1. Virus de lhpatite A et Ep Virus et marqueurs diagnostiquesVincent THIBAULTLaboratoire de Virologie Groupe HospitalierPiti-SalptrireAssistance Publique Hpitaux de Paris V.Thibault_janv.-121Hpatites viralesp mode de transmission prfrentiel parentralfco-oral fco oral Bnon A non BA, A1965 D 1972 Vaccin1977CE Vaccin 1990 1991(Vaccin)(V i ) F, G, TTV, autres V.Thibault_janv.-122

2. V.Thibault_janv.-123 Historique VHAq Avant J.C.: La Jaunisse (Ikterus / kirrhos) 1745 : Cockayne, hpatites pidmiques y , p p q 1908 : McDonald, "notion de virus" Reproduction de la maladie 1942 : p Volontaires (Voegt, Havens), Paul 1943 ingestion feces/serum Entit clinique :1995 : Vaccin17-18me sicle - 1923 Blumer - 1947 McCallum (VHA "infectious"1996 : recommandations -VHB "serum")Transmission nosocomiale (prparation vaccinale : variole, fivre jaune) Visualisation : 1973 (Feinstone)1999 : recommandations Dveloppement de la srologie : pidmiologie 1979 19 9 : culture (Provost et Hilleman)l (PH ll) 1981... : Clonage, Squences nuclotidiques 1991 Vaccination 1991 : Vi ti 2006 : Dclaration obligatoireV.Thibault_janv.-124 3. Virus de lhpatite A V.Thibault_janv.-125 Virus de lHpatite A Famille : PicornaviridaeCapsidep(entrovirus type 72) Genre : hpatovirus Taille 27-32 nm27-32nm Non enveloppARN (+) Structure icosadrique ARN simple brin brin,Vpg polarit positive li de faon covalente une protine Vpg V.Thibault_janv.-126 4. P1 prot. Capside P2P3 0 Structurales Non structurales74781B1C 1D2A2B2C 3 A-B 3C (PRO)3D (POL) AAAVpg 1A2.5kDa IRES3 Traduction 2A A-B (eIF-4G) (eIF 4G) poly-VP2 VP3VP1 2B 2C3C (PRO)3D (POL)protine VP42 227 AA?Vpg Protase Liaison NTP Hlicase ARNVP0Polymrase VP2VP3 VP1 RplicationR li ti VP4 2A VP2VP3VP1 X5 X12 VP4Protines de surface 2AMaturation finale immunognicit V.Thibault_janv.-127 Cycle de multiplication du VHA en culture de cellulesAttachementLibration Rplicationdu gnomeEspace+de Disse-TraductionSynthse+de la polyprotine-P3Maturation P2Rticulum endoplasmiqueP1EmpaquetageCanalicule Relargage biliaire V.Thibault_janv.-128 5. Interfrence du VHA avec les mcanismesde dfense immunitaireQu et al. PLoS Pathogens 2011Vol. 7;9:e1002169 V.Thibault_janv.-12 9Prdisposition gntique Hp. A / AllergieHAV-induced severe liver disease wasassociated with a 6-amino-acid insertion dh 6dMeilleure liaison du VHAin TIM1/HAVCR1 (157insMTTTVP), theForme + svregene encoding the HAV receptor. Kim et al. J Clin Invest. 2011;121(3):11111118. Chatenoud & Bach J Clin Invest. 2011; 121(3):848850 V.Thibault_janv.-12 10 6. VHA : physiopathologie Absence deffet cytopathique direct : d effet cytolyse rsultant du processus immun de dfense de lhte, mdiation cellulairedi ti ll l i mdiation humoraleV.Thibault_janv.-12 11 Proprits Physiques du VHAp y q AgentsStabilit Chaleur Autoclavage (121C, 20) Inactivation 100CInactivation 60C Stable heureSt bl 1 h temprature ambiante Stable 1 mois (selles, eaux, sols)Plusieurs jours sur surface sche4 h Sur les mainsh. S l i 4CStable plusieurs mois CongelStable des mois ou annesAcide-baseA id bpH 1 : stable 5 h Ht blh.PH 3-11 : stable au moins 30 U.V. InactivationChimiques Chlore, ozone, Inactivation glutaraldhyde, iode Alcool 70 3 : inactivation partielleV.Thibault_janv.-12 12 7. VHA et agents physiques ou chimiques http://www.invs.sante.fr/publications/2009/guide_hepatite_a V.Thibault_janv.