serologi fk 15

PEMERIKSAAN SEROLOGI PEMERIKSAAN SEROLOGI TUBERKULOSIS, DEMAM TIFOID TUBERKULOSIS, DEMAM TIFOID

DAN SIFILIS DAN SIFILIS

Prof. Dr. JUSAK NUGRAHA, dr., Sp.PK Prof. Dr. JUSAK NUGRAHA, dr., Sp.PK (K-GH, K-PTI, K-AI) MS.(K-GH, K-PTI, K-AI) MS.

KULIAH FK ‘15KULIAH FK ‘15

PenyakitTuberkulosisMenyerang 1/3 penduduk dunia Indonesia menduduki peringkat ke 5Survey terbaru: prevalensi lebih

tinggi daripada perkiraan sebelumnya

Dampak sosio ekonomi besarMeningkatnya kekebalan thd OATMDR-TBXDR-TBTB + HIV

TB DI INDONESIATB DI INDONESIA

• PENYEBAB KEMATIAN KE DUA ( SKRT 92)• KASUS 445.000/TAHUN• PREVALENSI TB : 0,29 % ( SKRT 79-82 )• MENINGGAL 175.000/TAHUN• HIV + TB• MULTIPLE DRUG RESISTANCE ( RIF + INH )• USIA PRODUKTIF ( ¾ )

• SEPARUH TIDAK TERDIAGNOSIS !

TB : salah satu pembunuh terbesar bersama TB : salah satu pembunuh terbesar bersama AIDS dan malariaAIDS dan malaria

• Setiap tahun membunuh sekitar 2 juta orang dan Setiap tahun membunuh sekitar 2 juta orang dan bertambahnya 9 juta kasus barubertambahnya 9 juta kasus baru

• TB sebagai pembunuh utama bersama HIV/AIDSTB sebagai pembunuh utama bersama HIV/AIDS• Hampir setengah juta kasus baru multi-drug Hampir setengah juta kasus baru multi-drug

resistance (MDR) TB terjadi setiap tahunresistance (MDR) TB terjadi setiap tahun• Kasus Kasus extensively drug-resistantextensively drug-resistant (XDR) TB (XDR) TB

diketahui semakin meningkat (ancaman global) diketahui semakin meningkat (ancaman global)

BTA DAHAK MIKROSKOPIS LANGSUNG

• Keunggulan:– Murah, praktis, cepat, spesifik

• Kelemahan:– Kurang sensitiv

• Usaha meningkatkan sensitifitas:– Pelaksanaan SPS (Sewaktu-Pagi-Sewaktu)– Pengecatan Auramine, Rhodamine

RAPID DIAGNOSIS OF DRUG-RAPID DIAGNOSIS OF DRUG-RESISTANT TUBERCULOSISRESISTANT TUBERCULOSIS

1.1. Xpert MTB/RIFXpert MTB/RIF

2.2. line probe assay (LPA)line probe assay (LPA)

Xpert MTB/RIF testing we might be underestimating the burden of drug-resistant tuberculosis and indicate that country-specific probes need to be designed to increase the sensitivity of the Xpert MTB/RIF.

SEROLOGI & REVERSE SEROLOGI & REVERSE SEROLOGY FOR TB DETECTIONSEROLOGY FOR TB DETECTION

Serologi (antibodi detection) tidak dipakai Serologi (antibodi detection) tidak dipakai menggantikan BTA untuk diagnosis TBmenggantikan BTA untuk diagnosis TB

Hanya dipakai untuk membantu diagnosis Hanya dipakai untuk membantu diagnosis bersama pemeriksaan lain , terutama bersama pemeriksaan lain , terutama bila antigen sulit didapat.bila antigen sulit didapat.

