prezentace aplikace powerpointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_odber_vzorku.pdf · podle...
TRANSCRIPT
![Page 1: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/1.jpg)
Odběr vzorků
![Page 2: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/2.jpg)
Faktory ovlivňující růst mikroorganismů v potravinách
Vnitřní : živiny, pH, redox potenciál, vodní aktivita,antimikrobiální aktivity
Vnější: vlhkost, teplota, atmosféra
Implicitní: specifická růstová rychlost, synergismus, antagonismus, komensalismus
Technologické: krájení, mytí, balení, záření, pasteurizace
![Page 3: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/3.jpg)
Podle nároků na výživu dělíme bakterie :
Autotrofní - zdrojem jsou anorganické látky (zdroj uhlíku CO2, zdroj dusíku N2, NH4+, NO3- )
Heterotrofní - zdrojem jsou organické látky, a to :
a) prototrofní (jednoduché org.látky - ethanol, sacharidy a p.)
b) auxotrofní (vyžadují složité org.látky - např. vitaminy,
nukleotidy a p.)
![Page 4: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/4.jpg)
Velká většina mikroorganismů je chemoorganotrofní
chemoorganotrofie- Zdrojem energie je oxidace redukované
organické látky. Tato látka je současně zdrojem uhlíku.
Zdroj uhlíku a energie. A) komplexní
B) definovaný
![Page 5: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/5.jpg)
Metody stanovení mikroorganismů
Kultivační: kvalitativní, kvantitativní (tuhé půdy, MPA)
Mikroskopické
Rychlé metody: biofyzikální
biochemické
imunochemické
molekulárně biologické
![Page 6: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/6.jpg)
kvantitativní
Tuhé půdy : universální
selektivní diagnostické
MPA : most probably number
![Page 7: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/7.jpg)
kvalitativní
Selektivní pomnožení
Potvrzující testy:
biochemické
sérologické
![Page 8: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/8.jpg)
Rychlé metody stanovení
Mikroskopické metody
přímé
epifluorescenční
po filtraci
Biochemické a biofyzikální
Imunochemické
Molekulární genetiky
![Page 9: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/9.jpg)
Kultivační metody
• Umožňují udržení mikroorganismů (MO) v živém stavu, jejich růst a množení na živné půdě
• Pro detekci patogenů v potravinách využívány již déle než sto let
• Dodnes představují základ téměř všech metod pro zjišťování patogenů v potravinách
![Page 10: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/10.jpg)
Obecná ustanovení
• Každé vyšetřeni, fyzikální, chemické či mikrobiologické, začíná odběrem vzorků.
• Na odběr vzorků bezprostředně navazuje jeho přeprava, uchovávání a zpracování v laboratoři.
• Vždy je třeba mít na paměti, že způsob odběru a přípravy vzorků může významně ovlivnit výsledky provedeného vyšetřeni.
![Page 11: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/11.jpg)
Legislativa • ČSN ISO 7218 – Všeobecné pokyny pro
mikrobiologické zkoušení
• ČSN 56 0100 – Mikrobiologické zkoušení poživatin, předmětů běžného užívání a prostředí potravinářských provozoven
• ČSN 56 0080 – Způsob odběru vzorků pro mikrobiologické zkoušení
• Vyhláška MZČR 252/2004 Sb. (voda)
• ČSN ISO 5667 - Jakost vod
• Nařízení komise (ES) č. 1441/2007 (č.2073/2005)
![Page 12: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/12.jpg)
Typy rozborů
Provozní
Jakostní a hygienické
Cílené
![Page 13: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/13.jpg)
Odběr vzorků
• Při preventivní soustavné a namátkové kontrole
hygienické a jakostní nezávadnosti, plnohodnotnosti, trvanlivosti a uchovatelnosti surovin, polotovarů a hotových výrobků
• Posuzování správnosti technologických postupů
• Posuzování úrovně hygieny a sanitace
• Stížnosti na jakost a uchovatelnost
• Vzniku onemocnění z poživatin a PBU
![Page 14: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/14.jpg)
Postup mikrobiální analýzy
• Odběr vzorků
• Transport
• Příprava ke zkoušení
• - dokumentace
• - dekontaminace obalů
• - otevírání
• - navážky
• - ředění
![Page 15: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/15.jpg)
Vzorek • jednotka výrobku, suroviny nebo jiného
zkoušeneho materiálu:
• originalni spotřebitelske baleni,
• určitý počet kusů u kusovych výrobků
• určitá hmotnost (objem) u nekusových výrobků a surovin.
