skripsi - umm institutional repositoryeprints.umm.ac.id/49819/23/pendahuluan.pdf · 20mg/disk....
TRANSCRIPT
SKRIPSI
SOFYAN ARIF
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI
ETANOL KULIT BUAH Citrus reticulata
TERHADAP BAKTERI Escherichia coli DENGAN
METODE DIFUSI CAKRAM
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
2019
ii
Lembar Pengesahan
iii
Lembar Pengujian
iv
KATA PENGANTAR
Bismillahirrahmanirrahim.
Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokaatuh
Alhamdulillahirrobbil’alamin, puji syukur kehadirat Tuhan Yang Maha
Esa yang senantiasa memberikan rahmat, hidayah, serta karunia-Nya sehingga
penulis dapat menyelesaikan karya tulis ini dengan baik dan sesuai dengan waktu
yang telah direncanakan. Penelitian tugas akhir yang berjudul “Uji Aktivitas
Antibakteri Fraksi Etanol Kulit Buah Citrus reticulata terhadap bakteri
Escherichia coli dengan metode difusi cakram” ini diajukan untuk memenuhi
persyaratan untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi
Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.
Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak lepas dari peranan
pembimbing dan bantuan dari banyak pihak. Untuk itu, dengan segala kerendahan
hati penulis ingin mengucapkan banyak terimakasihkepada:
1. Faqih Ruhyanudin, M.Kep., MB., selaku Dekan Fakultas Ilmu Kesehatan
Universitas Muhammadiyah Malang serta Hj. Dian Ermawati,
M.Farm.,Apt., selaku Ketua Program Studi Farmasi Universitas
Muhammadiyah Malang yang telah banyak memberikan kemudahan,
motivasi dan kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi
Universitas Muhammadiyah Malang
2. Siti Rofida S.Si., M.Farm., Apt., selaku Dosen Pembimbing I dan Ahmad
Shobrun Jamil, S.Si., MP., selaku Dosen Pembimbing II sekaligus dosen
wali saya yang dengan ikhlas dan selalu sabar dalam membimbing serta
memberikan dorongan moril maupun materil sehingga penulis dapat
menyelesaikan penelitian dengan baik.
3. Engrid Juni Astuti, M.Farm., Apt., selaku Dosen Penguji I dan Amaliyah
Dina A, M.Farm., Apt selaku Dosen Penguji II yang telah memberikan
saran dan kritik sebagai masukan kepada penulis sehingga penyusunan
skripsi ini menjadi jauh lebih baik dan yang telah mengizinkan penulis
serta memberikan fasilitas untuk melakukan penelitian.
4. Seluruh Dosen dan Staf Pengajar Program Studi Farmasi Universitas
Muhammadiyah Malang yang telah mendidikdan mengajarkan banyak
ilmu pengetahuan yang sangat bermanfaat sehingga penulis dapat
menyelesaikan pendidikan sarjana farmasi.
5. Para laboran Laboratorium Farmasi Mbak Evi, Mbak Susi, Mbak Meta,
mas ferdi dan mas dani yang telah membantu serta membimbing penulis
selama melakukan penelitian.
6. Kedua Orang tua tercinta bapak Sunawa Yunianto dan Ibu Siti Rodhliyah,
serta kakak dan adik Muhammad Ridwan, Devi Prawesti dan Ni’matul
v
Mauludiyah yang dengan senantiasa memberikan dukungan moril dan
materil, mendoakan, memberikan nasihat serta semangat sehingga penulis
dapat menyelesaikan skripsi serta program pendidikan sarjana farmasi.
7. om sulis,tante emi dan sekeluarga yang terus memberi semangat,
dukungan dan saran selama perkuliahan dan penyusunan skripsi hingga
saat ini.
8. Teman pendamping terbaik Wenni Fista Rika yang telah memberikan
semangat, dukungan serta menemani penulis selama penyusunan skripsi
dan kebersamaan selama perkuliahan sarjana hingga saat ini.
