practica n° 7 - identificaciÓn de cuerpos cetÓnicos en orina (autoguardado)

8/19/2019 PRACTICA N° 7 - IDENTIFICACIÓN DE CUERPOS CETÓNICOS EN ORINA (Autoguardado)

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INTRODUCCIÓN

Cuando la glucosa no está fácilmente disponible en el organismo a consecuencia

de no existir un aporte simultáneo de glucosa por la alimentación, es estos casos

el hígado se empobrece en glucógeno y la glucogenólisis es incapaz de

compensar el desgaste periférico de glucosa. Sucede lo mismo en el ayuno

prolongado; un mecanismo de adaptación al ayuno es la formación de cuerpos

cetónicos sintetizados a partir de los ácidos grasos y producidos nicamente en el

hígado; estos se utilizan como fuente de energía

!n caso de ayuno hay cambios "ue re"uieren de la adaptación del organismo y

esto trae como consecuencia modificaciones en los patrones metabólicos y por lo

tanto en las moléculas utilizadas como combustibles.

#urante las primeras etapas del ayuno se realizan cambios hormonales, se de$a

de liberar insulina y se aumenta la liberación de glucagón, lo "ue ocasiona un

aumento en la %lucogenólisis, estimulación de la &ipólisis, inhibición de la síntesis

de triacilglicéridos, aumento de la 'eta ( oxidación y producción de cuerpos

cetónicos )Cetogénesis*, si el ayuno es prolongado se presenta un dese"uilibrio

entre el metabolismo de carbohidratos y el de lípidos lo "ue ocasiona "ue los

ni+eles de cuerpos cetónicos se ele+en en sangre y sean eliminados por orina

donde son detectados fácilmente.


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OBJETIVOS

O"#$%&'( G$)$*+,

• dentificar cuerpos cetónicos en la orina mediante diferentes pruebas.

O"#$%&'( E$/1&/(

• #eterminar la presencia de cuerpos cetónicos en orina, mediante pruebas

cualitati+as para cada uno de ellos.

• -amiliarizarse con algunos protocolos empleados en laboratorios clínicos

para el reconocimiento de cuerpos cetónicos


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TEORA RELACIONADA

&os cuerpos cetónicos son los ácidos acetoacético, la acetona y el ácido (

hidróxibutirico.

!n la cetósis, hallamos un aumento de estas sustancias en la sangre y en la orina.

'a$o buenas condiciones de salud, los cuerpos cetónicos se forman en el hígado y

son completamente metabolizados, de tal manera "ue solo cantidades

insignificantes aparecen en la orina. /or el contrario, en casos de diabetes,

inanición, +ómitos con deshidratación y después de la exposición al frío y0o

e$ercicio +igoroso, los cuerpos cetónicos pueden encontrarse en cantidades

apreciables en la orina, lo cual permite su determinación cualitati+a.

&a determinación de acetona )1étodo de mbert*, se fundamenta en la formaciónde un ferropentacianuro con el deri+ado isonitrado de la acetona, la determinación

de acido acetoacético )1étodo de %erhrdt*, se basa en la aparición de una

coloración ro$o(+inosa con el cloruro férrico y en el 1étodo de 2art, el acido (

hidróxibutirico es transformado en acetona, la cual se identifica mediante el

reacti+o de mbert.

&os cuerpos cetónicos desempe3an un papel importante en la homeostasis del

organismo. !n estados en los "ue la glucemia es ba$a )como en el ayuno o en

dietas pobres en glcidos* o en casos donde la glucosa no puede ser utilizada

)como en la diabetes*, la concentración de ácidos grasos y cuerpos cetónicos enel plasma aumenta. 4mbas sustancias sustituyen a la glucosa como combustible

fa+orito para obtener energía por parte de la célula. Con+iene recordar "ue la

gluconeogénesis, en animales, utiliza distintos precursores como aminoácidos,

lactato, glicerol o ácido pir+ico para conseguir fabricar glucosa, pero "ue los

ácidos grasos no pueden con+ertirse en azcares.

