protocoale practica

Upload: andreea-velnic

Post on 28-Feb-2018

274 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    1/25

    Primirea si fixarea pieselor chirurgicale

    1. Pregatirea pentru fixare: identificare spalare fixare in formol 10-15% (12 24 h

    2. Pregatirea pentru macroscopie: !palare din formol "escriere macro #legere fragment $umerotarea pieselor

    . Pregatirea pentru histochineta

    4. Pastrarea re&er'elor.

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    2/25

    Examen citologic

    Tehnica de lucru

    1. Primirea produselor

    - lichide de punctie

    - urini

    - aspirate ronsice) rosa*e ) spute

    2.+chilirare epruete

    .,entrifugare

    - pornire centrifuga in po&itia (4

    - se selectea&a turatia

    - timp centrifugare (10-15 min - 1000rotmin

    4.+talarea materialului iologic pe lame cu lamela sau

    ansa

    5.scare la aer

    /.ixare cu alcool metilic asolut (1- min

    .,olorare - solutie iemsa (0 min - frotiurile cer'ico-'aginale colorate prin

    metoda 3aes Papanicolau

    .!palare in apa roinet

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    3/25

    .+xamen microscopic

    Coloratie ( HE ) pentru examenul extemporaneu

    intraoperator - criostat

    Tehnica de lucru

    1. !palarea cu apa a lamei ce contine sectiunea.

    2. ,olorare cu 6ematoxilina (2 min).

    3. !palare in apa.

    4. "iferentiere in apa litinata (5-10 sec.)

    5. ,olorare cu +o&ina (30 sec).

    6. !palare in apa.

    7. "eshidratare in alcool etilic (5-10 sec).

    . 7oluen pentru clarificare.!. 8ontarea lamelei peste sectiune (alsam

    ,anada.

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    4/25

    7+6$9,# 983#!#8#;99

    1. !e practica o inci&ie xifo-omilicala

    2. ,uratarea ca'itatii adominale (extragerea

    e'entualului lichid si a altor materiale iologice

    . ,reearea unui suport de 'ata sau material textil

    intratoracic si intraadominal

    4. 9ntroducerea unei cantitati suficiente de formol in

    ca'itatea toracica si adominala (aproximati' 0 50

    ml

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    5/25

    TEHNICA AUTOPSIEI

    1. !e practica o inci&ie sumentopuiana.

    2. !e inlatura coastele cu a*utorul unui costotom.

    . !e anali&ea&a cu atentie ca'itatea toracica si

    adominala.

    4. !e recoltea&a fragmente din &onele suspecte de o

    anumita le&iune patologica.

    5. 9n ca&ul autopsiei complete) se practica si o inci&ie

    imastoidiana prin 'ortex) se decalotea&a craniul apoi

    se taie cu a*utorul unui fierastrau.

    /. +xtragerea creierului

    . ,reearea unor suporturi de 'ata sau material textile

    . #daugarea de formol 0 50 ml

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    6/25

    ;ecoltarea si preele'area materialuluiioptic

    8odalitatea de aducere a produselor iologice in ser'iciul deanatomie patologica este urmatoarea: a produsele iologice 'or fi insotite de un ilet de trimitere caretreuie sa cuprinda: numele si prenumele pacientului= sexul= 'arsta=codul numeric personal= numarul foii de oser'atie= date clinice sitratamente aplicate anterior= datele examenului macroscopicintraoperator al piesei prele'ate) in ca&ul pieselor chirurgicale=re&ultate histopatologice sau citopatologice anterioare= diagnosticulpre&umti'= data operatiei sau efectuarii iopsiei= semnatura siparafa medicului care trimite aceste produse= produsele iologice 'or fi inregistrate in registrul de iopsii)cu urmatoarele rurici: numarul de ordine) numele si prenumelepacientului) codul numeric personal) sexul) 'arsta) piesa trimisa)numarul foii de oser'atie) diagnosticul clinic) sectia care trimitepiesa) numele operatorului) data primirii piesei= c piesele operatorii se trimit in totalitate= nu sunt admise

