Universidad Escuela Colombiana de Carreras Industriales

(UECCI)

Materia: Biología y Laboratorio – Segundo Informe de Lab.

Daniel Felipe Galeano Sánchez

Yeimy Lorena Prieto Rojas

Laura Katerine Rodríguez Contreras

Lina María Rodríguez Pinera

Grupo 1DM

BOGOTA D.C

2015

Procedimiento A continuación se hará una descripción del proceso que se realizó en la práctica de laboratorio.

A) Detección de Carbohidratos: Prueba de Benedict: Se debe pelar y triturar parte de la papa y de la pera, después de haberlo hecho se mezcla con un poco de agua y se procede a sacar el zumo. (Como se ve en la imagen)

Se Marcan cuatro tubos de ensayo con los números del 1 al 4. Después de haberlo hecho, se adicionará (Pera, Papa, Agua y Glucosa) así:

Agregar 1 ml de reactivo de Benedict en cada tubo, se mezcla y después se pone

calentar los tubos durante diez minutos en baño de maría (Imagen parte 1 y 2)

Resultados

Tubo N°1 (Pera): Después de haber agregado 1ml de Reactivo de Benedict, este reactivo

cambia su color, y se pone Verde Musgo, se pone en baño de maría en un Becker que

esté previamente lleno con agua para realizar dicho baño (Parte 2. De la imagen) cuando

su Tº subió gracias al baño de maría, pasó del color Verde M. al Amarillo.

Tubo N°2 (Papa): Se hace el mismo procedimiento que con la Pera, después de haberlo

hecho su color inicial es café pero al agregarle el reactivo se nota que partes del color

azul que contiene el reactivo junto con el baño de maría; éste comienza a hervir y se torna

a un color Gris Verdoso y algo espumoso.

Tubo N°3 (Agua): Se ponen 3ml de agua en un tubo de ensayo y se le agrega el reactivo

de Benedict, al hacerlo se ve un azul con transparente, luego se pone en el baño maría al

igual que las anteriores muestras, al haberlo hecho se descubre que el color no cambia a

pesar de que sube su Tº.

Tubo N°4(Glucosa): Se vierte 3ml de una solución de glucosa al 20% en un tubo de

ensayo, se le agrega el reactivo de Benedict. Al igual que el agua se ve de color azul

claro, al ponerla en el baño maría, y al aumento de su Tº se torna de un color naranja

intenso.

Prueba de Lugol Básicamente se hace el mismo procedimiento que se hizo en la prueba con el reactivo de

Benedict, a excepción de que en esta prueba se excluye la parte del baño de maría, se

aplican tres mililitros en cada tubo de ensayo (se marcan del 1-4). Al haberlo hecho se

aplica un mililitro de reactivo de Lugol

Resultados:

Resultados

Tubo N°1: Se pela y se tritura una pera hasta sacarle 3ml del sumo (Como se hace con la

papa) y se vierte en un tubo de ensayo, se procede a agregarle 1ml de Lugol, al agregarle

este reactivo, se agita y su color cambia para poderse ver de un color café.

Tubo N°2: Se pela y tritura la papa, para sacar 3ml del sumo (con un poco de agua) en

un tubo de ensayo, luego se le agrega 1ml de Lugol, se agita un poco e inmediatamente

se torna de un color negro (Esto se debe a la reacción que tiene el almidón con el Lugol).

Tubo N°3: Se ponen aproximadamente 3ml de agua en un tubo de ensayo y se le agrega

el Lugol, se agita y esté se tornará de un color naranja claro.

Tubo N°4: Se vierten aproximadamente 3ml de glucosa al 20% en un tubo de ensayo, se

procede a agregarle el Lugòl, y al hacerlo se observará este reactivo de un color naranja

oscuro.

B) Detección de lípidos:

Prueba de Sudan

Se Marcan tres tubos de ensayo con los números del 1 al 3. Después de haberlo hecho,

se adicionará (Agua y jugo de pera/Papa) así:

Agregar 1 ml de reactivo de Sudan en cada tubo y se mezcla.

