1. 1. UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA. LABORATORIO DE TOXICOLOGIA NOMBRE: JONATHAN PESANTEZ CURSO: QUINTO AO B DOCENTE: BIOQ FARMA. DR CARLOS GARCIA GRUPO: 3 CALIFICACION: FECHA DE ELABRACIN: 23 de junio del 2015. FECHA DE PRESENTACIN: 30 de junio del 2015 10 PRCTICA # 3 TITULO: INTOXICACIN CON CLOROFORMO Animal de experimentacion:Rata Wistar Txico:Metanol Via de Administracin: 10 ml intraperitoneal. Tiempos Inicio de la prctica: 07:45 Hora de administracin:07:48 Deceso del animal:07:56(6 minutos) Hora de diseccin:08:30 Final de la practica:09:30 Sintomas Ceguera Vertigo Nauseas Vomitos OBJETIVOS: Observar todos los sintomas que presenta el animal debido a la intoxicacin. Explicar el tiempo que el toxico deja de actuar en el animal. Adquirir destrezas y realizar puebas de reacciones de identificacin para la presencia de Cloroformo en la rata wister ,tomando como referencia la sol. madre. Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis
2. 2. MATERIALES Jeringa de 10 cc Agitador Espatula Probeta Pinzas Fosforo Cronometro Perlas de vidrio Equipo de diseccin Equipo de destilacin Tubos de ensayo. Tabla de diseccin Pipeta Pera Mechero de Alcohol Guantes de ltex Mascarilla Mandil Vaso de precipitacin 200 y 500 ml Bistur REACTIVOS Potasa alcohlica Percloruro de hierro Nitrato de plata Cloruro de plata Beta naftol Alcohol Leja de sosa Yodo Clorhidrato de piperacina SUSTANCIA Agua Destilada EQUIPO: Balanza. Cocineta PROCEDIMIENTO. Preparar el mesn de trabajo y con ello materiales y sustancias, adems de implementos de bioseguridad. Administrar 10 ml de Cloroformo por va Intraperitoneal Monitorear sntomas que se presentan y en qu tiempo hasta la muerte del cobayo. Atamos al animal en experimentacin a una tabla de diseccin. Procedemos rasurarle toda la parte abdominal donde se har el corte Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis
3. 3. Con la ayuda del bistur procedemos la diseccin del cobayo, y observamos los cambios (coloracin, dureza, etc.) que presentan sus rganos. Colocamos las muestras (vsceras) en un vaso de precipitacin Agregar las 50 perlas de vidrio y Acido Tartrico 2g en 50 mL de agua. Preparar el equipo de destilacin y as mismo hacemos giros rotatorios con el mechero de alcohol para fijar la concentracin de nuestra sustancia a obtener durante 30 minutos Obtenida la solucin madre realizamos las respectivas reaccin de reconomiento Una vez terminada la prctica se limpi todo el material y el rea utilizada. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO. REACCIONES EN MEDIO BIOLGICO El material de la investigacin se somete a destilacin con arrastre de vapor en medio acido tartrico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificacin. 1.-En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas de alcohol de 95 que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el cido clorhdrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata. Reaccin de dunas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos mililitros de potasa alcohlica (proporcin 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio. CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porcin se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un precipitado en caliente. A la otra porcin se le agrega solucin de nitrato de plata producindose un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido. Reaccin de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y una solucin alcohlica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul. Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos oscuro; con resorsinol la coloracin e roja violceo y con la piridina rojo. Reaccin de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de leja de sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en bao de Mara y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que vara del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reaccin sensible para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algn sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofrmica. Reaccin de roseboom.- se disuelve un pequeo cristal de yodo en la solucin muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo est Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis
4. 4. presente en la muestra, la coloracin violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide. Reaccin de Benedict.- si la solucin muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentracin del toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo. . GRAFICOS Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis 2.Inyectar el toxico por via intraperitoneal. 1.Animal de experimentacin: Rata Wistar. 3. Observamos los sntomas luego de administrar el toxico 4.Colocar el animal en la tabla de diseccin. 6.Triturar la visceras 5.Extraer las visceras y colocar en un vaso de precipitacin. 7. Preparamos el equipo de destilacin Soxlet 8.Esperar 15 minutos para obtener la solucin madre. 9. Realizar las reacciones de identificacin.
