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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Nombre: Valeria Alejandra Sánchez ÁlvarezDocente: Bioq. Farm. Carlos García MSc.Curso: Quinto Año Paralelo: “B” Grupo: 2

Fecha de Elaboración de la Práctica: martes, 23 de Junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: martes, 1 de Julio del 2014

PRÁCTICA N° 5

Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO

Animal de Experimentación: Cobayo café.

Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la aplicación de Cloroformo vía intraperitoneal.

2. Observar las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el Cloroformo.3. Reconocer mediante pruebas de identificación la presencia de Cloroformo.

MATERIALES Bata de Laboratorio Bisturí Cronómetro Equipo de destilación. Equipo de disección Erlenmeyer Guantes de látex Jeringuilla de 10cc Mascarilla Pipetas Probeta Tubos de ensayo Vaso de precipitación

SUSTANCIAS Alcohol De 95ª Nitrato De Plata Ácido Clorhídrico Potasa Alcohólica Percloruro De Hierro Amoniaco Diluido Beta Naftol Solución Alcohólica

Concentrada De Potasa Cristal De Yodo Clorhidrato De Piperacina Reactivo De Benedict

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1

PROCEDIMIENTO

1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo.2. Administrar 10ml de Cloroformo por vía intraperitoneal 3. Colocar el cobayo en el Panema, para la observación.4. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su muerte.5. Colocamos al cobayo en la tabla de disección.6. Procedemos rasurarle toda la parte abdominal para facilitar la disección.7. Con la ayuda del bisturí procedemos abrir al cobayo, y observamos los sus órganos

teniendo en cuenta los cambios que se han presentado.8. Procedemos a colocar los fluidos y las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el

balón de destición junto con las perlas.9. Añadimos 25ml de ácido tartárico.10. Procedemos a destilar, en el equipo de Destilación11. Y recibimos en un erlenmeyer con 30 ml. De 12. El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor, se

practican las diferentes reacciones de reconocimiento.

Reacciones y Conducta Post-Administración

Tiempo de muerte: 25 minutos (7:35 – 8:09)

Síntomas:

Perdida de actividad motora Estado de sueño profundo Hinchazon Abdominal Hipoxia Convulsión. Muerte

Reacciones:

Reacciones en medio biológico

El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio acido tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación.

1.-En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata.

Reacción de dunas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio.

CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O

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Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente.

A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido.

Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.

Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos oscuro; con resorsinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.

Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.

Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.

Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.

GRAFICOS

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Disección del cobayo

Colocando las vísceras y fluidos

Acidificando con ácido tartárico.

2

1

1

Acidificando con ácido tartárico.

Armamos el equipo de destilación.

Destilamos colocando con 50 perlas de vidrio

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

Reconocimiento en Medios BiológicosMuestra Inicial

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3

5

4

6

Reacción N° 1 Reacción Positivo no característico coloración Plata

Reacción de Dunas

Reacción Reacción Positiva coloración Rijiza en Frio

Reacción Positivo característico Coloración rojiza en Caliente

Reacción Positivo no característico Coloración caracteristico

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Reacción de Lustgarten

TimolReacción Reacción Negativo Coloración Azul

ResorcinolReacción Reacción Positivo Coloración Amarillo oscuro

Reacción Reacción Positivo Coloración Rojiza

Reacción de roseboomReacción Reacción Positivo Coloración Amarillo Rojiza

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Reacción de BenedictReacción Reacción Negativa Coloración Blanco

OBSERVACIONES

Mediante reacciones de identificación se puede identificar la presencia de Cloroformo sustancia que es muy toxica.

Se observaron los efectos que causa el Cloroformo en el cobayo.

CONCLUSIONES

Al culminar la practica puedo decir que al realizar la misma se logro identificar los efectos que causa el Cloroformo sobre un organismo, concluyendo que la exposición directa de el mismo es muy toxico.

Las pruebas de identificación evidenciaron la presencia de él toxico Etanol en el cobayo.

RECOMENDACIONES

Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes, mascarilla, zapatones.

Evitar el contacto directo del toxico, ya que puede causar serios daños. Trabajar con absoluta seriedad y responsabilidad para evitar accidentes.

GLOSARIO

Que es el Cloroformo?

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Es un compuesto químico que puede obtenerse por cloración como derivado del metano o del alcohol etílico.

Cuáles son las aplicaciones del Cloroformo?

Es habitualmente utilizado en tintorerías como disolvente de grasas en la limpieza a seco, extintores de incendios, fabricación de colorantes fumigadores, insecticidas.

Que son las Intoxicaciones?

Se produce por exposición, ingestión, inyección o inhalación de una sustancia toxica siempre y cuando sea de composición química ya que si el compuesto es natral se le llamara ingesta excesiva y esto por cualquier sustancia química, natural, procesada o creada.

