perbandingan pertumbuhan anggrek dendrobium ...dan ekstrak buah nangka pada media subkultur dapat...

PERBANDINGAN PERTUMBUHAN ANGGREK Dendrobium nobile Linn.

MENGGUNAKAN MEDIA SUBKULTUR DENGAN PENAMBAHAN

EKSTRAK BUAH PISANG AMBON DAN EKSTRAK BUAH NANGKA

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Pendidikan

Program Studi Pendidikan Biologi

Disusun oleh:

Roswita Septevania Nida

NIM: 141434025

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

JURUSAN PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN

ALAM

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENGETAHUAN

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2018

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

i




SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Pendidikan

Program Studi Pendidikan Biologi

Disusun oleh:


NIM: 141434025

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

JURUSAN PENDIDIKAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN

ALAM

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENGETAHUAN

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2018


ii

SKRIPSI




DISUSUN OLEH:


NIM : 141434025

Telah diterima oleh

Pembimbing,

Ig. Yulius Kristio Budiasmoro., S.Si., M.Si. Tanggal 10/Desember/2018


iii

HALAMAN PENGESAHAN


iv

HALAMAN PERSEMBAHAN

“ Aku tahu bahwa segalah sesuatu yang dilakukan Allah

akan tetap ada untuk selamanya; itu tak dapat

ditambahkan dan tak dapat dikurangi; Allah berbuat

demikian, supaya manusia takut akan Dia”

Penghotbah 3:14

Kupersembahkan untuk:

Romo Jhosep Padang Pr. selaku ayahku yang tercinta,

Keluarga besarku, Mama, Bapak, Kakak dan Adikku

Teman-teman Seangkatan P.BIO 14,

Teman-teman Kost Gratia Plena,

serta semua orang yang pernah datang

dan pergi dalam perjalananku,

teman-teman, sahabat, dan ALMAMATERKU


v

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA

Saya menyatakan dengan sesungguhnya bahwa skripsi yang saya tulis ini tidak

memuat karya atau karya orang lain, kecuali yang telah disebutkan dalam kutipan

dan daftar pustaka, sebagaimana layaknya karya ilmiah.

Yogyakarta,19 Desember 2018

Penulis



vi

LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN

PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS

Yang bertanda tangan di bawah ini, saya mahasiswa Universitas Sanata Dharma

Yogyakarta:

Nama : Roswita Septevania Nida

Nim : 141434025

Demi kepentingan pengembangan ilmu penegetahuan, saya memberikan kepada

Perpustakaan Universitas Sanata Dharma karya ilmiah saya yang berjudul:

PERBANDINGAN PERTUMBUHAN ANGGREK Dendrobium Nobile Linn.



Dengan demikian saya memberikan kepada kepala perpustakaan Universitas Sanata

Dharma hak untuk menyimpan, untuk mengalihkan dalam bentuk media lain,

mengelolahya, dalam bentuk pengkalan data, mendistribusikan secara terbatas, dan

mempublikaskannya di internet atau media lain untuk kepentingan akademis tanpa

perlu izin dari saya mampu memberikan royalty, kepada saya selama tetap

mencantumkan nama saya sebagai penulis.

Demikian peryataan ini saya buat dengan sebenarnya

Dibuat di : Yogyakrta

Pada tanggal : 19 Desember 2018

Yang menyatakan,



vii

PERBANDINGAN PERTUMBUHAN ANGGREK Dendrobium Nobile Linn.




Universitas Sanata Dharma

141434025

ABSTRAK

Penggunaan media kultur in vitro anggrek berhubungan dengan komposisi

unsur hara makro, mikro, dan vitamin untuk memenuhi nutrisi pertumbuhan

plantlet anggrek. Penelitian ini menggunakan media dasar subkultur Murashige and

Skoog dengan penambahan ekstrak buah pisang ambon dan ekstrak buah nangka.

Tujuan penelitian ini untuk mengetahui pengaruh penambahan ekstrak buah pisang

ambon dan ekstrak buah nangka terhadap pertumbuhan planlet anggrek

Dendrobium nobile Linn.

Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kultur Jaringan Fakultas Farmasi

Universitas Sanata Dharma. Penelitian ini menggunakan tiga perlakuan, yaitu:

perlakuan media A dengan penambahan ekstrak buah pisang ambon, media B

dengan penambahan ekstak buah nangka, dan media C tanpa penambahan ekstrak

buah. Parameter yang diamati adalah pertambahan bobot plantlet, pertambahan

tinggi, dan persentase hidup plantlet. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan

uji Anova satu faktor untuk mengetahui pengaruh penambahan ekstrak buah pisang

ambon dan ekstrak buah nangka.