Resultados

Tubo N°1 (Agua y Aceite): Después de haber agregado 1ml de Reactivo de Sudan, a la

mezcla del agua con el aceite este torna su color, a un rosado claro, se notarán unos

puntos (lípidos), donde la parte de abajo que es el agua queda más oscura (En la imagen

PARTE 2).

Tubo N°2 (Agua y Zumo): Se hace el mismo procedimiento que con el Agua y el Aceite,

después de haberlo hecho; su color inicial es café amarillento pero al agregarle el reactivo

se descubre que su color cambia y se vuelve un café con rosado.

Tubo N°3 (Agua): Se ponen 2ml de agua en un tubo de ensayo y se le agrega el reactivo

de Sudan, al hacerlo su color cambia y se vuelve en un rosado oscuro.

C) Detección de proteínas:

Prueba de Biuret Se Rotulan cuatro tubos de ensayo con los números del 1 al 4. Después de haberlo

hecho, se adicionará (Agua, Gelatina sin sabor y la albúmina del Huevo) así:

Agregar 1 ml de reactivo de Biuret en cada tubo y se mezcla.

Tubo N°1: Se ponen 2ml de agua en un tubo de ensayo y se procede a agregarle el

reactivo Biuret, tornándose de color azul claro.

Tubo N°2: Se pone un cuarto de solución de gelatina sin sabor para proceder a hacer el

baño de maría, después se sacan 2ml y se pone en un tubo de ensayo, se le agrega el

Reactivo Biuret, se agita y se torna de un color lavanda con un poco de espuma en la

parte de superior.

Tubo N°3: Se saca la clara del huevo más conocida como la Albúmina, se vierte en un

tubo hasta completar aproximadamente 2ml. Se aplica el reactivo de Biuret, se alcanza a

ver de color azul dispersado; al mismo tiempo se puede ver del color de la clara del huevo

(amarillo transparente).

Tubo N°4: Se ponen 3ml de zumo de pera mezclado con el zumo de la papa, después de

haber hecho esto se le agrega el Reactivo Biuret, se agita y se ve de color café oscuro.

Cuestionario 1. ¿Por qué en los experimentos se incluye un tubo con agua? -Se incluye un tubo con agua para mirar la reacción que esta va a tener con algunos de

los reactivo que se le agregan a los otros tubos con muestras.

2. En la detección de carbohidratos, ¿Cuál de los tubos tiene más azúcares reductores?, ¿por qué? -En la detección de carbohidratos, el tubo que tiene más azúcares reductores es el que contiene la pera, ya que la pera es una fructosa, una azúcar monosacárida, además la papa es un almidón o sea un polisacárido que está compuesto por varios monosacáridos, teniendo en cuenta esto las azúcares reductores Los monosacáridos y la mayoría de los disacáridos poseen poder reductor, que deben al grupo carbonilo que tienen en su molécula. Este carácter reductor puede ponerse de manifiesto por medio de una reacción redox llevada a cabo entre ellos y el sulfato de Cobre (II). Las soluciones de esta sal tienen color azul. Tras la reacción con el glúcido reductor se forma óxido de Cobre (I) de color rojo. De este modo, el cambio de color indica que se ha producido la citada reacción y que, por lo tanto, el glúcido presente es reductor. Los azúcares o carbohidratos pueden ser monosacáridos, disacáridos, trisacáridos, oligosacáridos y polisacáridos. Los monosacáridos reaccionan de acuerdo a los grupos hidroxilo y carbonilo que poseen. 3. ¿Cuál es la función del almidón para las plantas? El almidón es una azúcar polisacárido, es una azúcar compleja ya que está compuesta

por muchos o varios monosacáridos, formado por múltiples sub unidades de glucosa.

Como muchos seres vivos obtenemos energía a partir de esta molécula, es fundamental,

que las plantas fabriquen almidón, y lo guarde, los alimentos que más contienen almidón

son los tubérculos como la papa, camote etcétera.

4. ¿Cuál es el principal componente de la clara de huevo y de la gelatina comercial?