Reverse serology (antigen detection) Reverse serology (antigen detection) dengan Rapid Test (lateral flow/ICT) : dengan Rapid Test (lateral flow/ICT) : metode mudah / cepat dan dapat metode mudah / cepat dan dapat membedakan MTB dan NTM membedakan MTB dan NTM

INDIKASI SEROLOGI TBINDIKASI SEROLOGI TB1.1. BTA DAHAK NEGATIFBTA DAHAK NEGATIF

2.2. TB EKSTRAPULMONUMTB EKSTRAPULMONUM

3.3. TB ANAKTB ANAK

4.4. SPESIFISITAS: TGT JENIS SPESIFISITAS: TGT JENIS ANTIGEN (REAKSI SILANG)ANTIGEN (REAKSI SILANG)

Fishman AP, Elias JA.Pulmonary disease and disorder.4ed, New york, Mcgrawhill,2008.p792

Patogenesis (Paradigma Th1 / Th2)

Mycobacterium tuberculosis

ESAT-6 protein lain

Faktor Virulensi

Infeksi

Respons imun

Proteksi

SellulerTh1 IFN-, IL12

Marka diagnostik

HumoralTh2 Sel B Ab

SehatTh1 >> Th2

Sakit (TB aktif)Th2 >> Th1

Th2 dominan

Th1dominan

DETEKSI TUBERKULOSIS DETEKSI TUBERKULOSIS LATENLATEN

Pengganti Uji tuberculin (PPD) : deteksi adanya serokonversi

Pengukuran IFN-γ dari limfosit T, setelah stimulasi dengan PPD/ESAT-6

• ELISPOT

• QuantiFERON-TB (IGRA = Interferon γ Release Assay) diakui ISTC

Adanya reaksi: pernah kontak dgn M. tb

Aktif atau Latent ditentukan oleh cutoff point.

TES SKRINING

1. Tuberculins Skin Test / Mantoux / PPD

2. IGRA (Interferon gamma release assay) : mendeteksi adanya Sel T memory terhadap Antigen TB, contoh:

a) QuantiFERON TB-Gold

b) T-Spot TB

Diagnosis of tuberculosis

Latent Infection Active tuberculosis

Smear examination

Solid and liquid culture

Identification

Susceptibility testing methods

TST

IFN- techniques

MolecularEpidemiology

RFLP

Spoligotyping

MIRU

Molecular methods-Detection-Identification-Detection of resistance

• RFLP (RFLP (IS6110)IS6110)

• SpoligotypingSpoligotyping

• MIRUsMIRUs

Molecular epidemiologyMolecular epidemiology

• Insertion sequence present exclusively in the M.tuberculosis complex: IS6110

• High polymorphism between no related strains regarding the number of copies and their localization in the chromosome.

• Advantages: High discriminative power.• Disadvantages: Slow, laborious and with

certain complexity.

Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP)

• The DR sequences (direct repeat) are repeated sequences of 36 bp in only one locus of the M.tuberculosis chromosome, separated by sequences of 34 to 41 bp.

• The technique is based on a PCR of the locus where the DR sequences are located. The amplification product is hybridized with oligos synthesized from the inter-DR spaces.

• The presence or absence of different DR allows a specific pattern for each strain.

• Advantages: Few DNA is required, easy interpretation• Disadvantages: Lesser discriminative power than the

RFLP.

Spacer oligonucleotype typing (Spoligotyping)

• Determine the number of repetitive units in 12 (15 or 20) different locus of one genetic sequence called “mycobacterial interspersed repetitive units (MIRUs)”. The number of repetitions is detected by PCR.

• The number of repetitive units in each locus is calculated by the size of the fragment amplified with the specifics primers.

• MIRU-VNTR is more discriminative than the spoligotyping and similar to the RFLP-IS6110.

• Advantages: rapid, simple and automatic.• Disadvantages: In study

Mycobacterial Interspersed Repetitive Units (MIRU)Mycobacterial Interspersed Repetitive Units (MIRU)

O'Garra A, et al. The immune response in tuberculosis. Annu Rev Immunol. 2013;31:475-527. doi: 10.1146/annurev-immunol-032712-095939.