Hasil penelitian menunjukan bahwa pemberian ekstrak buah pisang ambon

dan ekstrak buah nangka pada media subkultur dapat meningkatkan pertambahan

bobot plantlet pengaruh secara signifikan (P=0,019). Pertambahan tinggi plantlet

tidak berpengaruh secara signifikan (P=0,105). Persentase hidup paling tinggi

terdapat pada media kontrol sebesar 37%. Hasil penelitian ini dapat disimpulkan

bahwa penggunaan ekstrak buah pisang ambon dan ekstrak buah nangka pada

media subkultur memberikan pengaruh terhadap pertumbuhan plantlet anggrek

Dendrobium nobile Linn.

Kata kunci : Kultur Anggrek Dendrobium, Ekstrak buah, Media Subkultur


viii

COMPARISON OF THE GROWTH ORCHID OF Dendrobium nobile Linn.

USING SUBCULTURE MEDIA WITH ADDITION OF AMBON BANANA

EXTRACT AND JACKFRUIT EXTRACT


Universitas Sanata Dharma

141434025

ABSTRACT

The use of in vitro orchid culture media is related to macro nutrien

elements, micro, and vitamin compositionS to fulfill growth nutritions of

orchid plantlets. This study used the media of Murashige and Skoog

subculture base with the addition of Ambon banana extract and Jackfruit fruit

extract. The purpose of this study was know the effect of ambon banana

extract and jackfruit extract on the growth of Dendrobium nobile Linn. orchid

plantlets.

The study was carried out at Tissue Culture Laboratory, Faculity

Pharmacy, University Sanata Dharma. This study uses three treatments.

Frist, the treatment of media A with the addition of ambon banana fruit

extract. Second, the treatment of media B with the addition of jackfruit

extracts. And third the treatment of media C without the addition of fruit

extract. The observed parameters were plantlet weight gain, height increase,

and percentage of plantlet life. The data obtained ware analyzed using the

one-factor Anova test to determine the effect of the addition of Ambon banana

extract and jackfruit extract.

The results showed that Ambon banana extract and jackfruit extract

on subculture media could increase plantlet weight gain influence

singnificantly (P = 0.019). The increase in plantlet height did not significant

influence (P = 0.105). The highest percentage of life in the control media ay

37%. The results showed that putting ambon banana extract and jackfruit

extract on subculture media has an effect on the growth of Dendrobium nobile

Linn. orchid plantlets.

Keywords: Dendrobium Orchid Culture, Fruit Extract, Subculture Media


ix

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas semua berkat dan

rahmat-Nya sehingga penyusunan skripsi yang berjudul “PERBANDINGAN

PERTUMBUHAN ANGGREK Dendrobium Nobile Linn. MENGGUNAKAN

MEDIA SUBKULTUR DENGAN PENAMBAHAN EKSTRAK BUAH

PISANG AMBON DAN EKSTRAK BUAH NANGKA dapat diselesaikan

dengan baik.

Penulis menyadari bahwa selama proses penyususan skripsi ini banyak

ditemukan kendala dan kesulitan, namun berkat doa, bantuan, bimbingan, dan

dukungan dari berbagai pihak, kendala dan kesulitan tersebut dapat diatasi. Untuk

itu, pada kesempatan ini penulis mengucapkan terimakasih kepada:

1. Tuhan Yang Maha Esa atas segalah berkat dan penyertaan Roh Kudusnya

bagi penulisan skripsi ini hingga dapat berjalan dengan sangat baik.

2. Universitas Sanata Dharma sebagai lembaga intitusi yang telah memberikan

kesempatan bagi penulis untuk menimbah ilmu dan berekspresi di

Pendidikan Biologi.

3. Bapak Ignatius Yulius Kristio Budiasmoro S.Si., M.Si., selaku dosen

pembimbing yang selalu sabar dan tulus dalam membimbing, memberikan

saran, arahan, dan solusi atas berbagai permasalahan dan kesulian yang

dihadapi oleh penulis sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini.

4. Bapak Drs. Antonius Tri Priantoro M.For.Sc., selaku Ketua Program Studi

Pendidikan Biologi atas bantuan masukan, dan arahan bagi penulis dapat

menyelesaikan skripsi ini.


x

5. Ibu Retno Herrani Setyati M.Biotech., selaku wakil Ketua Program studi

Pendidikan Biologi dan Dosen yang juga turut memberikan arahan, saran,

dan semagat kepada penulis saat mengalami kesulitan.

6. Ibu Dra. Maslicha Asy’ari M.Pd., Ibu Puspita Ratna susilawati, M.Sc., Ibu

Ika Yuli Listyarini M.Pd., Ibu Lucia Wiwid Wijayantu M.Si., Ibu Lusia

Diana Handoyo M.Si., Romo Dr. Ir.Paulus Wiryono Priyotamtama, SJ., dan

Bapak Sulistyono S.Si., M.Si., selalu Dosen pengajar di Pendidikan Biologi

yang selalu memberikan saran dan pengalaman bagi penulis.

