preparaciones para examen con el microscopio de campo luminoso, campo oscuro y contraste de fases....
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Preparaciones para Examen con el Microscopio de Campo Luminoso, Campo Oscuro y Contraste
de Fases.
La obtención de preparaciones adecuadas para el examen microscópico puede conseguirse mediante dos técnicas generales, en las que los microorganismos pueden ser examinados en estado viviente y sin teñir ó después de la aplicación de colorantes para que resalten con más claridad:
a) Observación Vital: hace posible la observación de los
organismos vivos suspendidos en un líquido b) La Preparación de frotis ( películas ) desecados, fijos y teñidos
de la muestra.
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Observacion Vital a) Observación Vital: hace posible la observación de los
organismos vivos suspendidos en un líquido Preparaciones Húmedas
Preparaciones de Gota pendiente
Tinciones Vitales
-La morfología de las espiroquetas se altera mucho cuando se desecan y tiñen.
-Para determinar la movilidad de las baterias.
-Para determinar cambios citológicos durante la división celular.
-Ofrecen ventajas para la observación con microscopía de Campo Oscuro y Contraste de Fases.
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Anillo de Vaselina
Zona excavada
Asa de Inoculación
Gota de Cultivo bacteriano
Cubreobjetos
Cubreobjetos Gota de Cultivo
Vaselina
Preparación de Gota pendiente
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Preparación del Frotis: Películas
a) Preparación de frotis ( películas ) desecados, fijos y teñidos de la muestra.Los pasos a seguir son:
Confección del frotis ó película Secado
Fijación
Coloración
- Producto líquido
- Cultivo en medio sólido
- Sangre
-Por calor
-Con alcohol metílico, formol u otros fijadores
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Forma de Realizar una Extensión de Sangre
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Coloración
Coloración: es el proceso de teñir artificialmente los microorganismos con colorantes ó reactivos para facilitar su estudio microscópico.
Colorante
Grupo Cromóforo-
Grupo Auxócromo
Mordiente-
Soluciones acuosas ó diluídas en alcohol.
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Tipos de ColorantesLos Colorantes pueden ser:
Colorantes Naturales. Colorantes Artificiales.Según el tipo de grupo auxócromo, los colorantes artificiales se dividen en:
A) Acidos . Grupo auxócromo: COOH, SO3H .
B ) Basicos . Grupo auxócromo: NH2 ó N(CH3 )2
C) Neutros
D) Indiferentes
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Métodos de Coloración
Los métodos de Coloración son: a) Coloraciones Simples: fucsina fenicada diluída, azul de metileno, cristal
violeta y safranina. b) Coloraciones Selectivas ó Estructurales: para cápsulas, gránulos
metacromáticos, esporas, flagelos, etc. en bacterias. c) Coloraciones diferenciales : Tinción de Gram, Tinción de Ziehl
Neelsen d) Coloraciones Panópticas : Tinción de Giemsa, Tinción de Mae-
Grenwald-Giemsa Tinción de Wright.
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FIJACIÓN
CRISTAL VIOLETA
TRATAMIENTO CON IODO
DECOLORACIÓN
CONTRACOLORACIÓN: SAFRANINA
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