Las claras de huevo son una de las principales fuentes de proteína. En esta lista

clasificatoria, las claras de huevo se encuentran las primeras, seguidas de la carne

magra, el pollo y el pescado. En más de medio huevo encontramos 6 g de proteína, de

hecho, estas proteínas provienen de la clara. La clara de un solo huevo nos aporta 4 g de

proteína, sin la grasa y otros detrimentos que están en la yema. Por lo tanto, si comes

sólo la clara, no ingerirás nada de grasa, a menos que la frías en el aceite o en

mantequilla. Si se consumen alimentos proteicos y bajos en grasa en dietas diarias se,

puede reducir el riesgo de desarrollar enfermedades cardiacas.

La gelatina sin sabor es una PROTEINA de color amarillento, por lo tanto libre de

carbohidratos o azúcares, grasa y colesterol. La gelatina se obtiene del colágeno natural

del tejido conectivo animal, específicamente del cuero vacuno, y se elabora a través de

una estricta selección de materias primas

5. REACTIVO DE BENEDICT

En química, la reacción o prueba de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que

tienen su OH libre del C anomérico), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y celulosa.

En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita

de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.

El reactivo de Benedict consta de:

Sulfato cúprico;

Citrato de sodio;

Carbonato Anhidro de Sodio.

Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio.

El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico

(otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehído del

azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo

ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).

El medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal, puesto que el azúcar en

solución forma un anillo de piranósico o furanósico. Una vez que el azúcar está lineal, su

grupo aldehído puede reaccionar con el ion cúprico en solución.

En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetohexosa) es capaz de dar

positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en un medio alcalino

caliente esta cetohexosa se tautomería (pasando por un intermediario eólico)

a glucosa (que es capaz de reducir al ion cúprico).

Los disacáridos como la sacarosa (enlace α(1 → 2)O) y la trémalos (enlace α(1→1)O), no

dan positivo puesto que sus OH del C numéricos están siendo utilizados en el enlace

glucosúrico.

Algunos azúcares tienen la propiedad de oxidarse en presencia de agentes oxidantes

suaves como el ion Fe3+ o Cu2+. Esta característica radica en la presencia de un grupo

carbonilo libre, el cual es oxidado y genera un grupo carboxilo. Por lo tanto, aquellos

azúcares con un grupo carbonilo libre son llamados azúcares reductores y aquellos en los

que el grupo carbonilo se encuentra combinado en unión glicosídica se conocen como

azúcares no reductores. Existen varias reacciones químicas que permiten determinar si se

está en presencia de un azúcar reductor o no. La prueba de Benedict es una de ellas y se

basa precisamente en la reacción o no de un azúcar con el ion Cu2+. El reactivo 21 de

Benedict contiene soluciones de carbonato de sodio, sulfato de cobre, y citrato de sodio.

El Na2CO3 confiere a la solución un pH alcalino necesario para que la reacción pueda

llevarse a cabo. El citrato de sodio mantiene al ion Cu2+ en solución ya que tiene la

propiedad de formar complejos coloreados poco ionizados con algunos de los metales

pesados. Con el cobre produce un complejo de color azul. Si se le agrega al reactivo una

solución de azúcar reductor y se calienta hasta llevar la mezcla a ebullición, el azúcar en

solución alcalina a elevadas temperaturas se convertirá en D-gluconato y su ene-diol,

rompiéndose luego en dos fragmentos altamente reductores, los cuales con sus

electrones expuestos, reaccionarán con el Cu++. Se obtiene entonces un azúcar oxidado

y dos iones Cu+ . Posteriormente el Cu+ producido reacciona con los iones OH-

presentes en la solución para formar el hidróxido de cobre: Cu + + OH - → Cu(OH)

(precipitado amarillo) El hidróxido pierde agua 2Cu(OH) → Cu2O (precipitado rojo ladrillo)

+ H2O La aparición de un precipitado amarillo, anaranjado, o rojo ladrillo evidencia la

6. EL REACTIVO LUGOL

¿Qué es el lugol?

El lugol o solución de Lugol es una disolución de yodo molecular I2 y yoduro

potásico KI en agua destilada. Fue preparada por primera vez en 1829 y nombrada en

honor al médico francés J.G.A. Lugol.

Este producto se emplea frecuentemente como desinfectante y antiséptico, para

la desinfección de agua en emergencias y como un reactivo para la prueba del

yodo en análisis médicos yde laboratorio.