Heterogeneity Resulting From M. tuberculosis Infection

KESIMPULANKESIMPULANDIAGNOSIS LABORATORIUM UNTUK TB

MASIH TERUS DIKEMBANGKAN• Baku emas: tetap Biakan / KulturBaku emas: tetap Biakan / Kultur• BTA dahak: ditingkatkan sensitivitasnyaBTA dahak: ditingkatkan sensitivitasnya• Metode lain: terutama pada BTA negatifMetode lain: terutama pada BTA negatif• Metode canggih: lebih cepat , lebih mahalMetode canggih: lebih cepat , lebih mahal• Perlu dipelajari untung ruginya setiap Perlu dipelajari untung ruginya setiap

diagnostik barudiagnostik baru• Lab perlu berhati-hati memilih tes diagnostik, Lab perlu berhati-hati memilih tes diagnostik,

sesuaikan dengan kebutuhan.sesuaikan dengan kebutuhan.

TERIMA KASIH ATAS PERHATIAN ANDA

UJI SEROLOGI DEMAM UJI SEROLOGI DEMAM TIFOIDTIFOID

Dr. Jusak Nugraha, dr, MS,SpPK (KGH,KIm,KT-I)Dr. Jusak Nugraha, dr, MS,SpPK (KGH,KIm,KT-I)

Bagian Patologi KlinikBagian Patologi KlinikFK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, SurabayaFK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, Surabaya

PEMERIKSAAN PEMERIKSAAN LABORATORIUM DEMAM LABORATORIUM DEMAM

TIFOIDTIFOID1.1. TES WIDALTES WIDAL

2.2. TES IgM SalmonellaTES IgM Salmonella

3.3. ELISAELISA

4.4. Deteksi cepat Antigen (reversed serology)Deteksi cepat Antigen (reversed serology)

5.5. BIAKAN / KULTUR DARAHBIAKAN / KULTUR DARAH

6.6. PCRPCR

7.7. BIAKAN URINE / TINJABIAKAN URINE / TINJA

INDIKASI

Membantu menegakkan Dx & menentukan Px dari penyakit DEMAM TIFOID

SUPAYA MENDAPAT PENGERTIAN YANG JELAS MENGENAI LANDASAN DASAR & INTERPRETASI TES, PERLU DIKETAHUI :

- Sifat-sifat antigenik dari S. typhi/paratyphi

- PATOGENESIS demam tifoid

Gambar 34. Struktur antigen Salmonella

Jenis AntigenJenis Antigen• Antigen O" :: polysaccharides associated with

the lipopolysaccharide (LPS) of the bacterial outer membrane.

• "H" antigens are proteins associated with the bacterial flagella (singular; flagellum).

• Pathogenic strains of Salmonella typhi carry an additional antigen, "Vi", so-called because of the enhanced virulence of strains that produce this antigen, which is associated with a bacterial capsule.

http://en.wikipedia.org/wiki/Polysaccharides

http://en.wikipedia.org/wiki/Lipopolysaccharide

http://en.wikipedia.org/wiki/Outer_membrane

http://en.wikipedia.org/wiki/Flagella

Salmonella Antigen O Antigen H Fase I

Antigen H Fase II

Grup A:S. paratyphi AGrup B:S. paratyphi BS. DerbyS. TyphimuriumS. HeildelbergGrup C:S. cholerae-suisS. pratyphi CS. oranienburgS. garoliS. thompsonS. bareillyGrup D:S. typhiS. enteritidisS. pullorum-gallinarumGrup E:S. weltevredenS. anatumGrup F:S. durhamS. worthingtonS. cubana

1, 2, 12

1, 4, 5, 121, 4, 5, 121, 4, 5, 12

(1), 4, 5, (12)

6, 76, 7, (Vi)

6, 76, 76, 76, 7

9, 12, (Vi)1, 9, 121, 9, 12

3, 103, 10

13, 231, 13, 231, 13, 23

a

bf, g

ir

cC

m, tiky

dg, m

-

re, h

bz

z29

-

1, 2(1, 2)1, 21, 2

1, 51, 5

-1, 61, 51, 5

---

z61, 6

enz 15

1, w-

38

Tabel 1. Antigen Salmonella yang menyebabkan demam tifoid dan paratifoid

Tabel 2. Antigen O yang spesifik pada demam tifoid

(WHO, 2003. Background document : The diagnosis, treatment and prevention of typhoid fever)

