referat farmacognozie

Specia: Inula helenium L

Contribuii la studiul farmacognostic al fitopreparatului compus din catina, iarba mare si

lumanarica

Universitatea de Medicina i Farmacie Carol Davila Bucuresti

Facultatea de Farmacie

Disciplina de Farmacognozie, Fitochimie, Fitoterapie

CONTRIBUII LA STUDIUL FARMACOGNOSTIC ALFITOPREPARATULUI COMPUS DIN CATINA, IARBA MARE SI LUMANARICA

Coordonator tiinific:

Student:Conf. Dr. Cerasela Elena Gard

Cristina-Silvia Stoicescu

An III Grupa 19Plan de redadactare referat

Introducere........................................................................................................................ pag.1Capitolul 1. Data generale privind produsele vegetale componente ale fitopreparatului..................................................................................................................pag.21.1 Fisele produselor vegetale..............................................................................................pag.21.1.1 Produsul vegetal Hippophae fructus (fructe de Ctin)..................................pag.21.1.1.1 Incadrarea speciei.............................................................................pag.21.1.1.2 Descriere...........................................................................................pag.31.1.1.3 Compozitie chimica..........................................................................pag.1

1.1.1.4 Actiune/Farmacologie.......................................................................pag.11.1.1.5 Intrebuintari/Recomandari................................................................pag.1

1.1.1.6 Mod de preparare i administrare.....................................................pag.1

1.1.1.7 Contraindicaii..................................................................................pag.1

1.1.1.8 Preparate farmaceutice......................................................................pag.1

1.1.2 Produsul vegetal Verbascum phlomoides (Lumnrica).................................pag.1

1.1.1.1 Incadrarea speciei

1.1.1.2 Descriere...........................................................................................pag.1

1.1.1.3 Compozitie chimica..........................................................................pag.1





1.1.3 Produsul vegetal Inula helenium (Iarba mare) ...............................................pag.1


1.1.1.2 Descriere...........................................................................................pag.1

1.1.1.3 Compozitie chimica..........................................................................pag.1





Capitolul 2 Analiza farmacognostica a produselor vegetale componente ale fitopreparatului .................................................................................................................pag.1

2.1 Examen macroscopic......................................................................................................pag.1

2.2 Examen microscopic......................................................................................................pag.1

2.3 Analiza chimica calitativa..............................................................................................pag.1

2.4 Determinarea cantitativa a APFC...................................................................................pag.1

2.5 Determinarea cantitativa a flavonelor............................................................................pag.1

Capitolul 3 Stabilirea formulei de fitopreparat...............................................................pag.1

3.1 Raportul dintre produsele vegetale componente ale fitopreparatului.............................pag.1

3.2 Analiza chimica calitativa a fitopreparatului..................................................................pag.1

3.3 Determinarea cantitativa a flavonelor pe fitopreparat....................................................pag.1

3.4 Determinarea cantitativa a APFC pe fitopreparat..........................................................pag.1

Capitolul 4 Corelatii intre principiile active identificate si potentialele efecte terapeutice induse...................................................................................................................................pag.1

Capitolul 5 Concluzii..........................................................................................................pag.1

Bibliografie..........................................................................................................................pag.1IntroducereLucrarea de fa este o sintez ce scoate n eviden importana acestor produse vegetale att ca produse individuale, ct i a fitopreparatului de compoziie bine determinat.

Produse vegetale sunt trecute n revist evideniindu-se compoziia structural, fizico-chimice, aciunile terapeutice, precum i intrebuinrile. n final se pune n eviden aciunea fitocomplexului, menionndu-se raportul dintre componente i importana sa terapeutic. La sfritul lucrrii sunt prezentate concluziile i bibliografia aferent.

Capitolul 1. Data generale privind produsele vegetale componente ale fitopreparatului1.1 Fisele produselor vegetale1.1.1 Produsul vegetal Hippophae fructus (fructe de Ctin) (Hippophae rhamnoides L.; Homoktovis; Sanddoin) fructe de ctin (Hippophae fructus), catina alba, catina de rau1.1.1.1 Incadrarea speciei:

Incadrarea speciei Hippophae rhamnoides L. Hippophae fructus (fructe de catina)Specia: Hippophae fructus (fructe de catina)Familia EleagnaceaeOrdinul MyrtalesSeria CalycifloraeSubclasa DialypetalaeClasa DicotyledonataeSubincrengatura Angiospermae

Increngatura Spermatophyta

Despartamintul Cormophyta

[1] Fitotaxonomie-Baze practice, M. Palade, M.Dinu, p91[2] Hippophae rhamnoides Dupa O Bojor

1.1.1.2 Descriere:Arbust tufos, foarte ramificat, spinos, cu o culoare general albicioas. Fructele ovoide, crnoase, de 7-8 mm diametru, portocalii, cu un smbure tare. Fixator de sol pe coaste rpoase, dezvoltndusc bine pe prundiuri i nisipuri.1.1.1.3 Compoziie chimic:Fructele de ctin conin zaharuri, n special monozaharide, acizi organici, flavonoide, pectine, polifenoli, taninuri, ulei gras complex, numeroase microelemente (P, Ca, Mg, K. Na, Fe), vitamine liposolubile (A, E, F, D), vitamine hidrosolubile (C, P, K, complexul B), acizi grai eseniali (oleic, linoleic, pantotenic, palmitic, heptodecanoic etc), acizii succinic, malic, maleic etc, alfa i beta caroten, licopen, criptoxantin, zeaxantin, taraxantin etc , tocoferoli, fitosteroli.

Seminele conin acizi grai nesaturai: linoleic i linolenic. Frunzele i scoara conin, de asemenea, sitosteroli i tocoferol.

1.1.1.4 Actiune/Farmacologie:n primul rnd, putem considera fructele de Ctin, datorit compoziiei chimice att de bogate i variate, ca una dintre cele mai bogate surse de polivitamine naturale, cu aciunea lor specific. Acizii grai eseniali si n special acizii linoleic i linolenic au o aciune antioxidanl care se recomand n numeroase afeciuni.Uleiul de Ctina are aciune favorabil n arsuri termice i chimice, n expunerea ndelungat la iradieri i n diferite dermatoze. Acioneaz ca cicatrizant n ulcerul gastric i duodenal, n stri alergice, n boli endocrine, n hepatite, anemii, astenii etc. 1.1.1.5 Intrebuintari/Recomandari:Datorit coninutului in vitamina C, carotenoide (inclusiv provitamina A), vitamine din grupa B, vitaminele E, F i P, flavonoide i antociani, fruclele dc Catin constituie o valoroas surs de polivitamine. Uleiul din semine are o aciune cicatrizant i epitelizant, fiind indicat n rni sau plagi greu vindecabile.

1.1.1.6 Mod de preparare i administrare:

Sub forma de sucuri, siropuri, marmelad sau gem. Sucul, n amestec de 25 pri la 75 pri miere, este un bun energizant provitaminic. Sucul din fructe, liofilizat, poate fi utilizat n amestec cu alte vitamine la obinerea unor comprimate.

1.1.1.7 Contraindicaii:Nu se cunosc. 1.1.1.8 Preparate farmaceutice:1.1.2 Produsul vegetal Verbascum Phlomoides (Lumnrica) (Verbascum phlomoides L., V. thapsiforme Schrad., V. thapsus L.; Qkorfarkkoro; Konigskerze).1.1.1.1 Incadrarea speciei

Incadrarea speciei Verbascum tapsus L. (lumanarica, lumanarica-Domnului), Verbascum thapsiforme Schrad. (lumanare, coada vacii), Verbascum phlomoides L. (lumanarica Domnului)

Specia: Verbascum phlomoides L. (lumanarica Domnului)

TribVerbasceae

Familia Scrophulariaceae

Ordinul Personales

Grupa ordin Tubiflorae

Subseria Hypogynae

Seria Tetracyclicae

Subclasa Gamopetalae

Clasa DicotyledonataeSubincrengatura Angiospermae



Verbascum phlomoides Dupa O Bojor

1.1.1.2 Descriere:

Plante erbacee bianuale, drepte, neramificate sau puin ramificate, cu o nlime ntre 1,5-2 m, acoperite cu nveli de peri psloi. n primul an se formeaz numai rozeta de frunze bazale, iar n ai doilea an, tulpina florifer, Funze mari, lungi de l0-30 cm i late de 4-10 cm, acoperite de peri psloi. Florile se dezvolt la partea superioar i sunt mari, galbene-aurii, Se recolteaz treptat, pe msura deschiderii lor, dimineaa, dup ce roua se ridic.