    impartirea piesei si trimiterea de tesut in mai multe ser'icii deanatomie patologica simultan= piesa se poate trimite proaspata(nefixata in maximum doua ore de la operatie sau in formoltamponat 10% dupa acest inter'al) intr-un container care treuie sacontina un 'olum de formol de 2-10 ori mai mare decat 'olumulpiesei= containerul 'a fi inscriptionat cu numele si prenumelepacientului) numele piesei trimise) data operatiei) numeleoperatorului= piesa chirurgicala 'a fi trimisa nesectionata)

    deschiderea ei facandu-se de catre medicul anatomopatolog= candacesta considera necesar) poate solicita pre&enta medicului operatorla orientarea macroscopica= medicul anatomopatolog consemnea&anumarul) dimensiunile) aspectul pe suprafata) aspectul pe sectiuneal pieselor operatorii) date care 'or fi incluse in uletinulhistopatologic la rurica examenului macroscopic al piesei= se

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    7/25

    reperea&a &onele interesante din punct de 'edere al diagnosticului)se recoltea&a si se prelucrea&a corespun&ator= piesele operatoriirestante dupa recoltarea fragmentelor pentru examinareahistopatologica se 'or tine minimum luni dupa elaorarea

    diagnosticului anatomopatologic in containere cu formol tamponat10%) etichetate cu numarul de inregistrare din registrul de iopsii)dupa care 'or fi distruse= lamele histopatologice re&ultate se 'orpastra o perioada de minimum 10 ani) iar locurile de parafinare&ultate se 'or pastra o perioada de minimum 0 de ani= d iopsiile se trimit in formol tamponat 10%= containerultreuie inscriptionat cu datele de identitate ale pacientului si sectiacare trimite= se consemnea&a numarul) dimensiunile si aspectul

    macroscopic) dupa ca&= se prelucrea&a corespun&ator standardelorhistopatologice=Prelevarea este o etapa esentiala care se reali&ea&a pe o

    placa de lemn moale sau pluta) fixata intr-un suport etans unde sepot colecta lichidele fixatoare sau lichidele patologice. Prele'area materialului iologic 'a fi precedata de unstudiu macroscopic al piesei recoltate) care se 'a consemna inuletinul histopatologic. !e 'or mentiona dimensiunile

    piesei)greutatea)aspectul macroscopic)pre&enta si aspectille&iunilor macroscopice)intinderea acestora)rapoartele cu altestructuri sau organe.Prele'area treuie sa tina cont de:-orientarea sectiunilor histologice=-grosimea si suprafetele sectiunilor-pre&enta si intinderea le&iunii-mentinerea raporturilor anatomice si histologice cat mai aproapede starea ))in 'i'o>>9n timpul prele'arii se 'a tine cont de incidenta sectiunilor care se'or executa la microton: - prin organele parenchimatoase se 'orreali&a sectiuni plane)paralele sau perpendiculare cu grosimea de-5 mm-pentru organe ca'itare)tuulare sectiunile 'ar fi perpendiculare pelumenul organului=

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    8/25

    -pentru scoarta cererala planul de sectiune 'a fi perpendicular=-pentru muschi)miocard se pot reali&a sectiuni longitudinale sitrans'ersale=9n ca&ul unor organe parenchimatoase cu o consistenta foarte

    redusa(timus)encefal se recomanda introducerea intreguluiorganin solutia fixatoare(formol 10-20% timp de 2-24h.Piesa prele'ata 'a purta un numar corespun&ator cu cel dinregistru. 9n registru se descrie locul de unde a fost prele'ata piesahistologica)marimea)grosimea)planul de sectiune fata de axeleanatomice ale organului.