9. Kawan terbaik sekaligus teman sarjana Agung, Edo, Selvi, Murni, Icha
yang terus memberi semangat tiada henti, terimakasih atas kerjasama,
dukungan dan dorongan serta kebersamaan dalam setiap langkah
perkuliahan sarjana serta penyusunan skripsi.
10. Teman Tumpang Kontrakan (Rizal, Dwi, Fikri, Dimas, Ibnu, Anca dan
mas dewa) terima kasih atas tempat tidur , kebersamaan, kerjasama dan
dukungan selama perkuliahan hingga saat ini.
11. Teman Nongkrong (kak mexi, kak fuzan, kak ari, mas agung, da nom
grendis) dan owner “3mx coffee” bapak/mas Artabah yang selalu
mendukung, memberikan semangat, dan memberikan nasehat terhadap
penyusunan skripsi.
12. Teman-teman Farmasi D angkatan 2014 dan teman-teman Farmasi
angkatan 2014 lain yang tidak bisa disebutkan satu persatu, terimakasih
atas kebersamaan serta kerja sama selama menempuh pendidikan di
Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang.
Penulis menyadari bahwa masih banyak terdapat kekurangan dalam
penyusunan skripsi ini. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran
membangun dari berbagai pihak sehingga nantinya dapat memberikan hasil
terbaik dan bermanfaat bagi pembaca.
vi
RINGKASAN
Di negara Indonesia, diare merupakan masalah kesehatan masyarakat
karena morbiditas dan mortalitasnya yang masih tinggi. Survei morbiditas yang
dilakukan oleh Subdit Diare Departemen Kesehatan dari tahun 2000 s/d 2010
terlihat kecenderungan insidens naik. Pada tahun 2000 penyakit Diare 301 kasus
dari 1000 penduduk, tahun 2003 naik menjadi 374 kasus dari 1000 penduduk,
tahun 2006 naik menjadi 423 kasus dari 1000 penduduk dan tahun 2010 menjadi
411kasus dari 1000 penduduk. Diare merupakan penyakit yang disebabkan oleh
infeksi mikroorganisme meliputi bakteri, virus, parasit, protozoa, dan penularan
nya secara fekal-oral(Kemenkes RI, 2011)..
Escherichia coli sering menyebabkan diare yang sering terjadi di seluruh
dunia (Geo F, Janet S, Stephan A, 2008). Escherichia coli adalah bakteri Gram
negatif berbentuk batang dalam sel tunggal atau berpasangan, merupakan anggota
famili Enterobacteriacea dan flora normal intestinal yang mempunyai kontribusi
pada fungsi normal intestine dan nutrisi tetapi bakteri ini akan menjadi pathogen
bila mencapai jaringan di luar jaringan intestinal(Hera, 2004).
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan Razak dkk. (2013),
mengatakan bahwa tanaman jeruk banyak mengandung senyawa flavonoid,
saponin, tanin dan alkaloid yang mana senyawa tersebut berkhasiat sebagai
antibakteri. Menurut sultana dkk (2012) bahwa daya hambat dari kulit buah Citrus
Reticulata dalam konsentrasi 3µl/ml sebesar 12 mm terhadap bakteri Escherichia
coli. Sedangkan perbedaan pada penelitian yang akan di lakukan terletak pada
konsentrasi yang akan digunakan yaitu 5%,10%, dan 25%. kemudian untuk
pengujian antibakteri konsentrasi yang digunakan yaitu 4mg/disk,8mg/disk, dan
20mg/disk. Digunakan kloramfenikol 30µg untuk kontrol positif dan DMSO 2%
sebagai kontrol negatif. Media yang di gunakan yaitu MHA dengan suspensi
bakteri dengan tingkat kekeruhan 106
CFU/ml yang digores tipis diatas
permukaaan media. inkubasi dengan suhu 37 0C selama 24 jam dengan replikasi 3
kali. Dari penelitian pada fraksi etanol kulit buah Citrus reticulata terhadap
bakteri Escherichia coli yang dilakukan didapatkan hasil pada kosentrasi 5%
mendapatkan diameter rata-rata sebesar 8,66 mm, konsentrasi 10% sebesar 9,32
mm, dan konsentrasi 25% sebesar 11,52 mm dan kontrol positif kloramfenikol 30
µg yaitu 22,81 mm. dapat disimpulkan bahwa fraksi etanol kulit buah Citrus
reticulata memiliki potensi aktivitas antibakteri dan dapat dijadikan pengobatan
alternatif terhadap bakteri Escherichia coli
.
