Depósitos de anticuerpos anti-cardíacos en pacientes con insuficiencia cardíaca y su posible contribución en el desarrollo y

progresión de la enfermedad

Christian Assad-Kottner, MD1, 2; Andrea M Cordero-Reyes, MD2; Alejandro R Trevino, MD2; Jose H Flores-Arredondo, MD2; Evaristo Fernandez2, MD; Roberto Barrios, MD2; Keith A Youker, PhD2; Guillermo Torre-Amione, MD, PhD2

The University of Texas Medical Branch at Galveston Texas (UTMB)The Methodist DeBakey Heart Center

Herskowitz, A. et al. (1993) Concepts of autoimmunity applied to idiopathic dilated cardiomyopathy. J. Am. Coll. Cardiol. 22, 1385–1388

IntroducciónVarios estudios han sugerido la posibilidad de que la respuesta humoral inmunológica pudiera ser un contribuyente importante en el desarrollo y progresión de la insuficiencia cardíaca.

Estudios previos se han enfocado en demostrar la presencia de anticuerpos contra el miocardio en el suero de los pacientes con cardiomiopatías.

Hasta la fecha no existe ningún estudio que demuestre la presencia de anticuerpos natos del paciente en el miocardio con insuficiencia cardíaca.

Caforio AL, Mahon NJ, Tona F, McKenna WJ. Circulating cardiac autoantibodies in dilated cardiomyopathy and myocarditis: pathogenetic and clinical significance. Eur J Heart Fail. 2002 Aug;4(4):411-7.

IntroducciónAutoanticuer

pos

Mitocondria

M7ANT

BCKD-E2

Sarcolema / Proteínas

Contráctiles

TroponinaActina

Miosina

ReceptoresMuscarínicos

Receptores B1-

Adrenérgicos

Introducción

La posibilidad de la existencia de anticuerpos contra el miocardio ha sido estudiada en el suero de los pacientes desde 1986

Uno de los mayores retos es poder comprobar la especificidad de los anticuerpos hacia el miocardio, ya que algunos han demostrado estar presentes en porcentajes similares en personas normales

Schimke I, Muller J, Priem F, et al. Decreased oxidative stress in patients with idiopathic dilated cardiomyopathy one year after immunoglobulin adsorption. J Am Coll Cardiol. 2001;38:178–183.

Diversos grupos han demostrado que el remover anticuerpos en pacientes con insuficiencia cardíaca mejora la función sistólica, diastólica y la clase NYHA

Predominantemente la remoción de los anticuerpos subclase IgG3

Introducción

IntroducciónComo remover los anticuerpos?

PlasmaféresisInmunoadsorción

Felix SB, Staudt A. Immunoadsorption as treatment option in dilated cardiomyopathy. Autoimmunity. 2008 Sep;41(6):484-9.

Que tiene de especial el IgG3?Activa el complemento de la manera mas eficiente

Dentro de las subclases de anticuerpos es el que tiene mayor actividad citotóxica

Se ha demostrado estar relacionado con múltiples enfermedades autoinmunes (Artritis Reumatoide, Enfermedades del Tejido conectivo, Psoriasis)

Introducción

Staudt A, Böhm M,Felix SB. Potential role of autoantibodies belonging to the immunoglobulin G-3 subclass in cardiac dysfunction among patients with dilated cardiomyopathy. Staudt A, Böhm M,Felix SB. Circulation. 2002 Nov 5;106(19):2448-53.

Jahns R, Boivin V, Siegmund C, et al. Autoantibodies activating human B-1-adrenergic receptors are associated with reduced cardiac function in chronic heart failure. Circulation. 1999;99:649–654

Anticuerpos contra el receptor B1-Adrenérgico

60% de los pacientes con Cardiomiopatía Idiopática<1% de las personas sanas10-13% de los pacientes con cardiomiopatía isquémica

Introducción

MétodosSe obtuvieron muestras del miocardio de 100 pacientes con insuficiencia cardíaca al momento de trasplante o de implante de un dispositivo de asistencia ventricular izquierda.

40 muestras de corazones normales se utilizaron como control

Las muestras fueron posteriormente fijadas en parafina siguiendo protocolos estandarizados.