1.1.1.3 Compozitie chimica:Florile de Lumnric au n compoziia lor cca 3% mucilagii polizaharidice solubile n ap, care, dup hidroliz, produc 47% D-galactoz, 25% arabinoz, 14% D-glucoz, 6% D-xiloz, 4% L-rhamnoz, 2% D-manoz, 1% L-fructoz i 12% acizi uronici. Mai conin 1,5-3% flavonoide, printre care luteolin, apigenin, canferol i rutozid. Mai conin derivai ai acidului cafeic, ferulic, ai acidului protocatehic i verbascozide; rnonoterpene iridoidice, triterpene, saponozide specifice (verbacosaponine), steroli, 11% zahr invertit, etc.

1.1.1.4 Actiune/Farmacologie:Datorit mucilagiilor i saponozidclor, preparatele pe baz de flori de Lumnric au aciune emolient i expectorant, fluidificnd secreiile bronice. Au i proprieti sudoriflce i uor diuretice. Cercetrile mai noi au demonstrat in vitro" i aciunea antiviral asupra anumitor tulpini gripale de tipul A i B i asupra virusului herpetic simplu. Pn la definitivarea cercetrilor n acest domeniu, principalele aciuni unanim recunoscute sunt cele expectorante, sudorifice, diuretice i astringente.

1.1.1.5 Intrebuintari/Recomandari:n strile inflamatorii ale cilor respiratorii, ca tratament simptomatic n tuse, guturai, tuse uscat, congestii ale aparatului respirator, expectorant, datorita saponozidelor.

1.1.1.6 Mod de preparare i administrare:Sub form de infuzie, o lingur flori la o cana cu ap (sau dou linguri flori i frunze), din care se beau 2-3 cni pe zi ndulcite cu miere.

Decoctul se prepar din 2-3 g plant la o can cu ap i se fierbe la foc domol timp de 10 minute, n acest fel, dac decoctul este lsat timp de 10 minute nainte de filtrare, se asigur o mai bun extracie i a flavonoidelor.

Din extractul fluid l:l (g/ml) se iau 1,5-2 ml de dou ori pe zi.

Se poate prepara i o tinctur 1:5 (g/ml) n alcool de 60 centigrade, din care se iau 7-8 ml de dou ori pe zi, diluale n ap cald.

1.1.1.7 Contraindicaii:Nu prezint. Nu s-au semnalat nici efecte secundare, restricii n timpul sarcinii sau lactaiei i nici interaciuni cu alte medicamente.

1.1.1.8 Preparate farmaceutice:1.1.3 Produsul vegetal Inula helenium (Iarba mare) (Inula heienium L.; Orvenygyoker; Echtcr Alant)


Incadrarea speciei Inula helenium L. (iarba mare)

Specia: Inula helenium L. (iarba mare)

Subfamilia Radiatiflorae

Familia Asteraceae

Ordinul Asterales

Subseria Epigynae

Seria Tetracyclicae

Subclasa Gamopetalae

Clasa DicotyledonataeSubincrengatura Angiospermae



Inula heienium Dupa O Bojor

1.1.1.2 Descriere:

Plant peren, viguroas, de 0,7-1,5 m nlime, rspndit n flora spontan, n zonele deluroase pn n regiunile submontane, la margini de pduri, prin fnee umede, de-a lungul praielor. Frunzele bazale sunt atenuate n peiol, lungi (de 30-60 cm i late de 10-20 cm, iar cele tulpinale, scurt peiolate, din ce n ce mai mici spre vrful tulpinii. Suprafaa superioar a frunzelor este verde, iar cea inferioar cenuiu proas. Florile sunt de 6-8 cm n diametru, de culoare galben, asemntoare relativ cu cele de Floarea-soarelui. Se utilizeaz n special rdcinile, care sunt lungi de 20-50 cm i groase de pn la 1 cm, de culoare cenu-ie-brun. Se poate confunda cu specia Telekia speciosa (Brustan, Brusturul oii), care crete n special n regiunea montana. La aceast specie frunzele bazale sunt lung peiolate, iar pe dos frunzele sunt proase numai pe nervuri.1.1.1.3 Compozitie chimica:

Prile subterane conin cantiti foarte mari de polimeri ai levulozei (40-50%), dintre care 95% este inulina; 1-3% substane volatile formate din mici cantiti de ulei esenial, derivai sesquiterpenici: alantolactone (complex denumit i helenin) cu structura apropiat santoninei; substante antibiotice, fridelin i stigniastorin, acetat de damaradienil etc. Frunzele conin o substan amar alantopicrina, vitamina C, saruri minerale etc, iar florile conin helenin.

1.1.1.4 Actiune/Farmacologie:

Prezena alantolactonelor i a uleiului esenial imprima rdcinilor proprietatca de a modifica secreiile bronice i au aciune bacteriostatic n special asupra bacilului Koch; tot datorit unor alantolactone similare santoninei, Iarba mare are proprieti antihelmintice i diuretice. Prin complexul compoziiei chimice are proprieti coleretic-colagoge.

1.1.1.5 Intrebuintari/Recomandari:

Se recomand ca diuretic, favoriznd nu numai eliminarea apei, dar i a azotailor si clorurilor. Se recomand i pentru proprietile antiinflamtoare n congestii hepatice, n colecistite, n litiaza biliar i renala, n artrite i oligurie i ca sedativ asociat cu alte plante.

Produii de hidroliz ai inulinei (fructoza, levuloza) sunt glucide mai bine tolerate de diabetici dect zaharoza.

Recomandarea major este de calmant al tusei, de colagog, de diuretic i de antihelmintic.1.1.1.6 Mod de preparare i administrare:

Pentru aciunea expectorant i de calrnare a tusei, se prepar un decoct dintr-o lingur rdcin mrunit la o can cu ap din care se beau dou cni pe zi. La fel se procedeaz i pentru aciunea diuretic i coleretic.

n helmintiaze, rdcina se recomand sub form de decoct preparat din 4 linguri fragmentate la o can cu ap: se iau 4 linguri pe zi timp de cel puin o saptmn.

Pentru efectele sedative, rdcina de larb mare se asociaz cu Talpa gtii, n pri egale, din care se prepar o tinctur folosind 20 g amestec de plante la 100 ml alcool de 60 -70, prin macerare timp de 8 zile; se iau de 3 ori pe zi 15-20 picturi n puin ap, ultima doz seara nainte de culcare.

1.1.1.7 Contraindicaii:Dei rdcina de Iarb mare i preparatele obinute din aceast specie, n doze terapeutice, nu prezint efecte secundare, cantitile supradozate, administrate oral, din cauza alantolactonelor, pot provoca efecte nedorite care se manifest prin excitaie, iar la doze mai mari prin paralizie bulbo-medular. Deci, atenie la dozare!

1.1.1.8 Preparate farmaceutice:

Goji catina tibetana

Ulei de CatinaCapitolul 2 Analiza farmacognostica a produselor vegetale componente ale fitopreparatului

2.1. Determinarea identitii

Se realizeaz prin examen macroscopic, microscopic, microchimic i chimic calitativ.

2.1 Examen macroscopic

Examenul macroscopic reprezint primul stadiu de investigare al produselor vegetale si are ca scop stabilirea caracterele morfologice detectabile cu ochiul liber sau la lup i a celor organoleptice percepute prin gust, miros i culoare.

Examinarea macroscopic presupune stabilirea aspectului, dimensiunilor, culorii, mirosului i gustului.

In vederea acestor determinari am analizat fiecare produs vegetal in parte att cu ochiul liber ct i cu lupa. In urma acestor analize am constat ca produsele vegetale nu sunt omogene, dimensiunea produselor fiind diferite, de la pulbere la fragmente mari.