Pro mikrobiologické vyšetřeni se nejčastěji odebirají vzorky výchozich surovin, pomocných látek, fázové vzorky v průběhu výroby, dále stěry z provozní zařízení, hotové výrobky či skladované potraviny
![Page 16: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/16.jpg)
Vzorkovaná jednotka
• 1 velkoobchodni originalni baleni (karton, bedna, balík, pytel, paleta atd.),
• 1 upravený celek, jde-li o kusové produkty,
• celá zásilka, jde-li o sypané či jiné volně ložené produkty (odebírá se 5 vzorků z různých částí zásilky),
• 1 nádrž, tank, konev či jiná nádoba, jde-li o produkty tekuté
![Page 17: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/17.jpg)
Odběr vzorků
• Senzorické hodnocení (vzhled, vůně)
• Rozdělení do tří kategorií
• Nejdříve odběr vzorků pro mikrobiologické zkoušení!!!!!!
• Odběr jednotlivých vzorků směsné či průměrné
• Pozor na množství vzorku!!!!!!
![Page 18: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/18.jpg)
Odběr vzorků
Odběr vzorků provádí tzv. oprávněná osoba,
která je:
• seznámena se zásadami správného vzorkování
• nese zodpovědnost za správnost provedení odběru
![Page 19: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/19.jpg)
Odběr vzorků
• Kdo? – oprávněná osoba • Jak hodnotit? Senzorika bez ?????? • 1) výrobky, které nemají zjevnou mikrobiální
kontaminaci • 2) výrobky podezřelé vykazují známky způsobené
možnou mikrobiální kontaminací- voda, plyn
• 3) výrobky zkažené, se zjevnými známkami mikrobiálního kažení- osliznutí, hnití, plesnivění, kysání, kvašení, změna barvy apod.
(Tato skupina vzorků se běžně pro kontrolní účely mikrobiologicky nevyšetřuje).
![Page 20: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/20.jpg)
Vzorkování v rámci výkonu státního zdravotního dozoru
Náhodný výběr jednoho vzorku ze vzorkovaného celku (určitý pokrm) Cílený odběr se provádí v případech EPI souvislosti Odděleně se vzorkují: součástí pokrmu suroviny rozpracované pokrmy a polotovary
![Page 21: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/21.jpg)
Vzorkování v rámci výkonu státního zdravotního dozoru
Vzorek je: • Podávaná porce • Kusový výrobek (při odběru vzorků na průkaz bakteriálních toxinů se odebere větší množství vzorku) U vícesložkových pokrmů lze odebrat všechny součásti v poměru, v jakém jsou zastoupeny nebo odděleně jako několik vzorků
![Page 22: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/22.jpg)
Odběr vzorků
• Při úřední kontrole – tj. hodnocení, zda daná šarže (dávka) odpovídá stanoveným mikrobiologickým požadavkům, se odebírá zpravidla 5 vzorků.
• U vybraných skupin výrobků může byt tento počet ještě vyšší (upravuje platná evropská legislativa týkající se mikrobiologických kritérií pro potraviny).
![Page 23: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/23.jpg)
Odběr nekusových vzorků
Pokud není odebíráno celé spotřebitelské balení, musí být ke vzorkování použito výhradně:
• sterilní náčiní z korozivzdorné oceli (sondy, nebozezy, naběračky, lžíce, nože, pinzety, atd.)
• skla (pipety), které se předem balí do
• hliníkové fólie a sterilizují v horkovzdušném
sterilizátoru či autoklávu.
• kovové nástroje lze při odběru průběžně sterilizovat 70% etanolem a opálením v plameni.
![Page 24: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/24.jpg)
Odběr nekusových vzorků
Vzorky se odebírají do sterilních, dostatečně
velkých nádob či obalů
• prachovnic se zabroušenou zátkou
• zavařovacích sklenic s uzávěrem „twist off“
• fólií (alobal)
• polyetylénových sáčků
• sterilního nepropustného papíru.
![Page 25: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/25.jpg)
Hmotnost odebíraných vzorků
Odebraný počet vzorků musí vystihovat celou
vyšetřovanou partii tak, aby bylo možno posoudit povahu, stupeň a rozsah mikrobiálního znečištění.
Při odběru vzorků pro mikrobiologické vyšetření se neodebírají vzorky průměrné (tj.směsné).
