university of technology, iraq - republic of iraq …...republic of iraq ministry of higher...

Republic of Iraq

Ministry of Higher Education and Scientific Research

University of Technology of Applied of SciencesDep.Biotechnology Division

The effect of extracted crude ethanolic alcohol

of Petroselinum crispum seeds and leaves on

white mice and some of cancer cells lines

A thesis

Submitted to the Department of applied Science/

University of Technology in partial Fulfillment of the

Requirements for the degree of M.Sc. in Biotechnology.

By

Afnan Ismail Abd-Alwahab

B.Sc. Biology

Supervision

Dr.Abbas Abdullah Mohmmed Dr.Shalal Murad Hussian

2010 A.D. 1431 A.H.

جمھوریة العراق

وزارة التعلیم العالي والبحث العلمي

الجامعة التكنولوجیة

قسم العلوم التطبیقیة

فرع التقنیات االحیائیة

الخام لبذور واوراق نبات الكحول االثیلي مستخلص تأثیرPetroselinumالمعدنوس crispum البیض في الفئران

ة السرطانیة الخطوط الخلوی وفي بعض

رسالة مقدمة الى

الجامعة التكنولوجیة وھي جزء من متطلبات -قسم العلوم التطبیقیةمجلس .االحیائیة ل درجة ماجستیر علوم في التقنیاتنی

من قبل

أفنان اسماعیل عبد الوھاب

بكلوریوس علوم حیاة

بأشراف

نیشالل مراد حس. م د.أعباس عبد اهللا محمد. م د.أ

م ٢٠١٠ ھـ ١٤٣١

المقدمة الفصل االول

١

Introduction المقدمة

ارتبط وجود معظم الحضارات دائما بالنباتات،فكانت اكثر حاجة اليها فحافظت على مقدراتها

والجداول الغذائية من خالل تهيئة النظم البيئية والموارد الطبيعية لها فشقت لها االنهار

وانشأت السدود وقد احتل االنتاج الزراعي والصناعي والدوائي مكانة مهمة من قبل كثير من

.الدول

تعد النباتات مصدرا مهما لصناعة العقاقير الطبية لوجود بعض المواد الكيميائية ذات

اثارت النباتات . بيةالفعالية البايولوجية لذا أعتمدت في تحضيرالكثير من االدوية والعقاقير الط

الطبية انتباه العلماء منذ فترة طويلة بعد انتشارأستعمالها كوسيلة عالجية لكثير من الحاالت

الطبية خاصة في السنوات االخيرة عندما أتضح تأثيرها لتحضير الكثير من االدوية والعقاقير

لة تأثيراتها الجانبية السلبية الطبية لفعاليتها البايولوجية الدوائية وسرعة تأثيرها العالجي ولق

لذاأصبحت أفضل الوسائل العالجية لكثير من االمراض ،التي تحدثها االدوية المصنعة كيميائيا

.1979قطب،(التي تسقم الجنس البشري (

درس العلماء بصورة مستفيضة في اقطار مختلفة من العالم العديد من المستخلصات

الكيميائية المؤثرة وراثيا، وتعد الدراسات المتعلقة بهذا الموضوع النباتية لتوضيح المكونات

ذات طابع مهم في جوانب المعرفة العلمية والتطبيقية،أذ برزت في اآلونة االخيرة دراسات

متخصصة بالنباتات الطبية بعد كشف النقاب عن مكانتها في الطب الحديث فأولت منظمة

ة بدال من في توسيع استعمال األدوية من المصادر النباتيأهمية كبيرة )WHO(الصحة العالمية

Islam(يااالدوية المصنعة كيميائ et al.,1994( فكانت الدراسات التي قام بها العديد من

كشفت النقاب عن األهمية الكبيرة لبعض ،الباحثين في المراكز البحثية والمتاحف المتخصصة


٢

فرصا تم من خاللها التعرف على الكثير من التراكيب المستخلصات النباتية واعطت للمهتمين

فعلى سبيل المثال ال الحصر لوحظ للعديد من المستخلصات ،الكيميائية ذات الفعالية الطبية

النباتية تأثير مضاد لبعض السرطانات الحتوائها على مركبات تؤثر في آليات االنقسام الخلوي

اوأحد االنزيمات المهمة في )DNA(لا من خالل تأثيرها في تضاعف الحامض النووي

التضاعف والتي تمنع تكوين األنبيبات الدقيقة لخيوط مغزل انقسام الخلية كمادة الكولجيسين

Colchicine المستخلصة من نباتColchicum cwtumnale اذ تمنع بلمرة بروتين

tubulin ي تمنع أتمام عمليةمما تؤدي الى توقف الكروموسومات في الطور االستوائي وبالتال

Usui(األنقسام الخلوي et al., Benzoكذلك الحال مع مادة). 1998 phenanthridin

نواع خاليا الخطوط ا وهي من القلويدات التي تعمل على تثبيط األنقسامات المتعددة لبعض

Apoptosisالسرطانية لالنسان والمقاومة للعقاقيرالطبية ودفعها الى الموت المبرمج

)Lopus and Panda, لذا عدت بعض المستخلصات النباتية الطبية كمضادات ). 2006

Anti-cancer)Gurib-Fakimوالسرطان Anti-carcinogensالتسرطن , 2005.(

تزايدت اهمية النباتات الطبية عندما اتضح دورها في حماية المادة الوراثية من تأثير

المطفرات البيئية وقابلية مكوناتها على تصحيح اآلخطاء الوراثية التي تحدثها هذه الطفرات

)Manosori et al., 2005(.

Petroselinumونظرا الى ما تقدم اختير نبات المعدنوس crispum وهو نبات عشبي

.لهذه الدراسةثنائي الحول


٣

الهدف من الدراسة

في ضوء ما تقدم صممت الدراسة الحالية لمعرفة تأثير المستخلصات الكحولية لنبات

:المعدنوس من خالل

دراسة بعض التحليالت الوراثية والخلوية في الفئران المختبرية المعاملة بتركيز مختلفة :اوال

: من مستخلص بذور واوراق نبات المعدنوس وكما يأتي

.معرفة اهم المركبات الفعالة للمستخلص النباتي لكل من االوراق والبذور - 1

Mitoticدراسة معامل االنقسام - 2 index العظم لخاليا نقيBone marrowالفئران في

.المختبرية

Micronucleiدراسة تشكيل النوى الصغيرة - 3 formation.

Chromosomalدراسة التشوهات الكروموسومية - 4 aberrations للخاليا الجسمية في

Boneنخاع العظم marrow في الفئران المختبرية.

.خطوط الخاليا السرطانية دراسة تأثير المستخلص الكحولي على:ثانيا

I

الخالصة

مستخلص الكحول االثيلي الخام لبذور وأوراق نبات إلى اختبار تأثير هدفت الدراسة

Petroselinumالمعدنوس crispum يا نقي العظـم للفئران المختبرية، في خال)Mus

musculus( وفي ثالث خطوط سرطانية هم ،Hep-2)وHeLaوAMN-3(.

ية للمستخلص الكحولي الخام لبذور تم الكشف الكيميائي عن بعض المكونات الكيميائ

الفالفونويدات (ية يميائوأوراق نبات المعدنوس،فوجد إن بذور النبات تحتوي على المركبات الك

، واحتوى المستخلص الكحولي ألوراق النبات على )والكاليكوسيدات والسترويدات

ويدات والتربينات والسترويدات والتأنينات والفالفونات الصابونيات والراتنجات ولقل(

ملغم من المستخلص الكحولي 25، تم الحصول على )والكاليكوسيدات والراتنجيات والقلويدات

ولألوراق الجافة نسبة % 14.29غم من البذور بنسبة استخالص 50الخام من أصل

.11.9استخالص %

2000درس التأثير الوراثي الخلوي للتراكيز ‘ 1000 ‘ 500 ‘ كغم من /ملغم250

Boneنقي العظام (المستخلص الكحولي الخام لبذور وأوراق النبات في الخاليا الجسمية

marrow ( 28في الفئران المختبرية بعد تجريعها الفموي للفترات ‘ 21 ‘ 14 ‘ ايوم 7

500وأظهرت النتائج حصول تثبيط معنوي في مؤشر انقسام الخاليا الجسمية للجرعتيــن

‘ 28كغم لأليام /ملغم 250 ‘ عاملة في كل من المستخلص ممقارنة بالفئران غير ال21

اختباري ا في الكحولي للبذور واألوراق في حين اظهر المستخلص الكحولي انخفاضا طفيف

. ةالصغيرة والتغيرات الكروموسومي تشكيل النوى

II

الخام ألوراق نبات ير السمي الخلوي للمستخلص االثيليتم التحري عن التأث

وخط خاليا سرطان ) (Hep-2خط خاليا سرطان الحنجرة البشري المعدنوس في كل من

تم أخذ تراكيز مختلفة أذ ،)AMN-3( وخط خاليا سرطان الغدة اللبنية الفأري )HeLa( الرحم

500,من المستخلص ,250 ,125 ,62.5 ,31.25 ,15.5 ,7.7 ,3.8 ,1.9 ,0.95),8000

,6000 ,4000 ,2000 مل ، فلوحظ /مكغم) ١٦٠٠٠ ,١٤٠٠٠ ,١٢٠٠٠ ,1000١٠٠٠٠,

اما مل /مكغم) 62.5,31.25,15.5,7.7,3.8,1.9,0.95,125(عدم وجود تثبيط عند التراكيز

مل فكانت نسبة تثبيط نمو خاليا الخطوط الثالث عندها اقل /مكغم) 1000,500,250(التراكيز

على %) 63%,66(مل فكانت نسب التثبيط /مكغم) 4000,2000( نوعند التركيزي% 50من

فكانت نسبة مل /مكغم) 16000,14000,12000,10000,8000,6000(التوالي اما التراكيز

بها واختبار اعتماد هذه التراكيز واألخذ لذلك تم% 70اوزت تثبيط نمو الخاليا عندها عالية تج

.ساعة 72,48,24لفترات تعرض مختلفة هي فعاليتها في القتل

ت عند التراكيز توصلت الدراسة إلى وجود تأثير سمي قاتل للمستخلص الكحولي للنبا

6000كيزعند التر% 70.242من) Hep-2(تراوحت نسب التثبيط للخط الست المعتمدة أذ

ساعة وكانت 24مل عند فترة التعرض/مكغم 16000عند التركيز% 75.778مل إلى /مكغم

عند % 77.093إلى مل/مكغم6000عند تركيز% 71.626نسب التثبيط لخاليا الخط نفسه من

عند %72.594ساعة وكانت النسب من 48مل عند فترة التعرض /مكغم 16000التركيز

.ساعة 72عند فترة التعرض % 79.130مل إلى/مكغم 6000التركيز

عند % 73.840فكانت نسبة التثبيط تتراوح من) HeLa(إما الخط الخلوي السرطاني

24مل لفترة تعرض/مكغم 16000عند التركيز % 79.238مل إلى /مكغم 6000التركيز

III

عند % 86.505مل إلى/مكغم 6000عند التركيز % 79.930ساعة وكانت النسب من

عند التركيز %82.353ساعة وكانت من 48مل عند فترة التعرض /مكغم 16000 التركيز

.ساعة 72مل عند فترة التعرض /مكغم16000عند التركيز% 88.581إلى مل /مكغم 6000

عند %71.97القتل تتراوح من كانت نسبة AMN-3بالنسبة للخط الخلوي السرطاني

24مل ولفترة تعرض /مكغم 16000عند التركيز %78.20مل إلى /مكغم 6000التركيز

عند %80.96مل إلى /مكغم 6000عند التركيز %74.04وحت نسبة القتل من ساعة وترا

عند %75.08كانت نسبة القتل من ساعة و 48عند فترة تعرضمل /مكغم 16000التركيز

72تعرض عند فترةمل /مكغم 16000عند التركيز %.82.69مل إلى /مكغم 6000التركيز

.ساعة

يمكن االستنتاج بان نبات المعدنوس يعد من امن هذه النتائج التي تم الحصول عليه

أثيره التثبيطي أهم النباتات الطبية الواعدة ذات الدور الفعال في معالجة السرطان من خالل ت

.الخاليا السرطانية والسمي القاتل في

IV

: قائمة المحتویات

الصفحة الموضوع التسلسل

١ المقدمة: الفصل األول

٤ أستعراض المراجع: الفصل الثاني

٤ النباتات الطبیة

٥ دور النباتات في تثبیط الطفرة والوقایة من السرطان

٧ نبات المعدنوس2-2

٧ نبات التصنیف 1-2-2

٨ تركیب المعدنوس2-2-2

٨ الوصف العام للنبات3-2-2

١٠ مناطق التوزیع4-2-2

١٠ الخلفیة الحضاریة لنبات المعدنوس5-2-2

١١ اھمیة نبات المعدنوس الطبیة6-2-2

١٢ الخلویة -التحلیالت الوراثیة 3-2

١٥ آختبار معامل االنقسام1-3-2

١٦ آختبار تشكیل النوى الصغیرة2-3-2

١٦ آختبار التغیرات الكروموسومیة3-3-2

١٨ السرطان4-2

١٩ نشوء السرطان1-4-2

٢٠ وبائیة السرطان2-4-2

٢٠ مسببات السرطان3-4-2

V

٣١ المعدنوس نباتوتصنیف جمع1-3

٣١ للنبات مستخلص االیثانوليتحضیر ال2-3

٣١ تخلص البذورمس1-2-3

٣٢ االوراق النباتیةمستخلص 2-2-3

٣٢ تحضیر جرع المستخلص3-3

عن اھم المركبات الفعالة في المستخلص الكشف الكیمیائي4-3 . الكحولي لبذور واوراق نبات المعدنوس

٣٣

لبعض المكونات الكیمیائیة في التمھیديالكیمیائي الكشف 1-4-3 .اوراق نبات المعدنوس

٣٣

٣٤ في الكشف عن أھم المركبات الكیمیائیة الیل المستعملةالمح2-1-4-3

٣٥ طریقة العمل للكشف عن أھم المركبات الفعالة3-1-4-3

٣٥ الكشف عن القلویدات1-3-1-4-3

٣٥ الكشف عن الفالفونات2-3-1-4-3

٣٦ الكشف عن التربینات والسترویدات3-3-1-4-3

٣٦ الكشف عن السكریات والكالیكو سیدات3-1-4-3٤-

٣٦ الكشف عن الصابونیات3-1-4-3٥-

٣٧ الكشف عن الراتنجیات3-1-4-3٦-

٣٧ الخلویة –الدراسة الوراثیة 5-3

٣٧ عملةالحیوانات المست1-5-3

٣٨ الخلویة- الوراثیة ةفي الدراس المحالیل المستعملة2-5-3

٤٠ ر كروموسومات نخاع العظمتحضی3-5-3

٤١ الصغیرة فحص النوى4-5-3

ي الخام الوراق لنبات دراسة تأثیر المستخلص الكحول6-3 .بعض الخطوط السرطانیة المعدنوس في

٤٢

٤٢ والزرع الثانوي سیجي االساسالمحالیل الخاصة بالزرع الن1-6-3

٤٢ اوساط الزرع النسیجي1-1-6-3

٤٢ اوساط النمو1-1-1-6-3

٤٣ اوساط الحفظ2-1-1-6-3

٤٣ المواد المستخدمة طرق تحضیر2-1-6-3

٤٦ السرطانیة الخطوط الخلویة2-6-3

47تحضير الوسط الزرعي للخطوط الخلوية السرطانية 3-6-3

٢٧ طرق عالج السرطن4-4-2

٣١ ق العملائالمواد وطر:الفصل الثالث

VI

واختبار سمية المستخلص على تلك الخطوط

٤٧ ي للخطوط الخلویة السرطانیةالوسط الزرع تحضیر1-3-6-3

على تكاثر أختبار سمیة المستخلصات الخام لنبات المعدنوس2-3-6-3 الخطوط السرطانیة

٤٩

٥١ التحلیل االحصائي

٥٢ النتائج والمناقشة:الفصل الرابع

٥٢ االستخالص1-4

الكشف عن اھم المركبات الفعالة في المستخلص الكحولي 2-4 . الخام لبذور واوراق نبات المعدنوس

٥٢

التأثیر الوراثي الخلوي للمستخلص الكحولي الخام لبذور 3-4 . واوراق نبات المعدنوس

٥٥

تأثیر المستخلص الكحولي الخام لبذور نبات المعدنوس في 1-3-4 .خالیا نقي العظم للفئران المختبریة

٥٥

تأثیر المستخلص الكحولي الخام لبذور نبات المعدنوس في 1-1-3-4 . مؤشرانقسام خالیا نقي العظم في الفئران المختبریة

٥٥

المستخلص الكحولي الخام لبذور نبات المعدنوس في تأثیر2-1-3-4تشكیل النوى الصغیرة لخالیا نقي العظم في الفئران

.المختبریة

٥٩

قابلیة المستخلص الكحولي الخام لبذور نبات المعدنوس في 3-1-3-4في لخالیا نقي العظم استحثاث التغیرات الكروموسومیة

. الفئران المختبریة

٦١

تأثیر المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس في 2-3-4 .خالیا نقي العظم للفئران المختبریة

٦٦

تأثیر المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس في 1-2-3-4 . انقسام خالیا نقي العظم في الفئران المختبریةمعامل

٦٦

قابلیة المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس في 2-2-3-4تشكیل النوى الصغیرة لخالیا نقي العظم في الفئران

.المختبریة

٦٨

خلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس في قابلیة المست3-2-3-4في لخالیا نقي العظم استحثاث التغیرات الكروموسومیة

.الفئران المختبریة

٧٠

التأثیر السمي للمستخلص الكحولي الخام الوراق نبات 4-4 .المعدنوس في نمو خالیا الخطوط الخلویة السرطانیة

٧٤

Hep-2٧٥الخط الخلوي السرطاني 1-4-4

٧٥ المستخلص الكحولي الوراق نبات المعدنوس 1-4-4-1

VII

HeLa٧٩الخط الخلوي السرطاني 2-4-4

٧٩ المستخلص الكحولي الوراق نبات المعدنوس1-2-4-4

AMN-3٨٣الخط الخلوي السرطاني 3-4-4

٨٣ .المستخلص الكحولي الوراق نبات المعدنوس1-3-4-4

٩٨ والتوصیاتاالستنتاجات :الفصل الخامس ٩٨ االستنتاجات 1-5

٩٩ التوصیات والمقترحات2-5

١٠٠ المصادر

VIII

قائمة الجداول

الصفحة الموضوع التسلسلأھم المركبات الفعالة في المستخلص الكحولي لبذور واوراق نبات 1-4

.المعدنوس٥٤

تأثیر المستخلص الكحولي لبذور نبات المعدنوس في مؤشر انقسام الخالیا 2-4 .ران المختبریةئالجسمیة للف

٥٦

تأثیر المستخلص الكحولي لبذور نبات المعدنوس في تشكیل النوى 3-4 .ختبریةمران الئالصغیرة للف

٦٠

الخطا القياسي لمعدل التغيرات الكروموسومية لتأثير ±المتوسط4-4

في مؤشر انقسام الخاليا المستخلص الكحولي لبذور نبات المعدنوس

.الجسمية للفئران المختبرية

٦٣

تأثير المستخلص الكحولي الوراق نبات المعدنوس في مؤشرأنقسام یمثل 5-4

. الخاليا الجسمية للفئران المختبرية

٦٧

٦٩. ران المختبریةئالصغیرة للف ىیمثل تأثیر المستخلص الكحولي لنبات المعدنوس في تشكیل النو6-4

الخطأ القیاسي للتغیرات الكروموسومیة في الخالیا الجسمیة ±المتوسط 7-4

. للفئران المعاملة بالمستخلص الكحولي ألوراق نبات المعدنوس

٧١

تراكیز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات تأثیر 8-4 ساعة للخط الخلوي72,48,24المعدنوس ولفترات التعرض الثالث

Hep-2. السرطاني

٧٦

تراكیز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس تأثیر9-4 السرطاني ساعة للخط الخلوي72,48,24ولفترات التعرض الثالث

.HeLa

٨٠

تراكیز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات تأثیر 10-4 ساعة للخط الخلوي72,48,24المعدنوس ولفترات التعرض الثالث

AMN-3. السرطاني

٨٥

ساعة على 24مقارنة بین تراكیز مختلفة من المستخلص ولفترة تعرض11-4.AMN-3,HeLa,Hep-2الخطوط السرطانیة الثالث

٨٨

ساعة على 48مقارنة بین تراكیز مختلفة من المستخلص ولفترة تعرض12-4.AMN-3,HeLa,Hep-2الخطوط السرطانیة الثالث

٨٩

ساعة على 72مقارنة بین تراكیز مختلفة من المستخلص ولفترة تعرض13-4 .خالل AMN-3,HeLa,Hep-2الخطوط السرطانیة الثالث

٩٠

ونسب التثبیط المأخوذة معامل االرتباط الذي یوضح العالقة بین التراكیز14-4وعند AMN-3,HeLa,Hep-2لكل من الخطوط السرطانیة الثالث

.ساعة 72,48,24 فترات التعرض الثالث

٩١

IX

قائمة األشكال

الصفحة عنوان الشكل التسلسلPetroseliumنبات المعدنوس ١-٢ crispum٩

یوضح خلیة لنخاع العظم في احد الفئران المختبریة منقسمة ومتوقفة عند الطور األستوائي ١-٤metaphase.

٥٨

لخلیة من نخاع العظم العظم في احد الفئران Micronucleiیوضح تشكیل النوى الصغیرة ٢-٤ .المختبریة المعاملة بالسایكلوفوسفواماید

٦١

خالیا نقي العظم في الفئران المختبریة المعاملة یوضح التغیرات الكروموسومیة ل ٣-٤ .بالسایكلوفوسفواماید

٦٥

تأثیر تراكیز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس ولفترات ٤-٤.Hep-2ساعة للخط الخلوي السرطاني 72,48,24التعرض الثالث

٧٧

غیرالمعاملة بالمستخلص Hep-2یوضح المقارنة بین خالیا الخط الخلوي السرطاني ٥-٤ . ساعة 72مل ولفترة تعرض/مكغم 16000والخالیا المعاملة بالمستخلص عند التركیز

٧٨

تأثیر تراكیز مختلفةمن المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس ولفترات ٦-٤.HeLaعلى الخط الخلوي السرطاني ساعة 72,48,24التعرض الثالث

٨١

بالمستخلص عند ةغیر المعامل HeLaمقارنة بین خالیا الخط الخلوي السرطاني ٧-٤ .ساعة 72ولفترة تعرض مل/مكغم 16000التركیز

٨٢

تأثیر تراكیز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس ولفترات ٨-٤.AMN-3ساعة على الخط الخلوي السرطاني 72,48,24التعرض الثالث

٨٦

غیر المعاملة بالمستخلص والخالیا AMN-3مقارنة بین خالیا الخط الخلوي السرطاني ٩-٤ .ساعة72مل ولفترة تعرض /مكغم16000المعاملة بالمستخلص عند التركیز

٨٧

بتأثیر تراكیز مختلفة 3AMN-HeLa,Hep-2المقارنة بین الخطوط السرطانیة الثالث ١٠-٤ .ساعة 24وراق نبات المعدنوس ولفترة تعرض من المستخلص الكحولي الخام ال

٨٨

بتأثیر تراكیز مختلفة 3AMN-HeLa,Hep-2المقارنة بین الخطوط السرطانیة الثالث ١١-٤ .ساعة 48من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس ولفترة تعرض

٨٩

بتأثیر تراكیز مختلفة 3AMN-HeLa,Hep-2المقارنة بین الخطوط السرطانیة الثالث ١٢-٤.ساعة 72من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس ولفترة تعرض

٩٠

معامل االرتباط الذي یبین العالقة بین التراكیز المأخوذة ونسب التثبیط لكل من الخطوط ١٣-٤ .ساعة 72,48,24ولفترات التعرض الثالث AMN-3,HeLa,Hep-2 السرطانیة الثالث

٩٢

X

:قائمة المختصرات

Aflatoxin B1AFB1

CyclophosphamideCFA

Deoxyribonucleic acidDNA

Epstein- Barr VirusEBV

Human Papillona VirusHPV

Human T-cell Lympho Viruses type I andIIHTLV-I HTLV-II

International Agency For Research on

Cancer

IARC

Dimethyl sulphoxideDMSO

Phosphate Buffer SalinePBS

Ribonucleic acidRNA

World Heath OrganizationWHO

Human larynx epidermoid larynx carcinomaHep-2

Inhibition ratioIR

Enzyme-linked immunosorbent assayELISA

Ahmed-Mohammed-Nahi-2003AMN-3

Rosswell Park Memorial Institute-1640RPMI-1640

Henritta LacksHeLa

XII

Alternative الطب البدیل medicineAngiogenesis التشكل الوعائيAnti مضاد للسرطان cancerAnti مضاد لألنبثاق metastatasisAnti مضاد لألكسدة oxidant

Benign أورام حمیدة tumorBone نخاع العظم marrow

Cancer سرطانCarcinogenesis نشوء السرطانCarcinogenic مواد مسرطنة agents

Carcinoma سرطان النسیج الطالئيChromosomal التشوھات الكروموسومیة aberrations

Malignant خبیثةأورام tumorMicronuclei ى الصغیرةتشكیل النو formation

Mitotic معامل االنقسام indexMutagenic ةمواد مطفر agents

Radioisotopes النظائر المشعةTumor الجینات الكابحة لألورام suppressor genes

Cell خط خلوي lineIn )في الحي(داخل الجسم الحي vivoIn ) في الزجاج(خارج الجسم الحي vitro

:قائمة المصطلحات العلمیة

الثالث المواد وطرائق العمل الفصل

٣١

Material: المواد وطرائق العمل and Methods

ان االجهزة والمستلزمات المختبرية والمواد الكيمياوية المستعملة موضحة بهيئة مالحق

).2و 1ملحق(في نهاية الرسالة

Collection:نبات المعدنوس جمع وتصنيف :1-3 and classification of the plant

P.crispum

في الظل وبدرجة تم الحصول على البذور واالوراق النباتية من السوق ، تم تجفيفها

وبعد ذلك طحنت باستعمال مطحنة كهربائية لغرض هويةحرارة الغرفة ضمن محيط جيد الت

وتم التأكد من ،الحصول على مسحوق النبات الذي أستعمال لتحضير المستخلص الكحولي

.جامعة بغداد/كلية العلوم /تصنيف النبات من قبل األستاذ الدكتور علي الموسوي

Preparation:تحضير المستخلص االيثانولي للنبات:2-3 of ethanolic extract the

plant

The:مستخلص البذور:1-2-3 extraction of seeds

ووضع Thumbleداخل كشتبان غم من مسحوق بذور النبات ثم وضع 50وزن

4-5مدة) 80%(مل من الكحول االثيلي 300حاو على ) Soxhlet(في جهاز سكسوليت

Incubaterبعد ذلك أخذ المستخلص الكحولي لبذور النبات ووضع داخل الحاضنة .ساعات

.حتى أكتمال جفافها من الكحولم37تحت درجة


٣٢

The:مستخلص األوراق النباتية:2-2-3 extraction of leaves

غم ،ووضعت كل 50غم من مسحوق اورق النبات على دفعتين كل دفعة 100وزن

مل من 300ووضعت في جهاز ساكسوليت حاو ايضا على Thumbleدفعة داخل كشتبان

لمستخلص بعد ذلك أخذ ا.ساعات لغرض االستخالص 4-5مدة ) 80%(الكحول االثيلي

حتى أكتمال م37تحت درجة Incubaterالكحولي الوراق النبات ووضع داخل الحاضنة

.جفافها من الكحول

Prepration:تحضير جرع المستخلص:3-3 of dose of exctraction

حضرت اربع جرع من المستخلص الكحولي الوراق وبذور نبات المعدنوس هي

Subكغم وأعتمدت الجرعة تحت القاتلة /ملغم 2000,1000,500,250 lethal dose

لنبات ) 2008،التميمي (والمؤثرة للمستخلص الكحولي الخام في الفئران المقترحة من قبل

.التي ينتمي اليها نبات المعدنوس Umbelliferaeالكرفس والذي ينتمي الى العائلة المظلية

الخلوية لتلك الجرع على نظام اللبائن بأعتماد فأر مختبري - أثيرات الوراثيةاذ قيمت الت

Mus musculus ضربBalb/c الذي تم تجريعه عن طريق الفمOrally بواسطة محقنة

مل من الجرعة المخصصة له وكان 0.25بمعدة لهذا الغرض،اذ جرع كل حيوان خاصة

–يوما للقيام بالدراسة الوراثية 28,21,14,7بعد التجريع بين يوم واخروتم تشريح الحيوانات

