sp tests antipaludogrammes
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1
Travaux pratiquesTravaux pratiques
Test de chimiosensibilitTest de chimiosensibilitéé in vitro pour in vitro pour ll’é’évaluation de la sensibilitvaluation de la sensibilitéé de de Plasmodium Plasmodium
falciparumfalciparum aux extraits de plantesaux extraits de plantes
Marie Ange Rason, Laetitia Morin, Michel RatsimbasonMarie Ange Rason, Laetitia Morin, Michel Ratsimbason
et Milijaona Randrianarivelojosiaet Milijaona Randrianarivelojosia
Atelier Paludisme Atelier Paludisme –– 5eme 5eme ééditiondition19 F19 Féévrier au 30 Mars 2007vrier au 30 Mars 2007
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2
Phot
o: R
andr
iana
rivel
ojos
ia &
Tal
l, N
ov.
Phot
o: R
andr
iana
rivel
ojos
ia &
Tal
l, N
ov.
2003
2003
…… il y a un besoin permanent en nouveaux antipaludiquesil y a un besoin permanent en nouveaux antipaludiques
Antipaludiques, outil de lutte contre le paludisme : Antipaludiques, outil de lutte contre le paludisme : nombre limitnombre limitéé et det dééfifiéés par la rs par la réésistance des parasitessistance des parasites
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3ÉÉtapes cltapes cléé dans le ddans le dééveloppement de mveloppement de méédicamentsdicaments
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4
N
N
OH
HOMe
QuinineQuinine
N
CF 3
CF 3
N
H
OH
H
MefloquineMefloquine
N
NHN(CH 2CH 3)2
Cl
ChloroquineChloroquine
O
CH3
CH3
O
O
OOCH3
H
H
H
ArtemisinineArtemisinine
N
NH OH
CH 2-N(CH 2CH 3)2
Cl
AmodiaquineAmodiaquine
Structure Structure chimiqueschimiques dd’’antipaludiquesantipaludiques majeursmajeurs
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5
MMéédecine traditionnelle : traitement des symptômesdecine traditionnelle : traitement des symptômes
(page 73)
TazoTazo (fi(fièèvre, frisson, cvre, frisson, cééphalphaléée, lombalgie, fatigue e, lombalgie, fatigue ……) ) nn’’est pas forcement du paludismeest pas forcement du paludisme
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6
Plantes, paludisme et antipaludiquesPlantes, paludisme et antipaludiques
AmAméérique latine :rique latine :QuinineQuinine
Asie :Asie :ArtemisinineArtemisinine
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7
Phot
o :
Rand
riana
rivel
ojos
ia, 2
003
?
PaludismePaludisme et et plantesplantesafricainesafricaines
Plantes mPlantes méédicinales en Afrique : dicinales en Afrique : superstition ? rsuperstition ? rééalitalitéé ??
Comment dComment déécouvrir des couvrir des molmoléécules antipaludiques cules antipaludiques ààpartir des plantes ?partir des plantes ?
MMéédicaments obtenus dicaments obtenus àà partir partir des plantes de Madagascardes plantes de Madagascar
CatharanthusCatharanthus roseusroseus donne des donne des antianti--leucleucéémiquesmiques
CentellaCentella asiaticaasiatica donne un cicatrisantdonne un cicatrisant
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Plantes de Madagascar et de lPlantes de Madagascar et de l’’Afrique, Afrique, éétuditudiéées rigoureusement es rigoureusement par des grands laboratoirespar des grands laboratoires
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Premier pas :Premier pas : identifier des extraits ou des molidentifier des extraits ou des moléécules cules antiplasmodiales antiplasmodiales àà partir des plantespartir des plantes
CCHHIIMMIIEE
PlantesPlantes BiologieBiologie
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Premier pas :Premier pas : identifier des extraits ou des molidentifier des extraits ou des moléécules cules antiplasmodiales antiplasmodiales àà partir des plantespartir des plantes
CCHHIIMMIIEE
EthnobotaniqueEthnobotaniquechimiotaxonomiechimiotaxonomie
Collection de Collection de plantesplantes
Test antiplasmodial in vitroTest antiplasmodial in vitro
PlantesPlantes BiologieBiologie
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Premier pas :Premier pas : identifier des extraits ou des molidentifier des extraits ou des moléécules cules antiplasmodiales antiplasmodiales àà partir des plantespartir des plantes
CCHHIIMMIIEE
EthnobotaniqueEthnobotaniquechimiotaxonomiechimiotaxonomie
Collection de Collection de plantesplantes
Test antiplasmodial in vitroTest antiplasmodial in vitro
Test de cytotoxicitTest de cytotoxicitéé in vitroin vitro
Test in vivo chez la Test in vivo chez la sourissouris((antipaludiqueantipaludique, , toxicittoxicitéé))
PlantesPlantes BiologieBiologie
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Premier pas :Premier pas : identifier des extraits ou des molidentifier des extraits ou des moléécules cules antiplasmodiales antiplasmodiales àà partir des plantespartir des plantes
CCHHIIMMIIEE
Collection de Collection de plantesplantesTest antiplasmodial in vitroTest antiplasmodial in vitro
Test de cytotoxicitTest de cytotoxicitéé in vitroin vitro