39

d. thorac

Sirkulasi Bakteriemi 1

Pl. Player

PATOGENESIS DEMAM TIFOID

Organ2

7-10 hari

Bakteriemi 2

HeparLien

Ren

Sutul

S. typhi 105

Gambar 36. Patogenesis demam tifoid

BAKTERIEMI 2 KAPSEL Vi

Fagositosis sukar

Jalur alternatif komplemen

Lisis

ENDOTOKSIN ( AG – O )

GEJALA KLINIS

7 – 10 HARI ( PERUBAHAN KAPSEL )

Fagositosis Pembengkakan organ-organ

Sel-sel imunokompeten

Tak ada bakteriemi (akhir mgg. Ke 2)

AGLUTININ

O H ViGambar 37. Imunopatogenesis demam tifoid

Gambar 38. Roseola di dada anak dengan demam tifoid

Sensitivity of TUBEX TF vs Antibody respond & Days after infection

Ag. pada permukaan sel

Ab.Aglutinasi

Tak larut

PRINSIP DASAR UJI WIDAL yi. UJI AGLUTINASI

Gambar 39. Prinsip dasar reaksi aglutinasi

ANTIGEN UNTUK TES WIDAL :

2. Ag. H ( flagella ); S. typhi yang motil + dg formalin 0,3%

1. Ag. O ( somatik ); S. typhi tak motil + dg alkohol abs.

Pengawet larutan phenol 0,5%

3. Ag. PA; S.paratyphi A + dg formalin 0,3%

4. Ag. PB; S.paratyphi B + dg formalin 0,3%

Ad 1, sebelum dipakai encerkan kons. Alk, 12%

PROSEDUR PEMERIKSAAN

- DI ATAS GELAS OBYEK

- 2 TETES ( 40 µl ) SERUM YG DIENCERKAN

- 2 TETES ( 40 µl ) SUSPENSI ANTIGEN (O, H,

PA, PB)

DIGOYANG

AGLUTINASI

t° RUANGAN 5 MENIT

POSITIF LANJUTKAN dg. PENGENCERAN SELANJUTNYA

NEGATIF STOP DILAPORKAN : NEGATIF

Pengenceran serum:

OH

PB

Dimulai titer : 1: 40

PA

Untuk : Dimulai titer : 1: 80

Dimulai titer : 1:20

AMBANG ATAS NILAI NORMAL

- DILAKUKAN PADA 120 ORANG SEHAT

- AGLUTININ O 1: 80

H 1: 80

PA 1: 40

PB 1: 160

KRITERIA DIAGNOSTIK DEMAM TIFOID

I. TITER AGLUTININ O atau

AGLUTININ O& H

2X ambang atas nilai normal

II. DALAM JANGKA WAKTU 5 - 7 HARI :

TITER MENINGKAT 4x

2.1. CARA KLASIK :

: Pengenceran serial dalam 4 baris

Baris 1 diberi Ag O,

Baris 2 diberi Ag H,

Baris 3 diberi PA,

Baris 4 diberi PB,

Inkubasi ; 37°C, 24 jam

2.2 CARA STOKES :

Prinsip hampir sama dengan cara klasik

2. Uji tabung.

PERBEDAANNYA

a. Serumnya ; waterbath 56°C, ½ jam

b. Diluent-nya ; PBS, pH 7,4.

c. Inkubasinya ; tbg O waterbath 37°C, 4 jam H, PA, & PB waterbath 50°C, 2 jam

Pembacaannya : - Segera- Lebih baik setelah semalam pada 4°C

`

Gambar 41. Aglutinat di dasar tabung uji Widal yang positif

Gambar 42. Endapan antigen pada dasar tabung uji Widal yang positif

FAKTOR-FAKTOR YANG PERLU DIPERHATIKAN.