.الخلوية ولكال المستخلصين الكحوليين لبذور واوراق النبات

Hep-2¡HeLa¡AMN-3في حين أعتمدت التجارب المختصة بالخطوط السرطانية

مل وقد أختيرت فقط /مكغم16000مل الى/مكغم O.95على مزارع الدم المستعملة من


٣٣

,16000(التراكيز 14000, 12000, 10000, 8000, مل لفعاليتها في قتل /مكغم)6000

.الخاليا في الخطوط السرطانية المأخوذة

ي عن أهم المركبات الفعالة في المستخلص الكحولي لبذور واوراق الكشف الكيميائ:4-3

.نبات المعدنوس

.ة في اوراق نبات المعدنوسالكشف الكيميائي التمهيدي لبعض المكونات الكيميائي1-4-3

.الكواشف المستعملة:1-1-4-3

الكشف عن القلويدات -أ

Mayersكاشف ماير - 1-أ Reagent

:وكاالتي Atherder)1969(حضر على وفق ما ذكر في

مل من الماء 60في) HgCl2(غرام من كلوريد الزئبقيك 1.358حضر باذابة ):آ(المحلول- 1

.المقطر

.مل من الماء المقطر 10في )KI(غرام من يوديد البوتاسيوم 5حضر باذابة ):ب(المحلول- 2

مل من 100وأكمل الحجم الى )ب(مل من المحلول 10مع ) أ(مليلتر من المحلول 60مزج

.الماء المقطر وحفظ الكاشف الى حين االستخدام

Dragendroffs)1969(كاشف دراجندروف – 2-أ Regent

:وكاالتي) Stahl¡1969(فق ماذكر في حضر على و


٣٤

مل 10غرام من نترات البزموث القاعدية في خليط من 0.85حضر باذابة ):أ(المحلول- 1

.مل من الماء المقطر 40حامض الخليك و

.مل من الماء المقطر 20في ) KI(غرام من يوديد البوتاسيوم 8حضر باذابة ):ب(المحول- 2

Stockالمحلول الخزين - 3 solution: أ(يحضر بخلط كميات متساوية من المحلول (

.ويمكن ان يحفظ لمدة طويلة في قنان زجاجية معقمة) ب(والمحلول

Sprayمحلول الرش - 4 reagent: مل من 2مل من محلول الخزين مع 1يحضر بخلط

.مل الماء ويحضر انيا قبل االستعمال 10حامض الخليك مع

الكشف عن السكريات -ب

100وذلك باذابة المواد االتية في Stahl)1969(حضر على وفق ماذكر في :بندكت كاشف

.مل من الماء المقطر

).CuSO4.5H2O(غم من كبريتات النحاس المائية 1-1.73

.غم من سترات الصوديوم2-17.3

.غم من كاربونات الصوديوم الهدروجينية3-10

م المركبات الكيميائيةهالمحاليل المستعملة في الكشف عن أ:2-1-4-3

HgCl2محلول كلوريد الزئبقيك-أ


٣٥

مل من الماء المقطر ويستعمل 100في HgCl2غم من كلوريد الزئبقيك 1حضر باذابة

.هذا المحلول في الكشف عن الصابونيات للمستخلص النباتي

FeCl2محلول كلوريد الحديديك-ب

.مل من الماء المقطر 100غم من كلوريد الحديديك في 1حضر باذابة

CH3COOPbمحلول خالت الرصاص- ج

مل من الماء المقطر 100غم من خالت الرصاص في 1حضرباذابة

.للكشف عن التنينات) ب وج(يستخدم المحلوالن

طريقة العمل للكشف عن أهم المركبات الفعالة:3-1-4-3

Alkaloidsالكشف عن القلويدات:1-3-1-4-3

اذ يدل )2-وأ 1-أ(تم الكشف عن القلويدات باستعمال المحاليل التي تم ذكرها في

ظهورالراسب االبيض على وجود القلويدات في حالة استعمال كاشف ماير ويدل ظهور

.الراسب البني على وجودها في حالة استعمال كاشف دراجندورف

Flavonoidsالكشف عن الفالفونات :2-3-1-4-3

وهو ) أ(اذ حضر المحلول ,etal.,Jafferefal)1983(تم الكشف تبعا لما ورد في

مل من الكحول 10باذابة )ب(مل وحضر المحلول 5المستخلص الخام لبذور النبات بحجم

،مزجت كميات %50مل من هيدروكسيد البوتاسيوم بتركيز 10الى %"50االثيلي بتركيز

ثم .اذ يدل ظهور اللون االصفر على وجود الفالفونات) ب(و) أ(متساوية من كل من المحلول


٣٦

هو المستخلص النباتي الخام ) أ(قمنا باعادة نفس الطريقة وبنفس الكميات ولكن كان المحلول

.المذكور أعاله)ب(مل مع المحلول 5ألوراق النبات بحجم

Terpensالكشف عن التربينات والسترويدات :3-3-1-4-3 and Steroids

مل من المستخلص 1وذلك بمزج Al-Maisry¡)1999(تم الكشف وفقا لما ورد في

مل من الكلوروفورم واضيفت اليه قطرة من حامض الخليك الالمائي وقطرة من 2النباتي مع

ان تكون اللون البني الفاتح يدل على ايجابية الفحص للتربين اما .حامض الكبريتيك المركز

فانه يدل على وجود ) يوم كامل(الداكن بعد ترك المزيج مدة طويلة ظهور اللون االزرق

.السترويد

Saccharidesالكشف عن السكريات والكاليكوسيدات :4-3-1-4-3 or Glycosides

وتم HCLمل من المستخلص الكحولي الخام واضيف له قطرات من 1تم الكشف باخذ

مل من كاشف بندكت في انبوبة اختبار 2خذ غليهما مدة دقيقتين في حمام مائي وبعدها ا

دقائق ثم برد، 5مل من المستخلص ووضعت االنبوبة في حمام مائي مغلي مدة 1واضيف له

).Evans¡1999(الفحص ويدل تكون الراسب االحمر على ايجابية

Saponinesالكشف عن الصابونيات :5-3-1-4-3

غم من 1وذلك بوضع Harborn¡)1973(ة أجري الكشف عن الصابونيات وفقا لطريق

مل من الماء المقطر 10المستخلص الكحولي لبذور النبات في أنبوبة أختبار ثم يضاف اليه

وبعدها يرج المزيج بشدة وان ظهور رغوة كثيفة وبقاءها مدة طويلة يعد دليال على ايجابية

-3(وتتم باضافة ) 1982(وكذلك تم الكشف عن الصابونيات وفقا لطريقة الشامي . الفحص


٣٧

مل من المستخلص المائي لبذور النبات وان ظهور 5مل من محلول كلوريد الزئبقيك الى )1

غم من المستخلص 1الراسب االبيض يعد دليال على وجود الصابونيات وتعاد هذه الطريقة مع

.الكحولي الوراق النبات

Resineالكشف عن الراتنجيات :6-3-1-4-3

ويترك ) 95%(مل من الكحول االثيلي 50غم من المسحوق النباتي مع 10تم مزج

مل من الماء المحمض 100المزيج لدقيقتين في حمام مائي مغلي ثم رشح المحلول واضيف

وتم االستدالل على وجود الراتنجيات وذلك بظهور عكورة .4%)(بحامض الهيدروكلوريك

).Harborn¡1984(واضحة في المحلول

Genetic-cellularالخلوية- الدراسة الوراثية:5-3 study

Animal:الحيوانات المستعملة:1-5-3 using

Musجربت فئران مختبرية musculus ضربBalb/c تم الحصول عليها من البيت

الجامعة المستنصرية بمعدل /يواني التابع للمركز العراقي لبحوث السرطان والوراثة الطبية الح

وضعت في اقفاص خاصة واعطيت .غم25اسبوع وبمعدل وزن 8-12عمر يتراوح مابين

.الماء والعليقة المجهزة من قبل المركز المذكور

الخلوية –المحاليل المستعملة في الدراسة الوراثية :2-5-3

Colchicineمحلول الكولجيسين :1-2-5-3 Solution


٣٨

مل محلول دارى الفوسفات 0.5ملغم في 0.5حضر المحلول بأذابة حبة من الكولجسين

Allen(الفسيولوجي المعقم واستعمل انيا et al;1977.(

Hypotonic) ناقص التوتر(محلول كلوريد البوتاسيوم :2-2-5-3 Solution (KCl)

مل من الماء المقطر 1000غم من كلوريد البوتاسيوم في 5.70حضر المحلول باذابة

)موالري 0.057(0.57%وبذلك تم الحصول على تركيز م4وحفظ في الثالجة بحرارة

)Allen et al;1977(.

PBS(Phosphate(محلول دارى الفوسفات الفسيولوجي :3-2-5-3 Buffer Saline

غم من كلوريد البوتاسيوم 0.2و NaClغم من كلوريد الصوديوم 8حضر المحلول بأذابة

KCl غم من فوسفات الصوديوم أحادي الهدروجيني 1.15وNa2HPO4 غم من 0.2و

مل من الماء المقطر ويضبط تحت 1000في KH2PO4فوسفات البوتاسيوم ثنائية الهيدروجين

Allen(م4ويحفظ في 7.2اس هيدروجيني et al;1977(.

Fixativeالمحلول المثبت :4-2-5-3 solution

مع حجم واحد من CH3OHحضر المحلول بمزج ثالثة حجوم من الميثانول المطلق

Allen(وتم تحضيره انيا وبرد في الثالجة قبل استعماله CH3COOHحامض الخليك الثلجي

et al,1977.(

Sodiumمحلول بيكاربونات الصوديوم :5-2-5-3 bicarbonate solution


٣٩

في Na2HCO3غم من بيكاربونات الصوديوم 7.5تم تحضير هذا المحلول بأذابة

.م4،يحفظ هذا المحلول تحت )0.75%(مل من الماء المقطر للحصول على تركيز 1000

GiemsaStock) ملون كمزا(محلول التخزين :6-2-5-3 solution of

Glycerineمل من الكليسرين 33غم من مسحوق كمزا في 1حضر الملون باذابة

مدة ساعتين مع الرج المستمر ثم ترك المحلول مدة نصف م 60ووضع في حمام مائي تحت

مل من الكحول المطلق مع استمرار 66ساعة في درجة حرارة الغرفة وعند ذلك أضيف اليه

اما محلول ملون كمزة فيحضر عند الحاجة بمزج . ك وحفظ في قنينة معقمة ومعتمةالتحري

مل 2.5مل من الكحول المثيلي المطلق و 1.25مل من المحلول الخزين مع 1:المواد التالية

Allen(مل من الماء المقطر 40من محلول بيكاربونات الصوديوم و et al;1977.(

Stockالمحلول الخزين لعقار سايكلوفوسفامايد :7-2-5-3 solution of

Cyclophosphamide

مل من الماء 25ميد في من عقار سايكلوفوسفا) غم0.5(أذيبت محتويات عبوة واحدة

المقطر المعقم وحفظ المحلول في الثالجة وعد هذا المحلول محلول الخزين الذي حضرت منه

Teixeira(كغم /ملغم 15الجرعة et al.,2003.(


٤٠

Boneتحضير كروموسومات نخاع العظم :3-5-3 Marrow

Evan'sاعتمدت طريقة et al;1964 في هذا االختبار وكاالتي:

مل من محلول الكولجيسين المحضر أنيا في منطقة الغشاء البريتوني 0.25حقن الحيوان ب- 1

Intraperitoneal بعد تعقيم المنطقة بالكحول.

Cerricalبعد مرور ساعتين ونصف ضحي بالحيوان بعملية فصل العنق - 2 dislocation

.Femurوشرح ،ثم استأصل عظم الفخذ

قطعت نهايتا عظم الفخذ ثم استخرج المحتوى الخلوي لنقي العظم في انبوبة اختبار - 3

.محلول دارى الفوسفات الفسيولوجي مل 5مل و 1باستعمال محقنة طبية

.دقائق 10دقيقة مدة /دورة 2000نبذت الخاليا في النابذة بسرعة - 4

محلول كلوريد البوتاسيوم (لتوتر ا ءمل من محلول واطى5اهمل الرائق واضيف للراسب - 5

0.057M (م مدة 37وعلقت الخاليا جيدا ثم وضع االنبوبان في حمام مائي بحرارة ءالدافى

. دقائق 5دقيقة مع المزج كل 30

دقائق، وأهمل الرائق واضيف الى 5مدة ) دقيقة /دورة 2000(نبذت الخاليا بالنابذة - 6

المحضر انيا بهيئة قطرات قليلة تنسال على جدار مل من محلول التثبيت البارد 5الراسب

مزجت المحتويات جيدا باستعمال ماصة باستور ووضع االنبوبان في الثالجة بحرارة .االنبوبة

.دقيقة 30لمدة م 4

.مل من المحلول المثبت البارد 2-1اعيدت الخطوة السابقة مرتين وبعدها علقت الخاليا - 7


٤١

اسقطت بضع قطرات من محتويات االنبوبة على شريحة زجاجية نظيفة وباردة وبمعدل - 8

اقدام من الشرائح ثم جففت الشرائح على صفيحة 3قطرات بصورة عمودية من ارتفاع 5-4

). م 45(ساخنة

.دقيقة ثم غسلت بالماء المقطر وتركت لتجف 15لونت الشرائح بملون كمزة مدة - 9

اذ فحصت ) 100x(ئح تحت المجهر الضوئي باستعمال العدسة الزيتية فحصت الشرا-10

:خلية منقسمة وغير منقسمة واستخراج معامل االنقسام على وفق المعادلة االتية 1000

Stich(100×)العددالكلي للخاليا/عدد الخاليا المنقسمة =(MIمعامل االنقسام and San

1981)

Chromosomalروموسومية ولغرض حساب التغيرات الك Abrrations 100تحسب في

كروموسوما مفصولة بشكل 40خلية في الطور االستوائي وبصورة عشوائية والحاوية على

.جيد

Micronucleiفحص النوى الصغيرة :4-5-3 assay :

,Schmid(لقد تم هذا الفحص على وفق طريقة :وكاالتي) 1975

مل من 3استأصل عظم الفخذ للفأر وقطعت نهايته ثم افرغ محتواه الخلوي باستعمال - 1

AB(البالزما البشرية المثبطة حراريا Blood group (في انبوبة اختبار.

.دقائق 10دقيقة مدة /دورة 1000نبذت الخاليا بالنابذة بسرعة - 2

).Smear(الخاليا بقليل منه ثم عملت مسحة اهمل معظم الرائق وعلق راسب - 3


٤٢

جففت الشرائح في درجة حرارة المختبر ووضعت في اناء حاو على الكحول المثيلي - 4

.لغرض التثبيت مدة دقيقتين

.دقائق وبعد ذلك غسلت بالماء المقطر 10جففت الشرائح ثم لونت بملون كمزا لمدة - 5

وحسبت عدد الخاليا الحاوية ) 100X(لزيتية بعد ان جفت الشرائح فحصت تحت العدسة ا- 6

Polychromaticخلية من نوع الدمية المتعددة الجبيبات1000على االنوية الصغيرة من بين

erythrocyte)Pce.(

دراسة تأثير المستخلص الكحولي الخام لنبات المعدنوس في بعض الخطوط السرطانية :6-3

والزرع الثانوي يالنسيجي االساسالمحاليل الخاصة بالزرع :1-6-3

Stock Solution used for tissue culture and subculture

.الخاصة بالزرع النسيجي Freshney¡(2000)تم تحضير المحاليل تبعا لطريقة

Tissueاوساط الزرع النسيجي1-1-6-3: culture media

Growthاوساط النمو :1-1-1-6-3 media

ZŽƐƐǁ(الوسط الزرعي1- ĞůWĂƌŬD ĞŵŽƌŝĂů/ŶƐƟƚƵƚĞ;ZWD /ϭϲϰϬ

:من ويتألف

RPM 1640 with heps buffer , L.glutaminغم10.4

Sodiumغم 15 bicarbonate (4.4%)

7.4-7.8بيكاربونات الصوديوم لتعديل األس الهدروجيني الى


٤٣

Crystillineمل 0.5 Penicilline

Streptomycinمل0.5

Nystatin مل 0.25

أكمل الحجم الى واحد لتر بأضافة ماء مقطر وعقم بالترشيح بفلتر نوع

.hoodبظروف معقمة) 0.22µm(نالجين

MEM(Minimum(الوسط الزرعي 2- Essential Media

ويتألف من

(Gibco,Scotlandغم11 with L-glutamin(MEM

10مل 1Hepes buffer (Flow laboratories,Scotland)مل

Sodium bicarbonate غم 2

Benzyl Penicillin 0.5 مل

Streptomycin مل 0.5

Nystatin مل 0.5

0.22ماء مقطر ويعقم بالترشيح لتر باستعمال1يكمل الحجم الى µm فلتر

Maintenanceأوساط الحفظ :2-1-1-6-3 media

يحتوي على جميع مكونات الوسط الزرعي ماعدا المصل البقري


٤٤

طرق تحضير المواد المستخدمة :2-1-6-3

:Antibioticsطريقة تحضير المضادات الحيوية :1-2-1-6-3

:A-1-2-1-6-3 محلول البنسلينPenicillin solution:-

مل منه 0.5لماء المقطر وأضيف مل من ا 5غم من البنسيلين في1حضر المحلول بأذابة

.الى لتر واحد من الوسط الزرعي

:B-1-2-1-6-3 محلول الستربتومايسين)Streptomysin Solution(

مل من الماء المقطر ليكون التركيز النهائي 5غم من الستربتومايسين في 1حضر بأذابة

لوسط الزرعيمل وأضيف الى لتر واحد من ا 0.5مل أخذ منه / ملغم 200

:C-1-2-1-6-3 محلول األنستاتين)Nystatin Solution(

ملغم وأضيفت الى لتر واحد من الوسط وأذيبت 500من األنستاتين حبة½حضر بأخذ

.فيه

طرق تحضير المحاليال األخرى المستخدمة في دراسة تأثير المستخلص :2-2-1-6-3

: الكحولي لنبات المعدنوس في بعض الخطوط السرطانية

:A-2-2-1-6-3محلول دارئ الفوسفات الملحيPhosphate buffer saline (PBS)

هم 121موصدة بدرجة حرارةانفة الذكر ثم عقم بال) 3-5-2-3(حضر على وفق الخطوة

.الى حين األستعمال ه م 4دقيقة ثم حفظ في درجة 15ولمدة

:B-2-2-1-6-3محلول بيكاربونات الصوديومSodium bicarbonate solution


٤٥

انفة الذكر ثم عقم بالموصدة بدرجة حرارة ) 3-5-2-5(حضر المحلول على وفق الخطوة

.الى حين األستعمال هم 4رجة حرارةدقيقة وحفظ بد 15مدة هم 121

:C-2-2-1-6-3 صبغة البنفسج البلوريCrystal Violet

مل من كحول الميثانول الطلق ثم رشحت بورق ترشيح 200غم من الصبغة في ٥ذيب أ

وأكمل الحجم بالماء % 37مليلتر من الفورمالديهايد ذي تركيز 50واتمان وأضيف للراشح

)(لتر 1المقطر الى Mather & Roberts 1998.

:D-2-2-1-6-3 التربسينTrypsin

)PBS(مل من دارى الفوسفات الفسيولوجي 100غم من مسحوق التربسين في 1حضر

وعقم بالترشيح بأستعمال مرشح بقطر ذي ثقوب بقطر،)3-5-2-3(المحضر في فقرة

0.22µm م20 -وحفظ بدرجة.

:E-2-2-1-6-3 الفرسينVersine

EDTA)thyleneغم من مسحوق 1أضيف diamine tetra acetic acid disodum

حفظ ،دقائق 10لمدة م121مل من الماء المقطر واذيب جيدا ثم عقم بالموصدة 100الى )

. م -20بدرجة

:F-2-2-1-6-3 فرسين -محلول التربسينTrypsin-Versine solution

Trypsinمحلول التربسين A-ويتكون من s.20 مليلتر

-B 10محلول الفرسين Versin s. مليلتر


٤٦

-c محلول دارى الفوسفات الفسيولوجيPBS370 مليلتر

.لحين االستعمال م4مزجت المواد معا وحفظت عند درجة حرارة

:G-2-2-1-6-3 محلولDMSO

ثم عقم بأستعمال ، مل من الماء المقطر 100في DMSOمن مل 0.2حضر بخلط

الى حين األستعمال حيث ه م 4مايكرون وحفظ بدرجة حرارة 0.22مرشح ذي ثقوب بقطر

.تم أستخدمة في أذابة المسخلص األيثانولي الخام لالوراق

Cellالخطوط الخلوية السرطانية :2-6-3 linesCancer

Hep-2(Human(الخط الخلوي السرطاني1- epidermoid larynx carcinoma

وهو خط خاليا سرطان الحنجره لرجل يبلغ من ) 231( استعمل هذا الخط عند التمريرة رقم

,Toolan(سنة 57العمر 1954; Moore etal., ان هذا الخط تم تطبيعه للنمو على ).1955

العراقي لبحوث من مصل العجل البقري في المركز% 10المجهز بـ RPMI-1640وسط

Confluent(السرطان والوراثة الطبية، وعند تكون الطبقة االحادية الكاملة monolayer(

.Subcultureفرسين وذلك لتهيئة المزرعة الثانوية - تمت معاملة الخاليا بمحلول التربسين

HeLa(LacksHenritta(الخط الخلوي السرطاني2-

Henrittaوهو خط سرطان الرحم ألمراة تدعى ) 248(استعمل هذا الخط عند التمريره

Lacks وهذا الخط تم تطبيعه للنمو على وسط ١٩٥١سنةMEM وعند تكون الطبقة االحادية


٤٧

Confluent(الكاملة monolayer (فرسين وذلك - تمت معاملة الخاليا بمحلول التربسين

.Subcultureلتهيئة المزرعة الثانوية

-AMN-3(Ahmed(نيالخط الخلوي السرطا3- Mohammed- Nahi-2003

Mammaryوهو سرطان الغده اللبنية ) 177(تم استعمال هذا الخط عند التمريره رقم

adenocarcinoma الناث فئران نوعBalb/c المصابة بسرطان الغدة اللبنية التلقائي

)In vivo spontaneous mammary adenocarcinoma ( في تم استحداث هذا الخط

من مصل العجل البقري، وعند تكون الطبقة االحادية % 10مجهز بـ RPMI-1640وسط

Confluent(الكاملة monolayer (فرسين لتقسيمها على -عوملت الخاليا بمحلول التربسين

.مزرعة ثانوية اخرى

تحضير الوسط الزرعي للخطوط الخلوية السرطانية واختبار سمية المستخلص على 3-6-3:

Preparationخطوطتلك ال of medium of cancer cell lines and test the

extraction toxic on cancer cell lines

Preparationالخلوية السرطانيةتحضيرالوسط الزرعي للخطوط :1-3-6-3 of medium

of cancer cell lines

Freshney(لتمت تهيئية الوسط الزرعي وفقآ , بخلط مكوناته مع بعضها ) 2000

ثم وزع ، مايكرون 0.22ومن ثم عقمت بأستعمال مرشح ذي ثقوب ، لتر منه 1البعض لتحضير

مل وحفظت في القنان بدرجة 200اء محكم سعة الوسط الزرعي في قناني زجاجية ذات غط

.الى حين األستعمال هم20–حرارة


٤٨

تم الحصول على الخطوط السرطانية من المركز العراقي لبحوث السرطان والوراثة

. الجامعة المستنصرية / الطبية

:حيث تم أجراء الخطوات الخاصة بالزرع النسيجي تحت ظروف معقمة كاألتي

الى ) F-2-2-1-6-3(فرنسين المحضر في الفقرة/ مل من محلول التربسين 2ضيفأ 1-

الحاوية على الخاليا بعد تفريقها من الوسط الزرعي القديم ٣سم25قنينة الزرع النسيجي بحجم

دقيقة لتفكيك 15مدة هم37ثم حركت القنينة برفق وحضنت في الحاضنة بدرجة حرارة

خلخلة التصاقها بجدار القنينة للحصول قدر األمكان على خاليا أحادية الخاليا الملتصقة وكذلك

.مفردة

مل من وسط نمو جديد 15أضيفت الى القنينة الحاوية على الخاليا المتفككة ما يقارب 2-

RPMI-1640)( وتم تحريك القنينة جيدآ وبعدها أفرغت محتويات القنينة الحاوية على الوسط

ع الخاليا الى قنينة أخرى جديدة بحيث يكون مستوى الوسط الزرعي مع الزرعي الجديد م

الخاليا متساو بين القنينتين أي كل قنينة وضع فيها نفس الحجم تقريبأ من الوسط الزرعي مع

.Subculture)(الخاليا وتسمى هذه العملية بالمزرعة الثانوية

وخمسة أيام Hep-2فيما يخص مدة يومين هم37حضنت القناني بدرجة حرارة 3-

فريق عمل المركز العراقي ألبحاث السرطان ) (الطبيعة الوغارتمية لنمو الخالبا( AMN-3لل

بعد أن كتب عليها معلومات كاملة عن نوع الخاليا ونوع التمريرة الجديدة ، )والوراثة الطبية

)New passage (يوميا للتأكد من خلوها وتمت متابعة القناني، وتم أجراء المزرعة الثانوية


٤٩

Inverted(من أي تلوث وأن الخاليا بحالة جيدة وذلك بفحصها بواسطة المجهر المقلوب

microscope (وعندما يصبح النمو داخل القنينة جيدآ فأن الخاليا تكون جاهزة لألستعمال.

السرطانيةأختبار سمية المستخلصات الخام لنبات المعدنوس على تكاثر الخطوط :2-3-6-3

غم من المستخلص االيثانولي الخام لالوراق النباتية المحضر على وفق الفقرة 0.1ذيب أ

DMSO(Dimethyl(مل ١+PBSمل ٩[مل من المذيب 10في ) 2-2-3( sulfoxid[, ثم

مايكرون وحضرت منه ستة تراكيز هي 0.22عقم المستخلصان بأستعمال مرشح ذي ثقوب

)16000, 14000, 12000, 10000, 8000, وتحت ظروف ، مليلتر/مايكروغرام) 6000

أستعملت جميع التراكيز المحضرة مباشرة بعد إكمال عملية التحضيروحسب الخطوات ، معقمة

.التالية

بمحلول 3سم 25جهز عالق الخاليا عن طريق معاملة الزرع النسيجي حجم -أ

ثم حضنت في ، تحريك القنينة برفقفرسين بعد تفريغ الوسط الزرعي القديم و/التربسين

مل وسط النمو المحضر في 20ثم أضيف له، دقيقة 15م مدةه37الحاضنة بدرجة حرارة

RPMI(،أستعمل وسط النمو )3-6-1-1-1(الفقرة لكل من خاليا الخطين السرطانيين ) 1640

Hep-2 وAMN-3 وأستعمل وسط النموMEM لخاليا الخط السرطانيHela ج ثم تم مز

مل بعد كل مزجة جديدة الى حفر طبق معايرة الزرع 0.2عالق الخاليا جيدآ وتم نقل

Microtiterالنسيجي ذي القعر المسطح plate for tissue culture بأستعمال ماصة

.أوتوماتيكية دقيقة


٥٠

ساعة الى حين التصاق الخاليا في 24م لمدةه 37ترك الطبق في الحاضنة بدرجة حرارة -ب

مل من 0.2بعدها تم التخلص من الوسط الزرعي القديم في الحفرة وتم أضافة، الحفرة

تم عمل ثالث . التراكيز المحضرة سابقا في كل حفرة وبواقع ثالث مكررات لكل تركيز

Freeمضاف لها وسط زرعي خال من المصل ) خاليا فقط(مكررات للسيطرة media.

ساعة أخرج الطبق من الحاضنة وأضيف إليه محلول صبغة البنفسج 24بعد مرور - ج

مل لكل حفرة وكررت الخطوة نفسها 0.2البلوري لجميع الحفر الحاوية على الخاليا بمقدار

.ساعة72و 48بعد فترة حضن

زيلت وبعدها أخرج الطبق وأ،أعيد الطبق مرة ثانية الى الحاضنة ليحضن مدة نصف ساعة -د

الى حين زوال الصبغة الزائدة أذ أن الخاليا الحية ) PBS(محتوياته وغسلت الخاليا بمحلول

.تأخذ الصبغة أما الميتة فال تأخذها

.نانومتر 492بطول موجي ELISAقرأت النتائج بأستعمال - ه

,Hep-2HeLaأجريت الخطوات السابقة على كل من الخطوط السرطانية الثالث،-و

.بأستعمال الستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس AMN-3و

.تم حساب نسبة التثبيط لكل تركيز - ز


٥١

التحليل األحصائي

Completeحللت النتائج أحصائيآ باتباع التصميم العشوائي الكامل Randomized

Design (CRD) بأستعمال ، ولمعرفة فيما أذا كانت الفروقات بين المعامالت معنوية أم ال

Duncun(أختبار دنكن متعدد الحدود multiple test( وبأستعمال البرنامج األحصائي

).1998،العقيلي والشايب(SPSSالجاهز

النتائج والمناقشة الفصل الرابع

٥٢

Results النتائج والمناقشة and Discussion

األستخالص :1-4

ت المعدنوس بعد من مسحوق بذور نبا) غم 50(ملغم من 35تم الحصول على وزن

في حين تم %) 14.29(والتي تقدر بنسبة استخالص %80 الكحول االثيلي استخالصها في

من مسحوق أوراق النبات بعد استخالصها أي ) غم50(ملغم من 42الحصول على وزن

د وذي لون اخضر داكن مائل الى السوا اوكان المستخلصان ذو%) 11.9(بنسبة استخالص

بذور ستخالص نسبة ا ان اذ وجدت )2007(دراسة التميمي، لزوجة وهذه ما اشارت اليه

Apiumالكرفس graveolens9.816(تساوي % 95 في المستخلص الكحولي االثيلي(%

ولألوراق النباتية %) 10.27(كانت% 95 في المستخلص الكحولي المثيلي بينما

لي والميثانولي على التوالي ، وهذه لكل من المستخلص االيثانو%) 13.2%,16.80(كانت

ص لنبات المديد ستخالالآذ كانت نسبة ا)2008(اعلى مما حصلت عليهاالسعدي النسبة

Convolvulus arvensis0.06%.