-12 13Variabilit gntiqueP1 prot Capside prot. P2P3 0 StructuralesNon structurales 7478 1B1C 1D2A 2B 2C 3A-B 3C (PRO)3D (POL) AAAVpg 1A2.5kDaComparaison nuclotidiqueCi l tidi 6 Gnotypes : IA,B ; II; IIIA,B ; IV-VIHomme : gnotype I (90%), (III, II)Singes : IV, V, VISrotype unique Nombre limit dpitopes antigniques VP1, VP3Tests immunologiques T i l iVaccination (HM175, CR326)virus i iinactiv cultiv sur MRC 5ti lti MRC-5 V.Thibault_janv.-12 14 8. Rpartition mondiale des gnotypesGnotypes infectant lhomme en noir , les singes en rouge.Souche PA21 (gnotype IIIA), isole dun singe Panamanian Owl en vert. (gyp ), gCristina J, Costa-Mattioli M. Virus Res. 2007 Aug;127(2):151-7.V.Thibault_janv.-1215 Phylognie etfacteurs de risque n=1156 casesKlevens et al. Arch Intern Med.2010;170(20):1811-1818V.Thibault_janv.-1216 9. Epidemiology and Genetic Characterization of HepatitisA Virus Genotype IIA Vi us G n t p IA IBDiffusion du gnotype IIA en IIBFrance partir dune originepg Autochtones Ah Africaine IIA West Africa VP1 sequences (900 nt.) IIIBDesbois et al. J CLIN MICROBIOLOGY,IIIA2010, 48, 9:33063315V.Thibault_janv.-1217Gnotypes et svrit de lhpatite Globalement, pas de consensus pour un lien direct entre legnotype et la svrit de latteinte hpatique Donnes en faveur de facteurs lis lhte (TIM-HAVCR).Hepatitis A Virus Genotype and Its Correlation With the ClinicalOutcome of Acute Hepatitis A in Korea: 20062008 pYun et al. J. Med. Virol. 83:20732081 (2011)n=556 (497 ARN positifs) Sept. 2006 Aot 2008Gnotype IIIA induit des symptmes plus svresyp y ppComparative Analysis of Disease Severity Between Genotypes IAand IIIA of Hd f Hepatitis A VititiVirusYoon et al. J. Med. Virol. 83:13081314 (2011)n=111, comparaison de deux priodes 1998 et 1999 (IA) (n = 45) et 2009(IIIA) ( = 66) (nIIIA plus svre (ALAT et dure hospitalisation)V.Thibault_janv.-1218 10. VHA : Paramtres BiologiquesAc anti-VHA = hpatite A ancienne ou vaccinationIgM anti-VHA = hpatite aigu A (clinique)protection contre rinfection Ag foie IgGSymptomes IctreVHA Selles IgMVHA Sang 01 2 34 56 789 1024 Semaines 19V.Thibault_janv.-12IgM HAV uniquement bon escient ! 1%11 %82 % Faux positifs = 30%p Roque Afonso et al. CID 2006:42 -887Alaska : test "rflexe" si Ig-VHA totales + rflexe Ig VHAIg M HAV 32 % de faux + (Castrodale CID 2005:41;e86)Vaccination : 8 20 % dIgM VHA + dans les 2 3 semaines suivantlinjectionNE RECHERCHER LIgM anti-VHA QUEN CAS DHEPATITE AIGUV.Thibault_janv.-12 20 11. Marqueurs biochimiquesDiagnostic Transaminases (ALAT, ASAT) Bili biBilirubine Phosphatase alcaline Facteurs de coagulationFgSrologie +++IgM anti VHA : infection rcenteIgG anti VHA : infection passe ou vaccinationIgM et IgG anti VHA ti direct ( ) [ iDiagnostic diDi t (-) [uniquement d t dans l cadre dt d ]le d dtudes]Virmie : techniques sensibles (105 v./mL)Recherche de virus dans les selles, prolonge, importante(109v./mL), pidmiologieSaliveS li :IgG (ELISA)V.Thibault_janv.-12Gnome viral (RT-PCR) 21 Quantification de la virmie ?Limite dequantification 11 Hpatites A Normann et al., Journal of Medical Virology 72:1016 (2004) 72:10 16 Hpatite fulminante Evolution bnigneFujiwara K et al.50 Hpatites A dont 19 fulminantes (10 OLT) pf ( ) J. Med Virol. 2011 Feb;83(2):201-7. Hpatite fulminante :Hepatitis A viral load in relation to-virmie (p=0.03) * severity of the infection.