1

PLATELIA™ TOXO IgG AVIDITY 48 72842

DETERMINAREA AVIDITĂȚII IGG ANTI-TOXOPLASMA GONDII ÎN SER UMAN PRIN METODA IMUNOENZIMATICĂ

881130 – 2013/11 1. SCOPUL UTILIZĂRII Platelia™ TOXO IgG AVIDITY este un test imunoenzimatic pentru determinarea avidității anticorpilor anti-T. gondii IgG în ser uman. Testul The Platelia™ TOXO IgG AVIDITY ar trebui să fie folosit în combinație cu Platelia™ TOXO IgG kit (Ref. 72840). 2. VALOARE CLINICĂ T. gondii este un protozoar ce determină infecții la numeroase specii de mamifere și păsări. Toxoplasmoza, frecventă la oameni și animale, este, de obicei, subclinică. Răspândirea acestei infecții în rândul populației, determinată cu ajutorul testelor serologice, poate diferi în funcție de țara de origine și de vârstă. Toxoplasmoza în timpul sarcinii, a fost implicată în anomalii congenitale grave (în special deteriorarea funcțiilor cerebrale) și, uneori, în nașterea copilului mort. Demonstrarea anticorpului Toxo IgG la femei anterior concepției oferă asigurări cu privire la protejarea fătului de o eventuală toxoplasmoză în timpul sarcinii. Predispoziția la infecții grave cu toxoplasmoză este frecvent întâlnită la persoanele cunoscute a fi dobândit Sindromul Imunodeficienței Dobândite (SIDA), sau care prezintă alte imunodeficiențe. Aceste infecții se datorează, în principal, reactivării chisturilor T. gondii prezente anterior infecției cu HIV. Diagnosticarea specifică a infecției cu T. gondii poate fi complicată, iar izolarea parazitului este rară. Confirmarea serologică a anticorpilor T. gondii indică expunerea la parazit și a devenit larg acceptată ca un mijloc de a determina statutul imun si susceptibilitatea la infectii. Verificarea câtorva izotipuri permite fie datarea T. gondii și implementarea unei terapii adecvate în cazul unei infecții recente sau propunerea de recomandări profilactice: îndrumări cu privire la igienă-dietă în cazul femeilor însărcinate, chimoprofilaxie în cazul populației cu imunodeficiențe. Însă, diagnosticul diferențiat între infecțiile recente și cele trecute este dificil de realizat uneori ca urmare a persistenței anticorpilor T. gondii IgM sau a reapariției anticorpilor T. gondii IgM în caz de reinfectare, a reactivării unei infecții latente sau a stimulării nespecifice a sistemului imunitar. În astfel de situații, măsurarea avidității IgG prin metoda imunoenzimatică poate sprijini diferențierea între infecțiile acute sau infecțiile trecute. Această determinare se bazează pe maturitatea răspunsului imun, care se traduce, prin sinteza unor anticorpi IgG cu aviditate scăzută în timpul primoinfecților și a unor anticorpi IgG cu aviditate ridicată în timpul infecților trecute. 3. PRINCIPIU Acest test este efectuat utilizând Platelia™ TOXO IgG AVIDITY (Ref. 72842) în combinație cu Platelia™ TOXO IgG (Ref. 72840). Principiul acestei metode se bazează pe măsurarea avidității anticorpilor IgG la T. gondii. Utilizarea unor agenți (precum ureea) ce discoiază legătura antigen/anticorp în paralel cu tehnica obișnuită de măsurare a anticorpilor IgG permite realizarea unei comparații între densitatea optică (DO) obținută după acțiunea agentului disociator și DO obținută în lipsa agentului disociator. Aviditatea este considerată scăzută atunci când legătura antigen/anticorp este disociată ușor. Aviditatea este considerată ridicată atunci când legătura antigen/anticorp nu este disociată ușor Acest test trebuie să fie folosit numai pentru probe pozitive ce demonstrează o concentrație a anticorpilor T. gondii IgG mai mare decât 9 IU/ml cu Platelia™ TOXO IgG (Ref. 72840).