También se ha usado para cubrir deficiencias de yodo; sin embargo, se prefiere el uso

de yoduro de potasio puro debido a la ausencia de yodo diatómico, forma molecular cuyo

consumo puede resultar tóxico.

¿Cuál es la utilidad del lugol?

Se ha utilizado con éxito, por ejemplo, en el tratamiento del hipertiroidismo y

las crisis tirotóxicas agudas, así como en forma de colutoriode acción antiséptica y

desinfectante; o también en las intervenciones de tiroidectomía total, donde permite

comprimir los vasos sanguíneos para prevenir las hemorragias profusas, frecuentes en un

órgano tan vascular izado como la glándula tiroidea. Y, sobre todo, como reactivo de

laboratorio; por ejemplo, en microbiología, como mordiente en la técnica de tinción de

Gram. O como colorante vital para la cromo endoscopia digestiva alta: puesto que las

células normales del esófago absorben el lugol, las zonas que no se tiñen son las más

adecuadas para tomar una biopsia en el cribado del cáncer esofágico entre grupos de alto

riesgo. O también para detectar en una sustancia la presencia de almidón (que se tiñe de

color violeta o azul muy oscuros, casi negro) o de glucógeno (que se tiñe de color caoba).

¿Qué es una reacción de precipitación? Escriba 5 tipos de ecuaciones de

este tipo.

La reacción de precipitación es un tipo común de reacción en disolución acuosa que se

caracteriza por la formación de un producto insoluble o precipitado. Un precipitado es un

sólido insoluble que se separa de la disolución. En las reacciones de precipitación por lo

general participan compuestos...

7.SUDAN

El Sudán III es un tinte diazo del tipo lisocromo (tinte soluble en grasa) usado para

manchar de triglicéridos en secciones congeladas, y algunos lípidos y lipoproteínas

encuadernados de la proteína en secciones de la parafina. Tiene el aspecto de cristales

rojizos y una absorción máxima en 507 (304) nanómetros.

Fundamento Biológico

La presencia de un exceso de grasas en las heces obedece a uno o varios de los

siguientes mecanismos: tránsito acelerado, déficit enzimático en su evolución, déficit de

absorción o hipersecreción endógena, por lo cual el organismo no puede procesarlas y

digerirlas y las elimina directamente con la materia fecal.

Fundamento Técnico

Las heces sospechosas de presentar ácidos grasos en su contenido, se mezclan con la

solución Sudan III, lisoenzima que permite diferenciar las grasas neutras que se tiñen de

color amarillo, las grasas minerales son incoloras y las ácidas adquieren una coloración

roja.

El enlace peptídico es un enlace covalente entre el grupo amino (–NH2) de un

aminoácido y el grupo carboxilo (–COOH) de otro aminoácido. Los péptidos y las

proteínas están formados porla unión de aminoácidos mediante enlaces peptídicos. El

enlace peptídico implica la pérdida de una molécula de agua y la formación de un enlace

covalente CO-NH. Es, en realidad, unenlace amida sustituido.

Podemos seguir añadiendo aminoácidos al péptido, pero siempre en el extremo COOH

terminal.

Para nombrar el péptido se empieza por el NH2 terminal por acuerdo. Si el primer

aminoácido denuestro péptido fuera alanina y el segundo serina tendríamos el péptido

alanil-serina. (1)

8. REACTIVO DE BIURENT

El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y

otros compuestos con dos omás enlaces peptídicos en sustancias de composición

desconocida.

Está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4), junto con tartrato de

sodio y potasio (KNaC4O6·4H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en

presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de cadena

corta. El Hidróxido de Potasio no participa en la reacción, pero proporciona el

medio alcalino necesario para que tenga lugar.

Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un método colorimétrico que permite

determinar la concentración de proteínas de una muestra mediante espectroscopía

ultravioleta-visible a una longitud de onda de 540 nm (para detectar el ión Cu2+).

La presencia de proteínas en una mezcla se puede determinar mediante la reacción del

Biuret. El reactivo deBiuret contiene CuSO4 en solución acuosa alcalina (gracias a la

presencia de NaOH o KOH). La reacción se basa en la formación de un compuesto de

color violeta, debido a la formación de un complejo decoordinación entre los iones Cu2+ y

los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces

peptídicos.