Pruebas especiales para la detección y cuantificación de anticuerpos

INSTITUTO TECNOLÓGICO DE SONORADepartamento de Ciencias Agronómicas y Veterinarias

PE de Medicina Veterinaria y Zootecnia

Integrantes:Janitzin Herrera Valenzuela ID: 136477

Jonathan Eliud Gaytan Romero ID: 136295Siria Carolina Muñoz Ochoa ID: 136516

Inmunología Veterinaria

Ciudad Obregón, Sonora 11-11-2015

ELISA

Técnica de laboratorio que permite detectar pequeñas partículas llamadas antígenos, que habitualmente son fragmentos de proteínas. La identificación es específica, es decir, consigue que pequeños segmentos de proteínas destaquen y no puedan ser confundidas con otras.

Para poder identificar los antígenos se utilizan moléculas con dos componentes acoplados: un anticuerpo (que se une al antígeno de forma específica) y una enzima (que se activa y señala la unión al antígeno

Tipos de ELISA:

•ELISA directo•ELISA indirecto•ELISA sándwich

Fijación del complemento

Esta técnica se basa en que los complejos antígeno-anticuerpo fijan el complemento. Una vez producida esta reacción, se añade complemento y un sistema indicador que está formado por eritrocitos de carnero recubiertos de anticuerpos. En la muestra clínica que existan anticuerpos se fijará el complemento y no se producirá la lisis del sistema indicador

Neutralización del virus

Esta prueba se basa en la perdida de la capacidad infectiva de un virus al unirse al anticuerpo especifico, formando un complejo antigeno-anticuerpos

Las pruebas de neutralizacion van dirigidas a la deteccion de anticuerpos capaces de bloquear los epitopos criticos del patogeno. Donde normalmante suelen tener una interpretacion biologica correlacionada con la proteccion. Sin embargo, no suelen ser útiles para diferenciar respuestas entre animales infectados y vacunados ya que la mayoria de vacunas inducen anticuerpos neutralizantes.

Identificación del virus por microscopia inmunoelectrica

Esta técnica permite la visualización de complejos antígeno / anticuerpo que son específicos para un virus en particular. En este método se obtienen cortes ultra finos (de la muestra) y se incuban con un anticuerpo específico para el virus. Después de un paso de lavado, el corte se incuba con Proteína A conjugada con partículas de oro (de un rango de 5 a 20 nm). Este conjugado se une a la porción Fc del anticuerpo y se detecta por microscopía electrónica.

Inhibición de la aglutinación¿Qué es?Es un método sensible y específico para la identificación de pequeñas cantidades de antígeno soluble en la sangre o en otros líquidos de los tejidos.

¿Para que es utilizada?Para identificar virus con capacidad hemoaglutinante presentes en una muestra dada (virus influenza, parainfluenza, etc.), que al unirse a los anticuerpos específicos, pierden esta propiedad.

La prueba se lleva a cabo en dos etapas:•Directa: Los antígenos presentes en la superficie de las partículas reaccionan directamente con el anticuerpo homólogo formando grumos.•Indirecta: Los antígenos se acoplan a partículas que funcionan como soportes, estas partículas pueden ser eritrocitos o poliestireno (látex).

Lectura:•Positiva: Se observa formación de grumos teñidos y el resto del líquido permanece claro.•Negativa: La mezcla permanece sin cambios.

Aplicaciones más habituales:•Diagnóstico de enfermedades infecciosas del hombre y de los animales.•Determinación de grupos sanguíneos eritrociticos.•Identificación y clasificación de bacterias.•Determinación de la presencia de anticuerpos.

Gracias por su Atención