2

Pasul 1 Controalele de aviditate și serurile pacienților cu o concentrație de anticorpi IgG anti-T. gondii între 9 și mai mari de 80 IU/ml sunt diluate la 1/808. Probele diluate sunt apoi distribuite de două ori în godeurile acoperite cu antigen anti-T. gondii ale microplăcii. În timpul acestei incubații de o oră la 37°C, anticorpii IgG împotriva T. gondii prezenți în probă se leagă de antigenul T. gondii ce aoperă godeurile microplăcii. După incubare, anticorpii nespecifici nelegați și alte proteine serice sunt îndepărtate prin spălare. Pasul 2 Fiecare control de aviditate și fiecare ser pacient vor fi tratate la dublu: soluția de control este adăugată într-un godeu, iar soluția de disociere într-un alt godeu. În timpul acestei incubări de 15 minute la temperatura camerei (+18-30°C), soluția de disociere va încerca să disocieze complexele antigen/anticorp. După incubare, ambele soluții IgG sunt îndepărtate prin spălări. Pasul 3 Conjugatul (peroxidaza etichetat anticorp policlonal specific pentru lanțuri gamma umane) este adăugat în godeurile microplăcilor. În timpul acestei incubări de o oră la 37°C, anticorpul etichetat se leagă la serul IgG capturat de antigenul T. gondi. Conjugatul nelegat este îndepărtat prin spălări la finalul incubării. Pasul 4 Prezența de complexe imune (antigen T. gondii, anticorpi IgG împotriva T. gondii, conjugat anti-IgG ) este demonstrată prin adăugarea în fiecare godeu a unei soluții pentru dezvoltare enzimatică. Pasul 5 După o incubare de 30 de minute la temperatura camerei (+18-30°C), reacția enzimatică este oprită prin adăugarea de soluție de acid sulfuric 1N. Citirea densității optice realizată cu ajutorul spectometrului setat la 450/620 nm este proporțională cu suma anticorpilor IgG împotriva T. gondii prezenți în godeu. 4. INFORMAȚII PRODUS Cantitățile de reactivi furnizate au fost calculate pentru a permite 48 de teste cu kitul Platelia™ TOXO IgG (Ref. 72840). Toți reactivii sunt meniți în exclusivitate pentru diagnosticarea in vitro.

Eticheta Tipul reactivilor Prezentare

R5a Control de aviditate scăzută

Control de aviditate scăzută Ser uman reactiv la anticorpii IgG împotriva T. Gondii și negativ pentru antigenul HBs, anti-HIV1, anti- HIV2 și anti-HCV Conservant : 0,15% ProClin™ 300

1 x 0.75 ml

R5b Control de aviditate ridicată

Control de aviditate ridicată Ser uman reactiv la anticorpii IgG împotriva T. gondii, și negativ pentru antigenul HBs, anti-HIV1, anti- HIV2 și anti-HCV Conservant : 0,15% ProClin™ 300

1 x 0.75 ml

R12 Soluție control Soluție control Tampon TRIS-NaCl (pH 7.6 ± 0.2), 0.1% Tween® 20 și vopsea verde Conservant : 0,15% ProClin™ 300

1 x 28 ml

R13 Soluție de disociere

Soluție de disociere Tampon TRIS-NaCl (pH 7.6 ± 0.2), uree, 0.1% Tween® 20 et și vopsea verde Conservant : 0.001% ProClin™ 300

1 x 13 ml

În ceea ce privește condițiile de depozitare și data de expirare consultați indicațiile prezentate pe cutie.

3

5. AVERTISMENTE ȘI PRECAUȚII Fiabilitatea rezultatelor depinde de implementarea corectă a următoarelor Bune practici de laborator: Nu utilizați reactivi expirați. Nu amestecați și nu asociați în aceeași testare reactivi din loturi diferite. Înainte de utilizare, așteptați timp de o oră și 30 de minute pentru a permite reactivilor să ajungă la

temperatura camerei (+18-30°C). Folosiți articole de sticlă spălate temeinic și clătite cu apă deionizată sau, mai bine, utilizați materiale de

unică folosință. Folosiți un vârf de pipetă nou pentru fiecare probă. Verificați pipetele și celelalte echipamente pentru a desfășura operațiuni exacte și corecte. Respectați cu strictețe procedura de testare. Consultați și prospectul pentru Platelia™ TOXO IgG (Ref. 72840). Notă: Kitul Platelia™ TOXO AVIDITY poate fi utilizat cu diferite loturi de Platelia™ TOXO (Ref. 72840).