7. Ibu Yoanni Maria Lauda Feroniasanti M.Si., selaku Kepala Laboratorium

Pendidikan Biologi yang sudah mengijinkan penulis untuk menggunakan

Laboratorium Pendidikan Biologi sebagai tempat Pra-Penelitian.

8. Bapak Agus Handoyo selaku laboran Laboratorium Pendidikan Biologi

yang selalu membantu dan memberikan arahan dalam menggunakan alat-

alat laboratorium.

9. Ibu Damiana Sapta Candrasari S.Si., M.Sc Selaku Kepala Laboratorium

Farmasi yang sudah mengijinkan penulis untuk melakukan penelitian di

Laboratorium Kultur in vitro.

10. Bapak Wagiran laboran LFF dan Pak Sigit selaku laboran Laboratorium

Kultur in vitro yang sudah mempercayakan penulis untuk bekerja mandiri.

11. Teman-teman kost Gratia Plena dan Ibu panji selaku rekan dan wali orang

tua penulis selama di Yogyakarta, yang memberikan doa, dukungan,

memperhatikan, membantu, memberikan semangat, dan saran bagi penulis

hingga akhir penulisan skripsi ini.


xi

12. Go-jek Online yang senantiasa mengantar penulis saat bimbingan skripsi di

Pusat Study Lingkungan.

13. Teman-teman K2KAMSY dan Para Romo Seminari Anging Mammiri dan

Para Frater-frater KAMS yang selalu mendoakan, hiburan, memotivasi dan

memberi dorongan bagi penulis agar selalu semangat dalam mengerjakan

skripsi ini.

14. Teman-teman yang sudah membentu dalam penyusunan skripsi ini, serta

semua pihak yang turut campur tangan dalam membantu dari awal hingga

akhir penulisan skripsi ini.

Penulis juga menyadari bahwa masih banyak kekurangan dalam skripsi

ini. Oleh karna itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun dari

berbagai pihak guna menyempurnakan skripsi ini. Apabila terdapat hal-hal yang

kurang berkenan selama pelaksanaan hingga akhir penulisan skripsi ini, penulis

memohon maaf. Penulis berharap, semoga skripsi ini bermanfaat bagi semua pihak

dan pembaca.

Yogyakarta,19 Desember 2018

Penulis,



xii

DAFTAR ISI

HALAMAN SAMPUL ............................................................................................ i

LEMBAR PENGESAHAN DOSEN PEMBIMBING............................................ ii

HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ iii

HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ iv

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................................. v

LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN ...................................................... vi

PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS .......... vi

PERBANDINGAN PERTUMBUHAN ................................................................. vi

PERBANDINGAN PERTUMBUHAN ................................................................ vii

ABSTRAK ............................................................................................................ vii

ABSTRACT ........................................................................................................... viii

KATA PENGANTAR ........................................................................................... ix

DAFTAR ISI ......................................................................................................... xii

DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xvii

DAFTAR GRAFIK ............................................................................................. xvii

DAFTAR TABEL .............................................................................................. xviii

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xix


xiii

BAB 1 PENDAHULUAN ...................................................................................... 1

A.Latar Belakang ............................................................................................. 1

B. Rumusan Masalah ........................................................................................ 3

C. Tujuan Penelitian ......................................................................................... 4

D.Manfaat Penelitian ....................................................................................... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................. 6

A.Anggrek Dendrobium................................................................................... 6

B. Morfologi dan sistematika Anggrek Dendrobium ....................................... 7

C. Kultur in vitro Anggrek .............................................................................. 11

D.Kultur in vitro ............................................................................................. 13

E. Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Keberhasilan Pertumbuhan Kultur ... 14

1). Eksplant .................................................................................................... 15

a. Ukuran Eksplant ..................................................................................... 15

b. Umur Eksplant ........................................................................................ 15

c. Sumber eksplant ..................................................................................... 16

2). Media ........................................................................................................ 16

3). Lingkungan ............................................................................................... 21

a. Cahaya .................................................................................................... 21

b. Suhu ........................................................................................................ 21

d. Kelembaban ............................................................................................ 23


xiv

e. Wadah atau botol kultur ......................................................................... 24

F. Faktor Pertumbuhan Planlet dalam kultur in vitro ..................................... 24

1. Karakteristik Plantlet .................................................................................. 24

a) Daun ....................................................................................................... 25

b) Akar ........................................................................................................ 25

c) Jaringan angkut ....................................................................................... 25

d) Kemampuan bersimbiosis ...................................................................... 26

2. Faktor lingkungan ...................................................................................... 26

G.Zat Pengatur Tumbuh (Fitohormon) .......................................................... 27

1. Hormon Auksin .......................................................................................... 28

2. Hormon Sitokinin ....................................................................................... 28

F. Ekstrak Buah Nangka (Artocarpus heterophyllus) .................................... 30

G.Ekstrak Buah Pisang Ambon (Musa acuminata Linn.) ............................. 31

