar exactamente

    cerca de 20.0 mg de Analito XYZ materia

    prima y transferir a un baln volumtrico de

    100.0 mL, adicionar 50 mL de solucin

    diluente y 20 mL de SM, agitar hasta completa

    disolucin, ajustar volumen con solucin

    diluente, homogenizar y filtrar por membrana

    de 0.45 m.

  • Precisin

    Estimacin estadstica:

    Pruebas de normalidad.

    Anlisis descriptivo.

    Datos atpicos.

  • Precisin Intermedia Criterios de aceptacin:

    No existe diferencia estadstica significativa

    entre analistas con relacin a los estimados

    obtenidos entre las muestras evaluadas en el

    estudio R&R.

  • Precisin Intermedia

    Metodologa experimental:

    Preparar tres concentraciones con tres

    rplicas cada una (50% - 100% - 150%).

    Concentracin del 100%: Pesar exactamente

    cerca de 20.0 mg de Analito XYZ materia

    prima y transferir a un baln volumtrico de

    100.0 mL, adicionar 50 mL de solucin

    diluente y 20 mL de SM, agitar hasta completa

    disolucin, ajustar volumen con solucin

    diluente, homogenizar y filtrar por membrana

    de 0.45 m.

  • Precisin Intermedia

    Estimacin estadstica:

    Estudio R&R por el mtodo de ANOVA.

  • Exactitud Criterios de aceptacin:

    El porcentaje de recuperacin promedio

    para las tres concentraciones debe ser de

    100% 2 %, para un factor de proteccin

    del 95%, equivalente a un k=1.96.

    El estadstico t-student calculado

    experimentalmente debe ser menor que el t-

    student terico, para n-1 grados de libertad.

  • Exactitud

    Metodologa experimental:

    Preparar tres concentraciones con tres

    rplicas cada una (80% - 100% - 120%).

    Concentracin del 100%: Pesar exactamente

    cerca de 20.0 mg de Analito XYZ materia

    prima y transferir a un baln volumtrico de

    100.0 mL, adicionar 50 mL de solucin

    diluente y 20 mL de SM, agitar hasta completa

    disolucin, ajustar volumen con solucin

    diluente, homogenizar y filtrar por membrana

    de 0.45 m.

  • Exactitud

    Estimacin estadstica:

    Pruebas de normalidad y bondad de ajuste.

    Lmites de tolerancia e ndices de capacidad.

    Pruebas de hiptesis.

  • Estabilidad de la muestra Criterios de aceptacin:

    Al tiempo t la muestra es apta para

    anlisis si la respuesta obtenida no ha

    variado en ms del 2% frente a la

    respuesta inicial.

  • Estabilidad de la muestra

    Metodologa experimental: Pesar exactamente cerca de 20.0 mg de Analito XYZ y

    transferir a un baln volumtrico de 100.0 mL,

    adicionar 50 mL de solucin diluente y 20 mL de SM,

    agitar hasta completa disolucin, ajustar volumen con

    solucin diluente, homogenizar y filtrar por membrana

    de 0.45 m. Evaluar la misma muestra al inicio, a la

    hora, tres horas, cinco horas, siete horas, nueve

    horas, once horas, trece horas, quince horas,

    diecisiete horas, diecinueve horas, veintiuna horas,

    veintitrs horas y veinticinco horas.

  • Estabilidad de la muestra

    Estimacin estadstica:

    Modelos de correlacin y prediccin.

  • Lmite de deteccin y cuantificacin

    Criterios de aceptacin:

    El mtodo analtico es sensible, si el valor

    establecido para la respuesta de

    especificacin del analito es mayor al

    lmite de cuantificacin.

  • Lmite de deteccin y cuantificacin Metodologa experimental: Para la valoracin de analitos principales (Respuestas

    altas) estimar la respuesta promedio de 10 lecturas de

    blanco (Ruido, solucin diluente) y multiplicar dicho

    valor por 3 para LD y por 10 para LC.

    Para valoracin de compuestos relacionados y/o

    impurezas realizar una curva de calibracin para cinco

    concentraciones con tres rplicas cada una (0.08% -

    0.09% - 0.1% - 0.11% - 0.12%) de la concentracin

    especificada para dicho compuesto y/o impureza

  • Lmite de deteccin y cuantificacin

    Metodologa experimental:

    Preparar una solucin de estndar de

    compuesto relacionado (SCR) pesando

    exactamente cerca de 20.0 mg de Analito XYZ

    estndar de compuesto relacionado y transferir

    a un baln volumtrico de 100.0 mL, adicionar

    50 mL de solucin diluente y 20 mL de SM,

    agitar hasta completa disolucin, ajustar

    volumen con solucin diluente, homogenizar y

    filtrar por membrana de 0.45 m.

  • Lmite de deteccin y cuantificacin

    Metodologa experimental:

    Concentracin del 0.1%: Medir una alcuota

    de 10 mL de SCR y transferir a un baln

    volumtrico de 100.0 mL, ajustar volumen

    con solucin diluente, homogenizar y

    transferir una alcuota de 1.0 mL a un baln

    volumtrico de 100.0 mL, homogenizar y

    filtrar por membrana de 0.45 m.

  • Lmite de deteccin y cuantificacin

    Estimacin estadstica:

    Calibracin de modelos de relacin.

  • Robustez Criterios de aceptacin:

    Si el valor absoluto de la diferencia entre el

    resultado en el nivel alto y el resultado en el

    nivel bajo para cada factor experimental

    estudiado, es mayor que el producto de la

    desviacin estndar obtenida en la prueba

    de precisin por la raz cuadrada de dos, se

    dice que el parmetro tiene influencia

    significativa sobre el resultado obtenido en

    la variable respuesta.

  • Robustez Metodologa experimental: Realizar un diseo experimental Plackett and

    Burman sin aleatorizar para la variable respuesta

    contenido %

    Ensayo Factores experimentales

    ColumnaFase Mvil

    Buffer: MeOH

    Flujo

    mL/min

    Temperatura

    C

    Deteccin

    nm

    1 RP8 30:70 0.8 40 235

    2 RP18 30:70 0.8 34 215

    3 RP8 40:60 0.8 34 235

    4 RP18 40:60 0.8 40 215

    5 RP8 30:70 1.2