INSTITUTO TECNOLOGICO DEL VALLE DE MORELIA

NOMBRE: VANIA VALERIA CASTILLO OSORNIO

CARREA: INGENIERÍA AMBIENTAL

GRUPO: 21

ASIGNATURA: QUIMICA ANALITICA

PROFESORA: MCIA. CAMEN CECILIA GARCÍA CASTILLO

FECHA: 19 Septiembre 2014

NÚMERO DE CONTROL: 13850223

NÚMERO DE LA PARCTICA: 1era.

NOMBE DE LA PRÁCTICA:

INTRODUCCIÓN

El ADN significa ácido desoxirribonucleico, que constituye el material hereditario de un individuo. Su secuencia de nucleótidos contiene la información necesaria para poder controlar el metabolismo de un ser vivo y la síntesis de proteínas.

El ADN es el lugar donde reside la información genética de un ser vivo, su estructura es una cadena larga de piezas planas que se proyectan hacia afuera, denominadas bases. Esta escalera en espiral tiene la capacidad de enrollarse y desenrollarse para que la cadena de ácido nucleico pueda duplicarse. Ese proceso de duplicación, llamado replicación, sucede cada vez que una célula se divide.

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Está formada por la unión de muchos desoxirribonucleicos. La mayoría de las moléculas del ADN poseen dos cadenas polipeptídicas unidas mediante las bases nitrogenadas, por puente de Hidrogeno.

Donde este experimento podremos observar el ADN de una cebolla y de chicharos.

Las células eucariotas, como las de las cebollas, contienen el ADN en el interior de un compartimento llamado núcleo celular.

Las células vegetales, cuentan con una pared rígida de celulosa que contiene el ADN.

MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales utilizados en la práctica. (Imagen 1)

Cebolla detergente lavavajillas Sal Agua destilada Zumo de piña o papaya Alcohol de 96º muy frío Vaso de cristal alto Cuchillo Agitador Licuadora Ablandador de carne Chicharos Colador

METODOLOGIA

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Materiales utilizados para la extracción del ADN del chícharo y la cebolla. Imagen 1

Extracción del ADN de la cebolla y el chícharo.

OBSERVACIONES

Extracción del ADN de la cebolla

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Pelar y cortar la cebolla en pequeños cuadritos.

Agregar 1 cucharada de detergente, una de sal y agua en la licuadora.

Batir durante 30 segundos

Introducir los trozos de cebolla a la licuadora

Filtrar vaciándolo en un recipiente frío

Agregar una cucharada de ablandador de carne y mezclar durante 2 minutos

Reposar 2-3minutos

Añadir volumen de alcohol muy frío equivalente al del filtrado, por las paredes del vaso para formar una capa

sobre el filtrado, sin mezclarse.

Observar el ADN

Chicharos

Introducir los chicharos a la licuadora

Agregar una cucharada de zumo de papaya y mezclar durante 2 minutos

Corta la cebolla en pedazos pequeños, para facilitar el licuado. (Imagen 2)

En un vaso precipitado, se va a preparar la mezcla de detergente y sal, agregando una cucharada y media de detergente líquido y una cucharada de sal. Imagen 3 y 4.

Introducir la mezcla de detergente y sal a la licuadora agregándole agua a esta y mezclarlos un poco seguido agregar los pedazos de cebolla a la licuadora, licuando durante 30 segundos. Imagen 5,6 y 7.

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Se picó la cebolla en trozos pequeños. Imagen 2

Agregar una cucharada de sal, en el vaso precipitado. (Imagen 3)

Agregar una cucharada y media de detergente, en el vaso precipitado. (Imagen 4).

NOTA: La sal en disolución actúa disminuyendo la solubilidad de las proteínas, lo que hace que precipiten y se separen más fácilmente del ADN.

El detergente tiene como función destruir las membranas celulares, el detergente disuelve. Al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior. La licuadora ayuda en la rotura de estas células.

Agregar a la mezcla los trozos de cebolla

Filtra el líquido obtenido con un colador, vertiéndolo en el interior del vaso de cristal alto y frio, llenado no más de la mitad, seguido de agregar una cucharada de ablandador de carne. Imagen 7 y 8.

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NOTA: La licuadora ayuda en la rotura de membranas celulares y cubiertas nucleares, permitiendo la separación del ADN. Rompe las células y expone las paredes celulares y membranas a la acción del detergente

Una vez agregado la cucharada de ablandador de carne se mezclara bien con un agitador, durante 2 o 3 minutos. Añade cuidadosamente un volumen de alcohol muy frío equivalente al del filtrado, haciéndolo resbalar por las paredes del vaso para que forme una capa sobre el filtrado, sin mezclarse. Imagen 9 y 10.

Deja reposar durante 2 ó 3 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las dos capas, para poder observar el ADN. Imagen 11.

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Agregar al filtrado una cucharada de ablandador de carne. (Imagen 8)

Mezclar levemente durante 2 o 3 minutos. (Imagen 9) Agregar el alcohol haciéndolo resbalar por las

paredes del vaso. (Imagen 10)

NOTA: Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa.

RESULTADOS El ADN de la cebolla quedo un poco destruido, por exceso de agitación de la mezcla, pero la identificación de este es clara.

