Serpil Genç, Fetiye Kolaylı

Kocaeli Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Mikrobiyoloji AD

IV. KLİMUD Kongresi

Kasım 2017, ANTALYA

Amaç

Kocaeli Üniversitesi Tıp Fakültesi hastanesinde izole edilen karbapenem dirençli Klebsiella pneumoniae (KDKP) izolatlarının sahip olduğu, aktarılabilir karbapenemaz genlerinin saptanması

İzolatlar arasındaki genetik ilişkiyi belirleyerek ülkemiz için epidemiyolojik veri sağlanması

Giriş-1

Enterik bakteriler arasında karbapenem direncinin en yaygın gözlendiği tür K.pneumoniae’dır.

Avrupa’daki karbapenem direnç ortalaması 2015 yılında %8,1 olarak saptanmıştır.

Logan LK& Weinstein RA, J Infect Dıs. 2017 www.klimik.org.tr/2017/UAMDS-Verileri

Giriş-2 UAMDSS-“CAESAR” verilerine göre, ülkemiz invaziv K.pneumoniae izolatlarında karbapenem direnç yüzdeleri;

2013……%11 2014…………%28 2015………………%30 olarak bildirilmiştir.

Genellikle çoklu direnç genlerine de sahip olduklarından sebep oldukları enfeksiyonlar yüksek mortalite hızları ile ilişkilidir.

www.euro.who.int/CAESAR-Annual-report.2016 www.eucast.org/Resistance_mechanisms_v1.0 Nordmann at al. Clin Microbiol Infect. 2012

Yöntem-1

100 adet K. pneumoniae izolatı Ocak 2015-Şubat 2017

Vitek-2 (BioMérieux, Fransa) otomatize sistemi ile karbapenem grubu antibiyotiklerden herhangi birine azalmış duyarlılık

Agar dilüsyon yöntemi ile Minimum İnhibitör Konsantrasyon değerleri belirlendi*

* AMC, SXT ve TZP için disk difüzyon testi uygulandı

Yöntem-2

İki farklı Multipleks PZR** blaOXA-48, blaNDM ve blaKPC blaVIM ve blaIMP

Jel elektroforezi-görüntüleme “Epidemiyolojik Hasta Formu” ile hastane

kökenli (HK) ve toplum kökenli (TK) enfeksiyon ayırımı ve risk faktörleri araştırıldı.

**Poirel L, Walsh TR, Cuvillier V, Nordmann P. Multiplex PCR for detection of acquired carbapenemase genes. Diagn Microbiol Infect Dis. 2011;70:119-123.

Yöntem-3

HK enfeksiyon etkeni olarak belirlenen 84 K. pneumoniae izolatı arasındaki klonal ilişki PFGE yöntemi ile araştırıldı DNA izolasyonu CDC (PulseNet) tarafından önerilen

protokole göre uygulandı***

XbaI DNA restriksiyon enzimi ile kesim

Aynı protokolde belirtilen vuruş/süre de yürütüldü

***

Bulgular ve Tartışma-1

Antibiyotik Duyarlı

(S)

Orta Duyarlı

(I)

Dirençli

(R) MİK50 MİK90 MİK aralığı

AMP % 0 % 0 % 100 64 >64 32->64

AMC % 0 % 0 % 100 - - -

TZP % 0 % 0 % 100 - - -

CAZ % 1 % 1 % 98 >32 >32 0.5->32

CTX % 1 % 1 % 98 >16 >16 1->16

CİP % 2 % 4 % 94 8 >8 0.25->8

CN % 18 % 1 % 81 16 >32 ≤0.25->32

ETP % 0 % 2 % 98 32 64 1-64

MEM % 11 % 19 % 70 16 32 0.5-64

İPM % 16 % 28 % 56 16 32 0.5-64

AK % 39 % 23 % 38 16 128 ≤1->128

TG % 21 % 42 % 37 2 8 0.25->16

SXT % 34 % 3 % 63 - - -

Bulgular ve Tartışma-2 Risk Faktörü %

Yoğun bakım ünitesinde bulunma 53

Hipertansiyon 43

Malignite 40

Son bir ayda karbapenem kullanımı 39

Majör cerrahi 39

Diyabet 30

Üriner kateter 30

Son bir ayda sefalosporin kullanımı 29

Kardiyovasküler hastalık 29

İmmün süpresyon 27

Serebrovasküler hastalık 24

Kronik böbrek yetmezliği 24

Mekanik ventilatör 19

Pulmoner hastalık 14

Trakeotomi 11

Santral venöz kateter 11

Bulgular ve Tartışma-3

KDKP izolatlarının 95’i karbapenemaz genlerinden en az birini taşıyor Genlerin; %81.05’i blaOXA-48 %38.9’u blaNDM

%9.47’si blaKPC

%1.05’i blaVIM

blaOXA-48 ve blaNDM’nin birlikte bulunma sıklığı

%26.3

Bulgular ve Tartışma-3

Bulgular ve Tartışma-3

Bir izolat;

blaNDM ve blaVIM

genlerini

birlikte taşıyor

Bulgular ve Tartışma-3

İki izolat;

blaKPC ve blaNDM

genlerini

birlikte taşıyor

Bulgular ve Tartışma-3

Bir izolat;

blaOXA-48 ve blaKPC

genlerini birlikte

taşıyor

Bulgular ve Tartışma-3

Saptanan genler Örnek sayısı n(%)

HK TK

Toplam n(%)

blaOXA-48 40(%50.6) 11(%68,8) 51(%53.7)

blaNDM 9(%11.4) 0 9(%9.5)

blaKPC 6(%7.5) 0 6(%6.3)

blaOXA-48+NDM 20(%25,3) 5(%31,4) 25(%26.3)

blaKPC+NDM 2(%2,5) 0 2(%2.1)

blaOXA-48+KPC 1(%1,2) 0 1(%1.05)

blaVİM+NDM 1(%1,2) 0 1(%1.05)

Toplam 79(%83.2) 16(%16.8)

Bulgular ve Tartışma-4

PFGE ile

24 farklı klon saptandı

%63.09’u dört ana pulsotip içerisinde

İki haftalık süreçte (26.6.2015- 06.07.2015 ) dahili YBÜ’nde küçük bir salgının patlak verdiği belirlendi

Trakeal aspirat (5), Kan (1)

Bulgular ve Tartışma-4

Bulgular ve Tartışma-4

Sonuç

Multidrug ve pandrug dirence neden olabilen NDM enzimi (%38.9) Endemik ?!

Genellikle pandrug dirence neden olan KPC enzimi

(%9.47)

Ülkemizden ilk bildirim: OXA-48+KPC ve KPC+NDM

Teşekkürler…