INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

Cecyt No. 2

“MIGUEL BERNARD PERALES”

Practica 4. Cultivo De Bacterias

2 Semestre Grupo: 2IV08

Turno: Vespertino

Aguilar Muñoz Ángel Leopoldo

Jiménez Olivera Edgar Lorenzo

Ruiz Medina Rodrigo

Santiago Alvarado Emmanuel del Ángel

Valdés Gómez Brayan Armando

Vázquez Octaviano Luis Arturo

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Índice

Justificación ……………………………………………………… 3

Objetivos ……………………………………………………… 3

Introducción ……………………………………………………… 3-4

Condiciones generales para el cultivo de microorganismos…. 5-6

Material ……………………………………………………… 7

Desarrollo …………………………………………………… 7-8

Medidas Preventivas …………………………………………….. … 9

Resultados ………………………………………………………. 9

Conclusión ………………………………………………………. 10

Glosario ………………………………………………………. 10

Bibliografía ……………………………………………………….. 11

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Pagina

JustificaciónEl motivo para la realización de esta práctica es el crear un espacio de cultivo de bacterias en el cual se puedan estudiar posteriormente, esta práctica es similar a lo que hicimos con las moscas para después de reproducirse poderse observar esta práctica es sumamente similar

ObjetivosLograr construir nuestro propio sistema de cultivo de bacterias para su próxima identificación y estudio de cada una en un medio que las conserve (en este caso grenetina y gelatina), además de eso esto sirve para poder observar en el microscopio el comportamiento de las bacterias y su forma de subsistir sin alterar el medio al que están sometidas (nuevamente la grenetina)

Introducción.(Antecedentes)En biología, y específicamente en microbiología, un cultivo es un método para la multiplicación de microorganismos, tales como bacterias, hongos y parásitos, en el que se prepara un medio óptimo para favorecer el proceso deseado. Un cultivo es empleado como un método fundamental para el estudio de las bacterias y otros microorganismos que causan enfermedades en medicina humana y veterinaria. Los medios de cultivo contienen distintos nutrientes que van, desde azúcares simples hasta sustancias complejas como la sangre o el extracto de caldo de carne. Para aislar o purificar una especie bacteriana a partir de una muestra formada por muchos tipos de bacterias, se siembra en un medio de cultivo sólido donde las células que se multiplican no cambian de localización.

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Tras muchos ciclos reproductivos, cada bacteria individual genera por escisión binaria una colonia macroscópica compuesta por decenas de millones de células similares a la original. Si esta colonia individual se siembra a su vez en un nuevo medio crecerá como cultivo puro de un solo tipo de bacteria. La principal diferencia entre un medio de cultivo sólido y uno líquido es que el medio de cultivo sólido contiene un 1,5–2% de agar-agar, mientras que el medio líquido no contiene agar-agar. Muchas especies bacterianas son tan parecidas morfológicamente que es imposible diferenciarlas sólo con el uso del microscopio. En este caso, para identificar cada tipo de bacteria, se estudian sus características bioquímicas sembrándolas en medios de cultivo especiales. Así, algunos medios contienen un producto que inhibe el crecimiento de la mayoría de las especies bacterianas, pero no la del tipo que se desea averiguar si está presente. Otras veces, el medio de cultivo contiene determinados azúcares especiales que sólo pueden utilizar algunas bacterias. En algunos medios se añaden indicadores de pH que cambian de color cuando uno de los nutrientes del medio es fermentado y se generan catabolismos ácidos. Si las bacterias son capaces de producir fermentación, generan gases que pueden ser detectados cuando el cultivo se realiza en un tubo cerrado. Con otros medios de cultivo se puede identificar si las bacterias producen determinadas enzimas que digieren los nutrientes. Así, algunas bacterias con enzimas hemolíticas (capaces de romper los glóbulos rojos) producen hidrólisis y cambios apreciables prosaicamente en las placas de agar-sangre.

Condiciones generales para el cultivo de microorganismos

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El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve afectado por una serie de factores de gran importancia.

1- disponibilidad de nutrientes adecuados

Un medio de cultivo adecuado para la investigación microbiológica ha de contener, como mínimo, carbono, nitrógeno, azufre, fósforo y sales inorgánicas.

2- consistencia adecuada del medio

Partiendo de un medio líquido podemos modificar su consistencia añadiendo productos como albúmina, gelatina o agar, con lo que obtendríamos medios en estado semisólido o sólido. Los medios solidificados con gelatina tienen el gran inconveniente de que muchos microorganismos no se desarrollan adecuadamente a temperaturas inferiores al punto de fusión de este solidificaste y de que otros tienen la capacidad de licuarla.