5. 5. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO SOLUCIN MADRE REACCIN DE DUMAS Reaccin positivo caracterstico Produciendo un color rojo REACCIN DE LUSTGARTEN Reaccin positivo no caracterstico coloracin e roja violceo Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis REACCIN DE DUMAS ANTES . Adicionamos los reactivos descritos REACCIN DE DUMAS DESPUES Positiva caracterstico (color rojo). REACCIN DE LUSTGARTEN ANTES Reactivo de color amarillo . . REACCION DE FUJIWARA ANTES Adicionamos CNNa y calentamos REACCION DE FUJIWARA DESPUES Positivo no caracterstico (coloracin roja). REACCIN DE LUSTGARTEN DESPUES. Positivo No caracterstico (color violeta
6. 6. REACCION DE FUJIWARA Reaccin positivo caracterstico Coloracin rosa al rojo vivo REACCIN DE ROSEBOOM Reaccin Positivo no caracterstico Amarilla rojiza al disolverse el alcaloide. G Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis REACCIN DE ROSEBOOM ANTES Adicionamos al destilado los otros reactivos descritos . REACCION DE ROSEBOOM DESPUES Positiva No caracterstico (color amarillo rojiza). REACCION DE BENEDICT ANTES Agrgacion de la solucion madre REACCION DE BENEDICT DESPUES Coloracion verde
7. 7. Reaccin de Benedict Reaccin positivo no caracterstico Coloracin verde o amarilla REACCIONES DE COLORACIN A LA LLAMA OBSERVACIONES. Cuando se administro la dosis letal del toxico Cloroformo por via intraperitoneal,la rata wistar presento varios signos y sintomas como: Vomito,Cefalia,Vertigo,Nauseas. CONCLUSIONES. El Cloroformo es muy toxico y de accin rpida, en la cual se realizo la experimentacin en un rata wistar dministrando una dosis letal minima, que por un periodo de tiempo que el Cloroformo actuado en el organismo, provocando la muerte. Mediante una solucin madre que se obtuvo por medio de un proceso de destilacion, se le realizaron pruebas de identificacin para dar a conocer la presencia de Clorofromo en el animal deexperimentacin. RECOMENDACIONES Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis SOLUCION ALCOHOLICA ANTES Adicionamos unas gotas de cloroformo SOLUCION ALCOHOLICA DESPUES Positivo no caracterstico coloracin verde
8. 8. Sellar correctamente con cinta el refrigerante del equipo de destilacin para evitar perdida de gases. Cumplir con todas las medidas de proteccion.cuando se trabaja con componentes toxicos. Tener cuidado con las sustancias de uso restringido o peligroso, para evitar accidentes CUESTIONARIO DE PREGUNTAS QUE ES EL CLOROFORMO? El cloroformo es un lquido incoloro, dulcemente perfumado, que es ms conocido por su uso histrico como anestsico, aunque desde entonces ha sido abandonado debido a preocupaciones sobre su seguridad. Hoy en da, el cloroformo se usa en una variedad de procesos industriales, incluyendo la fabricacin de productos qumicos, refrigerantes y disolventes. Se produce mediante la reaccin de cloro con etanol y si bien es relativamente estable, tambin es txico y debe ser manejado con cuidado. La exposicin excesiva a cloroformo puede causar daos a largo plazo para la salud de varios rganos importantes. PROPIEDADES DEL CLOROFORMO? Es un lquido transparente e incoloro, con un olor agradable y no es inflamable. El lquido tiene un sabor dulce, pero tambin produce calor, sensacin de ardor en la boca Debe ponerse en contacto con un mdico si el cloroformo lquido le produce llagas en la piel. El cloroformo es una sustancia voltil, es decir, que cambia fcilmente de un estado lquido a un estado de vapor a temperaturas ambientales normales USOS DEL CLOROFORMO? En la fabricacin de plsticos que se utiliza en el proceso de unin. Se utiliza en sntesis orgnica. Se utiliza