Am identificat:

- fragmente de tulpini striate, de culoare verde, flori cu mult papus, de culoare alba reprezentnd produsul vegetal Polygonii herba;

- fragmente de frunze verzi pe ambele fele, cu miros aromat reprezentnd produsul vegetal Menthae herba;

- mici capitule florale, cu flori tubuloase de culoare galbena reprezentnd produsul vegetal

- fragmente de rdcini striate, rsucite, de culoare bruna la exterior si glbuie la interior reprezentnd produsul vegetal Ononidis radix;

- flori mici, tubuloase, de culoare glbuie posibil produsul vegetal Millefolii herba;

- fragmente de tulpini de culoare brun-inchisa;

- fragmente de paie;

- rest pulverulent.Concluzie:

Datorita faptului ca la prepararea ceaiului vom folosi produsele vegetale individuale in proportii stabilite, este de dorit ca pacientul sa beneficieze de toate actiunile ceaiului.

Fig. 1 Produsul vegetal in toto- Fructe de catina

Fig. 2 Produsul vegetal in toto- Flori de lumanaric

Fig. 3 Produsul vegetal in toto- Radacina de Iarba mare

2.2 Examen microscopic

Examenul microscopic are ca scop stabilirea esuturilor i elementelor anatomice caracteristice unui anumit tip de produs vegetal. Se poate realiza pe seciune transversal, longitudinal, radiar, pe preparat superficial (concissum) i pulbere.

Examenul microscopic al pulberilor vegetaleAre ca scop precizarea organului vegetal prin identificarea elementelor anatomice comune, i a produsului vegetal prin stabilirea esuturilor caracteristice.

Pentru obinerea preparatului microscopic se parcurg urmtoarele etape:

Pulverizarea produsului vegetal i omogenizarea pulberii obinute prin sitare;

Clarificarea pulberii vegetale;

Colorarea elementelor lignificate din pulberea clarificat;

Examinarea preparatului la microscop.

Agent de clarificare: cloralhidrat 800g/L.

Agent de colorare: floroglucin clorhidric 10g/L.

Tehnica obinerii preparatului microscopic din pulbere:

- pe o lam de microscop se aduc 2-3 picturi din soluia de cloralhidrat 800g/L i se presar cu ajutorul unui ac spatulat cteva fragmente de pulbere vegetal.

- preparatul rezultat se trece cu micri succesive prin flacra unui bec de gaz pn se percepe un slab miros caracteristic de reactiv i se observ degajarea unor vapori albicioi rezultai din descompunerea cloralhidratului.

Este recomandat supunerea preparatului unei clarificri repetate (2-3 ori), mai ales in cazul produselor vegetale bogate in substante de rezerva Elemente anatomice observate n preparatele microscopice obinute din organe subterane (radix, rhizoma)

a) elemente comune: fragmente de parenchim cu substane de rezerv (amidon, inulin, ulei gras), vase de lemn de calibru mare (reticulate, punctuale, scalariforme), suber (lipsete la rdcinile decorticate).

b) elemente specifice: elemente mecanice (fibre caracterizate prin form, lumen, canalicule, dimensiuni, celule pietroase), forma de cristalizare a oxalatului de calciu (druze, ursine, rafidii, cristale prismatice), esuturi secretoare (celule, canale, laticifere), aspectul granulelor de amidon (forma i poziia hilului, dimensiuni).

Elemente anatomice observate n preparatele microscopice obinute din scoare (cortex)a) clemente comune: fragmente de suber, diferite tipuri de parenchimuri (cortical, liberian), elemente mecanice.

b) elemente specifice: caracteristicile elementelor mecanice (fibre caracterizate prin form, lumen, canalicule, dimensiuni, nsoite sau nu de cristale prismatice de oxalat de calciu, celule pietroase), natura substanei de rezerv (amidon, picturi de ulei gras), esuturi secretoare (celule, canale).

Elemente anatomice observate n preparatele microscopice obinute din frunze (folium)a) elemente comune: fragmente de epiderm cu stomate, fragmente de parenchim

clorofilian, fragmente de esut palisadic i lacunar, fragmente izolate de esut

palisadic, vase de lemn de calibru mic (inelate, spiralate).

b) Elemente specifice: tipul stomatelor, forma celulelor (prezena ngrorilor

moniliforme, aspectul cuticulei neted sau striat), aspectul, forma i dimensiunile

perilor tectori, prezena perilor glandulari care uneori pot indica familia botanic,

elemente mecanice (fibre, celule pietroase-idioblaste), forma de cristalizare a oxalatului de calciu, esuturi secretoare (laticifere).

Tipuri de peri glandulari ntlnii n preparatele microscopice:

a) peri glandulari specifici familiei Lamiaceae caracterizai prin picior scurt unicelular i gland octocelular, cu celule dispuse circular i acoperite cu o cuticul;

b) peri glandulari specifici familiei Asteraceae formai dintr-un picior scurt unicelular i gland pluricelular, cu celule dispuse biseriat, pe mai multe etaje;

c) peri glandulari specifici familiei Malvaceae care se deosebesc de cei caracteristici

pentru Asteraceae, prin lipsa simetriei la nivelul glandei pluricelulare, celulele fiind

dispuse stratificat;

d) peri glandulari specifici familiei Solanaceae, cu picior pluricelular si gland pluricelular.

Tipuri de stomate:

a) stomate de tip diacitic (cu dou celule anexe paralele ntre ele i perpendiculare pe

axul longitudinal al ostiolei);

b) stomate de tip paracitic (cele dou celule anexe sunt paralele cu axul longitudinal al stomatei);

c) stomate de tip anisocitic (cu trei celule anexe, dintre care una este mai mic dect

celelalte dou);

d) stomate de tip anomocitic (sunt nconjurate de un numr variabil de celule

nedifereniate de celelalte celule epidermice).

Elemente anatomice observate n preparatele microscopice obinute din flori (flores)a) elemente comune: fragmente de endoteciu (esut mecanic al anterei), papile de pe

stigmat, papile de pe corol, gruncioare de polen, fragmente de epiderm cu aspect variat, determinat de piesa floral din care provine, parenchim clorofilian provenit din sepale, vase de lemn de calibru mic (inelate, spiralate).

b) elemente specifice: caracteristicile gruncioarelor de polen (exin neted, echinulat sau cu diferite formaiuni, numrul de pori germinativi, mrimea, forma), peri tectori, peri glandulari, elemente mecanice provenite mai ales din bractei, forma de cristalizare a oxalatului de calciu.

In preparatele obinute din produsele de tip herba elementele anatomice observate sunt cele comune i specifice pentru frunze i flori.

Elemente anatomice observate n preparatele microscopice obinute din fructe (fructus)

a) elemente comune: fragmente dc epicarp, mezocarp i endocarp, vase de lemn de

calibru mic (inelate, spiralate).

b) elemente specifice: elemente mecanice (fibre, celule pietroase), forma de cristalizare a oxalatului de calciu, esut pigmentai-, natura substanei de rezerv, esuturi secretoare (pungi, canale, celule), peri tectori (pentru fructele pubescente).

Elemente anatomice observate n preparatele microscopice obinute din semine (semen)a) elemente comune: fragmente de endosperm i embrion, vase de lemn de calibru mic (inelate, spiralate).

b) elemente specifice: esut pigmentar, elemente mecanice (fibre, celule pietroase), natura substanei de rezerv (amidon, aleuron, ulei gras), peri tectori (pentru seminele pubescente). [3]

S-a efectuat examenul microscopic pe cele trei produse vegetale in parte. n urma efecturii examenului microscopic pe preparat de tip pulveratum, obinut din fiecare produs vegetal, s-au identificat elemente anatomice produselor vegetale.

Inula helenium (Iarba mare) Structura primar n primele luni de vegetaie i secundar ncepnd de la un an de vegetaie, canalele secretoare de ulei volatil, Inulina sub form de

agregate sticloase cu muchii ascuite

Fig. 1. Preparatul microscopic necolorat al produsului vegetal Inula helenium (Iarba mare)Fig. 2. Preparatul microscopic colorat al produsului vegetal Inula helenium (Iarba mare)-evidentierea vaselor de lemn

Fig. 3. Preparat microscopic al produsului vegetal Hippophae fructus (fructe de Ctin)Fig. 4. Preparatul microscopic al produsului vegetal Hippophae fructus (fructe de Ctin)

Fig. 5. Preparat microscopic al produsului vegetal Verbascum phlomoides (Lumnrica)Fig. 3. Preparat microscopic al produsului vegetal Verbascum phlomoides (Lumnrica)

2.3 Analiza chimica calitativa

Analiza chimic calitativ a soluiei extractive apoase Examenul chimic calitativ const ntr-o analiz chimic calitativ ce are ca scop stabilirea principalelor grupe de principii active, prin care se identific tot spectrul chimic al produsului vegetal, pe baza unor reacii specifice. Realizarea acestui obiectiv presupune dou etape si anume:

- produsul vegetal este supus unor extracii succesive cu solveni de polariti diferite, de la apolar spre polar (n general eter etilic, metanol i ap);

- n fiecare soluie extractiv se efectueaz reacii chimice specifice diferitelor clase de principii active.

