recombinaci³n gen©tica (microbiolog­a)

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Health & Medicine

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1. Recombinacin Gentica. Transcripcin PCR Gentica Reaccin encadena de la polimerasa Herencia Segmento de DNAFenotipo Gen Fragmentos de restriccinNucletidos Plsmidos 2. Informacin gentica 3. Genoma Eucaritico Dos o mas cromosomas envueltos pormembrana nuclear. Diploides (recesivo y dominante). Haploides. Genes en organelos relacionados con lafuncin del mismo. DNA repetitivo. 4. Genoma procaritico Molcula de DNA circular. Replicones. Esta inmerso en el citoplasma. Islas de patogenicidad. Transposones. 5. Genoma viralLa molcula del cido nucleco de losbacterifagos est rodeada por una envolturaprotenica. Algunos tambin contienenlpidos.LiticosTemperados 6. Bacterias lisognicas (portadoras deprofagos). Fagos filamentosos (M13). Contienen DNA deuna cadena formando compejos con proteinasy son expulsados a la clula hueped. 7. Replicacin Se desenrolla la doble cadena y cada cadenasirve como molde. Sntesis de nuevas cadenas con sus bases enun orden complementario al de las cadenaspreexistentes. 8. Transferencia del DNA Transferencia de segmentos relativamentepequeos de un genoma donador a una clulareceptora. Endonucleasas de restriccin. Recombinacin homologa (genes con ancestroen comn). Recombinacin no homologa (depende deenzimas). 9. Conversin genica:Transferencia de secuenciasde adn entre dos genes muy similares, que seproduce la mayora de las veces porunentrecruzamiento desigual durante lameiosis. Puede ser un mecanismo que dalugar a una mutacin si la transferencia dematerial altera la secuencia codificadoradel gen o si el mismo material transferidocontiene una o ms mutaciones. 10. Mecanismos de transferencia de genes. Herencia Vertical. Herencia Lateral (horizontal). 11. Es posible aislar fragmentos especficos delDNA y amplificarse y sus genes puedenexpresarse en concentraciones elevadas. Las colonias bacterianas portan genesespecficos que pueden identificarse porhibridacin de DNA o RNA con sondasmarcadas. 12. Los genes aislados pueden ser utilizados paradiversos propsitos. La mutagnesis de sitiodirigido puede identificar y alternar lasecuencia de DNA de un gen. Los productos proteicos de los genes viralesaislados ofrecen una gran promesa comovacunas porque se preparan sin genes quecodifican la replicacin de acido nucleico viral 13. La diversidad gentica de las bacterias serefleja por su amplia gamma de enzimas derestriccin, las cueles poseen una selectividadnotable que les permite identificar regionesespecificas de DNA para su desdoblamiento. 14. La longitud de los fragmentos de DNAproducidos por enzimas de restriccin varia engran medida por la individualidad desecuencias de DNA. La longitud de los fragmentos de DNAdepende en gran parte del numero de basesespecificas reconocidas por una enzima 15. La mayora de las enzimas reconocen de 4 a 8secuencias de bases sin embargo algunasotras reconocen 10 hasta 15 secuencias debases. El reconocimiento de 4 bases da origen afragmentos con una longitud promedio de 250pares de bases y suele ser til para el anlisisde fragmentos genticos 16. Gran parte de la simplicidad de las tcnicas deingeniera gentica yace en el hecho de que laelectroforesis en gel permita la separacin defragmentos de DNA con base en el tamaomientras mas pequeos los fragmentos masrpida ser la tasa de migracin 17. Los genes con alto grado de enlaces cruzadosoptimizan la separacin de fragmentospequeos de DNA 18. Muchas enzimas de restriccin producendesdoblamiento asimtrico y fragmentos deDNA con extremos cohesivos que puedenhidrolizarse con otros fragmentos. Este DNA puede utilizarse como donador conun plsmido receptor pera formar unplsmido receptor para formar un plsmidorecombinante por medio de ingenieragentica 19. Los plsmidos recombinantes puedeninducirse en el hospedador bacteriano confrecuencia E. coli por medio de transformacin

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