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Seminário Municipal de
Hepatites Virais
Diagnóstico Laboratorial
Aline Gonzalez Vigani
Grupo de Estudos das Hepatites virais
Universidade Estadual de Campina - UNICAMP
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Diagnóstico Laboratorial
das Hepatites Virais Crônicas
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História Natural da Infecção pelo VHB
Infecçãoaguda
Óbito
Resolução
30-50 anos
Infecçãocrônica
Estabilização
Progressão
Cirrose
Cirrosecompensada
CHC Óbito
Cirrosedescompensada
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Diagnóstico Laboratorial
Hepatite BPesquisa dos marcadores sorológicos
ELISA (Ensaio Imunoenzimático)
HBsAg
HBeAg
Anti-HBc Total
Anti-HBc IgM
Anti-HBs
Anti-HBe
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VHB: estrutura
DNA dupla fita
AgHBs
Anti-HBs
AgHBc
anti-HBc
Partícula de Dane
DNA
Polimerase
AgHBe
(solúvel)
Anti-HBe
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HEPATITE B AGUDA
Diagnóstico Laboaratorial
- Dosagem de aminotransferases
- Coagulograma
- Bilirrubinas
- Sorologia
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Curso Sorológico da Hepatite B aguda
Evolução para Cura
Semanas após a exposição
HBeAg anti-HBe
anti-HBc
anti-HBc IgM
HBsAg
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 100
anti-HBs
sintomas
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Evolução da Hepatite B Aguda
HVB aguda
Adultos Crianças
95% cura5% infecção
persistente5% cura
95% infecção
persistente
Keeffe, E.B. et al; Clinical Gastroenterology & Hepatology, 2: 87-106, 2004
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Curso Sorológico da Infecção Crônica pelo VHB
Semanas após a exposição
anti-HBc IgM
anti-HBc
HBsAg
HBeAg anti-HBe
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 52 anos
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- HBsAg: primeiro marcador a aparecer no
soro.
Cura: deixa de ser detectado
Persistência > 6 m: infecção crônica
- HBeAg: marcador de replicação viral ativa e
infectividade
- HBcAg: não é secretado no soro, mas
abundante no fígado doente
Marcadores Sorológicos HVB
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- anti-HBc: IgM - infecção aguda
IgG - janela imunológica
- infecção crônica
- cura
- Anti-HBe: parada da replicação viral
- Anti-HBs: associado a cura
Marcadores Sorológicos HVB
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Hepatite B
Evolução para Cura
– Anti-HBsAg positivo
– HBsAg negativo
– Anti-HBC positivo
– Anti-HBe positivo
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Infecção Crônica VHB
– HBsAg positivo ≥ 6 meses
– HBeAg negativo / positivo
– Anti-HBs negativo
– ALT normal / elevada
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Anti-HBC puro
– Definição
– HBsAg negativo
– Anti-HBs negativo
– Anti-HBC positivo
– Possibilidades
– Falso positivo
– Janela imunológica
– Baixo título de Anti-HBs
– Infecção Oculta
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Casos Clínicos
( 1 ) ( 2 ) ( 3 ) ( 4 ) ( 5 ) ( 6 )
HBsAg - - + + + +
Anti-HBC - + + + + +
Anti-HBs + + - - - -
Anti-HBe - + + + - -
HBeAg - - - - + +
ALT 15 20 13 150 100 15
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Hepatite C
Tendência à
cronificação
(70 a 85%)
Maior causa de
transplante em
países desenvolvidos
Leva à cirrose
(20% a 30%) e ao CHC (4%)
170 milhões de
Portadores
(3%)
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História Natural - Hepatite C
Sexo feminino, jovem no momento da infecção
30 anos
Fígado
Normal
Infecção
AgudaInfecção
Crônica
80%
Hepatite
CrônicaCirrose
20%
Risco de
Carcinoma
1-4% por ano
20 anos
Bebida alcoólica, coinfecção
Sexo masculino, idade 40 anos
L
e
n
t
oTa
xa
de
pro
gre
ss
ão
ráp
ido
len
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História Natural - Hepatite C (HVC)
*carcinoma hepatocelular
Estável
80% (68%)
CHC*
Insuficiência
Hepática
25% (4%)
Progressão lenta
75% (13%)
Resolução
15% (15%)
HVC aguda
Cirrose
20% (17%)
HCV crônica
85% (85%)
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RNA Viral
Envelope
Core
do Envelope
Glicoproteínas(9400 nt)
55 – 65 nm
O vírus da hepatite C
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Hepatite CDiagnóstico Laboratorial
– Método indireto - Pesquisa de Ac específicos
• Sorologia - ELISA 3 geração
– Método direto – Pesquisa de componentes
virais
• RNA-PCR Qualitativo
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Diagnóstico Sorológico
Teste de Elisa-3 (anti-VHC)
- Teste padrão para “screening”
- Automatizado
- Boa reprodutibilidade
- Custo baixo
- Infecção aguda
- Detectado entre 3 a 6 meses
- Não diferencia entre infecção crônica e cura
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Diagnóstico Sorológico
Teste de Elisa-3 (anti-VHC)
- Diminuição de falso (+)
- Falso positivo em populações de baixa
prevalência (25%)
- Falso negativo em populações
imunossuprimidas
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RNA VHC qualitativo
– Reação em cadeia da polimerase
– Sensibilidade 50 UI /mL
– Teste confirmatório da presença de
infecção pelo VHC
– Positivo 1-2 sem após a exposição ao
VHC (aVHC -, ALTnl)
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Evolução da hepatite C aguda
Sintomas +/-
Tempo pós exposição
Tít
ulo
anti-VHC
ALT
Normal
0 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4
AnosMeses
RNA-VHC
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Evolução dos marcadores do VHC
Resolução espontânea (<20%)
infecção
Hepatite
aguda
RNA-VHC
Anticorpos
anti-VHC
ALT
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infecção
Hepatite
aguda Hepatite
crônica
RNA-
VHC
Anticorpos
anti-VHC
Evolução dos marcadores do VHC
Infecção Persistente (>80%)
ALT
ALT normal Ou ALT ondulante
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Avaliação
Genótipos
- Genótipo 1, 2, 3: distribuição
universal
- Genótipo 4 : África (Egito e Zaire )
- Genótipo 5 : África do Sul
- Genótipo 6 : Ásia
PositivoNegativo
Anticorpo Anti-
VHC (EIA)
RNA-VHC
PositivoNegativo
Testes adicionais:
Imunossuprimidos
Infecção ativa
Considerar:
BX hepática
Genotipagem
Sem infecção
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Casos Clínicos
( 1 ) ( 2 ) ( 3)
Anti-VHC + + -
RNA VHC + - -
ALT 150 20 150
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- Exames inespecíficos:
- aminotransferases
- bilirrubinas
- Coagulograma
- Sorologia
- IgM
- IgG
Hepatite A - Diagnóstico
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Hepatite A - Evolução
Sintomas
Infecção
VHA
Fezes
Semana