ix
DAFTAR ISI
Halaman
LEMBAR PENGESAHAN .................................................................................. ii
LEMBAR PENGUJIAN ...................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv
RINGKASAN ........................................................................................................ vi
ABSTRAK ........................................................................................................... vii
ABSTRACT ........................................................................................................ viii
DAFTAR ISI ......................................................................................................... ix
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xiii
DAFTAR TABEL .............................................................................................. xiv
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xv
DAFTAR SINGKATAN .................................................................................... xvi
BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ...................................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ................................................................................. 3
1.3 Tujuan Penelitian .................................................................................. 3
1.4 Manfaat Penelitian ................................................................................ 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................... 4
2.1 Tinjauan Umum Tanaman Jeruk Keprok (Citrus reticulata) ................ 4
2.1.1. Sejarah Citrus reticulata ............................................................ 4
2.1.2. Taksonomi dan Karakteristik Tanaman Jeruk Keprok............... 4
x
2.1.3. Morfologi Tanaman Citrus reticulata ........................................ 5
2.1.4. Habitat dan Distribusi Grafis ..................................................... 5
2.1.5. Manfaat Tanaman Citrus reticulata ........................................... 6
2.1.6 Kandungan Tanaman Citrus reticulata ....................................... 6
2.1.7. Tinjauan Skrining Fitokimia Tanaman Citrus Reticulata. ......... 7
2.1.8. Tinjauan Aktivitas Anti bakteri tanaman Citrus Reticulata ....... 7
2.2. Tinjauan Pustaka Escherichia coli ....................................................... 8
2.2.1. Taksonomi Escherichia coli ....................................................... 8
2.2.2. Morfologi Escherichia coli ........................................................ 8
2.2.3. Pewarnaan Gram ........................................................................ 9
2.2.4. Patogenesis Escherichia coli .................................................... 10
2.2.5. Terapi ....................................................................................... 11
2.2.6. Daya Kerja Antibiotik Kloramfenikol ..................................... 12
2.3. Tinjauan Tentang Ekstrak .................................................................. 12
2.4. Tinjauan Tentang Metode Ekstraksi .................................................. 13
2.4.1 Defenisi Ekstraksi ..................................................................... 13
2.4.2. Tujuan Ekstraksi....................................................................... 13
2.4.3. Jenis-jenis Metode Ekstraksi .................................................... 14
2.5. Fraksinasi ........................................................................................... 16
2.6. Tinjauan Tentang Pelarut ................................................................... 17
2.6.1. Etanol. ...................................................................................... 18
2.7. Uji Kepekaan Antimikroba Secara In-Vitro ...................................... 19
xi
2.7.1. Metode Difusi Cakram ............................................................. 19
2.7.2. Metode Dilusi ........................................................................... 19
2.7.3. Metode Bioautografi ................................................................ 20
2.8. Tinjauan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ........................................ 22
2.9. Tinjauan DMSO ................................................................................. 23
2.10 Standar Mc Farland ........................................................................... 24
BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ............................................................ 26
3.1 Bagan Kerangka Konseptual ............................................................ 26
3.2 Uraian Kerangka Konseptual ............................................................ 27
BAB IV METODE PENELITIAN .................................................................... 29
4.1 Bahan Uji ......................................................................................... 29
4.2 Objek Penelitian dan Tempat Penelitian .......................................... 29
4.3 Alat dan Bahan ................................................................................ 29
4.3.1 Alat Penelitian ........................................................................ 29