Test in vivo chez la Test in vivo chez la sourissouris((antipaludiqueantipaludique, , toxicittoxicitéé))
PlantesPlantes BiologieBiologie
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Premiers pas : Premiers pas : Identification des extraits actifs in vitro Identification des extraits actifs in vitro contre contre Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum
SSéélection lection des plantesdes plantes
Collecte Collecte des plantesdes plantes
PrPrééparation paration des ddes déécoctcoctééss
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Premiers pas :Premiers pas : Identification des extraits actifs in vitro Identification des extraits actifs in vitro contre contre Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum
SSéélection lection des plantesdes plantes
Culture dePlasmodium falciparum
Collecte Collecte des plantesdes plantes
PrPrééparation paration des ddes déécoctcoctééss
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Premiers pas : Premiers pas : Identification des extraits actifs in vitro Identification des extraits actifs in vitro contre contre Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum
SSéélection lection des plantesdes plantes
Culture dePlasmodium falciparum
Collecte Collecte des plantesdes plantes
Test anti-Plasmodium
in vitro
PrPrééparation paration des ddes déécoctcoctééss
Evaluationde l’activité
antiplasmodiale
(Extrait aqueux ou organique) (Extrait aqueux ou organique)
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Premiers pas : Premiers pas : Identification des extraits actifs in vitro Identification des extraits actifs in vitro contre contre Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum
Culture dePlasmodium falciparum
Test anti-Plasmodium
in vitro
Evaluationde l’activité
antiplasmodiale
SSéélection des lection des extraits extraits àà fractionnerfractionner
Fractionnement Fractionnement (chromatographie)(chromatographie)
(fractions (fractions ou molou moléécules pures)cules pures)
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Premiers pas : Premiers pas : Identification des extraits actifs in vitro Identification des extraits actifs in vitro contre contre Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum
Culture dePlasmodium falciparum
Test anti-Plasmodium
in vitro
Chimie de planteChimie de plante(purification)(purification)
Evaluationde l’activité
antiplasmodiale
(mol(moléécules isolcules isoléées) es)
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ActivitActivitéé intrinsintrinsèèque antique anti--Plasmodium Plasmodium des extraits des extraits
de plantesde plantes
Effet des extraits de Effet des extraits de plantes sur lplantes sur l’’activitactivitéé des des antipaludiques standardantipaludiques standard
Premiers pas : Premiers pas : Que peutQue peut--on chercher on chercher in vitroin vitro ??
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Cycle biologique des plasmodies infectant lCycle biologique des plasmodies infectant l’’hommehomme
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Culture continue de Culture continue de Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum(reproduction in vitro du stade (reproduction in vitro du stade erythrocytaireerythrocytaire))
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Tests antiplasmodial Tests antiplasmodial in vitroin vitro
MicroscopiqueMicroscopiqueOMS, CTD/MAL/97.20 OMS, CTD/MAL/97.20 RevRev. 2 2001. 2 2001
ColorimColoriméétrique (pLDH, HRPII)trique (pLDH, HRPII)Moreno et Moreno et alal. . MedMed Trop 2001; 61:545Trop 2001; 61:545--5757NoedlNoedl et et alal. . AntimicrobAntimicrob Agents Agents ChemotherChemother 2002; 46:16582002; 46:1658--6464
Isotopique (hypoxanthine tritiIsotopique (hypoxanthine tritiéée)e)Desjardins, Clin Desjardins, Clin PharmacolPharmacol TherTher 1979; 26:3271979; 26:327--2929Le Bras, Le Bras, AmAm J Trop J Trop MedMed HygHyg 1983; 32: 4471983; 32: 447--5151
Mise en culture Mise en culture des parasitesdes parasites
CytomCytoméétrie en fluxtrie en fluxPattanapanyasatPattanapanyasat et et alal.. CytometryCytometry 1997; 27: 841997; 27: 84--9191
MicrofluorimetriqueMicrofluorimetrique ((PicoGreenPicoGreen, , SybergreenSybergreen))Corbett et al. Am J Trop Med Hyg 2004; 70:119-24
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Contraintes logistique et technique (communes)Contraintes logistique et technique (communes)
•• Clone de parasitesClone de parasites
•• ÉÉquipements de laboratoirequipements de laboratoire
•• Personnel compPersonnel compéétanttant
•• Bonnes pratiques de laboratoireBonnes pratiques de laboratoire
•• Souches de rSouches de rééfféérence de rence de P. falciparum P. falciparum ((3D7, FCM29, D6 3D7, FCM29, D6 ……))
Questionnements : Questionnements : -- laboratoires rlaboratoires réégionaux en Afrique ?gionaux en Afrique ?-- collaborations collaborations sudsud--nordnord ??