H.Hasil Penelitian yang Relevan ................................................................... 33

I. Kerangka Berpikir ...................................................................................... 34

J. Hipotesa...................................................................................................... 37

BAB III METODE PENELITIAN........................................................................ 38

A.Jenis Penelitian ........................................................................................... 38

B. Variabel Penelitian ..................................................................................... 38

1. Variabel bebas ............................................................................................ 38


xv

2. Variabel terikat ........................................................................................... 38

3. Variabel kontrol ......................................................................................... 39

C. Batasan Penelitian ...................................................................................... 39

D.Waktu dan Tempat ..................................................................................... 40

E. Alat Dan Bahan .......................................................................................... 40

1. Alat ............................................................................................................. 40

2. Bahan.......................................................................................................... 40

F. Cara Kerja .................................................................................................. 41

1. Pemilihan Plantlet ...................................................................................... 41

2. Sterilisasi .................................................................................................... 41

3. Pembuatan Ekstrak buah ............................................................................ 42

4. Pembuatan Media ....................................................................................... 42

5. Perlakuaan Plantlet ..................................................................................... 43

6. Subkultur (overplanting) Plantlet ............................................................... 43

7. Pengamatan Plantlet ................................................................................... 44

G.Metode Analisis Data ................................................................................. 45

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 47

A.Hasil Penelitian .......................................................................................... 47

1. Hasil Analisis Pertambahan Bobot Anggrek ............................................. 47

B. Pembahasan ................................................................................................ 55


xvi

1. Pertambahan Bobot Plantlet ................................................................... 62

2. Tinggi Plantlet ........................................................................................ 68

3. Persentase Hidup Plantlet ....................................................................... 69

C. Kendala dan Keterbatasan dalam Penelitian .............................................. 70

BAB V IMPLEMENTASI TERHADAP PEMBELAJARAN ............................. 71

BAB VI KESIMPULAN ...................................................................................... 73

A.Kesimpulan ................................................................................................ 73

B. Saran ........................................................................................................... 73

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 74

LAMPIRAN .......................................................................................................... 77


xvii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2. 1 Struktur bunga anggrek Dendrobium ................................................. 9

Gambar 2. 2 Keseimbangan Auksin dan Sitokinin dalam Proses Morfogenesis

(Wattimena et al., 1992) .................................................................. 29

Gambar 2. 3 Kerangka Konseptual ....................................................................... 37

Gambar 4. 1 Diagram Presentase Anggrek Dendrobium ...................................... 55

Gambar 4. 2 Plantlet Pada Media A (Media MS penambahan ekstrak buah Pisang

Ambon ............................................................................................. 57

Gambar 4. 3 Plantlet Pada Media B (Media MS Penambahan ekstrak Buah

Nangka) ............................................................................................ 58

Gambar 4. 4 Plantlet Anggrek pada media A dan media B (Media A sebelah kiri

dan Media B sebelah kana) .............................................................. 59

DAFTAR GRAFIK

Grafik 4. 1 Rata-rata Bobot Plantlet Anggrek Dendrobium ................................. 47

Grafik 4. 2 Rata-rata Pertambahan Tinggi Plantlet Anggrek Dendrobium ........... 52


xviii

DAFTAR TABEL

Tebel 2. 1 Kandungan Hara Pisang Ambon dan Nangka dalam jumlah 100g ...... 31

Tabel 4.1. 1 Rata-rata Selisih Bobot Anggrek Dendrobium ................................. 48

Tabel 4.1. 2 Hasil Uji Homogeneity of Variasi dari setiap Perlakuan .................. 49

Tabel 4.1. 3 Hasil Uji ANOVA dari setiap Perlakuan Bobot Plantlet .................. 49

Tabel 4.1. 4 Hasil Uji Lanjutan Post Hoc Test dari setiap Perlakuan Bobot Plantlet

............................................................................................................................... 49

Tabel 4.1. 5 Rata-rata Pertambahan Bobot Anggrek Dendrobium ....................... 51

Tabel 4.2. 1 Pertambahan Tinggi Plantlet Anggrek Dendrobium ......................... 51

Tabel 4.2. 2 Hasil Uji Homogeneity of Variasi dari setiap Perlakuan .................. 53

Tabel 4.2. 3 Hasil Uji ANOVA dari setiap Perlakuan Tinggi Plantlet ................. 53

Tabel 4.3. 1 Temperatur Minimum yang dibutuhkan untuk Tumbuh Tanaman

Anggrek ........................................................................................... 66


xix

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Lembar Pengambilan Data ................................................................ 79

Lampiran 2. Documentasi Penelitian .................................................................... 84

Lampiran 3. Komposisi Media Murashige and skoog .......................................... 86

Lampiran 4.Silabus ............................................................................................... 88

Lampiran 5. RPP (Rencana Pelaksanaan Pembelajaran) ...................................... 93

Lampiran 6.Lembar Kerja Siswa (LKS) ............................................................. 104

Lampiran 7. Lembar Instrumen Penilaian Kognitif ............................................ 110

Lampiran 8. Lembar Penilaian Psikomotorik/Sikap ........................................... 117

Lampiran 9. Lembar Instrumen Penilaian Afektif .............................................. 120

Lampiran 10. Format Laporan Tertulis ............................................................... 122

Lampiran 11. Instrumen Penilaian Presentasi ..................................................... 126


1

BAB 1

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Indonesia memiliki keanekaragaman anggrek spesies yang sangat besar.

