plagiat merupakan tindakan tidak terpuji - core.ac.uk · anatomi fisiologi hati ..... 6 2. jenis...
TRANSCRIPT
EFEK HEPATOPROTEKTIF PEMBERIAN JANGKA PANJANG DEKOK
HERBA Bidens pilosa L. TERHADAP AKTIVITAS ALT-AST SERUM
PADA TIKUS BETINA TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)
Program Studi Farmasi
Oleh:
Apriyanto Gomes
NIM : 118114127
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2015
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
i
EFEK HEPATOPROTEKTIF PEMBERIAN JANGKA PANJANG DEKOK
HERBA Bidens pilosa L. TERHADAP AKTIVITAS ALT-AST SERUM
PADA TIKUS BETINA TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)
Program Studi Farmasi
Oleh:
Apriyanto Gomes
NIM : 118114127
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2015
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
Since everything is a reflection of your minds, everything can be
changed by our minds
- Buddha -
If you are depressed, you are living in the past. If you are anxious, you are
living in the future. If you are at peace you are living in the present
- Lao Tzu -
Bersama ini, saya persembahkan karya ini kepada:
Tuhan Yang Maha Esa
Ayah, ibu sebagai ungkapan rasa hormat dan baktiku
Kakak, adik serta keluarga besarku
Bapak/Ibu dosen Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Sahabat-sahabatku terkasih
Almamaterku tercinta
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ........................................................................................ i
HALAMAN JUDUL PERSETUJUAN PEMBIMBING ................................ ii
HALAMAN PENGESAHAN .......................................................................... iii
HALAMAN PERSEMBAHAN ...................................................................... iv
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .......................................................... v
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA
ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS ......................................... vi
PRAKATA ....................................................................................................... vii
DAFTAR ISI .................................................................................................... ix
DAFTAR TABEL ............................................................................................ xiii
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xv
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xvi
INTISARI ......................................................................................................... xviii
ABSTRACT ....................................................................................................... xix
BAB I. PENGANTAR ..................................................................................... 1
A. Latar Belakang................................................................................ 1
1. Perumusan masalah .................................................................... 3
2. Keaslian penelitian ..................................................................... 4
3. Manfaat penelitian ...................................................................... 4
B. Tujuan Penelitian ............................................................................ 5
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA.............................................................. 6
A. Hati ................................................................................................. 6
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
1. Anatomi fisiologi hati ................................................................. 6
2. Jenis kerusakan hati .................................................................... 8
3. Hepatotoksin ............................................................................... 9
4. ALT-AST .................................................................................... 10
5. Evaluasi kerusakan hati .............................................................. 11
B. Karbon Tetraklorida........................................................................ 13
C. Bidens pilosa Linn .......................................................................... 16
1. Taksonomi .................................................................................. 16
2. Nama daerah ............................................................................... 17
3. Morfologi .................................................................................... 17
4. Kandungan kimia dan kegunaan ................................................. 18
D. Dekok ............................................................................................. 19
E. Landasan Teori................................................................................ 20
F. Hipotesis .......................................................................................... 21
BAB III. METODE PENELITIAN.................................................................. 22
A. Jenis dan Rancangan Penelitian...................................................... 22
B. Variabel dan Definisi Operasional.................................................. 22
1. Variabel utama ............................................................................ 22
2. Variabel pengacau ...................................................................... 22
3. Definisi operasional .................................................................... 23
C. Bahan Penelitian.............................................................................. 23
D. Alat Penelitian................................................................................. 25
1. Alat pembuatan serbuk herba Bidens pilosa L ........................... 25
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
2. Alat pembuatan dekok herba Bidens pilosa L ............................ 25
3. Alat uji penetapan kadar air ........................................................ 25
4. Alat uji hepatoprotektif ............................................................... 25
E. Tata Cara Penelitian ........................................................................ 26
1. Determinasi tanaman herba Bidens pilosa L .............................. 26
2. Pengumpulan bahan uji .............................................................. 26
3. Pembuatan serbuk herba Bidens pilosa L ................................... 26
4. Penetapan kadar air serbuk herba Bidens pilosa L ..................... 26
5. Pembuatan dekok herba Bidens pilosa L .................................... 26
6. Pembuatan hepatotoksin karbon tetraklorida konsentrasi 50% .. 27
7. Uji pendahuluan .......................................................................... 27
8. Pengelompokkan dan perlakuan hewan uji ................................ 28
9. Pembuatan serum ........................................................................ 29
10. Pengukuran aktivitas serum ALT dan AST .............................. 30
F. Tata Cara Analisis Hasil .................................................................. 30
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 32
A. Penyiapan Bahan ............................................................................ 32
1. Hasil determinasi tanaman .......................................................... 32
2. Penetapan kadar air serbuk herba Bidens pilosa L ..................... 32
B. Uji Pendahuluan.............................................................................. 33
1. Penentuan dosis hepatotoksin ..................................................... 33
2. Penentuan dosis herba Bidens pilosa L ...................................... 33
3. Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji .......................... 34
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
C. Hasil Uji Efek Hepatoprotektif Dekok Herba Bidens pilosa L ...... 37
1. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB ...... 41
2. Kontrol negatif olive oil dosis 2 mL/kgBB ................................ 42
3. Kontrol dekok herba Bidens pilosa L. dosis 2 g/kgBB .............. 44
4. Kelompok perlakuan herba Bidens pilosa L. dosis 0,5;1;2
g/kgBB pada tikus betina galur Wistar terinduksi karbon
tetraklorida ................................................................................. 45
D. Rangkuman Pembahasan ................................................................ 49
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................... 52
A. Kesimpulan ..................................................................................... 52
B. Saran ............................................................................................... 52
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 53
LAMPIRAN ..................................................................................................... 57
BIOGRAFI PENULIS ..................................................................................... 77
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
DAFTAR TABEL
Tabel I. Peningkatan relatif dari beberapa serum enzim pada cedera hati .... 16
Tabel II. Komposisi dan konsentrasi reagen serum ALT ............................... 24
Tabel III. Komposisi dan konsentrasi reagen serum AST ............................... 25
Tabel IV. Purata aktivitas serum ALT ± pada selang waktu 0, 24, dan 48
jam setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB ......... 34
Tabel V. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT pada selang waktu 0, 24,
dan 48 jam setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
mL/kgBB .......................................................................................... 35
Tabel VI. Purata aktivitas serum AST ± SE pada selang waktu 0, 24, dan
48 jam setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB .... 35
Tabel VII. Hasil uji Scheffe aktivitas serum AST pada selang waktu 0, 24,
dan 48 jam setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
mL/kgBB .......................................................................................... 36
Tabel VIII. Purata ± SE aktivitas serum ALT dan AST tikus betina galur
Wistar pada kelompok perlakuan .................................................... 38
Tabel IX. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus betina galur Wistar
pada kelompok perlakuan................................................................. 40
Tabel X. Hasil uji Scheffe aktivitas serum AST tikus betina galur Wistar
pada kelompok perlakuan................................................................. 41
Tabel XI. Purata ± SE aktivitas serum ALT dan AST setelah pemberian
olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam .......... 43
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
Tabel XII. Hasil uji T berpasangan aktivitas serum ALT dan AST
pemberian olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan
24 jam ............................................................................................... 43
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Anatomi hati .................................................................................. 6
Gambar 2. Mekanisme biotransformasi karbon tetraklorida ........................... 14
Gambar 3. Mekanisme peroksidasi lipid oleh radikal CCL3 ........................... 15
Gambar 4. Herba Bidens pilosa L. ................................................................... 17
Gambar 5. Struktur flavonoid herba Bidens pilosa L. ..................................... 19
Gambar 6. Diagram batang purata aktivitas serum ALT pada selang waktu
0,24, dan 48 jam setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
mg/kgBB .................................................................................. 34
Gambar 7. Diagram batang purata aktivitas serum AST pada selang waktu
0,24, dan 48 jam setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2
mg/kgBB .................................................................................. 36
Gambar 8. Diagram batang purata aktivitas serum ALT tikus betina galur
Wistar pada kelompok perlakuan .................................................. 39
Gambar 9. Diagram batang purata aktivitas serum AST tikus betina galur
Wistar pada kelompok perlakuan .................................................. 39
Gambar 10. Diagram batang purata aktivitas serum ALT setelah pemberian
olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam ........ 44
Gambar 11. Diagram batang purata aktivitas serum AST setelah pemberian
olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam ........ 44
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Foto serbuk herba Bidens pilosa L. .......................................... 57
Lampiran 2. Foto pembuatan dekok herba Bidens pilosa L. ........................ 57
Lampiran 3. Foto dekok herba Bidens pilosa L. ........................................... 57
Lampiran 4. Surat pengesahan determinasi tanaman herba Bidens pilosa L. 58
Lampiran 5. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics
Committee (MHREC) ............................................................... 59
Lampiran 6. Analisis statistik aktivitas serum ALT pada uji pendahuluan
dosis hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB ................. 60
Lampiran 7. Analisis statistik aktivitas serum AST pada uji pendahuluan
dosis hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB ................. 62
Lampiran 8. Analisis statistik aktivitas serum ALT pada kelompok kontrol
olive oil 2 mL/kgBB ................................................................. 64
Lampiran 9. Analisis statistik aktivitas serum AST pada kelompok kontrol
olive oil 2 mL/kgBB ................................................................. 66
Lampiran 10. Analisis statistik aktivitas serum ALT pada perlakuan dekok
herba Bidens pilosa L. setelah induksi karbon tetraklorida 2
mL/kgBB .................................................................................. 68
Lampiran 11. Analisis statistik aktivitas serum AST pada perlakuan dekok
herba Bidens pilosa L. setelah induksi karbon tetraklorida 2
mL/kgBB .................................................................................. 72
Lampiran 12. Perhitungan efek hepatoprotektif ............................................. 75
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvii
Lampiran 13. Perhitungan konversi dosis herba Bidens pilosa L. untuk
manusia ..................................................................................... 75
Lampiran 14. Penetapan kadar air serbuk herba Bidens pilosa L. .................. 76
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xviii
INTISARI
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek hepatoprotektif
pemberian jangka panjang dekok herba Bidens pilosa L. pada tikus betina galur
Wistar terinduksi karbon tetraklorida, beserta dosis efektifnya.
Penelitian ini menggunakan tikus betina galur Wistar, umur 2-3 bulan,
dan berat 120-200 gram. Tikus dibagi secara acak ke dalam 6 kelompok, tiap
kelompok 5 ekor tikus. Kelompok I (kontrol hepatotoksin) diberi karbon
tetraklorida 2 ml/kg BB. Kelompok II (kontrol negatif) diberi olive oil 2 ml/kg
BB. Kelompok III (kontrol dekok) diberi dekok herba Bidens pilosa L. 2 g/kgBB.
Kelompok IV-VI (kelompok perlakuan) diberi dekok herba Bidens pilosa L. satu
kali sehari selama enam hari dengan dosis 0,5; 1; dan 2 g/kgBB, kemudian pada
hari ke-7 diinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB. Pada jam ke-24 setelah
pemberian karbon tetraklorida dilakukan pemeriksaan aktivitas serum ALT dan
AST pada semua kelompok perlakuan. Data aktivitas serum ALT dan AST
dianalisis menggunakan one way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95% dan
dilanjutkan uji Scheffe atau uji T berpasangan.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa pemberian dekok herba Bidens
pilosa L. memiliki efek hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas serum ALT
dan AST. Efek hepatoprotektif yang dihasilkan dari dosis terendah ke dosis
tertinggi sebesar 71,5; 85,8; 44,0%. Dari data diperoleh dosis efektif pemberian
dekok herba Bidens pilosa L., yaitu 1 g/kgBB.
Kata kunci : Bidens pilosa L., dekok, hepatoprotektif, ALT, AST
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xix
ABSTRACT
The aim of study research were to prove long-term administration of
Bidens pilosa L. herb decoction in female Wistar rats induced carbon
tetrachloride, and the effective dose.
This research use female Wistar rats, aged 2-3 months, and the weight
120-200 grams. Rats were randomly divided into six groups, each group had five
rats. Group I (control hepatotoxins) induced by carbon tetrachoride 2 mL/kgBW.
Group II (negative control) were given olive oil 2 ml/kgBW. Group III (control
decoction) were given decoction of herbs Bidens pilosa L. 2 g/kg. Group IV-VI
(treatment group) were given Bidens pilosa L. herb decoction once a day for six
days with a dose started from 0.5; 1; and 2 g/kgBW, then in seventh day the group
induced by carbon tetrachloride 2 ml/ kgBW. At the 24th hours after administrated
of carbon tetrachloride, ALT and AST activities were examinated in all treatment
groups. Data ALT and AST activities were analyzed using one-way ANOVA with
95% significancy level and continued with Scheffe test or paired t test.
The results showed that administration of Bidens pilosa L. herb decoction
has a hepatoprotective effect by lowering ALT and AST activities.
Hepatoprotective effects from the lowest to the highest doses were 71.5; 85.8;
44.0%. From the data, the effective dose of Bidens pilosa L. herb decoction were
1 g/kgBW.
Keywords : Bidens pilosa L., decoction, hepatoprotective, ALT, AST
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
BAB I
PENGANTAR
A. Latar Belakang
Hati merupakan organ terbesar yang memiliki peranan penting dalam
fungsi fisiologis tubuh. Hati dianggap sebagai organ metabolisme utama yang
memiliki berbagai fungsi, yaitu proses metabolisme karbohidrat, protein, lemak,
pengaturan koagulasi dan detoksifikasi dari substansi toksik (The Association of
Physicians of India, 2012). Organ hati memiliki resiko yang cukup besar untuk
mengalami kerusakan yang akan mengakibatkan terganggunya fungsi fisiologi
tubuh. Kerusakan tersebut dapat disebabkan oleh infeksi virus hepatitis, infeksi
bakteri, zat-zat toksik seperti alkohol (Roberts, 2010).
Perlemakan hati (steatosis) merupakan salah satu bentuk kerusakan hati.
Pada perlemakan hati terjadi penumpukan trigliserida dalam bentuk droplet di
dalam sitoplasma sel hepatosit (Schattner and Knobler, 2008). Perlemakan hati
dapat disebabkan oleh penyakit hati alkoholik maupun penyakit hati non
alkoholik/non alcoholic fatty liver disease (NAFDL). Pada saat ini, perlemakan
hati non alkoholik banyak ditemukan pada populasi masyarakat di negara
berkembang dan negara maju. Berdasarkan data epidemiologi, negara bagian barat
memiliki prevalensi NAFLD populasi dewasa sekitar 20-40%. Pada beberapa
negara Asia juga dilaporkan prevalensi NAFDL sekitar 5-40%, tergantung negara
yang diteliti (Sari, 2012). Di Indonesia, prevalensi NAFDL diperkirakan sekitar
30% berdasarkan studi di lingkungan urban (Sumantri, 2013).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
Indonesia memiliki keanekaragaman hayati yang berpotensi sebagai
tanaman obat. Di masyarakat penggunaan bahan alam untuk pengobatan
dipandang lebih ekonomis dan lebih aman dibandingkan pengobatan dengan
menggunakan bahan kimia. Salah satu tanaman yang berpotensi sebagai tanaman
obat adalah ketul (Bidens pilosa Linn.). Tanaman ini merupakan tanaman terna
(berbatang lunak) yang berasal dari Amerika. Tanaman ini biasanya tumbuh di
dekat air, kebun atau ladang, halaman rumah, dan pinggiran jalan (Sugiarto dan
Putera, 2008). Penelitian yang dilakukan Kviencinski, et al. (2011) melaporkan
bahwa penggunaan fraksi etil asetat herba Bidens pilosa L. selama sepuluh hari
memiliki efek hepatoprotektif. Menurut Ariyanti (2007) herba Bidens pilosa L.
mengandung senyawa flavonoid yang bersifat sebagai antioksidan. Senyawa
antioksidan diduga memiliki efek hepatoprotektif. Berdasarkan pemaparan di atas
peneliti tertarik untuk melakukan penelitian efek hepatoprotektif dengan
menggunakan dekok herba Bidens pilosa L. Pemilihan sediaan dekok, karena
dekok mendekati cara pemakaian di masyarakat dengan cara direbus dengan air.
