polymerase chain reaction (pcr) k
TRANSCRIPT
POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)DASAR BIOTEKNOLOGIKELAS K
GROUP 3 :1. Retno Febriyanti (115100600111028)2. Ghani Rasyid Ning (125100600111009)3. Quinntita Rofifadhila (115100607111004)4. Ni Luh Bella W. F. D (125100601111001)5. Muhammad Adiansyah (125100607111005)6. Nanda Filosofia (115100600111034)7. Fathul Mubin (115100600111006)
1. DEFINISI PCR
2. KOMPONEN PCR
3. SIKLUS PCR
4. PRINSIP DASAR PCR
5. VARIASI PCR
6. APLIKASI PCR
@ OUTLINE
What is PCR?
@ Polymerase Chain ReactioN
PCR adalah suatu teknik atau metode perbanyakan (replikasi) DNA secara enzimatik tanpa menggunakan organisme.
@ KOMPONEN PCR
1. CETAKAN DNA
2. PRIMER
6. PCR GENE CYCLER
4. BUFFER PCR & KONSENTRASI MG2+
3. TAQ DNA POLYMERASE
5. NUKLEOTIDA (dNTP)
@ SIKLUS PCR
1. Denaturasi
Untaian Ganda DNA
2. Primer Annealin
g
3. DNA Polymera
se Extensio
n
@ PRINSIP DASAR PCR
PENGGANDAAN DNA
PRIME FORWARD &
REVERSE
DEOXYNUCLEOSIDE TRIPHOSPHATES
(dNTPs)
ENZIM DNA POLIMERASE
@. Reverse Transcriptase PCR (RT-PCR)
# Yang diamplifikasi berupa m-RNA# Sampel yang digunakan adalah RNA yang diekstrak dari sel atau jaringan# Dibantu oleh enzim Reverse Transcriptase# RT-PCR digunakan sebagai alat diagnostik untuk mendeteksi dan menentukan serotipe virus, sebagai informasi untuk studi epidemiologi
@ VARIASI-VARIASI PCR
@. Nested PCR# Teknik perbanyakan replikasi sampel DNA dengan
bantuan enzim DNA polymerase# Menggunakan dua pasang primer untuk
mengamplifikasi fragmen# Hasil fragmen DNA dari nested PCR lebih
spesifik (lebih pendek) dibandingkan dengan PCR biasa
# Waktu yang diperlukan dalam reaksi Nested PCR lebih lama daripada PCR biasa
@ VARIASI-VARIASI PCR…
Denaturasi
Penempelan• Primer 1• Amplifikasi• Produk Pertama
Pemanjangan• Primer 2 (Nested
Primer)• Amplifikasi• Produk Kedua
@ APLIKASI PCR
ISOLASI GEN
DNA SEQUENCING
IDENTIFIKASI FORENSIK
DIAGNOSA PENYAKIT
• Aryani, Any dan Kusumawaty, Diah. 2007. Prinsip-prinsip Polymerase Chain
Reaction dan Aplikasinya.http://file.upi.edu/Direktori
/FPMIPA/JUR._PEND._BIOLOGI/197008112001122-DIAH_KUSUMAWATY/
Materi/PCRkursus.pdf. Diakses pada tanggal 19 Maret 2013 pukul 19.14
WIB.
• Campbell dan Farrell. 2008. Biochemistry Sixt Edition. Kanada :
Brooks/cole.
• Kurniawan, Annas. 2012. Reaksi Polimerase Berantai atau Polymerase
Chain Reaction (PCR). Bali : Universitas Pendidikan Ganesha.
• Muladno. 2002. Seputar Teknologi Rekayasa Genetika. Bogor : Pustaka
Wirausaha Muda dan USESE Foundation.
• Stanfield, W., dkk. 2009. Biologi Molekuler dan Sel. Jakarta : Erlangga.
@ REFERENSI
JIKA INGIN MENJADI YANG TERBAIK, LAKUKAN YANG TERBAIK TERLEBIH
DAHULU.
TERIMA KASIH… AKHIR KATA…
WASSALAMUALAIKUM…