Diperkirakan 5.000 spesies anggrek tersebar di hutan-hutan Indonesia. Keadaan ini

merupakan potensi yang sangat berharga bagi pengembangan anggrek di Indonesia,

terutama berkaitan dengan sumber daya genetik anggrek yang sangat diperlukan

untuk menghasilkan anggrek-anggrek silangan yang baik dan unggul (Sandra,

2004). Tanaman anggrek termasuk komoditas yang mudah diusahakan. Namun,

bila bibit yang diusahakan tidak dalam kondisi yang prima, maka tidak dapat

berbunga seperti yang diharapkan. Anggrek Dendrobium mampu memenuhi

tuntutan konsumen bunga yang seleranya selalu berubah dari waktu ke waktu. Hal

ini dapat dilihat dari jenis anggrek yang ada di pasar yang memiliki bentuk dan

warna bunga yang bervariasi, serta hadirnya varietas-varietas baru dengan

penampilan yang makin cantik dan menarik (Widiastoety, 2010).

Yolanda (2018), mengatakan bahwa satu polibag anggrek dijual antara Rp.

100 ribu–Rp. 180 ribu, tergantung jumlah bunga dan ukurannya. Menurut Dirjen

Hortikultura kementrian Pertanian dalam (Yolanda, 2018) Bisnis bunga saat ini

makin berkembang di Indonesia, baik permintaan pasar lokal juga tinggi dan

membawa keuntungan. Bunga nusantara yang tidak kalah menarik dan bernilai


2

ekonomis adalah bunga anggrek. Produksi anggrek sekitar 20 juta tangkai per

tahunya.

Kultur in vitro tanaman merupakan teknik budidaya yang banyak ditekuni

oleh para ilmuwan dan peneliti, khususnya di bidang pertanian. Mengingat lahan

pertanian di Indonesia semakin berkurang setiap tahunnya, karena berubahnya

penggunaan fungsi lahan. Permintaan konsumen pada kesediaan bunga anggrek

yang dijadikan sebagai tanaman hias, merupakan usaha menengah masyarakat yang

perlu ditingkatkan. Bisnis bibit anggrek dapat meningkatkan perekomonian

masyarakat dari tanaman hias ke bunga anggrek secara khusus sangat

menguntungkan. Anggrek hasil persilangan memiliki keanekaragaman sifat yang

besar, yang memberi peluang untuk memilih turunan yang terbaik untuk kemudian

diperbanyak secara massal dengan teknik kultur in vitro (Martin et al. 2005; dalam

Widiastoety, 2010).

Teknik kultur in vitro digunakan untuk mendapatkan bibit anggrek

dalam jumlah yang besar dan waktu yang relatif cepat. Secara alami anggrek sering

sulit mengalami perkecambahan, karena faktor lingkungan yang kurang

mendukung. Oleh karena itu, pelaksanaan teknik pembibitan secara kultur in vitro

mampu memberikan keuntungan, baik dari segi penghematan ruang, waktu, tenaga,

maupun uang. Teknik in vitro secara komersial telah banyak menghasilkan tanaman

dalam jumlah banyak dalam waktu yang singkat. Anggrek merupakan salah satu

jenis tanaman yang telah banyak diperbanyak dengan teknik kultur in vitro. Media

yang umum digunakan dalam kultur in vitro anggrek diantaranya adalah media

Vacint and Went (VW), Media Knudson C (KC), dan media Murashige and Skoog


3

(MS). Media kultur in vitro anggrek dapat disederhanakan dengan menggunakan

bahan-bahan yang lebih murah dan mudah didapat misalnya pupuk daun dan

senyawa organik kompleks, seperti air kelapa, ekstrak pisang, ekstrak tauge, ekstrak

tomat, dan ekstrak ragi (Hendaryono, 2000).

Media yang digunakan dalam kultur in vitro anggrek mengandung unsur

hara makro, mikro, vitamin, dan zat pengatur tumbuh (ZPT) atau Fitohormon.

Afriani (2006), berpendapat bahwa penggunaan senyawa organik diketahui dapat

memperbaiki pertumbuhan tanaman yang diperbanyak melalui teknik kultur in

vitro. Air kelapa dan pisang merupakan contoh bahan organik yang di tambahkan

dalam media. Kandungan berbagai zat dalam air kelapa dapat memacu pembelahan

sel, sedangkan kandungan nutrisi dan vitamin yang terdapat dalam pisang dapat

memperbaiki pertumbuhan tanaman.