Instrucțiuni de securitate și sănătate

Materialul de origine umană folosit la prepararea reactivilor a fost testat și s-a constatat că este nonreactiv la antigenul de suprafață pentru hepatita B (HBs Ag), la anticorpii pentru virusul hepatitei C (anti-HCV), și la virusul imunodeficienței umane (anti-HIV1 și anti-HIV2). Întrucât nicio metodă nu poate garanta în mod absolut absența agenților infecțioși, manipulați reactivii de origine umană și probele pacienților ca fiind potențial capabile să transmită boli infecțioase: Orice material, inclusiv soluțiile de spălare, care intră în contact direct cu probele și reactivii ce conțin

materiale de origine umană vor fi considerate capabile de a transmite boli infecțioase. Purtați mănuși de unică folosință atunci când manipulați probe și reactivi. Nu pipetați cu gura. Evitați vărsarea probelor sau soluțiilor care conțin probe. Deversările trebuie clătite cu înălbitor diluat la

10 %. În cazul în care este vărsat acid, aceasta trebuie să fie mai întâi neutralizat cu bicarbonat de sodiu, apoi clătit cu înălbitor diluat la 10 % apoi uscat cu hârtie absorbantă. Materialul utilizat pentru curățare trebuie aruncat într-un recipient destinat reziduurilor contaminate.

Probele pacienților, reactivii ce conțin material de origine umană, precum și materialul și produsele contaminate vor fi aruncate numai după decontaminare.

Reziduurile chimice și biologice vor fi manipulate și aruncate conform Bunelor practici de laborator. Toți reactivii din kit sunt meniți în exclusivitate pentru diagnosticare in vitro. Pentru recomandări privind pericolele şi măsurile de precauţie asociate unor componente chimice din

acest kit de test, vă rugăm să consultaţi pictograma (pictogramele) menţionată(e) pe etichete şi informaţiile furnizate la sfârşitul instrucţiunilor de utilizare. Fişa tehnică de siguranţă este disponibilă la www.bio-rad.com.

6. PROBE 1. Serul este singurul tip de probă recomandat. 2. Respectați următoarele recomandări pentru manipularea, prelucrarea și depozitarea probelor de sânge:

Colectați toate probele de sânge respectând măsurile de precauție de rutină pentru puncția venoasă. Permiteți coagularea completă a probelor înainte de centrifugare. Păstrați eprubetele închise în permanență. După centrifugare, separați serul de cheag sau de globulele roșii într-o eprubetă de depozitare

închisă ermetic. Probele pot fi depozitate la +2-8°C dacă testul este efectuat în termen de 7 zile. Dacă testul nu este finalizat în termen de 7 zile, sau în vederea transportului, înghețați probele -20°C

sau la o temperatură mai scăzută. Nu folosiți probe care au fost dezghețate mai mult de cinci ori. Probele înghețate anterior vor fi bine

amestecate (Vortex) după dezghețarea de dinainte de testare. 3. Probele ce conțin 90 g/l de albumină sau 100 mg/l de bilirubină neconjugată, probele lipemice ce conțin

echivalentul a 36 g/l de trioleină (trigliceride), și probele hemolizate ce conțin până la 10 g/l de hemoglobină, nu afectează rezultatele.

4. Nu încălziți probele.

4

7. PROCEDURA DE TESTARE 7.1 Materiale necesare, dar nefurnizate Consultați prospectul pentru Platelia™ TOXO IgG (Ref. 72840). 7.2 Reconstituirea reactivilor

R5a, R5b: Control reactivitate scăzută (R5a) și Control reactivitate ridicată (R5b) vor fi diluate la 1/101 utilizând un Diluant R7 furnizat cu testul Platelia™ TOXO IgG (Ref. 72840).

R12, R13: Soluția control (R12) și Soluția de disociere (R13) sunt gata de utilizare. Pentru alți reactivi consultați prospectul pentru Platelia™ TOXO IgG (Ref. 72840).