4sí, por e$emplo, células como los eritrocitos o las constituyentes del cerebro

obtienen su energía mayoritariamente de la glucosa, ya "ue sus mitocondrias

tienen poca capacidad para oxidar los ácidos grasos y en situaciones de ayuno o

casos de diabetes los cuerpos cetónicos constituyen unos magníficos sustratosenergéticos sustituti+os de la glucosa. /ara determinar estos cuerpos en el

organismo se realiza en la orina.

!sta prueba se usa para medir el ni+el de cetonas en su orina. 5ormalmente, su

cuerpo "uema azcar para obtener energía. Sin embargo, si usted tiene diabetes,

es posible "ue no tenga suficiente insulina para "ue el azcar de su torrente


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sanguíneo se use como combustible. Cuando sucede esto, su cuerpo "uema

grasas en lugar de "uemar azcar y produce sustancias denominadas

cetonas. &as cetonas terminan en su sangre y su orina.

6ener cantidades pe"ue3as de cetonas en su cuerpo es normal. Sin embargo,

tener ni+eles altos de cetonas podría ocasionar enfermedades gra+es o la muerte.

&as pruebas de detección de cetonas e+itan "ue esto suceda.


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PROCEDIMIENTO

DETERMINACIÓN DE ACETONA3 4 7 ml de orina, agregamos 8.7ml de 5itroprusiano de sodio disuelto al 79 en

acido acético al 789, adicionamos 8.7ml de amoniaco por las paredes del tubo, la

aparición de un anillo ro$o +ioláceo en l contacto de los lí"uidos, es indicati+o de la

presencia de acetona.

DETERMINACIÓN DE ACIDO ACETOAC4TICO. 4 7 ml de orina le adicionamos unas gotas de cloruro férrico, en presencia de

acido acetoacético se produce una coloración ro$o(+inosa.


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DETERMINACIÓN DE ACIDO 5-6IDROIBUTRICO!n una capsula de porcelana se mezclaron :8ml de agua y :8 ml de orina, se

acidifica con unas 7 gotas de acido acético y se caliento en una estufa hasta

reducir el +olumen a la mitad. Con este calentamiento se eliminan la acetona y el

acido acetoacético, al contenido de la capsula se le agregaron :8ml de agua y se

transfiere en partes iguales a dos tubos de ensayo, uno de estos tubos ser+irá

como control, al otro se le adiciona :ml de peróxido de hidrogeno al :89 y se

calienta en ba3o de 1aría por 7 min, se de$o enfriar y finalmente se practica la

prueba de mbert a ambos tubos.


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MATERIALES Y REACTIVOS

• tubos de ensayo

• : gradilla

• pipetas

• : beaC==2

al 789

ANALISIS DE RESULTADO


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DETERMINACION DE ACETONA3

!n primera instancia se procedió a depositar en un

tubo de ensayo una muestra de 7 ml de orina la cual

fue mezclada con 8,7 ml de nitroprusiato de sodio al79 en ácido acético al 789; mezcla "ue una +ez

finalizada, mostro un cambio en su coloración, esta se

tornó en un tono un poco más amarilla "ue en su

estado inicial, tampoco se presentó ningn tipo de

precipitado ni turbidez en el medio, de igual forma la

muestra se mantu+o todo el tiempo en su estado

lí"uido aun después de un tiempo considerable.

Se obser+aron los cambios y se procedió a realizar la siguiente parte de esta

prueba.

/ara esta parte; por sobre las paredes del tubo se le

agregaron 8,7 ml de amoniaco y se pudo obser+ar

"ue la muestra se tornó un poco más transparente

perdiendo un poco su tono amarillo presentado en el

paso anterior, esta +ez se pudo obser+ar "ue lamuestra se mostró con un tono un poco más

transparente en su parte superior, no se obser+ó

ningn tipo de precipitado ni turbidez en el medio y de

igual forma conser+o todo el tiempo su estado lí"uido.

Segn los resultados obser+ados en esta prueba, se puede determinar "ue,

debido a la ausencia del tono ro$o +ioláceo en el medio después de cada mezcla,

no hay presencia de acetonas en esta mezcla.