    7ehnici de includere

    Pentru recoltate la autopsie)fixate in formalina)?en@er sau solutie6ellA dupa spalare se poate utili&a schema=alcool etilic 0%........................2halcool 5%.................................. ai a 2halcool asolut.............................. ai a 1hxilen............................................... ai a 1 hxilen-parafina...............................1 aie 1hparafina......................................... ai a 1h

    Pentru t. de autopsie fixate in ,ornoA:metanol.........................................2 ai a 2hen&oat de metilen........................2 ai a 2hxilen................................................1hxilen-parafina..................................1hparafina............................................. ai a 1hPentru t. mici de iopsie)su 2mm.fixate in formalina:alcool 0%......................................0min.aalcool5%....................................... ai a cate 15min.alcool asolut................................... ai a cate 15min.xilen.................................................2 ai a cate 20min.parafina..........................................2 ai a cate 20min.Pentru fg.de iopsie mai mari:alcool0%..............................2halcool5%...............................4 ai a cate 20min)

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    9/25

    alcool asolut............................ ai a 0min.xilen......................................... ai a 0 minparafina.....................................2 ai a /0min.Pentru piesele de re&ectie chirurgicala sau iopsii mai mari:

    alcool0%.................................. 12halcool 5%................................4 ai a cate 1halcool asolut.............................. ai a cate 1h.xilen.............................................1h.xilenparafina...............................1h.parafina......................................2 ai a cate 1h.

    FIA!EA

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    10/25

    #re ca scop oprirea fenomenelor 'itale din tesuturi si celule) pentru a putea surprindemicroscopic un anumit aspect histofi&iologic sau histopatologic existent in produsulrecoltat la momentul recoltarii.

    ixarea impiedica alterarile post mortem a structurilor tisulare si celulare si intareste

    piesa) asfel ca aceasta sa poata fi supusa prelucrarilor ulterioare.

    ,antitatea de fixator treuie sa fie suficienta pentru ca apa din piese sa nu-i schimeconcentratia . "e oicei) 'olumul fixatorului treuie sa fie de 210 ori mai mare decat'olumul piesei fixate.

    a primirea pieselor gata fixate) se 'a controla cantitatea de lichid fixator si se 'acompleta cu 'olum de lichid ) acolo unde este ca&ul.

    "urata fixarii este 'ariaila) in functie de tipul tesutului si dimensiunea piesei) putanddura de la 24 ore la cate'a &ile.

    ixatorul poate fi schimat de-a lungul procesului de fixare) cu modelarea definiti'a apiesei. 7emperatura fixatorului este temperatura camerei.

    ixarea la cald se utili&ea&a doar pentru diagnostic histopatologic de urgenta.

    A"ENTI FIATO!I

    #$ Formol salin

    9ndicatii : - tehnica histologica de rutina) pentru orice piesa =

    - recomandat pentru piese mari =

    - recomandat pentru strudiul lipidelor in histochimie =

    - studiu imunohistochimic.

    Preparare : formol din comert ( 40% diluat cu apa de roinet pana la concentratia 10%

    - formol comercial 40% - /)5 litri=

    - apa distilata - 4)5 litri=

    - $a,l - 0)5 @g.

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    11/25

    %$ Formol neu&ru #'(

    9ndicatii : - pentru orice piesa in tehnica histologica de rutina =

    - recomandat in special pentru piese mari =

    - studiul lipidelor in histochimie =

    - studiu imunohistochimic.

    Preparare : formol din comert ( 40% diluat cu apa distilata pana la concentratia 5% :

    - formol comercial 40% - 10 ml =

    - apa distilata - 0 ml =

    - caronat de calciu - 1 gr.

    )$ Fixa&or pen&ru ganglion limfa&ic

    9ndicatii : - piese de e'idare ganglionara =

    - piese ce necesita i&olarea ganglionilor.

    Preparare : - alcool etilic /% - /50 ml =

    - cloroform - 200 ml =

    - acid acetic glacial - 50 ml =

    - formol concentrat 40% - 150 ml.

