Zaragoza, 9 de Noviembre de 2010

María José Martínez Lorenzo

RETOS DE LA INGENIERIA TISULAR:

APLICACIÓN CLINICA

PI PAMER 0918

“CONDROGENESIS DE CELULAS

MESENQUIMALES BAJO LA

INFLUENCIA DE CONDROCITOS”

Tratamientos actualesTratamientos actuales

Técnicas que estimulan la médula ósea:

• Microfractura

• Mosaicoplastia

Artroplastia.

Alotrasplante.

Técnicas basadas en terapia celular:

•Implante de condrocitos autólogos

(ACI)

Técnicas basadas en terapia celular:

•Implante de condrocitos autólogos

(ACI)

Lesión

Biopsia de cartílagosano

Digestión enzimática

Cultivo durante 11-21 días(aumento del número de células)

Tratamiento con tripsina

Suspensión de 2,6 -5 x 106 células

Inyección de condrocitos autólogos en la lesión

Sutura de la lesión con cobertura de periostio

Extracción de periostio de tibia

medial

Estrategias de regeneraciEstrategias de regeneracióón y reparacin y reparacióónn

- n=8

- 5 ♀, 3 ♂- 74 ± 5,07

años

- Artrosis (OA)

- n=8

- 5 ♀, 3 ♂- 74 ± 5,07

años

- Artrosis (OA)

Procedencia: rodilla

Procedencia: rodilla

Cartílago articular

Pacientes Pacientes

MUESTRASMUESTRASMUESTRAS

Disgregación/DigestiónCultivo

Diferenciación hacia condrocitos

OBTENCIÓN, AISLAMIENTO Y CULTIVO DE CELULAS A PARTIR DE CARTILAGO

OBTENCIÓN, AISLAMIENTO Y CULTIVO DE CELULAS A PARTIR DE CARTILAGO

CD31-, CD34-, CD36-, CD117-, CD133/1-, HLA-DR-

CD13+, CD44+, CD59+, CD73+, CD90+, CD105+, CD151+,

CD166+

CD31-, CD34-, CD36-, CD117-, CD133/1-, HLA-DR-

CD13+, CD44+, CD59+, CD73+, CD90+, CD105+, CD151+,

CD166+

Fenotipo por citometría de flujo a pase 1Fenotipo por citometrFenotipo por citometríía de flujo a pase 1a de flujo a pase 1

Cartílago articular

Grasa de Hoffa

MSCs

Células de cartílago

COCULTIVOS MSC-Células de cartílago

Células de cartílago

MSC de tejido adiposo

Células de cartílago

MSC de tejido adiposo

COCULTIVOS MSC-Células de cartílago

MD1 (BMP-6+ TGFb)

MD1 (BMP-6+ TGFb)

MD1 (BMP-6+ TGFb)

Células de cartílago+

MSC

MSC de grasa

MSC de médula

COCULTIVOS –Medios de diferenciación

Células de cartílago+

MSC de tejido adiposo

MD1 (BMP-6+ TGFb)

MD2 (…)

MD4 (BMP-6)

MD3 (TGFb)

?

?

COCULTIVOS –Medios de diferenciación

Membrana amnióticaMembrana amniótica

Aplicación clínica

(soporte de células)

PERSPECTIVAS FUTURAS

-Andamiajes (scaffolds)

-Cultivo en condiciones GMP. Aplicación clínica

SALA BLANCASALA BLANCA