Astfel s-a preparat cate o soluie extractiv apoas conform prospectului pentru fiecare produs vegetal in parte: peste 1-2 lingurie amestec de plante se toarn 200 ml ap clocotit i se las la infuzat o durata de 10-15 minute, acoperit, apoi se strecoar.

1. Identificarea ozelor se realizeaz pe baza proprietilor chimice: caracterul reductor, transformarea n furfural (sau hidroximetilfurfural) urmat de cuplare cu fenoli sau amine aromatice.

Reacia cu reactivul Fehling

Principiul reaciei: are la baz proprietatea ozelor de a reduce hidroxidul amino-cupric la oxid cupros.

Reactivi necesari: reactiv Fehling I, reactiv Fehling II.

Tehnica de lucru: peste 1 mL soluie extractiv adus n prealabil n eprubet se adaug 1 mL reactiv Fehling (obinut prin amestecarea extempore a 0,5 mL reactiv Fehling I cu 0,5 mL

reactiv Fehling II). Amestecul se nclzete pe baie de ap; se observ apariia unui precipitat

rou-crmiziu (oxid de cupru) care sedimenteaz n timp. [3]

Produs vegetalHippophae fructus (fructe de Ctin)Verbascum phlomoides (Lumnrica)Inula helenium

(Iarba mare)

ReactiePOZITIVAPOZITIVAPOZITIVA

Concluziesoluia extractiv apoas conine ozesoluia extractiv apoas conine ozesoluia extractiv apoas conine oze

Reacia Molisch

Principiul reaciei: sub aciunea acidului sulfuric concentrat, ozele se deshidrateaz, cu fomarea furfuralului (pentoze) sau hidroximetilfurfuralului (hexoze); acetia, prin cuplare cu timol genereaz compui colorai n rou-purpuriu.

Reactivi necesari: acid sulfuric concentrat, timol 10 g/L.

Tehnica de lucru: 3-5 mL soluie extractiv se concentreaz n capsula pn la sicitate. Peste reziduul format (rcit n prealabil) se adaug 1 mL acid sulfuric concentrat i proba se

menine n repaus cel puin 5 minute (pentru deshidratare), dup care se trateaz cu 1 -2

picturi timol 10 g/L; se formeaz un compus colorat n rou-purpuriu sau rou-portocaliu (dependent de concentraia ozelor din prob). [3]

2. Identificarea poliholozidelor se realizeaz pe baza proprietilor fizico-chimice (hidrolizeaz n mediu acid sau enzimatic, genernd oze de baz; n prezena acizilor concentrai se depolimerizeaz i deshidrateaz la furfural i derivai ai acestuia; nu prezint caracter reductor; amidonul formeaz cu iodul un compus colorat n albastru; inulina i celuloza nu dau pozitiv aceasta reacie; celuloza se coloreaz n violet cu cloroiodura de zinc).

Reacia Molisch

Principiul reaciei: sub aciunea acidului sulfuric concentrat, poliholozidele se deshidrateaz, cu formarea furfuralului sau hidroximelilfurfuralului; acetia, prin cuplare cu timol, genereaz compui colorai n rou-purpuriu.Reactivi necesari: acid sulfuric concentrat, timol 10 g/L.

Tehnica de lucru: 3-5 mL soluie extractiv se concentreaz n capsul pn la sicitate. Peste reziduul format (rcit n prealabil) se adaug 1 mL acid sulfuric concentrat i proba se menine n repaus cel puin 5 minute (pentru deshidratare), dup care se trateaz cu 1-2 picturi timol 10 g/L; se formeaz un compus colorat n rou-purpuriu sau rou-portocaliu (dependent de concentraia ozelor din prob). [3]


(Iarba mare)


Concluziesoluia extractiv apoas conine poliholozidesoluia extractiv apoas conine poliholozidesoluia extractiv apoas conine poliholozide

3. Identificarea mucilagiilor se realizeaz pe baza proprietilor chimice.

Reacia de precipitare a mucilagiilor

Principiul reaciei: mucilagiile precipit n prezena alcoolului sau a acetonei.

Reactivi necesari: metanol sau aceton.

Tehnica de lucru: ntr-o eprubet coninnd 10 mL metanol sau aceton se toarn in fir subire, sub continu agitare, 2-3 mL soluie extractiv apoas concentrat. Se formeaz un precipitat alb, translucid. [3]


(Iarba mare)


Concluziesoluia extractiv apoas conine mucilagiisoluia extractiv apoas conine mucilagiisoluia extractiv apoas conine mucilagii

4. Identificarea ODP-urilor (acidul clorogenic, cinarina i izomerii lor) se realizeaz pe baza proprietilor reductoare i a capacitii dc substituie a nucleului aromatic.

Reacia cu reactivul Arnow

Principiul reaciei: formarea nitrozoderivailor (n mediu acid) i tautomerizarea spontan a acestora la oximele corespunztoare, care prezint coloraie roie i se solubilizeaz n mediu alcalin.

Reactivi necesari: acid clorhidric 0,5 N sau 1N, reactiv Arnow, hidroxid de sodiu 0,5 N sau 1N.

Tehnica de lucru: 1 mL soluie extractiv se trateaz cu 1 mL acid clorhidric 0,5 N, 1 mL

reactiv Arnow i 1 mL hidroxid de sodiu 0,5 N. Apare o coloraie roie sau rou-violet ca urmare a formrii oximei acidului cafeic.

Observaie: intensitatea coloraiei este dependent de cantitatea de ODP-uri din produsul

vegetal. [3]


(Iarba mare)


Concluziesoluia extractiv apoas conine ODP-urisoluia extractiv apoas conine ODP-urisoluia extractiv apoas conine ODP-uri

5. Identificarea flavonozidelor se realizeaz pe baza proprietilor chimice.

Formarea fenoxizilor

Principiul reaciei: flavonozidele i agliconii formeaz n mediu alcalin fenoxizi colorai n galben.

Reactiv necesar: hidroxid de sodiu 100 g/L.

Tehnica de lucru: la 1 mL soluie extractiv apoas se adaug 0,5 mL soluie de hidroxid de sodiu 100 g/L; se observ intensificarea coloraiei galbene. [3]


(Iarba mare)


Concluziesoluia extractiv apoas conine flavonozidesoluia extractiv apoas conine flavonozidesoluia extractiv apoas conine flavonozide

Reacia de obinere a chelailor

Principiul reaciei: proprietatea flavonozidelor sau a agliconilor acestora de a forma n

prezena metalelor bi- sau trivalente chelai colorai n galben intens i care prezint ofluorescent galben-verzuie sau albastr n lumin UV.

Observaii: cea mai practicat reacie din acest grup este cea n care se folosete clorura de aluminiu.

Reactivi necesari: acetat de sodiu 100 g/L, clorur de aluminiu 25 g/L.

Tehnica de lucru: la 1 mL soluie extractiv apoas se adaug 0,5 mL soluie dc acetat de

sodiu 100 g/l i 1 mL soluie de clorur de aluminiu 25 g/L; se observ intensificarea

coloraiei galbene. [3]


(Iarba mare)


Concluziesoluia extractiv apoas conine flavonozidesoluia extractiv apoas conine flavonozidesoluia extractiv apoas conine flavonozide

6. Identificarea antocianozidelor. Deoarece soluiile extractive apoase sunt de culoare galben, nu este necesar identificarea antocianozidelor care n soluie extractiv apoas sunt de culoare roie. Produsele vegetale nu conin antocianozide.