![Page 26: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/26.jpg)
Hmotnost odebraného vzorku
musí být dostatečná pro provedení všech předepsaných vyšetření Odebíráme-li vzorek výrobku ve spotřebitelském balení, potom: a) odebereme 1 spotřebitelské balení, pokud jeho hmotnost (objem) dosahuje požadované hmotnosti;
b) pokud hmotnost (objem) spotřebitelského balení výrazně převyšuje potřebné množství, stačí odebrat jako vzorek poměrnou část spotřebitelského balení, nesmí tím však být ohroženo dosažení účelu vyšetření; c) pokud hmotnost (objem) spotřebitelského balení je nižší než požadované množství, odebereme potřebný počet spotřebitelských balení
![Page 27: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/27.jpg)
Potřebná množství vzorků pro mikrobiologické vyšetření.
Druh vzorku Množství tekuté 300 ml koncentráty 150 g kašovité 250 g vejce 3 ks pevné 300 g drůbež 1 ks sušené 150 g pitná voda 500 ml
![Page 28: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/28.jpg)
Odběr vzorků závisí na balení a konsistenci vzorku
• nejméně 1 kus u výrobků ve spotřebitelském balení nejméně však podle charakteru vzorku 150-250 g (ml);
• až 500 g(ml) u tekutých, kašovitých, sypkých a malých kusových výrobků
• 500-1000g(ml) výrobků ve velkých kusech nebo velkých baleních jednotkách.
![Page 29: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/29.jpg)
Způsob odběru • tekuté a kašovité promíchat, u vyšších objemů
odběr ze tří vrstev
• sypké promíchat, velké objemy z různých míst
• střední a velké kusové výrobky:
– odkrojení
– odřezání z hloubky
– použití vzorkovače
ASEPTICKÁ PRÁCE!!!!!!!!
![Page 30: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/30.jpg)
Označování vzorků
• O odběru musí být vyhotoven protokol o odběru vzorků.
• Současně se vyplní žádanka o laboratorní vyšetření, ve které je nutno specifikovat, jaká konkrétní vyšetření mají být u vzorku provedena.
![Page 31: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/31.jpg)
Protokol o odběru vzorků • Číslo protokolu o odběru vzorků
• Účel mikrobiologického rozboru • Místo, datum, hodina odběru • Přesný název vzorkovaných výrobků (druh, typ obalu,
hmotnost) • Název výrobce, datum (hodina) výroby • Název dodavatele, datum dodávky • Posouzení vnějšího vzhledu, obalů, závady • Způsob, počet, hmotnost odebraných vzorků • Adresa institucí, kterým budou sděleny výsledky • Způsob úchovy vzorků do doby mikrobiologického
rozboru • Jména a příjmení, funkce a podpisy osob, které odběr
prováděly a které byly odběru přítomny
![Page 32: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/32.jpg)
Přeprava vzorků Zvláštní pozornost musí být věnována zachování doporučených teplot úchovy v
průběhu přepravy jednotlivých druhů vzorků:
• stabilní výrobky - okolní teplota
• čerstvé a chlazené výrobky - rozmezí teplot 0-4oC
• zmrazené a hlubokozmrazené výrobky - teploty pod -18 oC
• pasterované a podobné výrobky - rozmezí teplot 0-4 oC
• zkažené jednotky stabilních výrobků - rozmezí teplot 0-4 oC
• rychle se kazící potraviny - např. vnitřnosti, čerstvé ryby musí být při přepravě uchovávány při teplotě v rozmezí 0-2 oC
![Page 33: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/33.jpg)
Transport
• mrazené výrobky v isotermických obalech
• Konzervy - nemrazit obsah - pokojová teplota
• ostatní vzorky při 5oC
• maximální doba přepravy 6 hodin
![Page 34: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/34.jpg)
Příjem a uchovávání vzorků v laboratoři
Při příjmu vzorků v laboratoři se:
• posoudí jejich stav
• zkontroluje se, zda souhlasí údaje uvedené v průvodní dokumentaci
• provede se záznam o příjmu vzorků do laboratorního deníku.
Obecně musí být o vzorcích přijatých do laboratoře vedena dokumentace tak, aby byl monitorován jejich postup od okamžiku přijetí až do doby zpracování protokolu o výsledku zkoušení.
![Page 35: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/35.jpg)
Typy vzorkování
Základem vzorkování je vytvoření vzorkovacího plánu, podle kterého bude sledovaný soubor potravinářských výrobků sledován.
Komplexní plán musí obsahovat následující prvky:
a) Jaký mikrob nebo skupina mikrobů bude sledovaná;
b) Počet testovaných vzorků (n);
c) Testovací metoda (metody);
d) Mikrobiální limit (y); m & M
- přijatelný (< m) - mezní hodnota (>m a > _ M)
- nepřijatelná hodnota (>M)
e) Počet vzorků spadajících do shora uvedených kategorií
Pro vzorkování užívané v mikrobiologii se užívá dvouparametrický a tříparametrický plán.