Selain itu, karena senyawa flavonoid bersifat polar sehingga dapat tersari
menggunakan pelarut air (Andersen and Markham, 2006).
Pada penelitian ini pemberian jangka panjang praperlakuan dilakukan
dengan jangka waktu enam hari berturut-turut mengacu kepada model penelitan
yang dilakukan oleh Rahmamurti (2013) mengenai “Efek Hepatoprotektif Ekstrak
Etanol-Air Daun Macaranga tanarius L. pada Tikus Terinduksi Karbon
Tetraklorida : Kajian terhadap Praperlakuan Jangka Panjang. Karbon tetraklorida
merupakan salah satu senyawa model yang dapat digunakan untuk menimbulkan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
kerusakan hati. Hepatotoksisitas karbon tetraklorida disebabkan oleh metabolit
triklorometil (•CCl3) yang merupakan radikal bebas yang dapat mengikat
lipoprotein dan menyebabkan peroksidasi lipid (Dongare, Dhande and Kadam,
2013). Adanya pengikatan lipoprotein dan peroksidasi lipid ini dapat
menyebabkan kerusakan hati berupa perlemakan hati (steatosis). Berdasarkan
jenis kerusakan hati yang terjadi, karbon tetraklorida digunakan sebagai senyawa
model pada penelitian ini.
Ketoksikan karbon tetraklorida dapat menyebabkan perubahan sifat fisik
dan kimia dari membran sel yang akan mempengaruhi permeabilitas membran sel
sehingga dapat menyebabkan kebocoran enzim (Dongare, et al., 2013). Kerusakan
hati ditandai dengan peningkatan kadar enzim ALT dan AST (Fleiser, 2009).
Berdasarkan pemaparan di atas, perlu dilakukan penelitian mengenai pengaruh
efek hepatoprotektif dekok herba Bidens pilosa L. pada tikus yang terinduksi
karbon tetraklorida dengan melihat perubahan aktivitas ALT dan AST.
1. Perumusan masalah
a. Apakah pemberian jangka panjang dekok herba Bidens pilosa L.
mempunyai efek hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas serum ALT
dan AST pada tikus betina galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida?
b. Berapakah dosis efektif pemberian jangka panjang dekok herba Bidens
pilosa L. sebagai hepatoprotektor pada tikus betina galur Wistar terinduksi
karbon tetraklorida?
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
2. Keaslian penelitian
Penelitian menggunakan herba Bidens pilosa L. pernah dilakukan oleh
Ariyanti (2000) yang melaporkan mengenai aktivitas antioksidan fraksi air ekstrak
metanolik dengan mengunakan metode DPPH. Dari penelitan tersebut, dilaporkan
ekstrak metanol memiliki IC50 sebesar 44,77 µL/mL dan fraksi air sebesar 97,40
µg/mL. Penelitian lain melaporkan bahwa herba Bidens pilosa L. mengandung
metabolit utama polyacetylene dan flavonoid yang berkhasiat dalam mengobati
penyakit, seperti anti-hiperglikemik, anti-hipertensi, hepatoprotektif, anti-
inflamasi, dan lain-lain (Silva, et al., 2011). Penelitian Kviencinski, et al. (2011)
mengenai aktivitas antioksidan dan efek hepatoprotektif dari fraksi etil asetat
herba Bidens pilosa L. di Brazil yang menunjukkan bahwa herba Bidens pilosa L.
memiliki efek hepatoprotektif.
Sejauh penelusuran pustaka yang dilakukan peneliti, penelitian mengenai
“Efek Hepatoprotektif Pemberian Jangka Panjang Dekok Herba Bidens pilosa L.
terhadap Aktivitas Serum ALT-AST pada Tikus Betina Terinduksi Karbon
Tetraklorida” belum pernah dilakukan.
2. Manfaat penelitian
a. Manfaat teoritis
Hasil penelitian ini diharapkan mampu memberikan informasi terkait
ilmu pengetahuan khususnya bidang kefarmasian mengenai pengaruh
pemberian jangka panjang dekok herba Bidens pilosa L. sebagai
hepatoprotektor.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
b. Manfaat praktis
Hasil penelitian ini diharapkan mampu memberikan informasi terkait
dosis efektif pemberian dekok herba Bidens pilosa L. bagi masyarakat
khususnya sebagai hepatoprotektor jangka panjang.
B. Tujuan Penelitian
1. Tujuan umum
Untuk mengetahui efek hepatoprotektif pemberian dekok herba Bidens
pilosa L. pada tikus betina galur Wistar.
2. Tujuan khusus
a. Mengetahui efek hepatoprotektif pemberian jangka panjang dekok herba
Bidens pilosa L. terhadap penurunan aktivitas serum ALT dan AST pada
tikus betina galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
b. Mengetahui dosis efektif pemberian jangka panjang dekok herba Bidens
pilosa L. terhadap aktivitas serum ALT dan AST yang dapat memberikan
efek hepatoprotektif optimal pada tikus betina galur Wistar terinduksi
karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
BAB II
PENELAAHAN PUSTAKA
A. Hati
1. Anatomi fisiologi hati
Hati merupakan salah satu organ terbesar di dalam tubuh dengan berat
sekitar 1500 gram. Hati terletak dalam rongga perut sebelah kanan, berwarna
merah kecokelatan dengan konsistensi lunak (Wibowo, 2008). Bagian atas hati
berbentuk cembung, terletak di bawah kubah kanan diafragma. Bagian bawah hati
berbentuk cekung, di bawahnya terdapat ginjal kanan, lambung, pankreas, dan
usus (Baradero, Daydrit, dan Siswadi, 2008).
Gambar 1. Anatomi hati (Watson, 2014).
Hati dibagi menjadi dua lobus utama, kiri dan kanan (gambar 1).
Permukaan atas berbentung cembung dan terletak di bawah diafragma sedangkan
permukaan bawah tidak rata dan memperlihatkan lekukan fisura transversus.
Permukaannya dilintasi berbagai pembuluh darah yang keluar masuk hati. Fisura
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
longitudinal memisahkan lobus kanan dan kiri permukaan bawah, sedangkan
ligamen falsiformis memisahkan lobus kanan dan kiri permukaan atas. Hati dibagi
mejadi empat lobus (kanan, kiri, kaudata, dan kuadrata) yang terdiri atas lobulus.
Lobulus ini berbentuk polihedral (segi banyak) yang terdiri atas sel hati berbentuk
kubus, dan cabang-cabang pembuluh darah yang diikat bersama oleh jaringan hati
(Pearce, 2009).
Di dalam lobulus terdapat sel-sel hati (hepatosit) yang tersusun seperti
lapisan-lapisan plat. Pada setiap segi dari lobules terdapat cabang-cabang vena
porta, arteri hepatika, dan kanalikuli empedu. Di antara deretan sel-sel hati
terdapat sinusoid yang membawa darah dari cabang-cabang vena porta dan arteri
hepatika ke vena hepatika. Pada dinding sinusoid terdapat sel-sel fagosit yang
disebut sel Kupffer. Sel Kupffer ini memiliki fungsi utama menelan eristrosit,
leukosit yang mati, mikroorganisme, dan benda asing yang masuk dalam hati
(Baradero, dkk., 2008).
Hati mempunyai peranan penting dan memiliki berbagai macam fungsi di
dalam tubuh. Fungsi-fungsi utama hati, yaitu membantu menjaga keseimbangan
glukosa darah (metabolisme karbohidrat), membantu pembentukan protein
terutama albumin, membantu metabolisme protein (tempat menyusun asam amino
menjadi protein, memproduksi sebagian besar protein plasma, memproduksi
faktor pembekuan darah, mengubah amonia menjadi urea), penyimpanan
vitamin/zat besi, memproduksi dan mensekresikan empedu, membantu
metabolisme lemak (memproduksi dan merombak kolesterol menjadi garam
empedu), serta mendetoksifikasi zat-zat beracun dalam tubuh (Sargent, 2009).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
2. Jenis kerusakan hati
a. Steatosis
Steatosis merupakan akumulasi lemak pada hepatosit yang menunjukkan
terjadinya kerusakan hati pada banyak kasus penyakit hati. Steatosis dikategorikan
menjadi dua, yaitu makrovesikular dan microvesikular. Steatosis makrovesikular
terjadi ketika satu atau beberapa droplet lemak hampir mengisi hepatosit
sedangkan mikrovesikular terjadi ketika ditemukan sejumlah droplet kecil yang
membuat hepatosit tampak berbusa. Steatosis pada orang dewasa umumnya
terjadi karena penyakit hati alkoholik (Kelly, 2008). Selain itu, steatosis juga
dapat disebabkan oleh hepatotoksin karbon tetraklorida. Hepatotoksin karbon
tetraklorida menyebabkan steatosis makrovesikular (Rubin, Strayer and Rubin,
2011).
b. Nekrosis
Nekrosis (kematian sel) dapat terjadi karena cedera sel langsung,
gangguan fungsi intraseluler, atau cedera langsung oleh sistem imun yang
dimediasi oleh kerusakan membran. Nekrosis hati dapat disebabkan oleh alkohol,
CCl4, brombenzena, dan berilium. Alkohol menyebabkan nekrosis periportal
(zona 1) karena alkohol dehidrogenase yang diangkut oleh darah kontak pada
daerah ini. Nekrosis mid zona (zona 2), disebabkan oleh berilium. Nekrosis zona 3
(nekrosis sentrilobular) disebabkan oleh aktivitas metabolisme senyawa toksin
seperti CCl4/brombenzena pada daerah tersebut (Duffus and Worth, 1996).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
c. Kolestasis
Kolestasis adalah penurunan atau penyumbatan aliran empedu yang
dapat menyebabkan kulit dan putih mata tampak berwarna kuning, kulit, urine
gelap, serta tinja dapat berwarna terang dan berbau busuk. Pada orang yang
mengalami kolestasis, aliran empedu (cairan pencernaan yang dihasilkan oleh
hati) terganggu di beberapa titik antara sel-sel hati dan usus dua belas jari (segmen
pertama dari usus kecil). Ketika aliran empedu terhenti, pigmen bilirubin (produk
limbah yang terbentuk ketika sel-sel darah merah tua atau rusak dipecah) lolos ke
dalam aliran darah dan menumpuk. Hal ini dapat terjadi karena gangguan hati,
saluran empedu, dan pankreas (Porter, 2009)
d. Sirosis
Sirosis adalah bentuk kerusakan akhir dari penyakit hati yang disebabkan
oleh berbagai penyebab. Penyebab yang paling umum adalah hepatotoksin seperti
alkohol, infeksi hepatitis virus, dan gangguan empedu primary sclerosing
cholangitis (PSC). Kondisi ini ditandai dengan disfungsi hepatosit dengan
pembentukan jaringan fibrosa, diikuti oleh nodul regeneratif (Mahkad, Hoey,
Lakkaraju and Bhuskute, 2012).
3. Hepatotoksin
Senyawa atau obat-obat yang dapat menyebabkan kerusakan hati
diklasifikasikan menjadi 2, yaitu:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
a. Hepatotoksin intrinsik
Senyawa yang memiliki efek hepatotoksik hampir pada seluruh populasi
yang terpejankan senyawa tersebut. Senyawa ini bergantung pada dosis
pemberian. Contohnya: parasetamol, karbon tetraklorida, dan alkohol.
b. Hepatotoksin idiosinkratik
Senyawa yang memiliki efek hepatotoksik pada sebagian kecil populasi
yang terpejankan senyawa tersebut. Beberapa bergantung pada dosis pemberian,
dan frekuensi kejadiannya sangat jarang. Contoh-contoh zat termasuk isoniazid,
sulfonamida, valproat, dan fenitoin
(Friedman and Keeffe, 2012).
4. ALT-AST
Aminotransferase adalah enzim-enzim yang mengkatalisis konversi α-
ketoacid menjadi asam amino melalui transfer dari satu residu amino. Aspartat
aminotransferase (AST) mengkatalisis transfer residu 2-amino dari aspartat
menjadi 2-oksoglutarat, menghasilkan glutamat dan oksaloasetat. Alanin
aminotransferase (ALT) mengkatalisis transfer residu 2-amino dari alanin 2-
oksoglutarat, membentuk glutamat dan piruvat (Dancygier, 2010). Kisaran normal
AST adalah 0-40 IU/L, sedangkan ALT adalah 0-45 IU/L. Pemeriksaan kadar
ALT dan AST dapat digunakan sebagai indikator kerusakan atau kematian sel hati
yang sedang terjadi (Dickerson, 2006).
Serum normal aminotransferase mencerminkan pergantian sel fisiologis.
Pada penyakit hati peningkatan serum bukan terjadi karena peningkatan sintesis
enzim, tetapi karena manifestasi peningkatan pelepasan enzim yang disebabkan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
oleh kematian sel hati atau kerusakan hati dengan peningkatan permeabilitas
membran hepatoseluler. Oleh karena itu, ALT dan AST dapat digunakan sebagai
indikator yang sensitif dari kerusakan hepatoselular. ALT dan AST digunakan
sebagai parameter diagnostik dasar untuk menilai dan memantau penyakit hati.
ALT adalah indikator yang relatif spesifik penyakit hati, yang hadir dalam cedera
sel bahkan kecil (Dancygier, 2010).
ALT sebagian besar ditemukan di hati, aktivitas ALT di hati lebih
spesifik, yaitu sepuluh kali lipat aktivitas di jantung atau otot rangka. Pada tingkat
selular, ALT di simpan dalam sitosol hepatosit sedangkan AST di dalam
mitokondria (70%) dan sitoplasma (30%) (Dancygier, 2010). Pada kasus
ekstrahepatik (infark miokard, gangguan otot, dan trauma) yang menyebabkan
peningkatan transaminase harus dikesampingkan, terutama AST. Rasio AST :
ALT > 1 biasanya menunjukkan kerusakan hati yang diinduksi alkohol dan rasio
AST : ALT < 1 menunjukkan kerusakan hati yang disebabkan virus. Tingkat
transaminase tertinggi ditemukan pada hepatitis akut (AST dan ALT> 10x upper
limit of normal (ULN). Pada jaundice obstruktif, tingkat transaminase selalu naik,
tetapi umumnya tetap pada tingkat <10 x ULN. Tingkat transaminase yang cukup
tinggi dapat menunjukkan berbagai penyakit hati yang disebabkan oleh alkohol,
obat yang menginduksi kerusakan hati, hepatitis kronis yang disebabkan virus,
sirosis hati, dan kongesti hati (Siegenthaler, 2007).