7.3 Depozitarea și validitatea agenților deschiși și/sau reconstituiți Kitul va fi depozitat la +2-8°C. Atunci când kitul este depozitat la +2-8°C înainte de deschidere, fiecare componentă va fi utilizată până la data de expirare indicată pe eticheta exterioară a kitului.

R5a, R5b: Odată deschiși și necontaminați, reactivii depozitați la +2-8°C sunt stabili timp de 16 săptămâni.

R12, R13: Odată deschiși și necontaminați, reactivii depozitați la +2-8°C sunt stabili timp de 16 săptămâni.

Consultați și prospectul pentru Platelia™ TOXO IgG (Ref. 72840). 7.4 Procedură Respectați cu strictețe procedura de testare și Bunele practici de laborator. Utilizați Controlul de aviditate scăzută (R5a) și Controlul de aviditate ridicată (R5b) la fiecare testare pentru a valida rezultatele testării. Alți reactivi de utilizat (R1, R2, R6, R7, R9 și R10) sunt incluși în kitul Platelia™ TOXO IgG (Ref. 72840). Notă: înainte de utilizare așteptați 1 oră și 30 de minute pentru a permite reactivilor să ajungă la temperatura camerei (+18-30°C), în special în cazul reactivilor R12 și R13. 1. Stabiliți cu atenție planul de distribuire și identificare a controalelor și a probelor pacienților. 2. Preparați Soluția de spălare diluată (R2). 3. Scoateți tava de transport și bandeletele (R1) din punga de protecție. 4. În cazul eprubetelor identificate individual, diluați la 1/101 în Diluant (R7) controalele de aviditate (R5a,

R5b) și probele pacienților (S1, S2…) cu o concentrație IgG anti-T. gondii între 9 și 80 IU/ml [10µl de probă și 1ml de Diluant (R7)]. Serurile pacienților cu o concentrație IgG anti-T. gondii mai mare decât 80 IU/ml sunt diluate la 1/808 [10µl de probă și 1ml de Diluant (R7) apoi 100 µL din prima diluare și 700 µL de Diluant (R7)]. Amestecați în vortex probele diluate.

5. Respectând cu strictețe secvența indicată mai jos, distribuiți în fiecare godeu 200µl de controale diluate și probe pacienți:

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

A R5a R5a S7 S7 B R5b R5b C S1 S1 D S2 S2 E S3 S3 F S4 S4 G S5 S5 H S6 S6

6. Acoperiți microplaca cu un capac de etanșare adezivă, apoi apăsați ferm placa pentru a asigura o

închidere etanșă. Incubați microplaca imediat într-o baie de apă controlată cu ajutorul unui termostat sau într-un incubator uscat timp de 1 oră 5 minute la 37°C 1°C.

7. La finalul perioadei de incubare, îndepărtați capacul de etanșare adezivă. Aspirați conținutul tuturor godeurilor într-un container pentru deșeuri periculoase (care conține hipoclorit de sodiu).

8. Distribuiți rapid 200 µl de Soluție control (R12) în fiecare godeu al bandeletelor impare. Apoi distribuiți rapid 200 µl de Soluție de disociere (R13) în fiecare godeu al bandeletelor pare.

5

9. Incubați microplaca timp de 15 minute 2 min. La temperatura camerei (+18-30°C). 10. Înainte de finalul perioadei de incubare, preparați soluția de lucru pentru conjugat (R6+R7). 11. La finalul perioadei de incubare, aspirați conținutul tuturor godeurilor într-un container pentru deșeuri cu

risc biologic (care conține hipoclorit de sodiu). Spălați microplăcile de 2 ori cu 350 µl din Soluție de spălare (R2). Răsturnați ușor microplăcile și aplicați ușor hârtie absorbantă pentru a îndepărta lichidul rămas.

12. Distribuiți imediat 200 µl de soluție de lucru pentru conjugat (R6+R7) în toate godeurile. Soluția va fi agitată ușor înainte de utilizare.

13. Acoperiți microplaca cu un capac de etanșare adezivă, apoi apăsați ferm placa pentru a asigura o închidere etanșă. Incubați microplaca imediat într-o baie de apă controlată cu ajutorul unui termostat sau într-un incubator uscat timp de 1 oră 5 minute la 37°C 1°C.