نبات لبذور وأوراق الخامستخلص الكحولي الكشف عن أهم المركبات الفعالة في الم: 2-4

- :المعدنوس

ية االستداللية للمستخلص الكحولي الخام ئأظهرت نتائج التحليل والكشوفات الكيميا

والفالفونويدات المعدنوس تحتوي علىذور لبذور وأوراق نبات المعدنوس ،ان ب

،بينما وجدت المركبات الصابونيات والقلوديات ) 4-1(جدول يداتسيدات والسترووالكاليكو

من المركبات اتنجيات والفالفويندات التي تعدوالكالكوسيات والتربينات والسترويدات والر

على نبات ) 2007(التميميدراسة عالة في أوراق نبات المعدنوس وهذا ما اشارت اليه الف


٥٣

بوجود )2006(،وجماعته Zheng ائج دراسةنت كما اشارت )2008(،الكرفس و السعدي

.في نبات الكرفس Monoterepeneالتربينات األحادية

لبذور في المستخلص الكحولي االثيلي Flafvonoidesيدات إن وجود الفالفون

يولوجية والفسيولوجية العالية عند االيتها البوارواق نبات المعدنوس التي اثبت الدراسات فع

التي تحمي Antioxidantsإعطائها عن طريق الفم والتي تعمل كمواد مضادة لألكسدة

Freeخاليا اللبائن من الجذور الحرة لألوكسجين Oxygen والتـــــي تعمل على

Nakayama(إزالتها etal,2002,2003(.


٥٤

المركبات الفعالة في المستخلص الكحولي لبذور واوراق نبات أهم :)4-1(جدول

المعدنوس

النتيجةدليل الكشفالكاشف المستخدمالمركب الكيمياويت

األوراقالبذور

+-راسب بنيدراجندروفالقلويدات1

++راسب اصفرمع الكحول االثيليKOHالفالفونات2

التربينات3

و

السترويدات

حامض +كلورفوم

قطرة حامض +الخليك

الكبريتيك المخفف

لون بني فاتح

لون ازرق داكن بعد

يوم

-

+

+

+

%1خالت الرصاصالتأنينات4

كلوريد الحديديك

راسب ابيض هالمي

اخضر مزرق

-+

+-رغوة تبقى مدةرج المستخلص الكحوليالصابونيات5

ماء +كحول اثيلي الراتنجيات6

Hcl4%محمض بالـ

+-العكورة

++راسب احمربندكتالكاليكوسيدات7

تدل على ايجابية الكشف(+) العالمة

تدل على سلبية الكشف)-(العالمة


٥٥

التأثير الوراثي الخلوي للمستخلص الكحولي الخام لبذور وأوراق نبات المعدنوس : 3-4

الكحولي الخام لبذور نبات المعدنوس في خاليا نقي العظم للفئران تأثير المستخلص :1-3-4

.المختبرية

تأثير المستخلص الكحولي الخام لبذور نبات المعدنوس في مؤشر انقسام الخاليا : 1-1-3-4

.نقي العظم في الفئران المختبرية

نبات المعدنوس في معامل تأثير المستخلص الكحولي الخام لبذور) 4-2(يوضح جدول

Mitoticاالنقسام index قي العظم لخاليـــــــا نBone marrow cells في

ران السيطرة انقسام الخاليا في فئي معامل الفئران المختبرية ، آذ يالحظ حصول تثبيط ف

سيطرة مل مقارنة بال/ميكروغرام 10عقــــار سايكلوفوسفوامايد بتركيز الموجبة المعاملة ب

¡)P>0.05(وجود فرق معنوي اإلحصائيوقد أكد التحليل ) غير المعاملة الفئران(السالبة

إن انخفاض هذا المعامل دليل على التأثير السمي والتطفيري للعقار الذي يستخدم بشكل واسع

-4.0H-CP(4(كمضاد للسرطان والذي يحصل له تنشيط تأيضي بدائي إلى

hydroxycyclophoamid يمتلك عدة إشكال تأيضه أخرى مثل .ظهر فعاليةلت

)PAM(Phsphoamid mustard و)ALP(Aldophosphamid)Kown,etal;1987(.


٥٦

اليا نبات المعدنوس في مؤشر انقسام الخ لبذورالكحولي صتأثير المستخل): 4-2(جدول

.الجسمية للفئران المختبرية

للمقارنة بين األسطر واألحرف ) p›0.05(تعني وجود فرق معنوي) A,B(األحرف المختلفة

›P(تعني وجود فرق معنوي ) a,b(المختلفة للمقارنة بين االعمدة) 0.05

µ = ، المتوسطSE =قياسيالخطأ ال .

يوم28 يوم21 يوم14 أيام7 الفترة

µ ±SEµ±SEµ±SEµ±SE المجاميع

A,a السيطرة السالبة

9.16±0.33

A,a

9.16±0.33

A,a

9.16±0.33

A,a

9.16±0.33

B,a السيطرة الموجبة

3.93±0.21

B,a

3.93±0.21

B,a

3.93±0.21

B,a

3.93±0.21

A,aكغم/ملغم 250

8.16±0.06

A,a

7.65±0.06

öAC,ab

7.19±0.06

BC,b

4.96±0.06


9.14±0.05

A,a

9.14±0.05

C,b

6.43±0.06

C,b

5.64±0.06

A,aكغم/ملغم1000

9.10±0.05

A,a

6.60±0.05

A,a

6.65±0.05

C,b

5.64±0.05

A,a كغم/ملغم 2000

9.26±0.05

A,a

9.75±0.05

A,ab

6.15±0.05

C,b

6.34±0.07


٥٧

إلى أن العقار 1986)(وجماعته Pieperفقد توصل DNAبالـ ما من ناحية ارتباط العقارا

وبالتالي إيقاف Guanineبقاعدة الكوانين N7له قابلية على االرتباط التساهمي مع

إما DNAاالستنساخ في هذا الموقع بتأثير القنوات المتكونة بين العقار وشريط بالـ

Lugoي الشقيقد أشار إلى قابلية العقار على استحثاث التبادل الكروماتيدفق) 1989(وجماعته

Sister chromatid exchange (SCE) في نقي العظم للفئران في دورتين خلويتين وان

Atayaموقع التبادل مرتبط مع وحدة التضاعف الفعالة وهذه النتائج تتفق مع دراسة

ل على تثبيط معامل انقسام التي تشير إلى تأثير عقار السايكلوفوسفوامايد يعم1989وجماعته

مل االنقسام حصول انخفاض في معا) 4-2(كما يتضح من جدول .ي العظم للجرذ قخاليا ن

العظم للفئران المعاملة المستخلص الكحولي الخام لبذور نبات المعدنوس الخلوي لخاليا نقي

فرقا كغم/ملغم 250أظهرت الجرعة كغم اذ/ملغم )2000,1000,500,250(لجميـع الجرع

، وكذلك رابعمقارنة بالسيطرة السالبة وباألخص بعد األسبوع الثالث وال )P>0.05(معنويا

)P>0.05(كغم فرقا معنويا/ملغم 1000كغم في حين أظهرت/ملغم 500الحال مع الجرعة

ملغم 2000من التجريع ، أظهرت الجرعة 28,21,14بالمقارنة مع السيطرة السالبة لأليام

على ) 6.34و 6.15(آذ كان 28,21،لأليام )P>0.05(داللة معنوية كغم انخفاضا ذا/

خلية لنخاع العظم في احد الفئران المختبرية منقسمة ومتوقفة ) 4-1(شكليوضح الو التوالي

إن المستخلص الكحولي الخام لبذور نبات المعدنوس كما metaphaseعند الطور االستوائي

عدد الخاليا الداخلة في األطوار نأو يقلل م نقسام الخلوي ، فيمنعال اتثبيطي يمتلك فعال

Ghareeb¡1997(دراسة فة من االنقسام وهذا ما أشارت اليهالمختل and George ( آو ،

S)Saggooأو يسبب في تلف أو ضعف في الطور S-phaseقد يطيل من فترة الطور

etal.,1991 (كبات أو نواتجها ، كما ويمكن ان يفسر إلى أن ما يحتويه المستخلص من المر


activeيضية التي تعمل على تثبيط تصنيع البروتين لمرحلة االنقسام الفعلي division آو

(mRNA الخاص ببناء بروتين آو

Mercykutty(التي تشكل خيـوط المغزل and

جهاز كحولي بتراكيزه المعتمدة تؤثر على

مغزل االنقسام آو مكوناته لذا يمكن اعتبار هذه المركبات التي تؤثر على بروتين االنيبيبات

ومن مثلها المــــــواد

Huang)بأنها مضادات الخاليا السرطانية

ومتوقفة عند الطور نخاع العظم في احد الفئران المختبرية منقسمة

Giemsa.(

الفصل الرابع

٥٨

يضية التي تعمل على تثبيط تصنيع البروتين لمرحلة االنقسام الفعلي

(mRNAالالزمة لالستنساخ (DNA)منع إزالة حلزنــة بالـ

التي تشكل خيـوط المغزل tubulineتجميـــع بروتينات

Steph (كحولي بتراكيزه المعتمدة تؤثر علىمما يعني أن المستخلص ال


microtubule ومن مثلها المــــــواد المكونة لخيـــــوط انقسام المغزل

Toxol , Colchicine , Vin بأنها مضادات الخاليا السرطانية

نخاع العظم في احد الفئران المختبرية منقسمة يوضح خلية

metaphase)100×¡Giemsaاالستوائي


يضية التي تعمل على تثبيط تصنيع البروتين لمرحلة االنقسام الفعليألا

منع إزالة حلزنــة بالـ

تجميـــع بروتينات

Stephan ,1984


microtubuleقيقةدال

Toxol , Colchicine , Vinblastine

etal.,2002).

يوضح خلية ):4-1(شكل


٥٩

الصغيرة ىالمستخلص الكحولي الخام لبذور نبات المعدنوس في تشكيل النوتأثير :2-1-3-4

لخاليا نقي العظم في الفئران المختبرية

تشكيل تأثير المستخلص الكحولي الخام لبذور نبات المعدنوس في) 4-3(يوضح جدول

تشكيل النواة الصغيرة للعينة ي الفئران المختبرية ،اذ كانالعظم ف النواة الصغيرة لخاليا نقي

لقياسية ، في حين ارتفعت النسبة في العينة ا 0.31±1.50هو)السيطرة السالبة (القياسية

تشكيل النواة الصغيرة )٢- ٤(ويوضح الشكل 0.49±5.70الى)السيطرة الموجبة (

Micronucleus المعاملة لخلية من نخاع العظم في احد الفئران المختبرية

بين السيطرة وجود فرق معنوي وقد أكد التحليل بالسايكلوفوسفوامايد عند السيطرة الموجبة،

انخفاض قيم معدل تشكيل النواة ) 4-3(، كما يبين الجدول ) P>(0.05 السالبة والموجبة

ر نبات المعدنوس ولمختلف الجرع الصغيرة في الفئران المعاملة بالمستخلص الكحولي لبذو

)2000, 1000, 500, يوم مقارنة ) 28,21,14,7(كغم وخالل ايام التجريع /ملغم )250

، وهذ ما اشارت )%1.63-0.90(اذ تراوحت النسبة بين ) لسالبةالسيطرة ا(نة القياسية بالعي

قي العظم عدل تكوين النوى الصغيرة لخاليا ناذ الحظت انخفاض م 2007النعيمي،دراسة اليه

Capparisفي الفئران المختبرية المجرعة بالمستخلص األيثانولي لنبات الكبر spinosa

Rumex لحميضوالمستخلص الميثانولي لنبات ا acctosella والتي ترجع الى قلة حصول

من )DNA( لـوالتي تمنح حماية ل quercetin,rutin يرات الكروموسومية بسبب وجودالتغ

، او من خالل فعالية الفيتامينات الفعالة والتي تتميز نبات المعدنوس بوفرتها مثل اإلضرار

antioxdant)Nielsen كمواد مضادة لالكسدةتي تعمل وال E,Aفيتامين et al.,1999( أو

.أو مضادة للتطفير )detoxification(ه مركبات المستخلصات في اإلزالة السمية لقابلي


٦٠

الصغيرة ىتأثير المستخلص الكحولي لبذور نبات المعدنوس في تشكيل النو) 4-3(جدول

.للفئران المختبرية

يوم28يوم21يوم14أيام7الفترة

µ±SEµ±SEµ±SEµ±SEالمجاميع

A,aالسيطرة السالبة

1.50±0.31

A,a

1.50±0.31

A,a

1.50±0.31

A,a

1.50±0.31

B,aالسيطرة الموجبة

5.70±0.49

B,a

5.70±0.49

B,a

5.70±0.49

B,a

5.70±0.49


1.63±0.03

A,a

1.20±0.05

A,a

1.10±0.08

A,a

1.00±0.08


1.40±0.05

A,a

1.20±0.06

A,a

1.10±0.06

A,a

1.10±0. 07


1.63±0.06

A,a

1.30±0.05

A,a

1.00±0.07

A,a

1.00±0.07


1.30±0.07

A,a

1.15±0.07

A,a

1.00±0.05

A,a

0.90±0.06

للمقارنة بين األسطر ) P>0.05( تعني وجود فرق معنوي ) A,B(األحرف المختلفة

للمقارنـــــــة ) P>0.05( تعني وجود فرق معنوي ) a,b(األحرف المختلفة

.قياسيالخطأ ال= SEالمتوسط ، = µ بين االعمدة


الخام ة في المستخلص االيثانولي

قي العظم ، آو لقلة ي لتشكيل النواة الصغيرة لخاليا ن

Centromeresالتغيرات الكروموسومية الحاصلة والتي تؤدي إلى ظهور قطع مركزية

خالية من القطع المركزية لديها القدرة على التحام نهايتها وتشكيل

لخلية من نخاع العظم في احد

(.

المعدنوس في استحثاث التغيرات

لكسر أن معدل التغيرات الكروموسومية ممثلة با

للخاليا الجسمية لخاليا نقي العظم في الفئران المختبرية


٦١

ة في المستخلص االيثانوليكبات الرئيسم وجود دور سلبي للمرنستنتج عد

ي لتشكيل النواة الصغيرة لخاليا نلبذور المعدنوس على رفع المستوى التلقائ

التغيرات الكروموسومية الحاصلة والتي تؤدي إلى ظهور قطع مركزية

خالية من القطع المركزية لديها القدرة على التحام نهايتها وتشكيل توموسوما

.نوى صغيرة الحجم

لخلية من نخاع العظم في احد Micronucleiالصغيرة ى يوضح تشكيل النو

)Giemsa¡×100( المعاملة بالسايكلوفوسفوامايد الفئران المختبرية

المعدنوس في استحثاث التغيرات نبات الخام لبذورقابلية المستخلص الكحولي

.الكروموسومية لخاليا نقي العظم في الفئران المختبرية

أن معدل التغيرات الكروموسومية ممثلة با)4-4(يالحظ من الجدول رقم

للخاليا الجسمية لخاليا نقي العظم في الفئران المختبرية )الكرموماتيدي والكروموسومي


نستنتج عد ما تقدمومن

لبذور المعدنوس على رفع المستوى التلقائ

التغيرات الكروموسومية الحاصلة والتي تؤدي إلى ظهور قطع مركزية

وموسوماكرغير طبيعية ل

نوى صغيرة الحجم

يوضح تشكيل النو):4-2(شكل

الفئران المختبرية

قابلية المستخلص الكحولي :3-1-3-4

الكروموسومية لخاليا نقي العظم في الفئران المختبرية

يالحظ من الجدول رقم

الكرموماتيدي والكروموسومي(


٦٢

، عند المقارنة ) السيطرة الموجبة (ارتفع معنويا عند تجريع الفئران سايكلوفوسفوامايد

±3.20(و) 0.05±3.40(،حيث أصبـح ) السيطرة السالبة (بالحيوانات غير المجرعة

من الكسر الكروماتيدي والكروموسومي على التوالي ،في حين كان للعينة القياسية لكل) 0.05

لكال من الكسر الكرومويتدي و ) ±1.600.320(و) 1.40±0.30( لبةالسيطــرة السا

التغيرات )4-3(شكل يوضحو الكروموسومي على التوالي وهي اقل من ذلك بكثير ،

من المعروف ان المعاملة بالسايكلوفوسفوامايد و لخاليا نقي العظم في الفأر الكروموسومية

او المسرطن Mutagenesis التطفيري د من المواد ذات الفعلعقار سايكلوفوسفواماي

Carcinogenesis يضاته مع المادة الوراثية بالـبسبب ارتباطه او متأ)DNA( والتي تؤدي

وبالتالي تعمل على إعاقة تضاعف المادة الوراثية )DNA(الـ الى حصول كسور في أشرطة

(DNA)الـ بين أشرطة cross-linkingاو في عمل ) S-phase(خالل دورة الخلية

، لذا اختلفت السيطرة ) ,1976Auler( وبالتالي تؤدي إلى إحداث التغيرات الكروموسومية

، كما يالحظ انخفاض معدل ) P>0.05( السالبة عن السيطرة الموجبة اختالفا معنويا

التغيرات الكرموسومية الكسر الكروماتيدي والكسر الكروموسومي بمرور الزمن ابتداءا من

كغم ، /ملغم )2000,1000,500,250( ألسبوع األول وحتى األسبوع الرابع ولجميع الجرعا

حظ وجود فروق معنوية لتلك مقارنة بالسيطرة السالبة ولم يال إال إن هذه التغيرات طفيفة

.التغيرات خالل مدة إجراء التجربة


٦٣

الخطأ القياسي لمعدل التغيرات الكروموسومية لتأثير المستخلص ±المتوسط ) 4-4(جدول

- :الكحولي لبذور نبات المعدنوس في الخاليا الجسمية للفئران المختبرية

الكسر الكروموسومي الكسر الكروماتيدي

يوم28 يوم21 يوم14 أيام7 يوم28 يوم21 يوم14 أيام7 الفترة

µ±SEµ±SEµ±SEµ±SEµ±SEµ±SEµ±SEµ±SE السيطرة السالبة

A,a

1.60±0.370

A,a

1.60±0.0370

A,a

1.60±0.037

A,a

1.60±0.0370

A,a

1.40±0.30

A,a

1.40±0.30

A,a

1.40±0.30

A,a

1. 40±0.30

السيطرة

ةالموجب

B,a

3.40±0.55

B,a

3.40±0.55

B,a

3.40±0.55

B,a

3.40±0.55

B,a

3.20±0.57

B,a

3.2±0.57

B,a

0.57±3.20

B,a

3.20±0.57

A,a كغم/ملغم250

1.70±0.06

A,a

1.50±0.05

A,a

1.40±0.03

A,a

1.30±0.06

A,a

1.60±0.05

A,a

1.50±0.05

A,a

1.40±0.06

A,a

1,30±0.05


1.40±0.06

A,a

1.30±0.06

A,a

1.20±0.06

A,a

0.90±0.07

A,a

1.30±0.05

A,a

1.20±0.06

A,a

1.10±0.06

A,a

0.90±o.05

A,a كغم/ملغ1000

1.40±0.06

A,a

1.40±0.06

A,a

1.10±0.06

A,a

0.90±0.05

A,a

1.10±0.05

A,a

1.10±0.05

A,a

1.00±0.05

A,a

0.80±0.05


1.00±0.06

A,a

1.00±0.06

A,a

1.00±0.05

A,a

1.00±0.07

A,a

1.00±0.05

A,a

0.9±0.05

A,a

0.90±0.05

A,a

0.80±0.05

للمقارنة بين األسطر ) P>0.05( تعني وجود فرق معنوي ) A,B(األحرف المختلفة

للمقارنــــة بين ) P>0.05( تعني وجود فرق معنوي ) a,b(األحرف المختلفة

.الخطأ القياسي= SEالمتوسط ، = µ األعمدة


٦٤

والتي تكون Spontaneousروموسومية يمكن ان تحدث ذاتيـاإن التغيرات الك

Repair صالحضمن كفاءة أنظمة اإل systems ان تحدث نتيجة لعوامل في الخاليا ، ويمكن

او على ميكانيكية حركة االنقسام او أنزيماتها تكروموسومالالطبيعة التركيبية ل قد تؤثر في

Zhu,1990)(Au and لي الخام لبذور المعدنوس ال ومن هنا يتضح أن المستخلص الكحو

Mutagenicمن المواد المطفرة يعد agents والتي تتضح من خالل عدم قدرته على

.استحثاث التغيرات الكروموسومية


المعاملة لخاليا نقي العظم في الفأر

(.


٦٥

يوضح الكسر الكروماتيدي:)أ(

يوضح الكسر الكروموسومي:)ب(

لخاليا نقي العظم في الفأر يوضح التغيرات الكروموسومية):3

)Giemsa¡×100( بالسايكلوفوسفوامايد


4-3(شكل


٦٦

لفئران ات المعدنوس في خاليا نقي العظم لألوراق نبتأثيرالمستخلص الكحولي الخام :2-3-4

-:المختبرية

ي معامل انقسام خاليا ألوراق نبات المعدنوس فتأثيرالمستخلص الكحولي الخام : 1-2-3-4

- :فئران المختبرية نقي العظم في

بين تأثير المستخلص الكحولي الخام للنبات على معامل االنقسام ي) 4-5(جدول

من بعد ايوم 28,21,14,7كغم ولأليام /ملغم ) 2000,1000,500,250(وللجرع الخيطي

لسالبة في حين يالحظ ان في السيطرة ا%) 9.16(المعاملة نالحظ ان معامل االنقسام هو

السيطرة الموجبة للفئران المعاملة بالمطفر سايكلوفوسفوامايد المؤشر علىانخفاض هذا

P)>0.05(اكدليل على التأثير السمي والتطفيري له وكان مستوى االختالف معنوي%) 3.93(

التأثيرات السمية والتطفيرية للمطفر في المقارنة بيـن العينتيـن وهذا ما أشارت اليه

Ataya(لمعامل االنقسام د على خاليا اللبائن من خالل خفضهسايكوفوسفواماي etal

للمستخلص الكحولي الخام ألوراق نبات الفئران المعاملة بالجرع األربع اما ).1989,.

500,250لجرع المعدنوس يالحظ ارتفاع القدرة التثبيطية للمستخلص الكحولي للمعدنوس ل

آذ أعطت فرقا ) السيطرة السالبة(عند المقارنة مع العينة القياسية 28,21لأليام غمك/ملغم

من 14,7في حين لم يالحظ وجود اختالف معنوي لأليام) P>0.05( معنويا واالحتمالية

ملغم 2000,1000التجريع للجرعتين أعاله ،لم يالحظ وجود اختالف معنــــوي للجرع

لكن يالحظ وجود اختالف 21,14,7لأليام ) السيطرة السالبة (كغم مقارنة بالعينة القياسية /

)P‹0.05(مقارنة بالسيطرة السالبة خالل االسبوع الرابع من المعاملة) P>0.05 (معنوي

.لهاتين الجرعتين


٦٧

انقسام الخاليا الجسمية للفئران المختبريةتأثير المستخلص الكحولي ألوراق نبات المعدنوس في مؤشر :)4-5(جدول

.

األحرف للمقارنة بين األسطر ) P<0.05(تعني وجود فرق معنوي ) A,B(ألحرف المختلفة ا

للمقارنـــــــة بيـــن األعمدة ) P<0.05(تعني وجود فرق معنوي ) a,b(المختلفة

µ = ، المتوسطSE =قياسيالخطأ ال .

يوم28 يوم21 يوم14 أيام7 الفترة

µ ±SEµ±SEµ±SEµ±SE المجاميع


9.16±0.33

A,a

9.16±0.33

A,a

9.16±0.33

A,a

9.16±0.33


3.93±0.21

B,a

3.93±0.21

B,a

3.93±0.21

B,a

3.93±0.21


8.54±0.46

A,a

8.54±0.46

öAC,ab

7.09±0.45

BC,b

4.96±0.33


9.14±0.42

A,a

9.14±0.42

C,b

6.38±0.52

C,b

5.28±0.37


9.60±0.36

A,a

9.60±0.36

A,a

8.20±0.51

C,b

5.52±0.37


9.75±0.36

A,a

9.75±0.36

A,ab

7.94±0.52

C,b

6.14±0.36


٦٨

الصغيرة ىالنو قابليةالمستخلص الكحولي ألوراق نبات المعدنوس في تشكيل- :2-2-3-4

-:لخاليا نقي العظم في الفئران المختبرية

لتشكيل النوى الصغيرة لكل من الفئران غير العاملة مقارنة) 4-6( بين جدول

والفئران ) السيطرة الموجبة (عقار سايكلوفوسفوامايد والفئران المعاملة ب) ة السالبة السيطر(

عاملة بالمستخلص الكحولي ألوراق نبات المعدنوس لخاليا نقي العظم ، يتضح حصول مال

الصغيرة واختلفت السيطرة السالبة عن السيطرة الموجبة اختالفا زيادة في معدل تشكيل النوى

لمعالجة بعض حاالت السايكلوفوسفوامايد والذي يستعمل ان اذ) P>0.05(معنويا عاليا

ليصبح فعاال بايولوجيا ويمتلك عدة إشكال تايضه اايضي السرطان هو عامل يتطلب تحوال

من خالل DNAشكال التايضية ترتبط بالـ جميع هذه اإل) ALP(و)PAM(و) OHCP-4( وهي

على خاليا اللبائن الخاصة بقاعدة الكوانين ،إما تأثيراته N7االرتباط التساهمي مع مجموعة

إثناء التضاعف مؤديا الى حدوث تغيرات كروموسومية DNAأشرطة بالـ فانه يؤثر في

نوى الصغيرة لجميع الجرع كما يالحظ حدوث انخفاض في معدل تشكيل ال .وبمعدالت عالية

اال ان هذه التغيرات طفيفة لم تظهر ايوم) 28,21,14,7(مقارنة بالسيطرة السالبة لأليام

.)P‹0.05(نتائج التحليل الى وجود اختالف معنوي


٦٩

الصغيرة للفئران ىتأثير المستخلص الكحولي لنبات المعدنوس في تشكيل النو): 4-6(جدول

.المختبرية

يوم28يوم21 يوم14 أيام7 الفترة

µ ± SEµ±SEµ±SEµ±SE الحالة


1.50±0.31

A,a

1.50±0.31

A,a

1.50±0.31

A,a

1.50±0.31


5.70±0.34

B,a

5.70±0.34

B,a

5.70±0.34

B,a

5.70±0.34


1.63±0.03

A,a

1.20±0.05

A,a

1.10±0.08

A,a

1.00±0.08


1.40±0.27

A,a

1.20±0.30

A,a

1.10±0.29

A,a

1.10±0. 23


1.63±0.30

A,a

1.30±0.30

A,a

1.00±0.30

A,a

1.00±0.26


1.40±0.27

A,a

1.20±0.25

A,a

1.00±0.28

A,a

0.90±0.24

للمقارنة بين األسطر األحرف ) P<0.05(تعني وجود فرق معنوي ) A,B(األحرف المختلفة

للمقارنـــــــة بيـــن االعمدة ) P<0.05(تعني وجود فرق معنوي ) a,b(المختلفة

µ = ، المتوسطSE =قياسيالخطأ ال


٧٠

الصغيرة ربما ناتجة عن حاالت غير الطبيعية في انقسام القطع إن تشكيل النوى

تقود الى عدم DNAبالـ او ناتجة بسبب إضرار تللكروموسوما Centromeresالمركزية

Kasahara(فعالية القطع المركزية والى عدم تشكيل المغزل وهذه تتفق مع نتائـج كل من

,etal.,1992 (و)Takada,etal.,2003 ( والتي تفسر ظهور قطع كروموسومية خالية من

القطع المركزية لديها القدرة على التحام نهاياتها لتكوين تشكيالت كروية تشبه النواة بحجم

وهنا تظهر نتيجة الفعالية العالية لمقدرة السايكلوفوسفوامايد على إحداث مثل هذه صغير جدا

بات المعدنوس ليس لديه التأثير السلبي الحاالت في حين يالحظ ان المستخلص الكحولي ن

إلحداث مثل هذه التغيرات وتشكيل نوى صغيرة اعلى من المستوى الطبيعي لخاليا نقي العظم

.في الفئران المختبرية

قابليةالمستخلص الكحولي ألوراق نبات المعدنوس في استحثاث التغيرات : 3-2-3-4

المختبرية الكروموسومية لخاليا نقي العظم في الفئران

بالكسر الكرموماتيدي والكسر (لتغيرات الكروموسومية ممثلة يوضح ا) 4-7(جدول

) السيطرة السالبة(لقيمة القياسية ،ان معدل التغيرات الكروموسومية ل)الكروموسومي

من الكسر الكروماتيدي والكروموسومي وهذه القيمة تمثل لكل% ) 1.40و % 1.60(هي

المطفر سايكلوفوسفوامايد في السيطرة روموسومية التلقائية وعند استعمالمعدل التغيرات الك

كدليل على %) 3.40(مل ارتفعت هذه التغيرات الى / ممايكرو غرا) 10(الموجبة بتركيز

التأثير السمي التطفيري لهذا العقار واختلف جوهريا عن معدل التغيرات الكروموسومية في

.P>0.05(االحتمالية ةالبالعينة القياسية السيطرة الس (


٧١

الخطأ القياسي للتغيرات الكروموسومية في الخاليا الجسمية للفئران ±المتوسط ) 4-7(جدول

.المعاملة بالمستخلص الكحولي ألوراق نبات المعدنوس

الكسر الكروموسومي الكسر الكروماتيدي

يوم28 يوم21 يوم14 أيام7 يوم28 يوم21 يوم14 أيام7 الفترة

µ±SEµ±SEµ±SEµ±SEµ±SEµ±SEµ±SEµ±SE السيطرة السالبة

A,a

1.60±0.039

A,a

1.60±0.039

A,a

1.60±0.039

A,a

1.60±0.039

A,a

1.40±0.30

A,a

1.40±0.30

A,a

1.40±0.30

A,a

1. 40±0.30

السيطرة

ةالموجب

B,a

3.40±0.42

B,a

3.40±0.42

B,a

3.40±0.42

B,a

3.40±0.42

B,a

3.20±0.43

B,a

3.20±0.43

B,a

0.43±3.20

B,a

3.20±0.43


1.70±0.30

A,a

1.50±0.37

A,a

1.40±0.30

A,a

1.30±0.30

A,a

1.60±0.21

A,a

1.50±0.22

A,a

1.40±0.27

A,a

1.30±0.30


1.40±0.27

A,a

1.30±0.30

A,a

1.20±0.29

A,a

0.90±0.23

A,a

1.30±0.21

A,a

1.20±0.29

A,a

1.10±0.08

A,a

0.90±o.23

A,a كغم/ملغ1000

1.40±0.26

A,a

1.40±0.26

A,a

1.10±0.23

A,a

0.90±0.18

A,a

1.10±0.18

A,a

1.10±0.18

A,a

1.00±0.15

A,a

0.80±0.20


1.00±0.26

A,a

1.00±0.21

A,a

1.00±0.21

A,a

1.00±0.21

A,a

1.00±0.21

A,a

0.90±0.23

A,a

0.90±0.18

A,a

0.80±0.20

للمقارنة بين األسطر األحرف ) P<0.05(تعني وجود فرق معنوي ) A,B(األحرف المختلفة

للمقارنـــــــة بيـــن االعمدة ) P<0.05(تعني وجود فرق معنوي ) a,b(المختلفة

µ = ، المتوسطSE =الخطأ القياسي .