4.3.2 Bahan Uji ................................................................................ 30
4.3.4 Pengujian Difusi Cakram ........................................................ 30
4.4 Sterilisasi Alat dan Bahan ................................................................. 30
4.4.1 Sterilisasi Kering .................................................................... 30
4.4.2 Sterilisasi Basah ...................................................................... 31
4.5 Variabel Penelitian ............................................................................ 31
4.5.1 Variabel Bebas ........................................................................ 31
4.5.2 Variabel Terikat ...................................................................... 31
xii
4.6 Metode Penelitian ............................................................................. 31
4.6.1 Rancangan Penelitian .............................................................. 31
4.6.2 Kerangka Operasional ............................................................ 32
4.7 Prosedur Kerja .................................................................................. 32
4.7.1 Tahapan Persiapan .................................................................. 32
4.7.2 Tahapan Pengujian .................................................................. 35
4.8 Analisis Data .................................................................................... 37
BAB V HASIL PENELITIAN ........................................................................... 38
5.1 Pengecekan Pewarnaan Bakteri Uji .................................................. 38
5.2 Hasil Uji Aktivitas Antibakkteri. ...................................................... 38
BAB VI PEMBAHASAN ................................................................................... 41
BABVII KESIMPULAN .................................................................................... 44
7.1 Kesimpulan ....................................................................................... 44
7.2 Saran ................................................................................................. 44
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 45
LAMPIRAN-LAMPIRAN ................................................................................. 48
xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
Gambar 2. 1 Buah Citrus Reticulata ...................................................................... 5
Gambar 2. 2 Stuktur Kimia Kloramfenikol .......................................................... 12
Gambar 3. 1 Bagan Kerangka Konseptual………………………………… ......... 26
Gambar 4. 1 Skema Kerangka Oprasional………………………………………. 33
Gambar 4. 2 Standart Penggunaan standart Mc Farland ....................................... 35
Gambar 4. 3 Prosedur Pengujian Antibakteri dengan Metode Difusi Cakram ..... 38
Gambar 5. 1 Bakteri Escherichia coli berbentuk batang pendek. .......................... 39
Gambar 5. 2 Hasil Pengujian Difusi Cakram terhadap bakteri Escherichia coli .. 40
Gambar 5. 3 Diagram Perbandingan Zona Hambat .............................................. 41
xiv
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
Tabel 2. 1 Kandungan Kimia Citrus Reticulata ...................................................... 7
Tabel 2. 2 Bakteri Escherichia coli ......................................................................... 8
Tabel 2. 3 Konstanta dielektrik pelarut organik .................................................... 18
Tabel V. I Hasil rata-rata Diameter Zona Hambat Aktivitas Antibakteri terhadap
bakteri Escherichia coli. ........................................................................ 39
xv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran Halaman
Lampiran 1 Daftar Riwayat Hidup........................................................................ 48
Lampiran 2 Surat Pernyataan ................................................................................ 49
Lampiran 3 Surat Tugas ........................................................................................ 50
Lampiran 4 Skema Pembuatan Fraksi Etanol Kulit Buah Citrus reticulata ......... 51
Lampiran 5 Surat Determinasi Tanaman .............................................................. 52
Lampiran 6 Hasil Screening Fitokimia Fraksi Etanol Kulit buah Citrus reticulata
dengan KLT ....................................................................................... 53
Lampiran 7 Perhitungan Konsentrasi Setiap Disk ................................................ 56
Lampiran 8 Surat Validasi Penelitian ................................................................... 57
Lampiran 9 Dokumentasi Penelitian ...................................................................... 60
xvi
DAFTAR SINGKATAN
µg : Mikrogram
µl : Mikroliter
CFU : Colony Forming Unit
CLSI : Clinical Laboratory Standart Institude
Cm : Centimeter
DMSO : Dimethyl Sulfoxide
E.coli : Escherichia coli
KLT : Kromatografi Lapis Tipis
mm : Milimeter
MHA : Mueler Hinton Agar
45
DAFTAR PUSTAKA
Ajizah, Aulia. 2004. Sensitifitas Salmonella Typhimurium Terhadap Ekstrak
Daun Psidium guajava L. Journal bioscientiae. Volume 1, no 1. hal 31-38.
