Establecimiento in vitro y pruebas preliminares de micropropagación en medio semisólido y líquido de frambuesa (Rubus idaeus L.).

Se seleccionan brotes de frambuesa con aproximadamente 5 entrenudos incluyendo el ápice.

Se cortan cada uno de los entrenudos y se lavan con agua corriente y ozonificada.

En cámara de flujo laminar se cortan cada uno de los entrenudos de y se colocan 50 en un frasco con agua destilada estéril y dos gotas de tween 20 (o bien jabón antibacterial). Se agitan lentamente durante 1 minuto y se retira el líquido por decantación.

Se enjuaga con agua estéril hasta retirar el exceso de jabón. Se le adicionan aproximadamente 200 ml de una solución de: 6 g/l de Agri-mycin®, 6 g/l de Bisolex® y 5 g/l de Ferbam®. (para cada 100 ml se pesan 0.6 gr de cada unos de los dos primeros compuestos y 0.5 g del tercero).

Los explantes se mantienen en la solución por una hora, agitando ocasionalmente para evitar la sedimentación. Al cabo de este tiempo se retira la solución por decantación.

Se le vierte aproximadamente 200 ml de una solución de hipoclorito de calcio (CaClO2) al 3.5%. (por cada 100 ml se pesan 3.5 gr de hipoclorito de calcio). Se mantienen en agitación lenta por 15 minutos (la bibliografía menciona el uso de bomba de vacio). Posteriormente se retira la solución y se realizan 3 lavados con agua destilada estéril. Una vez terminada la desinfección se mantienen en agua destilada estéril.

Se toman los explantes y se colocan sobre una superficie absorbente. Se cortan las partes oxidadas y se procede a la siembra.

Como protocolo alterno se pueden proceder a la desinfección únicamente de los ápices.

Factors affecting the efficiency of micropropagation from lateral buds and shoot tips of Rubus

Se seleccionan brotes de frambuesa de entre 3-5 cm de longitud (50 brotes), o bien se puede trabajar con ápices sanos de aproximadamente 2-3 cm de longitud.

El material es lavado con agua destilada estéril y unas gotas de gel antibacterial. (no descrito en el artículo).

En cámara de flujo laminar se toman los explantes y son sumergidos en etanol al 70 % (para preparar 100 ml de una solución de etanol al 70% a partir de etanol al 96% se deben de tomar 73 ml de esta última y aforar a 100 ml con agua destilada estéril).

Después de esto se transfieren inmediatamente a una solución de hipoclorito de sodio al 0.6%. (Esto quiere decir que por cada 100 ml de solución al 0.6% se deben de tomar: 12 ml de cloro al 5% y llevarlo a 100 ml, o bien, 5 ml de cloro al 13% y llevarlo a 100 ml). Más dos gotas de Tween-20 con una agitación ligera, esto por 25 minutos.

Después de esto se enjuagan 5 veces con agua destilada estéril, y se mantienen en agua antes de ser cortadas y sembradas.

Se toman los explantes y se colocan sobre una superficie absorbente y estéril, se cortan cuidadosamente con la ayuda de un bisturí y se siembra una sola por frasco.

En el caso de los ápices se deben de remover las hojas antes de ser sembrados.

Clonal propagation of dwarf raspberry (Rubus pubescens Raf.) through in vitro axillary shoot proliferation

Se seleccionan brotes de frambuesa de entre 3-5 cm de longitud (50 brotes) los cuales son lavados con agua corriente y una solución de jabón lavaplatos al 2% de la marca Palmolive, esto por 2 minutos.

Después son esterilizados con una solución de hipoclorito de sodio (cloro) al 1.05% y 0.1% de Tween-20 (una gota). (Para preparar 100 ml de una solución de cloro al 1.05 a partir de: cloro al 5% se toman 21 ml y se llevan a 100 ml, o bien, si es a partir de cloro al 13% se toman 8 ml y se afora a 100 ml). Este proceso se lleva a cabo por 20 minutos.

Rápidamente se retira el cloro y se le adiciona una solución de etanol (alcohol) al 70%. Y después se enjuaga 3 veces con agua destilada estéril.

Los explantes se mantienen en agua antes de ser cortados y sembrados. Con la ayuda de material estéril se toman los explantes y se colocan sobre una superficie absorbente y estéril, se cortan los segmentos nodales (entrenudos), con mucho cuidado y se colocan cada uno en un frasco con medio de cultivo.

Protocols for in vitro micropropagation of RaspberryResearch Institute for Fruit Growing.University of Pitesti²

Se seleccionan brotes de frambuesa y se seccionan en segmentos de entre 2 a 3 cm y que contengan alguna yema axilar. (50 segmentos).

La esterilización de los explantes se realizará en dos etapas. Primero se sumergirán los segmentos en alcohol (etanol) al 94% durante

7 minutos. Por medio de decantación se retira el alcohol. La segunda etapa se lleva a cabo por una inmersión en hipoclorito de

calcio al 3% (3 gr de hipoclorito de calcio y se aforan a 100 ml de agua destilada estéril).

Por último se enjuagan 3 veces con agua destilada estéril antes de ser cortados y sembrados.

Los explantes se mantienen en agua antes de ser cortados y sembrados. Con la ayuda de material estéril se toman los explantes y se colocan sobre una superficie absorbente y estéril, se cortan los segmentos nodales (entrenudos), con mucho cuidado y se colocan cada uno en un frasco con medio de cultivo.