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Tests de chimiosensibilitTests de chimiosensibilitéé in vitroin vitro
MicroscopiqueMicroscopiqueOMS, CTD/MAL/97.20 OMS, CTD/MAL/97.20 RevRev. 2 2001. 2 2001
ColorimColoriméétrique (pLDH, HRPII)trique (pLDH, HRPII)Moreno et Moreno et alal. . MedMed Trop 2001; 61:545Trop 2001; 61:545--5757NoedlNoedl et et alal. . AntimicrobAntimicrob Agents Agents ChemotherChemother 2002; 46:16582002; 46:1658--6464
Isotopique (hypoxanthine tritiIsotopique (hypoxanthine tritiéée)e)Desjardins, Clin Desjardins, Clin PharmacolPharmacol TherTher 1979; 26:3271979; 26:327--2929Le Bras, Le Bras, AmAm J Trop J Trop MedMed HygHyg 1983; 32: 4471983; 32: 447--5151
CytomCytoméétrie en fluxtrie en fluxPattanapanyasatPattanapanyasat et et alal.. CytometryCytometry 1997; 27: 841997; 27: 84--9191
MicrofluorimetriqueMicrofluorimetrique ((PicoGreenPicoGreen, , SybergreenSybergreen))Corbett et al. Am J Trop Med Hyg 2004; 70:119-24
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ProcProcéédure:dure:Randrianarivelojosia et Randrianarivelojosia et alal, 2002, 2002Le Bras & Deloron, 1983Le Bras & Deloron, 1983
Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum (synchronis(synchroniséé))
PrPrééparation de la suspension parasitaire dans du RPSH (200paration de la suspension parasitaire dans du RPSH (200µµl l par puits sur plaque de 96 puits; 0,5% de parasitpar puits sur plaque de 96 puits; 0,5% de parasitéémie; 1,5% mie; 1,5% dd’’hhéématocrite; hypoxanthine tritimatocrite; hypoxanthine tritiéée 0,5 e 0,5 µµCiCi/puits)/puits)
Incubation 42h Incubation 42h àà 3737°°C (atmosphC (atmosphèère micro are micro aéérophile et humide)rophile et humide)
Evaluation de la radioactivitEvaluation de la radioactivitéé incorporincorporéée et calcul des CI50e et calcul des CI50
Conduite du test isotopique Conduite du test isotopique in vitroin vitro
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SchSchéématisation de lmatisation de l’’incorporation de lincorporation de l ’’hypoxanthinehypoxanthinetrititritiéée dans le dans l’’ADN du parasiteADN du parasite
+
Hypoxanthine-3H
ADN plasmodial ADN plasmodial (d(déébut du test) but du test) ADN marquADN marquéé au au
tritiumtritium
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Compteur Compteur àà scintillation liquide pilotscintillation liquide pilotéé par ordinateurpar ordinateur
. Comptage de la radioactivit. Comptage de la radioactivitéé((cpmcpm) ) àà ll ’’aide du aide du MicrobetaMicrobeta
.. Calcul des Calcul des CI50 CI50 (concentration (concentration inhibitrice 50%)inhibitrice 50%)
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27
IllustrationIllustrationEvaluationEvaluation de l'activitde l'activitéé antiplasmodiale antiplasmodiale
de plantes malgaches amde plantes malgaches amèères de la famille des res de la famille des Gentianaceae et des Meliaceae Gentianaceae et des Meliaceae
ThThèèse de Pharmaciese de PharmacieLLääetitiaetitia MorinMorin
Le 18 dLe 18 déécembre 2006 cembre 2006
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28
SSéélection des Plantes lection des Plantes àà éétudiertudier
Tachiadenus longiflorusTachiadenus longiflorus(Gentianaceae)(Gentianaceae)
felampelanafelampelana ou ou kifelapelanakifelapelana( celle qui a de jolies fleurs)( celle qui a de jolies fleurs)
SSéélectionnlectionnéée sur la base des e sur la base des renseignements ethnobotaniquesrenseignements ethnobotaniques
UtilisUtiliséée contre la fie contre la fièèvre (vre (tazotazo ou ou tazomokatazomoka en malgache) en malgache)
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29
Plantes Plantes éétuditudiééeses
Tachiadenus carinatusTachiadenus carinatus(Gentianaceae)(Gentianaceae)