Berg, Howard C. 2004. E. coli in motion, Biological dan Medical Physics
Biomedical Engineering. New york: Springer verlag AIP press.
Brooks F. Geo, Carrol C. Karen, Butel S. Janet, Morse A. Stephen, Mietzer A.
Timothy. 2010. Medical Microbiology 26th Edition (1) : 13-401. Mc.
Graw Hill. New York.
Brooks, Geo F., butel, Janet S., dan Morse, Stephen A. 2007. Mikrobiologi
Kedokteran, Jawetz, Melnick & Adelberg. Terjemahan Staf Pengajar
Mikrobiologi FK Unair dari mikrobiology. Jakarta:EGC.
Brooks, Geo F., Butel, Janet S., Morse, Stephan A. 2005. Mikrobiologi
kedokteran. Alih Bahasa. Mudihardi E, Kuntaman,Wasito EB. Jakarta:
Salemba Medika, 317-27.
Campbhell, Neil A., Reece, Jane B., dan Mitchell, Lawrence G. 2002. Biologi,
Edisi Kelima-Jilid 2. Jakarta: Erlangga.
CLSI, 2019, Performance Standarts for Antimicrobial Susceptibility Testing, 29th
Edition.
Cowan, M., 1999. Plants Products as Antimicrobial Agent. Clinical
Microbiology Review; 12(4): 564-582.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia., 1995. Farmakope Indonesia Edisi
IV. Jakarta : Derektoral Jenderal Pengawasan Obat Dan Makanan.
F. Gulay Kirbaslar. Aydin Tavman. Basaran Dulger dan Gulen Turker. 2009.
Antimicrobial Activity Of Turkish Citrus Peel Oils. Department of
Elementary Education, Faculty of Hasan Ali Yücel Education: Istanbul
University, Vefa, Istanbul, Turkey.
Fauci, A.S., Kasper, D.L., Longo, D.L, Braunwald, E., Hauser, S.L., Jameson,
J.L., dan Loscalzo, Joseph. 2008. Harrison’s Principles of Internal
Medicine 17th
Edittion. USA: Mc Graw Hill’s Access Medicine.
G.A. Ayoola, O. O. Jonhson, T.Adelowoton, I. E. Aibinu, E. Adenipekun, A. A.
Adepojubello, H. A. B. Coker dan T. O. Odugbemi. 2008. Evaluation of
The Chemical Constituents and The Antimicrobial Activity of The
Volatile Oil of Citrus Reticulata Fruit (Tangerine Fruit Peel) From
South West Nigeria. African Journal of Biotechnology vol. 7 (13).
Gould, Dinah. 2003. Mikrobiologi terapan untuk perawat. Alih bahasa. Brahm
U. Jakarta: EGC.
46
Hardjoeno. 2007. Kumpulan Penyakit Infeksi dan Tes Kultur Sensitivitas Kuman
Serta Upaya Pengendaliannya. Makasar : Cahya Dinan Rucitra.
Hidayat, Rahmat. 2018. Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etanol Kulit Buah Citrus
reticulate Terhadap Pertumbuhan Staphylococcusc aureus Menggunakan
Metode Difusi Cakram. Skripsi. Program Studi Farmasi,Fakultas Ilmu
Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Malang, Indonesia.
