procedimiento operativo estandarizado nitritos...siguientes soluciones de acuerdo a la siguiente...

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDARIZADO DETERMINACION DE NITRITOS EN DERIVADOS

CARNICOS

CODIGO P-SA-106

FECHA DE EMISIÓN

08/04/2016

VERSIÓN 01

PÁGINA Página 1 de 12


CARNICOS

ELABORÓ REVISÓ APROBÓ

REFERENTE DE LABORATORIO REPRESENTANTE DE CALIDAD

PROFESIONAL DEL LABORATORIO

SECRETARIO DE SALUD

REPRESENTANTE DE LA DIRECCIÓN


CARNICOS

CODIGO P-SA-106

FECHA DE EMISIÓN

08/04/2016

VERSIÓN 01


1. OBJETIVO

Describir el procedimiento para la determinación de nitritos de sodio en derivados cárnicos. 2. ALCANCE

Aplica para los alimentos derivados cárnicos que ingresan al laboratorio de salud pública seccional del Meta, área de salud ambiental laboratorio físico-químico de alimentos. 3. DEFINICIONES

Derivados Cárnicos: son productos alimenticios preparados total o parcialmente con

carnes, despojo, grasas y subproductos comestibles, procedentes de los animales de abasto u otras especies y, en su caso, ingredientes de origen vegetal o animal, así como condimentos, especias y aditivos, siempre que estén autorizados, y se ajusten a las normas específicas de calidad.

Proteínas: son macromoléculas formadas por cadenas lineales de aminoácidos. Nitritos: En la naturaleza los nitritos se forman por oxidación biológica de las aminas y

del amoníaco, o por reducción del nitrato en condiciones anaeróbicas. fórmula: NO2. Se usa en la industria alimentaria, concretamente en la cárnica en la que se emplea como conservante y fijador de color de carnes y sus derivados.

4. RESPONSABLES Los profesionales del Laboratorio Fisicoquímico de Alimentos Y Bebidas Alcohólicas del laboratorio de salud pública del Meta, son responsables de aplicar estas técnicas en forma en adecuada, sin hacer ningún cambio o variación que no esté debidamente documentado y autorizado. 5. CRITERIOS PARA APROBACION O RECHAZO DE LA MUESTRA

http://es.wikipedia.org/wiki/Oxidaci%C3%B3n

http://es.wikipedia.org/wiki/Amina

http://es.wikipedia.org/wiki/Amon%C3%ADaco

http://es.wikipedia.org/wiki/Nitrato

http://es.wikipedia.org/wiki/Anammox

http://es.wikipedia.org/wiki/Industria_alimentaria

http://es.wikipedia.org/wiki/Industria_c%C3%A1rnica

http://es.wikipedia.org/wiki/Conservante

http://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Fijador_de_color&action=edit&redlink=1

http://es.wikipedia.org/wiki/Carne


CARNICOS

CODIGO P-SA-106

FECHA DE EMISIÓN

08/04/2016

VERSIÓN 01


La cantidad de muestra debe ajustarse a lo establecido en el cuadro de aceptación

para la recepción de muestras fijado por el laboratorio de salud pública del departamento del Meta (cantidades mínima y condiciones en las que debe llegar el alimento para su análisis fisicoquímico y microbiológico).

Las muestras de alimentos se recibirán en su empaque original y a temperatura de refrigeración. Los alimentos que no tengan empaque original deben ser enviados en un material apropiado no toxico impermeable al agua y a las grasas.

Los alimentos que presenten fecha de caducidad, deben encontrarse vigentes al momento de solicitarle su análisis.

Para todas aquellas muestras en las que se deberá tomar más de una muestra estas deberán ser del mismo lote.

Nota: Si el técnico no cumple con los criterios antes mencionados se le hace saber si se le rechaza la muestra. 6. ANÁLISIS A DETERMINAR SEGÚN MÉTODO

PARAMETRO TECNICA METODO

Determinación De Nitritos en Derivados

Cárnicos

Colorimetría AOAC Método Oficial 973.31

Norma Técnica ICONTEC 4565(1

actualización)

Colorimetría AOAC Método Oficial 973.31

6.1 Referencias Manual de Análisis de Cárnicos. Ministerio de Salud. Instituto Nacional de Salud. INVIMA 7. DETERMINACIÓN DE NITRITOS EN DERIVADO CARNICOS 7.1 Fundamento