5. Evaluasi kerusakan hati
Evaluasi kerusakan hati dapat dilakukan dengan beberapa cara di
laboratorium, yaitu:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
a. Uji aktivitas enzim serum
Evaluasi dilakukan dengan mengukur aktivitas enzim pada serum
aminotransferase, alkalin fosfatase, laktat dehidrogenase. Pengujian aktivitas
enzim menggambarkan fungsi hati. Serum aminotransferase merupakan indikator
yang sensitif dari cedera pada sel-sel hati dan berguna dalam mendeteksi penyakit
hati akut seperti hepatitis. Alanin aminotransferase (ALT), aspartat
aminotransferase (AST), dan gamma - glutamil transferase (GGT) adalah tes yang
paling sering digunakan dari kerusakan hati. Aktivitas ALT akan meningkat pada
gangguan hati dan dapat digunakan untuk memantau hepatitis, sirosis, dan efek
dari pengobatan yang mungkin beracun untuk hati. Serum AST ada dalam
jaringan yang memiliki aktivitas metabolik yang tinggi. Oleh karena itu, AST
akan meningkat saat terjadi kerusakan atau kematian jaringan organ seperti
jantung, hati, otot rangka, dan ginjal. Meskipun tidak spesifik untuk penyakit hati,
tingkat AST dapat meningkat pada sirosis, hepatitis, dan kanker hati. Peningkatan
kadar GGT berhubungan dengan kolestasis, tetapi juga dapat disebabkan oleh
penyakit hati alkoholik (Smeltzer, Bare, Hinkle and Cheever, 2009).
b. Uji ekskretori hepatik
Bilirubin adalah produk ekskretori hati yang dibentuk dari katabolisme
heme. Bilirubin diglukuronide dibentuk dengan bantuan konjugasi oleh hati yang
kemudian dieksresikan melalui kantong empedu (Vasudevan, Srekumari, and
Vaidyanathan, 2013). Pengukuran bilirubin dalam darah dan urin biasanya
digunakan untuk menilai transportasi anion hati, meskipun banyak anion lain,
termasuk garam empedu yang juga diangkut oleh hati (Beckett, et al., 2010).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
c. Uji kadar protein serum
Hati mensintesis hampir semua protein plasma kecuali imunoglobulin.
Serum albumin secara kuantitatif merupakan protein penting yang disintesis oleh
hati, dan mencerminkan sejauh mana sel-sel hati masih berfungsi. Albumin
memiliki waktu paruh sekitar 20 hari, sehingga dalam semua penyakit kronis hati,
tingkat albumin akan menurun. Tingkat albumin normal dalam darah adalah 3,5
sampai 5 g/dL (Vasudevan, et al., 2013).
d. Biopsi liver
Biopsi hati merupakan pengambilan sejumlah kecil jaringan hati yang
akan digunakan untuk pemeriksaan sel-sel hati di laboratorium. Biasanya yang
paling umum adalah untuk mengevaluasi gangguan menyebar dari parenkim dan
mendiagnosa ruang yang menempati lesi. Biopsi hati sangat berguna ketika
temuan klinis dan uji laboratorium tidak diagnostik (Smeltzer, et al., 2009).
B. Karbon Tetraklorida
Karbon tetraklorida (CCl4) merupakan pelarut yang digunakan secara luas
pada alat pemadam kebakaran, produk pembersih, dan produksi refrigeran
fluorocarbon. Pada tahun 1960 dan 1970-an penggunaan karbon tetraklorida
mengalami penurunan karena penemuan penyakit hati pada pekerja yang terpapar
(misalnya petugas toko dry cleaning), namun karbon tetraklorida masih digunakan
di beberapa industri. CCl4 juga digunakan di laboratorium toksikologi karena
kemampuannya untuk menginduksi hepatotoksisitas intrinsik dan peroksidasi lipid
pada spesies yang beragam. Karbon tetraklorida juga merupakan polutan
lingkungan yang signifikan melalui kehadirannya di tanah, air minum, dan udara
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
14
sekitar. Sebagai zat yang sangat volatile, paparan sering terjadi melalui rute
inhalasi, walaupun kasus keracunan domestik kecelakaan juga terjadi dan
biasanya melibatkan karbon tetraklorida konsumsi melalui saluran gastrointestinal
(Burcham, 2014).
Karbon tetraklorida dapat menyebabkan nekrosi centrilobular hati dan
perlemakan hati. Senyawa ini memiliki efek utama toksik pada hati, terlepas dari
cara pemberian. Administrasi atau paparan kronis menyebabkan sirosis hati,
tumor hati dan juga kerusakan ginjal. Alasan untuk hati menjadi target utama
adalah bahwa toksisitas karbon tetraklorida tergantung pada aktivasi metabolik
oleh sitokrom P-450. Oleh karena itu, hati menjadi target karena mengandung
konsentrasi terbesar sitokrom P-450, terutama di wilayah centrilobular yang mana
kerusakan paling besar (Timbrell, 2000).
Gambar 2. Mekanisme biotransformasi karbon tetraklorida (Timbrell, 2000).
Bioaktivitas dari karbon tetraklorida tergantung dari dehalogenasi reduksi
sitokrom P-450. CYP2E1 adalah enzim utama yang bertanggungjawab untuk
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
metabolisme karbon tetraklorida menjadi triklorometil (•CCl3) yang bersifat
radikal bebas (Bateman, Jefferson, Thomas, Thompson, and Vale, 2014). Radikal
bebask triklorometil (gambar 2). dapat berikatan dengan komponen sel hati yang
berefek pada penghambatan sekresi lipoprotein. Hal ini menyebabkan menumpuk
lemak di hati (steatosis) (Manahan, 2002). Radikal bebas yang berinteraksi
dengan lipid akan menyebabkan peroksidasi lipid yang dapat menganggu fungsi
sel dan integritas membran serta kematian sel. Triklorometil lalu akan bereaksi
dengan molekul oksigen membentuk radikal triklorometilperoksi (•OOCCL3)
yang lebih reaktif. Selain itu, radikal triklorometilperoksi dapat bereaksi lebih
lanjut untuk menghasilkan fosgen, yang dapat berinteraksi dengan jaringan
makromolekul menghasilkan asam klorida dan karbondioksida (Bateman, et al.,
2014).
Gambar 3. Mekanisme peroksidasi lipid oleh radikal CCl3 (Manahan, 2002).
Peroksidasi lipid merupakan proses oksidasi lemak tak jenuh melalui
reaksi radikal bebas membentuk lemak terperoksidasi (LOOH). Mekanisme
peroksidasi lipid terdiri dari tiga tahap, yaitu: inisiasi, propagasi, dan terminasi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
(gambar 3). Lemak terperoksidasi merupakan molekul tidak stabil yang dapat
terurai menghasilkan radikal bebas tambahan. Proses ini berakhir ketika radikal
bebas bereaksi dengan radikal bebas yang lain membentuk molekul yang stabil
(Manahan, 2002).
Tabel I. Peningkatan relatif dari beberapa serum enzim pada cedera hati
Senyawa
toksik
Lesi Derajat peningkatan kadar enzim serum
Nekrosis Steatosis AST2 ALT2 OCT.SDH
CCl4 + + 4+ 3+ 4+
Tioacetamida + - 4+ 3+ 4+
Tetrasiklin - + 2 + 1+
Etionin - + + - +
Fosfor ± + 1-2+ 1-2+ 1-2+
Karbon tetraklorida dapat menyebabkan kerusakan hati berupa steatosis
(tabel I). Kerusakan hati yang disebabkan oleh karbon tetraklorida dapat dilihat
dari kenaikan aktivitas serum ALT dan AST. Pada saat terjadi steatosis terjadi
peningkatan aktivitas serum ALT sebesar 3 kali normal dan aktivitas serum AST
sebesar 4 kali normal (Zimmerman, 1999).
C. Bidens pilosa Linn.
1. Taksonomi
Kingdom : Plantae
Sub Kingdom : Tracheobionta
Superdivisi : Spermatophyta
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Sub Kelas : Asteridae
Bangsa : Asterales
Keluarga : Asteraceae
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
Marga : Bidens
Varietas : Bidens pilosa L.
(Bartolome, Villasenor and Yang, 2013).
2. Nama daerah
Ajeran, hareuga (Sunda), dan jaringan, ketul (Jawa) (Sugiarto dan
Putera, 2008).
3. Morfologi
Tanaman Bidens pilosa Linn. merupakan tanaman terna (berbatang
lunak) yang berasal dari amerika. Tanaman ini tumbuh di dekat air, kebun atau
ladang, halaman rumah, dan pinggiran jalan di ketinggian 250-2.500 meter dpl.
Tinggi tanaman ini dapat mencapai 150 cm dengan batang berbentuk segi empat
berwarna hijau. Daun terbagi tiga, berbentuk bulat telur dengan tepi bergerigi.
Bunga bertangkai panjang, mahkota bunga berwarna putih dengan putik berwarna
kuning (gambar 4) (Sugiarto dan Putera, 2008).
Gambar 4. Herba Bidens pilosa L. (Silva, et al., 2011).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
4. Kandungan kimia dan kegunaan
Bidens pilosa L. memiliki berbagai macam kandungan kimia, seperti
polyacetylene, glikosida polyacetylene, auron, glikosida auron, turunan asam p-
kumarat, turunan caffeoylquinic acid, flavonoid, glikosida flavonoid, seskuiterpen,
pheophytin, dan terpen (Bairwa, Kumar, Sharma, and Roy, 2010). Berdasarkan
senyawa-senyawa yang dilaporkan, polyacetylene dan flavonoid merupakan
golongan metabolit khas yang mendominasi pada genus Bidens. Tanaman Bidens
pilosa L. telah dikenal luas sebagai obat tradisional di berbagai negara. Di
Martinique, Cina dan Brazil, Bidens pilosa L. digunakan sebagai obat tradisional
untuk mengobati berbagai penyakit, seperti diare, diabetes, peradangan, enteritis,
disentri basiler, dan faringitis (Silva, et al., 2011).
Beberapa ekstrak dan fraksi yang diperoleh dari Bidens pilosa L.
memiliki aktivitas tertentu. Oleh karena itu, beberapa konstituen terisolasi dari
tanaman telah dipelajari mengacu pada efek anti-inflamasi, imunosupresif,
hepatoprotektif, anti-bakteri, anti-jamur, antioksidan, anti-malaria, dan anti-kanker
(Silva, et al., 2011). Senyawa bioaktif Bidens pilosa L. yang berperan untuk
melindungi hati adalah flavonoid. Senyawa flavonoid pada Bidens pilosa L.
dilaporkan memiliki aktivitas antioksidan yang berkorelasi terhadap efek
hepatotoksik. Dari uji antioksidan secara in vitro menggunakan uji DPPH, ekstrak
kasar etil asetat, butanol, dan fraksi air Bidens pilosa L. memiliki aktivitas
antioksidan. Senyawa Bidens pilosa L. yang memiliki aktivitas antioksidan, yaitu
flavonoid (quercetin 3-o-rabinobioside, quercetin 3-o-rutinoside, jacein,
centaurein) dan fenolat (chlorogenic acid; 3,4-di-o-caffeoylquinic acid; 3,5-di-o-
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
caffeoylquinic acid; 4,5-di-o-caffeoylquinic acid) (gambar5) (Bartolome, et al.,
2013).
quercetin 3-o rutinoside quercetin 3-o-rabinobioside
chlorogenic acid 3,4-di-o-caffeoylquinic acid
3,5-di-o-caffeoylquinic acid
4,5-di-o-caffeoylquinic acid
Jacein Centaurein
Gambar 5. Struktur flavonoid herba Bidens pilosa L. (Bairwa, et al., 2010;
Bartolome, et al., 2013).
D. Dekok
Dekok adalah sediaan cair yang dibuat dengan mengekstraksi sediaan
herbal dengan air pada suhu 90°C selama 30 menit. Dekok dapat dibuat dengan
cara mencampur simplisia dengan derajat halus yang sesuai dalam panci dengan
air secukupnya. Pemanasan dilakukan di atas penangas air selama 30 menit
terhitung sejak mencapai suhu 90°C yang disertai dengan pengadukan.
Penyerkaian dilakukan menggunakan kain flanel yang disertai dengan
menambahkan air panas secukupnya melalui ampas hingga diperoleh volume
dekok yang dikehendaki (Badan Pengawas Obat dan Makanan, 2010).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
E. Landasan Teori
Hati merupakan organ metabolisme yang memiliki peranan penting di
dalam tubuh manusia. Salah satu peranan penting hati di dalam tubuh adalah
mendetoksifikasi senyawa-senyawa toksik yang masuk ke dalam tubuh (Seifter,
Ratner and Sloane, 2005). Jika terjadi kerusakan pada organ hati maka fungsi di
dalam tubuh akan terganggu. Kerusakan pada sel-sel hati dapat disebabkan oleh
zat kimia toksik seperti alkohol, virus hepatitis, dan obat-obatan tertentu
(Kaplowitz and Deleve, 2013).
Herba Bidens pilosa L. memiliki berbagai macam kandungan kimia,
bahkan tanaman ini telah dikenal luas dibeberapa negara sebagai obat tradisional.
Tanaman ini mengandung senyawa flavonoid yang diduga berperan dalam efek
hepatoprotektif. Pada penelitian ini digunakan sediaan dekok karena mudah
diaplikasikan di masyarakat dan senyawa flavonoid herba Bidens pilosa L. yang
bersifat polar dapat tersari menggunakan air.
Karbon tetraklorida digunakan sebagai senyawa model untuk mengetahui
efek hepatoprotektif dekok herba Bidens pilosa L. Senyawa ini dipilih
berdasarkan efek hepatotoksiknya yang dapat menyebabkan steatosis. Pada saat
terjadi steatosis hati, aktivitas serum ALT dan AST akan meningkat (Kelly,
2008). Pemberian dekok herba Bidens pilosa L. yang mengandung senyawa
flavonoid diharapkan dapat memiliki efek hepatoprotektif dengan menurunkan
aktivitas ALT dan AST pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
F. Hipotesis
Dekok herba Bidens pilosa L. memiliki efek hepatoprotektif dengan
menurunkan aktivitas ALT dan AST pada tikus betina galur Wistar terinduksi
karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan
rancangan acak lengkap pola searah.
B. Variabel dan Definisi Operasional
1. Variabel utama
a. Variabel bebas
Variabel bebas penelitian ini adalah variasi dosis dalam pemberian
jangka panjang dekok herba Bidens pilosa L.
b. Variabel tergantung
Variabel tergantung penelitian ini adalah efek hepatoprotektif.
2. Variabel pengacau
a. Variabel pengacau terkendali
Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini adalah kondisi hewan
uji, yaitu tikus betina galur Wistar dengan berat badan 120-200 g; umur 2-3
bulan; cara pemberian hepatotoksin secara per oral; cara pemberian herba
Bidens pilosa L. secara per oral; frekuensi pemberian dekok herba Bidens
pilosa L. satu kali sehari selama enam hari berturut-turut dengan waktu
pemberian yang sama dan herba Bidens pilosa L. yang diperoleh dari Dusun
Jenengan, Desa Maguwoharjo, Kecamatan Depok, Kabupaten Sleman,
Daerah Istimewa Yogyakarta.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
b. Variabel pengacau tak terkendali
Variabel pengacau tak terkendali dalam penelitian ini adalah kondisi
patologis tikus betina galur Wistar yang digunakan sebagai hewan uji.
3. Definisi operasional
a. Herba Bidens pilosa L.
Herba Bidens pilosa L. adalah semua bagian tumbuhan di atas tanah
(batang, daun, bunga, dan buah herba Bidens pilosa L.).
b. Dekok herba Bidens pilosa L.
Dekok herba Bidens pilosa L. dengan konsentrasi 16% didapatkan
dengan cara merebus 16,0 g serbuk kering herba Bidens pilosa L. dalam
100,0 ml aquadest pada suhu 90°C selama 30 menit.
c. Efek hepatoprotektif
Efek hepatoprotekif adalah kemampuan dekok herba Bidens pilosa L.
pada dosis tertentu untuk menurunkan aktivitas serum ALT dan AST pada
tikus betina galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.
d. Jangka panjang
Jangka panjang adalah pemberian dekok herba Bidens pilosa L. satu kali
sehari selama enam hari berturut-turut.