B. Rumusan Masalah

Adapun rumusan masalah berdasarkan latar belakang adalah sebagai berikut:

1. Untuk mengetahui pengaruh penambahan ekstrak buah pisang ambon dan

esktak buah nangka terhadap pertumbuhan plantlet anggrek Dendrobium

nobile Linn. pada media subkultur Murashige and Skoog

2. Penambahan ekstrak buah pisang ambon dan ekstrak buah nangka

mempengaruhi pertambahan bobot, tinggi, dan persentase hidup plantlet

anggrek Dendrobium nobile Linn. pada media subkultur Murashige and

Skoog.


4

C. Tujuan Penelitian

Berdasarkan latar belakang di atas, rumusan masalah yang dapat diambil adalah

sebagai berikut:


ekstrak buah nangka terhadap pertumbuhan planlet anggrek Dendrobium

nobile Linn. pada media subkultur Murashige and Skoog.


ekstrak buah nangka terhadap pertambahan bobot, tinggi, dan persentase

hidup planlet anggrek Dendrobium nobile Linn pada media subkultur

Murashige and Skoog.

D. Manfaat Penelitian

Adapun manfaat dalam penelitian yang saya lakukan yaitu:

- Bagi Peneliti

1. Sebagai sarana untuk mengembangkan kemampuan dan teknik

di bidang kultur in vitro

2. Sebagai sarana meneliti spesies-spesies anggrek yang ada di

Indonesia.

- Bagi Dunia Pendidikan

1. Sebagai sarana media belajar bagi peserta didik tingkat SMA

XII, Bab Bioteknologi, Sub-Bab Bioteknologi Modern (Kultur

in vitro), terkhususnya pada saat praktikum.

2. Sebagai sarana kegiatan salah satu mata pelajaran yang dapat

menarik minat belajar peserta didik.


5

3. Sebagai sarana guru mengembangkan ide-ide dan modifikasi

belajar yang menarik bagi peserta didik.

- Bagi Masyarakat

1. Menciptakan peluang bisnis tanaman hias dengan

memanfaatkan teknik kultur in vitro dalam skala rumah tangga

dengan memanfaatkan bahan-bahan organik yang mudah

didapat.

2. Menciptakan alternatif komposisi media subkultur dari bahan-

bahan organik dari ekstrak buah sebagai bahan tambahan media

kultur anggrek.


6

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Anggrek Dendrobium

Anggrek berbeda dengan tanaman berbunga pada umumnya karena

memiliki embrio yang sangat kecil, berdiameter ±0,1 mm. Biji anggrek tidak

mempunyai endosperm, karena tidak terjadi penyerbukan ganda secara

sempurna. Sehingga nukleusnya tidak berkembang (Arditti, 1992). Keadaan

ini menyebabkan biji anggrek sulit berkecambah secara alami.

Perkecambahan terjadi jika ada jamur mikoriza yang menginfeksi biji

anggrek sehingga dapat mensuplai kebutuhan bahan-bahan organik untuk

pertumbuhannya. Saat berkecambah embrio membentuk protocorm, suatu

struktur seperti corm yang berwarna hijau dan mampu melakukan

fotosintesis. Kemudian tunas dan akar baru terbentuk jika kandungan

senyawa-senyawa organik dalam protocrom tercukupi (Wattimena et al.,

1992).

Bunga anggrek memiliki kelebihan dibandingkan bunga-bunga yang

lain, yaitu sebagai berikut:

1. Mempunyai keragaman atau variasi bunga, baik bentuk, ukuran, dan

warna.


7

2. Mempunyai masa berbunga yang cukup lama. Sekitar 1-3 bulan.

walaupun bebrapa jenis anggrek ada yang berbunga dalam satu hari.

3. Banyak digunakan untuk berbagai kegiatan, seperti pernikahan, parcel,

rangkaian bunga, bunga potong, bunga anggrek dalam pot, dan anggrek

koleksi.

4. Mempunyai jaringan pemasaran yang cukup luas dan beragam, baik di

pasar nasional maupun pasar internasional.

Anggrek termasuk ke dalam familia Orchidaceae, suatu family besar

yang memiliki 17.000 sampai 25.000 spesies (Kurzweil dan Kocyan, 2002).

Dendrobium merupakan anggota familia Orchidaceae, Subfamilia

Epidendroideae, Tribe (suku bangsa/rumpun) Dendrobieae, Subtribe

Dendrobiinae. Dendrobium merupakan genus besar yang terdiri dari sekitar

900 spesies (Mc. Donald et al., 1998). Sampai sekarang telah banyak

dilakukan persilangan pada tanaman anggrek. Tanaman anggrek memiliki

kemampuan untuk disilangkan antar spesies maupun antar genera. Keadaan

ini sangat bermanfaat dalam usaha mendapatkan variasi warna, bentuk dan

ukuran bunga untuk memenuhi kebutuhan permintaan konsumen.