Podle těchto schemat se ze zkoumaného souboru odebírá dané množství vzorků.
![Page 36: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/36.jpg)
Zápis do laboratorního deníku musí obsahovat
• pořadové číslo záznamu
• datum a hodinu příjmu vzorků
• druh, množství a charakteristiku vzorků
• údaje o vzorkování (datum, způsob vzorkování, konzervace, atd.)
• jméno a adresu majitele vzorků
• datum a hodinu zahájení rozboru
• požadovaný rozsah vyšetření vzorků
• způsob přípravy vzorků k rozboru (hmotnost
• navážek a stupeň ředění, zjištěné mikrobiologické ukazatele)
• jméno osoby, která vyšetření provedla
• případně další nezbytné údaje.
![Page 37: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/37.jpg)
Příprava vzorku k rozboru
• - dokumentace
• - dekontaminace
• - příprava navážek
• - zřeďování vzorků
![Page 38: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/38.jpg)
Dokumentace
Protokol o odběru
Laboratorní deník:
• - datum a hodina příjmu
• - datum event. hodina zahájení rozboru
• - testované ukazatele
• - počet vzorků
• - způsob přípravy vzorku (množství, ředění)
![Page 39: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/39.jpg)
Protokol o odběru
• číslo
• místo
• datum
• hodina
• způsob
• údaje o výrobku
• konrétní osoba
• podpisy
![Page 40: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/40.jpg)
Protokol o rozboru
• - senzorické hodnocení
• - živné půdy
• - způsob očkování
• - teplota a doba inkubace
• - vyhodnocení výsledků
• - závěr
![Page 41: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/41.jpg)
Dekontaminace obalů
• Hermetické obaly (sklo, kov, plast)
• -odstranění
• -omytí detergentem
• -oplach čistou vodou
• -osušení
• Nehermetické obaly
• - otření sterilním tamponem s ethanolem
![Page 42: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/42.jpg)
Kontrola hermetičnosti
• plechovka se ponoří do vody cca 85oC na 5-7 min
• plechovka se ponoří do převařené, schlazené vody (var. 15 min) v exikátoru
• skleněné obaly: filtrační papír kolem uzávěru
![Page 43: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/43.jpg)
Zmrazené výrobky
• 18 hodin při teplotě 2-5oC
• 15 minut při teplotě 35oC
![Page 44: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/44.jpg)
Zpracování vzorku
• Do 3 hodin
• Do 24 hodin
• Do 48 hodin
• Skladování!!!!
![Page 45: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/45.jpg)
Zřeďování vzorků
• fysiologický roztok s peptonem (0,85%NaCl + 0,1%peptonu, pH 7)
• Pozor Chladový šok
• Teplota zřeďovacího = teplota navážky
• tuky 37oC psychrofilní, 40-45oC ostatní
• Hypertonické roztoky – bez NaCl
• Halofilni, osmofilní – zvýšený obsah NaCl
![Page 46: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/46.jpg)
Zřeďování vzorků
• Výchozí ředění
• Tekuté, tuhé-nerozpustné 1:9
• Tuhé rozpustné 1:10
• Botnající 1:9, sterilní olej a poté ředící roztok
• Ojedinělé mikroorganismy
- bez ředění
Tekuté, filtrovatelné – membránová filtrace
DOBA MANIPULACE SE VZORKEM: 30 minut!!!!!
![Page 47: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/47.jpg)
Deskové metody
a) Zalévání do pevných půd
2 misky, 1 ml vzorku, vytemperovaná půda, 4-5mm vrstva rozmíchat!!!!!!
b) Roztěr na povrch půd
2 misky, předsoušení půd, 0,1-0,2 ml vzorku
![Page 48: Prezentace aplikace PowerPointold-biomikro.vscht.cz/vyuka/mzp/2018-05-25_ODBER_VZORKU.pdf · Podle nároků na výživu dělíme bakterie : Autotrofní - zdrojem jsou anorganické](https://reader034.vdocuments.mx/reader034/viewer/2022051804/5ff1a6bb14f3c74dde06cd06/html5/thumbnails/48.jpg)
Membránová filtrace
• Vzorky s malým množstvím resuspendovaných částic se filtrují nejdříve přes filtr o průměru porů 4µm
• Podle zjišťované skupiny mikroorganismů přes filtr : bakterie 0,3 µm