Elle nElle n’’est pas utilisest pas utiliséée contre le e contre le «« tazotazo »»
SSéélectionnlectionnéée sur la base de la e sur la base de la chimiotaxonomiechimiotaxonomie
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30
Plantes Plantes éétuditudiééeses
Exacum quinquenerviumExacum quinquenervium(Gentianaceae)(Gentianaceae)
mamoahelymamoahely ( celle qui fructifie en ( celle qui fructifie en éétant petite)tant petite)
UtilisUtiliséée contre le e contre le «« tazotazo »»
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31
Plantes Plantes éétuditudiééeses
Malleastrum gracileMalleastrum gracile(Meliaceae)(Meliaceae)
AndriamagnamoraAndriamagnamora
UtilisUtiliséée contre le e contre le «« tazotazo »»
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32
Plante antipaludique de rPlante antipaludique de rééfféérencerence
Artemisia annuaArtemisia annua((AsteraceaeAsteraceae))
Fournie gracieusement Fournie gracieusement par la socipar la sociééttéé BionexxBionexx
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33
6 g de mat6 g de matéériel vriel vééggéétal + 40 ml dtal + 40 ml d’’eau distilleau distillééeeEbullitionEbullition pendant 5 minpendant 5 minLaisser refroidir 1h Laisser refroidir 1h àà temptempéérature ambianterature ambiante
Centrifugations puis filtrationCentrifugations puis filtrationSSééchage dchage d’’1 ml du d1 ml du déécoctcoctéé (estimation quantit(estimation quantitéé de matide matièère)re)Filtration stFiltration stéérilisante du reste de drilisante du reste de déécoctcoctéé sous hottesous hotteDilutions en cascade (6 concentrations dDilutions en cascade (6 concentrations d’’extraits de plantes)extraits de plantes)
PrPrééparation des dparation des déécoctcoctééss
![Page 34: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/34.jpg)
34
Points importants :Points importants :
Entretenir quotidiennement les culturesEntretenir quotidiennement les cultures
Eviter les contaminations (bactEviter les contaminations (bactééries ou champignons)ries ou champignons)
Surveiller les charges parasitairesSurveiller les charges parasitaires
Respecter les bonnes pratiquesRespecter les bonnes pratiquesde laboratoirede laboratoire
Culture continue de Culture continue de Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum
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35
Test de sensibilitTest de sensibilitéé sur 2 souches :sur 2 souches :P. falciparum P. falciparum FCM29FCM29 (r(réésistant sistant àà la chloroquine)la chloroquine)P. falciparum P. falciparum 3D7 (sensible 3D7 (sensible àà la chloroquine)la chloroquine)
MMééthode isotopiquethode isotopiqueBasBaséée sur le sur l’’inhibition de linhibition de l’’incorporation de lincorporation de l’’hypoxanthine hypoxanthine trititritiééee
Conditions du testConditions du testSynchronisation au sorbitol Synchronisation au sorbitol àà 5% 5%
Test antiplasmodial in vitroTest antiplasmodial in vitro
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36
RRéépartition sur la plaque 96 puitspartition sur la plaque 96 puits
RPMI-1640 glucoséPuits TémoinT
(extrait aqueux brut)(extrait aqueux brut)(extrait aqueux brut)
Plante A. fruitsPlante A. tigesPlante A. racines
H
TS1S1TS1S1TS1S1G
TS2S2TS2S2TS2S2F
S3S3S3S3S3S3S3S3S3E
S4S4S4S4S4S4S4S4S4D
S5S5S5S5S5S5S5S5S5C
TS6S6TS6S6TS6S6B
A
121110987654321
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37
Comptage de la radioactivitComptage de la radioactivitéé((cpmcpm) ) àà ll’’aide du compteur aide du compteur MicrobetaMicrobeta
Calcul des Calcul des CI50 CI50 (concentration inhibitrice (concentration inhibitrice 50%)50%)
Incubation des plaques Incubation des plaques pendant 24 h pendant 24 h àà 3737°°C;C;atmosphatmosphèère humidere humidemicroamicroaéérophilerophile
CongCongéélationlation--ddéécongcongéélationlation des des plaquesplaques