C. Bahan Penelitian
1. Bahan utama
a. Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus betina galur
Wistar yang berumur 2-3 bulan dengan berat badan 120-200 g yang
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
diperoleh dari Laboratorium Hayati Imono, Fakultas Farmasi, Universitas
Sanata Dharma, Yogyakarta.
b. Bahan uji yang digunakan adalah herba Bidens pilosa L. yang diperoleh
dari Dusun Jenengan, Desa Maguwoharjo, Kecamatan Depok, Kabupaten
Sleman, Daerah Istimewa Yogyakarta.
2. Bahan kimia
a. Bahan hepatotoksin yang digunakan adalah karbon tetraklorida (Merck®).
b. Pelarut hepatotoksin karbon tetraklorida dan kontrol negatif yang
digunakan adalah olive oil yang diperoleh dari PT. Brataco Chemika,
Yogyakarta.
c. Pelarut untuk dekok digunakan aquadest yang diperoleh dari Laboratorium
Farmakognosi-Fitokimia, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma,
Yogyakarta.
d. Blanko pengukuran aktivitas serum ALT dan AST menggunakan aqua
bidestilata yang diperoleh dari Laboratorium Kimia Analisis dan
Instrumental, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
e. Reagen ALT yang digunakan adalah reagen ALT DiaSys. Komposisi dan
konsentrasi dari reagen ALT adalah sebagai berikut:
Tabel II. Komposisi dan konsentrasi reagen ALT
Komposisi pH Konsentrasi
R1: TRIS 7,15 140 mmol/L
L-Alanine 700 mmol/L
LDH (Lactate dehydrogenase) ≥ 2300 U/L
R2 : 2-Oxoglutarate 85 mmol/L
NADH 1 mmol/L
Pyridoxal-5 phosphate FS :
Good’s buffer
Pyridoxal-5-phosphate
9,6 100 mmol/L
13 mmol/L
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
f. Reagen AST yang digunakan adalah reagen AST DiaSys. Komposisi dan
konsentrasi dari reagen AST adalah sebagai berikut:
Tabel III. Komposisi dan konsentrasi reagen AST
Komposisi pH Konsentrasi
R1: TRIS 7,65 110 mmol/L
L-Aspartate 320 mmol/L
MDH (Malate dehydrogenase) ≥ 800 U/L
LDH (Lactate dehydrogenase) ≥ 1200 U/L
R2 : 2-Oxoglutarate 65 mmol/L
NADH 1 mmol/L
Pyridoxal-5 phosphate FS :
Good’s buffer
Pyridoxal-5-phosphate
9,6 100 mmol/L
13 mmol/L
D. Alat Penelitian
1. Alat pembuatan serbuk herba Bidens pilosa L.
Alat-alat yang digunakan antara lain oven, mesin penyerbuk, dan ayakan.
2. Alat pembuatan dekok herba Bidens pilosa L.
Panci lapis alumunium, thermometer, stopwatch, beaker glass, gelas
ukur, labu takar, corong, batang pengaduk, cawan porselen, penangas air,
timbangan analitik Mettler Toledo®, kain flannel.
3. Alat uji penetapan kadar air
Moisture balance, beaker glass, sendok.
4. Alat uji hepatoprotektif
Seperangkat alat gelas berupa beaker glass, gelas ukur, tabung reaksi,
pipet tetes, labu takar, batang pengaduk Pyrex Iwaki Glass®, timbangan
analitik Mettler Toledo®, sentrifuge Centurion Scientific®, vortex Genie
Wilten®, spuit injeksi per oral, spuit injeksi i.p., pipa kapiler, micropipette,
blue tip, tabung Eppendorf, Microlab 200 Merck®, dan stopwatch.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
E. Tata Cara Penelitian
1. Determinasi tanaman herba Bidens pilosa L.
Determinasi dilakukan dengan mencocokkan morfologi tanaman herba
Bidens pilosa L. dengan menggunakan buku acuan (Backer, 1963).
2. Pengumpulan bahan uji
Bahan uji yang digunakan adalah herba Bidens pilosa L. yang meliputi
semua bagian tumbuhan di atas tanah (batang, daun, bunga, dan buah), dipilih
yang masih bagus dan terhindar dari penyakit pada bulan Juli 2014.
3. Pembuatan serbuk herba Bidens pilosa L.
Herba Bidens pilosa L. dicuci bersih, dipotong-potong, dan dikeringkan.
Setelah itu oven pada suhu 50°C selama 48 jam. Setelah benar-benar kering,
herba diserbuk dan diayak menggunakan ayakan nomor mesh 40.
4. Penetapan kadar air serbuk herba Bidens pilosa L.
Serbuk herba Bidens pilosa L. dimasukkan ke dalam alat moisture
balance sebanyak 5 g, lalu diratakan. Bobot serbuk tersebut ditetapkan
sebagai bobot sebelum pemanasan, setelah itu dipanaskan pada suhu 1050C.
Serbuk yang telah dipanaskan ditimbang kembali lalu dihitung sebagai bobot
setelah pemanasan. Kadar air serbuk diperoleh menggunakan rumus:
5. Pembuatan dekok herba Bidens pilosa L.
Dekok herba Bidens pilosa L. dibuat dengan konsentrasi 16%. Sejumlah
16,0 g serbuk herba Bidens pilosa L. dibasahkan dengan 32 mL aquadest, lalu
ditambahkan dengan 100,0 mL aquadest. Campuran ini kemudian dipanaskan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
di atas heater pada suhu 90°C selama 30 menit, dihitung ketika suhu
campuran mencapai 90°C. Dekok lalu disaring menggunakan kain flanel,
tambahkan aquadest panas melalui ampas rebusan hingga volume 100,0 mL
pada labu takar.
6. Pembuatan hepatotoksin karbon tetraklorida 50%
Hepatotoksin karbon tetraklorida 50% dibuat dengan cara mencampur
larutan karbon tetraklorida dan olive oil dengan perbandingan volume 1:1.
7. Uji pendahuluan
a. Penetapan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida
Berdasarkan penelitian Al-Olayan, et al., (2014) ditetapkan dosis
hepatotoksin karbon tetraklorida sebesar 2 mL/kgBB yang diberikan secara
intraperitoneal. Pemilihan dosis hepatotoksik ini karena pada dosis tersebut
telah menyebabkan kerusakan sel-sel hati pada tikus galur Wistar yang
ditunjukkan dengan peningkatan aktivitas serum ALT dan AST, namun
belum menyebabkan kematian. Hal ini juga didukung oleh penelitian
Wijayanti (2013) yang melaporkan induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB
mampu meningkatkan ALT dan AST tiga kali dari aktivitas serum awal.
b. Penetapan dosis dekok herba Bidens pilosa L.
Penetapan dosis dekok herba Bidens pilosa L. dihitung berdasarkan berat
badan tertinggi hewan uji tikus, ½ volume maksimal secara per oral pada
tikus, dan konsentrasi maksimal dekok herba Bidens pilosa L. yang dapat
dibuat. Penetapan dosis tertinggi dekok adalah sebagai berikut:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
D x BB = C x V
D x BB tertinggi tikus (kgBB) = C dekok (g/mL) x ½ Vmaks
D x 200 g/kgBB = 0,16 g/mL x 2,5 mL
D = 2 g/kgBB
Dosis tertinggi 2 g/kgBB digunakan sebagai dosis III. Peringkat dosis
lainnya dihitung dengan menggunakan faktor kelipatan 2, sehingga
didapatkan dosis I sebesar 0,5 g/kgBB dan dosis II sebesar 1 g/kgBB.
c. Penetapan waktu pencuplikan darah
Penetapan waktu pencuplikan darah ditentukan melalui orientasi pada
jam ke - 0, 24, dan 48, dibuat kelompok orientasi masing-masing 5 ekor tikus.
Setiap ekor tikus diambil darahnya melalui sinus orbitalis mata menggunakan
pipa kapiler pada jam ke-0, 24, dan 48 setelah pemejanan hepatotoksin
karbon tetraklorida. Kemudian diukur aktivitas serum ALT dan AST.
8. Pengelompokkan dan perlakuan hewan uji
Sejumlah 30 ekor tikus dibagi secara acak ke dalam 6 kelompok
perlakuan, masing-masing sejumlah lima ekor tikus. Pengelompokkan dan
perlakuan hewan uji, yaitu sebagai berikut :
a. Kelompok I (kontrol hepatotoksin) diberi hepatotoksin karbon tetraklorida
dengan dosis 2 mL/kgBB secara intraperitoneal. Setelah 24 jam darah
hewan uji diambil melalui sinus orbitalis mata, lalu diukur aktivitas serum
ALT dan AST.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
b. Kelompok II (kontrol negatif) diberi olive oil dengan dosis 2 mL/kgBB
secara intraperitoneal. Setelah 24 jam darah hewan uji diambil melalui
sinus orbitalis mata, lalu diukur aktivitas serum ALT dan AST.
c. Kelompok III (kontrol dekok) diberi dekok herba Bidens pilosa L. dosis
tertinggi, yaitu 2 g/kg BB selama enam hari berturut-turut secara p.o.
Setelah 24 jam darah hewan uji diambil melalui sinus orbitalis mata, lalu
diukur aktivitas serum ALT dan AST.
d. Kelompok IV (dosis I) diberi dekok herba Bidens pilosa L. dosis 0,5
g/kgBB selama enam hari berturut-turut secara p.o.
e. Kelompok V (dosis II) diberi dekok herba Bidens pilosa L. dosis 1 g/kgBB
selama enam hari berturut-turut secara p.o.
f. Kelompok VI (dosis III) diberi dekok herba Bidens pilosa L. dosis 2
g/kgBB selama enam hari berturut-turut secara p.o.
Pada hari ke tujuh kelompok IV, V, dan VI diberi hepatotoksin karbon
tetraklorida 2 mL/kgBB secara intraperitoneal dengan waktu yang sama
dengan pemberian dekok. Setelah 24 jam darah hewan uji diambil melalui
sinus orbitalis mata, lalu diukur aktivitas serum ALT dan AST.
9. Pembuatan serum
Setiap tikus diambil darahnya melalui sinus orbitalis mata menggunakan
pipa kapiler, ditampung dalam tabung Eppendorf. Darah yang telah diambil
didiamkan selama 15 menit, lalu disentrifugasi pada kecepatan 8000 rpm
selama 15 menit. Bagian supenatan diambil menggunakan micropipette, lalu
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
disentrifugasi kembali pada kecepatan 8000 rpm selama 10 menit. Bagian
supernatan diambil menggunakan micropipette.
10. Pengukuran aktivitas serum ALT dan AST
Pengukuran aktivitas serum ALT-AST dilakukan menggunakan
Microlab-200 Merck® di Laboratorium Biokimia Fisiologi Manusia, Fakultas
Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Aktivitas serum ALT-AST
diukur pada panjang gelombang 340 nm, dan dinyatakan dengan satuan U/L.
Pengukuran serum ALT dilakukan dengan cara mencampur 100 µL
serum dengan 1000 µL reagen 1, lalu divortex dan didiamkan selama
operating time 2 menit. Reagen 2 ditambahkan sebanyak 250 µL, lalu
divortex dan diukur setelah didiamkan selama operating time 1 menit.
Pengukuran serum AST dilakukan dengan cara mencampur 100 µL serum
dengan 1000 µL reagen 1, lalu divortex dan didiamkan selama operating time
2 menit. Reagen 2 ditambahkan sebanyak 250 µL, lalu divortex dan diukur
setelah didiamkan selama operating time 1 menit.
F. Tata Cara Analisis Hasil
Data aktivitas serum ALT dan AST diuji dengan Saphiro-Wilk untuk
mengetahui distribusi data dan analisis varian (uji Levene’s) untuk mengetahui
homogenitas varian antar kelompok hewan uji. Jika data terdistribusi normal dan
homogen maka analisis dilanjutkan dengan analisis variansi pola searah (One Way
ANOVA) dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui perbedaan masing-
masing kelompok. Kemudian dilanjutkan dengan uji Scheffe untuk melihat
perbedaan antar kelompok, berbeda bermakna (p<0,05) atau berbeda tidak
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
bermakna (p>0,05). Pada satu kelompok yang memiliki dua data berhubungan,
kebermaknaan dilakukan dengan uji T berpasangan dengan taraf kepercayaan
95%.
Perhitungan efek hepatoprotektif terhadap hepatotoksin karbon
tetraklorida diperoleh dengan rumus:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian dan besar
dosis efektif hepatoprotektif dari dekok herba Bidens pilosa L. pada tikus betina
galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida, yaitu dengan melihat aktivitas serum
ALT dan AST. Efek hepatoprotektif ditunjukkan dengan adanya penurunan
aktivitas serum ALT dan AST setelah pemberian herba Bidens pilosa L. pada
tikus betina galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida.
A. Penyiapan Bahan
1. Hasil determinasi tanaman
Determinasi tanaman bertujuan untuk memastikan bahwa tanaman yang
digunakan dalam penelitian adalah herba Bidens pilosa L., sehingga tidak terjadi
kesalahan dalam penyiapan bahan. Determinasi dilakukan di Laboratorium
Farmakognosi-Fitokimia, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma,
Yogyakarta. Determinasi tanaman dilakukan hingga tingkat spesies dengan cara
mencocokan kesamaan makroskopis tanaman dengan menggunakan buku acuan
Backer (1963). Bagian tanaman yang dideterminasi, yaitu batang, daun, bunga,
dan buah. Dari hasil determinasi, dipastikan bahwa batang, daun, bunga, dan buah
yang digunakan adalah benar dari tanaman Bidens pilosa L. (lampiran 4).
2. Penetapan kadar air serbuk herba Bidens pilosa L.
Penetapan kadar air bertujuan untuk mengetahui apakah serbuk herba
Bidens pilosa L. memenuhi persyaratan serbuk yang baik, yakni kadar air serbuk
simplisia kurang dari 10% (Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan RI,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
1995). Penetapan kadar air dilakukan dengan metode gravimetri dengan
menggunakan alat moisture balance. Serbuk dipanaskan di dalam alat pada suhu
105oC selama 15 menit, setelah itu dilakukan perhitungan terhadap kadar air
serbuk herba Bidens pilosa L. Hasil perhitungan menunjukkan bahwa serbuk
herba Bidens pilosa L. memiliki kadar air sebesar 8,614%, maka serbuk herba
Bidens pilosa L. memenuhi syarat kadar air serbuk simplisia yang baik.
B. Uji Pendahuluan
1. Penentuan dosis hepatotoksin
Pada penelitian ini senyawa model hepatotoksin yang digunakan adalah
karbon tetraklorida. Penentuan dosis karbon tetraklorida bertujuan untuk
mengetahui berapa dosis karbon tetraklorida yang dapat menyebabkan kerusakan
hati pada tikus yang ditunjukkan dengan peningkatan aktivitas serum ALT dan
AST. Kenaikan serum ALT sebanyak 3 kali dan AST 4 kali lipat menjukkan
terjadinya steatosis (Zimmerman, 1999). Dosis karbon tetraklorida yang
digunakan pada penelitian ini mengacu pada penelitian Al-Olayan, et al., (2014)
yang melaporkan pada dosis 2 mL/kgBB telah dapat menginduksi hepatotoksik
pada tikus tanpa menyebabkan kematian.