14. La finalul perioadei de incubare, îndepărtați capacul de etanșare adezivă. Aspirați conținutul tuturor godeurilor într-un container pentru deșeuri cu risc biologic (care conține hipoclorit de sodiu). Spălați microplaca de 4 ori cu 350 µl din Soluție de spălare (R2). Răsturnați ușor microplăcile și aplicați ușor hârtie absorbantă pentru a îndepărta lichidul rămas.

15. Distribuiți rapid în fiecare godeu și departe de lumină 200 µl de soluție Cromogen (R9). Permiteți reacției să se dezvolte la întuneric timp de 30 ± 5 minute la temperatura camerei (+18-30°C). Nu utilizați un capac de etanșare adezivă.

16. Opriți reactia enzimatică adăugând 100 µl de Soluție de stopare (R10) în fiecare godeu. Uitilizați aceeași secvență și rată de distribuire ca și în cazul soluției de dezvoltare.

17. Ștergeți cu atenție baza plăcii. Citiți densitatea optică la 450/620 nm utilizând un cititor de placă în termen de 30 minute de la oprirea reacției. Bandeletele vor fi întotdeauna menținute departe de lumină înainte de citire.

18. Înainte de raportarea rezultatelor, verificați concordanța dintre planul de citire și planul de distribuire a plăcilor și probelor.

8. INTERPRETAREA REZULTATELOR 8.1 Calcularea Indicelui de aviditate (IA) Indicele de aviditate (IA) al unei probe este raportul de densități optice (DO) măsurat cu Soluție de disociere (R13) și cu Soluție de control (R12):

IA= DOProbă R13 / DOProbă R12 Calcularea IA-ului unei probe poate fi efectuată dacă DO obținută cu Soluția de control este mai mare decât 0,150. 8.2 Control calitate Inculdeți toate controalele pentru fiecare microplacă și pentru fiecare testare și analizați rezultatele obținute. Pentru validaea testului trebuie să fie îndeplinite următoarele criterii:

Valori densitate optică cu Soluția de control (R12): DO R5a ≥ 0.200 DO R5b ≥ 0.200

Indice aviditate: IA R5a < 0.40 IA R5b ≥ 0.50

Dacă nu sunt îndeplinite acetse criterii de control al calității, testul va fi repetat. 8.3 Interpretarea rezultatelor

Indice de aviditate (AI) Interpretare

IA < 0,40 Zonă aviditate scăzută

0,40 ≤ IA < 0,50 Zona aviditate gri

IA ≥ 0.50 Zonă aviditate ridicată

6

Indicii de aviditate mai mici decât 0,40 indică mai curând primoinfecțiile recente, de mai puțin de 20 săptămâni. Însă astfel de rezultate nu permit confirmarea acestui diagnostic cu o certitudine absolută.

Indicii de aviditate mai mari sau egali cu 0,50 indică mai curând infecțiile trecute, mai vechi de 20 săptămâni. Însă astfel de rezultate nu permit excluderea cu certitudine absolută a unei primoinfecții recente de mai puțin de 20 săptămâni.

Dacă este suspectată o infecție recentă sau dacă indicele de aviditate se află în zona gri, poate fi testată o a doua probă (Consultați legislația curentă cu privire la monitorizarea pacienților).

8.4 Ghid rezolvare probleme

Reacțiile nevalidate sau nerepetabile sunt adeseori cauzate de: Temperatura neadecvată a reactivilor Spălarea neadecvată a microplăcilor. Diluarea incorectă a probelor Contaminarea probelor negative cu ser cu un titru ridicat de anticorpi Contaminarea soluției de dezvoltare cu agenți chimici oxidanți (înălbitor, ioni metalici...) Contaminarea Soluției de stopare.

