Praktična nastava Mikrobiologija 2014/2015

Bojana Jovanović

bojana.jovanovic@bio.bg.ac.rs

Dr Stoimir Kolarević stoimirk@bio.bg.ac.rs

Ivica Dimkić ivicad@bio.bg.ac.rs

Karolina Sunjog

sunjogkarolina@imsi.rs

Tamara Janakiev

tamara.janakiev@gmail.com

Srdjan Maširević

srdjanmasirevic2@gmail.com Ivan Nikolić

ivan.nikolic@bio.bg.ac.rs

Jovana Kostić

jkostic@imsi.rs

Marina Rajić Jovanović

marina.rajic.jovanovic@gmail.com

Informacije o bodovanju

Ukupno poena na vežbama→30:

• prisustvo→10 (pravo na jedan izostanak)

• overa praktikuma→15 (5 vežbi po 3 poena)

• mikroskop test→5

Kolokvijumi (dva po 20 poena)→40

• I kolokvijum (25.04.2015.god.)

• II kolokvijum (02.06.2015.god.)

Usmeni deo ispita→30

Šta nositi na vežbe

• Praktikum (kupuje se u studentskoj službi)

• Mantil

• Upaljač

• Permanentni marker

• Rukavice za vežbu bojenja !!!

• Papirnate maramice

Bakterije

• Prokariotska ćelija

• 0,2-50 µm u dijametru

(Escherichia coli 1 x 2µm)

• Tipična eukariotska ćelija

je 2-200µm u dijametru

Najveći do sada poznati

prokariot: Thiomargarita

namibiensis ( 400-750 µm)

Podela bakterija po obliku

• Koke (monokoke, diplokoke,

tetrakoke, streptokoke,

stafilokoke)

• Štapići (pojedinačni ili u

lancima)

• Spirile

• Spirohete

• Bakterije koje formiraju drške

• Filamentozne bakterije

Mikroskopiranje

Objekti bliži od 0,2μm mogu se videti

razdvojeno upotrebom imerzionog

objektiva (100x)

Svetlosni mikroskop – koristi fotone vidljive svetlosti

za formiranje lika

-Objektivi suvog sistema

-Sistem uljane imerzije

Razdvojna moć svetlosnog

mikroskopa je 0,2μm, što znači da se

objekti koji su na manjoj razdaljini od

0,2μm ne mogu videti kao odvojeni

entiteti

Razdvojna moć zavisi od:

- Sistema sočiva

- Refraktornog indeksa sredine

- Talasne dužine svetlosti (plava svetlost

povećava moć razdvajanja)

Indeks prelamanja imerzionog ulja

1,51 ~ 1,52 indeks prelamanja stakla

Pripremanje trajnih preparata

• Nanošenje materijala na mikroskopsku pločicu

sterilnom ezom i kružno razmazivanje

• Sušenje razmaza na vazduhu ili fiksiranje na

plamenu

Podela bakterija po Gramu

Na osnovu bojenja po Gramu bakterije se

mogu podeliti na:

• Gram pozitivne (G+) – boje se ljubičasto

• Gram negativne (G-) – boje se crveno

G+ koke

G- koke

G+ štapici

Bacillus subtilis

mogu da formiraju

lance

G- štapici

Escherichia coli

ne formiraju lance

G+/G- štapići

Endospore

• Formiraju se u unutrašnjosti ćelije

procesom sporulacije U

NEPOVOLJNIM uslovima

• Otporne su na niske i visoke

temperature, UV i X-zračenja,

hemijske agense

• Teško primaju boju i često ostaju

neobojene

• Mogu se formirati centralno,

subterminalno i terminalno u ćeliji

• Javljaju se kod rodova Bacillus i

Clostridium

Endospore obojene po Šefer-Fultonu

Spora

(zelenkasta)

Vegetativna

ćelija (crvena)

Kapsule (glikokaliks, sluzavi

omotač) – ekstracelularni polimeri

• Polisaharidna, ređe proteinska struktura koja formira

omotač oko ćelijskog zida

• Visok procenat vode, bez fiksiranja na plamenu

• Sprečava isušivanje, zaštita, služi za kačenje

(Streptococcus mutans), jonska i osmotska barijera

• Kod nekih faktor patogenosti

• Formiranje biofilmova

Kapsule bojene po Giemsa-i

Bacillus anthracis

Ćelije plave,

okolina crvena

Kapsula –

neobojena zona

oivičena

crvenom linijom

Kapsule bojene po Oltu

Bacillus anthracis

Kapsula – neobojena zona

Ćelije – crvene

Bojenje po Ziehl - Neelsen

• Koristi se za bojenje

acidorezistentnih bakterija

• Crveno obojene štapićaste

ćelije (Mycobacterium tuberculosis)

Mycobacterium tuberculosis