2. Penentuan dosis herba Bidens pilosa L.
Penentuan dosis dekok dihitung berdasarkan konsentrasi tertinggi herba
Bidens pilosa L. yang dapat dibuat, yaitu 16%. Berdasarkan konsentrasi tersebut,
dosis tertinggi yang dapat dibuat yaitu 2 g/kgBB. Pada penelitian ini digunakan 3
peringkat dosis dengan faktor kelipatan 2 sehingga dosis rendah 0,5 g/kgBB, dosis
tengah 1 g/kgBB dan dosis tinggi 2 g/kgBB.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
3. Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji
Penentuan waktu pencuplikan bertujuan untuk mengetahui waktu karbon
tetraklorida dosis 2 mL/kgBB menimbulkan ketoksikan yang maksimal,
ditunjukkan dengan peningkatan aktivitas serum ALT dan AST tertinggi pada
selang waktu tertentu. Karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB diberikan secara i.p
pada tikus, kemudian dilakukan pencuplikan darah pada selang waktu 0, 24, dan
48 jam. Hasil uji aktivitas serum ALT ditampilkan pada tabel IV dan gambar 6.
Tabel IV. Purata aktivitas serum ALT ± SE pada selang waktu 0, 24 dan 48 jam
setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Selang waktu (jam) Purata aktivitas serum ALT ± SE (U/L)
0 51,2 ± 3,7
24 153,0 ± 2,1
48 61,4 ± 2,4
Gambar 6. Diagram batang purata aktivitas serum ALT pada selang waktu 0, 24
dan 48 jam setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mg/kgBB
Hasil analisis statistik serum ALT menunjukkan distribusi data normal
dan variansi data homogen, sehingga data dapat dianalisis menggunakan analisis
variansi satu arah. Hasil analisis variansi satu arah dari data aktivitas serum ALT
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
menunjukkan nilai signifikansi sebesar 0,000 (p<0,05), yang berarti bahwa
terdapat perbedaan bermakna antar kelompok. Oleh karena itu, untuk melihat
perbedaan antar kelompok dilanjutkan dengan uji Scheffe. Hasil uji Scheffe
aktivitas serum ALT ditampilkan pada tabel V.
Tabel V. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT pada selang waktu 0, 24 dan 48 jam
setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Selang waktu (jam) Jam ke-0 Jam ke-24 Jam ke-48
0 BB BTB
24 BB BB
48 BTB BB
Keterangan:
BB = Berbeda bermakna (p<0,05), BTB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05)
Dari tabel IV dan gambar 6 terlihat bahwa aktivitas serum ALT yang
paling tinggi ditunjukkan pada jam ke-24 (153,0 ± 2,1 U/L). Jika dibandingkan
dengan jam ke-0 (51,2 ± 3,7 U/L) aktivitas serum ALT mengalami kenaikan
sekitar 3 kali, sedangkan pada pencuplikan darah ke-48 (61,4 ± 2,4 U/L) aktivitas
serum ALT telah mengalami penurunan. Hal ini juga ditunjukkan pada tabel V,
aktivitas serum ALT pada jam ke-0 memiliki perbedaan yang tidak bermakna
terhadap jam ke-48, yang berarti bahwa aktivitas serum ALT pada jam ke-48 telah
kembali normal seperti pada jam ke-0.
Tabel VI. Purata aktivitas serum AST ± SE pada selang waktu 0, 24 dan 48 jam
setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Selang waktu (jam) Purata aktivitas serum AST ± SE (U/L)
0 109,0 ± 4,6
24 425,6 ± 10,4
48 150,6 ± 7,0
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
Gambar 7. Diagram batang purata aktivitas serum AST pada selang waktu 0, 24
dan 48 jam setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mg/kgBB
Hasil analisis statistik serum AST menunjukkan distribusi data normal
dan variansi data homogen, sehingga data dapat dianalisis menggunakan analisis
variansi satu arah. Hasil analisis variansi satu arah dari data aktivitas serum AST
menunjukkan nilai signifikansi sebesar 0,000 (p<0,05), yang berarti bahwa
terdapat perbedaan bermakna antar kelompok. Oleh karena itu, untuk melihat
perbedaan antar kelompok dilanjutkan dengan uji Scheffe. Hasil uji Scheffe
aktivitas serum ALT ditampilkan pada tabel VII.
Tabel VII. Hasil uji Scheffe aktivitas serum AST pada selang waktu 0, 24 dan 48
jam setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Selang waktu (jam) Jam ke-0 Jam ke-24 Jam ke-48
0 BB BB
24 BB BB
48 BB BB
Keterangan:
BB = Berbeda bermakna (p<0,05)
Dari tabel VI dan gambar 7 terlihat bahwa aktivitas serum AST yang
paling tinggi ditunjukkan pada jam ke-24 (425,6 ± 10,4 U/L). Jika dibandingkan
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
37
dengan jam ke-0 (109,0 ± 4,6 U/L) aktivitas serum AST mengalami kenaikan
sekitar 4 kali, sedangkan pada pencuplikan darah ke-48 (150,6 ± 7,0 U/L)
aktivitas serum AST telah mengalami penurunan.
Berdasarkan hasil aktivitas serum ALT dan AST pada penelitian ini,
karbon tetraklorida memiliki efek hepatotoksik yang paling tinggi pada jam ke-24,
sehingga waktu pencuplikan darah yang digunakan dalam penelitian ini adalah
jam ke-24 setelah pemberian karbon tetraklorida 2 mL/kgBB secara
intraperitoneal.
C. Hasil Uji Efek Hepatoprotektif Dekok Herba Bidens pilosa L.
Pada penelitian ini dilihat efek hepatoprotektif dari dekok herba Bidens
pilosa L. pada tiga peringkat dosis, yaitu peringkat dosis terkecil sebesar 0,5
g/kgBB, dosis tengah sebesar 1 g/kgBB, dan dosis tertinggi sebesar 2 g/kgBB.
Pemberian dekok herba Bidens pilosa L. dilakukan secara peroral selama enam
hari turut-turut, kemudian pada hari ke tujuh diberikan hepatotoksin karbon
tetraklorida dosis 2 ml/kgBB secara intraperitoneal. Efek hepatoprotektif
ditunjukkan dengan penurunan aktivitas serum ALT dan AST. Data aktivitas
serum ALT dan AST ditampilkan dalam bentuk purata ± SE pada tabel VIII,
gambar 8 dan gambar 9.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
38
Tabel VIII. Purata ± SE aktivitas serum ALT dan AST tikus betina galur Wistar
pada kelompok perlakuan
Kelompok Perlakuan
Purata
aktivitas
serum ALT
± SE (U/L)
Purata
aktivitas
serum AST
± SE (U/L)
Efek hepato-
protektif
(ALT)
Efek hepato-
protektif
(AST)
I
Kontrol
hepatotoksin
karbon
tetraklorida 2
mL/kgBB
174,4 ± 2,9 409,6 ± 7,8 0% 0%
II
Kontrol
negatif olive
oil 2 ml/kgBB
57,2 ± 3,1 101,8 ± 3,8 100% 100%
III
Kontrol
DHBP 2
g/kgBB
55,4 ± 2,3 98,2 ± 4,2 - -
IV
DHBP 0,5
g/kgBB +
karbon
tetraklorida 2
mL/kgBB
90,6 ± 3,2 164,8 ± 5,0 71,5% 79,5%
V
DHBP 1
g/kgBB +
karbon
tetraklorida 2
mL/kgBB
73,8 ± 2,5 132,6 ± 4,2 85,8% 90%
VI
DHBP 2
g/kgBB +
karbon
tetraklorida 2
mL/kgBB
122,8 ± 3,6 213,0 ± 5,5 44,0% 63,9%
Keterangan: DHBP = Dekok herba Bidens pilosa L.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
39
Gambar 8. Diagram batang purata aktivitas serum ALT tikus betina galur Wistar
pada kelompok perlakuan
Gambar 9. Diagram batang purata aktivitas serum AST tikus betina galur Wistar
pada kelompok perlakuan
Data aktivitas serum ALT dan AST dianalisis dengan uji Shapiro-Wilk
menunjukkan bahwa distribusi data normal dengan signifikansi (p>0,05). Data
aktivitas serum ALT dan AST juga menunjukkan tidak adanya variansi data antar
kelompok (data homogen) dari uji Levene’s sebesar 0,669 dan 0,345 (p>0,05),
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
40
sehingga data dilanjutkan dengan analisis variansi satu arah. Hasil analisis
variansi satu arah aktivitas ALT dan AST menunjukkan nilai signifikansi 0,000
(p<0,005), yang berarti bahwa terdapat perbedaan bermakna antar kelompok
perlakuan. Oleh karena itu, untuk melihat perbedaan antar kelompok dilanjutkan
dengan uji Scheffe. Hasil uji Scheffe ditampilkan pada tabel IX dan tabel X.
Tabel IX. Hasil uji Scheffe aktivitas serum ALT tikus betina galur Wistar pada
kelompok perlakuan
Kelompok
Perlakuan
Kontrol
hepatotoksin
CCl4 2
mL/kgBB
Kontrol
negatif
olive oil 2
mL/kgBB
Kontrol
DHBP 2
g/kgBB
DHBP 0,5
g/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
DHBP 1
g/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
DHBP 2
g/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
Kontrol
hepatotoksin
CCl4 2
mL/kgBB
BB BB BB BB BB
Kontrol
negatif olive
oil 2
mL/kgBB
BB BTB BB BB BB
Kontrol
DHBP 2
g/kgBB
BB BTB BB BB BB
DHBP 0,5
g/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
BB BB BB BB BB
DHBP 1
g/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
BB BB BB BB BB
DHBP 2
g/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
BB BB BB BB BB
Keterangan:
DHBP = Dekok herba Bidens pilosa L.
BB = Berbeda bermakna (p<0,05), BTB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
41
Tabel X. Hasil uji Scheffe aktivitas serum AST tikus betina galur Wistar pada
kelompok perlakuan
Kelompok
Perlakuan
Kontrol
hepatotoksin
CCl4 2
mL/kgBB
Kontrol
negatif
olive oil 2
mL/kgBB
Kontrol
DHBP 2
g/kgBB
DHBP 0,5
g/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
DHBP 1
g/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
DHBP 2
g/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
Kontrol
hepatotoksin
CCl4 2
mL/kgBB
BB BB BB BB BB
Kontrol
negatif olive
oil 2
mL/kgBB
BB BTB BB BB BB
Kontrol
DHBP 2
g/kgBB
BB BTB BB BB BB
DHBP 0,5
g/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
BB BB BB BB BB
DHBP 1
g/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
BB BB BB BB BB
DHBP 2
g/kgBB +
CCl4 2
mL/kgBB
BB BB BB BB BB
Keterangan:
DHBP = Dekok herba Bidens pilosa L.
BB = Berbeda bermakna (p<0,05), BTB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05)
1. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB
Kontrol hepatotoksin bertujuan untuk melihat kerusakan hati yang
ditimbulkan oleh hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB yang
diberikan secara intraperitoneal. Parameter kerusakan hati yang terjadi dilakukan
dengan pengukuran aktivitas serum ALT dan AST pada jam ke-24.
Pengukuran aktivitas serum ALT dan AST pada jam ke-24 setelah
pemberian karbon tetraklorida pada jam ke-24 sebesar 174,4 ± 2,9 U/L dan 409,6
± 7,8 U/L. Dari hasil ini menunjukkan bahwa terjadi kenaikan aktivitas ALT
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
42
serum sebesar 3 kali dari kontrol negatif (57,2 ± 3,1 U/L) dan aktivitas AST
serum sebesar 4 kali aktivitas serum AST pada kontrol negatif (101,8 ± 3,8 U/L).
Peningkatakan aktivitas ALT serum sebesar 3 kali lipat dan AST serum sebesar 4
kali lipat terhadap nilai normal menandakan terjadinya kerusakan hati berupa
steatosis (Zimmerman, 1999).
Hasil uji Scheffe yang ditampilkan pada tabel IX dan X, menunjukkan
bahwa aktivitas serum ALT dan AST kontrol hepatotoksin berbeda signifikan
dengan aktivitas serum ALT dan AST kontrol negatif. Dari hasil ini, data kontrol
hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB dapat digunakan untuk menghitung
efek hepatoprotektif dekok herba Bidens pilosa L. pada ketiga variasi dosis.
2. Kontrol negatif olive oil dosis 2 mL/kgBB
Pada penelitian ini kontrol negatif yang digunakan, yaitu olive oil dengan
dosis 2 mL/kgBB, yang merupakan pelarut dari hepatotoksin karbon tetraklorida
dengan dosis yang sama. Kontrol negatif bertujuan untuk memastikan bahwa olive
oil sebagai pelarut yang digunakan tidak memberikan pengaruh dalam
peningkatan aktivitas serum ALT dan AST. Aktivitas serum ALT dan AST pada
jam ke-0 selanjutnya dibandingkan dengan aktivitas serum tersebut pada jam ke-
24. Purata aktivitas serum ALT dan AST kontrol negatif olive oil pada jam ke-0
berturut-turut sebesar 55,2 ± 2,1 U/L dan 105,2 ± 1,4 U/L (tabel XI), sedangkan
purata aktivitas ALT dan AST serum kontrol negatif olive oil pada jam ke-24
berturut-turut sebesar 57,2 ± 3,1 U/L dan 101,8 ± 3,8 U/L (tabel XI).
Data aktivitas serum ALT dan AST dianalisis dengan uji Shapiro-Wilk
menunjukkan bahwa distribusi data normal dengan signifikansi (p>0,05). Data
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
43
dilanjutkan dengan uji T berpasangan untuk mengetahui perbedaan aktivitas
serum ALT dan AST jam ke-0 dibandingkan dengan jam ke-24. Dari hasil uji T
berpasangan (tabel XII), menunjukkan bahwa aktivitas serum ALT dan AST pada
hewan uji sebelum dan sesudah dipejankan olive oil 2 mL/kgBB secara
intraperitoneal berbeda tidak bermakna. Dari hasil tersebut, dapat disimpulkan
bahwa olive oil sebagai pelarut hepatotoksin karbon tetraklorida tidak
memberikan pengaruh dalam peningkatan aktivitas serum ALT dan AST.
Kelompok kontrol negatif olive oil 2 mL/kgBB selanjutnya digunakan sebagai
dasar nilai aktivitas serum ALT dan AST normal pada penelitian ini.
Tabel XI. Purata ± SE aktivitas serum ALT dan AST setelah pemberian olive oil
dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
Selang waktu
(jam)
Purata aktivitas serum ALT ± SE
(U/L)
Purata aktivitas serum AST ± SE
(U/L)
0 55,2 ± 2,1 105,2 ± 1,4
24 57,2 ± 3,1 101,8 ±3,8
Tabel XII. Hasil uji T berpasangan aktivitas serum ALT dan AST
pemberian olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
Selang waktu (jam) Aktivitas serum ALT Aktivitas serum AST
Jam ke-0 Jam ke-24 Jam ke-0 Jam ke-24
Jam ke-0 BTB BTB
Jam ke-24 BTB BTB
Keterangan:
BTB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
44
Gambar 10. Diagram batang purata aktivitas serum ALT setelah pemberian olive
oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
Gambar 11. Diagram batang purata aktivitas serum AST setelah pemberian olive oil
dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 24 jam
3. Kontrol dekok herba Bidens pilosa L. dosis 2 g/kgBB
Kontrol dekok herba Bidens pilosa L. dilakukan untuk melihat pengaruh
dekok herba Bidens pilosa L. terhadap aktivitas serum ALT dan AST tanpa
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
45
pemberian hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada jam ke-24.
Dosis yang digunakan, yaitu 2 g/kgBB secara p.o yang merupakan peringkat dosis
tertinggi dalam perlakuan. Dosis ini dipilih karena dianggap mewakili peringkat
dosis I dan II, sehingga jika pada dosis tertinggi tidak terjadi kenaikan aktivitas
ALT dan AST serum pada jam ke-24 maka pada dosis I dan II juga tidak
memberikan pengaruh terhadap kenaikan serum ALT dan AST. Pada kelompok
ini diperoleh data aktivitas serum ALT dan AST masing-masing sebesar 55,4 ±
2,3 U/L dan 98,2 ± 4,2 U/L (tabel VIII).