9. PERFORMANȚE

9.1 Studii clinice Performanțele Platelia™ TOXO IgG AVIDITY au fost evaluate în laboratorul unui spital prin utilizarea a 297 probe în esență de la femei însărcinate, și cu ajutorul unui panou de seroconversie de 33 probe. A fost realizat un studiu prospectiv pe 72 probe pozitive pentru IgG anti-T. gondii cu Platelia™ TOXO IgG (72840). Pentru 65 dintre acestea, rezultatele Platelia™ TOXO IgG AVIDITY rezultatele au fost comparate cu cele obținute cu ajutorul unui test de aviditate comercializat EIA IgG și luat în considerare ca referință. S-au constatat numai 9 discrepanțe minore: 2 probe cu indice de aviditate scăzut stabilit utilizând testul de referință au fost identificate cu aviditate

intermediară cu Platelia™ TOXO IgG AVIDITY. 4 probe cu indice de aviditate intermediar stabilit utilizând testul de referință au fost identificate cu

aviditate ridicată cu Platelia™ TOXO IgG AVIDITY. 3 probe cu indice de aviditate ridicat stabilit utilizând testul de referință au fost identificate cu aviditate

intermediară Platelia™ TOXO IgG AVIDITY. A fost realizat un studiu retrospectiv pe 93 probe pozitive pentru IgG anti-T. gondii și negative pentru IgM anti-T. gondii, și considerate ca fiind toxoplasmoze trecute. Dintre aceste probe: 82 au prezentat un indice de aviditate ridicat. 9 au prezentat un indice de aviditate intermediar 2 au prezentat un indice de aviditate scăzut Cele 9 ce au prezentat un indice de aviditate intermediar corespund unor infecții trecute la adulți și

prezintă un indice de aviditate apropiat de limita ridicată. Cele 2 seruri ce au prezentat un indice de aviditate scăzut provin din sângele din cordonul ombilical. Unul dintre acestea provine de la o femeie însărcinată ce a fost tratat după seroconversie, ceea ce explică întârzierea de maturare a IgG. Pentru celălalt exemplu nu au fost disponibile informații cu privire la statutul serologic al mamei.

Au mai fost testate și 99 probe pozitive pentru IgG anti-T. gondii IgG și IgM anti-T. gondii. Indicii de aviditate obținuți au fost comparați cu cei obținuți prin metoda de referință:

7

Test avididate de referință

Aviditate scăzută

Aviditate intermediară

Aviditate ridicată

Platelia TOXO IgG Avidity (72842)

Aviditate scăzută

21 0 0

Aviditate intermediară

5** 5 2

Aviditate ridicată

1* 12 53

Printre discrepanțele observate: După retestarea cu ambele probe, a fost confirmată o discrepanță minoră pentru una dintre probe (*).

Aceasta corespunde unei femei a cărei toxoplasmoză era mai veche de 2 luni înainte de prelevare. O probă (**) dintr-o seroconversie și care prezenta o discrepanță minoră a generat un indice de aviditate

scăzut cu ambele probe după retestare. 10 probe nu au fost controlate întrucât corespundeau unor infecții trecute și prezentau discrepanțe

minore. Toate aceste probe au demonstrat un indice de aviditate intermediar apropiat de pragul de indice de aviditate ridicat cu testul de referință și un indice de aviditate ridicat cu Platelia™ TOXO IgG AVIDITY.

În ceea ce privește cele 6 din 8 probe rămase, după retestare se menține o discrepanță minoră (aviditate ridicată vs intermediară ; intermediară vs ridicată; scăzută vs intermediară)

Au mai fost testate 33 probe din seroconversii toxomplasmoză de mai puțin de 2 luni. Aceste seruri corespundeau primelor probe pozitive IgG anti-T. gondii și au prezentat, toate, un indice de aviditate scăzut cu Platelia™ TOXO IgG AVIDITY. 9.2 Precizie Au fost realizate studii de precizie pe 3 probe pozitive IgG anti-T. gondii diluate la 1/101 și 3 probe pozitive IgG anti-T. gondii diluate la 1/808. În cadrul aceleiași testări (repetabilitate): Pentru a evalua repetabilitatea în cadrul aceleiași testări, cele șase probe au fost testate de 30 de ori în timpul aceleiași testări. Au fost determinați indicii de aviditate pentru fiecare probă. IA medii, Deviația Standard (DS) și Coeficientul de Variație (%CV) pentru fiecare probă sunt enumerați în tabelul de mai jos:

Precizie în cadrul aceleiași testări (repetabilitate)