٧٢

الكروموماتيدي بالكسر (ممثلة ةفي حين يالحظ خفض معدل التغيرات الكروموسومي

كغم ولجميع األيام مقارنة / ملغم) 2000,1000,500,250(ولجميع الجرع ) والكروموسومي

األسبوع الثالث والرابع من المعاملة ولجميع ي معدل انخفاض عندلسالبة وكان اعلبالسيطرة ا

كغم / ملغم ) 2000,1000,500,250( للجرع ) 0.90,1.00,1.10,1.20(الجرع اذ كان

وحصلت زيادة في من المعاملة للكسر الكروموسومي وعلى التوالي خالل األسبوع الثالث

كغم / للجرع ملغم ) 0.80,0.80,0.90,1.30(معدل االنخفاض في األسبوع الرابع وكان

التحليل اإلحصائي عدم وجود فروق معنوية مقارنة بالسيطرة السالبة نوعلى التوالي يبي

كغم في /ملغم ) 2000(وكذلك الحال مع الكسر الكروموسيومي إذ يالحظ كفاءة التراكيز

مقارنة ) وموسوميالـكسر الكروماتيدي والكرب(خفض معدل التغيرات الكروموسومية ممثلة

مما يبن كفاءة المستخلص الكحولي في القدرة على تثبيط هذه .ببقية الجرع الثالث األخرى

Repairمن كفاءة أنظمة اإلصالح زيادتها اعلىالتغيرات التي قد تؤدي systems في

.الخلية الى حصول تطفير وقد تؤدي بالتالي الى نشوء السرطان

ينفرد بوجود تراكيز عالية من العناصر والمركبات التي ان المستخلص الكحولي

تستخلص بصورة اقوي في المذيبات العضوية السيما الصبغات والدهون باختالف أنواعها

التي تتوفر بكميات كبيرة في أوراق نبات E,Aوالفيتامينات الذائبة بالدهون وهي فيتامين

بالمذيبات ابالماء فقط بينما يكون كلي اجزئي ، ان هذه المركبات يكون ذوبانهاالمعدنوس

Abd-Elhadyالعضوية etal.,1994. وقد يعمل المستخلص الكحولي لهذا النبات على غلق

عن طريق األلتصاق بها ومنع حصول تغيرات كروموسومية او )(DNAلالمواقع الحساسة في ا

ه او ان التراكيز المختلفة من خالل حث أنظمة األصالح في الخلية آلصالح التلف بعد حدوث


٧٣

تعمل على حث األنزيمات في بعض العضيات الخلوية التي تزيل المستخلص داخل الخليةمن

السمية وتساعد الخلية على أتمام عملية التضاعف والتقليل من الخطأ الوراثي والطفرة ولهذا

شتقاتها وان يمكن تصنيف المستخلص الكحولي ألوراق نبات المعدنوس ضمن المثبطات او م

سرطان وهذا ما المركبات الفعالة فيه تعمل على قطع اومنع حصول الطفرة والوقاية من ال

Kada.,etمن اشار اليه كل al 1988RamallDeflora,و 1985 and ومن هنا يمكن

تصنيف المعدنوس ضمن المركبات التي تعمل داخل الخلية كمضاد للتطفير

Antimutagenicity.


٧٤

دنوس في نمو خاليا التأثير السمي للمستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المع:4-4

الخطوط الخلوية السرطانية

تم اختبار قدرة المستخلص الكحولي الوراق نبات المعدنوس على تثبيط نمو الخاليا

وقد يةة خطوط خلوية سرطانالسرطانيه خارج جسم الكائن الحي وقد اجري االختبار على ثالث

من المستخلص الكحولي بدءا من التركيز ط الخلوية بتراكيز مختلفةعوملت هذه الخطو

مل وقد تم اعتماد التراكيز الست االعلى /مكغم16000الى التركيز ) مل/مكغم(مل/مكغم0.095

تازت بها واهملت التراكيز التي ام مل لنسبة القتل العالية/مكغم16000مل الى /مكغم000٨من

مل /مكغم)62.5الى 0.095من(على القتل حيث تميزت التراكيز تها الواطئةوذلك لقابلي القليلة

مل فكانت لها نسب تثبيطية /مكغم)1000الى 125من(بانعدام قابليتها على التثبيط اما التراكيز

63.1%,66.3%مل فكانت نسبة القتل/مكغم)4000,2000(اما التركيزين %50اقل من واطئة

70%ذلك ارتئينا اخذ التراكيز االعلى من ذلك والتي كانت تمتاز بنسب قتل من على التوالي ل

فما فوق لفعاليتها في القضاء على نسبه اكبر من الخاليا السرطانيه ولثالث اوقات هي

Cytotoxicity ساعه واعتمد اختبار السمية الخلوية 72,48,24 assay لتقويم تأثير تراكيز

والذي يستخرج من ،%IRلمعدل التثبيط نسبة المئويةيا بداللة الالمستخلص في نمو الخال

IR%: المعادله االتية =

× 100

Controlتعني Aحيث

B تعنيTest


٧٥

Hep-2الخط الخلوي السرطاني :1-4-4

من مختلفة بتراكيز )231( عند التمريرة Hep-2عند معاملة الخط الخلوي السرطاني

ساعة وجد تأثير 72,48,24عند فترات التعرض الثالث المستخلص الكحولي الوراق النبات

وفترة داد بزيادة التركيز وان نسبة التثبيط تز تثبيطي واضح في نمو الخاليا السرطانية

.التعرض

المستخلص الكحولي الوراق نبات المعدنوس:1-1-4-4

نمو الخط لمستخلص تأثيرا تثبيطيا كبيرا فيان لهذا ا )4-8(الجدوليتبين لنا من

فرق معنوي كبير عن مجموعة وب للتراكيز الست المأخوذة Hep-2الخلوي السرطاني

عند التركيز % 75.778ساعه هي 24للتثبيط عند فترة التعرض السيطرة وكانت اعلى نسبة

عند % 77.093فكانت ساعة 48ة التعرض للتثبيط عند فتر ةلى نسبمل اما اع/مكغم16000

ة اذ كانت اعلى نسبةساع72لفترة التعرض ةضا وكذلك بالنسبمل اي/مكغم16000التركيز

فأن نسبة التثبيط ) ٤- ٤(كيز نفسه وكما هو مبين في الشكل عند التر% 77.136للتثبيط هي

عند يتميز بأعلى نسبة قتل مل/مكغم16000تزداد بزيادة التركيز وفترة التعرض وان التركيز

72تعرض ولفترة للقتل هي عند هذا التركيز اعلى نسبة وان فترات التعرض الثالث المختلفة

وقلة عددها Hep-2يوضح نسبة التثبيط الكبيرة لخالياالخط السرطاني) ٥- ٤(شكلوان ال ةساع

ومن . مستخلصغير المعاملة بال مقارنة بخاليا الخطعند هذا التركيز وفترة التعرض

تزداد بزيادة Hep-2الواضح لنا ان نسبة القتل وتثبيط نمو الخاليا للخط الخلوي السرطاني

غير المعنوية عند تركيز المستخلص وفترة التعرض رغم ان هذه الفروقات بين نسب التثبيط

نسب التثبيط ولكن بمستويات في ةولكن هذا الينفي وجود الزياد )P<0.05( مستوى المعنوية


٧٦

ةاعلى قيم يتبين لنا ان )4-14(بزيادة التركيز وفترة التعرض ومن الجدول قليلة ومتقاربة

حيث بلغت ساعة72ثم الـ )+0.919(حيث بلغت ساعة48عندكانت لمعامل االرتباط

ةروهذا يؤكد ان للتراكيز المستخدمة قد +)0.913(حيث بلغت ساعة24ثم الـ )+0.914(

ا يدل على اهمية المستخلص مم Hep-2جدا للخاليا السرطانيه للخط الخلوي تثبيطيه عالية

.Hep-2على تثبيط نمو خاليا الخط الخلوي السرطاني الفعالة وقدرتة العالية

تأثير تراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس ):4-8(جدول

.Hep-2للخط الخلوي السرطاني ساعة 72,48,24ولفترات التعرض الثالث

الخطأ القياسيمل/غمالتركيز مك + نسبة التثبيط

ساعة72ساعة48ساعة24

60002.94 ± 70.2429.20 ± 71.62610.22 ± 72.594

80004.66 ± 73.3567.05 ± 74.7414.52 ± 75.23

100001.85 ± 74.0488.51 ± 75.0866.99 ± 75.779

120003.31 ± 75.0866.58 ± 76.1249.80 ± 76.125

140002.66 ± 75.4236.20 ± 76.475.81 ± 77.125

160007.49 ± 75.77811.39 ± 77.09313.33 ± 77.136


الوراق نبات المعدنوس الخام

.Hep-2للخط الخلوي السرطاني

66

68

70

72

74

76

78

6000 8000

ط بیتث ال

بةس

ن


٧٧

الخامتأثير تراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي

للخط الخلوي السرطاني ساعة 72,48,24ولفترات التعرض الثالث

8000 10000 12000 14000 16000

مل/التركیز مكغم


تأثير تراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي):4-4(شكل

ولفترات التعرض الثالث

24 ساعة

48 ساعة

72 ساعة


٧٨

).×100(وهو يوضح خاليا الخط الكثيفة والتي تكون بشكل طبقة واحدة ،الذي يمثل السيطرة Hep-2الخط الخلوي السرطاني ):أ(

16000المعامل بالمستخلص الكحولي الوراق نبات المعدنوس عند التركيز Hep-2الخط الخلوي السرطاني ):ب(

).×100(يوضح الفراغات بين الخاليا وقلة عددها، ساعة 72مل وعند فترة تعرض /مكغم

غير المعاملة Hep-2يوضح المقارنة بين خاليا الخط الخلوي السرطاني ): 4-5(شكل

72مل ولفترة تعرض /مكغم 16000بالمستخلص و الخالياالمعاملة بالمستخلص عند التركيز

Crystal¡×100(ساعة violat.(


٧٩

HeLaالخط الخلوي السرطاني :2-4-4

من بتراكيز مختلفة )248( عند التمريرة HeLaعند معاملة الخط الخلوي السرطاني

هساعة وجد ان ل 72,48,24فترات التعرض الثالث المستخلص الكحولي الوراق النبات عند

لهذا الخط امتازت بزيادة التثبيط من التراكيز االقل الى ا للخاليا السرطانيةعالي اتثبيطي اتأثير

ولكن Hep-2االعلى ومن فترات التعرض االقل الى االكثر كما هو الحال في الخط الخلوي

.سب تثبيط اعلى بن

المستخلص الكحولي الوراق نبات المعدنوس :1-2-4-4

اكبير اتثبيطي االمعدنوس تأثيران للمستخلص الكحولي الوراق نبات )4-9(يبين الجدول

وبفروق اكيز الست المأخوذةولجميع التر HeLaعلى نمو خاليا الخط الخلوي السرطاني

ثبيط تزداد من التركيز االقل وان نسب الت معنوية كبيرة عن مجموعة السيطرة

ترة للتثبيط خالل ف ى نسبةمل وكانت اعل/مكغم16000مل الى التركيز االعلى/ممكغ6000وهو

¡%86.505¡%79.238مل هي /مكغم16000ساعه عند التركيز 72,48,24التعرض

فأن نسبة التثبيط تزداد بزيادة )4-6(الي وكما هو مالحظ في الشكلعلى التو% 88.581

عند تراكيز الست المأخوذةللتثبيط لل يز وفترات التعرض وكانت اعلى نسبةالترك

يوضح نسبة التثبيط ) ٧- ٤(ساعة وان الشكل72ضمل ولفترة التعر/مكغم16000التركيز

مقارنة وفترة التعرضوقلة عددها عند هذا التركيز HeLaالكبيرة لخالياالخط السرطاني

ورغم هذه الفروق في نسب التثبيط بين التراكيز . غير المعاملة بالمستخلص بخاليا الخط

)P<0.05( مستوى المعنويةرض فأن هذه الفروق تعد غير معنوية احصائيا عند وفترات التع

في التثبيط بزيادة التركيز وفترة التعرض ولكن تكون ةولكن هذا الينفي وجود هذه الزياد


٨٠

يتبين لنا ان معامل االرتباط بين تراكيز ونسب )4-14(ومن الجدول.ة فيما بينها قليل الفروق

التعرض الثالث جدا كما مالحظ في الجدول نفسه ولفترات ةوعالي ةالتثبيط عالقه طردي

ساعه حيث72ثم عند +)0.982(حيث كانت ةساع48ت اعلى قيمه لمعامل االرتباط عندوبلغ

وهي تتقارب مع ما +) 0.970(حين وصلت الى ةساع24وبعدها عند +) 0.977(كانت

ولكن بمعامل ارتباط اكبر قليال لكل فترة Hep-2توصلت اليه النتائج عند الخط الخلوي

جدا لخاليا الخط الخلوي ذات قدرة تثبيطية عالية ةلى ان التراكيز المأخوذتعرض هذا يدل ع

في تثبيط لمستخلص النباتي وفعاليتة الكبيرةوهذا يبرهن على اهمية هذا ا HeLaالسرطاني

.HeLaنمو خاليا الخط الخلوي السرطاني

ات المعدونس تأثير تراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نب ):4-9(دول ج

.HeLaساعة للخط الخلوي السرطاني 72,48,24 الثالث ولفترات التعرض

الخطأ القياسيمل/غمركيز مكالت + نسبة التثبيط


600012.94 ± 73.843.80 ± 79.936.94 ± 82.353

80007.04 ± 74.3944.66 ± 80.96811.39 ± 83.045

100005.81 ± 75.2252.03 ± 82.0068.73 ± 84.083

1200016.82 ± 75.7785.61 ± 82.6986.00 ± 85.121

140004.55 ± 77.5087.99 ± 84.4295.88 ± 87.889

160008.84 ± 79.2383.00 ± 86.5054.06 ± 88.581


تراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس

.HeLaساعة على الخط الخلوي السرطاني

65

70

75

80

85

90

6000 8000

ط بیلثة ا

سبن


٨١

تراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس تأثير

ساعة على الخط الخلوي السرطاني 72,48,24ولفترات التعرض الثالث

8000 10000 12000 14000 16000



تأثير ):4-6(شكل


24 ساعة

48 ساعة

72 ساعة


٨٢

).×100(الذي يمثل السيطرة وهو يوضح خاليا الخط الكثيفة والتي تكون بشكل طبقة واحدة HeLaالخط الخلوي السرطاني ):أ(

المعامل بالمستخلص الكحولي الوراق نبات المعدنوس عند التركيز HeLaالخط الخلوي السرطاني ):ب(

).×100(يوضح الفراغات بين الخاليا وقلة عددها ، ساعة 72مل ولفترة تعرض /مكغم16000

غير المعاملة HeLaقارنة بين خاليا الخط الخلوي السرطاني ميوضح ال):4-7(شكل

72مل ولفترة تعرض /مكغم 16000بالمستخلص والخاليا المعاملة بالمستخلص عند التركيز

.violet(Crystal¡×100(ساعة


٨٣

AMN-3الخط الخلوي السرطاني :3-4-4

من كيز مختلفةبترا )177(عند التمريرة AMN-3عند معاملة الخط الخلوي السرطاني

ساعه اشارت النتائج 72,48,24نبات المعدنوس ولفترة تعرضوراق المستخلص الكحولي ال

بيط بزيادة ويزداد هذا التث ةالى وجود تثبيط في تكاثر الخاليا عند التراكيز الست المأخوذ

.وفترة التعرضالتركيز

المستخلص الكحولي الوراق نبات المعدنوس:1-3-4-4

نمو الخط الخلوي ان لهذا المستخلص تأثير تثبيطي في )4-10(يبين الجدول

كبيرة عن مجموعة السيطرة ةوبفروق معنوي ةلست المأخوذوللتراكيز ا AMN-3السرطاني

مل وكانت نسبة التثبيط /مكغم16000بيط نمو الخاليا عند التركيزحيث بلغت اعلى نسبة لتث

عند فترة %80.96وبلغت نسبة التثبيط ساعة24لفترة تعرض% 78.20عند هذا التركيز

وكما هو ،ساعة72عند فترة التعرض %82.69ووصلت نسبة التثبيط الى ساعة 48التعرض

حيث بلغت فأن نسبة التثبيط تزداد بزيادة التركيز وفترة التعرض )4-8(مالحظ في الشكل

) ٩- ٤(وان الشكل ساعة72وفترة تعرض مل/مكغم16000التركيز اعلى نسبة للتثبيط عند

وقلة عددها عند هذا التركيز AMN-3لخالياالخط السرطانييوضح نسبة التثبيط الكبيرة

.غير المعاملة بالمستخلص مقارنة وفترة التعرض بخاليا الخط

فأنها تعد غير معنوية الزيادة الحاصلة في نسب التثبيط بين التراكيز المعتمدة ورغم

في نسب التثبيط الزيادة ولكن هذا الينفي وجود هذه) P‹0.05(احصائيا عند مستوى المعنوية

ان معامل االرتباط ذو قيمة عالية يتبين )4-14(ومن الجدول .ولكنها بفروق قليلة غير معنوية


٨٤

وهذا يعني وجود عالقة طردية قوية بين التراكيز ونسب التثبيط ولفترات التعرض الثالث

ساعة اذ 48وان اعلى قيمة لمعامل االرتباط كانت عند فترة تعرضساعة 72,48,24

ثم عند فترة + 0.943ساعة حيث بلغت 72ثم تلتها عند فترة تعرض + 0.971وصلت الى

+.0.853ساعة حيث كانت 24تعرض

ساعة 72,48,24ولفترات التعرض الثالث AMN-3قيم معامل االرتباط للخط الخلوي ان

مع وجود بعض االختالفات بين الخطوط Hep-2,HeLaه عند الخطين الخلويينتقريبة لقيم

ان قيم معامل االرتباط تعطي .)4-13(لكما في الشك الثالث ولفترات التعرض الثالث المختلفة

الدليل القاطع على ان التراكيز الست المأخوذة للمستخلص النباتي ذات قيمة تثبيطية عالية

للتراكيز الست المأخوذة انيتبين لنا ) 4-11(ومن الجدول .AMN-3لخاليا الخط الخلوي

ذات نسب تثبيطية عالية AMN-3,HeLa,Hep-2والمعاملة بها الخطوط السرطانية الثالث

مع وجود فروقات بين الخط الخلوي نفسه وبين الخطوط الخلوية ساعة 24عند فترة تعرض

كما )P‹0.05(معنوية احصائيا عند مستوى المعنوية االثالث ولكن هذه الفروقات التعد فروق

ثبيط وبفارق تيمتلك اعلى نسبة لل HeLaالخط الخلوي يبين انيؤكد ذلك و) 4-10(ان الشكل

و HeLaوقد اقتربت نسبة التثبيط كثيرابين الخطين Hep-2AMN-3,ضئيل عن الخطين

AMN-3 يتبين لنا )4-12(وكذلك فأن الجدول .مل/مكغم )1200014000,( عند التركيزين

AMN-3,HeLa,Hep-2للتراكيز الست المأخوذة والمعاملة بها الخطوط السرطانية الثالث ان

مع وجود فروقات بين الخط الخلوي ساعة 48عند فترة تعرض ذات نسب تثبيطية عالية

معنوية احصائيا عند انفسه وبين الخطوط الخلوية الثالث ولكن هذه الفروقات التعد فروق

)4-13( وكذلك الجدول يدعم هذه النتيجة) 4-11(وان الشكل )P‹0.05(مستوى المعنوية


٨٥

HeLa,Hep-2,للتراكيز الست المأخوذة والمعاملة بها الخطوط السرطانية الثالث يتبين لنا ان

AMN-3 مع وجود فروقات بين الخط ساعة 72عند فترة تعرض ذات نسب تثبيطية عالية

معنوية احصائيا االخلوي نفسه وبين الخطوط الخلوية الثالث ولكن هذه الفروقات التعد فروق

ومن كل ما تقدم يتبين .يؤكد هذه النتيجة) 4-12(وان الشكل )P‹0.05(عند مستوى المعنوية

وقابليته الكبيرة على تثبيط لنا القدرة التثبيطية العالية للمستخلص الكحولي لنبات المعدنوس

عند التراكيز الست المأخوذة عالية خاصةالخطوط السرطانية الثالث المأخوذة وبنسب تثبيط

.للمستخلص النباتي

تأثير تراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات يبين ):4-10(دولج

.AMN-3خط الخلوي السرطاني لل 72,48,24المعدنوس ولفترات التعرض الثالث

الخطأ القياسيمل/غمكالتركيز م + نسبة التثبيط


60009.53 ± 71.976.33 ± 74.048.99 ± 75.08

80004.81 ± 72.664.51 ± 76.124.83 ± 77.50

100006.53 ± 74.743.34 ± 77.166.51 ± 78.20

120007.02 ± 75.777.10 ± 78.209.43 ± 80.62

1400010.81 ± 77.504.26 ± 79.997.66 ± 81.16

160009.43 ± 78.205.54 ± 80.964.53 ± 82.69


تراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس

.AMN-3على الخط الخلوي السرطاني

66

68

70

72

74

76

78

80

82

84

6000 8000

ط بیتث ال

بةس

ن


٨٦

تراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس تأثير

على الخط الخلوي السرطاني ساعة 72,48,24ولفترات التعرض الثالث

8000 10000 12000 14000 16000


24

48

72


تأثير):4-8(شكل


24 ساعة

48 ساعة

72 ساعة


٨٧

).×100(الذي يمثل السيطرة وهو يوضح خاليا الخط الكثيفة والتي تكون بشكل طبقة واحدة AMN-3الخط الخلوي السرطاني ):أ(

مل وعند /مكغم16000المعامل بالمستخص الكحولي الوراق نبات المعدنوس عند التركيز AMN-3الخط الخلوي السرطاني ):ب(

).×100(ين الخاليا وقلة عددها يبين الفراغات ب، ساعة 72فترة تعرض

غير المعاملة AMN-3يوضح المقارنة بين خاليا الخط الخلوي السرطاني ): 4-9(شكل

72مل ولفترة تعرض /مكغم 16000المعاملة بالمستخلص عند التركيز بالمستخلص والخاليا

Crystal¡×100(ساعة violat.(


ساعةعلى 24ولفترة تعرض

الخطأ القياسي

AMN-3

129.53 ± 71.97

7.044.81 ± 72.66

5.816.53 ± 74.74

16.7.02 ± 75.77

4.5510.81 ± 77.50

8.849.43 ± 78.20

AMN-3,HeLa,Hep بتأثير

24تراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس ولفترة تعرض

64

66

68

70

72

74

76

78

80

6000 8000

ط بیلثة ا

سبن


٨٨

ولفترة تعرضمقارنة بين تراكيز مختلفة من المستخلص

.AMN-3,HeLa,Hep-2الثالث

الخطأ القياسيمل + نسبة التثبيط

Hep-2HeLa

2.94 ± 70.24212.94 ± 73.84

4.66 ± 73.35604 ± 74.394

1.85 ± 74.04881 ± 75.225

3.31 ± 75.086.82 ± 75.778

2.66 ± 75.42355 ± 77.508

7.49 ± 75.77884 ± 79.238

HeLa,Hep-2,3يبين المقارنة بين الخطوط السرطانية الثالث

تراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس ولفترة تعرض

8000 10000 12000 14000 16000



مقارنة بين تراكيز مختلفة من المستخلص):4-11(جدول

الخطوط الخلوية

مل/غمالتركيز مك

6000

8000

10000

12000

14000

16000

يبين المقارنة بين الخطوط السرطانية الثالث ):4-10(شكل

تراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي الخام الوراق نبات المعدنوس ولفترة تعرض

. ساعة

Hep-2

Hela

AMN-3


ساعة على 48تراكيز مختلفة من المستخلص ولفترة تعرض


AMN-3

3.6.33 ± 74.04

4.664.51 ± 76.12

2.033.34 ± 77.16

5.617.10 ± 78.20

7.994.26 ± 79.99

3.005.54 ± 80.96

AMN-3,HeLa,Hep بتأثير تراكيز

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

6000 8000

ط بیتث ال

بةس

ن


٨٩

تراكيز مختلفة من المستخلص ولفترة تعرضمقارنة بين

.AMN-3,HeLa,Hep-2الخطوط السرطانية الثالث

الخطأ القياسيمل + نسبة التثبيط

Hep-2HeLa

9.20 ± 71.626.80 ± 79.93

7.05 ± 74.7466 ± 80.968

8.51 ± 75.08603 ± 82.006

6.58 ± 76.12461 ± 82.698

6.20 ± 76.4799 ± 84.429

11.39 ± 77.09300 ± 86.505

HeLa,Hep-2,3المقارنة بين الخطوط السرطانية الثالث

.ساعة 48مختلفة من المستخلص ولفترة تعرض

8000 10000 12000 14000 16000



مقارنة بين):4-12(جدول

الخطوط السرطانية الثالث

مل/غمالتركيز مك

6000

8000

10000

12000

14000

16000

المقارنة بين الخطوط السرطانية الثالث ):4-11(شكل

مختلفة من المستخلص ولفترة تعرض

Hep-2

HeLa

AMN-3


ساعة على 72ولفترة تعرض


HeLAMN-3

6.948.99 ± 75.08

11.4.83 ± 77.50

8.736.51 ± 78.20

6.009.43 ± 80.62

5.887.66 ± 81.16

4.064.53 ± 82.69

AMN-3,HeLa,Hep بتراكيز

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

6000 8000

طبیتث ال

بةس

ن


٩٠

ولفترة تعرض تراكيز مختلفة من المستخلص مقارنة بين

.AMN-3,HeLa,Hep-2الخطوط السرطانية الثالث

الخطأ القياسيمل/غم + نسبة التثبيط

Hep-2La

600010.22 ± 72.59494 ± 82.353

800014.52 ± 75.23.39 ± 83.045

100006.99 ± 75.77973 ± 84.083

120009.80 ± 76.12500 ± 85.121

140005.81 ± 77.12588 ± 87.889

1600013.33 ± 77.13606 ± 88.581

HeLa,Hep-2,3رنة بين الخطوط السرطانية الثالث ا

.ساعة 72مختلفة من المستخلص ولفترة تعرض

8000 10000 12000 14000 16000



مقارنة بين):4-13(جدول

الخطوط السرطانية الثالث

غمالتركيز مك

6000

8000

10000

12000

14000

16000

امق): 4-12(شكل

مختلفة من المستخلص ولفترة تعرض

Hep-2

HeLa

AMN-3


٩١

التثبيط لكل معامل االرتباط الذي يوضح العالقة بين التراكيز المأخوذة ونسب ): 4-14(دولج

وعند فترات التعرض الثالث AMN-3,HeLa,Hep-2من الخطوط السرطانية الثالث

.ساعة 72,48,24

Hep-2نسبة التثبيط

ساعة 72 ساعة 48 ساعة 24 مل/غمالتركيز مك

+0.913+0.919+0.914

Helaنسبة التثبيط


+0.970+0.982+0.977

AMN-3نسبة التثبيط


+0.853+0.971+0.943

عالقة طردية+

عالقة ضعيفة 0.3-0.1

عالقة متوسطة 0.6-0.4

عالقة قوية 0.9-0.7


معامل االرتباط الذي يبين العالقة بين التراكيز المأخوذة ونسب التثبيط لكل من الخطوط

.ساعة 72,48,24

دعمت بما توصل اليه العديد من الباحثين

المستخلصات النباتية من فعالية مضادة للخاليا السرطانية وان هذه الفعالية

وفترة التعرض كما تعتمد على نوع المستخلص

وان النتائج التي تحصلنا .لكل ذلك

يط العالي لنمو المستخلص الكحولي لنبات المعدنوس وقدرته على التثب

AMN والتي امتازت بزيادة

والخطوط نسبة التثبيط بزيادة التركيز وفترة التعرض حتى وان كانت بين التراكيز والفترات

قام به هذه الدراسات ما

0.78

0.8

0.82

0.84

0.86

0.88

0.9

0.92

0.94

0.96

0.98

1

24 ساعة

طبیتث ال

بةس

ن


٩٢

معامل االرتباط الذي يبين العالقة بين التراكيز المأخوذة ونسب التثبيط لكل من الخطوط