Data aktivitas serum ALT kontrol dekok herba Bidens pilosa L. dosis 2
g/kgBB dibandingkan dengan kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB memiliki
perbedaan yang tidak bermakna (tabel IX). Begitu pula dengan aktivitas serum
AST kontrol dekok herba Bidens pilosa L. dosis 2 g/kgBB dengan kontrol negatif
olive oil 2 ml/kgBB (tabel X). Hal ini menunjukkan bahwa aktivitas serum ALT
dan AST pada kedua kelompok tersebut berada dalam range normal. Dengan
demikian, pemberian dekok herba Bidens pilosa L. dosis 2 g/kgBB tidak
berpengaruh terhadap kenaikan serum ALT dan AST.
4. Kelompok perlakuan dekok herba Bidens pilosa L. dosis 0,5;1;2 g/kgBB
pada tikus betina galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida
Pada penelitian ini dilihat efek hepatoprotektif dari dekok herba Bidens
pilosa L. dengan tiga peringkat dosis, yaitu peringkat dosis terkecil sebesar 0,5
g/kgBB, dosis tengah sebesar 1 g/kgBB, dan dosis tertinggi sebesar 2 g/kgBB.
Efek hepatoprotektif ditunjukkan dengan penurunan aktivitas serum ALT dan
AST. Pada kelompok perlakuan dekok herba Bidens pilosa L. dosis 0,5 g/kgBB,
aktivitas serum ALT dan AST berturut-turut sebesar 90,6 ± 3,2 U/L dan 164,8 ±
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
46
5,0 U/L (tabel VIII). Hasil uji Scheffe (tabel IX dan X) menunjukkan aktivitas
serum ALT dan AST memiliki perbedaan yang bermakna dengan kelompok
kontrol karbon tetraklorida 2 mL/kgBB dan kontrol olive oil 2 mL/kgBB. Analisis
statistik menunjukkan bahwa dekok herba Bidens pilosa L. dosis 0,5 g/kgBB
memiliki efek hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas serum ALT dan AST,
namun belum bisa kembali seperti keadaan normal akibat kerusakan yang
ditimbulkan dari induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB.
Pada kelompok perlakuan dekok herba Bidens pilosa L. dosis 1 g/kgBB,
aktivitas serum ALT dan AST berturut-turut sebesar 73,8 ± 2,5 U/L dan 132,6 ±
4,2 U/L (tabel VIII). Hasil uji Scheffe (tabel IX dan X) menunjukkan aktivitas
serum ALT dan AST memiliki perbedaan yang bermakna dengan kelompok
kontrol karbon tetraklorida 2 mL/kgBB dan kontrol olive oil 2 mL/kgBB. Analisis
statistik menunjukkan bahwa dekok herba Bidens pilosa L. dosis 1 g/kgBB
memiliki efek hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas serum ALT dan AST,
namun belum bisa kembali seperti keadaan normal akibat kerusakan yang
ditimbulkan dari induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB.
Pada kelompok perlakuan dekok herba Bidens pilosa L. dosis 2 g/kgBB,
aktivitas serum ALT dan AST berturut-turut sebesar 122,8 ± 3,6 U/L dan 213,0 ±
5,5 U/L (tabel VIII). Data hasil uji Scheffe (tabel IX dan X) menunjukkan aktivitas
serum ALT dan AST memiliki perbedaan yang bermakna dengan kelompok
kontrol karbon tetraklorida 2 mL/kgBB dan kontrol olive oil 2 mL/kgBB. Analisis
statistik menunjukkan bahwa dekok herba Bidens pilosa L. dosis 2 g/kgBB
memiliki efek hepatoprotektif dengan menurunkan aktivitas serum ALT dan AST,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
47
namun belum bisa kembali seperti keadaan normal akibat kerusakan yang
ditimbulkan dari induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB.
Hasil uji Scheffe (tabel IX dan X), aktivitas ALT dan AST pada ketiga
peringkat dosis dekok herba Bidens pilosa L. memiliki perbedaan yang bermakna.
Hal ini berarti, dekok herba Bidens pilosa L. dosis 0,5;1;2 g/kgBB memiliki
perbedaan yang signifikan dalam memberikan efek hepatoprotektif. Nilai efek
hepatoprotektif dilihat dari nilai aktivitas serum ALT, karena enzim ALT lebih
spesifik hati dibandingkan serum AST. Hasil perhitungan efek hepatoprotektif
ketiga peringkat dosis dari dosis terendah ke dosis tertinggi, yaitu 71,5; 85,8; dan
44,0% (tabel VIII). Dari hasil analisis statistik dan perhitungan efek
hepatoprotektif dapat disimpulkan dosis efektif dekok herba Bidens pilosa L.,
yaitu, 1 g/kgBB dengan efek hepatoprotektif sebesar 85,8%. Berdasarkan hasil di
atas, maka tidak dapat ditentukan nilai dosis efektif 50% (ED50). Oleh karena itu,
perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai dosis di bawah 0,5 g/kgBB
Pada penelitian ini didapatkan dosis efektif sebesar 1 g/kgBB, jika
dikonversi ke manusia dengan berat badan 70 kg adalah sebesar 11,2 g. Dari hasil
penelitian, dekok herba Bidens pilosa L. memiliki potensi untuk digunakan
sebagai hepatoprotektor jangka panjang di masyarakat. Oleh karena itu, perlu
dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai toksisitas dekok herba Bidens pilosa L.
untuk mengetahui efek toksik dekok herba Bidens pilosa L. dalam penggunaan
jangka panjang.
Karbon tetraklorida dapat menyebabkan kerusakan hati berupa
perlemakan hati (steatosis). Ketoksikan karbon tetraklorida disebabkan oleh
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
48
radikal triklorometil (•CCl3), yang merupakan metabolit reaktif hasil bioaktivasi
enzim CYP2E1 sebagai agen pereduksi dan pengkatalis adisi elektron yang
mengakibatkan hilangnya satu ion klorin. Triklorometil dengan adanya molekul
oksigen akan berubah menjadi metabolit yang lebih reaktif, yaitu radikal bebas
triklorometilperoksi (•OOCCl3). Radikal triklorometil dapat berikatan secara
kovalen dengan lipid dan protein yang dapat menyebabkan kerusakan pada
retikulum endoplasma dan badan golgi (Timbrell, 2000). Retikulum endoplasma
dan badan golgi bertanggungjawab terhadap pembentukan lipoprotein yang
berfungsi untuk transport lipid. Kerusakan pada retikulum endoplasma dan badan
golgi dapat menyebabkan penghambatan sekresi lipoprotein sehingga terjadi
perlemakan hati (steatosis). Triklorometil juga dapat bereaksi dengan lemak tak
jenuh melalui reaksi radikal bebas yang menyebabkan peroksidasi lipid. Hal ini
yang menyebabkan perubahan permeabilitas pada membran sel, sehingga terjadi
kenaikan aktivitas serum ALT dan AST di darah.
Ketiga dosis herba Bidens pilosa L. tidak menunjukkan adanya korelasi
antara dosis dan efek hepatoprotektif yang berbanding lurus. Pada dosis tertinggi,
yaitu 2 g/kgBB terjadi penurunan efek hepatoprotektif. Hal ini disebabkan karena
flavonoid pada dosis yang lebih tinggi dapat memicu aktivitas pro-oxidant
(Rietjens, Boersma, Haan, Spenkelink, Awad and Cnubben, 2002). Senyawa pro-
oxidant terbentuk karena adanya senyawa flavonoid yang teroksidasi setelah
menangkap radikal bebas (Anzenbacher and Zanger, 2012). Senyawa flavonoid
yang bersifat pro-oxidant inilah yang menyebabkan penurunan efek
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
49
hepatoprotektif, karena senyawa ini memicu terjadinya reaksi oksidasi yang
menyebabkan kerusakan sel.
Pada dekok herba Bidens pilosa L. yang diduga berperan dalam
memberikan efek hepatoprotektif adalah senyawa flavonoid. Senyawa flavonoid
dapat meningkatkan kadar glutathione (GSH), yang merupakan antioksidan alami
di dalam tubuh (Myhrstad, Carlsen, Nordstrom, Blomhoff and Moskaug, 2002).
Selain itu, senyawa flavonoid juga dapat menurunkan aktivitas enzim sitokrom P-
450 (Kusirisin, Jaikang, Chaiyasut and Narongchai, 2009). Kedua mekanisme
tersebut, yang diduga berperan dalam efek hepatoprotektif dengan menurunkan
aktivitas metabolit triklorometil dalam menyebabkan steatosis. Oleh karena itu,
pemberian dekok herba Bidens pilosa L. dalam jangka panjang dapat menurunkan
aktivitas serum ALT dan AST setelah pemberian karbon tetraklorida 2 mL/kgBB
secara intraperitoneal.
D. Rangkuman Pembahasan
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian dan besar
dosis efektif hepatoprotektif dari dekok herba Bidens pilosa L. pada tikus betina
galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida. Dosis dekok herba Bidens pilosa L.
yang digunakan, yaitu 0,5 g/kgBB, 1 g/kgBB, dan 2 g/kgBB. Parameter efek
hepatoprotektif dilihat dari kemampuan dekok herba Bidens pilosa L. dalam
menurunkan aktivitas serum ALT dan AST pada jam ke-24 setelah pemejanan
hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB secara intraperitoneal.
Aktivitas serum ALT dan AST pada kelompok kontrol olive oil setelah
pemberian olive oil (jam ke-24) memiliki kesamaan aktivitas serum ALT dan AST
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
50
sebelum pemberian olive oil (jam ke-0). Dari hal tersebut, disimpulkan bahwa
olive oil tidak memberikan pengaruh dalam peningkatan aktivitas serum ALT dan
AST serum. Pada kelompok kontrol dekok herba Bidens pilosa L. dosis 2 g/kgBB
tanpa pemejanan hepatotoksin karbon tetraklorida, dekok herba Bidens pilosa L.
juga tidak memberikan pengaruh dalam peningkatan aktivitas ALT dan AST
serum yang ditunjukkan dari kesamaan aktivitas dengan kontrol olive oil yang
dijadikan dasar nilai aktivitas serum ALT dan AST normal pada penelitian ini.
Berdasarkan hasil kontrol olive oil dan kontrol dekok herba Bidens pilosa L.,
dapat dinyatakan bahwa kenaikan aktivitas serum ALT dan AST pada penelitian
ini murni disebabkan oleh induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB.
Berdasarkan efek hepatoprotektif yang dihasilkan, kelompok perlakuan
dekok herba Bidens pilosa L. dosis 1 g/kgBB menunjukkan efek yang paling baik
dibandingkan dosis 0,5 g/kgBB dan dosis 2 g/kgBB. Dengan hasil, efek
hepatoprotektif pada dosis 0,5 g/kgBB sebesar 71,5%, dosis 1 g/kgBB sebesar
85,8%, dan dosis 2 g/kgBB sebesar 44,0%. Analisis statistik data aktivitas serum
ALT dan AST ketiga peringkat dosis juga menunjukkan adanya perbedaan yang
bermakna. Artinya, dekok herba Bidens pilosa L. pada ketiga variasi dosis
memiliki perbedaan yang signifikan dalam memberikan efek hepatoprotektif.
Oleh karena itu, dapat disimpulkan bahwa dosis efektif dekok herba Bidens pilosa
L., yaitu 1 g/kgBB dengan efek hepatoprotektif sebesar 85,8%.
Karbon tetraklorida dapat menyebabkan kerusakan hati berupa
perlemakan hati (steatosis). Ketoksikan karbon tetraklorida disebabkan oleh
metabolit reaktif radikal triklorometil (•CCl3). Radikal triklorometil dapat
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
51
berikatan secara kovalen dengan lipid dan protein yang dapat menyebabkan
kerusakan pada retikulum endoplasma dan badan golgi (Timbrell, 2000).
Kerusakan tersebut dapat menyebabkan penghambatan sekresi lipoprotein
sehingga terjadi perlemakan hati (steatosis). Triklorometil juga dapat
menyebabkan peroksidasi lipid melalui reaksi radikal bebas dengan lemak tak
jenuh. Hal ini yang menyebabkan perubahan permeabilitas pada membran sel,
sehingga terjadi kenaikan aktivitas serum ALT dan AST di darah.
Pada dekok herba Bidens pilosa L. diduga yang berperan dalam
memberikan efek hepatoprotektif adalah senyawa flavonoid. Senyawa flavonoid
dapat meningkatkan sintesis GSH dan menghambat aktivitas enzim sitokrom P-
450 dengan menurunkan aktivitas metabolit triklorometil yang menyebabkan
steatosis. Oleh karena itu, pemberian dekok herba Bidens pilosa L. dalam jangka
panjang dapat menurunkan aktivitas serum ALT dan AST setelah pemberian
karbon tetraklorida.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
52
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil yang diperoleh dan analisis statistik yang dilakukan,
maka dapat disimpulkan:
1. Pemberian dekok herba Bidens pilosa L. memiliki efek hepatoprotektif pada
tikus terinduksi karbon tetraklorida dengan menurunkan aktivitas serum ALT
dan AST.
2. Dosis efektif pemberian dekok herba Bidens pilosa L., yaitu 1 g/kgBB dengan
efek hepatoprotektif sebesar 85,8% pada tikus terinduksi karbon tetraklorida.
B. Saran
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai:
1. Efek hepatoprotektif dekok herba Bidens pilosa L. dengan variasi dosis di
bawah 0,5 g/kgBB untuk mengetahui nilai ED50.
2. Uji toksisitas dari dekok herba Bidens pilosa L. untuk mengetahui efek toksik
penggunaan dekok herba Bidens pilosa L. dalam jangka panjang.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
53
DAFTAR PUSTAKA
Al-Olayan, E.M., El-Khadragy M.F., Aref A.M., Othman , M.S., Kassab R.B. and
Moneim A.E.A., 2014, The Potential Protective Effect of Physalis
peruviana L. against Carbon Tetrachloride-Induced Hepatotoxicity in
Rats Is Mediated by Suppression of Oxidative Stress and Downregulation
of MMP-9 Expression, Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 1-2.
Andersen, O.M., Markham, K.R., (Eds.), 2006, Flavonoids: Chemistry,
Biochemistry and Applications, Taylor & Francis Group, United State, p.
2.
Anzenbacher, P., Zanger, U.M., (Eds.), 2012, Metabolism of Drugs and Other
Xenobiotics, Wiley-VCH, Germany, p. 563.
Ariyanti, N.K.N., 2007, Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Air Ekstrak Metanolik
Herba Ketul (Bidens pilosa L.), Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas
Gadjah Mada.
Backer, C.A., 1963, Flora of Java, vol 2, N.V.P. Noordhoff – Groningen, The
Netherland, pp. 362-366, 412-413.
Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Departemen Kesehatan, Republik
Indonesia., 2013, Riset Kesehatan Dasar 2013, Departemen Kesehatan
RI, Jakarta, pp. 71-72.
Badan Pengawas Obat dan Makanan RI., 2010, Acuan Sediaan Herbal, 5 (1),
Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI, hal. 4.
Bairwa, K., Kumar. R., Sharma, R.J. and Roy, R.K., 2010, Updated Review on
Bidens pilosa L., Der Pharma Chemica, 2 (3), 325-337.
