seminario degradación de colorantes listo

30
BIOTECNOLOGÍA BIODEGRADACIÓN DE Red 5B Direct, UN COLORANTE TEXTIL POR EL RECIENTEMENTE AISLADO Comamonas sp. UVS LORAYME MARÍA BOÓR!UE" RODRÍGUE" BARRAN!UILLAD.E.I.P, #.$%& 1

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BIOTECNOLOGÍA

BIODEGRADACIÓN DE Red 5BDirect, UN COLORANTE TEXTIL

POR EL RECIENTEMENTE

AISLADOComamonas sp. UVS

LORAYME MARÍA BOÓR!UE"RODRÍGUE"

BARRAN!UILLAD.E.I.P, #.$%&

1

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CONTENIDO

2

%. INTRODUCCIÓN 

#. MATERIALES Y M'TODOS2.1 Colorantes y productos químicos2.2 Aclimatación, la detección de microorganismos y las condiciones de cultivo2.3. Secuenciación de 16S rDA2.! "#perimento de decoloración2.$ %reparación del e#tracto li&re de c'lulas

2.6. An(lisis de la en)ima2.* "studios de decoloración y de &iodegradación2.. "-ecto del ini&idor so&re la actividad de la decoloración y la en)ima de lasc'lulas2./ "studio de 0toto#icidad2.1 An(lisis estadístico

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 3.1. "l aislamiento y la detección de &acterias de tinte decolorante3.2. "-ecto de la temperatura y el p so&re la decoloración del tinte3.3. "l rendimiento de decoloración de Comamonas sp. 4S en condicionesest(ticas y tem&lorosas y la eliminación de la D5

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CONTENIDO

3.!. "-ecto de la concentración de colorante en la decoloración y sucin'tica3.$. 7a decoloración de la adición repetida de partes alícuotas decolorantes y diversos colorantes3.6. 7as actividades en)im(ticas

3.*. "-ecto del ini&idor so&re la producción de en)imas ydecoloración3.. "studio de 0toto#icidad3./. An(lisis de producto de degradación

). CONCLUSIÓN

5. RE*ERENCIAS

3

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%. INTRODUCCIÓN

  !

1 a 1$8 colorante sepierde directamente a lasaguas residuales

 7a 9oculación,coagulación, adsorción,0ltración de mem&rana,

precipitación,o)oni)ación irradiación.

 Alta D:, D5,

color, p, y tam&i'ncontiene ionesmet(licos

compuestos recalcitrantescomo colorantes

Amplia gama demicroorganismos es capa)de decolorar una variedadde tintes incluyen algunas&acterias, ongos, levadurasy a

lgas

E+ i-+ie/t0 de ce1-2cteri/- c1ce- dedec0+0rr 3/ ti/te 0

c0+0r/te de 3/ 1+/tte4ti+ 3ti+i/d0 di6er--

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#.MATERIALES Y M'TODOS

$

2 .1 .C

    ol    o

    r    a    nt    e

    s    y

    p    r    o     d    u

    c     t    o    s    q    u     í    m     i    c    o    s

     2 .     2 .     A

    c     l     i    m    a     t    a    c     i     ó    n ,

     l    a

     d

    e     t    e    c    c     i     ó    n

     d    e

    m     i    c    r    o

    o    r    g    a    n     i    s    m    o    s

    y

    c    o    n     d     i    c     i    o    n    e    s

     d    e

    c    u     l     t     i    v    o

     2 .     3 .    s

    e    c    u    e    n    c     i    a    c     i     ó    n

     d    e     1     6

     S    r     D          A

     2 .     ! .    e

    "    p    e    r     i    m    e    n     t    o     d    e

     d    e    c    o     l    o    r    a    c     i     ó    n

     2 .     # .     $

    r    e    p    a    r    a    c     i     ó    n     d    e     l 

    e    "     t    r    a    c     t    o     l     i     %    r    e     d    e    c     &     l    u     l    a    s

     2 .     6 .    a

    n     '     l     i    s     i    s     d    e     l    a

    e    n    (     i    m

    a

     2 .     ) .    e

    s     t    u     d     i    o    s     d    e

     d    e    c    o     l    o    r    a    c     i     ó    n    y     d    e

     %     i    o     d    e

    g    r    a     d    a    c     i     ó    n

     2 .     * .     +

         e    c     t    o     d    e     l      i    n     -     i     %     i     d

    o    r

    s    o     %    r    e

     l    a    a    c     t     i    v     i     d    a     d     d    e

     l    a

     d    e    c    o     l    o    r    a    c     i     ó    n    y     l    a    e    n    (     i    m    a

     d    e     l    a    s    c     &     l    u     l    a    s

     2 .      .

    e    s     t    u     d     i    o     d    e

          i     t    o     t    o

    "     i    c     i     d    a     d

     2 .     1

     / .

    a    n     '     l     i    s     i    s

    e    s     t    a     d

     í    s     t     i    c    o

2.1. Colorantes y productos químicos

;ndustria te#til de<anpasand.;canl=ran>i,;ndia

2,2?A)ino?:is@3?etil&en)otia)ol?6?(cidosin-ónico @A:SBB ,

Compaía de químicaSigma

:D @:i&lioteca DigitalispanaB

 Catecol . 7a&oratoriode ;nvestigación deSisco,;ndia

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6

#.MATERIALES Y M'TODOS

Detección del colorante

decolorante cepas %acterianas

1 ml de caldonutriente quecontiene D$:@$ mg E lB

1 g

se incu%aron a 3/ 0 C con

agitación 12/ rpm

Comamonas sp.