    *$ Alcool +formol, ace&ic - AFA.

    9ndicatii : - fixator ideal pentru coloratii de rutina si imunohistochimice=

    - de&a'anta*ul este repre&entat de pretul ridicat =

    - se 'a utili&a pentru toate piesele mici :

    iopsii = ganglioni = chiureta*e = iopsii osteo-medulare = tiroida= sectoare mamare de mici dimensiuni=

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    12/25

    un fragment repre&entati' din orice tumoare ( B dintumorile mai mici de cm..

    Preparare : - formol concentrat - 20 ml =

    -acid acetic glacial - 50 ml =

    - alcool etilic /% - 5 ml.

    ). /ECA0CIFICA!EA

    !e aplica pieselor histologice care contin caronat de calciu) fapt ce face imposiilasectionarea ( ex.os.

    "ecalcificarea se poate efectua concomitent cu fixarea sau dupa aceea.

    Piesa ce urmea&a a fi decalcificata se fixea&a in formol ) care pre'ine umflareaexagerata a firelor de colagen.

    ,antitatea de lichid de decalcificare treuie sa fie mai mare de 100-200 ori fata de piesafixata.

    ichidul de decalcificare se schima de mai multe ori.

    "urata decalcificarii depinde de grosimea piesei.

    #precierea decalcificarii

    - aprecierea gradului de inmuiere al piesei prin palpare sau intepare cu ac =

    - decalcificarea se considera terminata cand piesa se sectionea&a cu usurinta.

    "upa decalcificare) piesele se spala cu apa curgatoare de la roinet si se tratea&a cusolutie apoasa de sulfat de sodiu sau litiu ( pre'ine umflarea firelor de colagen.

    #gentul de decalcificare : #cid tricloracetic :

    Preparare : 10 gr. #cid tricloracetic C 100 ml. apa distilata.

    8etoda de lucru: - piesa se fixea&a in formol 24 ore=

    - transele supuse decalcificarii se taie la mm. =

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    13/25

    - se tine in decalcificator pana la inmuiereatesutului( minim &ile =

    - se impune prelungirea timpilor de colorare in coloratia6+)in special.

    P9+!+ ,69;;9,#+ si $+,;DP!9939DP!99

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    14/25

    P$,799

    9. ;+,D7#;+# !9 P;++E#;+# 8#7+;9#9 39DD9,99. P;989;+

    999. D;9+$7#;+# 8#7+;9#9 39DD9,

    1. Piesa se trimite Fn recipient etichetat cu numele olna'ului2. #lGturat se trimite un uletin de FnsoHire cu:

    ocul de prele'are "ate clinice 7ratamente efectuate #lte examene histopatologice

    . ragmentul de Hesut poate fi trimis Fn secHia de anatomie patologicG: In formol 10% tamponat 'erificaHi ProaspGt dar pe o compresG umedG $9,9D"#7J uscatG=

    timp de aducere recomandail max 0 de minute4. Pentru examen electronomicroscopic: Fn glutaraldehidG5. Pentru 9": proaspGt= mediu umed= rapid/. #rtefacte de prele'are - metoda de prele'are

    #rtefacte de stri'ire #rtefacte de eletrocoagulare

    . D;9+$7#;+# P9+!+9 #+,79$9 78D;#+

    8arcaHi repere care sG 'G permitG orientarea piesei 8arcarea cu un fir chirurgical a orei 12 e suficientG Preci&area limitelor de re&ecHie (in'adate sau nu KidistanHa Fntre tumorG Ki limita de re&ecHie imita de re&ecHie chirurgicalG nein'adatG nu FnseamnGcG limita de re&ecHie oncologicG e suficientGLLL #tentie- limita de re&ecHie molecularGLLL

    . #rtefacte de orientare sectiuni tangentiale. #rtefacte:

    ixare inadec'atG Prelucrare histopatologicG inadec'atG:

    deshidratare deficitarG) clarificare insuficientG)