AMN-3,HeLa,Hep- 72,48,24ولفترات التعرض الثالث

دعمت بما توصل اليه العديد من الباحثين التي توصلنا اليها في هذه الدراسةان النتائج

المستخلصات النباتية من فعالية مضادة للخاليا السرطانية وان هذه الفعالية

وفترة التعرض كما تعتمد على نوع المستخلص د بشكل اساس على التركيز المستعمل

لكل ذلك ومدى حساسية الخاليا السرطانية لفعالة فيه

المستخلص الكحولي لنبات المعدنوس وقدرته على التثبعليها والتي اثبتت تأثير

MN-3,HeLa,Hep-2الثالث الخاليا السرطانية للخطوط السرطانية

نسبة التثبيط بزيادة التركيز وفترة التعرض حتى وان كانت بين التراكيز والفترات

ومن حثون في دراساتهموهذا ما اشار له العديد من البا

48 ساعة 72 ساعة


معامل االرتباط الذي يبين العالقة بين التراكيز المأخوذة ونسب التثبيط لكل من الخطوط ):4-13(لشك

2-السرطانية الثالث

ان النتائج

المستخلصات النباتية من فعالية مضادة للخاليا السرطانية وان هذه الفعاليةول ما تمتلكه ح

د بشكل اساس على التركيز المستعملتعتم

لفعالة فيهوالمركبات ا

عليها والتي اثبتت تأثير

الخاليا السرطانية للخطوط السرطانية

نسبة التثبيط بزيادة التركيز وفترة التعرض حتى وان كانت بين التراكيز والفترات

وهذا ما اشار له العديد من البا

Hep-2

HeLa

AMN-3


٩٣

Cyperusعلى عشب السعد) 2004الحلي،( rotundusl قابليتة على تثبيط والذي اختبر

ث انواع من المستخلصات استخدم ثال اذ AMN-3,RD,Hep-2 يةطانالسر الخطوط الخلوية

الث فترات ولث تراكيز مختلفةالهكساني والمائي وااليثانولي وبثمان للنبات هي

وبشكل عام كانت النتائج تمتاز بزيادة نسبة التثبيط بزيادة التركيز ساعة 72,48,24تعرض

ستخلصات وفترة التعرض مع وجود اختالفات في نسب التعرض بأختالف التراكيز والم

بأستخدام ثالث قامت الباحثة اذ) 2008سلمان،(ا ما الحظناه في دراسة كذلك هذ المستخدمة

Silybumانواع من المستخلصات النباتيه لنبات الكلغان marianuml وكانت المستخلصات

للمستخلص ودرست ةواستخدمت تراكيز مختلف )المائي الخام، االيثانولي الخام، الزيتي الخام(

ة والحظت الباحث REFوالخط الطبيعي RD,AMN-3,Hep-2الخطوط السرطانيه يرها فيتأث

تزداد بزيادة RD,AMN-3,Hep-2الثالث ةللخطوط الخلوي ةنسبة التثبيط للخاليا السرطاني ان

ن النتائج لم تعطي نسب قتل فأ REFالتركيز وفترة التعرض اما بالنسبة للخط الخلوي الطبيعي

وقد وجدت. احصائيا ر مهمةوغي وعة السيطرة والفروق قليلةمع مجم معنوية

ان هناك نسب تثبيط لنمو الخاليا ها على قشور نبات الرمانتفي دراس) 2008،السعدي(

وان هذه النسب تزداد بزيادة Hep-2,AMN-3السرطانيه للخطين الخلويين السرطانيين

خاليا الخطين عند اعلى تركيز لتثبيط ةالتركيز وفترة التعرض حتى بلغت اعلى نسب

AMN-3للخط %) 59.27( وكانت النسبة mساع72مل ولفترة تعرض /مكغم700وهو

كانت نسب التثبيط عند REFبينما في الخط الخلوي الطبيعي Hep-2للخط %) 56.64(و

لتثبيط ةبالنسب والتي تعد قليلة%) 23(هي ساعة72مل وبفترة تعرض /مكغم700التركيز

امتالك مستخلصات نبات الصفصاف فعالية تثبيط )2006، الموسوي(ت كما الحظ. يا الخال

عن تأثير اوراق ) 2008،السعدي(ودراسة AMN-3والـ Hep-2البثري الحنجرةلسرطان


٩٤

REFوالخط الخلوي الطبيعي AMN-3والـ Hep-2المديد على الخطين الخلويين الـ

لنبات التمر الزهدي لنمو ةفي دراسة تأثير المستخلصات النباتي )2007الجريصي،(ودراسة

على تثبيط مختلف الخطوط قدرة النباتات المختلفةوقد تعزى .AMN-3والـ Hep-2سرطان

حيث ان النباتات .في تلك النباتات الزيتية الموجودة ةوجود المركبات الكيميائيالى السرطانية

ومن هذه الفعاليات هي ةفتمتلك العديد من المركبات ذات الفعاليات المختل ةواالعشاب الطبي

داخل جسم الكائن الحي او خارجه وان لهذه انيةللخاليا السرط الفعالية السمية المثبطة

والحد من نموها ها ان تؤدي الى تثبيط قدرة الخلية السرطانيةالمركبات عدة اليات من شأن

Mori(وانتشارها وقتلها etal.,2002.(

ةالعديد من هذه المركبات الفعال كالتي تمتل ةان نبات المعدنوس احد تلك النباتات الطبيعي

ان لهذه ومن هذه المركبات القلويدات اذ ةفي القتل وتثبيط الخاليا السرطاني ةوالمؤثر

Isostryفي القلويد المركبات اهمية في تثبيط نمو الخاليا السرطانية وهذا ما نالحظة

chnopentamino ةاالفريقي ةالموجود في الشجر Strychnos usambar ensis انه اذ

Hct-116)Frederichلسرطان القولون ةيحدث عملية الموت المبرمج للخطوط الخلوي

etal.,2003.( كما ان لقلويدHomohar ringtonine المعزول من جذور نبات

Cephalotauns herringtona من خالل تثبيط صنع ةله دور في تثبيط الخاليا السرطاني

Alexandrova((DNA)البروتين والـ etal.,2000.(نوس يحتوي على كما ان نبات المعد

التي Flavonoidsلتي تحتوي على مركبات الفالفونات وا Polyphenols الفينوالت المتعددة

في تأثيرها على الخاليا Antioxidant ل بوصفها مركبات ضد عملية االكسدةتعم

Lopez-Lazaro(السرطانيه etal.,2001 (الحلي، وهذا ما اشار اليه)حيث نصت )2004


٩٥

ها دور ومن ضمنها الفالفونويد الموجود في عشب السعد ل ان المركبات الفينولية المتعددةعلى

3( كبير بأعتبارهاعوامل مضادة لالكسدة في فعاليتها التثبيطية للخطوط السرطانية

RD,AMN-Hep-2, (المركبات كما ان لهذه ذلك على التراكيز ونوع المستخلص، عتمدا فيم

Vascularعلى احداث التأثير السمي على سرطان البروستات القدرة Endothelial

Growth factor(VEGF) والذي يكون مسؤول عن تكوين االوعيه الدمويه

مما يعطي هذه المركبات دور اساسي في تثبيط وقتل الخاليا ) Angiogensis(الجديده

ان لمركبات الفالفونات تأثيرا تثبيطيا ) 1994(،واخرون Elangovarالسرطانيه، كما بين

-S(وكذلك الخط الخلوي السرطاني )Hep-2(على نمو خاليا الخط الخلوي السرطاني

L80(Sarcomy-L -Sعند مرحلة )DNA(وذلك عن طريق ايقاف عملية تضاعف الـ 80

phase عملة تثبيط خالل دورة حياة الخليه ومن الجدير بالذكر ان اهمية هذه المركبات في

في الخاليا السرطانيه للخطوط الخلويه السرطانيه المختلفه جاءت من قدرة هذه المركبات

Caceres-Cortes)من خالل تثبيط فعالية الجين التأثير على االليه السرطانية etal .,2001)

Bcl-2 مرحلة الموت السرطانيةحاصل في هذا الجين تدخل الخليه ونتيجة للخلل ال

لسرطان الدم لحال في العديد من الخطوط الخلوية السرطانيةكما هو ا Apoptosisالمبرمج

Humanالبشري Leukemic cell Lines Reed.,2004)(Pellechia and كفاءة فعالية لو

على تثبيطها مثل ت فهناك العديد من الخطوط الخلوية السرطانية التي لها القدرةهذه المركبا

(CASKI)سرطان الرحم البشريو(colo320)وسرطان القولون البشري (Bc1)طان الثدي سر

,Lopez.Lazaro)يوسرطان البروستات البشر etal 2001; Forkmann and

Martens,2001).


٩٦

على كما ان للمركبات الفينولية المتعددة وخاصة تلك المضادة لعملية االكسدة القدرة

Scavengerفي كسح انتشارها وذلك المتالكها القابليةوالحد من السرطانية تثبيط نمو الخاليا

Forkmann( لده عند تحول الخاليا من الطبيعية الى خاليا سرطانيةالمتو الجذور الحرة and

Martens.,2001.(في اوراق نبات المعدنوس والتي تمثل احد التربينات الموجودة وان

من خالل قدرتها على على تثبيط نمو خاليا سرطان المعدة ةمركباته لها دور مؤثر والقدر

وحث الخاليا على الموت المبرمج للخط الخلوي السرطاني )DNA(لخفض تصنيع ا

Leukemia cell HL-601،في تثبيط والحد من انتشار خاليا وان لهذه المركبات اهمية بالغة

Humanالخط الخلوي السرطاني Myelogenous Leukemia ك من خالل ايقاف وذل

G1)Sadeghiعند طور الدوره الخلوية and Yazdanparst.,2003.(

في اوراق النبات لها التأثير الواضح على الخاليا الموجودة Taninsالتأنينات وقد لوحظ ان

وحث )DNA(وذلك من خالل تجزئة شريط الـ )HL-60(السرطانيه للخط الخلوي السرطاني

وتحتوي اوراق نبات المعدنوس ايضا على ).Sakagami.,1995(لمبرمج الخاليا لنمو الموت ا

ه وذلك من خالل ميكانيكيات متعددةالصابونيات التي لها دور فعال في تثبيط الخاليا السرطاني

Acaciaوهذا ما لوحظ في نبات victoria حيث ان لها دور تثبيطي انتقائي في نمو الخطوط

وكذلك تحدث ف دورة الخليه في سرطان الثدي عند االنسانالخلويه السرطانيه بواسطة توق

Hanausek(في الخط الخلوي لسرطان الدم الموت المبرمج للخلية etal.,2001 ( وهذا ما

Panaxلوحظ ايضا في العشبه الصينيه gensing حيث انها استخدمت لعالج السرطان بسبب

Cogo(قدرتها على تثبيط السرطان في الحيوانات المختبريه and Kevinlai.,2003.(


٩٧

متاز بأمتالكة قدرة تثبيطيةالذي ي - C-نبات المعدنوس ايضا على فيتامين يحتوي

اذ انه يكون Anti-oxidation من خالل فعاليتة المضادة لالكسدة لخاليا السرطانيةل عالية

خاليا السرطانية بتكون ال من خالل عملية ازالة الجذور الحرة المتولدة للخاليا السرطانية ساما

)Jacob,1995.( المعدنوس كنبات طبي فعال لقابليتة من هذا كله يتوضح لنا اهمية نبات

لى اهميتة في معالجة امراض مختلفةا ةاضاف ةفي تثبيط نمو الخاليا السرطاني التثبيطية

.اخرى


٩٨

الفصل الخامس االستنتاجات والتوصیات

٩٨

Conclusionاالستنتاجات والتوصيات and Recommendations

Conclusionsاالستنتاجات :1-5

للمستخلص الكحولي لبذور وأوراق نبات المعدنوس هي الجرعة ) كغم/ملغم 500(الجرعة 1-

األفضل في تثبيط معدل دالة االنقسام لخاليا نقي العظم في الفئران المختبرية ، وذات تأثير

.يوما من التجريع الفموي 28,21فعال بعد

فاض معدل ظهور أدى المستخلص الكحولي الخام لبذور وأوراق نبات المعدنوس الى انخ2-

النواة الصغيرة لخاليا نقي العظم في الفئران المختبرية لجميع الجرع ،لكنها لم تؤدي الى

.إحداث تغيرات ذات داللة معنوية

ان المستخلصات الكحولية الخام لبذور وأوراق نبات المعدنوس أدت إلى انخفاض في معدل 3-

لخاليا نقي ) روماتيدي والكروموسوميالك(ممثلة بالكسر ةظهور التغيرات الكروموسومي

.العظم في الفئران المختبرية ولجميع الجرع ،لكنها لم تصل الى مستوى االختالف المعنوي

يمتلك المستخلص الكحولي الخام ألوراق نبات المعدنوس تأثيرا تثبيطيا في نمو خاليا 4-

,AMN-3(الخطوط الخلوية السرطانية HeLa , Hep-2 (72,28,24لثالث المختلفةللفترات ا

.ساعة

أن المستخلص الكحولي الخام ألوراق نبات المعدنوس الخلوية قد أعطى نسب قتل جيدة 5-

ومؤثرة في الخطوط السرطانية وان نسبة القتل تزداد بزيادة التركيز للمستخلص ومدة

.التعرض

الفصل الخامس االستنتاجات والتوصیات

٩٩

Recommendationsالتوصيات والمقترحات:2-5 & Suggestions

إمكانية اعتبار نبات المعدنوس من النباتات الطبية ذات الفعالية بتأثيرها في معدل انقسام 1-

.الخاليا الجسمية

ولية ودراسة تأثيراتها وفعاليتها عزل وتنقية المواد الفعالة الموجودة في المستخلصات الكح 2-

.في تثبيط نمو الخاليا الطبيعية والسرطانية

.إجراء تنقية كمية ونوعية للمركبات الفعالة ودراسة تأثيراتها الوراثية والخلوية 3-

إجراء دراسة مناعية لمعرفة تأثير تلك المستخلصات ومركباتها في الجهاز المناعي للفئران 4-

.سان المختبرية واإلن

إجراء دراسة نسيجية تركيبية ووظيفية لمعرفة تأثير تلك المستخلصات على بعض 5-

.األعضاء الجسمية

االهتمام بالتقصي والبحث عن مكونات النبات الطبية المختلفة وإجراء دراسة مكملة 6-

وشاملة لفحص القابلية المضادة للطفرة والتسرطن للنبات وفي أنواع مختلفة من األوساط

. من المذيبات ) المائية ، الميثانول ، الهكسان وغيرها (

دراسة تأثير المستخلص الكحولي ألوراق نبات المعدنوس في خطوط سرطانية أخرى 7-

دراسة تأثير المستخلص الكحولي ألوراق نبات المعدنوس في نمو او تثبيط األورام داخل 8-

.جسم الفئران المختبرية

الفصل الثاني استعراض المراجع

٤

Literatureأستعراض المراجع review

Medicinalالنباتات الطبية :1-2 Plants

أستعملت النباتات الطبية ومستخلصاتها منذ القدم وكانت اقدم الشعوب يستعملونها في

التداوي لمختلف االمراض التي كانت تلم بهم ومنذ ذلك الوقت بدأت تتجلى اهمية هذه النباتات

وخصائصها العالجية فضال عن أهميتها الغذائية ومن الجدير بالذكر أن فائدة هذه االنباتات

ر على هذا فحسب بل تتعداه الى أهميتها في وقاية الجسم من األمراض كون تلك التقتص

النباتات تمتلك مركبات كيميائية عديدة تختلف بانواعها وتراكيزها وتأثيرها باختالف النبات

المستعمل وتعطي النبات االهمية والقدرة على مقاومة االمراض لذلك فهي تعد مصدرا اساسيا

لدوائية وأنتاج مختلف أنواع العقاقير لمعالجة العديد من االمراض المختلفة في الصناعات ا

)De-Smet,1997.(

عالوة على ما تقدم فان الميزة االساسية للنباتات الطبية تتجلى بقدرتها على كبح فعالية

ولكي يتم الحصول على . ومقاومتها وتطهير الجسم منهاالعديد من انواع البكتريا والفايروسات

افضل نتيجة ممكنة من استعمال النباتات الطبية يجب اخذها بكميات ونسب معينة مسموح بها

).1983،رويحة وامين(و معرفة الفترات المالئمة ألخذها واستعمالها

لى نطاق واسع والمراض وهناك العديد من النباتات الطبية المعروفة والمتداولة ع

ونبات ) 2004اليعقوبي،(والهيل ) 2001العتابي،(مختلفة مثل نبات سم الفراخ

)2007الجريصي،(والتمرالزهدي ) 2006االوسي،(الحبة السوداء ) 2004الحلي،(السعد


٥

والبربين ) 2008،العبيدي(صوم يوالق) 2008السعدي،(والمديد ) 2007،التميمي(والكرفس

كذلك نبات عرق ) 2008عبد الحسين،(وحشيشة الليمون والنعناع والدارسين) 2008الربيعي،(

السوس والحلبة والبصل وغيرها وان نبات المعدنوس من ابرز هذه النباتات وتأكيدا الهمية

الموجود في الخضروات ) الصبغ الجذري(هذه النباتات فقد اثبت ان قلة تناول الكاروتينات

2008).العمري،(م في زيادة خطر االصابة بمرض سرطان الرئةالخضراء والصفراء يساه

Role دور النباتات في تثبيط الطفرة والوقاية من السرطان of the plants in the

inhibition of mutation and preventation of cancer

وكوجبات خضرالفواكه وال مثلتات الطبية ات بعيد واألنسان يتناول العديد من النبقمنذ و

مهما في تقليل الطفرات والوقاية من السرطان ا تؤدي النباتات باختالف أنواعها دور، غذائية

وقد قام الكثير من الباحثين ولفترة طويلة بدراسة تأثير النباتات في العديد من الكائنات الحية

أو تحويل النباتات الى مستخلصات سواء كانت مجهرية أو كائنات راقية بشكل طبيعي

Deflora(بأستعمال مذيبات كيميائية تم أختبارها and Ramel ,1988(.

Gamelaومثال ذلك الشاي األخضر المأخوذ من نبات كاميال Sinensis له القابلية على

م الخبيث البشري ويثبط المطفر المحفز للور DNAمع He3تثبيط الطفرات المعلمة بوساطة

لفأر وتلعب مادته األساسية دورآ هامآ كعامل مضاد لتقدير الورم وكعامل مضاد ا الجلدي في

)(لبدء الورم في الجلد Katiyar et al تمتلك مكونات نبات الشاي دورآ تثبيطيآ .1992,.

)(لعدد من الطفرات والسرطانات ألحتوائه على العديد األحماض االمينية Stich , 1992¡

خافض للحرارة يستعمل الشاي األخضر كشراب شائع في آسيا والصين ويستعمل كدواء


٦

ومدرر للبول ويمتلك خصائص مضادة للطفرة واألكسدة الذاتية الحتوائه العالي على متعدد

Wangالتي تعمل على تثبيط السرطان polyphenolالفينوالت et al ., 1989).(

ة للشاي األخضر واألسود والشاي الخالي من الكافائين كمضادات قورنت المستخلصات المائي

للطفرة وأعطت هذه الستخلصات فعالية عالية ضد الطفرات وكان أكثرها فعالية الشاي

,.Abbas(األخضر ثم الشاي األسود الخالي من الكافائين وبفرق غيرمعنوية 1996(

سرطنات التي حقنت لمواليد الفئران منذ دور تثبيطي في الم Ginsengلنبتة الصينية تمتلك ا

%29تجريع مستخلص هذه النبتة لمواليد الفئران أنخفض معدل أصابتها بسرطان الرئة الى

Yun(مقارنة بالسيطرة الموجبة % 95وأنخفض معدل أصابتها بسرطان الكبد الى et al .,

Cالى أن فيتامين ) 1998(وجماعته Leeتوصل ، و) 1983 , E والبيتاكاروتين في نبتة

Ginseng لهم دور وقائي من السرطانات كمواد مضادة لألكسدة وذلك عند أعطائها للمدخنين

كذلك فأن لنبات البربين تأثير تثبيطي عالي على نمو حجم ) أكثر من عشرين سيكارة في اليوم(

شبة السعد تأثير ،كماان لع)2008الربيعي،(االورام السرطانية المغروسة في الفئران البيض

تثبيطي للعديد من الخطوط السرطانية لما لمستخلصاتها من قابلية كبيرة في حالة األكسدة

وبالتالي زيادة القدرة على التخلص من الجذور واألختزال للخاليا السرطانية سلبيا اوايجابيا

همة في عملية الحرة المتولدة نتيجة التسرطن من خالل زيادة او نقصان بعض االنزيمات الم

كذلك فقد أظهرت دراسة تأثير ) 2004الحلي،(وغيرها Catalaseاألكسدة وضد االكسدة مثل

مستخلص نبات الدفلة في الخاليا الطبيعية وخطوط الخاليا السرطانية النامية في الزجاج ان

هذا النبات ممكن ان يكون عالجا واعدا للسرطان وثبت ذلك من سالمة استخدامه في عالج

).2006الشيباني،(سرطان الغدة اللبنية للفأروالنتائج الجيدة التي تحققت في هذا المجال


٧

Petroselinumنبات المعدنوس :2-2 crispum:

نبات المعدنوس كما يدعى في اغلب البلدان العربية يسمى ايضا بالمقدونس نسبة الى

ي الموطن االصلي للنبات كذلك يسمى احيانا بالبقدونس في بعض البلدان العربية مقدونيا وه

وفي بلدان اخرى بالكرفس الرومي وكذلك يدعى بالطراسلون باللغة اليونانية ويدعى ماتت

باللغة االنكليزية واول من اطلق عليه اسمه العلمي Parsleyباللغة الفرعونية ويطلق عليه

Petroselinumبيب المشهور ديقوريدسهو الط.(WWW.abib.Com 2008)

Classificationتصنيف النبات :1-2-2 of plant:

:يصنف نبات المعدنوس كاالتي

Kingdom Plantae

Subkingdom Tracheobionta

Superdivision Spermatophyta

Division Magnoliopsida

Class Dicots

Order Umbellales

Family Umbelliferae

Genus Petroselinum

Species crispum (Mill.)Airy-shaw

)AL-Rawi et al.,1964(


٨

Structure: تركيب المعدنوس :2-2-2 of Petroselinum crispum

وس عطرية قليال مع طعم حلو خفيف وهي تحتوي على النشأوهالم ندمعان جذور ال

وسكر وزيوت طيارة ورماد ومواد اخرى ،ورق المعدنوس يحتوي على زيوت طيارة اكثر

كالسيوم ،حديد ،من الجذور والزيوت الطيارة الموجودة في الجذور تحتوي على امالح معدنية

).1983رويحة وأمين،( A,Cفسفور فيتامين،

Generalالوصف العام للنبات :3-2-2 Description of Plant :

سم ٦٠- ٣٠يعد نبات المعدنوس من النباتات العشبية ثنائية الحول،ويتراوح ارتفاعه ما بين

جذر واحد وتكون قائمة ومدورة ومتفرعة وتكون االوراق له سيقان عديدة تنمو جميعها من

واالزهار مركبة وتتميز الثمار بلونها االبيض كذلك تكون الثمار مركبة خيمية و يتميز نبات

المعدنوس برائحته العطرية النفاذة واوراقه الخضراء الزاهية وهو من العائلة الخيمية ومن

:أصنافه

البلدي االملس-أ

المجعداالفرنجي -ب

كما يمكن الحصول على زيت المعدنوس من البذور ويمكن استعمال جميع اجزائه بما

صنفا كانت تزرع منذ قديم ٧٣فيها الجذور،وهناك عدة انواع زراعية من المعدنوس تبلغ

).1983رويحة وأمين،(الزمان


٩

)أ(

)ب(

Petroselinumنبات المعدنوس ):2-1(الشكل crispum

.االوراق والجزء الخضري لنبات المعدنوس):أ(

.بذور نبات المعدنوس):ب(


١٠

Regional: مناطق التوزيع :4-2-2 Distribution

يزرع المعدنوس في اغلب مناطق العالم وان الموطن االصلي للنبات هومقدونيا كما

لبنان وغيرها،اما - مناطق عدة من حوض البحر المتوسط مثل تركياويوجد في اسلفنا

المعدنوس البري فتنسب نشأته الى سردينيا ثم دخل الى انكلترا واوربا واول زراعة له كانت

م،وفي وقتنا الحاضر نالحظ نجاح زراعته في كل مناطق الوطن العربي بما فيها 1584عام

عليه سهلة ومتاحة لدى كل من يريد ذلك لحصولالعراق وان طريقة زراعته وامكانية ا

.(WWW.abib.Com 2008)

Cultural:الخلفية الحضارية لنبات المعدنوس:5-2-2 background of P. crispum

ان نبات المعدنوس واحد من ابرز النباتات الطبية ذات القيمة الغذائية

م العصور،اذ استعمله االقدمون في عالج التهابات المعدة والعالجية وقد استعمل منذ اقد

وكمذيب ومضاد للمغص والربو وضيق التنفس واورام الثدي كما ان قدماء المصريين

وس، اذ عثر عالم المصريات جرابو على بذور واوراق معدنقد أهتموا كثيرا بال) الفراعنة(

وس في الكثير من وصفاتهم ندمعلوا الالنبات في بعض المقابر الفرعونية وذكر بانهم استعم

العالجية لكثير من االمراض كما اعتقد بانهم استعملوها في التحنيط فضال عن المواد

المستعملة االخرى، اما االغريق فقدأهتموا به كثيرا ووضعوه في مكانه عالية وكانت تصنع

).2008WWW.6abib.com(منه االكاليل وتوضع على روؤس الفرسان المنتصرين


١١

Medical:اهمية نبات المعدنوس الطبية:6-2-2 importance of P. crispum

تنامت في الوقت الحاضرالمعرفة العلمية الهمية المعدنوس العالجية والطبية فضال

التجارب بان المعدنوس يعد من مضادات الكسدة الخاليا عن أهميته الغذائية،أكدت احدث

ويرجع السبب الحتوائه على التي تحميها من االصابة بالسرطان وتنمي جهاز المناعة لديها

التي تعمل على Apigninوعلى مستويات عالية من الفالفونات وخاصة مادة ،Cفيتامين

يساعد في عالج هذا المرض والحد من انتشاره الحد من انقسام الخاليا السرطانية لذلك فهو

)Nielsen et al.,1999.( وقد اثبتت التجارب التي قام بها مجموعة من الباحثين ان الزيت

المستخلص من نبات المعدنوس يعد بديال طبيعيا كعامل مضاد لألكسدة وكابح للجذور الحرة

)Zhang et al.,2006.( كما اثبتVoraوجماعته)ستخلص االيثانولي لنبات ان الم)2008

.المعدنوس تأثير كبير في استحثاث العوامل المضادة لألكسدة في منطقة دماغ الفأر

دراسات عديدة حاولت الكشف عن سر المعدنوس حتى وجد ان المعدنوس يحتوي على

ويشكل هذا Apioleوهومهم جدا ومن اهم مركباته االيبول Myristicinزيت طيار يدعى

وامالح الحديد والكالسيوم واليود Cوفيتامين) B)B,B2,B3,B4وAومعه فيتامينات الزيت

Razzaghi-Abyaneh(الجوهر الفعال للنبات et al.,2007 .( ومن الجدير بالذكر ان نبات

تعادل اربع مرات نسبته في الليمون أذ وجد Cالمعدنوس يحتوي على نسبة عالية من فيتامين

مليغراما من الفيتامين وتحتوي الثمار 165المعدنوس يحتوي على غرام من 100ان كل

وقد ).1983رويحة وأمين،(على النسبة الكبيرة من الفيتامين والجذور على النسبة االقل

أظهرت مستخلصات نبات المعدنوس فعالية عالية كمضادات حيوية للبكتريا السالبة والموجبة


١٢

Ojala(لصبغة كرام وبعض الفطريات et al.,2000.( ونظرا لما يحتوية المعدنوس من

Davis(فيتامينات ، معادن وصبغات و زيوت طيارة و ومركبات فعالة بايولوجيا

etal.,1997( أستعمل لعالج الكثير من اإلمراض لذا يعد من اإلعشاب كثيرة االستعمال ،

Alternativeوالتداول في الطب البديل والمكمل medicineفة مثل عالج امراض مختل

Robbers(عسر الهظم et al.,1994 ( وازالة انتفاخ المعدة ألحتوائه على مادة

تساعد على عملية الهضم كما انه يعالج إمراض الكلى التيChlorophyllالكلوروفيل

والمجاري البولية كما انه يعمل على تفتيت حصى الكلية ويزيل احتباس الماء في

Atta(الجسم et al.,1998 (كما يستعمل في عالج إمراض المفاصل ،)Hoppe,1975(

وان اوراقه المهروسة لعمل لبخة لعالج التواء القدم والمفاصل و يعالج امراض الصدر

والسعال والربو وانواع الرشح وقد استعماله األقدمون لضيق النفس والربو وهو يعالج إمراض

ويستعمل كمطهر ضد البكتريا والفايروسات Apioleاخرى مثل المالريا الحتوائه على مادة

وتتجلى أهميته بأنه احد مكونات سلطة عالجية مكونة من المعدنوس ونباتات اخرى منها

الثوم والبنجر والفجل والكرفس والجزر والخس والبصل لمعالجة السرطان ، والتتوقف أهمية

اخرى مثل فقر الدم وذلك لوفرة الحديد المعدنوس عند هذا الحد بل تتعداه بانه يعالج امراض

Whitehouse(الحاوي على حامض الفوليك في النبات et al,1999 ( كما انه يستخدم في

ايقاف ادرار الحليب في الثدي والحداث االجهاض عند الحوامل السباب طبية وهو يعد منشط

العديد من االنفس للذاكرة ويستخدم لمعالجة مرض الطاعون الذي يعتبر مرض وبائي فتك ب

¡)1983رويحة وامين،(وهو يعمل على إزالة التنمل من الجسم ويستخدم كمهدىء لالعصاب

ويستعمل زيت المعدنوس بتدليكه على الصلعة لتنشيط نمو الشعر ومنع تساقطه وهو يزيد من

حيوية ونشاط الجسم بشكل عام كما انه ملين ومسهل طبيعي يساعد في انقاص الوزن النه


١٣

ل في اذابة الدهون ويفيد في افراز الصفراء في الكبد وهو مدرر للبول وان تقطير عصير فعا

المعدنوس في العين يستخدم في عالج الرمد كما ان غسل الوجه صباحا ومساءا بمغلي

ومن الجدير بالذكر فان . المعدنوس في الماء يؤدي الى نضارة الوجه والبشرة وازالة التجاعيد

اء فعال الزالة المغص بمختلف انواعه كما ان زيت بذور المعدنوس يستعمل المعدنوس هو دو

ضد الضعف الجنسي وفي تقليل اضطرابات واالم الحيض وازالة الحمى ويستعمل مع الماء

كغسول مهبلي لعالج السيالن وان عصيره يهدىء االم الكليتين والمثانة والمجاري البولية

)Bedir and khan.,2000 ( تدليك الجلد باوراق المعدنوس يمنع لسعات البعوض وان

وبسبب رائحته الزكية يستخدم في ازالة رائحة ) 1983رويحة وأمين،(ويستخدم كعالج للنمش

.الفم الكريهة

Cytogentic: الخلوية-التحليالت الوراثية:3-2 analysis

والخلوية للكثيرمن أعتمدت اللبائن أوخالياها للكشف عن التأثيرات السمية الوراثية

inلوجية داخل جسم الكائن الحيوية والبايالمواد الكيميائية والفيزيائ vivo او خارج الجسم

inالحي في الزجاج vitro لتحديد مقدار ونوع الضرر الحاصل في المادة الوراثية للخلية

رفة قابليتها على استحثاث الطفرات الوراثية التي قد تؤدي الى ظهور السرطانات وان ولمع

او من خالل عوامل تؤثر Spontaneousالتغيرات الكروموسومية يمكن ان تحصل تلقائيا

اما في الطبيعة التركيبية للكروموسومات او في ميكانيكية حركتها خالل االنقسام الخلوي

او ) النقص، االضافة ، االنتقال، االنقالب(على نوعين اما نوعية مثل فتظهر تلك التغيرات

وهناك العديد من الفرضيات التي توضح ) اختزال العدد الكروموسومي او تضاعفه(عددية مثل

Ionizingالمؤينة - حدوث مثل هذه التغيرات فاالشعة radiation للنظائر المشعة


١٤

Radioisotopes للشر للعمود الفقري تؤدي الى التحطيم المبا)DNA ( وتجعله ضعيفا سهل

Crook(الكسر et al.,1986(.