Extracción del ADN del chícharo.

El procedimiento que se aplica para la extracción del chícharo es el mismo, en cambio en más de agregar ablandado de carne, vamos agregar zumo de papaya.

Vamos a preparar el zumo de papaya, moliéndolo con un mortero. Imagen 1.

Preparar la mezcla de detergente y sal, agregando una cucharada y media de detergente líquido y una cucharada de sal. Imagen 2 y 3.

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Preparación del zumo de papaya. (Imagen 1)

Introducir la mezcla de detergente y sal a la licuadora agregándole agua a esta y mezclarlos un poco seguido agregar los chicharos a la licuadora, licuando durante 30 segundos. Imagen 4, 5 y 6.

Filtra el líquido obtenido con un colador, vertiéndolo en el interior del vaso de cristal alto y frio, llenado no más de la mitad, seguido de agregar una cucharada de zumo de papaya. Imagen 7 y 8.

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Agregar la mezcla de sal y detergente a la licuadora con la mitad de agua y batir durante un corto periodo. Imagen 4

Agregar los pedazos de cebolla a la licuadora con la demás mezcla. (Imagen 5)

Batir todo durante 30 segundos. (Imagen 6)

Una vez agregado la cucharada de zumo de papaya se mezclara bien con un agitador, durante 2 o 3 minutos (El agitado debe ser lento).Añade cuidadosamente un volumen de alcohol muy frío equivalente al del filtrado, haciéndolo resbalar por las paredes del vaso para que forme una capa sobre el filtrado, sin mezclarse. Imagen 9 y 10.

Deja reposar durante 2 ó 3 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las dos capas, para poder observar el ADN. Imagen 11.

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NOTA: Las enzimas son unas sustancias que atacan a las proteínas de las células, lo que permite romperlas y separarlas del ADN. Si no disponemos de enzimas, podemos utilizar zumo de papaya (el cual contiene papaína, sustancia que degrada las proteínas).

Mezclar levemente durante 2 o 3 minutos. (Imagen 9)

Agregar el alcohol haciéndolo resbalar por las paredes del vaso. (Imagen 10)

Observación del ADN de los chicharos. (Imagen 11)

RESULTADOS El zumo de papaya no pudo destruir las proteínas que protegen al ADN, por la poca cantidad que se suministró en la mezcla, pero el ADN es visible, aunque muy poco.

CUESTIONARIO

1. Realizar un esquema de lo que hayas obtenido en el tubo.

2. ¿Cuál es la función del ADN en la célula?

R= El núcleo presenta cromosomas si está en fase de división: mitosis, los cromosomas son estructuras formadas por ADN y proteínas.

Es el sitio de control por parte del ADN de las actividades celulares Es el sitio de duplicación del ADN previo a la división celular

El ADN es el soporte físico de la herencia, con la excepción del ADN de los plástidos, todo el ADN está confinado al núcleo.

3. ¿Dónde se encuentra el ADN?

R= En el núcleo, en su interior encontramos toda la información genética de la célula en forma de ADN, que presenta diversas organizaciones a lo largo de la vida celular. 

4. ¿Qué función tiene el detergente para la extracción del ADN? Recuerda que los detergentes actúan sobre los lípidos.

R= El detergente tiene como función destruir las membranas celulares, el detergente disuelve. Al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior. La licuadora ayuda en la rotura de estas células.

5. ¿Por qué se utiliza el ablandador (que contiene enzimas que destruyen proteínas)?

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R= El ablandador de carne, tiene enzimas proteolíticas, proteínas especializadas en la degradación de otras proteínas y separarlas del ADN.

6. ¿Por qué se utiliza el alcohol?

R= Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa.

7. ¿A qué sustancia es más afín el ADN, al agua o al alcohol?8. Escribe tus conclusiones9. Identificar el nombre que corresponde en la siguiente figura:

CONCLUSIÓN

Mediante un método especifico casero se pudo obtener ADN, por esto la ciencia ha avanzado con pasos grandísimos nos demuestra de cómo podemos extraer material genético de una manera que cualquier persona los pueda realizar con materiales de fácil acceso.- Se realizó los diferentes procedimientos para hacer la extracción del ADN de un tejido vegetal “cebolla y chícharo”

El detergente y la sal, ayudadas por la acción de la batidora son capaz de romper primero la pared celular, luego las membranas plasmática y por último la pared nuclear (lugar donde está contenido el ADN).

El jugo natural de piña o papaya contiene una enzima conocida como papaína, que ayudan a disolver los lípidos (moléculas grasas) y las proteínas de la célula que puedan contaminar en ADN.

El alcohol precipita el ADN que es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol frío se desenrolla y se precipita en la interface entre el alcohol y el agua.

BIBLIOGRAFÍA

http://www.geocities.ws/bio135a/Extrac_ADN.html

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https://blu175.mail.live.com/mail/ViewOfficePreview.aspx? messageid=mgtIRPOp405BGz6QAhWtiBjA2&folderid=flinbox&attindex=2&cp=-1&attdepth=2&n=46085073

http://www.ingenioambiental.org/2013/05/articulo-cientifico- laboratorio-de.html

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