Baradero, M., Dayrit, M. W., Siswadi, Y, 2008, Klien Gangguan Hati: Seri
Asuhan Keperawatan, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 1-3.
Bartolome, A.P., Villasenor, I.M. and Yang, W., 2013, Bidens pilosa L.
(Asteraceae): Botanical Properties, Traditional Uses, Phytochemistry,
and Pharmacology, Evidence-Based Complementary and Alternative
Medicine, 2013, 1-3.
Bateman, N., Jefferson, R., Thomas, S., Thompson, J, Vale A., (Eds.), 2014,
Oxford Desk Reference: Toxicology, CPI Group Ltd., United Kingdom,
p.221.
Beckett, G., Walker, S., Rae, P., Ashby, P., 2010, Lecture Notes: Clinical
Biochemistry, Blackwell Publishing Ltd., United States, pp. 197-199.
Burcham, P.C., 2014, An Introduction to Toxicology, Springer, London, pp. 170-
171.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
54
Dancygier, H., 2010, Clinical Hepatology: Principles and Practice of
Hepatobiliary Diseases, Springer, New York, pp. 320-322.
Dickerson, J.L., 2006, Cirrhosis: An Essential Guide for the Newly Diagnosed,
Avalon Publishing Group, United States of America, pp. 82-83.
Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia., 1995,
Farmakope Indonesia, Edisi IV, Departemen Kesehatan Republik
Indonesia, pp. 46.
Dongare, P.P., Dhande, S.R. and Kadam, V.J., 2013, Standarization of Carbon
Tetrachloride-Induced Hepatotoxicity In the Rat, Am. J. PharmTech
Res., 3 (5), 439-445.
Duffus, J.H. and Worth H.G.J., 1996, Fundamental Toxicology for Chemists,
Athenaeum Press Ltd., Gateshead, pp. 140-141.
Fenton, J.J., 2001, Toxicology: A Case-Oriented Approach, CRC Press, USA pp.
90-91.
Fleiser, L.A., 2009, Anesthesia and Uncommon Diseases, 6th edition, Elsevier
Inc., United States, p. 170.
Friedman, L.S. and Keefe, E.B., 2012, Handbook of Liver Disease, 3rd edition,
Elsevier, Philadelphia.
Ganiswara, S.G., 1995, Farmakologi dan Terapi 1, Universitas Indonesia Press,
Jakarta, pp. 57-60.
Kaplowitz, N., Deleve, L., (Eds.), 2013, Drug-Induced Liver Disease, 3rd Edition,
Academic Press, United State of America, pp. 595-597.
Kelly, D., 2008, Diseases of the Liver and Biliary System in Children, 3rd edition,
Blackwell Publishing Ltd., United States, pp. 253.
Kusirisin, W., Jaikang, C., Caiyasut, C. and Narongchai, P., 2009, Effect of
Polyphenolic Compounds from Solanum torvum on Plasma Lipid
Peroxidation, Superoxide Anion and Cytochrome P450 2E1 in Human
Liver Microsomes, Med. Chem., 5 (6), 583-588.
Kviencinski, M.R., Felipe, K.B., Correia, J.F., Ferreira, E.A., Rossi, M.H., De
Moura Gatti, F., et al., 2011, Brazilian Bidens pilosa Linne Yields
Fraction Containing Quercetin-Derived Favonoid with Free Radical
Scavenger Activity and Hepatoprotective Effects, The Libyan Journal of
Medicine, 6, 176-184.
Mahkad, K., Hoey, E., Lakkaraju, A., Bhuskute, N., (Eds.), 2012, MRI of The
Whole Body: An Illustrated Guide to Common Pathologies, CRC Press,
USA. 139.
Manahan, S. E., 2002, Toxicological Chemistry and Biochemistry, 3rd edition,
Lewis Publishers, United States of America, pp. 329-330.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
55
Moskaug, J.O., Carlsen, H., Myhrstad, M.C.W., Blomhoff, R., 2005, Polyphenols
and Glutathione Synthesis Regulation1-4, The American Journal of
Clinical Nutrition, 81, 277S-283S.
Myhrstad, M.C.W., Carlsen, H., Nordstrom, O., Blomhoff, R., Moskaug, J.O.,
2002, Flavonoids Increase The Intracellular Glutathione Level By
Transactivation of The -Glutamylcysteine Synthetase Catalytical
Subunit Promoter, Free Radical Biology & Medicine, 32 (5), 386-393.
Pearce, E.C., 2009, Anatomi dan Fisiologi untuk Paramedis, Gramedia, Jakarta,
pp. 243-246.
Porter, R.S., 2009, The Merck Manual Home Health Handboook, Merck Sharp &
Dohme, New Jersey.
Price, S.A. dan Wilson, L.M., 2005, Patofisiologi: Konsep Klinis Proses-Proses
Penyakit, Edisi 6, Vol 1, Penerbit EGC, Jakarta, pp. 473-476.
Rahmamurti, B.A., 2013, Efek Hepatoprotektif Ekstrak Etanol-Air Daun
Macaranga tanarius L. pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida :
Kajian terhadap Praperlakuan Jangka Panjang, Skripsi, 33, Universitas
Sanata Dharma, Yogyakarta.
Rietjens, I.M.C.M., Boersma, M.G., Haan, L.D., Spenkelink, B., Awad, H.M.,
Cnubben, N.H.P., et al., 2002, The Pro-oxidant Chemistry of The Natural
Antioxidants Vitamin C, Vitamin E, Carotenoids and Flavonoids,
Environmental Toxicology and Pharmacology, 6, 321-333.
Roberts, A., 2010, The Complete Human Body: The Definitive Visual Guide, DK
Publishing, London, pp. 466-467.
Rubin, R., Strayer, D.S., Rubin, E., (Eds), 2011, Pathology: Clinicopathologic
Foundations of Medicine, 6th edition, Lippincott Williams & Wilkins,
Philadelphia, p. 720.
Sargent, S., 2009, Liver Diseases: An Essential Guide for Nurses and Health Care
Professional, Blackwell Publishing Ltd., United States, pp. 1-9.
Sari, G.A.C., 2012, Penyakit Perlemakan Hati Non-Alkoholik pada Sindroma
Metabolik Dewasa, Skripsi, 45, Universitas Diponegoro, Semarang.
Schattner, A., Knobler, H., (Eds), 2008, Metabolic Aspects of Chronic Liver
Disease, Nova Publishers, New York, p. 37.
Seifter, J., Ratner, A., Sloane, D., 2005, Concepts in Medical Physiology,
Lippincott Williams & Wilkins, United Stated of America, p. 473.
Siegenthaler, W., 2007, Differential Diagnosis in Internal Medicine: From
Symptom to Diagnosis, Thieme Publishing Group, Germany, pp. 25.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
56
Silva, F.B., Fischer, D.C.H., Tavares, J.F., Silva, M.S., de Athayde-Filho, P.F. and
Barbosa-Filho, J.M., 2011, Compilation of Secondary Metabolites from
Bidens pilosa L., Molecules, 16, 1070-1102.
Smeltzer, S.C., Bare, B.G., Hinkle, J.L., Cheever, K.H., 2009, Textbook of
Medical-Surgical Nursing, 13th edition, Lippincott Wiliams & Wilkins,
Philadelphia, pp. 1120-1121.
Sugiarto, A. dan Putera, T.D., 2008, Buku Pintar Tanaman Obat, PT. Agromedia
Pustaka,, Jakarta, pp.6.
Sumantri, S., 2013, Penggunaan Trasient Elastography untuk Staging dan Grading
pada Pasien NAFLD, Departemen Ilmu Penyakit Dalam, 40 (2), 97-101.
The Association of Physicians of India, 2012, Textbook of Medicine, 9th edition,
Jaypee Brothers Medical Publishers (P) Ltd., New Delhi, pp. 842-846.
Timbrell, J.A., 2000, Principles of Biochemical Toxicology, 3rd edition, Taylor &
Francis Group, USA, pp. 269-271.
Vasudevan, D.M., Srekumari, S., Vaidyanathan, K., 2013, Textbook of
Biochemistry for Medical Students, 7th edition, Jaypee Brothers Medical
Publishers (P) Ltd., New Delhi, pp. 349,352.
Watson, L.J., 2014, Hepatocellular Carcinoma, http://geekymedics.com/2014/03
/13/hepatocellular-carcinoma, diakses tanggal 19 Januari 2015.
Wibowo, D.S., 2008, Anatomi Tubuh Manusia, Grasindo, Jakarta pp 93.
Wijayanti, F.D.R., 2013, Efek Hepatoprotektif Ekstrak Metanol-Air Daun
Macaranga tanarius L. pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida:
Kajian terhadap Praperlakuan Jangka Waktu 30 Menit, Skripsi, 43,
Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.
Zimmerman, H.J., 1999, Hepatotoxicity: The adverse Effects of Drugs and Other
Chemicals on The liver, Lippincott Williams and Wilkins, USA, pp.126-
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
57
LAMPIRAN
Lampiran 1. Foto serbuk herba Bidens pilosa L.
Lampiran 2. Foto pembuatan dekok herba Bidens pilosa L.
Lampiran 3. Foto dekok herba Bidens pilosa L.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
58
Lampiran 4. Surat pengesahan determinasi tanaman herba Bidens pilosa L.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
59
Lampiran 5. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics
Committee (MHREC)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
60
Lampiran 6. Analisis statistik aktivitas serum ALT pada uji pendahuluan
dosis hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB
Descriptives
SGPT
N Mean
Std.
Deviation
Std.
Error
95% Confidence
Interval for Mean
Minimum Maximum
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol
hepatotoksin
0 jam
5 51,2000 8,25833 3,69324 40,9459 61,4541 43,00 63,00
Kontrol
hepatotoksin
24 jam
5 153,0000 4,74342 2,12132 147,1103 158,8897 147,00 158,00
Kontrol
hepatotoksin
48 jam
5 61,4000 5,27257 2,35797 54,8532 67,9468 56,00 70,00
Total 15 88,5333 47,73718 12,32569 62,0974 114,9693 43,00 158,00
Tests of Normality
Kelompok Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
SGPT Kontrol hepatotoksin 0 jam ,205 5 ,200* ,932 5 ,612
Kontrol hepatotoksin 24 jam ,263 5 ,200* ,900 5 ,410
Kontrol hepatotoksin 48 jam ,255 5 ,200* ,905 5 ,435
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variances
SGPT
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1,496 2 12 ,263
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
61
ANOVA
SGPT
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 31429,733 2 15714,867 397,845 ,000
Within Groups 474,000 12 39,500
Total 31903,733 14
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
SGPT
Scheffe
(I) Kelompok (J) Kelompok
Mean
Difference (I-J)
Std.
Error Sig.
95% Confidence
Interval
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol
hepatotoksin 0
jam
Kontrol
hepatotoksin 24
jam
-101,80000* 3,97492 ,000 -112,8804 -90,7196
Kontrol
hepatotoksin 48
jam
-10,20000 3,97492 ,072 -21,2804 ,8804
Kontrol
hepatotoksin 24
jam
Kontrol
hepatotoksin 0
jam
101,80000* 3,97492 ,000 90,7196 112,8804
Kontrol
hepatotoksin 48
jam
91,60000* 3,97492 ,000 80,5196 102,6804
Kontrol
hepatotoksin 48
jam
Kontrol
hepatotoksin 0
jam
10,20000 3,97492 ,072 -,8804 21,2804
Kontrol
hepatotoksin 24
jam
-91,60000* 3,97492 ,000 -102,6804 -80,5196
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
62
GGraph
Lampiran 7. Analisis statistik aktivitas serum AST pada uji pendahuluan
dosis hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB
Descriptives
SGOT
N Mean
Std.
Deviation
Std.
Error
95% Confidence
Interval for Mean
Minimum Maximum
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol
hepatotoksin
0 jam
5 109,0000 10,31988 4,61519 96,1862 121,8138 95,00 124,00
Kontrol
hepatotoksin
24 jam
5 425,6000 23,31952 10,42881 396,6450 454,5550 391,00 452,00
Kontrol
hepatotoksin
48 jam
5 150,6000 15,69395 7,01855 131,1134 170,0866 137,00 176,00
Total 15 228,4000 146,28045 37,76945 147,3926 309,4074 95,00 452,00
Tests of Normality
Kelompok Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
63
SGOT Kontrol hepatotoksin 0 jam ,261 5 ,200* ,939 5 ,658
Kontrol hepatotoksin 24 jam ,189 5 ,200* ,967 5 ,853
Kontrol hepatotoksin 48 jam ,263 5 ,200* ,871 5 ,272
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variances
SGOT
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1,257 2 12 ,320
ANOVA
SGOT
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 295985,200 2 147992,600 495,179 ,000
Within Groups 3586,400 12 298,867
Total 299571,600 14
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
SGOT
Scheffe
(I) Kelompok (J) Kelompok
Mean
Difference (I-
J)
Std.
Error Sig.
95% Confidence
Interval
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol
hepatotoksin 0
jam
Kontrol
hepatotoksin 24
jam
-316,60000* 10,93374 ,000 -347,0786 -286,1214
Kontrol
hepatotoksin 48
jam
-41,60000* 10,93374 ,009 -72,0786 -11,1214
Kontrol
hepatotoksin 24
jam
Kontrol
hepatotoksin 0
jam
316,60000* 10,93374 ,000 286,1214 347,0786
Kontrol
hepatotoksin 48
jam
275,00000* 10,93374 ,000 244,5214 305,4786
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
64
Kontrol
hepatotoksin 48
jam
Kontrol
hepatotoksin 0
jam
41,60000* 10,93374 ,009 11,1214 72,0786
Kontrol
hepatotoksin 24
jam
-275,00000* 10,93374 ,000 -305,4786 -244,5214
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
GGraph
Lampiran 8. Analisis statistik aktivitas serum ALT pada kelompok kontrol
olive oil 2 mL/kgBB
Descriptives
Kelompok Statistic Std. Error
SGPT Jam_0 Mean 55,2000 2,08327
95% Confidence Interval for Mean Lower Bound 49,4159
Upper Bound 60,9841
5% Trimmed Mean 55,1667
Median 54,0000
Variance 21,700
Std. Deviation 4,65833
Minimum 50,00
Maximum 61,00
Range 11,00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
65
Interquartile Range 9,00
Skewness ,309 ,913
Kurtosis -2,218 2,000
Jam_24 Mean 57,2000 3,07246
95% Confidence Interval for Mean Lower Bound 48,6695
Upper Bound 65,7305
5% Trimmed Mean 57,3333
Median 60,0000
Variance 47,200
Std. Deviation 6,87023
Minimum 48,00
Maximum 64,00
Range 16,00
Interquartile Range 13,00
Skewness -,607 ,913
Kurtosis -2,038 2,000
Tests of Normality
Kelompok Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
SGPT
dimension1
Jam_0 ,202 5 ,200* ,933 5 ,619
Jam_24 ,258 5 ,200* ,902 5 ,419
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
T-Test
Paired Samples Statistics
Mean N Std. Deviation Std. Error Mean
Pair 1 Jam_0 55,2000 5 4,65833 2,08327
Jam_24 57,2000 5 6,87023 3,07246
Paired Samples Correlations
N Correlation Sig.
Pair 1 Jam_0 & Jam_24 5 ,147 ,814
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
66
Paired Samples Test
Paired Differences
t df
Sig. (2-
tailed) Mean
Std.