y se utili(a para el

estudio adicional

decoloración

2.2. Aclimatación, la detección de microorganismos y condiciones de cultivo

condición est'tica

 Aclimatación

Colorante resco , aumento

de la concentración de @$a $ mg E l

5ranserencia de # m de varias alícuotas

$lacas de agar con colorante se

7noculan con /,1 m de

  6 a s  c

 o  l o  n  i a

 s  a  i s  l a

 d a s  s

 o  n 

  t  r a  n s

  , e  r  i d a

 s  a  l  c

 a  l d o  d

 e 

  n  u  t  r

  i e  n  t e s

$eptona # g8l ,aCl #g8l , +"tracto de

carne 3 g8l , 9unto con

dierentes tintes

$or otro lado

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*

2.3. secuenciación de 16S rDA

"l (r&ol 0logen'tico

 ecnologías Feneom&io 7td., ;ndia

Secuencia de nucleótidos en C:; @Centronacional para la in-orm(tica &iotecnológicaB y"<:7 @la&oratorio "uropeo de la &iologíamolecularB

#.MATERIALES Y M'TODOS

'

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#.MATERIALES Y M'TODOS

cultivo micro&iano deo,1 densidad óptica

!/ 0 C durante 13 - %a9ouna condición est'tica

colorante

#/ mg 8 l. 

# ml de la muestra ue

retirada en dierentes

intervalos de tiempo

#/// rpm durante 1# min

+l so%renadante se utili(ó para medir la

decoloración en los m'"imos de a%sor%ancia

de los colorantes

2.!. e"perimento de decoloración

Despu's de 13

1 m7 de caldode nutrientes

Comamonas sp. 4S en condiciones est(ticas yagitadas @12 rpmB, y a diversa temperaturasG@2?$ 0 C a p: 2;1!

asta 13 ciclos

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#.MATERIALES Y M'TODOS

/

)/// rpm durante 2/ min y

se suspenden )# mg 8 ml

en tampón de #/ m< de

osato de potasio

2.#. $reparación del e"tracto li%re de c&lulas

H C durante 13

2.6. an'lisis de la en(ima

 Actividades de lignina pero"idasa 7$, lacasa y tirosinasa se

anali(aron por espectrootometría en so%renadante de cultivo.

=ormación de

propanalde-ído en

3// nm

<edición de lao#idación deA:S a !2nm

Se determinó en una

me(cla de reacción de2 ml> que contiene

/,/1? de catecol en

tampón osato /,1 <

p: ),! mediante la

medición de quinona

catecol li%erada a !1/

nm

 Am&iente

#/// rpm durante 1# min

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1

#.MATERIALES Y M'TODOS

Decoloración

@iodegradación7dentiicación de los meta%olitos

2.). estudios de decoloración y de %iodegradación

#/// rpm durante 1# min

Despu&s de la decoloracióncompleta de D#@, el medio

decolorado

So%renadante, se utili(a

con un volumen igual de

acetato de etilo.

Se secaron en

Sulato sódico an-ídrido

os cristales se

disuelven en metanol

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11

#.MATERIALES Y M'TODOS

Durante el crecimiento

de Comamonas sp. 4S.

2.*. +ecto del in-i%idor so%re

la actividad de la decoloración

y la en(ima de las c&lulas

Actividades delignina pero#idasa@7;%B, lacasa ytirosinasa

2.. estudio de itoto"icidad

1/ semillas

D$: D$: I Comamonas sp. 4S.

 

2.1/. an'lisis estadístico

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(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 3.1. "l aislamiento y la detección de &acterias de

tinte decoloranteJptimos rendimientos G! H C y p 6,$

12

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13

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

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1!

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

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(.#. E8ect0 de + te1ert3r 9 e+ 1 -02re + dec0+0rci:/ de+ ti/te

1$

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

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(.(. E+ re/diie/t0 de dec0+0rci:/

de Comamonas -1. UVS e/ c0/dici0/e- e-t;tic- 9te2+0r0-- 9 + e+ii/ci:/ de + D!O.

16

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

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1*

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

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1

3.4. Efecto de la concentración de colorante en la decoloración y su

cinética

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

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1/

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN (.5. L dec0+0rci:/ de + dici:/ re1etid de 1rte-

+<c30t- de c0+0r/te- 9 di6er-0- c0+0r/te-.

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(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

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(.&. L- cti6idde- e/i;tic-, ie/tr- =3e +dec0+0rci:/ e/ c3+ti60 di-c0/ti/32.

21

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

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(.>. E8ect0 de+ i/?i2id0r -02re + 1r0d3cci:/ de e/i- 9 dec0+0rci:/

22

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

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(.@. E-t3di0 det0t04iciddB iesgos am&ientales y de

salud graves.B 7a germinación de las

semillas -ue completamenteini&ida, cuando las semillasse trataron con $ ppm de

concentración de D$:.

23

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

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2!

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

.. A/;+i-i- de 1r0d3ct0 de derdci:/

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2$

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

Ó

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26

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

Ó

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2*

(. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 

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B n microorganismo aislado Comamonas sp. 4S tiene lacapacidad para decolorar y degradar D$: en meta&olitos notó#icos.

B ;ni&ición signi0cativa en las actividades lignina pero#idasa ylacasa en presencia de a)ida de sodio >unto con la disminución

signi0cativa de la decoloración del tinte indica principal -unción deestas en)imas en el proceso de decoloración del colorante.

B Capacidad de este organismo para decolorar diversos colorantes

te#tiles indica su aplica&ilidad comercial.

B 7as condiciones optimas de las Comamonas sp. 4S para reali)arla decoloración y la &iodegradación es de ! HC y p 6,$.

2/

). CONCLUSIÓN 

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FAC;ASK..

3