Recombinación Genética.

Genética

Herencia

GenFenotipo

Nucleótidos

Segmento de DNA

Fragmentos de restricción

Plásmidos

PCRReacción en cadena de la polimerasa

Transcripción

Información genética

Genoma Eucariótico

• Dos o mas cromosomas envueltos por membrana nuclear.

• Diploides (recesivo y dominante).• Haploides.• Genes en organelos relacionados con la

función del mismo.• DNA repetitivo.

Genoma procariótico

• Molécula de DNA circular.• Replicones.• Esta inmerso en el citoplasma.• Islas de patogenicidad.• Transposones.

Genoma viral

“La molécula del ácido nucleíco de los bacteriófagos está rodeada por una envoltura proteínica. Algunos también contienen lípidos”.

•Liticos

•Temperados

• Bacterias lisogénicas (portadoras de profagos).

• Fagos filamentosos (M13). Contienen DNA de una cadena formando compejos con proteinas y son expulsados a la célula hueped.

Replicación• Se desenrolla la doble cadena y cada cadena

sirve como molde.• Síntesis de nuevas cadenas con sus bases en

un orden complementario al de las cadenas preexistentes.

Transferencia del DNA

• Transferencia de segmentos relativamente pequeños de un genoma donador a una célula receptora.

• Endonucleasas de restricción.• Recombinación homologa (genes con ancestro

en común).• Recombinación no homologa (depende de

enzimas).

• Conversión genica:Transferencia de secuencias de adn entre dos genes muy similares, que se produce la mayoría de las veces por unentrecruzamiento desigual durante la meiosis. Puede ser un mecanismo que da lugar a una mutación si la transferencia de material altera la secuencia codificadora del gen o si el mismo material transferido contiene una o más mutaciones.

Mecanismos de transferencia de genes.

• Herencia Vertical.

• Herencia Lateral (horizontal).

INGENIERIA GENETICA

• Es posible aislar fragmentos específicos del DNA y amplificarse y sus genes pueden expresarse en concentraciones elevadas.

• Las colonias bacterianas portan genes específicos que pueden identificarse por hibridación de DNA o RNA con sondas marcadas.

• Los genes aislados pueden ser utilizados para diversos propósitos. La mutagénesis de sitio dirigido puede identificar y alternar la secuencia de DNA de un gen.

• Los productos proteicos de los genes virales aislados ofrecen una gran promesa como vacunas porque se preparan sin genes que codifican la replicación de acido nucleico viral

Preparación de fragmentos de DNA con enzimas de

restricción

• La diversidad genética de las bacterias se refleja por su amplia gamma de enzimas de restricción, las cueles poseen una selectividad notable que les permite identificar regiones especificas de DNA para su desdoblamiento.

• La longitud de los fragmentos de DNA producidos por enzimas de restricción varia en gran medida por la individualidad de secuencias de DNA.

• La longitud de los fragmentos de DNA depende en gran parte del numero de bases especificas reconocidas por una enzima

• La mayoría de las enzimas reconocen de 4 a 8 secuencias de bases sin embargo algunas otras reconocen 10 hasta 15 secuencias de bases.

• El reconocimiento de 4 bases da origen a fragmentos con una longitud promedio de 250 pares de bases y suele ser útil para el análisis de fragmentos genéticos

Separación física de fragmentos de DNA de

tamaño diferente

• Gran parte de la simplicidad de las técnicas de ingeniería genética yace en el hecho de que la electroforesis en gel permita la separación de fragmentos de DNA con base en el tamaño mientras mas pequeños los fragmentos mas rápida será la tasa de migración

• Los genes con alto grado de enlaces cruzados optimizan la separación de fragmentos pequeños de DNA

Clonación de fragmentos de resolución de DNA

• Muchas enzimas de restricción producen desdoblamiento asimétrico y fragmentos de DNA con extremos cohesivos que pueden hidrolizarse con otros fragmentos.

• Este DNA puede utilizarse como donador con un plásmido receptor pera formar un plásmido receptor para formar un plásmido recombinante por medio de ingeniería genética

• Los plásmidos recombinantes pueden inducirse en el hospedador bacteriano con frecuencia E. coli por medio de transformación