DETERMINACION DE ACIDO ACETOACETICO3


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/ara esta prueba hemos disuelto 7 ml de orina, muestra a la cual se le han

agregado gotas de cloruro férrico en presencia de

ácido acetoacetico, se agito le+emente y se pudo

obser+ar un cambio de coloración en la muestra, ésta

se tornó en un tono blanco, algo espeso, mientras "ue

no se obser+ó ningn tipo de precipitado ni turbidez en

el medio, se conser+ó todo el tiempo en estado lí"uido.

Segn los resultados obtenidos, se puede concluir "ue

esta prueba es negati+a para la presencia de ácido

acetoacetico en el medio, debido a "ue este no se

mostró en ningn momento en un tono ro$o(+inoso.

DETERMINACION DE ACIDO 5-6IDROIBUTIRICO3

Paso 1: para la determinación de ácido (

hidroxibutirico hemos disuelto :8 ml de agua y :8 ml de

orina y se le han adicionado 7 gotas de ácido acético,

hasta este punto hemos obser+ado una coloración

amarilla en el medio aun después de haberla puesto a

calentar en una estufa, no se presentó ningn tipo de

precipitado ni turbidez en el medio y se mantu+o todo el

tiempo en estado lí"uido.

Paso 2:con estos resultados obtenidos hemos

procedido a agregarle :8 ml de agua y se ha

transferido esta muestra en dos tubos de ensayos en

partes iguales, los cuales se han marcado 6?'= 4 y

6?'= C=56@=&; en donde al tubo 4 se le ha

agregado : ml de peróxido de hidrogeno al :89

mientras "ue el tubo C=56@=& no se le ha agregadonada; ambos se han calentado en ba3o de maría por

7 min, se de$aron enfriar para así proceder a

realizársele la prueba de mbert.

?na +ez finalizada esta prueba se pudo obser+ar "ue ambos presentaron una

coloración amarilla en el fondo del tubo, llegando hasta la parte media de la

muestra, ya en la parte superior se mostró un tono un poco más transparente, el


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medio se mantu+o todo el tiempo en estado lí"uido y no se presentó ningn tipo

de precipitado ni turbidez en la muestra.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS


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. Q89 (%*( %&( :$ 8%+)/&+ 8$:$) :$%$*;&)+*$ $) ,+ (*&)+ (* 8);$%+"(,&;( +)(*;+, :$ ,&:(.

Cristales, albumina, acetona, pigmentos y sales

• 4cido 7(hidroxindoloacetico

• %lucosa

• !lectrolitos urinarios

• ?rea

• -enilacetona

• :A( corticosteroides

• =xalato

• 4cido acetoacético

• 4cido '( hidróxibutirico

•

5itroprusiano de sodio.

2. Q89 $ ,+ /$%


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C$%()8*&+3 está generalmente asociada a la cetoacidosis diabética o al ayunoprolongado. 5= es igual a la cetoacidosis )"ue es una cantidad de cetonas tan

grande "ue +uel+e la sangre acídica*.

@efle$a una alteración en el metabolismo de los hidratos de carbono )C2=* comofuentes de energía y una mo+ilización de los depósitos lipídicos )ácidos grasos

libres* "ue el hígado transforma en cuerpos cetónicos para su posterior utilización

como fuente alternati+a de energía. Cuando las células corporales no pueden

disponer de glucosa como fuente de energía, emplean las grasas. Como

consecuencia de la combustión de estas, se obtienen los cuerpos cetónicos. !n el

mercado existen tiras reacti+as "ue son tiles para monitorear los ni+eles de

cuerpos cetónicos en la orina a tra+és la lectura +isual de colores. 4yudan al

paciente diabético a controlar me$or su condición y a obtener información sobre el

metabolismo de los hidratos de carbono y de los lípidos, educándose al respecto.

Causas de cetonuriaB

• 1etabólicas #iabetes mellitus mal controlada )es decir, la hiperglucemia

diabética mal mane$ada* )generalmente #1:* %lucosuria renal )ocasional*

!nfermedades por almacenamiento del glucógeno

• -actores dietéticos 4yuno prolongado y la desnutrición #ietas con excesi+o

contenido en grasas

• 4umento de los re"uerimientos metabólicos 2ipertiroidismo -iebre

!mbarazo y lactancia

CONCLUSIÓN


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BIBLIOGRAFA

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