3- presencia (o ausencia) de oxígeno y otros gases

Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmósfera con tensión de oxígeno normal. Algunas pueden obtener el oxígeno directamente de variados sustratos. Pero los microorganismos anaerobios estrictos sólo se desarrollarán adecuadamente en una atmósfera sin oxígeno ambiental.

4- condiciones adecuadas de humedad

Un nivel mínimo de humedad, tanto en el medio como en la atmósfera, es imprescindible para un buen desarrollo de las células vegetativas microbianas en los cultivos. Hay que prever el mantenimiento de estas condiciones mínimas en las estufas de cultivo a 35-37ºC proporcionando una fuente adecuada de agua que mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar así que se deseque el medio.

5- Luz ambiental

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La mayoría de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en presencia de luz solar. Hay excepciones evidentes como sería el caso de los microorganismos fotosintéticos.

6- pH

La concentración de iones hidrógeno es muy importante para el crecimiento de los microorganismos. La mayoría de ellos se desarrollan mejor en medios con un pH neutro, aunque los hay que requieren medios más o menos ácidos. No se debe olvidar que la presencia de ácidos o bases en cantidades que no impiden el crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos metabólicos normales.

7- Temperatura

Los microorganismos mesófilos crecen de forma óptima a temperaturas entre 15 y 43ºC. Otros como los psicrófilos crecen a 0ºC y los temófilos a 80ºC o incluso a temperaturas superiores (hipertemófilos). En líneas generales, los patógenos humanos crecen en rangos de temperatura mucho más cortos, alrededor de 37ºC, y los saprofítos tienen rangos más amplios.

8- Esterilidad del medio

Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estériles para evitar la aparición de formas de vida que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los especímenes inoculados en dichos medios. El sistema clásico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que utiliza vapor de agua a presión como agente esterilizante)

MaterialesGrenetina 1 vaso precipitado 250 ml. 1 mechero 1 agitador de vidrio

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1 triple de tela de asbesto 3 cajas Petri 3 tubos de ensayo con rosca 1 gradilla

1 espátula 1 balanza granataria abate lenguas asa de siembra

DESARROLLO Primero con la balanza se devera calcular el peso de las cajas petri y eso

agregarle la grenetina hasta que el peso final indique los 50g. Despues de eso vacia la grenetina en el vaso precipitado que contenga

agua Enseguida se coloca el vaso para herbir y se deja calentar hasta que este

sacando vapor el agua Luego de que la mezcla este caliente se revolver con el abate lenguas para

eliminar todo rastro de grumos Una vez caliente y pira la mezcla se deposita de nuevo en las cajas etri,

tantas como sea posible Por ultimo se tiene que dejar a la interperie para que acumule las bacterias

que se van a observar Por ultimo lo que falta es su estudio a tra ves del microsciopio

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Medidas PreventivasLos métodos de prevención principalmente son: traer la bata (abotonada), no jugar, amarrarse las agujetas antes de entrar, las chicas deberán entrar con el pelo recogido, traer franela y tomar con cuidado los instrumentos para no romperlos o causar un accidente mayor, usar pinzas o la franela para evitar que se queme con el agua caliente y tener cuidado con el transporte de las cajas Petri una vez vaciadas la grenetina

RESULTADOS

1.1 preparacion de las cajas petri

1.2 la forma en como se termino la gelatina

1.3 la forma final de como queda la mezcla

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ConclusionesAl final de esta práctica todos en el equipo pudimos crear nuestro cultivo propio de bacterias y quedo como una prueba de como para cada organismo se puede crear su propio sistema de estudio.

Glosario Grenetina: Sustancia que parecida a la azúcar es usada en alimentos

caseros Protista: Es un taxón que se incluye dentro de la categoría taxonómica de

reino. La acepción más extendida de esta categoría coincide con el objeto de interés de la microbiología.

Cultivo: forma en la cual se pueden observar y criar los tipos de organismos que se quieren estudiar

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Referencias Bibliográficas Visita al laboratorio de Biología en el CECyT No. 2 Biología Básica “Manual de Laboratorio”. https://es.wikipedia.org/wiki/cultivo_microbiano http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMedios.htm https://es.wikipedia.org/wiki/Biodiversidad http://definicion.de/reino-protista/ http://es.thefreedictionary.com/musgo

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