Collecte des parasites sur filtre Collecte des parasites sur filtre en fibre de verreen fibre de verre
![Page 38: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/38.jpg)
38
Illustration des résultats de test antiplasmodialavec les extraits de plantes
Décocté de feuilles de Artemisia annua contre la souche chloroquinorésistante Plasmodium falciparum FCM29
956613,48966291,74937550,877317860,433537350,22652080,11
0,0055150*
Inhibition de croissance de parasite
en 24 h (%)
Moyenne de radioactivité(coups/min)
Concentration de l’extrait(en µg/ml dans le puits)
CI50
![Page 39: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/39.jpg)
39
Inhibition de croissance de parasite
en 24 h (%)
Moyenne de radioactivité(coups/min)
Concentration de l’extrait(en µg/ml dans le puits)
9414081418,7872685709,4676375354,73711717177,3191493888,7221446444,30185570*
Illustration des résultats de test antiplasmodialavec les extraits de plantes
Décocté d’écorce de tiges de Malleastrum gracile contre la souche chloroquinorésistante Plasmodium falciparum FCM29
CI50
![Page 40: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/40.jpg)
40
Activités anti-Plasmodium
Exacum quinquenervium407,2374,6Fruits
386,2359,8Racines
504,1416,3Tiges
Tachiadenus longiflorus
422,0409,4Racines
548,0474,7Tiges
Artemisia annua (référence)
0,32 0,31 Feuilles
Tachiadenus carinatus309,1350,6Fruits
651,8540,0Racines
512,0627,1Tiges
276,1280,2Ecorce de tiges
445,4475,8Branches
Malleastrum gracile
P. falciparum 3D7P. falciparum FCM29Plantes testées
Moyenne des CI50 (µg/ml)
x900
![Page 41: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/41.jpg)
41
ActivitActivitéé antianti--Plasmodium Plasmodium des fractions obtenuesdes fractions obtenues
àà partir des extraits aqueux des plantes testpartir des extraits aqueux des plantes testééeses
Parasite utilisParasite utiliséé : :
Plasmodium falciparumPlasmodium falciparum FCM29 (FCM29 (chloroquinorchloroquinoréésistantsistant))
![Page 42: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/42.jpg)
42
Obtention des fractions Obtention des fractions àà partir partir des extraits aqueuxdes extraits aqueux
Culture deP. falciparum
Test anti-Plasmodium
DDéécoctcoctééss
Evaluationde l’activité
antiplasmodiale
extraits extraits àà fractionnerfractionner
FractionsFractions
ChromatographieChromatographie
Colonne de chromatographie
Cuve de CCM
![Page 43: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/43.jpg)
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Front de solvant
Ligne de dépôt
AE/MeOH/H2O
77/15/8Plante X
T A B C D E F
UV à 365nm
UV à 254nm
Acide sulfurique 50%
Regroupement des fractions Regroupement des fractions mmééthanoliquesthanoliques similaires obtenues similaires obtenues àà partir des partir des extraits aqueuxextraits aqueux
A et B fraction F1
C et D fraction F2
E et F fraction F3
![Page 44: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/44.jpg)
44
2424> 100> 100F2F2--MeOH sans tanninsMeOH sans tannins2626> 100> 100F2F2--MeOHMeOH3030> 100> 100F1F1--MeOH sans tanninsMeOH sans tannins1919> 100> 100F1F1--MeOHMeOH4949> 100> 100DichloromDichloromééthanethane3636> 100> 100HexaneHexaneFractionsFractions
504,1 504,1 ±± 112.9112.9Extrait aqueux brutExtrait aqueux brutàà 100 100 µµg/ml (%)g/ml (%)((µµg/ml)g/ml)Produits testProduits testééss
Inhibition maximale Inhibition maximale CI50CI50
ActivitActivitéés antis anti--Plasmodium Plasmodium des fractions obtenues des fractions obtenues àà partir du partir du ddéécoctcoctéé de tiges de de tiges de Exacum quinquenervium Exacum quinquenervium
![Page 45: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/45.jpg)
45
Que pouvonsQue pouvons--nous tirer de cette nous tirer de cette éétude ?tude ?