Los nitritos en presencia de Sulfanolamida y diclohidrato de N-1-Naftiletilendiamina desarrollan color rojo, el cual se mide a una longitud de onda de 538 nm

8. PROCEDIMIENTO


CARNICOS

CODIGO P-SA-106

FECHA DE EMISIÓN

08/04/2016

VERSIÓN 01


8.1 Equipos

Balanza analítica Precisa 121 sensibilidad 0,0001 gr Balanza Kern JLK sensibilidad 0,01 gramos Cabina extractora de humos y gases Control de Contaminación Ltda. Espectrofotómetro Uv-Vis Shimazu 1700 Baño Termorregulador SW23 Julabo Cronometro

8.2 Materiales

Celdas de cuarzo para el espectrofotómetro Uv-Vis Shimazu Erlenmeyer de 500 ml Pipetas Volumétricas Clase A 10,20,50 Matraz Clase A 50, 500 y 1000 ml Micropipeta de 1 ml Vasos de precipitado de 50 ml Embudos Papel filtro: Guantes Tapa bocas

8.3 Reactivos Agua destilada o desionizada

Nitrito de Sodio Reactivo Analítico: Pureza mínima de 99 % peso Reactivo

Analítico. Solución de ácido acético al 15% v/v: Coloque aproximadamente 200ml de agua

desionizada en un balón aforado de 500 ml adicione 75 ml de ácido acético glacial y diluya a volumen con agua desionizada.

Reactivo de NED: Se disuelven 0,2 gramos de N-(1-Naftil) etilendiamino, 2 HCl en 150 ml de Acido Acético al 15 % (v/v).Se filtra si es necesario, se guarda en botella oscura.

Reactivo de Sulfanilamida: Pesar 0,5 gramos de Sulfanilamida, adicionar 150 mililitros de Acido Acetico al 15 % (v/v) se filtra si es necesario, se guarda en botella oscura.


CARNICOS

CODIGO P-SA-106

FECHA DE EMISIÓN

08/04/2016

VERSIÓN 01


. 8.4 Patrones Y Materiales De Referencia

Estándar certificado de nitrito de sodio USP 1000 mg/L o equivalente.

8.4.1 Soluciones Estándar de Nitrito

Solución Stock de 1000 ppm (mg/L): Disolver 1,0000 gramo de NANO2 en agua

desionizada en un balón aforado de 1000 ml y completar a volumen. Solución Intermedia de 100 ppm (mg/L): Diluir 100 ml de la solución stock de

10000 mg/L en agua desionizada en un balón aforado de 1000 ml y completar a volumen.

Solución de Trabajo de 1 ppm (mg/L): Diluir 10 ml de la solución 100 mg/L agua desionizada en un balón aforado de 100 ml y completar a volumen.

8.5 Condiciones Ambientales El análisis se puede efectuar dentro de las siguientes condiciones ambientales:

Condición Ambiental Rango

Temperatura Ambiente 5-40 C

Humedad Relativa No debe superar el 50 % (40C)

8.6 Condiciones Previas

Preparar los estándares frescos semanalmente y realizar las correcciones de peso

teniendo en cuenta la pureza del estándar. Consultar las fichas de seguridad de los reactivos químicos a emplear para la

realización del análisis.

8.7 Preparación de la Muestra

Tomar entre 100 gr y 200 gr de muestra Licuar la muestra hasta triturarla lo más fino posible Homogenizar con ayuda de una espátula Transferir a un recipiente con tapa debidamente identificado. La muestra debe

permanecer en refrigeración, hasta el momento de su análisis.

8.8 Preparación de la Curva de Calibración:


CARNICOS

CODIGO P-SA-106

FECHA DE EMISIÓN

08/04/2016

VERSIÓN 01


A partir de la solución de trabajo diario de 1,0 p.p.m NO2 se preparan las siguientes soluciones de acuerdo a la siguiente tabla:

Volumen tomado a partir de 1,0 p.p.m de NO2(mls)

Volumen total de Muestra (mls)

Concentración (p.p.mN02)

20 50 0.20

40 50 0.40

60 50 0.60

80 50 0.80

100 50 1.0

9. DESARROLLO

N. RESPONSABLE ACTIVIDAD FLUJOGRAMA REGISTRO

1 INICIO

2 Director Técnico Profesional de

Laboratorio

Desprender la etiqueta del empaque de la muestra si lo contiene y guardarlo para posterior verificación de rotulado según resolución 5109 de 2005.