أستخدم هذا األختبار للكشف عن التأثيرات الوراثية للعديد من المواد الكيميوية

1986المستخدمة في بعض الصناعات فعلى سبيل المثال ال الحصر الحظ الحكاك وجماعته،

وجود زيادة معنوية عالية في معدل التغيرات الكروموسومية لعمال صناعة البطاريات في

كذلك اعتمد الكشف عن القابلية . بغداد لتعرضهم المباشر الوكسيد الرصاص أثناء العمل

التطفيرية لبعض العقاقير فقد كشف ميكانيكية عمل المضاد الحيوي البكتيري

Neomycin,Chloramphenicol تعمل هذه على تثبيط بناء البروتين أذProtein

synthesis في حين أقترح ،Castoldi ان تثبيط بناء البروتين يؤدي الى ) 1969(وجماعته

ضعف في العمود الفقري الكروموسومي الذي يؤدي الى التغيرات الكروموسومية

فرات الحيوية التي ية والمطلى العوامل الفيزيائية و الكيميائفيشير ا) (Manna,1971،اما

. ية في النسيجالفيزيائية والكيميائ) البيئية(ب تغير الظروف تعمل على كسر في الكروماتيد بسب

في حين اشارت الدراسات الوراثية الى قابلية العديد من المواد المضادة للسرطان الى قابليتها

نقسامات الخلوية ،بين وبالتالي تعيق استمرارية األ) DNA(لعلى تحطيم المادة الوراثية ا

Miura ان عقار المايتومايسين سي ) (1983واخرونMitomycin-C- يؤدي الى )(

الى ) 1989(وجماعته Pillanتكوين تغيرات كروموسومية في الخاليا اللمفية، في حين اشار

في أحداث التغيرات الكروموسومية ) Cyclophosphamide(السايكلوفوسفوآمايدراقابلية عق

في النسيج الرأسي ألجنة الفئران) DNA(لسور اشرطة الك

Mitotic: آختبار معامل االنقسام- 1-3-2 index assay


١٥

أعتمد هذا األختبارالذي يمثل نسبة عدد الخاليا المنقسمة في المراحل األنقسامية المختلفة

الى العدد الكلي للخاليا في دراسات عديدة فعلى سبيل المثال ال الحصر طبق هذا االختبار

وجية ،حيث ية والبايولالخلوي للعديد من المواد الكيميائية والفيزيائلبيان التأثير السمي الوراثي

(Mitomycin-C)الى تأثير عقار المايتوماسين سي ) 1980(،وجماعته Littefieldأشار

وجماعته Atayaفي تثبيط معامل األنقسام للخاليا اللمفاوية في االنسان في حين اشار

في تثبيط معامل األنقسام لخاليا نقي العظم CFAالى تأثير عقار السايكلوفوسفوآمايد) 1989(¡

وأستخدم هذا األختبار للكشف عن التأثير السمي والتطفيري لبعض النباتات الطبية .للجرذ

Bauhinia.مثل canolican,Maytenu ilicifoliaالمائية أذ لوحظ من خالل المستخلصات

MI)Marjoriلها تأثيرات ضعيفة في معامل األنقسام et al., كما درست التأثيرات ).2002

ان المستخلص ) 2007(الوراثية والخلوية لبعض النباتات الطبية المحلية ، فقد وجدت النعيمي،

Capparisاأليثانولي لنبات الكبر spinosa والمستخلص الميثانولي لنبات الحميضRumex

acetossellaرية، اما السعدي يؤدي الى زيادة معامل األنقسام الخلوي للفئران المختب

Alliumفقد الحظت أنخفاض دليل األنقسام لجذور البصل ) 2008(¡ cepa المعاملة

Convolvulusبالمستخلص القلويدي الخام لنبات المديد arvensis ، كما الحظت الباحثة

تثبيط لمعامل األنقسام الخلوي في نقي العظم للفئران المختبرية، في حين الحظت

أرتفاع في قيمة معامل االنقسام الخلوي لخاليا نقي العظم في الفئران )2008(،العبيدي

Achilleaوم يصالمختبرية المعاملة بالمستخلص الكحولي لنبات الق millefolium.

Micronuclei: آختبار تشكيل النوى الصغيرة- 2-3-2 test (assay)

او Deletionيحصل تشكيل النوى الصغيرة في السايتوبالزم نتيجة لحاالت الحذف

للقطع المركزية من الكروموسومات أذ تفشل في أنسحابها الى آحد قطبي Exclusionالفقدان


١٦

وتبقى Anaphaseلعدم آرتباطها بخيوط المغزل آثناء الطور األنفصالي الخلية المنقسمة نتيجة

أن تشكيل النوى الصغيرة يعد من األختبارات المهمة لتقييم السمية الوراثية ،في السايتوبالزم

)DNA(ية والبايولوجية والتي تشير الى مقدار الضرر في لكيميائية والفيزيائللعديد من المواد ا

Tice(سبة ظهورها يتناسب طرديا مع زيادة الجرعة لالشعة السينية اذ وجد زيادة ن، et

al.,1990( في حين الحظت العبيدي،)ان المستخلص الكحولي لنبات القصيوم ) 2008

Achillea millefolium الى أنخفاض التكرار التلقائي والمستحث لعقار أدى

الخاليا اللمفاوية،كما وجد السايكلوفوسفوآمايد لتكوين النوى الصغيرة في مزارع

500(ان التجريع داخل بريتون الفئران السليمة بواقع جرعة واحدة كل يومين ) 2007(صالح،

يوما لم يكن له تأثيرا سميا على 28للعكبراو لمدة ) كغم/ملغم 800(للغذاء الملكي و) كغم/ملغم

خلص الكأس من نبات ان مست) 2006(معامل انقسام النوى الصغيرة كما الحظت االوسي،

الحبة السوداء رفع قيمة االنقسام الخيطي واصالح التشوهات الكروموسومية وخفضه نسبة

ان المستخلص )2007(تكوين النوى الصغيرة في خاليا نقي العظم للفئران،كما وجد كريم،

المائي للزعتر البري لم يكن ذو تأثير سلبي على تكوين التغيرات الكروموسومية وتشكيل

.لنوى الصغيرةا

Chromosomalآختبار التغيرات الكروموسومية- 3-3-2 aberration assay :

ل عوامل اومن خال Spontaneousيمكن ان تحدث التغيرات الكروموسومية تلقائيا

في طبيعة الكروموسوم،أعتمادا على قابليتها في التداخل) ية وبايولوجيةفيزيائية وكيميائ(مؤثرة

يمكن ان تحصل التغيرات .وحصول ضرر في تركيبه DNAلاوالتفاعل مع جزيئة ا

او كليهما ) كسر كروماتيدي(الكروموسومية اما نتيجة لحدوث كسر في احد الكروماتيدين

DNAل،ويعتمد نوع التغير على موقع الكسر او أعادة ترتيب أشرطة ا)كسر كروموسومي(


١٧

آلية حدوث هذه التغيرات الكروموسومية غير معروفة أن.بصورة تختلف عن حالتها الطبيعية

:لحد األن،اال أن هناك بعض االراء والفرضيات التي توضح حدوثها وهي

Lonizingتعمل األشعة المؤينة - أ radation والمواد المشعةRadioisotopes

وبعض األدوية على أستحثاث التغيرات الكروموسومية عن طريق التحطيم المباشر للعمود

.بتأثيرها في عمليات بناء البروتينات الكروموسومية) DNA(للالفقري

تؤدي الى أستحثاث التغيرات ل) DNA(لادخول بعض المواد بين أشرطة - ب

Baseالكروموسومية مثل المواد الشبيهة بالقواعد analoges.

Metaphaseيتم الكشف عن التغيرات الكروموسومية عادة في الطور األستوائي

آجريت العديد من الدراسات لبيان تأثير أنواع مختلفة من المستخلصات النباتية للكشف عن

وذلك لتقييم التأثير السمي الوراثي في .قابليتها في أستحثاث التغيرات الكروموسومية

ففي دراسة . للبائن سواء كان ذلك في الخاليا الجسمية او الخاليا الجنسية كروموسومات ا

Nigellaأجريت على مستخلصات اوراق الحبة السوداء sativa على أصالح لوحظ قابليتها

).2006،االوسي(التشوهات الكروموسومية في الفئران المختبرية

ويبين المستخلص األيثانولي لنبات الكبر والمستخلص الميثانولي لنبات الحميض

كما ان المستخلص الكحولي لنبات ، )2007النعيمي،(نقصان في التغيرات الكروموسومية

Achilleaالقصيوم millefolium كان فعاال في خفض التكرار التلقائي والمستحث لعقار

وأدى الى خفض معدل ،النوى الصغيرة في مزارع الخاليا اللمفية سايكلوفوسفامايد لتكون

).2008،العبيدي.(التشوهات في روؤس النطف

Cancer: السرطان:4-2


١٨

م ، ووصف ابو . ق 2000مرض قديم وصفت إعراضه في مخطوطات المصريين

قراط عدة أنواع كسرطان الثدي والرحم والمعدة والجلد وسماه بهذا االسم ولم يعرف كمرض

مستقل اال مع ظهور الحضارة الحديثة ولم يعرف عالج له سوى التدخل الجراحي ومع

التطور التكنولوجي في القرن العشرين ظهرت المعالجة االشعاعية والكيميائية والمناعية

Pazdur.(لجنينيةوا etal,.2001(

غير متناسق لخاليا نسيج ما ، تختلف بشكل واضح عن مثيالتها في ينمو عشوائ

Walter(الخاليا الطبيعية ولذا تختلف وظيفتها ايضا حتى بعد زوال المؤثر etal,.1996(

رة وينتقل وتبدا بالضغط على األنسجة المجاو )Tumer(وتعطي كتلة متضخمة تدعى بالورم

Kufe(الى األعضاء الحيوية االخرى etal ,.2003(.

)Cooper,1997(تكون األورام السرطانية على شكل ثالثة مجاميع

%.90تشكل Carcinomaسرطان النسيج الطالئي 1-

Solidوتشمل االورام الصلبة Sarcomasسرطان االنسجة 2- tumar التي تصيب

.العضالت والعظام والغضاريف والنسيج الليفي

Leukemiasسرطان ابيضاض الدم والعقد اللمفاوية 3- & Tymhomas 8تشكل%

.وتتكون في الخاليا المكونة للدم وخاليا الجهاز المناعي

- :تصنف األورام إلى

Benginاألورام الحميدة 1- tumar لخاليا النسيج الناشئة منه تكون مشابهة بالشكل والوظيفة

، وتتميز بوضعها وال تتنتقل الى مناطق اخرى وذات نمو بطىء وعند استئصالها التعود للنمو


١٩

عادة تغلف بنسيج رابط على شكل محفظة ليفية كما هي الحال في اورام الرحم .مرة ثانية

فتؤثر في عملها الليفية والمستقيم والشامات ، قد تضغط هذه االورام على العضو المصاب

Stevens(بشكل طبيعي and lowe,2000.(

Malignatالخبيثةاالورام 2- tumar كتلة نسيجية مختلفة من ناحية التركيب والوظيفة عن

النسيج الذي نشأت منه ، الخاليا متعددة اإلشكال وتباين احجامها و تمتاز بزيادة معدل االنقسام

Stevens(فيها ووجود تشوهات كرموسومية and Lowe,2000.(

Carcinogenesis : نشوء السرطان1-4-2:

يبدأ التسرطن من خالل نشوء ورم بسيط ،ثم يتحول الى ورم خبيث عن طريق سلسلة

تبدأ هذه العملية بالتعرض ،من العمليات التي تؤدي الى تحول الخلية الطبيعية الى خلية ورمية

تمر العملية بثالث DNAوتنتج عنه طفرة في ) مطفر مسرطن(الى مؤثر داخلي او خارجي

-:مراحل

Initiationمرحلة البدء 1- stage غير قابلة لإلعادة وتبدا بالخلية اثناء تعرضها لعامل

فتتحول الى DNAمسرطن بوقت كاف لحدوث تغير في المادة الوراثية وكسر احد خيطي

Russel,1998;Pitot(خلية طافرة etal ,2000.(

promotionمرحلة التحفيز 2- stage قابلة لالعادةReversible وتتحول الى خاليا

نتيجة عوامل خارجية تدعى المحفزات transformationسرطانية بعملية التحول

Promoters المادة الوراثية وتجعل الخلية وهي عوامل غير مسرطنة اذ تؤثر مباشرة في

.)Russell,1998(عرضة لطفرات وراثية فتفقد وظيفتها وتنشط في النمو والتكاثر


٢٠

progressionمرحلة التقدم 3- stage وهي اخر مرحلة يكبر فيها حجم الورم ويصبح اكثر

Primaryخطورة فيدعى بالورم االولي tumor)Mac Sween &Whalcy,1997(

الورم الى تغذية سريعة ومستمرة فيبدا بتكوين اوعية وقنوات دموية خاصة به باطالق لحاجة

على حساب Angiogenesisمواد كيمياوية تؤثر في االوعية المجاورة بعملية التشكل الوعائي

Folkman(الخاليا المجاورة ,2003.(

السرطانية جزئيات على يختلف نقص انتشار األورام تبعا لألنواع فتمتلك بعض الخاليا

Noruzinia)سطحها ترتبط بمستقبالت خاصة على األوعية الدموية او اللمفاوية لتخترقها

etal., ,2005.(

Epidemiology : وبائية السرطان2-4-2: of cancer

لإلصابة بالسرطانات تشير العديد من الدراسات الى ان الدول المتقدمة اكثر عرضة

IARC(Internatinal(المختلفة ، إشارت إحصائية للوكالة الدولية لبحوث السرطان

Agency For Research On Cancer في العالم هي 2002الى ان معدل االصابة سنة

Parkin(مليون إصابة 10.9 et al.,2005.(

Cusing:مسببات السرطان 3-4-2 of cancer

Chemicalية ئالمسببات الكيميا carcinogens

األنسان أو يتعرض لها بين الحين عملهاية التي يستويوجد الكثير من العوامل الكيميا

درة على أحداث تغيرات خلوية على المستوى الجيني وقد أنها قا اذواألخر قد تسبب السرطان

Somaticتكون هذه التغيرات دائمية مسببة الطفرة الدائمية وتسمى بالطفرة الجسمية


٢١

mutation)Feoron & Vogelstein , وقد تكون هذه التغيرات مؤقتة وتنتهي وأن ، )1990

Yuspa(نمو الخلية أو قد يسبب موتها فيكال القسمين يؤثر et al يعد دخان التبغ .)1994,.

المسرطنة ةترتبط الماد اذلمرض السرطان هالمسبب العواملتدخين السجائر من ناتج مال

مما يسبب العديد من أنواع السرطان كسرطان المريء )DNA(لاالموجودة فيه بشريط

والبلعوم والحنجرة والتجويف الفمي واألنفي والبنكرياس والكبد والجهاز البولي وسرطان الرحم

)Phillips,2002;Schoket,2004( كما ويعد الكحول وكثرة تعاطيه من العوامل المهمة

والحنجرة والمريء والكبد والبارزة المسببة للسرطان فقد يسبب سرطان الفم

)Aronson,2003. (ية ووأن الكحول األثيلي مسرطن كيميائي له الصيغة الكيميا(C2H5OH)

أيض ت المسؤولة عن Detexfingفعالية إنزيمات أزالة السم في ة التأثيرات كتتم ميكاني

الذي يؤيض ) P450( مثل سايتوكروم) Isoenzymes(الكيميائيات المسرطنة وهي

Yang( يائيات منتجآ مواد اقل أو أكثر سمية من المركبات األوليةالكيم et al ويحفز ) 1994,.

Yang( اكسدة األيثانول واألستيت وهي نواتج مسرطنة et al.,1992 ( ويعد البنزين ومشتقاته

د الكيميائية التي لها تأثير في األصابة بمرض السرطان حيث أنها تسبب أبيضاض امن المو

Lymphoma)Nicholsonsالخاليا اللمفية الدم وسرطان & Landrigan,1989. (أن كما

اد ومن الم Nitrates,Nitrites,Nitrosaminesأمينات النتروز والنترات والنتريت

أن األمينات األولية والثانوية وحوامضها تمتاز بسميتها الوراثية وفعاليتها اذالمسرطنة

المسرطنة لقدرتها على التفاعل مع الجزيئة الخلوية لتشكل عوامل األلكلة المسرطنة

Alkalating agents. وان الزرنيخArsenic للسرطان رغم أنه ةيعد من المركبات المسبب

الدم الحاد أال أن التعرض أليه يسبب تغيرات في عالج سرطان أبيضاض عمليست

Endيرجح ثأثيره في التمامات نهاية الكروموسومية اذكروموسومية to end fusions وذلك


٢٢

وهذا ما يسبب أضرارا في نهاية Telomeraseبسبب تأثيره التثبيطي في أنزيم التيلومريز

أو موت الخلية السرطانية Carsinogenesisالكروموسومات والحث على أحداث التسرطن

Chou(قد يسبب السرطان أو يعالجه أذوهنا تتوضح الفعالية المتناقضة للزرنيخ et al.,

تعزز نمو األورام السرطانية بعد التعرض Drugsكما أن العديد من انواع األدوية) .2001

Fluoxetineةللسرطانات ومن هذه األدوي , Desipramine , Amitriptyline

)Brandes et al.,1992( . وأن األدوية التي تستعمل لعالج الشد العصبي مثلReserpine

Weiner( سبب سرطان الثدي في األنساني et al.,1999(. وأن العديد من العقاقير التي تحث

.Prednisoneتؤدي الى التسرطن ومن هذه العقاقير E,Cعوز فيتامين


٢٣

Physicalية المسببات الفيزيائ carcinogens :

Mineral األلياف المعدنية-أ fibers

ية المسببة للسرطان ومنها ألياف األسبستوس ول الفيزياماأللياف المعدنية من العوا تعد

Asbestos fibers األولية األساسية في الغذاء هفي الماد دحيث أن السبست يوج

وأألياف األسبست ، كالخضراوات واللحوم والزيوت كما توجد في األسمنت المستخدم للبناء

أنواعه تعمل من خالل تأثيرها بأليات معينة على تطور أمراض السرطان بمختلف

)Weitzman and Grance,1995;Hansen and Mosman,1997. ( وأن هذه األلياف

تحفز التشوهات الكروموسومية والطفرات الجينية وتبادل الكروماتيدات الشقيقة والتحول

Transformationالسرطاني neoplastic وحذف في الكروموسومات)Ault et

al.,1995;Hester berg and Barrett,1995. ( كذلك فأن ألياف السيليكاSilica fibers

على مواد مسرطنة تدخل أجسام العاملين في المصانع بواسطة األستنشاق مسبب لهم تحتوي

Hoet(سرطان الرئة et al.,2004.(

Radiationاألشعاع-ب :

مباشرة المة حياتية أما تأثيراته غير ظه مع أنيؤثر األشعاع المؤين مباشرة من خالل تفاعل

فتحفز عمليات DNAلافي جزيئة افتتم بأطالق جذور أيونية حرة مع المحاليل وتنتج أضرار

أما األشعاع غير المؤين فيتمثل قي المجاالت .)Upton,1991(األكسدة فتؤدي الى السرطان

Danilin( في المتالزمات العصبية النفسية عمالهالمغناطيسية األلكترونية ومنها أست et


٢٤

al.,1999( ويحدث األشعاع غير المؤين عملية نزع الحبيبات لكريات الدم البيض متعددة

).Paptheofanis,1990(األشكال وبهذا يسبب أبيضاض الدم

Biological: المسرطنات الحياتية carcinogens

أن سرطان الثدي وبطانة اذهناك العديد من المسرطنات الحياتية التي تسبب السرطان

Steroidالرحم والبروستات ناتجة عن الهرمونات السترويدية hormones ولنم المحفزة

Soto(الخاليا والتكاثر في األعضاء الجنسية والجسمية and Sonnonschen,2005( تؤدي

السرطان كما هو الحال في بكتريا رةأنواع البكتريا الى زيادة خطواألصابة ببعض

Helicobacter pylori المسببة أللتهاب المعدة)Versalovic,2003( الذي يمثل مرحلة

ذلك فأن هناك بكتريا مرضية فضال عن) Correa,1992(وسطية في نشوء سرطان المعدة

Helicobacterمسرطنة كما في hepticus وتطوره التي تحفز التهاب المعدة واألمعاء

)Tomczak et al.,2001(. كما أن هناك بعض الفطريات التي قد تسبب األصابة بالسرطان

تفرز سموما فطرية اذوأبرز هذه الفطريات هي التي تعيش على األغذية المخزونة

Mycotoxin وهي نواتج أيض ثانويSecondary metabolism ي مثال السم الفطر

Aflatoxin B1 (AFB) المفرز من الفطرياتflavunsAspergillus وغيرها)Abarca

et al Hepatocellularوهو مسبب خطر لسرطان الكبد ) 2000,. carcinoma

)Madden et al مما يؤدي الى Helixحيث أنه يعمل على تشويه الحلزون ) 2002,.

حصول طفرات وتتمثل بغرس أو شطب قطعة كاملة من القواعد النتروجينية خالل عملية

وهناك العديد من الفايروسات التي تسبب األصابة بالسرطانات ويطلق عليها .)DNA(لتصنيع ا

Tumorبالفايروسات الورمية virusis)Russell تعمل هذه الفايروسات أما أذ، )1998,


٢٥

يط غير طبيعي للجينات الورمية األولية ومن ثم تسبب السرطان أو استنساخ الجينات على تنش

Steven(الورمية الفايروسية ومن ثم تسبب السرطان أيضآ and lowe وهناك العديد ) 2000,

IIنوع Tمن أنواع هذه الفايروسات كما قي فايروس خاليا نوع ,I وهي

Human T-cell Lymphotropic Virusis type I and II (HTLY-I and HTLY-II)

هو العامل السبب لسرطان أبيضاض الخاليا اللمفاوية الثانية HTLV-Iأن فايروس اذ

cell lymphomaT-)Hollsberg,1999( بينما يعتقد أن النوعHILV-II له عالقة

Hairyبأبيضاض الخاليا التائية الشعري T-cell Leukemia)Cooper,1997. ( والنوع

Hepatitisالثاني من هذه الفايروسات هي فايروسات ألتهاب الكبد B and Hepatitis C

virusis يسببان سرطان الكبد ينالفايروس ينوأن كال هذHepatocellular carcinoma

)Tang Humanث من الفايروسات هو فايروس الورم الحلميلوالنوع الثا) 2001,

papilloma viruse (HPV) ولهذا الفايروس عالقة باألصابة بسرطان عنق الرحم

Cervical cancer وسرطان الخاليا الحرشفيةSquamous cell carcinoma

Pornthanakasem et al.,2001 (بار –تاين سأما النوع الرابع فهو فايروس إبEpstein-

Barr virus (EBV) بأنه مصاحب ألكثر طة طفيلي المالريا وقد لوحظاينتقل الفايروس بوس

Burkittisاللمفاوي يتمن حاالت سرطان بيرك% 90من lymphoma وكذلك لوحظ بأن له

B-cellعالقة بسرطان المعدة وأبيضاض الخاليا اللمفاوية البائية lymphocyts)Kang et

al.,2005 ( كما أن القليل من الطفيلياتParasites ها عالقة بمرض السرطان ومن اهم ل

Schistosmaذه الطفيلياته haematobium له عالقة بسرطان المثانة اذ انBladder

cancer)Khurana et al Opisthorchisوكذلك طفيلي ) 2005,. Viverrini الذي له

Cholangionبسرطان عصارة القناة الصفراوية ويةقعالقة carcinoma)Khurana et al


٢٦

Clonorchisليات لألصابة بالسرطان بوجود ديدان الكبد وتزداد خطورهذه الطفي) 2005,.

Sinensis)Parkin et al.,1993. (

Genetic : العوامل الوراثية factors

تنتج عن توارث جينات مسؤولة عن السرطان ، تصنف الى صنفين هما الموروثات

وهي موروثات ورمية اولية توجد في نواة الخلية الطبيعية Oncogenesالورمية

)Varmus,1994( تنشط هذه الموروثات باالنتقال الكروموسومي)Chromosomal

translocation ( كما في)chronic myelocytic leukemia ( او بالتضخم الجيني)Gene

Amplication(كما في)Pulmonary carcinoma ( او عند حدوث تشوهات باشرطة

(DNA) والطفرات النقطية او خالل اعادة ترتيب)DNA( او عند ادخال المحركات او

Promotor(المحفزات insertion ( او إدخال المعززات)Enhancer insertion)(Reddy

etal .,1992;Hemminki وهناك صنف اخر من الجينات هي الكابحة لألورام ). 1993,

)Tumor suppressor genes ( تكبح تحول الخاليا وتعزز ووهي تشفر الى بروتينات

Clark(توقف نموها وتمايزها وتستحث الموت المبرمج etal P53من أهم الجينات )1993,.

الذي ينظم تعبير جينات عديدة ويسلك سلوك عامل سيطرة ن وكيلو دالت 53وزنه الجزيئي

وتشوهه ويمثل البروتين مفتاح ابتداء الموت المبرمج فحدوث الطفرات في )DNA(رعند ضر

Tsugis(مثل هذه الجينات يؤدي لإلصابة بانواع مختلفة من السرطان and

Ogawa,1994(.

Methods : ق عالج السرطانائطر:4-4-2 of Cancer treatment


٢٧

Radiotherapy : العالج اإلشعاعي

Radiation(تنص فرضية حث اإلشعاع hormeses( ان المستويات الواطئة على

لوجية خلوية كتحفيز انظمة وفعل تحفيزي لعمليات باي اتفي االشعاع االيوني ذ

(DNA)(DNA)اصالح repair system وتفيد العديد من جينات االصالح)Oliver

etal., 2004;Hickson,2006( وفعالية انزيمات ازالة السم بكسر الجذور االيونية

الناتجة عن االشعاع كما يفرز قدرة الحماية في التعرض لالشعاع مستقبال

)Loken&Fenen degen,1993( الفوائد هناك اضرار جانبية للعالج فضال عن هذه

كأضمحالل النسيج البرنكيمي للخاليا الجذعية وتليف في االمعاء والرئة فضال عن تساقط

وجاءت تقنية المتحسسات الشعاعية مثل )Suit&Todorok,1995(الشعر

)(Misiodozole و)Nitroimidgole ( التي تسبب تسمم الخاليا الورمية نتيجة نقصان

Fertile(لدم في الشعريات المغذية للورم جريان ا and Malaie , 1995(.