Les extraits des quatre plantes malgaches sLes extraits des quatre plantes malgaches séélectionnlectionnéées et es et testtestéées nes n’’ont pas dont pas d’’activitactivitéé antiplasmodialeantiplasmodiale
Pourtant les Meliaceae et les Gentianaceae sont aussi connues poPourtant les Meliaceae et les Gentianaceae sont aussi connues pour ur leurs vertus antipaludiques dans dleurs vertus antipaludiques dans d’’autres paysautres pays
KhayaKhaya grandifoliagrandifolia (Meliaceae), utilis(Meliaceae), utiliséée au Cameroune au Cameroun
AzadirachtaAzadirachta indicaindica (Meliaceae)(Meliaceae)
Mais extraction avec des solvants organiques.Mais extraction avec des solvants organiques.
![Page 46: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/46.jpg)
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Que pouvonsQue pouvons--nous tirer de cette nous tirer de cette éétude ?tude ?
Nos rNos réésultats ne justifient pas lsultats ne justifient pas l’’utilisation des plantes utilisation des plantes éétuditudiéées pour traiter le paludismees pour traiter le paludisme
«« TazoTazo »» ddéésigne plutôt signe plutôt «« la fila fièèvrevre »»
Donc ces plantes pourraient soitDonc ces plantes pourraient soit
-- agir agir sur la fisur la fièèvrevre, activit, activitéé antipyrantipyréétiquetique
-- ou agir ou agir sur dsur d’’autres pathogautres pathogèènesnes pouvant donner des maladies pouvant donner des maladies dont les signes cliniques comprennent la fidont les signes cliniques comprennent la fièèvre vre
![Page 47: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/47.jpg)
47
Que pouvonsQue pouvons--nous tirer de cette nous tirer de cette éétude ?tude ?
Pour notre laboratoire d’accueil, nous avons contribué àll’é’établissement de proctablissement de procééduresdurespour tester les décoctés des plantes dites « antipaludiques »
Inutile (perte de temps et Inutile (perte de temps et dd’’argent) de fractionner les argent) de fractionner les extraits aqueux avec des extraits aqueux avec des CI50> CI50> 1010µµg/mlg/ml
![Page 48: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/48.jpg)
48
CCHHIIMMIIEE
Ethnobotanique, Ethnobotanique, taxonomietaxonomie
SSéélection de plantelection de plante
Test antiTest anti--PlasmodiumPlasmodium
Test de cytotoxicitTest de cytotoxicitéé in vitroin vitro
Test antipaludique Test antipaludique in vivoin vivo (souris) (souris)
Autres modAutres modèèlesles (inhibition de la (inhibition de la polympolyméérisation de hrisation de héématine, stade matine, stade
hepatiquehepatique……))
PlantesPlantesBiologie Biologie ((efficacité? Innocuité?)
Chercher des molChercher des moléécules actives = cribler un grand nombre cules actives = cribler un grand nombre de plantes, criblage de plantes, criblage àà haut dhaut déébit, et bit, et éélargir les tests largir les tests biologiquesbiologiques
Perspectives Perspectives ……
![Page 49: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/49.jpg)
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Conclusion gConclusion géénnééralerale
![Page 50: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/50.jpg)
50DDéécouverte de nouveaux mcouverte de nouveaux méédicaments : processus long et cherdicaments : processus long et cher
![Page 51: SP Tests antipaludogrammes](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022052602/55a100611a28ab132e8b47a4/html5/thumbnails/51.jpg)
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Travaux pratiquesTravaux pratiques
Test de chimiosensibilitTest de chimiosensibilitéé in vitro pour in vitro pour ll’é’évaluation de la sensibilitvaluation de la sensibilitéé de de Plasmodium Plasmodium
falciparumfalciparum aux extraits de plantesaux extraits de plantes
Marie Ange Rason, Laetitia Morin, Michel RatsimbasonMarie Ange Rason, Laetitia Morin, Michel Ratsimbason
et Milijaona Randrianarivelojosiaet Milijaona Randrianarivelojosia
Atelier Paludisme Atelier Paludisme –– 5eme 5eme ééditiondition19 F19 Féévrier au 30 Mars 2007vrier au 30 Mars 2007