UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYOFACULTAD DE MEDICINAASIGNATURA: MICROBIOLOGIA

GUIA DE PRACTICA N 03

PREPARACIN Y ESTERILIZACIN DE MEDIOS DE CULTIVO

I. INTRODUCCIONCultivar un microorganismo significa promover el desarrollo de ste en medios de cultivo y condiciones de laboratorio controladas. En consecuencia, los medios de cultivo son compuestos necesarios para el desarrollo bacteriano y deben contener: a) Sustancias nutritivas apropiadas (protenas, carbohidratos, sales minerales, etc)b) Tener un pH conveniente; generalmente de 6.8 a 7.6.c) Estar previamente esterilizados.d) Estar protegidos de contaminacin.

Tipos de medios de cultivo. Por su CONSISTENCIA:a) Slidos. Son aquellos que contienen un agente solidificante entre sus componentes, normalmente agar. Se preparan en placas de Petri o en tubos en slant (tubos con la superficie del medio inclinada).b) Lquidos. Se denominan caldos y se preparan en tubos o erlenmeyers. Por su COMPOSICIN:a) Medios generales. Permiten el desarrollo de una gran variedad de microorganismos.b) Medios de enriquecimiento. Favorecen el crecimiento de un determinado grupo de microorganismos, sin llegar a inhibir totalmente el crecimiento del resto.c) Medios selectivos. Permiten el crecimiento de un tipo de microorganismos determinado, inhibiendo el desarrollo de los dems.d) Medios diferenciales. Son aquellos en los que se pone de relieve alguna propiedad que un determinado tipo de microorganismos posee.

La poblacin de microorganismos desarrollada en un medio se denomina cultivo. Cuando ste contiene una sola especie de microorganismo, se denomina cultivo puro o axnico (proveniente de una sola clula), cuando contiene ms de una especie de microorganismos se denomina cultivo mixto. Un cultivo axnico se obtiene artificialmente en el laboratorio. Tomando las precauciones especiales, en el laboratorio, instrumentos y recipientes utilizados, ya que los microorganismos estn por todas partes, en la naturaleza., los microorganismos contaminantes deben ser eliminados.Una colonia est constituido por una poblacin de clulas descendientes de un solo microorganismo lo suficientemente grande como para ser visible sobre la superficie de un medio slido.

OBJETIVOS:Al finalizar la presente prctica el alumno de medicina ser capaz de: Conocer y aprender las tcnicas de preparacin de diferentes medios de cultivo, su esterilizacin y almacenaje Conocer y comprender la importancia, utilidad, composicin y usos de los medios de cultico ms utilizados en microbiologa. Conocer el fundamento de los medios de cultivo

III. MATERIAL: Placas petri estriles Tubos de ensayo estriles Matraces erlenmeyer Mechero, esptula, autoclave y bao mara. Algodn, papel, hilo Balanza

MEDIOS DE CULTIVO: Agar Mac Conkey Agar XLD Agar SS Agar LIA Agar TSI Agar SIM Agar CITRATO Agar Mueller Hinton Agar Manitol Salado

IV. PROCEDIMIENTOS: Pesar las sustancias segn indique la composicin del medio de cultivo y agregarlos a un matraz erlenmeyer. Disolver los ingredientes, a bao mara, en la cantidad de agua destilada indicada. Enfriar moderadamente y ajustar el pH entre 6.8 7.4 u otro que fuese indicado. Colocar un tapn de algodn en la boca del matraz y cubrirlo con papel ajustndolo con hilo al cuello del recipiente. Esterilizar en autoclave a 121C durante 15 min. Distribuir los medios de cultivo en placas y/o tubos estriles:a) Los medios lquidos repartirlos en tubos y/o placas estriles frente a la llama de mechero. A los medios slidos repartidos en tubos, antes que solidifiquen, se les dar la inclinacin respectiva. b) Realizar el control de esterilidad de los medios de cultivo incubado los tubos y/o placas en la estufa a 37C durante 24 horas.c) Conservar los tubos y/o placas de medio de cultivo en la refrigeradora hasta su posterior uso.