(Iarba mare)

ReactieNEGATIVNEGATIVNEGATIV

Concluziesoluia extractiv apoas nu conine antocianozidesoluia extractiv apoas conine antocianozidesoluia extractiv apoas conine antocianozide

7. Identificarea proantocianilor (leucoantocianilor) se realizeaz pe baza proprietilor chimice.

Reacia Bath-Smith

Principiul reaciei: n mediu acid i la cald se transform n antociani.

Reactivi necesari: acid clorhidric 3 mol/L.

Tehnica de lucru: la 1 mL soluie extractiv se adaug 1 mL soluie de acid clorhidric 3 mol/L. Proba astfel obinut se menine 30 de minute pe baia de apa la fierbere. Se obine o coloraie roie. [3]


(Iarba mare)


Concluziesoluia extractiv apoas conine proantocianisoluia extractiv apoas conine proantocianisoluia extractiv apoas conine proantociani

8. Identificarea taninurilor se realizeaz pe baza reaciilor comune sau specifice acestor principii active.

Reacia cu clorur de fer (III)

Principiul reaciei: n prezena cationului Fe trivleni taninurile catehice (condensate) formeaz precipitate i/sau coloraie verde-negricioas, iar cele galice (hidrolizabile) precipitate i/sau coloraie albastr-negricioas.

Reactiv necesar: clorur de fer (III) 10 g/L.

Tehnica de lucru: la 1 mL soluie extractiv se adaug 0,5 mL soluie de clorur de fer (III) 10 g/L; se obine un precipitat i/sau o coloraie diferit n funcie de tipul de tanin. [3]


(Iarba mare)


Concluziesoluia extractiv apoas conine taninurisoluia extractiv apoas conine taninurisoluia extractiv apoas conine taninuri

9. Identificarea saponozidelorObservaie: deoarece nici una din reacii nu este specific saponozidelor, trebuie s se coroboreze rezultatele.

Reacii de precipitare cu hidroxid de bariu, acetat bazic i neutru de plumb

Principiul reaciilor: saponozidele formeaz cu hidroxid de bariu, acetat bazic i neutru de plumb precipitate albe, insolubile n exces de reactiv.

Observaie: reaciile dc precipitare sunt pozitive i n cazul altor principii active (exemplu, taninuri, poliholozide). [3]

Reactivi necesari: hidroxid de bariu 100 g/L, acetat de plumb (II) 50 g/L, acetat bazic de plumb (II).

Tehnica de lucru: peste 1 mL soluie extractiv apoas se adaug 0,5 mL reactiv; apariia unor precipitate albe-glbui indic prezenta saponozidelor.


(Iarba mare)


Concluziesoluia extractiv apoas conine saponozidesoluia extractiv apoas conine saponozidesoluia extractiv apoas conine saponozide

Proba de spumefiere

Principiul reaciei: o soluie apoasa coninnd saponozide. prin agitare energic timp de 15 secunde, formeaz o coloan de spum persistent cel puin 15 minute.

Observaie: proprietile spumefiante, detergente ale saponinelor se explic prin tensioactivitate; poliholozidele au comportament asemntor, dar spuma format nu este persistent.

Tehnica de lucru: 5 mL soluie extractiv apoas sc agit timp de 15 secunde, apoi se las n repaus; existena unei spume persistente i dup 15 minute denot prezena saponozidelor. [3]


(Iarba mare)


Concluziesoluia extractiv apoas conine saponozidesoluia extractiv apoas conine saponozidesoluia extractiv apoas conine saponozide

10. Identificarea carotenoidelor se realizeaz prin reacii de culoare cu triclorur de stibiu, acid sulfuric concentrat, acid clorhidric concentrat.

Reacia Carr-Price

Principiul reaciei: la tratare cu triclorur de stibiu carotenoidele formeaz compui colorai n albastru, care trec n rou-purpuriu i apoi n rou-brun.

Reactiv necesar: reactiv Carr-Price.

Tehnica de lucru: 1-2 mL soluie extractiv apoas se aduce la reziduu, ntr-o capsul de porelan, pe baie de ap. Peste reziduu se adaug 1-2 picturi reactiv Carr-Price. In cazul unei reacii pozitive se observ apariia unei coloraii albastre, care vireaz rapid n rou-purpuriu i apoi n rou-brun. [4]


(Iarba mare)

ReactieNEGATIVANEGATIVANEGATIVA

Concluziesoluia extractiv apoas nu conine carotenoidesoluia extractiv apoas nu conine carotenoidesoluia extractiv apoas nu conine carotenoide

Reacia Winterstein

Principiul reaciei: la tratare cu acid sulfuric concentrat carotenoidele formeaz compui colorai n albastru-verzui.

Reactiv necesar: acid sulfuric concentrat.

Tehnica de lucru: 1-2 mL soluie extractiv apoas se aduce la reziduu, ntr-o capsul de porelan, pe baie de ap. Dup rcire, peste reziduu se adaug 1-2 picturi acid sulfuric concentrat. n cazul unei reacii pozitive se observ apariia unei coloraii albastre-verzui. [4]


(Iarba mare)


Concluziesoluia extractiv apoas nu conine carotenoidesoluia extractiv apoas nu conine carotenoidesoluia extractiv apoas nu conine carotenoide

Reacia cu acid clorhidric concentrat

Principiul reaciei: la tratare cu acid clorhidric concentrai carotenoidele cu structur epoxidic formeaz compui colorai n verde-albstrui.

Reactiv necesar: acid clorhidric concentrat.

Tehnica de lucru: 1-2 mL soluie extractiv apoas se aduce la reziduu, ntr-o capsul de porelan, pe baie de ap. Dup rcire, peste reziduu se adaug 1-2 picturi acid clorhidric concentrat. n cazul unei reacii pozitive se observ apariia unei coloraii albastre-verzui. [4]

Concluzie: dei Hippophae fructus (fructe de Ctin) conine carotenoide, reactia a fost negativa deoarece am lucrat pe soluie extractiv apoas, iar extracia carotenoidelor se face cu solveni organici apolari

11. Extracia i purificarea alcaloizilor se realizeaz prin metoda Stas-Otto.Principiul metodei de extracie: trecerea alcaloizilor ntr-o singur form (baz sau sare),

urmat de extracia cu solventul corespunztor.

n funcie de tipul solventului, se disting dou variante ale metodei Stas-Otto:

-extracia cu solvent apolar pentru alcaloizii baz;

-extracia cu solvent polar (eventual acidulat) pentru alcaloizii sruri.

Deoarece n produsele vegetale exist i ali compui azotai care dau pozitive reaciile de identificare generale efectuate pentru alcaloizi, este obligatoriu ca extracia s fie urmat de purificare.

Principiul metodei de purificare: trecerea succesiv i repetat a alcaloizilor-baz n alcaloizi-sruri, separarea srurilor, refacerea alcaloizilor-baz i separarea acestora prin extracie cu solvent apolar.

Tehnica de lucru: peste soluia apoas extractiv preparat conform prospectului se adaug soluie de hidroxid de amoniu 100 g/L pn la un pH 8-9 (verificare la hrtia indicator) i apoi se extrage cu 3-4 mL eter etilic. Soluia eteric se agit cu 3-4 mL acid clorhidric 20 g/L (n plnia de separare) i se realizeaz identificarea alcaloizilor pe soluia apoas acidulat.

Identificarea alcaloizilor se realizeaz prin reacii generale i specifice.

Principiul reaciilor generale de precipitare: n prezena reactivului, alcaloizii sruri formeaz precipitate.

Reactivi necesari: reactiv Mayer (soluie apoas de tetraiodomercuriat (II) de potasiu), reactiv Bertrand (soluie apoas de acid silicowolframic).

Tehnica de lucru: peste 1 mL soluie apoas acid se adaug treptat (pictur cu pictur) reactivul de precipitare (1-2 picturi) i se urmrete modificarea aspectului soluiei n raport cu o soluie martor. In cazul unei reacii pozitive se formeaz un precipitat galben la adugarea reactivului Mayer, respectiv, un precipitat alb la adugarea reactivului Bertrand Precipitatele formate sunt solubile n exces de reactiv; de aceea, reactivul se adaug treptat, n volume mici; n cazul n care proba are un coninut mic de alcaloizi, se va observa doar o opalescen, nu un precipitat. [4]


(Iarba mare)


Concluziesoluia extractiv apoas nu conine alcaloizisoluia extractiv apoas nu conine alcaloizisoluia extractiv apoas nu conine alcaloizi

2.4 Determinarea cantitativa a APFC

2.5 Determinarea cantitativa a flavonelor

2.3.2. Dozarea principiilor active

2.3.2.1.. Dozarea ODP-urilor

Principiul metodei: - n prezena reactivului Arnow se formeaz o coloraie roie; aceast reacie st i la baza determinrii cantitative, printr-o metod spectrofotometric, cnd se determin intensitatea culorii oximei acidului cafeic.

Tehnica de lucru:

- se prepar infuzie din cele trei produse vegetale proprii;- se folosesc dou baloane cotate, fiecare a cte 10 ml;

Martor Prob

1 ml soluie extractiv 1 ml soluie extractiv

1 ml HCl 0,5 N 1 ml HCl 0,5 N

1 ml R.Arnow

1 ml NaOH 10% 1 ml NaOH 10%

- se completeaz la volumul balonului cotat (10 ml) cu ap distilat;

- se citete extincia (absorbana) probei de analizat fa de martor la un spectrofotometru;

- cu valorile absorbanelor i ale concentraiilor corespunztoare se calculeaz coninutul n ODP-uri, exprimat n acid cafeic, corespunztor la 100 g produs vegetal, conform formulei:

g ODP-uri(exprimat n acid cafeic)/100 ml infuzie =Ep/EetxCet/CPX100 , unde :EP= absorbana probei;

Eet = absorbana soluiei de ODP-uri, substan de referin de concentraie Cet din curba etalon;

Cet = concentraia soluiei de ODP, substan de referin rezultat din curba etalon (g acid cafeic/mL)

Cp = masa de produs vegetal uscat corespunztoare la 1 mLsoluie prob folosit la dozare (/mL)

Ep=0,317

Cp=Vinfuzie/10=1/10=0,1

g ODP-uri/100 ml infuzie = 0,317/0,385x26,72/0,1x100=22000,622

Variaia extinciei n funcie de concentraia soluiei de acid cafeic

Tabel

Cet(g/ml )Eet

13,360,193

26,720,385

40,080,578

53,440,764

66,800,963

2.3.2.2. Dozarea flavonelor

Principiul metodei: - flavonozidele formeaz cu clorura de aluminiu, chelai de culoare galben.

Tehnica de lucru:

- se prepar infuzie conform indicaiilor productorului;- se folosesc dou baloane cotate de 10 ml;

Martor Proba


1,0 ml AlCl3 25 g/L

- se completeaz la volumul balonului cotat cu ap distilat, se agit i se las n repaus 45 minute.

- se citesc extinciile (absorbanele) probei de analizat fa de martor la spectrofotometru, la maximul de absorbie stabilit n funcie de substana folosit ca etalon, de exemplu, pentru rutozid =427 nm.

- cu valorile absorbanelor i ale concentraiilor corespunztoare se calculeaz coninutul n flavone, corespunztor la 100 g produs vegetal, conform formulei:

g flavone(exprimat n rutozid)/100 ml infuzie= Ep/EetxCet/CPX100 EP = absorbana probei;

Eet= absorbana soluiei de flavone, substan de referin de concentraie Ce din curba etalon;

Cet = concentraia soluiei de flavon, substan de referin rezultat din curba etalon (g acid cafeic/mL)

Cp = masa de produs vegetal uscat corespunztoare la 1 mL soluie prob folosit la dozare (/mL)

Cp == 0,2

Ap= 0,546

g flavone/100 ml infuzie = 938,144

Variaia extinciei n funcie de concentraia soluiei de rutozid

Tabel Cet(g/ml )Eet

1,000,137

2,000,354

3,000,584

4,000,799

2.1.3.3. Identificarea carotenoidelor

Reactia Carr-Price

La tratarea cu triclorura de stibiu, carotenoidele formeaz compui colorai n albastru, care trec n rou purpuriu i apoi n rou-brun.

Reactivi necesari: reactiv Carr-Price.

Tehnica de lucru: 1-2 ml soluie extractiv apolar din fiecare produs vegetal se aduce la reziduu, ntr-o capsul de porelan, pe baie de ap iar peste reziduu se adaug 1-2 picturi reactiv Carr-Price. In cazul unei reacii pozitive se observ apariia unei coloraii albastre, care vireaz rapid la rou-purpuriu i apoi la rou-brun.

Schema de extractie si identificare a carotenoidelor in infuzii

produs vegetal

infuzie 10-15 min, filtrare prin vat

solutie extractiv apolar

produs vegetal epuizat

5 mL infuzie (capsula)

SITA

reziduu

(pipeta uscata)

+

1 pic. R. Carr-Price concentrat

Concluzii: in urma analizelor efectuate se poate observa ca pentru toate produsele vegetale studiate rezultatele au fost negative, deci se pate spune ca pacientul NU beneficiaza de carotenoide la infuzie sau decoct.

Datorita faptului ca reaciile specifice carotenoidelor au dat negativ, reacia Winterstein si reactia cu acid clorhidric concentrat nu au mai fost efectuate, deoarece rezultatele ar fi fost negative si in urma tratarii compusilor cu acid sulfuric concentrat si acid clorhidric concentrat.

2.2. Determinarea puritii

2.2.1. Determinarea corpurilor strine

Corpurile strine se refer la:

-pri ale altor plante cu care specia de interes este confundat, involuntar (datorit cunoaterii insuficiente a caracterelor anatomice) sau voit (din raiuni financiare, ilegale);

-pri ale altor plante de care specia de interes nu poate fi separat n momentul recoltrii (n special la plantele care coabiteaz i se recolteaz mecanizat),

-materii minerale (pmnt, nisip, praf, resturi de ambalaj etc.). [3]

2.2.2. Determinarea impuritilor

Impuritile se refer la:

-pri din aceeai plant, dar nedefinite ca acel produs vegetal (exemplu: fragmente de tulpini pentru produsele vegetale tip folium i flores),

-produs vegetal degradat (atacat de fungi, insecte, roztoare, uscat sau conservat necorespunztor). [3]

La examenul macroscopic al amestecului de produse vegetale individuale am gsit urmtoarele:

- fragmente de tulpini de culoare brun-nchis care ar putea constitui produs vegetal degradat deci o impuritate;

- fragmente de paie care reprezint un corp strin;

- rest pulverulent care ar putea conine att impuriti, ct i corpuri strine.

Concluzie: produsele vegetale prezint att impuriti ct i corpuri strine.

2.3. Determinarea calitii

2.3.1. Determinri preliminarii

Determinarea indicelui de spumefiere

Indicele de spumefiere reprezint diluia minim a unei soluii coninnd saponozide, care prin agitare energic n plan vertical, timp de 15 secunde, ntr-o eprubet cu nlimea de 160 mm i cu diametrul de 16 mm, formeaz o coloan de spum nalt de 1 cm, persistent cel puin 15 minute.

Tehnica de lucru: se prepar soluia extractiv apoas conform prospectului: peste 1-2 lingurie amestec de plante se toarn 200 ml ap clocotit i se las 10-15 minute acoperit, apoi se strecoar; se iau 10 mL soluie extractiv apoas ntr-o eprubet, se agit in plan vertical 15 secunde, apoi se las n repaus 15 minute. Se msoar nlimea coloanei de spum persistent.

Observaie: daca nlimea coloanei este superioar unui centimetru n eprubet, indicele de spumefiere se considera a fi mai mare ca 100. iar dac suma are o nlime subunitara, indicele de spumefiere este mai mic dect 100. [3]

Concluzie: indicele de spumefiere este mai mic dect 100.

Determinarea factorului de mbibare (FR X)

Prin factor de mbibare se nelege volumul total (exprimat n mililitri) pe care l ocup 1 g produs vegetal i mucilagul aderent, dup mbibare cu ap.

Principiul metodei: msurarea nlimii pe care o ocup produsul vegetal i mucilagul care ader de acesta, dup mbibare cu ap.

Tehnica de lucru: 1,0000 g produs vegetal pulverizat se introduce ntr-o eprubet gradat de 25 de mL, cu dop rodat i se adaug 25 mL ap. Eprubet se agit timp de o or dup urmtoarea schem: de 4 ori la interval de 5 minute, apoi la 10 minute; fiecare agitare dureaz 1 minut. Se las n repaus 2 ore. Se citete volumul ocupat de produsul vegetal i mucilagul aderent.