-bilirubine -(p=0.04) *11 patients with fulminant hepatitis-age (p=0 09) age (p=0.09)10 with severe acute hepatitis-gnotype non IA (p=0.09)70 with self-limited acute hepatitisRezende et al., Hepatology 38:613-618 (2003)V.Thibault_janv.-12 22 12. Dure de la virmie: consquences cliniques et biologiques 6-75-6 2-5 Log particules/mLSuivi de 13 patients : dure moyenne 95 jours Suivi de 27 patientsdont 2 avec rechute (1-2 mois)High and Persistent Excretion of Hepatitis ADuration of viremia in hepatitis A virus pVirus in Immunocompetent Patients infection Tjon et al.Bower et al. Journal of Infectious DiseasesJournal of Medical Virology 78:13981405 (2006) 2000;182:127V.Thibault_janv.-1223 Hpatite A : le vaccinvirus inactiv AVAXIM 160U suspension injectable seringue prremplie Virus de lhpatite A souche GBM cultive sur cellules diplodes humaines MRC-p p 5 , inactiv HAVRIX 1 440 U Elisa/ml susp inj IM Ad en seringue HAVRIX 720 U Elisa/0,5 ml susp inj IM Enf/Nour en seringueEl / l E f/ Souche HM 175 du virus de lhpatite A cultive sur cellules humaines diplodes MRC5 p Le schma vaccinal habituel comprend 1 dose suivie dun rappel (1 dose) 6 12 mois plus t di l tard. Lapersistance des anticorpsanti-VHA aprs vaccinationnest actuellement pas connue . Les donnes disponibles suggrent la persistance des anticorps anti-VHA un niveau protecteur au moins jusqu 20 ans aprs primo-immunisation.Hepatitis A Vaccine versus Immune Globulin for Post-exposure ProphylaxisVictor et al. 2007 N Engl J Med 357;17V.Thibault_janv.-1224 13. Difficults diagnostiques En routine Adresser prlvementsau Centre national de rfrence du VHA Laboratoire de virologie Hpital Paul Brousse12-14 P l V ill t Couturier12 14 av Paul Vaillant C t i 94804 Villejuif cedexTel : 01 45 59 37 21http://invs.sante.fr/surveillance/cnr/liste V.Thibault_janv.-1225 SRAS ?Hpatite E ? Grippe V.Thibault_janv.-1226 14. Historique VHEDcouverte dpendante de la connaissance des virus des hpatites1955 : Inde, hpatite chez des personnes immunises contre le VHA, pidmie VHA idmi particulire. "NANBH" ti liEntit clinique 1980 - similitude avec lhpatite A :Inde : prvalence de l hpatite A importante lhpatiteEpidmie : autre virus des hpatites, contamination par leau1983 : reproduction de lhpatite non A-non B chez un volontaire p pimmunis contre VHA (Balayan)Hpatite J36J28-45, visualisation de particules virales > VHA (27-30nm)Reproduction de linfection chez le singe (cynomolgus)Hpatite "non A - non B transmission entrique (ENANB)non B"1990 : Reyes et al. clonage et squenage "VHE"1991 : Tam et al. VHE2000 : Panda et al. cDNA infectieuxV.Thibault_janv.-12 27Coloured transmission electron micrograph of hepatitis E virus particles (purple) Holmberg, Lancet Vol 376 September 11, 2010V.Thibault_janv.-12 28 15. VHEVirus non enveloppSphrique (SRV)Famille : Hepeviridae Surface irrgulireGenre : HepevirusCapside 27-34 nm 27 34 Symtrie icosadrique ARN simple brin hlice droite polarit + 7,5kbpoly-Apoly A extrmit 3 3StabilitAu laboratoire : instable(-70 +8C) Dconglation/conglationTractus GI : stable (pH) V.Thibault_janv.-1229 Organisation gnomique Non t N structuralest l StructuralesSt t l 7 200 nt ARN polarit +p3NC5 NC285109 7124 Poly-A5109ORF3 114 AA MeT Y ProPX Hel RdRp5123ORF2660 AA G notyp s Gnotypes 1-4 Protines P tiDIAGNOSTIC immunognesHtrognit gntiqueAu moins 4 groupes majeurs (