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    15/25

    impregnare cu parafinG insuficientG !ecHionare deficitarG ,olorare deficitarG 8ontare deficitarG

    10. +rori:

    Pierderea piesei +tichetarea greKitG a locului +tichetarea greKitG a lamelor ragmente tisulare care nu aparHin piesei respecti'e

    9ncluse Fn loc

    Pre&ente pe lamG fGrG sG fie incluse Fn loc

    11. 9M#;+# 8#7+;9#9 39DD9,- ormaldehida 10% - 4hN..20-25O, - 24hN..5O, - 2-10 h (iopsii) punctii-ormaldehida 20% - hN.. 55O,

    12. !P##;+ -24h in apa curgatoare1. P;D,+!#;+:

    "+!69";#7#;+-alcool etilic 0%- 2 h

    -alcool 5% - ai a cate 2 h -alcool asolut ai a cate 1 h

    ,#;99,#;+ -xilen ai a cate 1 h

    98P;+$#;+-xilen-parafina 1h

    14.9$,"+;+# ,parafina ai a cate 1h

    15. !+,79D$#;+# !9 PD?979D$#;+# !+,79$99 P+ #8# "+

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    16/25

    !79,#

    #1$CO0O!A!E

    #$ HE2ATOI0INA,EO3INA

    A$ Scop4 coloraHia standard Fn histopatologie5$ Principiu: reacHia chimicG dintre hematoxlinG (colorant a&ic Ki

    aci&ii nucleici Ki eo&inG (colorant acid Ki componentelecitoplasmatice

    C$ 2e&od6: fragmente fixate Fn formol 10%) incluse la parafinG)secHiuni 4-5 microni

    /$ P!OCE/U!74 "eparafinare - ai successi'e xilen ( M min

    6idratare ai alcool- etanol 100% ( x min - etanol 5% (1 x min

    - etanol 0% (1 x min- apa deioni&ata( 1 x 5 min

    9ndepartarea particulelor oxidate de la suprafata 'asuluicu hematoxilina !tergerea surplusului de apa de pe lama

    6ematoxilinG 8aAer min ,latire apa deioni&ata !palare apa roinet 5 min "iferenHiere rapidG -Q acid-alcool (scufundare rapida

    10-12x !pGlare apa roinet 1 min ,latire- apa deioni&ata 2 min (in aceasta fa&a lamele pot

    fi lasate peste noapte !tergerea surplusului de apa de pe lama

    +o&inG (P6R5- 0 sec (45 sec pt cea 'eche "eshidratare

    - etanol 5% ( x 5 min- etanol 100% ( x 5 min

    ,larificare

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    17/25

    -xilen ( x 15 min (lamele pot fi lasate in xilenpeste noapte pt o mai una clarificare 8ontare.

    -se pune o picatura de Permount(pe a&a de xilen sau 3alsam de

    ,anada pe lama) folosind o agheta de sticla) fara a lasa ule-se aplica lamella- se lasa la uscat

    E$ !E3U0TAT4 $ucleul - alastru ,itoplasma - ro&

    ,opArightShttp:TTT.cm.edurosenlaprotocols6+staining.pdf

    http:TTT.protocol-online.orgprot6istologA!taining6aematoxAlinUUU+osinUU6+UU!tainingindex.html

    TissueType

    Haematoxylin Acid alcohol0.3%

    Eosin Comment

    Routinetissues

    4 minutes See technicalpoint 2

    2 minutes

    Renalbiopsies

    0 minutes !2 seconds2!4minutes

    Chec" stainin#

    $ecals 0 minutes !2 seconds 30 secondsChec" stainin#ate& bluein#. Hxstep may need tobe &epeated ip&olon#ed decal.

    http'(())).ihc)o&ld.com(*p&otocols(special*stains(h+e*ellis.htm

    %$ 8AN "IESON

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    18/25

    A$ Scop4 diferenHierea colagenului de muKchi

    5$ Principiu4 reacHia chimicG dintre acidul picric Ki citoplasmafirelor musculare Ki fucsinG Ki colagen

