PROTOCOLO DE VIGILANCIA EN SALUD PUBLICA

COLOMBIA 

DENGUE

Descripción Nacional

• TOTAL CASOS :39.849

• DENGUE CLASICO: 35.031

• DENGUE 

HEMORRAGICO:4.818 88%

12%

Distribución de casos por presentación clínica año 2008

DENGUE  CLASICO

DENGUE HEMORRAGICO

COMPORTAMIENTO DENGUE  COLOMBIA 1997 ‐

2008

1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008

DENGUE TOTAL 121,2 308,8 103,0 111,9 263,0 357,9 252,9 121,1 166,0 167,4 190,0 196,0

CLASICO 101,5 284,1 97,80 104,1 234,7 336,0 231,4 108,7 149,2 144,3 170,0 172,0

HEMORRAGICO 19,72 24,70 5,26 7,80 28,30 21,90 21,50 12,40 16,80 22,87 19,00 24,00

0,0050,00

100,00150,00200,00250,00300,00350,00400,00

Tasa

X 1

00.0

00 h

abita

ntes

INCIDENCIA DE DENGUE. COLOMBIA 1997 - 2008

DENGUE TOTAL

CLASICO

HEMORRAGICO

Morbilidad por dengue 2008

DENGUE CLASICO DENGUE HEMORRAGICO

Distribución Geográfica de Serotipos de Dengue Colombia - 2008

Dengue 1

Dengue 2

Dengue 3Dengue 4

Fuente: Virología-SRNL

Flujo de Información

ÁmbitoMunicipal

ÁmbitoDepartamental

ÁmbitoNacional

ÁmbitoInternacional

UPGD

Individualsemanal

Individualsemanal

IndividualSemanal

Recopilación de Datos.Ficha Única de Notificación de Dengue

Bloques 1, 2, 3 y Seguimiento Bloques 4, 5, 6 y 7

VIGILANCIA DEL DENGUE POR  LABORATORIO

Estructura del Decreto 2323 de 2006 RED NACIONAL DE LABORATORIOS

Decreto Nº 2323 del 12 de Julio de 2006, por el cual se reglamenta parcialmente la Ley 9ª de 1979 en

relación con la Red Nacional de Laboratorios y se dictan otras disposiciones

Publicado en el Diario Oficial 46.328 del 13 de julio de 2006

Contiene 27 artículos organizados en 3 capítulos 

• CAPITULO 1: Disposiciones generales (6 artículos)

• CAPITULO 2: Estructura y funciones de la RNL (12 artículos)

• CAPITULO 3: Disposiciones varias (9 artículos)

Decreto 2323 de 2006 Red Nacional de Laboratorios CAPITULO I: Disposiciones generales

1.

Objeto: organizar la RNL y reglamentar su gestión

2.

Ámbito de aplicación: integrantes de la RNL

3.

Definiciones

4.

Ejes estratégicos de la RNL

5.

Principios orientadores de la RNL

6.

Integración funcional en el ámbito internacional

Objeto de la Red Nacional de Laboratorios

Red Nacional de Laboratorios• Sistema técnico gerencial cuyo objeto es la integración funcional 

de laboratorios nacionales de referencia, laboratorios de salud 

pública, laboratorios clínicos, otros laboratorios, y servicios de 

toma de muestras y microscopia, para el desarrollo de 

actividades de vigilancia en salud pública, prestación de servicios, 

gestión de la calidad e investigación

Ejes estratégicos de la Red Nacional de Laboratorios1)

Vigilancia en salud pública

2)

Gestión de la calidad

3)

Prestación de servicios

4)

Investigación

Integrantes de la Red Nacional de Laboratorios

1.

El Instituto Nacional de Salud, INS

2.

El Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos,

INVIMA.

3.

Laboratorios de Salud Pública Departamentales y del Distrito 

Capital de Bogotá.

4.

Laboratorios clínicos, de citohistopatología, de bromatología, de 

medicina reproductiva, bancos de sangre y componentes 

anatómicos y otros laboratorios que realicen análisis de interés 

para la vigilancia en salud pública y para la vigilancia y control 

sanitario

Parágrafo. Los laboratorios nacionales de referencia de otros 

sectores que tengan relación con la salud humana cooperarán 

con la RNL según sus competencias normativas.