Chemotherapy : يئالعالج الكيميا

- :ية ذات الدور العالجي المهم للسرطان ئالكيميا اديتضمن ثالثة اصناف من المو

ةمضادات االكسد مثل مسرطنات وسطيةلى ا األولية المسرطنات تنشيط ط يبثت 1-

Kornhauserالجزيئات الكاسحة وا eta ة في ئبالتي تتضمن الفيتامينات الذا) (1996,

.الماء والدهون والعناصر المعدنية والمواد الكيمياوية المشتقة من النباتات

مراكز مثبطات ابتداء السرطان او العوامل الغالقة التي تمنع السرطان من التفاعل مع2-

Siess(حيوية في الخلية etal., 1992.(


٢٨

)1000(العوامل الكابحة وتثبط المراحل المتاخرة لتقدم السرطان وتشمل أكثر من 3-

Federall(صنفا من المركبات المشتقة من النباتات 25مركب مصنفة ضمن

Register.,1993;Dragsted etal.,1993.(

Immunotherapy : العالج المناعي

احد اهم األسباب المؤدية للسرطان تكاثر Immunodeficiencyالعوز المناعييعتبر

الخاليا الطبيعية والسرطانية يعتمد على جزيئات تنتج من خاليا مناعية تعرف بالمدورات مثل

InterferonsواالنترفيروناتInterleakinsواالنترليوكيناتCytokinesالساتيوكينات

(Rosenberg,1997).

Hormonal : العالج الهرموني therapy

یتضمن استعمال عقار یحل محل او یتدخل مع وظائف الغدد الصم یؤدي الى تثبیط ورم

Oklsborne(او المستحث الغدد اللبنیة التلقائي etal., 2000; Weisch, et al., فھي ) 1998

ستروجین وأصناف أخرى تعمل كمثبطات او محفزات لألتعمل كمثبطات للتخلیق الحیوي،

Bromo(فراز ھرمون تصنیع الحلیب مثل ا cryptine) (Weisch etal.,

1990;Weisch&DeHoog,1993.(

Ozone : العالج االوزوني therapy

يحفز االوزون فعالية االنزيمات المضادة لألكسدة ويحفز افراز االنترفيرون وعامل

Pryor(تخثر الورم and Lightsey, 2003; Kennedg etal وله بعض الجوانب )1999,

الضرورية للتخليق الحيوي )Cycolxygenase(يكبح مثبطات انزيمات اذالسلبية

Schelyle(للبروستاكالندنيات فتنتج زيادة باالخيرة المحفزة للتسرطن etal.,1997(.


٢٩

Surgicalالعالج الجراحي therapy :

اسئصال االنسجة هذه التقنية هي االفضل لعالج االورام الصلبة وتتضمن تعد

Bourgaize(المسرطنة et al.,2000( ومن ضمنها االوعية الدموية المغذية للنسيج والغدد

ت والرحم اللمفاوية وتعتبر هذه التقنية فعالة لعالج مختلف السرطان كسرطان البروستا

.والثدي

Plant:العالج النباتي therapy

يعد طب االعشاب فرع من فروع الطب المكمل او البديل،وذلك الن النباتات تؤدي

وقد استعملت األعشاب كغذاء ودواء ،دورامهما في حماية صحة االنسان وتحسين مسار حياته

وقد ).Craig,1999(ونحن اليوم نشهد مدى واسعا من أستعمال النباتات للعالج ،لقرون عديدة

اذ ان معظم االدوية ،عرفت المكونات النباتية بانها المصدر الفعال لعالج الكثير من االمراض

Ghersi(المعروفة والستخدمة حالياهي من المكونات النباتية et al.,2005(، وان العديد من

لمركبات هذه المكونات تعد ذات اهمية في عالج مرض السرطان والحد منه،وان احد هذه ا

المعزول من االجزاء الهوائية لنبات المديد حيث انه يعمل على proteoglycanهي مركب

Lewisتثبيط نمو االورام السرطانية في الفئران ضرب lung من 77%بنسبة وصلت الى

,Meng(وزن الورم et al., هو مركب قلويدي يوجد في lycobetaine،وان مركب )2002

Lycarisالعشب radiate له القابلية على معالجة سرطان عنق الرحم والمبايض والمعدة

وهو من Genisteinفضال عن قابليته كما يحتوي فول الصويا على تراكيز عالية من

المركبات الفالفونويدية وهناك مايدل على ان هذه المادة تثبط عددا من انواع السرطان مثل

تات من خالل منع نمو االوعية الدموية الجديدة الى سرطان المعدة والبنكرياس والكبد والبروس


٣٠

التي )2001،العتابي(ومن أهم الدراسات الحديثة هي التي قام بها .)Duke,1993(االورام

درس فيها التأثير التثبيطي لتراكيز مختلفة من المستخلص الكحولي لنبات سم الفراخ

Withania somnifera في خطsu-aa انية الفأري لخاليا البالزما السرطplasmacytoma

125بتراكيزعند استخدامهفي الزجاج واظهرت النتائج تثبيطا عاليا للمستخلص

Cyperusالى ان لنبات السعد )2004،الحلي(وتوصل .مل سبعة ايام من الحضن/ماكروغرام

rotundusفعالية سمية ضد الخطوط السرطانية الثالث وهيRD,Hep-2 وخطAMN3

الى ان المستخلصات الخام والمنقاة )2009الحلي،(كما اثبت ،لسرطان الغدة اللبنية الفأري

للجذوروالعقد الجذرية لعشب السعد لها تأثير تثبيطي وبشكل واضح على كل من الخطوط

كما وجد ان تلك )GB¡AMN-3¡HEP-2¡RD¡HeLa¡Vero(الخلوية السرطانية

كما اشارت REFي معنوي على الخط االولي الطبيعي المستخلصات ليس لها اي تأثير تثبيط

النتائج ان للمستخلصات الثالث لعشب السعد القابلية المعنوية العالية كمضادات االكسدة،ذلك

لقابليتها على التأثير في حالة االكسدة واالختزال للخاليا السرطانية سلبا وايجابا وبالتالي زيادة

الحرة المتولدة نتيجة التسرطن وكذلك استحثاث عملية الموت القدرة على التخلص من الجذور

المبرمج للخاليا السرطانية،كما ان المستخلص الفينولي لالجزاء النباتية له القابلية على كبح

. الجديدة المساعدة على انتشار وتطور السرطان تكوين االوعية الدموية

Summery

This study amid to investigate the effects of crude ethanolic extraction

of Petroselium cripum seeds and leaves one bone marrow of lab mice

(Mus musculus ) and on the proliferation of the cancer cell lines (Hep-2,

HeLa and AMN-3). Chemical components of seeds and leaves extract

were studied and were found that seed, contain, Flavonoids steroids and

Glycosides. Leaves contain saponins, resins, alkaloids, terrenes, steroids,

tannins, flavonoids and glycosides. Twenty five mg of crude alcoholic

extract was obtained from 50 gm of seeds with percentage of 0.05% and

0.08% of dry leaves.

Cytogenic effect of 250,500,1000 and 2000 mg/kg of the extract were

study in somatic cells (Bone marrow cells) in lab mice at of 7,14,21 and

28 days intervals. Results indecated significant inhibition in cell division

at 250 and 500 mg/kg at 12 and 28 days comparing with the control while

the extract reveals small decrease micronulei formation and chromosomal

abervations.The cytotoxicity of cancer cell line of concentration of (0.95,

1.9,3.8,7.7,15.5,31.25,62.5,125,250,500,1000,2000,3000,4000,6000,8000

, 10000, 12000 and 16000)µg/ml showed there was no inhibition

observedat concentration (o.95,1.9,3.8,7.7,15.5,31.25and 62.5)µg/ml.

While at concentration of 250,500 and 1000 mg/ml the inhibition

percentage was less than 50%.But at concentration of 2000 and

4000µg/ml the inhibition percentage was(63%,66%) respectively at while

after 48hrs the concentration of (6000,8000,10000,12000,14000

and16000)µg/ml the inhibition percentage was more than70% at this

study was found that the alcoholic extract hase toxic effect on cancer cell

lines,on hep-2 70.242% of inhibition at 6000µg/ml and 75.778% of

inhibition at16000µg/ml after 24hrs; inhibition percentage was 71.626%

and77.093% at 6000µg/ml and 16000µg/ml respectively.but after 72hrs

the inhibition was 72.594% and 77.136% respectively,the inhibition

percentage of HeLa cell line was 73.840% and 79.238% at concentration

of 6000µg/ml and 16000 µg/ml after 24hrs the percentage79.930% at

concentration 6000 µg/ml to 86.505% at concentration16000 µg/ml after

48hrs. exposure and the percentage was 82.353% at concentration 6000

µg/ml to 88.581% at concentration16000 µg/ml after 72hrs .On AMN-3

cell line the inhibition percentage was71.97% and78.20% at

concentration of ml6000µg/ml and 16000µg/ml after 24hrs; while after

48hrs the percentage was 74.04% and 80.96% respectively,but after 72hrs

the percentage was 75.08% and82.69% respectively.From this result we

can concluded that this plant have a promising medicinal plant for effect

on cancer,through out the toxic effects on cancer cell lines.

المصادر

١٠٠

استجابة االجزاء النباتية لنبات الحلبة السوداء ). 2006(زينب سعد عبد الغني ،االوسي*

رسالة . للزراعة النسيجية ودراسة المادة الفعالة فيها على خاليا نقي العظم في الفئران

.جامعة النهرين –ماجستير، الى كلية العلوم

تأثير المستخلصات الكحولية الخاملبذور واوراق نبات ).2007(التميمي،مروة عامر حسين*

Apiumالكرفس graveolens var dulce في سرطانة الغدة اللبنية المغروسة في اناث

.جامعة بغداد- اطروحة دكتوراه ،كلية العلوم للبنات.الفئران البيض

ونوى الزهدي دراسة تأثير المستخلصات الخام لثمار) 2007.(الجريصي، ياسر حسن زيدان*

Phoenix dactylifera Cultivar Zahdi في تثبيط نمو بعض خطوط الخاليا السرطانيه في

كلية . رسالة ماجستير.الزجاج وفي عالج سرطان الغدة اللبنيه المغروس في الفئران البيض

.جامعة بغداد-العلوم

Cyperusسعدتأثير المستخلصات الخام لعشب ال). 2004(الحلي، زيد عبد المنعم علي*

rotundus L. جامعة - رسالة ماجستير، كلية العلوم. في تثبيط نمو الخطوط الخلويه السرطانية

.بغداد

دراسة التأثير السمي والمضاد لألكسدة والمضاد لتكوين ).2009(الحلي، زيد عبد المنعم علي*

الخام والمنقاة جزئيا االوعية الدموية الجديدة والحث على عملية الموت المبرمج للمستخلصات

Cyperusلعشب السعد rotundus L. اطروحة . في مختلف الخطوط الخلوية السرطانية

.جامعة بغداد- دكتوراه،معهد الهندسة الوراثية والتقنيات األحيائية

المصادر

١٠١

دراسة مرضية ومناعية ووراثة خلوية لتأثير ).٢٠٠٨(الربيعي ،عمر حسين خلف*

Portulacaالمستخلص الخام لنبات البربين oleracea L في عالج سرطان الغدة اللبنية

.جامعة بغداد-المغروسة في اناث الفئران البيضاء ،رسالة ماجستير ،كلية الطب البيطري

تأثير المستخلص المائي الخام لقشور الرمان على ). 2008(السعدي، اسيل ياسين كاظم*

الجامعه - ن، رسالة ماجستير، كلية العلومخطوط الخاليا السرطانية النامية في الزجاج والفئرا

.المستنصرية

تأثيرالمستخلص القلويدي الخام لالوراق المديد ).2008(السعدي،نمارق هادي منصور*

Convolvulus arvensis L. جامعة بغداد- كلية العلوم.رسالة ماجستير.في األنقسام الخلوي

رسالة .ية والسمية الزهار القصيومدراسة بعض الصفات الوراث).1982(سامي اغا ،الشامي*

.جامعة بغداد-كلية الطب البيطري،ماجستير

دراسة تأثير مستخلصات أوراق نبات الدفلة).2006(الشيباني،رغد ضياء عبد الجليل *

Nerium oleander الخام والنقية في الخاليا الطبيعية وخطوط الخاليا السرطانية النامية في

. الجامعة المستنصرية-اطروحة دكتوراه،كلية العلوم.الزجاج وفي الفئران البيض

الخلوية –تقييم بعض التأثيرات الوراثية ). 2008(شيماء يوسف عبد الفتاح ،العبيدي*

Achilleaيوم والمناعية للمستخلص الكحولي لنبات القص millefolium ذكور الفأر (في الحي

.جامعة بغداد-كلية العلوم للبنات.رسالة ماجستير ). خاليا لمفية بشرية (والزجاج ) االبيض

المصادر

١٠٢

تأثيرالمستخلص الكحولي الخام الوراق نبات سم الفراخ).2001(العتابي،شالل مراد حسين*

Withania somnifera Dun نيةفي الزجاج وفي بعض المعايير في نمو الخاليا السرطا

.جامعة بغداد-اطروحة دكتوراه،كلية الطب البيطري.الفسلجية في الفئران

.SPSSاستخدام البرنامج االحصائي ). 1998(العقيلي، صالح رشيد والشايب، محمد سامر*

.358مطبوعات الجامعه، دار الشرق للطباعه، صفحه

- ملزمة منشورات كلية العلوم الطبية التطبيقية.انالغذاء ومرض السرط).٢٠٠٨(هند،العمري*

.المملكة العربية السعودية.جامعة الملك سعود

Salixدراسة تأثير المستخلصات الخام لنبات الصفصاف ). 2006(الموسوي، ازهار جعفر*

acmophylla في نمو الخاليا الخلويه السرطانيه والخاليا اللمفاويه الطبيعيه لالنسان خارج

.جامعة كربالء-رسالة ماجستير، كلية التربيه. الجسم

التأثيرات البايولوجية لمستخلص نبات الكبر ).2007(ابتهال حسين محمود ،النعيمي*

رسالة دكتوراه مقدمة الى كلية . والحميض في الخاليا الطبيعية والورمية للالنسان والحيوان

.جامعة النهرين–العلوم

دراسة تأثير مستخلصي الكحول االثيلي والهكساني لثمار ).2004(اليعقوبي،كفاح جبار شاكر*

Ellettriaنبات الهيل cardomomu(Cardamom) في خطوط الخاليا السرطانية

.جامعة الكوفة-كلية العلوم،رسالة ماجستير.والطبيعية للدم المحيطي لألنسان خارج الجسم

.بيروت- دارالقلم. عةالطبعة الساب.التداوي باالعشاب).1983(رويحة وأمين *

المصادر

١٠٣

Silybumتأثير المستخلصات الخام لحبوب الكلغان ).2008(سلمان، اسراء صكبان*

marianum L. على الخطوط الخلويه السرطانيه والطبيعيه، رسالة ماجستير، كلية العلوم

.جامعة بغداد-للبنات

الورمية في الزجاج تأثيرالغذاء الملكي والكبر على بعض الخاليا).2007(صالح،خالد مهدي *

.الجامعة المستنصرية- اطروحة دكتوراه، كلية العلوم.والحي

دراسة تأثير بعض المستخلصات النباتية في طفيلي ).2008(عبد الحسين،غصون عادل *

Entamoebaالزحار االميبي histolyticaكلية العلوم.داخل الجسم الحي،رسالة ماجستير -

. جامعة بغداد

.ليبيا،باالدار العربية للكت،النباتات الطبية زراعتها ومكوناتها).1979(فوزي طه ،قطب*

Rheumدور المستخلص المائي للراوند). ٢٠٠٧(كريم،جالل كريم* ribes والزعترThmus

syriacus في تثبيط التأثير التطفيري للعقارGemcitabine والتأثير التسرطني لمادة

DMBA - ١٢7, جامعة دهوك-كلية الزراعة، رسالة ماجستير ،في ذكور الفئران البيض.

المصادر

١٠٤

A

*Abarca, M. L. ; Bragulat, M.R. ; Castella, G. ; Accensi

Nanez,X.,Clifford,M.N.,Walker,R. Ioannides, F. and Cabanes, F.

J.(2000). Mycotoxin producing fungi. Rev. Iberoam Micol., 17:563-568.

*Abbas,A.,C.(1996).A comparison of the antimutagenic potential of

green,blak and decaffeinated teas:Contribution of Flavonols to The

antimutagenic effect.Mutagenesis,11:597-603

*Abd-Elhady,F. ;Hegazi ,A. ,Ata ,N. and Enbawy , M.(1994) Studies for

determining antimicrobial activity of Solen ostomma argel .1-Extraction

with metharol ,water in different propotions . Qater univ. Sci . , 14(spec,

issue):138-142.

*Alexandrova, R.; Varadinova, T.; Velcheva, M.; Genova, P. and

Sainova, I.(2000). Cytotoxic effect of isoqyinoline alkaloids on tumor cell

lines, Experimental pathology and parasitology, 4:8-14.

*Allen,J.W;Schuler,C.F.;Mendes,R.W.and Latt,S.A.(1977).Asimplified

technique for in vivo analysis of sister chromatid exchange using 5-

bromodeoxy uridine tablets,Cytogentics,18:231-237.

*Al-Maisry,M.(1999).Effect of oil and alcoholic extract of Azdirachta

indica on some pathogenic fungi of plant,M.SC.Thesis.Science

college,Al-Mustansria University.

*Aronson,K.(2003).Alcohol:A recently identified risk factor for breast

cancer.Canadian Medical Associaition,C.M.A.J.,168.1147-1148.

*Ataya,K.,Valeriot,F.and Ramahi.,A.(1989).Effect of Cyclophosphamide

on the immature rat ovary.Cancer Res.,49:1660-1664.

المصادر

١٠٥

*Atherder L.M.(1969).Bentter and drivers text book of phanmacentical

chemistry,oxford.univ.,press,London.

*Atta,A.B.et al (1998).Anti-rociceptive and Anti-inflammatory effects of

celery.Ethnopha rmacology.,60(2):117-124.

*Au,O.and Zhu,S.(1990).Function of chromosomal aberration male

mouse.Mutation Res.244:209-214.

*Auler,L.(1976)Aberration induction by mitomycin C in early primary

spermatocytes of mice.Mutation Res.35:247-256.

*Ault,J.G;Cole,R.W.;Jensen,C.G;Jensen,L.:L.A.Bachert,L.A.andRieder,C

.L.(1995).Behavior of crocidolite asbestos during mitosis in living

vertebrate ling epithelial cells.Cancer Res.,55:792-798.

B

*Bedir,E.and Khan,I.A.(2000).New steroidal glycosids from the fruit of

tribulue terrestris .J.Nat.Prod.,63:1699-1701.

*Bourgaize,D.;Jewell,T.and Buiser, R.(2000).Biotechnology,demytifing

the concepts,(4th ed.),McGraw Hill press,New York,pp.:313-335.British

Medical Association(BMA).Complementary medicine-new approaches to

good practice.

*Brandes , L. J. ; Arron, R. J.and Bogdanovic, R. P. (1992) . Stimulation

of malignant growth in rodents by antidepressant drug clinically relevant

doses.Canser Res.,52:3796-3800.

المصادر

١٠٦

C

*Caceres-Cortes, J.R.; Cantu-Graza,F.A.; Mendoza-Mata, M.T.;

Charez-Gonzales ,M.A.Ramos-Mandujano,G. and Zambrano-Ramires ,

I.R. (2001). Cytotoxic activity of Justica-Spicigera is inhibited by Bcl2

proto-oncoyenes and induces apoptosis in a cell cycle dependent fashion,

phytothes.Res.,15:691-697.

*Castoldi ,G; Scapoli, P.and Spanedda, R. (1969). chromosoes and

chloramphenicol.Arch.Ltal.Patol.Clin.Tumori,12:117-141.

*Chou, W. C. ; Hawkins,A. L. ; Barrett, J. F. ; Griffin, C. A. and Dang,

C.V.(2001).Arsenic inhibition of telomerase transcription leads to genetic

instability. J. Clin. Invest., 108:1541-1547.

*Clarke,A.R.and Harrison D.J. (1993).Thymocyte apoptosis induced by

p53-dependent and independent pathways.Nature.,362:849-852.

*Cogo, E. and Kevinlai, N. D.(2003). Should ginseng be considered for

cancer prevention Z. compl. And Alter. Med. 80:153-155.

*Cooper, G.M.(1997). The cells: Amolecular approach. Oxford

University press, Oxford, pp.599-608.

*Correa,P.A.(1992). H uman gastric carcinogenesis:a multistep and

multifactorial process. First Americal Cancer Society a word lecture on

cancer epidemiology and prevention.Cancer Res.,52:6735-6740

*Craig,W.J.(1999). Healh-Promoting properties of common herbs .Am .

J.Clin. Nutr.7a:491s-499s.

*Crook,T; Souhami, R. and Mlean, A. (1986). Cytotoxicity DNA cross-

linking and single breaks in human leukemia cell. Cancer.Res.46 (10):

5029-5034.

المصادر

١٠٧

D

*Danilin,V.A.; Voronin,A.K. and Modorskii, V.S. (1999). The state of

health of personnel working in high-voltage electric fields.Gig.Tr. prof.

Zabol.,13:151-152.

*Davis,D.L.;Telang,N.T.;Osborne,M.P.and Brodlow,H.L.(1997).Medical

hypothesis:Bifunctional genetic-hormonal pathways to breast cancer.

Envionmetal Heath perspective (USA).,105/suppl. New Yourk, Avenue,

Washington, DC2000 USA.

*Deflora,S.and Ramell,C. (1988). Mechanisms of mulagenesis and

carcinogenesis,classification and over view. Mutat.Res.,202:285-306.

*De-Smet,P.A.G.M.(1997)The role of the plant –derived drugs and

herbal medicines in health care,Drugs:56:801-854.

*Dragsted,L.O.; Strube ,M. and Larsen, J.C. (1993). Cancer-protective

factorsin fruits and vegetables: biochemical and biological background .

Pharm. Toxical;72(suppl.1): s116-s135.

*Draoui,M.; Siegall,C.B.; FitzGerald,D.; Pastan,I. andMoody,T.W.

(1994).TGF α-PE40 inhibits non-small cell lung cancer growth. life

sci;54:445-453.

*Duke,J.(1993).Lupinus perennis:hypotensive Wildflower hypertensine

wires.Colts foot,14(6):4-5.

المصادر

١٠٨

E

*Elangovar,V.; Ramamrthy, N.;Balasubrama bian,S.;Sekar,N.and

Govidsany (1994). Studies on the antiproliferative effect of some

naturally occurring bioflavonoidal compounds against human carcinoma

of larynt.

*Evans, W.B. (1999). Trease and Evan,s pharmacognosy.

ed.W.B.Saunders Company Ltd.u.k.

*Evans,E.P.;Breckon,G.;and Ford,.C.E.(1964).An air drying method for

meiotic preparation from mammalian testes.Cytogenetics,3:284-294.

F

*Fedeal Register, (1993) .Food labeling :Health claims and label

statements:Antioxidants and Cancer.Final Rule,Vol.58:2622-2660

*Feoron, W. R. and Vogelstein, A.(1990). Agenetic model for Colorectal

tumorigenesis. Cell, 16:759-767.

*Fetile,B.and Malaise,E.P.(1995).Intrinsic radiosensitivity of human cell

lines is correlated with published survival curves.Int.J.Radiat.Oncel.Biol.

phys.,111:111699-111707

*Folkman,J.(2003).Fundamental concepts of the angio genig

process.Curr.Mol.Med.,3:643-651.

*Forkmann,G. and Martens, S.(2001). Metabolic engineering and

applications of flavonoids, Curr.Opinion Biotech.,12:155-160.

*Frederich, M.; Bentires-Alj, M.; Tits, M.; Angenot, L.; Greiners, R.;

Gielen, J.; Bours, V. and Merville, M. P.(2003). Isostrychnopentamine an

المصادر

١٠٩

indolomonoter Penice alkaloid from human Strychnos usambarensis

,induces cell cycle arrest and apoptosis in human colon cancer cells,

Journal of prarmacology and experimental therapeutics fast forward,

304(3):1103-1110.

*Freshney,R.I.(2000).Culture of animal cell:Amanual for basic technique

(4thed).Wileyliss, Ajohn wiley and Sons, Inc. Publication, New York

G

*Ghareeb, A. and George ,N.M.(1997).Cytotoxicity of insecticide temik

15 G (Decarb) in mitotic and meiotic cells of Vicia faba plant. Cytologia,

62:259-263.

*Ghersi,D.;Wilcken,N.and Simes,R.J.(2005). Asystematic review of

taxane containing regimeus for metastatic breast cancer Br.J. Cancer

93:293-301.

*Gurib-Fakim,A.(2005).Medicinal plants.Tradition of yesterday and

drugs tomorrow.Molecular Aspects of Medicine.

H

*Hanausek, M.; Ganesh, P.; Walas Zek,; Arntzen, C. J.; Staga, T. J. and

Gatterman, J. U.(2001). Avicins, a family triterpenoid saponins from

Acacia victoriae (Bentham), suppress H-ras mutations and aneuploidy in

a murine skin carcinogenesis model, pro. Nat. Acdd. Sc. USA, 98:11557-

11562.

المصادر

١١٠

*Hansen,K.and Mossman,B.T.(1997).Generation of superoxide from

alveolar macrophages exposed to asbestiform and nonfibrous

particles.Cancer Res.,47:1681-1686.

*Harborn,V.B.(1973).Phrborn chemical methods.A guide to modern

technique of plant analysis London.

*Harborn,J.B.(1984).Phytochemical methods:A guide to modern

techniques of plant analysis 2nd ed.chapman and Hall,NewYork.

*Hesterberg,T.W.and Burrett, J.C.(1995).Induction by asbestor fibers of

anaphase abnormalities:mechanism for aneuploidy and possibly

carcinogenesis.,6:473-478.

*Hesterberg,T.W.and Burrett, J.G.(1995).Induction by asbeston fibers of

anaphase abnormalities: mechanisms for ancuploidg and possibly

carcinogenesis.

*Hickson,I.D. and Harris, A.L.(2006). Mammalian DNA repair-use of

mutants hypersensible to cytotoxic agents Trends Genet.,40:11101-

11106.

*Hoet. P. H. M. ; Bruske-Hohlfeld, I. and Salata, O.V.(2004).

Nanoparticles-Known and urkown health risks. Journal of

Nanobiotechnology, 2:12-26.

*Hollsberg , p.(1999). Mechanism of T-cell activation by human T-cell

lymphotropic Virus type 1.Microbiology and molecular Biology Reviews

,63(2):308-333.

*Hoppe,H.A.(1975):DrogenKunde,Band1,Angiospermen,8.Auflage.Walt

er Gruyter and Co.,Berlin,Germany.

المصادر

١١١

*Huang,D.M.;Jih,H.G.;Yao,T.H.;Shih,C.C.;Hui,PandChe,M.T.(2002).Car

diac glycosides induce to tubulin-dependant human prostate

cancer,J.Biomed.Sci.,9:443-452.

I

*Islam,M.W.R;Radhakrishnan,X.M.;Liu,H.B. and AL-Naji,M.A.(1994).

Safety evaluation of Zizyphus spinachristi L.and Teucrium stocksianum

biss.,used in traditional medicine in the Arabian Gulf.

J

*Jacob, R.A. (1995). The integrated antioxidant system. Nut. Res.,

15:755-766.

*Jaffer,H.J; Mohmod,M.J.; Jawad,A.M.; Naj,A. and Alnaib,A. (1983).

Phytochemical and biological screening of some Iraqi plant,Fitoterapia

Lixzaq.

K

*Kada,T.;Inove,T.Ohta,T.;and Shirasu,Y.(1985)Antimutagens and their

modes of actier.NewYork.Vol.39:181-196.

*Kang .y. ; Xu ; C.J. ; Liu, X. S. ; Wu, C. Q ; Zhong, C. p. and Gu, J. R.

(2005). Herpes Simplex Virus type 1thymidine Kinase Lganciclovir

CHSV 1-TK (GCV) Cystem asan effective in Viveo death swich'' of live

tumov Vaccines A-Zheng. (Chinese), 24:909-914.

المصادر

١١٢

*Kasahara,Y.;Nakai,D.;Miura,K.and Hirbayashi,T.(1992).Mechanism of

micronuclei and chromosome aderration in mouse bone marrow by

multiple treatment of methorexate.Mutation Res.280:117-128.

*Katiyar, S,K.Agarwal ;Wang, Z.Y. ;Bhatia, A.K. and Mukhtar,

H.(1992). Epigallo cation.3 gallate in Camellia Sinensis Leaves From

Himalayn Region of Sikkimi inhibitory effects agains biochemical events

and tumer inhibition in Sencarmouse. Nutr, Cancer, 18(1):74-83.

*Kennedy,K.A;Crouchl,S. and Warshaw J.B.(1999).Effects of hyperoxia

on antioxidation in neonatal rat type II cell in vitro and in vivo. Pediatr

.Res.,26:400-403.

*Khurana, S. ; Duby ,M.L. and Malla, N.(2005). Association of parasitic

infection and Cancers. Indian J. Med. Microbiol.,23:74-79.

*Kief,H.(1993).The treatment of malignant disease with AHIT.IN:ozone

inMedicie,Proceeding Eleventh Ozone World Congress,pp.4.26-M-4-31.

*Kornhauser,A.;Wamer,W. and Giles,A. (1996).Protective effects of

betacarotene against phototoxicity:relevance to protection against

carcinogenesis.In:D.M.shankel,P.E.Hartman,T.Kada and A.Holaender

(eds.).antimutagenses Vol 39,pp.465.plenum Press,Nr.

*Kown,C.;Maddion,K.,Lacastro,L. and Broch,R.(1987)Accelerated

decomposition of 4-hydroxycylophos phamide by human Serum albumin

Cancer Res.46(6):1505-1508.

*Kufe,D.W.: Pollock,R.E.; Weichsdbaanm .R.R.; Bast,R.C.; Gansler,T.S.

and Holl (2003). Cancer medicine, (6thed.),B.C. Decker

of pathology, (13thed),oxford university press Inc.New York

USA,pp.355-409.