    C$ Con&rol4 mu9chi

    /$ 2e&od6: fragmente fixate Fn formol 10%) incluse la parafinG)secHiuni 4-5 microni

    E$ P!OCE/U!A:

    "eparafinare Ki hidratare ,olorare cu hematoxilinG Veigert (2 pGrHi hematoxilinG C

    1 parte mordant - 5 minute !palare "iferentiere rapida in alcool-acid clorhidric. !palare ,ontrastare Fn solutie saturata de i2,D !palare

    ,olorare cu picrofucsinG - 2-5 minute !palare deshidratare) clarificare Ki montare.

    F$ !E3U0TAT $uclei negri ,itoplasme de fire musculare galene #lte citoplasme cenuKii 6ematii galene

    ,olagen roKu

    )$ T!IC!O2 2ASSON

    A$ Scop4 e'idenHierea colagenului5$ Colora:ie de ru&in6 pen&ru ;iopsiile hepa&ice 9i renale

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    19/25

    C$ P!INCIPIU4 Hesuturile mai pHin poroase se colorea&G cumolecula cu dimensiunile cele mai mici

    /$ 2e&od64 fragmente fixate Fn formol 10%) incluse la parafinG)secHiuni 4-5 microni

    E$ P!OCE/U!74 "eparafinare Ki hidratare 6ematoxilinG Veigert -10 minute !pGlare - Fn apG ) i2,D 5 secunde Ponceau fucsinG 4 minute (2 pGrHi Ponceau 1%) 1 parte fuxinG acidG 1%) 1 parte

    acid acetic glacial !pGlare (Fn apG distilatG #coperire cu acid fosfomolidenic 1%- 10 minute

    #nilinG orange -5 minute (lama nu se spalG Fnainte !pGlare (Fn apG distilatG "eshidratare) clarificare Ki montare.

    F$ !E3U0TAT4 ,itoplasme) muKchi) eritrocite roKii ,olagen alastru $uclei negri $D7#: 'ariantG cu 'erde luminG Fn loc de alastru de

    anilinG colagenul - 'erde

    *$ "O2O!I

    A$ Scop4 e'idenHierea reticulinei5$ P!INCIPIU4 reacHia chimicG dintre firele de reticulinG iniHial

    sensiili&ate Ki ionii de argintC$ Con&rol4 fica&ul normal/$ 2e&od64 fragmente fixate Fn formol 10%) incluse la parafinG)

    secHiuni 4-5 microniE$ P!OCE/U!74

    "eparafinare Ki hidratare Dxidare cu permanganat de potasiu 1% (se filtrea&G !pGlare

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    20/25

    "ecolorare rapida cu metaisulfit de natriu sau potasiu2%

    !pGlare 8ordansare cu alaun feriamoniacal 2%- 2 minute

    !pGlare 9mpregnare cu soluHie argento- amoniacalG (7ollens #pG distilatG - 2 Gi rapide ;educere - formol neutru 10% #pG ;educere - cu metaisulfit de natriupotasiu 2%- 1 minut

    - facultati' #pG ixare - tiosulfat de natriu 1%- 1 minut !pGlare "eshidratare) clarificare Ki montare.

    F$ !E3U0TAT4 ;eticulina negru ,olagenul matur auriu

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    21/25

    !pGlare cu apG distilatG. ;ecati' !chiff 0 minute la temperatura camerei sau 45-

    /0 sec la microunde !pGlare cu apG de roinet 5 minute.

    !upracolorare cu hematoxilinG minute. !pGlare cu apG de roinet . "eshidratare) clarificare Ki montare.

    H$ !E3U0TAT4 licogen) fungi) mucus: roKu magenta $uclei alaKtri

    1$ A05AST!U A0CIANA$ Scop4 e'idenHierea mucinelor5$ P!INCIPIU4 reacHia chimicG dintre mucopoli&aharidele acide

    caroxilate Ki sialomucinele sulfatate sau caroxilate dincolorant Ki grupGrile acide ale mucopoli&aharidelor acide

    C$ Con&rol4 in&es&in su;:ire> colon/$ 2e&od64 fragmente fixate Fn formol 10%) incluse la parafinG)

    secHiuni 4-5 microniE$ P!OCE/U!74

    "eparafinare Ki hidratare !olutie #lastru alcian 20 minute !palare ,ontracolorare cu 6ematoxilina 8aAer 2-5 minute !palare "iferentiere rapida cu alcool-acid clorhidric !palare "eshidratare) clarificare Ki montare.

    F$ !E3U0TAT4 mucine - alastru ond sla leu

    ?$ "!OCOTT

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    22/25

    A$ Scop4 e'idenHierea fungilor5$ P!INCIPIU4 mucopoli&aharidele din peretele celulelor fungice sunt

    oxidate Ki elieraea&G grupGri aldehidice care reacHionea&G cu nitratulde argint determinXnd precipitarea argintului

    C$ Con&rol4 orice :esu& care pre@in&6 fungi/$ 2e&od64 fragmente fixate Fn formol 10%) incluse la parafinG) secHiuni4-5 microni

    E$ P!OCE/U!74 "eparafinare Ki hidratare Fn apG distilatG !oluHie acid cromic 5% o orG la /0O, sau 2% 45 sec

    microunde !pGlare cu apG de roinet Ki apoi distilatG. 8etaisulfit de sodiu 1% 1 minut

    !pGlare cu apG de roinet Ki apoi distilatG. !oluHie de argint metenaminG 1 orG la /0O, sau 0 sec

    microunde. !pGlare cu apG distilatG. ,lorurG de aur 0.5%) 1 minute . !pGlare cu apG distilatG Eerde luminG 1 minut !pGlare cu apG distilatG "eshidratare) clarificare Ki montare.

    F$ !E3U0TAT4 ungi negri ond 'erde

    $ PE!0S

    A$ Scop4 e'idenHierea depo&itelor de fier (fier feric din Hesuturi5$ Normal mici cantitGHi de fier sunt pre&ente Fn splinG Ki mGdu'a

    osoasG

    C$ P!INCIPIU4 reacHia chimicG dintre fierul feric din depo&itele dehemosiderinG cu ferocianurG de potasiu W ferocianurG fericG alastru intens

    /$ Con&rol4 orice :esu& care pre@in&6 depo@i&e de hemosiderin6E$ 2e&od64 fragmente fixate Fn formol 10%) incluse la parafinG) secHiuni

    4-5 microniF$ P!OCE/U!74

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    23/25

    "eparafinare Ki hidratare Fn apG distilatG 9mersie Fn soluHie: - sol. ferocianurG de potasiu 2% C sol.

    acid clorhidric 2% (raport sol. R 11 incuare timp de 0minute) 5/-/0 grade ,

    #pG distilatG 10 minute !upracolorare cu

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    24/25

    "eshidratare) clarificare Ki montare."$ !E3U0TAT

    3##; roKii +ritrocite ro&-palid: ,D$7;D 9$7+;$LLL

    ond alastru

    #'$ "IE2SA

    A$ Scop4 e'idenHierea detaliilor celulare5$ P!INCIPIU: reacHia chimicG dintre coloranHii a&ici alastru de

    metilen Ki aci&i eo&ina pe de o parte Ki structurile celulare pe de altaC$ Con&rol: splina/$ 2e&od6: fragmente fixate Fn formol 10%) incluse la parafinG) secHiuni

    4-5 microniE$ P!OCE/U!74

    "eparafinare Ki hidratare Fn apG distilatG iemsa (1 parte iemsa -

  • 7/25/2019 Protocoale Practica

    25/25