4.1. Dr hasil 1X tes belum dapat ditarik kesimpulan yang berarti. Perlu ulangan setelah 5-7 hari

4.2. Harga normal tes Widal tabung.

Aglutinin O : 1/160

Aglutinin H : 1/160

Aglutinin PA : 1/80

Aglutinin PB : 1/320

4.3. Vaksinasi; aglutinin H dapat dipertahankan beberapa tahun,

4.4. Antibiotika ; dapat memperlambat kenaikan titer

4.5. Febris ; dapat memberikan kenaikan titer

4.6. Narkotik ; Ketagihan hasil pos. semu

4.7. Stadium penyakit ; mgg ke 1 neg./dlm batas normal mgg ke 2 titer mulai naik puncaknya mgg ke 5 - 6;

4.8. Obatnya-2 imunosupresif; hambat pembentukan aglutinasi

4.9. Peny.-2 tertentu ; agamaglobulinemia & keganasan.

4.10. Infeksi campuran ; mis TB milliair sering neg. semu.

IgM SalmonellaIgM Salmonella

- pemeriksaan antibodi terhadap antigen O9, pemeriksaan antibodi terhadap antigen O9, lebih spesifik dari Widallebih spesifik dari Widal

- semi kuantitatif,semi kuantitatif,

Ada beberapa metode:Ada beberapa metode:

1.Inhibitions Magnetic Binding Immunoassay (IMBI)

2.2. Rapid test (Immunochromatography / lateral Rapid test (Immunochromatography / lateral flow)flow)

Hasil: dalam skala warna

tc

1. Penetesan Brown Reagen 45 µl ke dalam V-shape wells.

2. Penambahan spesimen & kontrol 45 µl ke dalam V-shape dan dilarutkan.

3. Penetesan Blue Reagen 90 µl.

4. Inkubasi dan homogenasi 2 menit pada suhu kamar.

5. Pemisahan magnetik 5 menit dan pembacaan hasil.

58

Interpretasi hasil

1 2 3

Kontrol Neg Kontrol Pos Serum Sampel Pos

5 min

Pemisahan Magnetik

0 48

Interpretasi hasil

0 2 4 6 8 10

Skor 0-2: negatif, 3-10: positif

59

- percobaan: antigen (simulasi bahan terlarut pada bufer, serum, & urine; bakteri utuh pada media kultur)antigen mengikat partikel indikator dan menghambat ikatan partikel indikator dengan partikel magnet

Gambar 1a. Ilustrasi ikatan inhibisi antigen–antibodi pada pemeriksaan antibodi dan antigen

60

UJI SEROLOGIK UJI SEROLOGIK UNTUK SYPHILIS ( STS )UNTUK SYPHILIS ( STS )

Bagian Patologi KlinikBagian Patologi KlinikFK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, SurabayaFK UNAIR / RSUD Dr. Soetomo, Surabaya

STS MEMEGANG PERANAN PENTING DALAM Dx LAB. DR LUES SEBAB :

- Perjalanan penyakit lama

- Belum berhasil membenihkan T. pallida pada media pembenihan.

- Pemeriksaan mikroskop memberi bbp. kesukaran a.l. ; * bahan harus diambil dari lesi yang manifes dalam waktu singkat,

* sering memberi hasil negatif semu.

INFEKSI DG T.pallida AKAN MENIMBULKAN 2 JENIS Ab.

1. Ab Non-treponemal/reagin ; baru terbentuk setelah infeksi kel. Limfe regional ( kerusakan jaringan ).

2. Ab Treponemal ; bereaksi dg T.pallida /closely related strains.

Dapat dibedakan 2 jenis Ab. a. Group Treponemal Ab ; thd Ag somatik dr semua treponemab. Specific Treponemal Ab ; thd Ag spesifik dr T.pallidum.