Deviation
Std. Error
Mean
95% Confidence Interval
of the Difference
Lower Upper
Pair
1
Jam_0 -
Jam_24
-
2,00000
7,71362 3,44964 -11,57773 7,57773 -
,580
4 ,593
GGraph
Lampiran 9. Analisis statistik aktivitas serum AST pada kelompok kontrol
olive oil 2 mL/kgBB
Descriptives
Kelompok Statistic Std. Error
SGOT Jam_0 Mean 105,2000 1,39284
95% Confidence Interval for Mean Lower Bound 101,3329
Upper Bound 109,0671
5% Trimmed Mean 105,1667
Median 104,0000
Variance 9,700
Std. Deviation 3,11448
Minimum 102,00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
67
Maximum 109,00
Range 7,00
Interquartile Range 6,00
Skewness ,437 ,913
Kurtosis -2,681 2,000
Jam_24 Mean 101,8000 3,83927
95% Confidence Interval for Mean Lower Bound 91,1405
Upper Bound 112,4595
5% Trimmed Mean 101,9444
Median 105,0000
Variance 73,700
Std. Deviation 8,58487
Minimum 90,00
Maximum 111,00
Range 21,00
Interquartile Range 16,00
Skewness -,584 ,913
Kurtosis -1,437 2,000
Tests of Normality
Kelompok Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
SGOT
dimension1
Jam_0 ,250 5 ,200* ,885 5 ,332
Jam_24 ,245 5 ,200* ,936 5 ,639
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
T-Test
Paired Samples Statistics
Mean N Std. Deviation Std. Error Mean
Pair 1 Jam_0 105,2000 5 3,11448 1,39284
Jam_24 101,8000 5 8,58487 3,83927
Paired Samples Correlations
N Correlation Sig.
Pair 1 Jam_0 & Jam_24 5 ,619 ,266
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
68
Paired Samples Test
Paired Differences
t df
Sig. (2-
tailed) Mean
Std.
Deviation
Std. Error
Mean
95% Confidence Interval
of the Difference
Lower Upper
Pair
1
Jam_0 -
Jam_24
3,40000 7,09225 3,17175 -5,40619 12,20619 1,072 4 ,344
GGraph
Lampiran 10. Analisis statistik aktivitas serum ALT pada perlakuan dekok
herba Bidens pilosa L. setelah induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB
Descriptives
SGPT
N Mean
Std.
Deviation
Std.
Error
95% Confidence
Interval for Mean
Minimum Maximum
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol CCl4 5 174,4000 6,50385 2,90861 166,3244 182,4756 166,00 182,00
Kontrol olive
oil
5 57,2000 6,87023 3,07246 48,6695 65,7305 48,00 64,00
Kontrol
dekok
5 55,4000 5,22494 2,33666 48,9124 61,8876 49,00 62,00
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
69
Perlakuan
dekok 0,5
g/kgBB
5 90,6000 7,19722 3,21870 81,6635 99,5365 82,00 98,00
Perlakuan
dekok 1
g/kgBB
5 73,8000 5,63028 2,51794 66,8091 80,7909 67,00 80,00
Perlakuan
dekok 2
g/kgBB
5 122,8000 8,07465 3,61109 112,7740 132,8260 112,00 131,00
Total 30 95,7000 43,05662 7,86103 79,6224 111,7776 48,00 182,00
Tests of Normality
Kelompok Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
SGPT Kontrol CCl4 ,160 5 ,200* ,969 5 ,871
Kontrol olive oil ,258 5 ,200* ,902 5 ,419
Kontrol dekok ,155 5 ,200* ,977 5 ,919
Perlakuan dekok 0,5 g/kgBB ,231 5 ,200* ,884 5 ,326
Perlakuan dekok 1 g/kgBB ,203 5 ,200* ,922 5 ,543
Perlakuan dekok 2 g/kgBB ,207 5 ,200* ,924 5 ,557
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variances
SGPT
Levene Statistic df1 df2 Sig.
,643 5 24 ,669
ANOVA
SGPT
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 52700,300 5 10540,060 238,193 ,000
Within Groups 1062,000 24 44,250
Total 53762,300 29
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
70
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
SGPT
Scheffe
(I) Kelompok (J) Kelompok
Mean
Difference (I-J)
Std.
Error Sig.
95% Confidence
Interval
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol CCl4 Kontrol olive oil 117,20000* 4,20714 ,000 101,9708 132,4292
Kontrol dekok 119,00000* 4,20714 ,000 103,7708 134,2292
Perlakuan dekok
0,5 g/kgBB
83,80000* 4,20714 ,000 68,5708 99,0292
Perlakuan dekok
1 g/kgBB
100,60000* 4,20714 ,000 85,3708 115,8292
Perlakuan dekok
2 g/kgBB
51,60000* 4,20714 ,000 36,3708 66,8292
Kontrol olive oil Kontrol CCl4 -117,20000* 4,20714 ,000 -132,4292 -101,9708
Kontrol dekok 1,80000 4,20714 ,999 -13,4292 17,0292
Perlakuan dekok
0,5 g/kgBB
-33,40000* 4,20714 ,000 -48,6292 -18,1708
Perlakuan dekok
1 g/kgBB
-16,60000* 4,20714 ,026 -31,8292 -1,3708
Perlakuan dekok
2 g/kgBB
-65,60000* 4,20714 ,000 -80,8292 -50,3708
Kontrol dekok Kontrol CCl4 -119,00000* 4,20714 ,000 -134,2292 -103,7708
Kontrol olive oil -1,80000 4,20714 ,999 -17,0292 13,4292
Perlakuan dekok
0,5 g/kgBB
-35,20000* 4,20714 ,000 -50,4292 -19,9708
Perlakuan dekok
1 g/kgBB
-18,40000* 4,20714 ,011 -33,6292 -3,1708
Perlakuan dekok
2 g/kgBB
-67,40000* 4,20714 ,000 -82,6292 -52,1708
Perlakuan dekok
0,5 g/kgBB
Kontrol CCl4 -83,80000* 4,20714 ,000 -99,0292 -68,5708
Kontrol olive oil 33,40000* 4,20714 ,000 18,1708 48,6292
Kontrol dekok 35,20000* 4,20714 ,000 19,9708 50,4292
Perlakuan dekok
1 g/kgBB
16,80000* 4,20714 ,024 1,5708 32,0292
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
71
Perlakuan dekok
2 g/kgBB
-32,20000* 4,20714 ,000 -47,4292 -16,9708
Perlakuan dekok
1 g/kgBB
Kontrol CCl4 -100,60000* 4,20714 ,000 -115,8292 -85,3708
Kontrol olive oil 16,60000* 4,20714 ,026 1,3708 31,8292
Kontrol dekok 18,40000* 4,20714 ,011 3,1708 33,6292
Perlakuan dekok
0,5 g/kgBB
-16,80000* 4,20714 ,024 -32,0292 -1,5708
Perlakuan dekok
2 g/kgBB
-49,00000* 4,20714 ,000 -64,2292 -33,7708
Perlakuan dekok
2 g/kgBB
Kontrol CCl4 -51,60000* 4,20714 ,000 -66,8292 -36,3708
Kontrol olive oil 65,60000* 4,20714 ,000 50,3708 80,8292
Kontrol dekok 67,40000* 4,20714 ,000 52,1708 82,6292
Perlakuan dekok
0,5 g/kgBB
32,20000* 4,20714 ,000 16,9708 47,4292
Perlakuan dekok
1 g/kgBB
49,00000* 4,20714 ,000 33,7708 64,2292
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
GGraph
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
72
Lampiran 11. Analisis statistik aktivitas serum AST pada perlakuan dekok
herba Bidens pilosa L. setelah induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB
Descriptives
SGOT
N Mean
Std.
Deviation
Std.
Error
95% Confidence
Interval for Mean
Minimum Maximum
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol
CCl4
5 409,6000 17,41551 7,78845 387,9758 431,2242 389,00 434,00
Kontrol
olive oil
5 101,8000 8,58487 3,83927 91,1405 112,4595 90,00 111,00
Kontrol
dekok
5 98,2000 9,49737 4,24735 86,4075 109,9925 88,00 112,00
Perlakuan
dekok 0,5
g/kgBB
5 164,8000 11,23388 5,02394 150,8513 178,7487 151,00 177,00
Perlakuan
dekok 1
g/kgBB
5 132,6000 9,44987 4,22611 120,8664 144,3336 121,00 144,00
Perlakuan
dekok 2
g/kgBB
5 213,0000 12,24745 5,47723 197,7928 228,2072 197,00 225,00
Total 30 186,6667 109,45707 19,98404 145,7947 227,5386 88,00 434,00
Tests of Normality
Kelompok Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
SGOT Kontrol CCl4 ,182 5 ,200* ,981 5 ,939
Kontrol olive oil ,245 5 ,200* ,936 5 ,639
Kontrol dekok ,192 5 ,200* ,960 5 ,805
Perlakuan dekok 0,5 g/kgBB ,246 5 ,200* ,906 5 ,443
Perlakuan dekok 1 g/kgBB ,200 5 ,200* ,950 5 ,740
Perlakuan dekok 2 g/kgBB ,288 5 ,200* ,878 5 ,301
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
73
Test of Homogeneity of Variances
SGOT
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1,187 5 24 ,345
ANOVA
SGOT
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 344113,867 5 68822,773 495,901 ,000
Within Groups 3330,800 24 138,783
Total 347444,667 29
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
SGOT
Scheffe
(I) Kelompok (J) Kelompok
Mean
Difference (I-J)
Std.
Error Sig.
95% Confidence
Interval
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol CCl4 Kontrol olive oil 307,80000* 7,45073 ,000 280,8295 334,7705
Kontrol dekok 311,40000* 7,45073 ,000 284,4295 338,3705
Perlakuan dekok
0,5 g/kgBB
244,80000* 7,45073 ,000 217,8295 271,7705
Perlakuan dekok
1 g/kgBB
277,00000* 7,45073 ,000 250,0295 303,9705
Perlakuan dekok
2 g/kgBB
196,60000* 7,45073 ,000 169,6295 223,5705
Kontrol olive oil Kontrol CCl4 -307,80000* 7,45073 ,000 -334,7705 -280,8295
Kontrol dekok 3,60000 7,45073 ,999 -23,3705 30,5705
Perlakuan dekok
0,5 g/kgBB
-63,00000* 7,45073 ,000 -89,9705 -36,0295
Perlakuan dekok
1 g/kgBB
-30,80000* 7,45073 ,018 -57,7705 -3,8295
Perlakuan dekok
2 g/kgBB
-111,20000* 7,45073 ,000 -138,1705 -84,2295
Kontrol dekok Kontrol CCl4 -311,40000* 7,45073 ,000 -338,3705 -284,4295
Kontrol olive oil -3,60000 7,45073 ,999 -30,5705 23,3705
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
74
Perlakuan dekok
0,5 g/kgBB
-66,60000* 7,45073 ,000 -93,5705 -39,6295
Perlakuan dekok
1 g/kgBB
-34,40000* 7,45073 ,006 -61,3705 -7,4295
Perlakuan dekok
2 g/kgBB
-114,80000* 7,45073 ,000 -141,7705 -87,8295
Perlakuan dekok
0,5 g/kgBB
Kontrol CCl4 -244,80000* 7,45073 ,000 -271,7705 -217,8295
Kontrol olive oil 63,00000* 7,45073 ,000 36,0295 89,9705
Kontrol dekok 66,60000* 7,45073 ,000 39,6295 93,5705
Perlakuan dekok
1 g/kgBB
32,20000* 7,45073 ,012 5,2295 59,1705
Perlakuan dekok
2 g/kgBB
-48,20000* 7,45073 ,000 -75,1705 -21,2295
Perlakuan dekok
1 g/kgBB
Kontrol CCl4 -277,00000* 7,45073 ,000 -303,9705 -250,0295
Kontrol olive oil 30,80000* 7,45073 ,018 3,8295 57,7705
Kontrol dekok 34,40000* 7,45073 ,006 7,4295 61,3705
Perlakuan dekok
0,5 g/kgBB
-32,20000* 7,45073 ,012 -59,1705 -5,2295
Perlakuan dekok
2 g/kgBB
-80,40000* 7,45073 ,000 -107,3705 -53,4295
Perlakuan dekok
2 g/kgBB
Kontrol CCl4 -196,60000* 7,45073 ,000 -223,5705 -169,6295
Kontrol olive oil 111,20000* 7,45073 ,000 84,2295 138,1705
Kontrol dekok 114,80000* 7,45073 ,000 87,8295 141,7705
Perlakuan dekok
0,5 g/kgBB
48,20000* 7,45073 ,000 21,2295 75,1705
Perlakuan dekok
1 g/kgBB
80,40000* 7,45073 ,000 53,4295 107,3705
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
75
GGraph
Lampiran 12. Perhitungan efek hepatoprotektif
Kelompok perlakuan dekok herba Bidens pilosa L. dosis 0,5 g/kgBB
Kelompok perlakuan dekok herba Bidens pilosa L. dosis 1 g/kgBB
85,8%
Kelompok perlakuan dekok herba Bidens pilosa L. dosis 2 g/kgBB
44,0%
Lampiran 13. Perhitungan konversi dosis herba Bidens pilosa L. untuk
manusia
Nilai konversi tikus 200 g ke manusia 70 kg = 56
Dosis untuk manusia 70 kg = dosis tikus 200 g x nilai konversi
Maka dosis dekok herba Bidens pilosa L. untuk manusia, yaitu:
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
76
Dekok herba Bidens pilosa L. dosis 0,5 g/kgBB
= 0,1g/200gBB x 56
= 5,6g/70kgBB
= 0,08 g/kgBB
Dekok herba Bidens pilosa L. dosis 1 g/kgBB
= 0,2g/200gBB x 56
= 11,2g/70kgBB
= 0,16 g/kgBB
Dekok herba Bidens pilosa L. dosis 2 g/kgBB
= 0,4g/200gBB x 56
= 22,4 g/70kgBB
= 0,32 g/kgBB
Lampiran 14. Penetapan kadar air serbuk herba Bidens pilosa L.
Penentuan kadar air dilakukan dengan metode gravimetri dengan
menggunakan alat moisture balance. Sampel dipanaskan pada pada suhu 1050C
selama 15 menit. Hasil penetapan kadar air, yaitu:
Replikasi I
8,740%
Replikasi II
8,716%
Replikasi III
8,385%
Rata-rata kadar air adalah 8,614%, telah memenuhi persyaratan kurang dari 10%.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
77
BIOGRAFI PENULIS
Penulis lahir di Jambi pada tanggal 3 April 1993.
Penulis merupakan putra kedua dari seorang ayah yang
bernama Hasan dan ibu yang bernama Maria. Pendidikan
formal yang telah ditempuh penulis, yaitu TK Nasional
Sariputra Jambi, tingkat Sekolah Dasar di SD Nasional
Sariputra Jambi, Tingkat Sekolah Menegah Pertama di SMP N
10 Jambi, tingkat Sekolah Menegah Atas di SMA N 3 Jambi,
dan Strata 1 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta 2011-2014.
Penulis memiliki pengalaman kerja sebagai asisten dosen Praktikum
Bentuk Sediaan Farmasi pada tahun 2012, 2013, 2014, Compounding and
Dispending 2013, dan Farmakologi Toksikologi 2014. Penulis juga pernah
mengikut Lomba Produk Kesehatan Nasional (Pharmanova 2013) yang
diselenggarakan oleh Kampus ITB, serta ikut dalam Program Kreativitas
Mahasiswa pada tahun 2014 yang dibiayai oleh Dinas Pendidikan Tinggi.
Selain dibidang akademik, penulis juga aktif dalam organisasi. Penulis
pernah menjabat sebagai Koordinator Divisi Pendidikan periode 2011-2012 dan
Wakil Ketua Komunitas Mahasiswa Buddhis Kong Hu Cu (KMBK) Dharma
Virya, Universitas Sanata Dharma, serta berbagai kepanitiaan lainnya.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI