7/26/2019 r5 Dozarea Lipidelor Totale Din Snge

1/2

Dozarea lipidelor totale din snge

Metoda extraiei la cald

Principiul metodei

Lipidele totale din ser sunt extrase la cald cu amestec alcool eter, extractuleste evaporat la sec, dup care rezidul este cntrit.

Mod de lucruSe adaug cu pictura, agitnd continuu 1 ml ser peste 20 ml amestec alcool eter, ntr-un alon !rlenme"er. Se agit 10 minute la temperatura camerei,dup care se va #ine pe aie de ap $erinte timp de 1 minut %i agitnd. Se$ltreaz apoi printr-un $ltru cantitativ plisat %i degresat n prealail cu alcool-eter. Se spal cantitativ alonul cu precipitat de dou ori cu cte & ml eteru%or nclzit. 'iltratul %i eterul de splare se trec ntr-o capsul, dup care se

evapor con#inutul capsulei pe o aie de ap la sec. (eziduul se reia cu eter%i se $ltreaz prin $ltru cantitativ plisat ntr-o capsul tarat n prealail)greutatea * +. Se evapor eterul pe aie de ap, se rce%te capsula, apoise cntre%te %i se men#ine n exicator pn la pond constant. Se noteazgreutatea cu +.

Calculul(G G) 1000 = g lipide / 1000 ml ser

n care + * greutatea capsulei/+ * greutatea capsulei %i lipide.

Metoda c !os!o"anilin#PrincipiulLipidele serice n prezen#a osovanilinei ormeaz la $erere, n mediu acid,un complex colorat n ro%u. ntensitatea colora#ie o#inute se estimeazotometric %i este propor#ional cu concentra#ia acizilor gra%i nesatura#i,respectiv cu concentra#ia lipidelor totale din ser.

Mod de lucru

Se realizeaz urmatoarea scem experimental

$eacti"i %ro&a 'talon MartorSer 0,1 - -Solu#ie etalon - 0,1 -Ser $ziologic )sau324

- - 0,1

5c. Suluric 6 6 6

7/26/2019 r5 Dozarea Lipidelor Totale Din Snge

2/2

Se $ere 10 minute pe aie de ap. Se rce%te imediat su curent de ap.

7roe 0,1 0,1 0,1

Solu#ie de osovanilin 2 2 2

Se agit puternic %i se rcesc su curent de ap. Se las n repaus 20-80 deminute pentru dezvoltarea culorii. ntensitatea culorii, respectiv extinc#ia sedetermin otometric la &80 nm.

CalculSe aplic rela#ia

mg lipide totale/100 ml ser = ('% 'M)/('' 'M) '

unde !7 * extinc#ia proei de analizat !9* extinc#ia martorului !!* extinc#ia etalonului :! * concentra#ia solu#iei etalon de triolein