IgG Treponemal Ab

ReaginIgM Treponemal Ab

Gambar 29. Kadar beberapa Ab selama perjalanan Syphilis

2560

640

160

40

10R

x

Ig. G-FTA-AbsTPHA

Ig. M-FTA-Abs.RPR /VDRL

Waktu

Kon

tak

Titer

Gambar 30. Pengaruh Rx pada titer Ab thd Syphilis

Gambar 31. Ulcus durum Lues I

Gambar 32. Syphilis Stadium II ( Condylomata Lata )

BEBERAPA STS YANG DAPAT DIKERJAKAN DI INDONESIA

1. Tes VDRL

2. Tes Treponema pallidum Immobilization ( TPI )

3. Tes Treponema pallidum Hemagglutination ( TPHA ).

4. Tes Fluorescence Treponemal Antibody Absorption ( FTA-ABS )5. Enzyme – linked Immunosorbant Assay ( ELISA )

UJI V.D.R.L.

Prinsip dasar : Uji presiptasi

Ag. : Lipoid Ag (Cardiolipin-lecithin-cholesterol)

Serum : Waterbath 56°C, 30 men. Inaktivasi C

Dikenal 2 macam teknik.

1. Uji Tabung ; dibaca secara Makroskopis.

2. Uji Slide ; dibaca secara Mikroskopis.

PEMBACAAN HASIL UJI V.D.R.L

A. Kualitatif : di bawah mikroskop ( pemb. 100 X )

a. Gumpalan besar/sedang Positif

b. Gumpalan kecil Positif lemah

c. Tiada gumpalan/sedikit kasar Negatif

B. Semi-kuantitatif : Pd serum yg pos./pos. lemah pengenceran secara serial Titer

Titer 1:4 ;Di Indonesia dianggap syphilis

Pembagian Uji VDRL atas Dasar Cara Pengambilan Sampel.

1. Uji VDRL Mikro

- 5 tetes drh ujung jari tengah +0,15 ml PZ

- Hasil dinyatakan secara kualitatif (+/-)

- Bila pos.,sesuai dengan titer 1 : 2

- Dipakai untuk survei lapangan/uji saring

2. Uji VDRL Makro

- 5 cc drh dr V. Cubiti. Hasil dinyatakan secara kualitatif maupun semi-kuantitatif ( titer )

TPHA. Prinsip Dasar.

- Hemaglutinasi Pasif

- Sebagai Ag ; T. pallida strain Nichol

- Sebagai carrier ; SDM Kalkun.

Sensitivitas : Baik kecuali L I.

Spesifisitas : Cukup baik

Penting : Tak dapat dipakai untuk mengikuti hasil Rx.

Gambar 33. Uji TPHA

POSITIF SEMU BIOLOGIK ( BFP )

Serologis pos. tanpa syphilis, dapat terjadi :

1. akut disebabkan penyakit-2 akut / stres ( imunisasi )

Seperti mononucleosis infeksiosa & demam tifoid,

2. menahun ( kronis ) disebabkan penyakit-2 menahun seperti frambusia, lepra, penyakit kolagen ( LE ), malaria, kehamilan dan narkotika.

Titernya umumnya rendah kecuali pada mononukleosis infeksiosa

VDRL MAKRO KUANTITATIF mempunyai Arti klinis yang penting sebab :

Merupakan garis Dasar untuk Evaluasi hasil uji laboratorium selanjutnya.

INTERPRETASI HASIL

Bila pada uji ulangan didapatkan :

1. Titer , menunjukan adanya ;

a. infeksi dengan T. pallida

c. relapse pd penderita-2 yg Serofast b. re-infeksi

2. Titer Rx adekuat pd pend Lues dini

3. Titer tetap reagin masih ada dalam drh stlh Rx

BILA STS TREPONEMAL POSITIF.

1. Sedang menderita lues ( peny. Aktif ) atau

2. Pernah menderita lues ttp telah sembuh.

Tak dapat untuk mengikuti hasil Rx.

Keunggulan Ig. M-FTA-Abs & Ig. M-ELISA.

1. Sebagai parameter biolgis apakah Rx masih diperlukan

2. Untuk Dx Lues kongenital pada bayi yang baru lahir Bila tes neg., tak menyingkirkan Dx Lues kongenita.

KESIMPULAN.