B. Morfologi dan sistematika Anggrek Dendrobium

Sebagian besar anggrek epifit memiliki batang yang berbentuk bulb,

oleh karena itu batang anggrek disebut pseudobulb (batang semu).

Berdasarkan jumlah ruas (internode), batang semu anggrek dapat

digolongkan menjadi dua, yaitu yang mempunyai banyak ruas (tipe


8

homoblastik) dan yang hanya mempunyai satu ruas (tipe heteroblastik) (Hew

dan Yong, 2004).

Daun anggrek sangat beragam dilihat dari bentuk, ukuran, dan

ketebalannya. Kebanyakan anggrek mempunyai bentuk daun yang mirip

dengan daun tanaman monokotil lainnya, yaitu memanjang dengan tulang

daun sejajar dan tepi daun yang rata. Ketebalan daun anggrek digolongkan

menjadi dua yaitu tebal berdaging dan tipis. Daun yang tebal dijumpai pada

jenis anggrek Dendrobium (Yusnita, 2010).

Bentuk akar jenis anggrek sangat dipengaruhi oleh habitatnya. Akar

anggrek epifit merupakan akar udara atau akar nafas yang menggantung

bebas atau menempel pada tempat anggrek menempel. Akar anggrek

umumnya lunak dan mudah patah. Ujungnya meruncing, licin, dan sedikit

lengket. Akar anggrek mempunyai lapisan velamen yang bersifat berongga

(spongy) dan pada bagian bawahnya terdapat lapisan yang mengandung

klorofil. Pada anggrek simpodial, akar keluar dari dasar pseudobulb atau

sepanjang rhizoma (Hew dan Yong, 2004).

Bunga anggrek mempunyai bentuk, susunan, warna, dan corak yang

sangat beragam. Pada bagian karangan bunga terdiri dari poros malai bunga

(axis) dan kuntum-kuntum bunga. Dalam satu malai atau tandan bunga

terdapat 1-40 kuntum bunga tergantung jenisnya. Ukuran kuntum bunga

sangat bervariasi dari 2-3 cm hingga 10-15 cm. Kebanyakan bunga anggrek

merupakan bunga sempurna, yaitu mempunyai organ reproduksi jantan


9

(androecium) dan organ reproduksi betina (gynoecium). Petal atau mahkota

bunga berjumlah tiga buah, dua diantaranya terletak berselang-seling dengan

kelopak bunga, sedangkan yang terbawah mengalami modifikasi menjadi

labellum. Sepal atau kelopak bunga juga berjumlah tiga buah, yang teratas

disebut dengan sepal dorsal, dan dua lainnya di bagian samping disebut sepal

lateral. Di bagian tengah bunga terdapat bunga (column atau gynostemium)

yang merupakan organ reproduksi jantan dan betina (Yusnita, 2010).

Gambar 2. 1 Struktur bunga anggrek Dendrobium

Keterangan gambar: Morfologi Bunga Anggrek (a). Bunga (b). Sepal dorsal (c).

Sepal lateral (d). Petal (e). Bibir bunga (f). Daun pelindung bunga (g). Colum

(sumber:http://repository.usu.ac.id/bitstream/handle/123456789/51199/Chapter%

20II.pdf;jsessionid=8C94D5E8B50B888FBE5754D606A928CF?sequence=4)

Buah dari anggrek Dendrobium berwarna kuning bila telah masak,

memiliki bentuk bulat dengan tiga rusuk sejati. Biji-biji dalam polong

terkumpul di tiga rusuk sejati yang berjumlah 1.300-4.000.000 biji dalam satu

polong (Pierik, 1987). Bentuk polong buah anggrek dan waktu yang

diperlukan sejak pembuahan hingga buah masak bervariasi tergantung genus

atau spesies. Kebanyakan buah Dendrobium memerlukan waktu 3-3,5 bulan

hingga masak (Yusnita, 2010).


10

Menurut Hew dan Yong (2004), setelah terjadi pembuahan maka

ovarium akan membesar dan akan membentuk polong. Pada polong buah

anggrek terdapat biji yang jumlahnya sangat banyak dan ukurannya sangat

kecil. Pierik (1987), menyatakan bahwa biji anggrek berukuran sangat kecil

dengan panjang 1-2 mm dan lebar 0,5-1 mm sehingga sering disebut Dust

seed. Biji anggrek terdiri dari testa yang tebal (kulit biji) yang membungkus

embrio, embrio sendiri hanya terdiri dari 100 sel. Testa merupakan jaringan

mati yang berisi udara 96 %. Menurut Koch dan Schultz 1975; Arditti 1992,

bobot biji anggrek Dendrobium/polong bisa lebih dari 500 mg/polong. Biji

anggrek relatif sulit untuk berkecambah karena di dalamnya tidak terdapat

endosperm. Di bagian distal embrio terdapat titik tumbuh potensial.

