Profa Alessandra Pardini

ANTICORPOS (Ac) ou IMUNOGLOBULINAS (Ig)

Linfócitos B- maturação na medula – fibronectina

- produzem e secretam Ig em grandes concentrações

- receptor de membrana - IgD

Anticorpos (Ac) ou Imunoglobulinas (Ig)

- São moléculas com receptores específicos para o

mesmo antígeno que estimulou a sua síntese, e

apresentam a mesma estrutura básica:

- Porção Fab (fragment antigen binding): liga-se ao

antígeno e varia segundo a especificidade de cada ly B.

- Porção Fc (fragment crystalizable): interage com

células, principalmente fagócitos, através de receptores

Fc ou ativa o complemento.

Molécula de Ac Sítio de ligação do Ag símbolo

Sítio de ligação do Ag antígeno Determinante antigênico (epítopo)

Cadeia leve

Cadeia pesada

Fab

Fc Região de dobradiça

Constituição básica IgG:- duas cadeias polipeptídicas leves (L) e duas pesadas (H) idênticas - cadeias H (pesadas): existem 5 tipos, cada uma dando origem a uma classe de imunoglobulina (IgG, A, M, D,

E)- Cadeia Leve (L light)- Porção amino terminal- Porção carboxi terminal

- porção amino terminal: variabilidade de aminoácidos região variável (VH e VL) / região hipervariável, onde se encontra

o sítio combinatório - restante da cadeia é constante região constante (CH e CL) H e L ligadas através de pontes dissulfídicas, na região V e C aproximam os aminoácidos formando dobramentos chamados de domínios (ligações dissulfídicas – ligação SS

intracadeia) onde: C=constante e V=variável

Fab Fabdobradiça

Cadeia leve

Cadeia pesada

Fc

Fab - Sítio de ligação ao Ag

Fc – espécie específico

- determina classe do Ac

Cadeia pesada - , , , e

Digestão pela papaína:

Dois fragmentos idênticos Fab (fragmento que

se combina com o antígeno – (fragment antigen

binding) e um fragmento que não se liga ao

antígeno Fc (fragmento cristalizável)

Digestão pela pepsina:

Fragmento (Fab’)2 interage com células, principalmente fagócitos, através de receptores Fc ou ativa o complemento

Figura 2: Caracterização (A) Digestão pela Papaína / (B) Digestão pela Pepsina

(A)

(B)

Polimorfismo• Classes ou isótipos

- diferentes estruturas dentro de uma espécie

- 5 classes de cadeia H: , , , e - sub classes (variação da cadeia H)

• Alotipia ou Alótipos:

- pequenas variações - regiões constantes - diferenças genéticas entre indivíduos

• Idiótipos

- definem os determinantes individuais e característicos dos Acs - regiões hiper-variáveis

Funções

- inativação de toxinas e outros agentes químicos

- inativação de vírus

- lise de bactérias

- citotoxicidade

- transferência de imunidade para fetos (IgG)

- transferência de imunidade a lactantes (IgA>IgG)

- fixação do complemento

- regulação da resposta imune

- participam de reações auto-imunes e alérgicas

FUNÇÕESDegranulação

– Membrana de linfócitos B

– Superfície de Fagócitos, Mastócitos e NK

– Soro, plasma e líquido intersticial

– Secreções como leite e o muco

DISTRIBUIÇÃO NATURAL

Resposta primária e secundária

Primeiro contato com Ag- inicialmente: resposta imune, estimulo a linfócito B que se diferencia em plasmócito e libera Ac- acelerado e progressivo da [Ac]- Ac- permanência de concentração basal = indica contato com o antígeno em algum momento

Segundo contato (mesmo Ag)- células receptoras = células de memória- desencadeamento de uma resposta imunológica mais rápida- produção de Ac

Tempo (dias)

Primeira exposição ao Ag

Segunda exposição ao Ag

Tít

ulo

de

Ac

no

so

ro

(un

idad

es)

Resposta SecundáriaResposta Primária

Dinâmica de produção de Ac durante a infecção

Figura 3: Curva de Anticorpos

MUNIDADE PASSIVA NATURAL (MATERNA) E IMUNIDADE ADQUIRIDA ATIVA (INFECÇÃO)

Imunidade Ativa- Ocorre quando o hospedeiro apresenta uma resposta a

um microrganismo ou a um antígeno microbiano.

Imunidade Passiva- Ocorre mediante a transferência de anticorpos ou

linfócitos T específicos para o microrganismo.

As duas formas de imunidade promovem resistência a infecções (imunidade), mas somente as respostas imunológicas ativas que geram memória

FASES DA INFECÇÃO CONFORME PERFIL SOROLÓGICO

INTERPRETAÇÃOINTERPRETAÇÃO

FASE AGUDA

FASE CRÔNICA; Memória sorológica de resposta vacinal ou infecção tardia

SEM INFECÇÃO; deficiência de soroconversão. Período de janela imunológica

FASE DE INTERSEÇÃO entre a fase aguda e fase crônica. Deve-se observar o título de anticorpos das Ig.

• IgM Reagente IgG NR

II. IgM NR IgG Reagente

III. IgM NR IgG NR

IV. IgM Reagente IgG Reagente

IgM > IgG: fase aguda

IgM < IgG: fase crônica

RESULTADO OBTIDO EM EXAMERESULTADO OBTIDO EM EXAME

Anticorpo IgG

- atravessa a barreira placentária humana- a sub-classe IgG3 fixa complemento com mais eficiência- possui 4 sub-classes: IgG1, 2, 3 e 4 que constituem 70, 20, 8 e 2%, respectivamente, do total de IgG- peso molecular 160kD- concentração plasmática = 800 - 1600 mg/dl- geralmente forma monomérica- principal imunoglobulina sérica- meia vida de 21 dias- principal Ig sintetizada na resposta secundária, neutraliza toxinas bacterianas e liga-se aos microorganismos para facilitar a fagocitose- é a responsável pela memória imunológica

Anticorpo IgM- encontra-se principalmente sob forma de pentâmero (cinco monômeros)- é a principal imunoglobulina da resposta primária aos antígenos; é a primeira classe ao elevar-se na fase aguda dos processos imunológicos- redução a monômero de peso molecular 180kDa- aglutinante e citolítico- fixa complemento melhor que IgG3- maturação do ly B, atuando como receptor e interagindo com o antígenoquanto ao controle da ativação ou supressão do linfócito

Anticorpo IgA- peso molecular 160kDa (monômero) ou 360kDa (dímero)não atravessa a placenta - concentração plasmática = 150 a 400 mg/dl- representa importante papel impedindo a penetração, no organismo de substâncias alergênicas e de partículas microbianas

IgA secretora- é a mais encontrada nas secreções exócrinas (saliva, lágrima, colostro, leite materno) = confere imunidade localbarreira contra vírus, micróbios, alérgenos

Anticorpo IgE- não deve ser a única Ig responsável pelasreações anafiláticas- peso molecular de 200kDa (quatro domínios de cadeia H)- concentração plasmática = 0,002 -0,05 mg/dl- seu papel defensivo não esta provado e assim a deficiência destas Ig não podem ser interpretadas- associação: aumento de IgE em infecções parasitárias, facilita a fagocitose- encontra-se ligada a mastócitos e basófilos através de sua porção Fc, participa de fenômenos alérgicos e reações anafiláticas (reação de hipersensibilidade tipo I)- encontrada também no cordão umbilical, mucosas, colostro

Anticorpo IgD- constituição básica de duas cadeias leves ( e ) e duas pesadas- forma monomérica- indivíduos com soro normal possuem pouca IgD- peso molecular 160kDa- não é detectada na circulação- altamente sensível a lise (lábil à degradação)- do mesmo modo que a IgM existe como receptor na superfície de todo linfócito B em determinado momento de sua ontogenia

Aplicação de especificidade, memória e auto-limitação

Figura 4: Microscopia eletrônica – configuração de um anticorpo

Figura 5: Representação esquemática de um anticorpo (Fc, Fab, dobradiça, sítio combinatório)

• Soro - grande número de anticorpos capazes de se ligarem a Ag específicos = soro imune

• mensuráveis (diluições)

• Produção de Ac específico para um determinado epítopo = tecnologia dos anticorpos monoclonais

• Ac produzidos pelo mesmo clone de linfócito B - mesma especificidade

Anticorpos Monoclonais

ANTICORPOS MONOCLONAL

OBTENÇÃO - HIBRIDOMA

• Inicialmente linfócitos B expressam IgM (primeiro Ac numa resposta imune)

• durante uma resposta imune, ocorre a liberação de citocinas por células T que induzem a troca de isotipo para IgG, IgA ou IgE;

• recombinação somática na célula B.

Switching ou Troca de classe

++-- TGF

-+-+- IFN

produçãoIl-5

+-+--IL-4

IgEIgAIgG2aIgG2bIgG1IgG3IgMcitocina

Papel das citocinas na expressão de isótipos

Antígenos

Proteínas exógenas

Vírus Bactérias Parasitas Fungos

VertebradosResposta Humoral

Resposta mediada por células ou Celular

antígeno

Plasmócitos secretores de Ac

Eliminação do Ag

Secreção de citocinas

Célula própria alterada

Eliminação de células próprias

alteradas

+ Citocinas do linfócito TH

Linfócito B Linfócito T

Linfócito TH

Linfócito TC

+ MHC classe II ligado a Ag + MHC classe I ligado

a AgLinfócito TH ativado

Para estudar

1) Defina anticorpo 2) Esquematize um Ig e indique e explique todas as

partes: Fab, Fc, sítio combinatório, região da dobradiça.

3) Explique as principais funções das Ig: IgM, G, A, E e D.

4) Interprete os quadros:Paciente apresenta sorologia para Toxoplasmose:(a) IgG- IgM+(b) IgG+ IgM-(c) IgG- IgM-

Agradecimentos

Profas Paula Knox e Adriana de Brito, pelo material gentilmente cedido

Obrigada, paz, amor e harmonia!Profa. Alessandra