Organigrama para la vigilancia

-Control Calidad-Vigilancia serológica-Apoyo técnico

-Control Calidad-Apoyo técnico-Vigilancia virológica

Resultados

La confirmación de infección por  dengue requiere :

La confirmación de infección por  dengue requiere :

La confirmación de infección por  dengue requiere :

Dengue: Diagnóstico  molecular

Metodología

Primer Secuencia Posición Genómica ± PCR

S1871DEN1S1871DEN2S1871DEN3S1871DEN4

5’-TGGCTGAGACCCARCATGGNAC-3’5’-TAGCAGAAACACARCATGGNAC-3’5’-TCTCCGAAACGCARCATGGNAC-3’5’-TGGCAGAAACACARCAYGGNAC-3’

1869 to 18901871 to 18891863 to 18841873 to 1894

RT-PCR

AS2622DEN1AS2622DEN2AS2622DEN3AS2622DEN4

5’-CAATTCATTTGATATTTGYTTCCAC-3’5’-CAATTCTGGTGTTATTTGYTTCCAC-3’5’-CAGTTCATTRGCTATTTGYTTCCAC-3’5’-TAGCTCGTTGGTTATTTGYTTCCAC-3’

2620 to 26442622 to 26462614 to 26382624 to 2648

RT-PCR

S2176DEN1S2176DEN2S2176DEN3S2176DEN4

5’-ATCCTGGGAGACACYGCNTGGG-3’5’-ATTTTRGGTGACACAGCNTGGG-3’5’-ATCTTGGGAGACACAGCNTGGG-3’5’-ATTCTAGGTGAAACAGCNTGGG-3’

2174 to 21952176 to 21972168 to 21892178 to 2199

Nested

AS2504DEN 5’-TGRAAYTTRTAYTGYTCTGTCC-3’ 2506 to 2527 Den 12504 to 2525 Den 22496 to 2517 Den 32506 to 2527 Den 4

Nested

TRISTED (Nested)TRISTED (Nested)

C- MW Muestras

Dengue: Diagnóstico molecular

C- MW Muestras

Dengue: Diagnóstico molecular

Buenos resultados en muestras de suero y ste. de cultivo

Tejido fresco?Tejido fresco?

Tejido en Tejido en parafina?parafina?

Tejido hepático, postmortem

PROCEDIMIENTO GENERAL DE EXTRACCIÓN TEJIDO FRESCO / PARAFINA

DESPARAFINIZACIÓN CON XILOL

TRATAMIENTO CON BUFFER DE LISIS

EXTRACCIÓN CON TRIZOL-LS

REACCIÓN DE RT

AMPLIFICACIÓN POR PCR

EPIDEMOL 1REACCIÓN TRISTED

10 Cortes 10µ

Tejido fresco S.S.

1 2 3 4 5 6

AMPLIFICACIÓN POR RT-PCR ANIDADA EN MUESTRAS DE TEJIDO FRESCO Y TEJIDO PARAFINADO

Carril 1: Muestra de hígado Carril 2: Muestra de bazo Carril 3: Muestra de pulmónCarril 4: Marcadores de peso molecularCarril 5: Control negativo PCRCarril 6: Control negativo nested

Mx Parafina

DENGUE 1: RELOJ MOLECULAR

III - India

Genotipos Dengue 3

Capítulo II: Dengue

I – SE Asia/ S. Pacific

Genotipos Dengue 3

Resultados Parciales

• La responsabilidad del virus como causa de la muerte  debe ser correlacionada con los hallazgos clínicos: 

dx. diferencial y co‐infecciones

– Fiebre Amarilla– Leptospirosis– Malaria– Influenza

DIAGNÓSTICO DEL DENGUE POR LABORATORIO:         

• La responsabilidad del virus como causa de la muerte  debe ser correlacionada con los hallazgos clínicos: 

dx. diferencial y co‐infecciones

– Fiebre Amarilla: ELISA IgM “casera”– Leptospirosis– Malaria– Influenza

DIAGNÓSTICO DEL DENGUE POR LABORATORIO:         

Primer GENO1

C prM E NS1 NS2a NS2b NS3 NS4a NS4b NS5

Fragment

734bp

1 10.233

Diseño de iniciadores para genotipificación

-1 -2 -3 C- -1 -2 -3 C--1 -2 -3 C- -1 -2 -3 C--1 - 2 -3

734pb

50ºC 50.9ºC 51.7ºC 52.8ºC 54.3ºC