N=30 IA scăzut

1/101

IA intermediar

1/101

IA ridicat 1/101

IA scăzut 1/808

IA intermediar

1/808

IA ridicat 1/808

Mediu 0,14 0,41 0,59 0,20 0,37 0,54 DS 0,01 0,02 0,03 0,01 0,03 0,03

%CV 8,5% 4,1% 5,4% 5,9% 8,0% 5,7% Precizie între testări (reproductibilitate): Pentru a evalua reproductibilitatea între testări, cele șase probe au fost testate de două ori, în două testări pe zi, timp de 20 de zile. Au fost determinați indicii de aviditate pentru fiecare probă. IA medii, Deviația Standard (DS) și Coeficientul de Variație (%CV) pentru fiecare probă sunt enumerați în tabelul de mai jos: Precizie între testări (reproductibilitate)

N=80 IA scăzut

1/101

IA intermediar

1/101

IA ridicat 1/101

IA scăzut 1/808

IA intermediar

1/808

IA ridicat 1/808

Mediu 0,19 0,42 0,61 0,20 0,42 0,80 DS 0,01 0,02 0,04 0,02 0,03 0,03

%CV 7,5% 5,3% 5,8% 7,9% 7,2% 3,3%

8

9. LIMITĂRI ALE PROCEDURII Diagnosticarea infecției cu T. gondii poate fi stabilită numai pe baza combinației de date clinice și biologice. Rezultatul unui singur test de titrare a anticorpilor IgG anti-T. gondii și măsurarea avidității acestora nu reprezintă o dovadă suficientă pentru diagnosticarea unei infecții recente cu T. gondii. 10. CONTROL CALITATE PRODUCĂTOR Toți reactivii fabricați sunt preparați în conformitate cu Sistemul nostru de calitate, de la recepția materiei prime până la comercializarea finală a produsului. Fiecare lot este supus unor evaluări de control al calității și este eliberat pe piață numai după ce sunt întrunite criteriile de acceptare predefinite. Documentele cu privire la producerea și controlul fiecărui lot în parte sunt păstrate de Bio-Rad. 11. REFERINȚE

1. COZON, G. J., J. FERRANDIZ, H. NEBHI, M. WALLON, and F. PEYRON. 1998. Estimation of the avidity of immunoglobulin G for routine diagnosis of chronic Toxoplasma gondii infection in pregnant women. Eur.J.Clin.Microbiol.Infect.Dis. 17:32-36.

2. JENUM, P. A., B. STRAY-PEDERSEN, and A. G. GUNDERSEN. 1997. Improved diagnosis of primary Toxoplasma gondii infection in early pregnancy by determination of anti-toxoplasma immunoglobulin G avidity. J.Clin.Microbiol. 35:1972-1977.

3. LAPPALAINEN, M., P. KOSKELA, M. KOSKINIEMI, P. AMMALA, V. HIILESMAA, K. TERAMO, K. O. RAIVIO, J. S. REMINGTON, and K. HEDMAN. 1993. Toxoplasmosis acquired during pregnancy: improved serodiagnosis based on avidity of IgG. J.Infect.Dis. 167:691-697.

4. LECOLIER, B. and B. PUCHEU. 1993. [Value of the study of IgG avidity for the diagnosis of toxoplasmosis]. Pathol.Biol.(Paris) 41:155-158.

5. LECOLIER, B. and B. PUCHEU. 1994. Comparaison de deux techniques de mesure de l'avidité des IgG pour le diagnostic de la toxoplasmose. Rev.Fr.Lab. 274:15-18.

6. REMINGTON J. S., THULLIEZ P., MONTOYA J. G. 2004. Recent Developments for Diagnosis of Toxoplasmosis. J.Clin.Microbiol. 42: 941-945.

7. ZOTTI, C., L. CHARRIER, M. GIACOMUZZI, R. A. MOIRAGHI, M. MOMBRO, C. FABRIS, and coll. 2004. Use of IgG Avidity test in case definitions of Toxoplasmosis in pregnancy. Microbiologica. 27: 17-20.

9

10

11

12

Bio-Rad 3, boulevard Raymond Poincare 92430 Marnes-la-Coquette - France Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00 2013/11 Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33 881130 www.bio-rad.com