Paling Ideal ; Ig. M- ELISA ( Dx, keaktivan, mengikuti hasil Rx )

Di Indonesia ; TPHA Dx VDRL Aktivitas &

mengikuti hasil Rx

Neurosyphilis : VDRL Dx Jumlah sel Protein Total

Keaktivan & mengikuti hasil Rx

©2012 MFMER | slide-80

Traditional Algorithm

Non-treponemal test (e.g., RPR)

Treponemal test (e.g., FTA)

Advantages:

• Results show good correlation with disease status• Rapid, inexpensive screening method• Excellent option for laboratory with small throughput• Recommended by the CDC

Negative for syphilis

Non-reactive

Non-reactive

Syphilis Negative for syphilis

Reactive

Reactive

24


• Incidence of disease impacts the positive predictive value of the assay

http://www.cdc.gov/std/stats09/figures/33.htm

Rate per 100,000 population

0.2 0.21-2.2 >2.2

Cas

es (

in t

hous

ands

)

Year

Primary and secondaryEarly latentTotal syphilis

The Traditional Syphilis Algorithm:If it works, why change it?

26


Reverse Algorithm

Treponemal test (eg, EIA)

Non-Treponemal test (eg, RPR) Negative for syphilis

Non-reactive

Non-reactive

Syphilis Second Treponemal Test (e.g., TP-PA)

Reactive

Reactive

Non-reactiveReactive

Evaluation Required* Negative for syphilis

27


• Automated treponemal screening assays are available (i.e., EIA, MFI)2

• > 500 sera/9 hr shift by MFI vs. ~ 200 sera/9 hr shift by manual methods

• Objective interpretation of results

• Results from EIA or MFI can be interfaced with LIS

• Specific screening test for anti-T. pallidum antibodies

• Potentially increased detection of patients with early syphilis3:

• Among 560 patients with lesions, 18 (3.2%) were EIA (+), DFA (+) and RPR (-)

• Among 9,137 patients with EIA (+), RPR (-) results, 54 became RPR (+) on follow-up testing

Reverse Algorithm:Advantages

28


• Higher cost/sample

• Higher assay complexity

• Increased detection of patients with screen (+), RPR (-) results4,5:

• CDC - ~56% of EIA reactive samples are non-reactive by RPR

• How do we interpret these results?

Reverse Algorithm:Limitations

29


Case #1• 37-year-old with HIV

• Presents to primary care physician with a 2-week history of fatigue, intermittent fever and new rash on palms and soles

• Previously resolved genital lesion

• Syphilis serology ordered• Syphilis IgG by EIA: positive• RPR: positive, titer of 1:64

Reverse Syphilis Screening Algorithm:Result Interpretation

30


Case #1 Conclusion

• No further testing needed on this sample

• Interpretation: “Untreated or recently treated syphilis.” Follow CDC treatment guidelines4

• For treatment follow-up:

• Samples can be tested directly by RPR.

• A 4-fold decrease in RPR titers (eg, 1:64 to 1:16) is interpreted as response to therapy


31


Case #2

• 23-year-old female

• Evaluated during first-trimester, routine pregnancy visit

• Previously healthy

• Syphilis serology ordered

• Syphilis IgG by EIA: positive

• RPR: negative

• Second treponemal test, TP-PA: negative


32


Case #2 Conclusion

• Interpretation: “Probable false-positive screening test. Negative for syphilis.”

• False-positive serologic tests are not uncommon during pregnancy and confirmatory testing is often required

• Syphilis IgM testing not recommended for routine pregnancy screening


33


Case #3

• 50-year-old immigrant from Somalia

• Pre-kidney transplant evaluation

• Syphilis serology ordered• Syphilis IgG by EIA: positive• RPR: negative• TP-PA: positive


34


Case #3 Conclusion

• Interpretation: “Historical and clinical evaluation required.”

• During evaluation with provider, patient indicates no known history of treatment for syphilis.

• Patient treated for possible latent syphilis


35

Terima Kasih atas Perhatian Anda

serologi fk 15

Health & Medicine