MétodosLas muestras fueron subsecuentemente analizadas por medio de técnicas de inmunofluorescencia para identificar

Inmunoglobulinas anti-cardíacas

Inmunoglobulinas del subtipo IgG3

Complemento Activado

Se utilizaron anticuerpos antihumanos conjugados con FITC (isocianato de fluoresceina) y Cy3 (carbocianina 3) para identificar los anticuerpos natos y la activación del complemento

Las muestras fueron analizadas por un patólogo certificado

Anticuerp

os 101

IgA IgD IgE IgG IgM

IgG1 IgG2 IgG4IgA1 IgA2

IgG3

Estructura de la inmunoglobulina y sus subclases

Fab

Fc

Estructura de la Inmunoglobulina

CADENA LIGERA

CADENA PESADA

Fragment, antigen binding

Fragment crystallizable

region

Dominios de la Inmunoglobulina

Dominios del AnticuerpoV: VariableC: Constante

Fab

Fc

Fragment, antigen binding

Fragment crystallizable

region

Anticuerpos conjugados con FITC (isocianato de fluoresceina) y Cy3 (carbocianina 3)

Anticuerpos Antihumano Anti-FABconjugado con FITC

(isocianato de fluoresceina)

Anticuerpo Antihumano antiC3c conjugado Cy3 (carbocianina 3)

Miocardio con anticuerpos anticardíacos natos expuestos por anticuerpos

antihumanos contra la porción FAB

Miocardio con anticuerpos anticardíacos unidos a anticuerpos antihumanos anti-FAB

conjugados con FITC

Anticuerpo Anticardíaco Nato

Anticuerpo AntihumanoAnti-FAB conjugado con FITC

Miocardio sin anticuerpos por consiguiente los anticuerpos antihumanos no se unen

?????????Y

ahora???

MIOCARDIO SANO INSUFICIENCIA CARDIACA

Depósitos de anticuerpos anti-cardíacos en el miocardio demostrados por medio de

inmunofluorescencia utilizando anticuerpos anti-IgG conjugados con FITC (Isotiocianato

de Fluoresceína)

Tinción del sarcolema de paciente sano y paciente

con insuficiencia cardíaca

Autoanticuerpos

Mitocondria

M7ANT

BCKD-E2

Sarcolema / Proteínas

Contráctiles

TroponinaActina

Miosina

ReceptoresMuscarínicos

Receptores B1-

Adrenérgicos

Prevalencia de anticuerpos anticardíacos IgG en el

miocardio

Muestras de

miocardio sano ( 40 pts) sin

depósitos de

anticuerpos contra el miocardio

Pacientes (71/100 )

con anticuerp

os anticardíacos IgG Las

subdivisiones señalan aquellos

pacientes en los

cuales el anticuerpo presente era del subtipo

IgG3 (68%)

Miocardio de un paciente con insuficiencia cardíaca con tinción doble para

IgG3 y C3c.

Depósito de un anticuerpo conjugado con FITC (tinción

verde) contra C3c.

Depósitos de anticuerpo conjugado con Cy3 (tinción roja)

contra IgG3

Sobreposición de ambas tinciones demostrando con

color amarillo el tejido positivo para IgG3 y C3c

Magnificación de la sobreposición de ambas

tinciones

• El grupo A demuestra un subgrupo de pacientes que resultó positivo tanto para IgG3 como para el marcador de activación del complemento C3c.

• El Grupo B demuestra un subgrupo de pacientes que resultó negativo tanto para IgG3 y C3c.

• Años Promedio de enfermedad en aquellos pacientes que resultaron positivos fue de 11 años contra 6 años de aquellos que resultaron negativos.

• Lo anterior sugiere que a medida que aumenta la duración de la enfermedad aumenta la presencia y activación del sistema inmune.

Activación inmunológica y duración de la enfermedad.

ConclusionesDemostramos por primera vez que 70% de los pacientes con insuficiencia cardiaca tiene depósitos de auto-anticuerpos cardiacos

El subtipo IgG3 el mas comúnTiene el mayor efecto celular citotóxico

Activa el complemento de la manera mas eficiente

Tiene el potencial de causar efectos pro-inflamatorios severos.

• A medida que aumenta la duración de la enfermedad aumenta la presencia y activación del sistema inmune.

Estos hallazgos apoyan la teoría que el sistema inmune desempeña un papel importante en el desarrollo y progresión de la disfunción cardíaca y por ende, el intervenir en su respuesta pudiera ayudar a brindar nuevas modalidades terapéuticas

Serán necesarios estudios adicionales para entender el papel que las diferentes clases de anticuerpos pudieran tener en el paciente con disfunción miocárdica

Muchas Gracias

Chassadk@utmb.edu

Christian Assad-Kottner

Christianassad

Pacientes con insuficiencia cardíaca Cardiomiopatía Isquémica (CMI) yNo Isquémica (CMNI) Características de los anticuerpos Activación del complemento