المصادر

١١٣

L

*Lee,B.M.,Lee,S.K.and Kim,H.S.(1998).Inhibition of oxidative DNA

damage,8ohedg.And carbonyl content in smokers treated with

antioxidants(vitamin E,C,beta-carotene and red ginseng).Cancer let.

132(1-2):219-227.

*Littlefeied, L.;Colyer, S.and Dufration, R.(1980).Comparison of SCE in

human lymphocyte after exposure to MMC in vitro,in

vivo.Mut.Res.,67:191-195.

*Loken,M.K. and Einendegen, L.E.F.(1993).Radiation Hormesis:Its

emerging significance in medical practice.

* Lopez-Lazaro, M. ; Galvor, M.; Martin-Lorder, C. and Ayuso, M.

J.(2001). Cytotoxicity of flavonoids on Cancer cell Line. Structure-

activity relation-ship.Med.chem., 1:82-114.

*Lopez-Lazaro, M.(2002). Flavonids as anticancer agents: structure –

activity relation shaip study. Curr. Med. Chem., :691-714.

*Lopus,M.and Panda,D.(2006).The enzophena thridine alkaloid

sanguinarine perturbs micro-tubule assembly dynamic through tubulin

binding.A possible mechanism for its antiproliferative activity

.J.FEBSIO:2139-50.

*Lugo, M. ;Rouchfuss, H. ;Zakour, H. ;Allen, J. and Hozier, D.(1989).

Evidence for chromosomal replication as units of sister chromatid

exchange. Cancer Res.66(8):1112-1117.

المصادر

١١٤

M

*Mac Sween, R.N.M. and Whalcy, K. (1997). Muirs textbook of

pathology (13thed.), Oxford University Press Inc.,New York,USA,PP.

355-409.

*Madden, C. R.; Finegold, M. J. and Slagle, B. L.(2002). Alterd DNA

mutation spectrum in aflatoxin B 1-treated transgenic mice that express

the hepatitis B. virus protein. J. virol. ,76:11776-11774.

*Manna,G.K.(1971)Bone marrow chromosome aberrations in mice

induced by some physical,chemical and living mutagens ,proc. Cytol.

Genet.,13:121-133.

*Manna,G.K;and Smriti,B.(1983)Effects of low antibiotics on the

chromosomes and mitotic frequency in bone marrow cells of mice

chromosomes Today:277-272

*Manosroi,J.;Dhumtanoma,P.and Manosoi,A.(2005).Anti-prolif.erative

activity of essential oil extracted from Thai medicinal plants on KB and

P388 cell lines.cancer letters:1-7.

*Marjori,L.C.;Teixeria,R.O.;Mantovani,M.S.and Vicentini,V.E.P.(2002).

Effects of Maytenus ilicifolia mart. and Bauhinia Candi Cans Benth

infusions on onion tip and rat bonemarrow cells.Genetics and molecular

biology,25(1):85-89.

*Mather, J.P. and Roberts, P.E. (1998). Introduction to cell and tissue

culture theory and technique. Plenum Press, New York.

*Meng,X.L.;Riordan,N.H;Casciari,J.J;Zhu,Y;Zhong,J.;Gonzalez,M.J.;Mi

randa-Massari, J.R.and Riodan, H.D.(2002).Effect of a high molecular

المصادر

١١٥

mass Convolvulus arvensis extract on tumer grouth and

angiogenesis,PRHS.J.;21:323-328.

*Mercykutty,V.C.and Stephan,J.(1984).Adrimycin induce genetic

toxicity as demonstrated by the Allium cepa test.Cytologia.,45:769-777.

*Miura,K.,Mortmoto,K.and Koizumi,A.(1983).Proliferation Kinetics and

MMC-induced chromosome damage in fanconis anemia

lymphocytes.Hum.Genet.63:19-23.

*Moore, A.E.; Sabachewesky ,L.and Toolen, H.W.(1955). Culture

characteristics of four permanent lines of human cancer cells.Cancer

Res.,15:598-605.

*Mori, T.; Ohnishi ,M. ;Komigama, M. ;Tsutsui, A. ;Yabnshita, H. and

Okada,H.(2002).Growth inhibitory effect of Paradicsom paprika in

cancer cell lines. Oncology Reports, 9:807-810.

N

*Nakamura Y., Yanai, H. ; Kiton, T. ; Matsubara, Y. ; Hirano A. ;

okamoto T. ; Yoshida, T. ; Okita, K. and Matsusaki, K.(2005). Mucin and

differentiation in Epstein-Barr Virus-associated gastric Carcinoma.

Hepatogastroenterology, 52:1066-1070.

*Nakayama,T.;Hor,K.;Terazawa and Kawakish S.(2002).Comparision of

the cytotoxicity of different hydroperoxides to V79cell.Free Radical Res.

Commun.,14:173-178.

*Nakayama, T.; Hiramitsu, M.; Osama;T. and Kawakish, S. (2003). The

protective role of gallic acid esters in bactertial cytotoxicity and Sos

responses indused by hydrogen peroxide. Mut. Res., 303:29-34.

المصادر

١١٦

*Nicholsons, W.J.and Landrigan,P.J(1989).Quantitative assessment of

lives lost due to delay in the regulation of occupational exposure to

benzene.Environmental Health Perspectives,82:185-188.

*Nielsen, S.E.,Young J.F.;Daneshvar, B.,Lauridsen, S.T.;Knuthsen

P.,Sandstrom, B.and Dragsted, L.O. (1999).effect of parsley

(Petroselinum crispum) intake on urinary apigenin excretion,blood

antioxidant enzymes and bhomarkers for oxidative stress in human

subjects. British Journal of Nutrition;81:447-455.

*Noruzinia M.;Coupier,I.and Pujol,P.(2005).IsBRCA1/BRCA2-related

breast carcinogenesis estrogen dependent.Cancer,104:1567-1574.

O

*Ojala T.,Remes S.,Haansuu P.,Vuorela H.,Hiltumen R.,Haahtela K.and

Vuorela, P.(2000).Antimicrobil activity of some coldmarin containing

herbal plants growing in Finland.J.Ethnopharmacology.73:299-305.

*Oklsborne.M.P.; Karmali.,R.A.;and Hershcof,R.J.(2000). W-3faaty

acids: modulation of estrogen metabolism and potentiad for breast cancer

prevention.Cancer Invest..,1629-1631.

*Olivier,G.;Bodycote.,J.and wolff S.(2004).Adaptive of radicactive

thymidine Science 1223:11594.

p

*Papatheofanis,F.J.(1990).Use of calcium channel an tagonsis as

magnetoprotective agents.Radiat.Res.122:24-28.

المصادر

١١٧

*Parkin, D.M. ; Bray, F. ; Ferlay, J. and Pisani, P.(2005). Global cancer

statistics,2002. CA Cancer J. Clin., 55:74-108.

*Parkin,D.M. ;Ohshima,H. ;Srivatanakul,P. and Vatanasapt,V. (1993).

Cholangiocarcinoma:Epidemiology,mechanism of carcinogenesis and

prevention.Cancer Epidemiol.Biomarkers Prev.,2:537-544.

*Pazdur,R.; Coia,L.R.; Hoskins,W.J. and Wagman,L.D. (2001). Cancer

management:Amultidiscipliary approach, (5thed.) PRR, Melville, NY.pp.

1000.

*Pellechia, M.I. and Reed,J.C.(2004).Inhibition of anti-apoptosis BC1-2

family proteins by cancer chemoprevention and chemotherapy

Curr.Pharm.DES.,10:1387-1398.

*Phillips,D.H.(2002).Smoking-related DNA and protein adducts in

human tissues.Carcinogenesis,23:1979-2004

*Pieper, R. ; Fustcher, B. and Erichson, L.(1986). City of versuschili and

Cancer 8(3):201-210.

*Pillans, P.; Pon, Z. S. and arker, M.(1989). Cytophosphamide induced

DNA strand breaks in mouse embryo cephalic tissue in vivo.

Carcinogenesis 10(1):83-85.

*Pitot,H.C.;Hikita,H.;Dragan,Y.;Sargent,L.and Haas,M.(2000).Review

article:the stages of gastrointestinal carcinogenesis application of rodent

models to human disease. Aimentary pharmacology and

Therapeutics(suppl),140-153.

*Pornthanakasem W. ; shotelersuk, K. ; Termrum ganglert, W. ; Voravad,

N. ; Nivuthisard, S and Mutirangura, A.(2001). Human Papillomavirus

DNA inplasma of Patients with cervical Cancer. BMC cancer, 1:2-9.

المصادر

١١٨

*Pryon,W.A and J.V.and Chrch D.F.(1991).Aldehdes hydrogen peroxide

and organic radicals as mediators of ozone toxicity.Free.Biol Med.,11:41-

46.

*Pryor,W.A. and J.W.Lightsey.(2003).Mechanisms of nitrogen dioxide

reactions:initiation of lipid peroxidation and the production of nitrous

asid.Science.,214:435-437.

R

*Razzaghi-Abyaneh M.,Yoshinari T.,Shams-Ghahfar, Okhi, M.;Rezaee

M.B.,Nagasawa H.and Sakudas (2007).Dillapiof andApiol as Specific

Inhibitors of the Biosynthesis of Aflatoxin G1in Aspergillus parasiticus

Biosci,Biotechnol.Biochem.71(a)2329-2332.

*Reddy,E.P.; Reyndds,R. Ksavtos; E. and Barbacid, M. (1992). Apoint

mutation is responiple for the acquisition of transforming properties by

the T24 human bladder carcinoma oncogene.Nature.,300:149-152.

*Robbers,J.E.; Speedia,M.K. and Tyler,V.E.(1994). Pharmacognosy and

pharmacobiotechnology.Baltimoreiwilliams and Wilkins.

*Rosenberg, S.A. (1997). Principles of cancer management: Biologic

therapy. In : V.T. De Vita ; S. Hellman and S. A. Rosenberg (Eds.),

Cancer : principles and practice of oncology, (5th ed.), Lippincott-Raven

Publishers , Philadelphia, pp.349-373 .

*Russel,P.J.(1998).Genetics,5thed.The Benjamin Cumminge Publishing

Company.Inc.Mcnlopark,USA.PP.585-614.

المصادر

١١٩

S

*Sadeghi,H and Yazdanparst,R.(2003).Antitumor Activity and cell cycle

arrest of a new Diterpene Ester from Daphne mucronata.

*Saggoo, M. I. S. Kumari , S. and Bindu(1991).Cytological effects of

India medicinal plants I. Mitotic effects of leaf homogenate of tylophora

indical on Allium cepa Cytologia, 56:33-637.

*Sakagami, H.(1995). Effect of tannins on cancer cell lines.Anticancer

Res. 15:2121-2128.

*Schelyle,E.S. ;Adams,W.C. and Siefkin A.D. (1997). Indomthacin

pretreatment reduces ozone-induced pulmonary function decrements in

human subjects.Amer,Rev.Respir.DIS.136:1350-1354.

*Schmid,W.(1975).The micronucleus test.Mut.Res.31:9-15.

*Schoket,B.(2004).The role of DNAadducts in smoking related

carcinogenesis.Magy. Onkol. 48:201-205.

*Siess M.H.;Lebon ,A.M.and Suschetet M. (1992).Dietary modification

of drutuetabolizing enzyme activities:Healh.,35:141-152.

*Soto, A.M. and Sonnonschein, C. (2005). The role of estrogen in the

proliferation of human breast tumor cells (MCF-7). J. Steroid Biochem.,

23:87-94.

*Stahl,R.(1969).Thin layer chromatography a laporotary hand book Zed

ed.Translated by Ashwor th:M.R.spriner;Verlag Berlin.

*Stevens,A.and Lowe,J.(2000).Pathology,(2nded.),ppp,Mosby Company

London,pp.79-104.

المصادر

١٢٠

*Stich, H.(1992). Tea and tea components as inhibitors carcinogen

formation in model systems and man. prev.med. 21(3): 377-387.

*Suit,H.D.andTodoroki ,T.(1995).Rationale for combining.Surgery and

radiation therapy.Cancer.,55:2246-2249.

T

*Takada, S.; Kelkar, A. and Theurkouf; W.(2003). Drosophila check

point kinase zcuples centrocome function and spindle assembly to

genomic integrity-cell 113:87-99.

*Tang, Z.Y.(2001). Tepato cellular carcinoma-cause, treatment and

metastasis. World J. Gastro enterol, 7:445-454.

*Teixeira,R.;Camparoto, M.; Mantovani, M. and Vicentini, V. E. (2003).

Assessment of two medicinal plants, Psidium guajava L. and Achillea

millefolium L., in in vitro and in vivo assays. Genetics and Molecular

biology 10:1415-1417.

*Tice,R.R.;Erexson,6.L.and Hilliard,C.J.(1990).Effects of treatment

protocol and sampling time on the freguencies of micronucleated poly

chromatic erythrocytes in mouse bone marrow and peripheral

blood.Mutagenesis;5:313-321.

*Tomczak,M.F.;S.E.Erdman,S.E.;Davidon,A.;Wang,y.y.;Nambair,P.P.;R

ogers,A.B.;Rickman,b.;Luchetti,D.(2001)Fox,induced colitis by1l-10

Requires the p50/p105 subunit of NFKappaB.J.Immnol.,177(10):7332-

7339.

*Toolan,H.w.(1954).Transplantable human neoplasms maintained in

cortisone treated laboratory animals:H-S.-1,Hep-1,Hep-2,Hep-3.Cancer

Res.,14:660-666.

المصادر

١٢١

* Tsuii,K.and Ogwa K.(1994).Recovery from ultraviolet-induced growth

arrest of primary rat hepatocytes by p53 antisense oligonucleotide

treatment .Mol.Carcinogenesis 9:167-174.primary prevention.In:Origins

of Human Cancer Res.,49:4062-4067.

U

*Usui,T.;Kondoh, M.; Cui, C-B., Mayami,T. and Osada,H. (1998).

Tryprostatin A,aspecific and novel inhibiton of microtubule

assembly.Biochem.J.,333:543-548.

*Upton, A. C.(1991). The question of there shold for radiation and

chemical Carcinogenesis. Cancer Invest., 17:126-1276.

V

*Varmus,H.E.(1994).The molecular genetics of cellular oncogenes.

Ann.Rev. Genet.,18:553.

*Versalovic,J.G.(2003).Helicobavcter pylori pathology and diagnostic

strategies.A.M.J.Clin,pathol.,119(3):403-412.

*Vora,S. H.; Patil, R.B. and Pillai M.M.(2008). Protective effects of

Petroselium crispum (mill) Nymanex A.W.Hill leaf extract on D-

galactose-induced oxidative stressin mouse brain.Indian Journal of

Experimental Biology 47:338-342.

W

المصادر

١٢٢

*Walter,J.B.;Talbot,I.C.;Gardnet,H.A.;Halloran,P.F.;Zuckerman,M.;Bird

A.G. and Forbes,A.(1996).Walter& Israael general pathology 7thed

Churchill Livingston,New York.pp.425.

*Wang,Z.Y;Chen,S.J.;Zhon,Z.C.;Athar,M.;Khan,M.A.;Bickers,D.R.; and

Mukhtar,H.(1989).Antimutagenic activity of green tea polyphenol. Mutat.

Res.23:273-285.

*Weiner,L.M.;O Dwyer,O.and:Kitson,O.(1999).Phase I evalution of an

anti-breast Carcinoma monoclonal antibody 26 of 9-recombinant ricin A

chain immunoconjugate. Cancer Res.,49:4062-4067.

*Weisch, C.W.and Dehoog, J.V.(1993).Retinoid feeding of the combined

treatment with N-(4-hydroxyphenyl) retinamide and overiectomy.Cancer

Res,42:508-512.

*Weisch,C.W.; Brown, C.K.; Goodrich-smith., M. chiusano,J. and.Moon,

R.C. (1998). ergstic effect of chronic prolactin suppression and retinad

treatment in the prophylaxis of N-methyl-N-nitrosourea-induced

mammary tumorigenesis in female.

*Weisch,C.W.; DeHoog, J.V. and Moon, R.C.(1990).Inhibition of

mammary tumorgenesis in nulliparous C3H mice by chronic feeding of

the combined treatment with N-(4-hydroxyphenyl) retinamide and overi

ectomy. Cancer Res.,42:508-512.

*Weitzman,S.A.and Graceffa, P.(1995).Asbestos Catalyzes hydroxyl and

superoxide radical generation from hydrogen peroxide Arch.

Biochem.Biophys.,228:373-376.

*Whitehouse,M.W.,Roberts,M.S.and P.M.Books(1999).Over theCounter

OTC oral remedies for arthritis and rheumatisms how effective are they

Jeallergy,30(20):2000-2001.

المصادر

١٢٣

*Williams, M. and Quhtit, A.(2005). Towards abetter understanding of

the molecular mechanisms in volved in sunlight-induced melanoma.

Journal of Biomedicine and Biotechnology, 1:57-61.

*WWW.6abib.Com 2008

Y

*Yang,C.S.;Brady,J.F.and Hong, J.Y.(1992).Dietary effects of cytoch

romes P-450 xenobiotics metabolism,and toxicity.FASEBJ.6:737-744.

*Yang,C.S.; Theresa,T.J.and Hong, J.Y.(1994). Cytochrome P-450

enzymes as targets for chemoprevention against carcinogenesis and

toxicity: opportunities and limitation.Cancer Res.,(Suppl.)54:19823-

19865.

*Yun,T.K.;Yun,Y.S.and Han,I.W.(1983).Anticarcinogenic effect of red

ginseng on new born mice exposed to various chemical carcinogens

cancer Detect Prer.6(6):515-525.

*Yuspa, S. H. ; Dlugosz, A. A. ; Cheng, C. K. ; Denning, M. F. ;

Tennenbaum, T. and Weinbreg, W. C.(1994). Role of oncogenes and

tumor suppressor genes in multistage carcinogenesis J. Invest. Dermatol.,

103:90S-95S.

Z

*Zhang H.,Chen F.;Wang,C. and Yao, H.Y.(2006).Evalution of

antioxidant activity of porsely (Petroselinum crispum) essential oil and

identification of its antioxidant constituents.Food Research

International.39:833-839.

المالحق

١٢٤

االجهزة والمستلزمات المختبرية : )I(ملحق

الشركة المصنعة/الدولة االجهزة واالدوات

RefrigeratorConcordثالجة / Lebanon

DistillerL4جهاز تقطير diamond / England

IncubatorSanyoحاضنة / England

Waterحمام مائي bathGermany/Precisterm

Hotصفيحة حارة plateGllenkamb / England

Dissectingعدة التشريح setGermany

Lightمجهر ضوئي microscopsOlympus / Japan

Magneticمحرك مغناطيسي stirrerEngland/Gallenkamp

Rotaryمبخر دوار evaporatorBuchi / Swatzerland

PH-meterBeckmanمقياس األس الهيدروجيني / USA

AutoclaveTomy)موصدة(جهاز التعقيم / Japan

Sensitiveميزان حساس electronic balanceSensitive electronicSwitzerland/Precisa balance

CentrfugeTDL80نابذة /2B / India

المالحق

١٢٥

حفرة 96أطباق الزرع النسيجي متعدد الحفرذو

Microtiterمسطحة plate for tissue

ĐƵůƚƵƌĞǁ ŝƚŚϵϲŇĂƚďŽƩ Žŵǁ ĞůůƐ

U.k ./Flow lap.,Irvine

Testأنابيب أختبار زجاجية حجم tube

) مل10(

U.S.A/Millipore

Miliporeفلتر تعقيم Filter 0·22µU.S.A/Millipore

HoodU.S.A/Milliporeكابينة معقمة

Enzymeقارىء األاليزا Linked Immuno

Sorbent Assay (ELISA).

U.S.A/Millipore

المالحق

١٢٦

والحياتية ةالمواد الكيميائي) : II(ملحق

الشركة /الدولة اسم المادة

المصنعة

Sodiumبيكاربونات الصوديوم BicarbonateBDH /

England

Hydrochloricحامض الهيدروكلوريك AcidBDH /

England

Glacialحامض الخليك الثلجي Acetic AcidBDH /

England

Sodiumسترات الصوديوم citrateBDH /

England

CyclophosphamideBaxterسايكلوفوسفامايد /

Germany

فوسفات ثنائية الصوديوم الهيدروجينية

Di Sodium hydrogen phosphate

Fluka /

Switzerland

فوسفات الصوديوم ثنائية الهيدروجين

Sodium di hydrogen phosphate

Fluka /

Switzerland

PhenolBDHفينول /

England

Sodiunكاربونات الصوديوم المائية carbonateFluka /

Switzerland

EthanolBDHكحول اثيلي /

England

MethanolBDHكحول مثيلي /

England

المالحق

١٢٧

Ammoniumكبريتات االمونيوم الالمائية sulphate anhydrousFluka /

Switzerland

Potassiunكلوريدالبوتاسيوم ChloroideBDH /

England

ChloroformBDHكلورفورم /

England

Amoniumكلوريد االمونيوم ChlorideBDH /

England

Sodiumكلوريد الصوديوم ChlorideBDH /

England

Ferricكلوريد الحديديك ChlorideBDH /

England

Mercuricكلوريد الزئبقيك ChlorideBDH /

England

ابن /سوريا Colchicineسين يكولج

حيان

Giemsaملون كمزا StainSigma / USA

Eosinملون االيوسين StainBDH /

England

Sodiumهيدروكسيد الصوديوم hydroxideBDH /

England

Potassiumهيدروكسيد البوتاسيوم hydroxideBDH /

England

Potassiumيوديد البوتاسيوم iodideBDH /

England

StreptomycinASIA/Syriaالمضاد الحيوي الستربتومايسين

المالحق

١٢٨

PenicillineASIAالمضاد الحيوي البنسلين /Syria

NystatinASIAنستاتين المضاد الفطري /Syria

Fetalمصل العجل البقري calf serum المركز العراقي

السرطان لبحوث

وراثة

العراق/الطبية

Rosswellالوسط الزرعي Park Memorial Institute

(RPMI-1640)

USA/Sigma

Mem(Minimum(الوسط الزرعي Essential MediaUSA/Sigma

TrypsinUSA/Sigmaالتربسين

VersinUSA/Sigmaالفرسين

Trypsin-VersinUSA/Sigmaفرسين -التربسين

Crystalصبغة البنفسج البلوري violetUSA/Sigma

المركز العراقي Hep-2خط خاليا سرطان الحنجرة

السرطان لبحوث

والوراثة

العراق/ لطبيةا

المركز العراقي HeLaخط خاليا سرطان الرحم

لبحوث السرطان

المالحق

١٢٩

والوراثة


لعراقي المركز اAMN-3ناث الفئران إلسرطان الغدة اللبنيةخط خاليا

لبحوث السرطان

والوراثة


صدق اهللا العظیم

255اآلیة : سورة البقرة سورة البقرة

االھداء

الى ینبوع الحنان التي ذكراھا تعطر ایامي*

) رحمھا اهللا(جدتي وادین لھا بالفضل الكبیر

االى من احاطاني بالعطف والرعایة وكانو*

ني على طریق اعوني وسندي ووضع

ابي وامي العلم والمعرفة

اخي- اخواتي الى من رافقوني حلي وترحالي *

اعم الصغیرات في بستان حیاتيرالى الب*

)صبح واخواتھا(اللواتي احبھن كثیرا بنات اخي

دربي اللذین شدو من ازري اقالى رف*

صدیقاتي وزمیالتي وشاركوني مشواري

اساتذتي لي دروب العلم والمعرفة واضاءأالى من *

الى من ترابھ اغلى من الذھب وعزتھ *

)وعرفانا ءوفا(وطني العراق العظیماعلى من الجبل

والى كل من یسره نجاحي*

اھدي ثمرة ھذا جھدي المتواضع

أفنان

تقدیرورشك

الحمد هللا رب العالمين صاحب العزة والجاللة والصالة والسالم على سيدنا محمد الحمد هللا رب العالمين صاحب العزة والجاللة والصالة والسالم على سيدنا محمد

....وبعدوبعد..اجمعيناجمعيناله وصحبه اله وصحبه على على وو

حانه حانه اهللا سباهللا سب، إال أن أشكر ، إال أن أشكر هذه الرسالةهذه الرسالةسعني وأنا أنتهي من إعدادسعني وأنا أنتهي من إعداداليالي

ووفقني ووفقني وامدني بالصبروامدني بالصبرتجاوز الصعوبات التي واجهتنيتجاوز الصعوبات التي واجهتنياعانني علىاعانني علىالذي الذي وتعالىوتعالى

..إلنجاز هذا البحثإلنجاز هذا البحث

شالل .عباس عبد اهللا محمد و د.المشرفین د االستاذینالى لشكربا كما اتقدم

لبحوث السرطان والوراثة الطبیة العراقي مركزالمعاون مدیر سینمراد ح

.الجامعة المستنصریة/

اتقدم بوافر الشكرواالمتنان الى رئاسة قسم العلوم التطبیقیة في الجامعة ذلكك

وكذلك الى رئاسة فرع التقنیات والدكتور قاسم سلمان رئیس القسم لوجیةوالتكن

والى كل من قدم لي ید العون النجاح والدكتور علي التمیمي رئیس الفرع االحیائیة

.بحث من منتسبي الفرعھذا ال

ادارة المركز العراقي لبحوث ان اتقدم بوافر الشكر والعرفان الىویسعدني

لما قدموه لي من تجھیزات الجامعة المستنصریة/السرطان والوراثة الطبیة

ي المركز على منتسبما اتقم بشكري الجزیل الى كالبحث ھذاوتسھیالت النجاز

.لي من عون و مساعدة ماقدموه

جامعة ،كلیة العلوم ، الى االستاذ الدكتور علي الموسوي وكذلك اتقدم بالشكر

.الذي ساعدنا في تصنیف النبات بغداد

لشكروالتقدیرالى كل من ابدى لي مساعدة كبیرة كانت ام اوالیفوتني ان اتقدم ب

الى كل من بالتوفیق ئيوالى كل من تمنى لي الخیر ودعا صغیرة التمام ھذا البحث

م باالعتذار الى كل من فاتني وامدني بالعون ولو بكلمة طیبة كما اتقد عاضدني

.اسمھ بدون قصدذكر

نأفنا

أقرار المشرف على الرسالة

:االحیائیةالتقنیات نشھد أن اعداد ھذه الرسالة قد جرى تحت أشرافنا في فرع

: التوقیع : التوقیع

شالل مراد حسین .د:المشرف عباس عبد اهللا محمد .د:المشرف

أستاذ مساعد :المرتبة العلمیة أستاذ مساعد :المرتبة العلمیة

ث السرطان المركز العراقي لبحو:العنوان قسم العلوم /االحیائیة التقنیاتفرع :العنوان

المستنصریةةالجامع/والوراثة الطبیة لوجیة والجامعة التكن/التطبیقیة

االحیائیة التقنیاتتوصیة رئیس فرع

أعاله اوصي بآحالة الرسالة على لجنة المناقشة لدراستھا ینالمشرف ةبناءا على آقرار األستاذ

.وبیان الرأي فیھا

:التوقیع

علي عبد اهللا التمیمي.د.م.أ :رئیس الفرع

أستاذ مساعد :المرتبة العلمیة

فرع التقنیات األحیائیة/ قسم العلوم التطبیقیة / كنولوجیة تالجامعة ال :العنوان

:التاریخ

إقرار لجنة المناقشة

مستخلص تأثیر(نشھد بأننا أعضاء لجنة المناقشة اطلعنا على الرسالة الموسومة Petroselinumلمعدنوس االخام لبذور واوراق نبات ثیليالكحول األ crispum

المقدمة من قبل الطالبة )الخطوط الخلویة السرطانیة في الفئران البیض وفي بعضعالقة بھا بتاریخ ناقشنا الطالبة في محتویاتھا ومالھ )أفنان إسماعیل عبد الوھاب( الكیمیائیة تقنیاتنیل درجة ماجستیر في الووجدنا بأنھا جدیرة بالقبول ل ٦/٥/٢٠١٠ .یائیةحألا

ونالمناقش

:التوقیع : التوقیع

علي عبد اهللا التمیمي .د :االسم نصر فرحان عبد اهللا.د.أ :االسم

أستاذ مساعد :المرتبة العلمیة أستاذ :المرتبة العلمیة

عضوا رئیسا للجنة

:التوقیع : التوقیع

عباس عبد اهللا محمد.د :االسم عبد الرزاق اماني عبد الوھاب .د :االسم

أستاذ مساعد :المرتبة العلمیة أستاذ مساعد :یةالمرتبة العلم

مشرفا عضوا

: التوقیع

شالل مراد حسین.د :االسم

أستاذ مساعد : المرتبة العلمیة

مشرفا

مصادقة قسم العلوم التطبیقیة

: التوقیع

قاسم سلمان قاسم .د :االسم

أستاذ مساعد : المرتبة العلمیة

/ / : التاریخ

ولالفصل األ

Chapter One

الفصل الثاني

Chapter Two

الفصل الثالث

Chapter

Three

الرابعالفصل

Chapter Four

الخامسالفصل

Chapter Five

References

المصادر العربیة

اقرار المقوم اللغوي

تأثیر المستخلصات الكحولیة الخام لبذور واوراق نبات المعدنوس (شھد بان الرسالة الموسومة أ

Petroselinum crispumأجریت ) في الخطوط الخلویة السرطانیة والطبیعیة في الزجاج

.مراجعتھا من الناحیة اللغویة

:التوقیع

جاسم حلو نعمة :االسم

استاذ: اللقب العلمي

:التاریخ

university of technology, iraq - republic of iraq …...republic of iraq ministry of higher...

Documents