Rezultatul se raporteaz la 1 g produs vegetal. [3]

Rezultat: volumul ocupat de produsul vegetal i mucilagul aderent este de 7 mL la 1 g produs vegetal.

2.3.2. Dozarea principiilor active

Determinarea cantitativ a flavonozidelor (FR X)

Principiul metodei: flavonozidele formeaz cu clorur de aluminiu chelai de culoare galben.

Reactivi necesari: clorur de aluminiu 25g/L.

Tehnica de lucru: se prepar soluia extractiv apoas conform prospectului

Folosind baloane cotate de 10 mL am realizat:

-o prob martor coninnd 3 mL soluie extractiv apoas i ap pn la cota balonului;

-o prob coninnd 3 mL soluie extractiv apoas, 1 mL clorur de aluminiu 25 g/L i pn la cota balonului.

Dup un repaus de 30 de minute se citesc absorbantele celor dou probe la =427 nm.

Concentratia solutiei de rutozidaAbsorbanta

10,137

20.354

30,582

40,799

Continutul in flavone corespunzator la 100 mL infuzie se calculeaza conform formulei:

Aproba/Aetalon * Cetalon/Cproba * 100 = ...g flavone/100 mL infuzie

Cproba = V mL infuzie/10

Aproba = absorbanta probei

Aetalon = absorbanta solutiei de referinta de concentratie Cetalon din tabelul de referinta

Cetalon = concentratia solutiei de referinta

Cproba = concentratia probei

Aproba = 0,363

Cproba = 0,3

Aetalon = 0,354 (cea mai apropiata valoare de cea obtinuta pentru proba)

Cetalon = 2

0,363/0,354 * 2/0,3 * 100 = 683,6158 g flavone/100 mL infuzie

Capitolul III Stabilirea formulei de fitopreparat3.1 Raportul dintre produsele vegetale component ale fitopreparatului

In urma rezultatelor obtinute la determinarea cantitativa AFPC si a flavonelor, au fost stabilite urmatoarele cantitati din produsele vegetale:

Catina ...g

Iarba Mare ....g

Lumanarica g

1.3 Analiza chimic calitativ a soluiei extractive apoase

Examenul chimic calitativ are ca scop identificarea celor mai importante grupe de principii active prin reacii chimice specifice.

Pentru analiza chimic calitativ a ceaiului compus din catina, iarba mare si lumanarica s-au efectuat reacii chimice specifice pe soluia extractiv apoas ce contine cele trei produse vegetale.Rezultatele obinute n urma examenului chimic calitativ pentru fitopreparat sunt centralizate in urmatorul tabel:

Nr.

crt.Principiul cautatReactii chimice efectuateRezultat

1.Substante cu caracter reducatorR. cu reactiv Fehlingpozitiv

2.Oze si poliholozideR.Molishpozitiv

3.MucilagiiR.cu hematoxilinapozitiv

4.APFC (ODP)R. cu reactivul Arnowpozitiv

5.CarotenoideR. cu reactivul Carr-Pricepozitiv

R. cu H2SO4conc (R Winterstein)pozitiv

R. cu HCl conc.pozitiv

6.FlavoneR. de formare a fenoxizilorpozitiv

R. de obtinere a chelatilorpozitiv

7.AntocianiR. virajului de culoarenegativ

8.ProantocianiR. cu HCl 3M (R. Bath-Smith)negativ

9.SaponozideProba spumefieriipozitiv

R. cu Ba(OH)2pozitiv

R. cu acetatul de plumbpozitiv

10.TaninuriR. cu clorura de fer (III)pozitiv

11.AlcaloiziR. cu reactivul Mayerpozitiv

R cu reactivul Bertrandpozitiv

Substante cu caracter reducator- Reactia 1Substante cu caracter reducator- Reactia 1-detaliu

Identificare mucilagii- Reactia 3

APFC (ODP)-Reactia 4APFC (ODP)- Reactia 4

Flavone- Reactia 6Antociani- Reactia 7

Saponozide-Reactia 9Taninuri-Reactia 10

3.4 Determinarea cantitativa a APFC pe fitopreparatA. Dozarea ODP-urilor

Principiul metodei:

- aceeasi ca si cazul produselor vegetale individuale (vezi capitol....)

- n prezena reactivului Arnow se formeaz o coloraie roie; aceast reacie st i la baza determinrii cantitative, printr-o metod spectrofotometric, cnd se determin intensitatea culorii oximei acidului cafeic.

Tehnica de lucru:

- aceeasi ca si cazul produselor vegetale individuale (vezi capitol....)- se prepar infuzie din fitopreparatul propriu;- se folosesc dou baloane cotate, fiecare a cte 10 ml;

Martor Prob


1 ml HCl 0,5 1 ml HCl 0,5 M

1 ml R.Arnow

1 ml NaOH 10% 1 ml NaOH 10%

- se completeaz la volumul balonului cotat (10 ml) cu ap distilat;

- se citete extincia (absorbana) probei de analizat fa de martor la un spectrofotometru;

- cu valorile absorbanelor i ale concentraiilor corespunztoare se calculeaz coninutul n ODP-uri, exprimat n acid cafeic, corespunztor la 100 g produs vegetal, conform formulei: g ODP-uri(exprimat n acid cafeic)/100 ml infuzie = , unde :

Ap = absorbana probei;

Ae = absorbana soluiei de ODP-uri, substan de referin de concentraie Ce din curba etalon;

Ce = concentraia soluiei de ODP, substan de referin rezultat din curba etalon (g acid cafeic/mL)

Cp = masa de produs vegetal uscat corespunztoare la 1 mLsoluie prob folosit la dozare (/mL)

Rezultat: absorbana g acid cafeic/ml

0,193

13,36

0,385

26,72

0,578

40,08

0,764

53

0,963

66,80

Cp == 0,1

Ap=0,394

g ODP-uri/100 ml infuzie = 27.344,62

3.3 Determinarea cantitativa a flavonelor pe fitopreparatPrincipiul metodei:

- aceeasi ca si cazul produselor vegetale individuale (vezi capitol....)- flavonozidele formeaz cu clorura de aluminiu, chelai de culoare galben.

Tehnica de lucru:

- aceeasi ca si cazul produselor vegetale individuale (vezi capitol....) - se prepar infuzie la 100 ml;

- se folosesc dou baloane cotate de 10 ml;

Martor Proba


0,6 ml AlCl 2,5 M

- se completeaz la volumul balonului cotat cu ap distilat, se agit i se las n repaus 45 min.; Se citesc extinciile (absorbanele) probei de analizat fa de martor la spectrofotometru, la maximul de absorbie stabilit n funcie de substana folosit ca etalon, de exemplu, pentru rutozid =430 nm.

- cu valorile absorbanelor i ale concentraiilor corespunztoare se calculeaz coninutul n flavone, corespunztor la 100 g produs vegetal, conform formulei:

g flavone(exprimat n rutozid)/100 ml infuzie= , unde :

Ap = absorbana probei;

Ae = absorbana soluiei de flavone, substan de referin de concentraie Ce din curba etalon;

Ce = concentraia soluiei de flavon, substan de referin rezultat din curba etalon (g acid cafeic/mL)

Cp = masa de produs vegetal uscat corespunztoare la 1 mL soluie prob folosit la dozare (/mL)

Rezultat: concentraia soluiei de rutozid (g/ml) absorbana

1

0,137

2

0,354

3

0,582

4

0,799

Cp == 0,2

Ap= 0,546

g flavone/100 ml infuzie = 938,144

Calculul concentratiei de flavone/APFC pe amestec

Unde:

dozare flavone

dozare APFCConform formulelor de mai sus avem:

Corelatii intre principiile active identificate si actiunea terapeutica a ceaiului compus din catina, iarba mare si lumanarica"Recomandm ceaiului compus din catina, iarba mare si lumanarica pentru litiaz biliar, litiaz renala, enterit, enterocolit, colecistita, diaree, balonri, dureri abdominale."Principiile active identificate n amestecul de produse vegetale sunt:

-ozele cu aciune energizant i remineralizant;

-mucilagiile cu aciune demulcent (formeaz un film protector la nivelul mucoaselor iritate) la administrare intern;

-ODP-urile cu actiune coleretic-colagoga hepato-protectoare, antihepato-toxica pentru derivaii acidului cafeic i clorogenic, aciune antioxidant prin captarea radicalilor liberi oxid i peroxid care intervin n procesele infecioase i de mbtrnire i care se ntrebuineaz n tratamentul disfunciilor hepatobiliare;

-flavonele cu aciune capilaroprotectoare (cresc rezistena vaselor capilare i scad permeabilitatea acestora), diuretic i antioxidant (chelateaz radicalii liberi eliberai n diferite stri patologice) i se ntrebuineaz singure sau asociate n hipertensiune arterial, retenie urinar, afeciuni hepatice;

-poantocianii cu aciune vasoprotectoare, antioxidant, antimutagena care scad presiunea sangvin (nu mai are loc vasoconstricia micilor arteriole renale), care au rol de vitamina P condensati cu cateholii;

-taninuri cu aciune antidiareic, antimicotic, antiseptic, antiviral (taninuri catehice cu aciune antioxidant, taninurile elagice care stimuleaz fagocitoza, depsidele cu aciune antiinflamatoare) care la administrare intern precipit proteinele bacteriene i fungice i care se ntrebuineaz n diarei, ulcere, colite;

-saponozide cu aciune antiinflamatoare, cicatrizant, antiulceroas, vasoprotectoare, diuretic (ce produc fenomene iritaive la nivelul mucoasei intestinale avnd ca efect absorbia altor principii active cu aciune diuretic; acidul ursolic i oleanolic cresc sinteza de colagen solubil).

Produsul vegetal Millefolii flores (Flori de coada oricelului) conine ulei volatil, principii amare, flavone (heterozide ale apigenolului, luteolului, cvercetolului), acid cafeic i clorogenic, tanin i are aciune antiinflamatoare, cicatrizant, colagog-coleretic.

Se ntrebuineaz n principal pentru tratamentul tulburrilor digestive (balonri epigastrice, flatulen, colite, digestie lent) dar poate fi considerat i un adjuvant n tratamentul litiazei renale i biliare.

Produsul vegetal Myrtilii folium (frunze de afin)......Produsul vegetal Galii herba (Snziene, drgaic)......Cap. 4 Concluzii

Conform productorului, principala ntrebuinare a ceaiului compus din catina, iarba mare si lumanarica este n tratamentul litiazelor renale i biliare. Acest lucru este asigurat cu ajutorul produselor vegetale din compozitia sa.

Polygonii herba care prezint un coninut mare de acid silicic ce dizolv calculii renali i biliari i care i elimin cu ajutorul flavonelor.

Celelalte produse vegetale prezente n compoziia ceaiului poteneaz aciunea troscotului prin coninutul mare n flavone, derivai flavonici i saponozide triterpenice care mresc efectul diuretic. Uleiurile volatile coninute prezint aciune antispastic, tonic stomahic ceea ce ajut la nlturarea durerilor abdominale. Derivaii acidului clorogenic i cafeic datorit aciunii coleretic-colagoge ajut la tratamentul durerilor abdominale i flatulenei. Mentolul are aciune uor sedativ (datorit esterilor coninui) pe mucoasele iritate fiind adjuvant n colite, colecistite, enterocolite. Taninurile prezente n cantitate mare asigur aciunea antidiareic menionat de productor. Mucilagiile asigur un film protector pe mucoasele iritate fiind adjuvanten enterocolite, colecistite, enterite. Aciunea antiinflamatoare este asigurat de uleiurile volatile i de saponozide.

Productorul atenioneaz pacientul c produsul nu se recomand n sarcin, alptare i copiilor sub 12 ani.

Atenionarea este justificat deoarece este contraindicat administrarea oral sau sub form de aplicaii locale pe zona temporal, frontal i pe lobii urechilor a preparatelor pe baz de Menthae aetheroleum i de mentol la copiii n vrst de pn la 30 de luni datorit inducerii spasmului glotic; se administreaz cu pruden la copiii cu vrsta de 5-7 ani tot datorit riscului de spasm glotic, deci asfixie; datorit cetonelor coninute, uleiul volatil prezint risc abortiv dac se administreaz la femeile gravide.

Deasemenea Millefolii flores nu se administreaz sugarilor, gravidelor i copiilor (datorit cetonelor) deoarece induc neurotoxicitate i fenomene abortive.

Productorul recomand ca durata unei cure obinuite s fie de 2-3 luni, lucru justificat deoarece la administrarea ndelungat a infuziei obinute din produsul vegetal Ononidis radix. intensitatea efectului diuretic scade.

Produsele vegetale Menthae folium, Chamomillae flores i Millefolii flores conin carotenoide dar pacientul nu poate beneficia de efectul antioxidant puternic al beta- carotenului deoarece carotenoidele nu pot fi extrase n soluie apoas, ele fiind solubile doar n solventi apolari.

Datorit faptului c produsul nu este omogen este posibil ca pacientul s nu beneficieze de toate aciunile ceaiul compus din coada soricelului, frunze de afin si sanziene. Produsele vegetale coninute n ceaiul compus din coada soricelului, frunze de afin si sanziene acioneaz sinergie, alctuiesc un fitocomplex ce prezint ca efecte principale efectul diuretic i acela de a dizolva calculii renali si biliari, dar tot la fel de importante efectele antispastic, coleretic-colagog, antiinflamator, antidiareic.

Amestecul de produse vegetale este unul neomogen, fragmentele de Ononidis radix i de Polygonii herba fiind mari comparativ cu restul produselor vegetale coninute. Deasemenea produsele vegetale Chamomillae flores i Millefolii flores se gsesc n cantitate mic comparativ cu produsul vegetal Polygonii herba. Datorit acestui lucru, la prepararea unei infuzii, nu este asigurat prezena tuturor produselor vegetale, menionate n prospect, n 1-2 lingurie amestec. La prepararea infuziei pacientul ar putea beneficia de efecte diuretic i antiinflamator sczute datorita dimensiunilor mari a produsului Ononidis radix care poate lipsi din cele 1-2 lingurie de amestec (un coninut mai mic de flavone i de saponozide), de efecte antispastic,diuretic i antiinflamator sczute datorit cantitii mici n care se gsesc produsele Millefolii flores i Chamomillae flores (un coninut mai mic de flavone i uleiuri volatile).

Dac produsul vegetal ar fi fost unul omogen efectul terapeutic ar fi fost unul maxim.

Bibliografie

1. Grd CE. - Curs de farmacognozie, fitochimie, ftoterapie voi. 1, editura Curtea Veche, Bucureti 2010. p.148. 298

2. Grd CE. -Curs de farmacognozie, fitochimie, ftoterapie voi.2, editura Curtea Veche, Bucureti 2010, p.52-56, 105-113

3. Grd CE., Duu L.E., Popescu M.L., ... - Bazele teoretice i practice ale analizei farmacognostice voi. I, editura Curtea Veche, Bucureti 2010, p.35-44, 52-53, 80-83 168-169, 238-241, 333, 342, 474-480

4. Grd CE., Duu L.E., Popescu M.L., ... - Bazele teoretice i practice ale analizei farmacognostice voi. II, editura Curtea Veche, Bucureti 2010, p. 132-134, 150-158

[1] Fitotaxonomie-Baze practice, M. Palade, M.Dinu, M.Stamanichi, M. Codreanu, M.Pavel, Editura Tehnoplast Comany, S.R.L-Bucuresti, p145, ISBN-973-98253-0-3Verbascum phlomoidesDescrierea speciilor Plante erbacee bianuale , inalte de 1-2 m. In primul an de vegetatie formeaza o rozeta de frunze bazilare, scurt petiolate, in al doilea an , tulpina florifera, neramificata, cu frunze alterne, sesile, tomentoase, verzi-cenusii.

Florile sunt grupate in spic lung;o floare are cinci sepale tomentoase

PAGE 5Bucuresti-2014

_1459176286.unknown

_1459176375.unknown

_1459176566.unknown

_1459177258.unknown

_1459176428.unknown

_1459176318.unknown

_1459176074.unknown

referat farmacognozie

Documents