place du laboratoire dans la prise en charge des patients atteints de fièvre hémorragiques virale...
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Place du laboratoire dans la prise en charge des patients atteints de
fièvre hémorragiques virale
MC Hernandez ericHIA Bégin, service de biologie
Introduction
• Fièvre hémorragique virale– toujours le samedi soir– si possible après 20 h 00– chez un malade grave– et bien sur « urgent »
Mais que veux donc le clinicien ?mais que peut faire le laboratoire ?
Objectifs de ce cours
• Présenter les agents des FHV et leur résistance
• Les prélèvements à réaliser
• Modalités de transport
• CAT au laboratoire pour le diagnostic et la prise en charge du patient
• Méthodes de diagnostic utilisables
Généralités
• Virus à ARN
• Enveloppés, fragiles dans le milieu extérieur
• Syndrome commun– hémorragies externes
– hémorragies internes
– état de choc
Famille Genre Virus Fièvre hémorragique
Flaviviridae Flavivirus Amaril
Dengue
Omsk
Kyasanur
Fièvre Jaune
Dengues
Fièvre hémorragique d’Omsk
M. forêt de Kyasanur
Bunyaviridae Phlebovirus
Nairovirus
Hantavirus
Rift Valley
Crimée-Congo
Hantaan
Puumala
Fièvre de la Vallée du Rift (FVR)
Fiévre Hémorragique de Crimée-Congo (CHF-C)
(FHSR)
Arenaviridae Arénavirus Junin
Machupo
Guanarito
Sabia
Lassa
Fièvre Hémorragique d’Argentine
FH de Bolivie
FH du Venezuela
Fièvre de Lassa
Filoviridae Filovirus Marburg
Ebola
Maladie de Marburg
Maladie à virus Ebola
Transmission nosocomiale
• Aérosols
• Contacts étroits avec un malade
• Fluides biologiques– urines
– sang
• Matériel souillé
Désinfection
• Virus fragiles dans le milieu extérieur
• Sensibles aux désinfectants– eau de Javel 3,6° Cl
déchets, déjections, produits biologiques
– eau de javel 0,5° Clmains nues, peau, petit matériel
– virucidie obtenue si > 0,15°Cl
Nota : (1° = 10000 ppm = 1 mg/L)
Désinfection (2)
• Matériel à usage unique– containers étanches, double emballage
– eau de javel 3° Cl (1% de chlore actif) ou éventuellement autoclavage avant incinération.
• Matériel réutilisable – matériel réutilisable ---> peroxyde d’hydrogène,
glutaraldéhyde eau de javel ou stérilisation par autoclavage
Prélèvements
• Diagnostic virologique
• Examens de prise en charge du patients
Diagnostic virologique
• Prélèvements sanguins ++– 2 tubes héparinés (anticoagulant)
Cultures, recherche des antigènes, RT-PCR
– 2 tubes secsRT-PCR, sérologie
• Tissus (patients décédés)foie, rate, cœur, poumons, rein ---> tous virus FHVpeau --> Ebola
Examens de prise en charge
• Limiter les analyses au strict nécessaire précautions de transport / pas de centrifugation
• NFS - plaquettes sur automate (bouchon fermé)
• hémostase (tube décanté, bouchon fermé, sur automate
• frottis pour recherche de paludisme (sous hotte)
• sérologies (sérum inactivé)
• transaminases, créatinine (sérum inactivé)
• bactériologie : hémocultures, LCR
• Assurer • protection du personnel (vêtements, masque, hotte….)
• traçabilité / élimination des déchets
Prélèvement
• Protection physique– tenue Tyvek – masque FFP3 – surblouse, – lunettes, – gants
• Utilisation de matériel de sécurité
• Application des précautions
standard
Etiquetage et renseignements cliniques
• Etiquetage – nom, prénom, date naisance, lieu naissance,– type prélèvement, – date, heure, – nom du préleveur
• Renseignements cliniques: indispensables
Importance des prélèvements
Prélèvements de bonne qualité
Levée de l ’isolement
Prise en charge efficace
Diagnostic précoce
Tertiaire
SecondairePrimaire
Documents
Transport au laboratoire (1)
Transport au laboratoire (2)
Envoi au LSB4 (1)
2 tubes secs 2 tubes héparinés
triple emballage
Transport + 4° C
Envoi laboratoire P4
Envoi au LSB4 (2)
• Prise de contact avec le centre de référence• CR des FHV (Hambourg), Laboratoire P4 Biomérieux (Lyon)
• Triple emballage agréé (ministère transport)
• Etiquetage conforme
• Document de bord• document de transport ou déclaration permanente
• document identifiant les marchandises et la quantité
• consignes en cas d’accident conservées dans la cabine, lues et comprises.
• Réserve au laboratoire: 1 tube sec + tube hépariné• Conservation - 20°C
Obligations du transporteur
• Véhicules fermés ou couverts• Matériel de transport et équipement
- moyens d’extinction incendie
- cale, deux signaux d’avertissement, baudrier ou vêtement fluorescent, lampe de poche.
• Prescriptions générales pour les conducteurs• formation aux prescriptions régissant ce type de transport
• verrouillage du compartiment chargé
• transport de voyageurs interdit
• utilisation des moyens d’extinction incendie
Délai minimal de transport et rendu des résultats 24 -36 heures
Traitement des examens de prise en charge au laboratoire
• Objectifs
– garantir la sécurité du personnel
– Servir le malade
– assurer la traçabilité des actions pour
• prise en charge
• diagnostic
• traitement
Tube citraté décanté:
Groupe sanguin - distribution en microplaque fermée, - désinfectée sous hotte
Sérologie biochimie: Inactivation du sérum sous hotte
• Triton 2% + Tributyril phosphate 2%, (45°C pendant 1 heure)
---> sérologies Test unitaire VIH MNI test---> transaminases---> créatinine
Au laboratoire déconditionnement sous hotte
Tube EDTA (passer tube eau javel)- NFS Plaquettes- frottis sanguin sous hotte fixation alcool Recherche paludisme- test rapide
Examens automatisés
• Priorité +++ – automates fermés
– tube primaires
– désinfection
– neutralisation des déchets
Tests rapides
Examens sur sérum inactivé
• Toutes les sérologies sont possibles
• La coagulation n’est pas fiable sauf PDF,
Fibrinogène et D-Dimères
PCR avec extraction automatique en laboratoire LSB3
Conclusion
• Prise en charge complexe
• Nécessité d’un minimum d ’examens biologiques dans l’intérêt du patient
• Les virus ne « sautent pas »
Faut-il attendre 24 -36 h pour faire un diagnostic de paludisme ?