Laboratorio

Pesar 5,0 gr de muestra finamente picada y mezclada en un vaso de precipitado de 50 ml

F-SA-34 Control interno de equipos


Laboratorio

Anadir a la muestra 40 ml de agua desionizada caliente a 80 °C mezclar con un agitador de vidrio, teniendo cuidad de romper todos los grumos y se transfiere a un matraz de 500 ml)

Anadir a la muestra 400 ml agua caliente mezclar y transferir a un matraz de 500 ml

Pesar 5,00 gramos de muestra.

Desprender la etiqueta del producto

INICIO

Transferir la muestra un balón de 500 ml, completar a volumen


CARNICOS

CODIGO P-SA-106

FECHA DE EMISIÓN

08/04/2016

VERSIÓN 01



Laboratorio

Se enjuaga el vaso precipitado de 50 ml con porciones sucesivas de agua caliente y se adicionan estos enjuagues al matraz.


Laboratorio

Se añade suficiente agua caliente hasta un volumen de 300 ml y se lleva el matraz al baño de agua hirviendo por 2 horas, agitando ocasionalmente.


Laboratorio

Se enfría a temperatura ambiente


Laboratorio

Se disuelve a volumen con agua y se vuelve a mezclar


Laboratorio

Se filtra, se agregan 2,5 ml del reactivo de sulfanilamida, conteniendo a alícuotas de 5-50ugs(se recomienda 20 ml) en un matraz de 50 ml


Laboratorio

Después de 5 minutos, se agregan 2,5 ml de reactivo NED, se mezcla, se disuelve a volumen, se mezcla y se permite el desarrollo del color por 15 minutos.


Laboratorio

Se transfiere una porción de la solución a la celda del espectrofotómetro y se determina la absorbancia a 540 nm contra un blanco preparado con 45 ml de agua, 2,5 ml de Reactivo de sulfanilamida y 2,5 ml de reactivo de NED.


Laboratorio

Elaboración Curva de Calibración: Se determina la presencia de Nitrito por comparación con una curva de calibración de la siguiente forma: Se añaden 10 ml,20 ml,30 ml y 40 ml de solución de 1 mg/L en matraces de 50 ml, se añaden 2,5 ml de reactivo de Sulfanilamida, se mezcla y

Enjuagues sucesivos del vaso precipitado de 50 ml

Agregar 2,5 ml de reactivo de Sulfanidamida en un matraz de 50 ml

Agregar 2,5 ml de reactivo NED y llevarla a un matraz de 50 ml.

Añadir 300 ml de agua caliente en un matraz de 500 ml.

Leer en el espectrofotómetro a 540 nm

Realizar curva de calibración.

Enfriar a temperatura ambiente

Se disuelve a volumen con agua y mezclar


CARNICOS

CODIGO P-SA-106

FECHA DE EMISIÓN

08/04/2016

VERSIÓN 01


Nota: Esta determinación debe realizarse por duplicado.

8. CALCULOS

8.1 Resultados e Informe Para obtener la cantidad de nitritos presentes en la muestra analizada, hay que tener en cuenta: Peso de la muestra Alícuota de la muestra que se tomo Volumen final a la que fue llevada la muestra Porcentaje de transmitancia

Absorbancia

Concentración de Nitritos p.p.m: %A* V (total) M*DI*PM Donde: p.p.m= Partes por MIllon Na NO2

%A= % de Absorbancia V (Total)= Volumen Total en 500 ml M= Pendiente de la curva de calibración DI= Alícuota tomada (20 ml) P.M= Peso muestra en g.

realiza el procedimiento anterior, iniciando después de los 5 minutos de espera (ítem 9)


Laboratorio

La curva de calibración será una recta de hasta 1 mg/L de Nitrito hasta el final de la solución

14

FIN

FIN


CARNICOS

CODIGO P-SA-106

FECHA DE EMISIÓN

08/04/2016

VERSIÓN 01


9. VERIFICACIONES 9.1 Aseguramiento De Calidad Del Método Realizar blanco de reactivos La curva de calibración se elabora cada vez que se realice un análisis Realizar análisis de la muestra por duplicado Realizar al papel filtro el test para contaminación de nitritos cada vez que inicie el uso de

una caja de papel filtro Verificar que los reactivos estén vigentes Verificar calibración de la balanza analítica y realizar registro en el control interno de

equipos F-SA-34 y en la hoja de vida de equipos F-SA-18 Registrar los controles internos de las lecturas de los patrones de Nitritos en el formato

F-SA- 162

Test para la Contaminación de Nitritos en Papel Filtro: Papel Filtro: Evalúe la posible contaminación del papel filtro con nitrito analizando 3 o 4 hojas de papel tomadas al azar de la caja:

Se filtran 40 ml de agua destilada o desionizada a través de cada hoja. Se añaden 4 ml de reactivo de sulfanilamida, se mezcla y se deja en reposo por 5

minutos, se añaden 4 ml de reactivo de NED y se espera por 15 minutos. En caso de ser positiva cualquiera de las muestras, se descarta toda la caja de papel. 9.2 Criterio De Aceptación o Rechazo

CRITERIO RANGO DE ACEPTACION ACCION PARA INCUMPLIMIENTO

DE CRITERIOS

Blanco de Reactivo Translucida y sin color, la presencia de color indica

contaminación.

Repetir Blanco Revisar Lavado de Material

Preparar Nuevamente Reactivos

Curva de Calibración r2 ≥ 0.98 Repetir Curva

Repetibilidad

CV < 5% entre duplicados analizados el mismo día por el

mismo analista bajo las mismas condiciones

Repetir Análisis

Reproducibilidad

CV < 5 % de los resultados de análisis individuales obtenidos

sobre idéntico material de análisis por dos laboratorios

distintos

Repetir Análisis


CARNICOS

CODIGO P-SA-106

FECHA DE EMISIÓN

08/04/2016

VERSIÓN 01

PÁGINA Página 10 de

12

Reactivos vigentes Vigencia del reactivo

Mantenimiento de equipos

Calibración, verificación y mantenimiento vigente

Repetir Análisis

9.3 Expresión De Resultados Los resultados se expresan en miligramos sobre Kilogramos (mg/Kg) de Nitritos de Sodio de muestra y se consignaran en el formato Resultados Fisicoquímicos de Nitritos Cárnicos F-SA- 180. 9.4 Rango De Medición Intervalo lineal para nitritos 0.2 – 1.0 mg/L en curva de calibración 9.5 Control de calidad

Control de Calidad Interno La curva de calibración se realiza cada vez que se realice un análisis y se registran los controles internos de las lecturas de los patrones de Nitritos en el formato F-SA- 162.

Control de Calidad Externo El laboratorio participa en programas de evaluación externa con el INVIMA. Los resultados se registran en el formato F-SA-109 “Análisis de resultados de control de calidad externo”. 10. REGISTROS


CARNICOS

CODIGO P-SA-106

FECHA DE EMISIÓN

08/04/2016

VERSIÓN 01


12

Registro Responsable Como

conservarlo Donde

conservarlo Tiempo de

conservación Disposición

Final

F-SA-34 Formato de control de interno de

equipos

Director Técnico /Profesional de

Laboratorio

Medio físico y/o electrónico

Según Listado Maestro de

documentos F-MC-04, Según

F-MC-03 -Listado

maestro de registros y/o

tabla de retención

documental


documentos F-MC-04, Según F-MC-03 -Listado

maestro de registros y/o tabla

de retención documental



F-MC-03 -Listado maestro de registros y/o

tabla de retención

documental

F-SA-18 Hoja de vida de Equipos


Laboratorio




F-MC-03 -Listado


tabla de retención

documental








tabla de retención

documental

F-SA-109 Análisis de resultados Control de

calidad


Laboratorio




F-MC-03 -Listado


tabla de retención

documental








tabla de retención

documental

F-SA-162 Control Interno de Nitritos

cárnicos


Laboratorio




F-MC-03 -Listado


tabla de retención

documental








tabla de retención

documental


CARNICOS

CODIGO P-SA-106

FECHA DE EMISIÓN

08/04/2016

VERSIÓN 01


12

F-SA-180 Resultados Fisicoquímicos de Nitritos cárnicos


Laboratorio




F-MC-03 -Listado


tabla de retención

documental








tabla de retención

documental

11. HISTORIAL

VERSIÓN VIGENCIA IDENTIFICACIÓN DE LOS CAMBIOS

1 8/04/2016 Versión inicial

procedimiento operativo estandarizado nitritos...siguientes soluciones de acuerdo a la siguiente...

Documents