GLOSARIO

Hinchazon

Es una protuberancia blanda en el cuerpo que pueden incluir tumores

Somnolencia

Es la necesidad exagerada para el sueño. Es un estado en el que ocurre una fuerte necesidad de dormir o en el que se duerme durante periodos prolongados.

Irritación

Estado inflamatorio o una reacción dolorosa del organismo causados principalmente por algún tipo de alergia a agentes químicos o a otros estímulos.

Hipoxia

Es un estado en el cual el cuerpo completo o una región del cuerpo, se ve privado del suministro adecuado de oxigeno.

Convulsión

Es un síntoma transitorio caracterizado por la actividad neuronal en el cerebro que conlleva a hallazgos físicos peculiares como la contracción y distensión repetida y temblorosa de uno o varios músculos de forma brusca y generalmente violenta.

BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA

INTOXICACIONES (en línea) (Fecha de Consulta: 15 de Junio del 2014) Disponible en: www.webconsultas.com/categoria/salud-al-dia/intoxicacionesSCIELO(en línea) (Fecha de Consulta: 15 de Junio del 2014) Disponible en: www.scielo.org.pe/scielo.php?pid=s17288-5917200002000010IRRITACION(en línea) (Fecha de Consulta: 15 de Junio del 2014) Disponible en: es.thefreedictionary.com/irritación

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MEDLINEPLUS(en línea) (Fecha de Consulta: 15 de Junio del 2014) Disponible en: www.nlm.nih.gov/medilineplus/spanish/ency/articleMEDLINEPLUS(en línea) (Fecha de Consulta: 15 de Junio del 2014) Disponible en: www.nlm.nih.gov/medilineplus/spanish/seizures.html

Machala, 10 de Junio del 2014

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Valeria Alejandra Sánchez Álvarez Bioq. Carlos García. Mg. Sc. Estudiante Docente

INTOXICACION POR CLOROFORMO

Generalidades

El cloroformo es el triclorometano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente anestésico, pero poco después se abandonó este uso por s gran toxicidad hepática y renal.es un líquido incoloro y no inflamable, de olor y sabor dulzón, extremadamente volátil y muy liposoluble.

Fuentes de exposición

Está disponible como disolvente en laboratorios y en la industria química.se ha prohibido su uso como sustancia aromática en pastas de dientes y otros productos como resultado de su efecto carcinogénico en animales después de exposiciones crónicas. La intoxicación aguda y crónica puede ocurrir por exposición a sus vapores.

Toxicocinetica y mecanismo de acción

El cloroformo es un anestésico potente y origina una profunda depresión del SNC. Entra en el organismo por vía respiratoria, digestivo dérmico. En humanos puede producir la muerte con la ingestión oral de tan solo 10ml .exposiciones prolongadas o repetidas a los vapores pueden producir hepatotoxicidad, severa que se característica por necrosis centrolobular. Asimismo se ha descrito degeneración grasa del hígado, el riñón el corazón. El mecanismo de lesión parece ser la oxidación a nivel hepático del cloroformo a fosgeno a través del sistema microsomal. También se forma fosgeno cuando los vapores de cloroformo se exponen al calor de una llama. El fosgeno inhalado se convierte en ácido hidroclorhidrico y dióxido de carbono cuando reacciona con el agua en el alveolo; y el ácido produce edema pulmonar.

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RevisadoDía Mes Año

Cuadro clínico

La severidad de los síntomas por exposición aguda, vía respiratoria, digestivo, dérmica, está en relación directa con la dosis absorbida. El cloroformo, cuando se inhala, produce todos los niveles de anestesia, teniendo un margen de seguridad muy estrecho, debido a que causa fallo cardiaco y respiratorio de forma casi simultánea. No puede detectarse por el olfato hasta que su concentración excede de 400 ppm. Una exposición durante 10 minutos a concentraciones de 1000 ppm produce síntomas generales como nauseas, vómitos, vértigo cefaleas .exposiciones a una concentración de 1000 a 4000 ppm origina desorientación y concentraciones de 10000 a 20000 ppm dan lugar a pérdida de conciencia, pudiendo originar la muerte.

Dependiendo de la dosis absorbida va a producir alteraciones más o menos importantes de la función hepática, renal y cardiaca.

El cloroformo, por su acusado poder como disolvente de grasas, en contacto con la piel da lugar a dermatitis local, y en los ojos produce irritación corneal.

Reacciones en medio biológico

El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio acido tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación.

1.-En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata.

Reacción de dunas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio.

CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O

Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente.

A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido.

Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.

Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos oscuro; con resorsinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.

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Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.

Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.

Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.

Efectos Potenciales de Salud

Inhalación: Actúa como anestésico relativamente potente. Irrita el tracto respiratorio y produce efectos en el sistema nervioso central, incluyendo dolor de cabeza, somnolencia, mareos. La exposición a altas concentraciones puede resultar en inconsciencia e inclusive muerte. Puede causar daño hepático y desórdenes sanguíneos. La exposición prolongada puede llevar a la muerte debida una frecuencia cardíaca irregular y desórdenes renales y hepáticos.

Ingestión: Causa quemaduras severas de boca y garganta, dolor pectoral y vómitos. Grandes cantidades pueden causar síntomas similares a los de la inhalación.

Contacto con la Piel: Causa irritación cutánea causando enrojecimiento y dolor. Elimina los aceites naturales. Puede ser absorbido a través de la piel.

Contacto con los Ojos: Los vapores causan dolor e irritación ocular. Las salpicaduras pueden causar severa irritación y posible daño ocular.

Exposición Crónica: La exposición prolongada o repetida a los vapores puede causar daño al sistema nervioso central, corazón, hígado y riñones. El contacto con el líquido elimina las grasas y puede causar irritación crónica de la piel con grietas y resequedad y la correspondiente dermatitis. Se sospecha que el cloroformo es un carcinógeno en humanos.

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Estabilidad y reactividad

Estabilidad: Establo bajo condiciones ordinarias del uso y del almacenaje. el pH disminuye en la exposición prolongada a la luz y al aire debido a la formación de HCl.

Productos peligrosos de la descomposición: Monóxido de carbono del producto de mayo, bióxido de carbono, cloruro de hidrógeno y fosgeno cuando está calentado a la descomposición.

Polimerización peligrosa: No ocurrirá.

Manejo

Guarde en un envase resistente a la luz, cerrado herméticamente y almacene en un área fresca, seca y bien ventilada. Proteja contra los daños físicos. Aísle de las substancias incompatibles. Use equipo de protección especial para realizar el mantenimiento o donde las exposiciones puedan exceder los niveles de exposición establecidos. Lávese las manos, la cara, los antebrazos y el cuello al salir de las áreas restringidas. Dese un baño de regadera, deseche la ropa exterior, cámbiese la ropa vistiendo ropa limpia al terminar el día.

Evite la contaminación cruzada de las ropas de calle. Lávese las manos antes de comer y no coma, ni beba, ni fume en el trabajo. Los envases de este material pueden ser peligrosos cuando están vacíos ya que retienen residuos del producto (vapores, líquido); observe todas las advertencias y precauciones que se alistan para el producto. Umbral de olor del cloroformo: 250 mg/m3. El umbral de olor sólo sirve como advertencia de la exposición; si no siente el olor, no significa que usted no está siendo expuesto.

Desechos:

En pequeñas cantidades puede dejarse evaporar en una campana extractora. En caso de grandes cantidades, debe mezclarse con combustible, como queroseno, e incinerarse en equipo especializado para evitar la generación de fosgeno.

ALMACENAMIENTO:

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Los recipientes que contienen este producto deben ser almacenados en lugares alejados de la luz directa del sol, ya que se descompone lentamente a productos como el fosgeno.

INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA

DATO TOXICOLÓGICOS:

Chloroform: LD50 oral en ratas: 908 mg/kg; LD50 piel de conejos: > 20 gm/kg; LC50 inhalación en ratas: 47702 mg/m3/4H; irritación data: piel de conejos 10 mg/24H abierta leve; Ojo de conejos: 20 mg/24H moderada; Ha sido investigado como tumorígeno, mutagénico y causante de efectos reproductivos.

Se han observado defectos al nacimiento en ratas y ratones expuestos a la inhalación de cloroformo a concentraciones en el aire mayores de 100 ppm. La ingestión de cloroformo por animales de laboratorio gestantes, ha causado feto toxicidad pero no defectos al nacimiento y sólo a niveles que causan severos efectos en la madre

INFORMACIÓN ECOLÓGICA

Esta sustancia puede ser peligrosa para el ambiente; debería prestarse atención especial al agua.

Ecotoxicidad

Algas (Chlamydomonas reinhardii) EC50 = 13,3 mg/l (72 horas) Crustáceos (Artemia salina) EC50 = 68 mg/l (10 horas) Peces (Brachydanio rerio) LC50 = 100 mg/l (48 horas)

Movilidad Coeficiente de reparto octanol/agua como log Pow: 1,97

BIBLIOGRAFÍA:

http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/7cloroformo.pdf http://www.dorwil.com.ar/msds/Cloroformo.pdf https://www.murciasalud.es/recursos/ficheros/137913-CLOROFORMO.pdf

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