como un precursor en la fabricacin de tefln (antiadherente). En la Primera Guerra Mundial el cloroformo fue usado como arma qumica. El cloroformo es clasificado como nocivo en caso de ingestin y como un irritante para la piel. La exposicin por inhalacin puede causar graves daos a la salud EFECTOS DEL CLOROFORMO EN EL CUERPO? El principal efecto sobre la salud del cloroformo es la depresin del sistema nervioso despus de una inhalacin aguda. La exposicin crnica al cloroformo se asocia con efectos sobre el hgado, el rin y el sistema nervioso central. RIESGO QUE PUEDE PRESENTAR ESTE TXICO? Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis
9. 9. El cloroformo inhalado puede causar irregularidades en los latidos del corazn que pueden llegar a ser mortales. Tambin puede causar dao en los riones y el hgado y altas concentraciones de cloroformo pueden producir dolores de cabeza, mareos y problemas gastrointestinales, como nuseas y vmitos. Adems, el cloroformo se ha clasificado como un carcingeno probable, es decir, una sustancia qumica que puede causar cncer. BIBLIOGRAFA Toxicologia Ambiental Dr Ramirez Cuello,H Funher.Editorial Cientifico-medico.Los Angeles.California. WEBGRAFIA Medline. (10 de Mayo de 2013 ). Intoxicacion con Cloroformo .Medlineplus.com. http://www.taringa.net/salud/Que-es-el-cloroformo-y-para-que-se-usa.html GLOSARIO Neuropata perifrica.- La neuropata perifrica significa que estos nervios no funcionan apropiadamente. Esta neuropata puede ser un dao a un solo nervio o a un grupo de nervios. Irritacin.- Estado inflamatoria o una reaccin dolorosa del organismo causado principalmente por algn tipo de alergia a agentes qumicos o a otros estmulos. Dosis letal.- Necesaria para provocar la muerte de un determinado porcentaje de individuos. Aerobios.-Se denominan aerobios o aerbicos a los organismos que pueden vivir o desarrollarse en presencia de oxgeno. Anaerobios.-Son los que no utilizan oxgeno (O2) en su metabolismo, ms exactamente que el aceptor final de electrones es otra sustancia diferente del oxgeno Xenobitico: Es todo compuesto qumico que no forme parte de la composicin de los organismos vivos. Txico: Se utiliza como adjetivo para designar y calificar a todos aquellos elementos o sustancias que resulten nocivos y dainos para algn tipo de organismo. Toxicidad: Al grado de efectividad que poseen las sustancias que, por su composicin, Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis
10. 10. se consideran txicas. Se trata de una medida que se emplea para identificar al nivel txico de diversos fluidos o elementos. Cloroformo. Es una sustancia voltil, es decir, que cambia fcilmente de un estado lquido a un estado de vapor a temperaturas ambientales normales Anastesico. Son sustancias que interfieren con la percepcin de las sensaciones. Anestsicos generales. (Que bloquean todo tipo de sensaciones). Anestsicos locales .(Que actan solamente en el sitio de administracin) ANEXOS DATOS OBTENIDOS DE LOS SINTOMAS DEL COBAYO Y LAS REACCIONES DE RECONOCIMIENTO PARA LA DETERMINACION DE PRESENCIA DE CIANURO TOMANDOCOMO REFERENCIA SOLUCIN MADRE Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis
11. 11. UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUIMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA INVESTIGACION BIBLIOGRAFICA # 4 NOMBRE: JONATHANPESANTEZ DOCENTE: DR. CARLOS GARCA CURSO: QUINTO B FECHA: 23 DE JUNIO DEL 2015 CLOROFORMO El cloroformo es un depresor del sistema nervioso central y produce efectos txicos sobre el hgado y los riones. Se absorbe bien tanto por va inhalatoria como por va oral y drmica .La principal ruta de eliminacin es la exhalacin. El dixido de carbono es su metabolito principal, aunque tambin puede formarse fosgeno. El cloroformo presenta una toxicidad de leve a moderada, si bien la muerte puede sobrevenir por depresin respiratoria durante la anestesia, o bien con posterioridad debido a su hepatotoxicidad. TOXICOCINTICA Y MECANISMO DE ACCIN El cloroformo es un anestsico potente y origina una profunda depresin del SNC. Entra en el organismo por va respiratoria, digestiva o drmica. En Humanos puede producir la muerte con la ingestin oral de tan solo 10 ml. Exposiciones prolongadas o repetidas a los vapores pueden producir hepatotoxicidad severa que se caracteriza por necrosis centro lobular. Asimismo se ha descrito degeneracin grasa del hgado, el rin y el corazn. El mecanismo de lesin parece ser la oxidacin a nivel heptico del cloroformo a fosgeno a travs del sistema microsomal. Tambin se forma fosgeno cuando los vapores de cloroformo se exponen al calor de una llama. El fosgeno inhalado se convierte en cido hidroclorhdrico y dixido de carbono cuando reacciona con el agua en el alveolo; y el cido produce edema pulmonar. Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis
12. 12. CUADRO CLNICO La severidad de los sntomas por exposicin aguda, va respiratoria, digestiva o drmica est en relacin directa con la dosis absorbida. El cloroformo, cuando se inhala, produce todos los niveles de anestesia, teniendo un margen de seguridad muy estrecho, debido a que causa fallo cardiaco y respiratorio de forma casi simultnea. No puede detectarse por el olfato hasta que su concentracin excede de 400 ppm. Una exposicin durante 10 minutos a concentraciones de 1000 ppm produce sntomas generales como nauseas vmitos, vrtigo y cefaleas. Exposiciones a una concentracin de 1000 a 4000 ppm originan desorientacin y concentraciones de 10000 a 20000 ppm den lugar a prdida de conciencia, pudiendo originar la muerte. Dependiendo de la dosis absorbida va a producir alteraciones ms o menos importantes de la funcin heptica, renal y cardiaca. El cloroformo, por su acusado poder como disolvente de grasa, en contacto con la piel da lugar a dermatitis local, y en los ojos produce irritacin cornea. PROPIEDADES DEL CLOROFORMO El cloroformo es un lquido transparente, incoloro, de olor agradable y sabor dulce pero produce ardor en la boca y la garganta. Es voltil y no es inflamable. Leer ms sobre las propiedades. USOS DEL CLOROFORMO El cloroformo se utiliza en la industria qumica, para fabricar plsticos o tefln o en la sntesis orgnica. Antiguamente se us como anestsico y como arma. Leer ms sobre los usos del cloroformo. CLOROFORMO COMO ANESTSICO El cloroformo es un anestsico eficaz al inhalar su vapor. Deprime la actividad del sistema nervioso central. Fue sustituido por ter, que es menos peligroso. Leer ms sobre el cloroformo como anestsico. EFECTOS DEL CLOROFORMO EN EL CUERPO El principal efecto del cloroformo es la depresin del sistema nervioso. A la larga provoca efectos sobre hgado, rin y sistema nervioso, incluso cncer. Leer ms sobre los efectos del cloroformo en el cuerpo. RIESGOS PARA LA SALUD DEL CLOROFORMO El cloroformo puede causar problemas de corazn, hgado, riones, dolores de cabeza y vmitos. Puede producir cncer. Puede convertirse en fosgeno, un veneno. Leer ms sobre los riesgos para la salud del cloroformo WEBGRAFIA Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis
13. 13. Macbell, C. (s.f.). Centro de control y Nivel de enfermedades. Recuperado el 4 de Junio de 2015, de http://emergency.cdc.gov/agent/cyanide/espanol/ FIRMA DEL ESTUDIANTE Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis