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La cromatografía puede definirse como una técnica que separa una mezcla desolutos basada en la velocidad de desplazamiento diferencial de los mismos que seestablece al ser arrastrados por una fase móvil (líquida o gaseosa) a través de unlecho cromatográfico que contiene la fase estacionaria, la cual puede ser líquida osólida.
CROMATOGRAFIA
La palabra Cromatografía significa Escribir en
Colores, porque cuando fue desarrollada los
componentes separados eran colorantes.
El botánico ruso Mijail Tswettestableció las ventajas de la técnica,adopto la terminología y definió losprocedimientos experimentalesbásicos para esta técnica, seconsidera que es el Padre de laCromatografía. En los años 30 y 40empezó su desarrollo y aplicación endiferentes procedimientos deexperimentación.
La cromatografía de gases es la técnica a elegir para laseparación de sustancias gaseosas. La Fase Móvil es un Gas(llamado Gas Portador) y la Fase Estacionaria puede ser un sólido(Cromatografía Gas-Sólido) o una Película de líquido de alto puntode ebullición (Generalmente Polietilén-Glicol o Silicón)recubriendo un sólido inerte (Cromatografía Gas-Líquido).
CROMATOGRAFIA DE GASES
El cromatógrafo de gases esta constituido normalmente por un suministro y una entrada delgas portador, un puerto de inyección, una columna normalmente localizada en el interior deuna cámara termostatizada (horno), un detector y un sistema computarizado para analizar,registrar e imprimir el cromatógrama.
Naturaleza de fase estacionaria
Naturaleza de fase estacionaria
Sólido Adsorción
Exclusión
Cambio iónico
Afinidad
Líquido Partición
Naturaleza de fase móvil Liquido Líquido-líquido (partición)
Líquido-sólido)adsorción, cambio iónico, exclusión, Afinidad.
Gas Gas-líquido (CGL)
Gas-sólido (CGS)
CROMATOGRAFIA DE GASES
CROMATOGRAFÍA GAS-SOLIDO (GSC)
En la GSC la fase estacionaria es sólida y la retención de los analitos en ella se produce mediante el proceso de adsorción.
Existen dos tipos de cromatografía de gases (GC): La cromatografía gas-sólido (GSC), y la cromatografía gas-líquido (GLC), siendo esta última laque se utiliza más ampliamente, y que se puede llamar simplementecromatografía de gases (GC).
CROMATOGRAFÍA GAS-LIQUIDO (GLC)
En la GLC, la fase estacionaria es líquida, y los analitos se separan mediantereparto. En ambas técnicas, el desplazamiento de la fase móvil, se realizamediante presión constante gracias al Regulador de Presión.
En el campo también pueden ser aplicados, principalmente en estudios decontaminantes del agua: insecticidas en agua, pesticidas en aguas de lagos,lagunas, ríos; desechos industriales descargados en ríos o lagunas.
En la industria del petróleo juega una función primordial, por medio de lacromatografía se pueden analizar los constituyentes de las gasolinas, lasmezclas de gases de refinería, gases de combustión
APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Efectos de los Hidrocarburos de Petróleo a la Salud Humana y MedioAmbiente
Es conocido que algunos hidrocarburos tienden a acumularse en los organismos através de las cadenas alimenticias con creciente riesgo de cáncer y de mutagénesis.Por ello los organismos más expuestos son los humanos. Estos contaminantesincluyen el benceno, los fenoles, y a los hidrocarburos policíclicos que son muypeligrosos por sus efectos cancerígenos.
APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Los efectos en la salud humana dependen de muchos factores, estos incluyen:
Tipo de hidrocarburo al que se encuentra expuesto Tiempo de exposición Cantidad de la sustancia química con la que se está en contacto.
APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Efectos al Medio Ambiente
Los hidrocarburos interfieren en el intercambio de gases entre el aire y elagua. Esto elimina el abastecimiento de oxígeno para los animales derespiración branquial y obstruye, en muchos casos, la posibilidad derespiración pulmonar de otros animales acuáticos.
Los hidrocarburos se adhieren a sedimentos, allí forman depósitos, losque se van liberando al ambiente lentamente durante mucho tiempo yactúan como fuentes de contaminación por un largo período.
APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Recolección de la muestra
La muestra de agua se recolecta en botellas color ambar de 1L con taparosca, dejando como mínimo dos centímetros de aire, y colocandopapel parafilm alrededor de la tapa para evitar contaminación oderrame de la muestra.
APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Proceso de Extracción
Para la extracción de hidrocarburos totales de petróleo en matrizacuosa se utilizó la extracción líquido-líquido.
Proceso de Purificación o Clean Up
El proceso de purificación se debe hacer a muestras demasiado turbias,caso contrario se puede omitir este paso.
APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Proceso de Concentrado y Almacenamiento
El extracto se concentra hasta aproximadamente 5mL y luego se pasa alKuderna-Danish dónde se concentra a 1mL, luego se coloca en un vial paracromatografía.Las muestras deben ser preservadas en refrigeración a 4ºC por 40 días.
Rotavapor utilizado en la Extracción Kuderna Danish utilizado en la Extracción
APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Los hidrocarburos totales de petróleo son cuantificados mediantecromatografía gaseosa con detector FID, inyectando un 1μL de muestra.
Cuantificación mediante cromatografía
Cromatógrafo Clarus 400
APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Las condiciones instrumentales para la cuantificación de los TPH’s en matrices líquidas de agua se recogen en la siguiente tabla.
APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFIA
Los TPH’s son identificados en un cromatograma en general, debido a la complejidad de identificar cada componente.
La cromatografía de gases es una técnica muy útil para de separación y determinación de compuestos orgánicos volátiles y semivolátiles que sean térmicamente estables. Acoplada a la espectrometría de masas, permite una identificación inequívoca de los distintos componentes separados sin necesidad de disponer de patrones de los mismos. En caso de poder comparar con los correspondientes patrones, se puede llevar a cabo, además, el análisis cuantitativo de los compuestos identificados.