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Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos
(Antibiograma por difusión con discos - CIM/CBM –
Curvas de muerte - PIS/PBS- VBS – Dosaje de Antimicrobianos)
Mirta G. Quinteros
Orientan tratamiento empírico inicial.
Influencian decisiones sobre el
tratamiento específico individual.
Desarrollo del vademecum hospitalario.
Aplicación de políticas de control de
infecciones.
Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos
Pruebas para evaluar “in vitro” la
sensibilidad a los antimicrobianos
Método de Difusión con discos
Método Difusión cuantitativa (Etest)
Método Dilución (automatizados y no automatizados)
Pruebas de screening (detección fenotípica)
Detección enzimática directa
Detección genotípica de resistencia
Curvas de cinética de muerte bacteriana
Pruebas para evaluar bactericidia
Prueba de sensibilidad a los
antimicrobianos: Método de Dilución
Fundamento
Se basa en los estudios colaborativos de Ericsson y Sherris
Se preparan diferentes concentraciones del antimicrobiano, en el medio de cultivo (caldo o agar), y se enfrentan con el microorganismo en estudio
Se obtienen resultados cuantitativos de concentración de antimicrobiano capaz de inhibir, o no, el crecimiento visible de un determinado microorganismo
Prueba de sensibilidad a los
antimicrobianos: Método de Dilución
El resultado que se obtiene al realizar las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos utilizando esta metodología se denomina con la sigla CIM
C: Concentración
I: Inhibitoria
M: Mínima
La CIM es la Mínima Concentración del antimicrobiano ensayado capaz de Inhibir el crecimiento visible del microorganismo en estudio.(MIC: Minimal Inhibitory Concentration)
Esquema de la metodología utilizada para realizar el
método de dilución en medio líquido (macrodilución)
ANTIBIOGRAMAS
1. Farmacológico.
2. Epidemiológico.
3. Clínico.
Criterios de Interpretación
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
F. Nicola:Módulo 4- ATM2007
HISTOGRAMAS: Distribución de microorganismos Vs CIM
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
INTERPRETACIÓN E INFORME64 –
32 –
16 –
8 –
4 –
2 –
1.0 –
0.5 –
I6
I10
I15
I20
I25
I30
I35
(mm)
MIC
(µ
g/m
l)
Resistante Intermedio Susceptible
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
1.Antibiograma por difusión con discos o tabletas
Pruebas de Sensibilidad
a los Antimicrobianos
Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos
ANTIBIOGRAMAS POR DIFUSIÓN
TABLETAS
DISCOS de
PAPEL
Tiras E-test
ESCATEGRAMA: CIM [µg/ml] Vs Ө [mm]
F. Nicola:Módulo 4- ATM2007
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
RESISTENCIA INTRINSECA Y NATURAL
NATURAL: GRAM (+) : R a polimixina
INTRINSECA:
Bacilos GRAM (-): R a glucopéptidos,eritromicina
Proteae: R a nitrofuranos-polimixina.
Serratia spp: R a polimixina
Enterobacter spp: R a cefalotina
Klebsiella spp: R a ampicilina
Enterococcus spp: R a Cef.1ºG- R de bajo nivel AG.
R a imipenem: S. malthopilia, E.faecium, E.raffinosus
R a vancomicina: E.gallinarum, E.casseliflavus
D-Test
Positivo
Fenotipo iMLSB
Negativo
Fenotipo M (Eflujo)
Pruebas de Sensibilidad
a los Antimicrobianos
Consenso grampositivoa- RAM2003
Ampicilina 20%
Cloranfenicol: 5%
Cefaclor: 5%
Cefuroxima. 3%
todas las cepas R a Amp fueron R a
CMP
AMS / AMC: 0%
Rifampicina: 0%
Resistencia a los antimicrobianos (Argentina n:350)
•Whonet 2004
PRODUCCIÓN DE B-
LACTAMASAS GRAM (+)
Haemophilus influenzae
Mecanismo de R:
R a ampicilina βlasa
Vigilancia de R.
R a ampi cromosómica /CEC)
R a quinolonas ( Ac. Nal)
ß-LACTAMASAS
PLASMIDICAS
•ß-lactamasas de espectro
extendido (BLEE):
TEMderiv
SHVderiv
PER1-2
CTXMderiv
Citrobacter freundii (AmpC + BLEE)
Utilización de los discos CTX-AMC-CAZ
Discos de C3G con y sin ácido clavulánico (CAZ, CTX, CPO)
Halo de inhibición de C3G /Clav 5 mm C3G sola
Enterobacterias productoras de Amp C inducible
Cefepima-AMC
FEPFEC
Métodos para confirmar fenotípicamente
la presencia de BLEE
CTX
CTC
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
Detección de la presencia de carbapenemasas
BGN
Curso a Distancia sobre Bacteriología Clínica 2010 – Col. Bioq. Pcia. Bs. As. y Univ. Kennedy –
Mirta Quinteros y Marcelo Marín
carbapenemasas de clase A
Pruebas de Sensibilidad
a los Antimicrobianos
Ácido clavulánico
Perfiles de resistencia
Stapylococcus aureus Penicilinasa
(+)
Meticilino resistente (SMR)
Penicilina
Amoxicilina
Ampicilina
Ampicilina-sulbactam
(AMS)
Amoxilina-clavulanico
CEF 1G (cefalotina)
Oxacilina
Vancomicina
R
R
R
S
S
S
S
S
R
R
R
R
R
R
R
S
Perfiles de resistencia
Bacteroides fragilis
(anaerobios)
Gentamicina, amicacina (AG)
Nitrofuranos
Metronidazol
Amoxicilina-clavulánico
clindamicina
R
R
S
S
S
Perfiles de resistencia
Escherichia coli BLEA BLEE AmpC
Ampicilina
Cefalotina (CEF1ºG
Amoxicilina/clavulanico (AMC)
Ampicilina /sulbactam (AMS)
Ceftriaxona, cefatacidima, cefotaxima (CEF·ºG)
Cefepime (CEF4ºG)
Cefoxitina (cefamicina)
Ertapenem, Meropenem, imipenem
(carbapenemes)
R
R
S
S
S
S
S
S
R
R
S
S
R
R
S
S
R
R
R
R
-
S
R
S
Ciprofloxacina, levofloxacina (FQ) S ó R S ó R S ó R
Colistina (polipeptidos) S S S
Gentamicina, amicacina (aminiglocòsidos) S ó R S ó R S ó R
Resistencia a los antibióticos Amenaza vigente para la
Salud pública