Husain Shahnaz Sultana. Mohammed Ali. Bibhu Prasad Panda. 2012. Influence
of volatile constituents of fruit peels of Citrus reticulata Blanco on
clinically isolated pathogenic microorganisms under In-vitro. Asian
Pacific Journal of Tropical Biomedicine : S1299.
Jasim, A. R., 2012, Phytochemical Study of some Flavonoids Present in theFruit
Peels of Citrus reticulata Grown in Iraq. Kerbala Journal of
Pharmaceutical Sciences. Number 3.
Johani, E. 2008. Tanaman Perkarangan Pilihan. Bandung: Karya Kita Press.
Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. 2011. Buku Pedoman Pengendalian
Penyakit Diare. Direktorat Jenderal Pengendalian dan Penyehatan
Lingkungan. Kementrian Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta
Kunkel D. 2009. Escherichia coli (http:// www.astrograpich.com. diakses tanggal
23 April 2018).
Lung E, Acute Diarrheal Disease. 2003.in: Friedman SL, McQuaid KR,
Grendell JH, editors. Current Diagnosis and Treatment in
Gastroenterology 2nd edition. New York: Lange Medical Books, 131 –
50.
La Choviya Hawa , Bambang Susilo, Natalia Eka Jayasari. 2011. Studi Komparasi
Inaktivasi Escherichia coli dan Perubahan Sifat Fisik Pada Pasteruisasi
Susu Sapi Segar Menggunakan Metode Pemanasan dan Tanpa Pemanasan
Dengan Kejut Medan Listrik. Jurnal Teknologi Pertanian Vol. 12 No.1
31-39.
Nihayatul Milah, Siti Harnina Bintari, Dewi Mustikaningtyas. 2016. Pengaruh
Konsentrasi Antibakteri Propolis terhadap Pertumbuhan Bakteri
Streptococcus pyogenes secara In Vitro. Life Science 5 (2).
Nithiya T, Vijayalakshmi R. 2015. Antimicrobial activity of fruit extract of
Annona squamosa L. WJPPS. 4(5):1257-67.
Pelczar, Michael, J., E.C.S Chan. 1988. Dasar – Dasar Mikrobiologi, Jakarta : UI
Press.
Razak, Abdul., Aziz Djamal., Gusti Revilla. 2013. Uji Daya Hambat Air
Perasan Buah Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia) Terhadap Pertumbuhan
Bakteri Staphylococcus aureus Secara In Vitro.Jurnal Kesehatan
Andalas. 2 (1). 05-08.
47
Salyers AA, Whitt DD. 1994. Bacterial Pathogenesis a Molecular Approach.
USA: ASM Press.
Soelarso, B. 1996. Budidaya Jeruk Bebas Penyakit. Yogyakarta: Kanisius.
Statistik Perdagangan Luar Negeri Indonesia. 2006. Impor. Vol. I. Biro Pusat
Statistik, Jakarta .
Sulistyani, Nunung Eni Kurniati, Yakup, dan R. A. C. (2016). Aktivitas
Antibakteri Infusa Daun Lidah Buaya (Aloe barbadensis Miller). Jurnal
Penelitian Saintek, 12(34 mm), 120–128.
Sultana, H. S., Mohammed, A., Bibhu, P.O., 2012. Influence of volatile
constituents
of fruit peels of Citrus reticulata Blanco on vlinically isolated pathogenic
microorganisms under In-vitro. Asia Pacific Journal of Tropical
Biomedicine.
ELSIVIER., S, 1299-1302, 2012.
Syultonil, M. I., 2017, Uji Antiinflamasi Fraksi Etanol Kulit Buah Citrus
reticulata L. Pada Rattus norvergicus yang diinduksi karagenin. Skripsi,
Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang, Kota Malang.
Wasitaningrum. 2009. Uji Resistensi Bakteri Staphylococcus aureus dan
Escherechia coli Dari Isolat Susu Sapi Segar Terhadap Beberapa
Antibiotik.. Skripsi. Fakultas Farmasi, Univesitas Muhammadiyah
Surakarta, Surakarta.