Sistem klasifikasi anggrek Dendrobium menurut (Dressler dan

Dodson 2000; dalam Widiastoety 2010) dapat dilihat pada Tabel 2.1 di bawah

ini.

Tabel 2. 1 Klasifikasi ilmiah Anggrek Denrobium nobile Linn.

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta

Subdivisi : Angiospermae

Kelas : Monocotyledoneae

Ordo : Orchidales

Famili : Orchidaceae

Subfamili : Epidendroideae

Rumpun : Epidendreae


11

Subrumpun : Dendrobiinae

Genus : Dendrobium

Spesies : Dendrobium nobile Linn.

Gambar 2. 2 Anggrek botol Dendrobium nobile Linn. (Dokumentasi pribadi)

C. Kultur in vitro Anggrek

Anggrek merupakan salah satu tanaman yang telah dikembangkan

secara teknik kultur in vitro untuk tujuan komersial. Permintaan terhadap

anggrek yang semakin meningkat menuntut adanya penyediaan bibit dalam

jumlah banyak pada waktu relatif singkat. Sebelum adanya teknik kultur in

vitro, anggrek yang diperdagangkan jumlahnya sedikit sehingga harganya

menjadi mahal. Hal ini disebabkan oleh masih sulitnya perbanyakan tanaman

tanaman anggrek. Secara alami biji anggrek tidak dapat tumbuh akibat tidak

memiliki endosprem. Biji anggrek dapat berkecambah jika bersimbiosis

dengan jamur mikoriza yang mampu mencukupi kebutuhan hara (Arditti,

1992). Perbanyakan melalui bagian tanaman secara vegetatif menghadapi

kendala dalam hal jumlah bahan tanaman yang tersedia.


12

Kultur jaringan pada anggrek pertama kali dilakukan oleh Knudson,

seorang Profesor di Cornell University pada tahun 1922 (Mc. Donald et al,

1998). Knudson mempublikasikan hasil penelitiannya tentang penanaman biji

anggrek dalam media tanam yang mengandung unsur hara pada lingkungan

yang aseptic. Tanaman anggrek secara in vitro dengan menggunakan potongan

bagian tanaman Phaius yang telah dewasa pertaman kali berhasil dilakukan

oleh John watknis pada tahun 1940.

Teknik kultur in vitro anggrek semakin berkembang seiring dengan

meningkatnya ilmu pengetahuan dan teknologi. Berbagai penelitian dilakukan

untuk menemukan media yang paling tepat bagi pertumbuhan setiap jenis

anggrek. Media MS merupakan salah satu media yang banyak digunakan untuk

berbagai jenis tanaman hortikultura (Conger, 1981). Banyak penelitian yang

dilakukan untuk melakukan modifikasi media dalam rangka menghasilkan

pertumbuhan tanman yang lebih baik, di antaranya dengan penambahan bahan

organic. Penambahan air kelapa 150 ml/L ke dalam media Knudson C dapat

memperbaiki pertumbuhan plantlet anggrek Dendrobium (Harjadi dan

Pamenang, 1984). Penambahan air kelapa sampai 300 ml/L mengaktifkan

penurunan pertumbuhan pada plantlet anggrek Dendrobium (Widiastoety dan

syafril, 1993). Menurut Hendaryono (2000), penambahan pisang ambon masak

yang telah di haluskan sebanyak 150-200 g dalam media VW dapat membuat

pertumbuhan plb anggrek menjadi lebih aktif.


13

D. Kultur in vitro

Kultur in vitro adalah istilah umum yang ditunjukan pada budi daya

secara in vitro (menumbuhkan bagian tanaman di dalam botol) terhadap

berbagai bagian tanaman yang meliputi batang, daun, akar, bunga, kalus, sel,

protoplasma, dan embrio. Bagian-bagaian tersebut yang diistilahkan sebagai

eksplant, diisolasi dari kondisi in vivo dan kultur pada medium buatan yang

steril sehingga dapat beregenerasi dan berdiferensiasi menjadi tanaman

lengkap (Street, 1973; dalam Katuuk, 1989). Hartmann et al (1990)

menggunakan istilah terkait yang lebih spesifik lagi, yaitu mikropropagasi

terhadap pemanfaatan kultur jarigan dalam upaya perbanyakan tanaman.

Dimulai dari pengkulturan bagian tanaman kecil (plantlet) secara aseptik di

dalam tabung kultur atau wadah lain yang serupa.

Menurut Sandra (2004), menggunakan teknik kultur in vitro

sederhana memperoleh suatu hasil yang sangat mengagumkan. Peluang bisnis

yang sangat positif yang bisa diperoleh dengan melakukan teknik kultur in

vitro sederhana sebagai berikut:

a. Dengan teknik kultur meristem dapat menghasilkan anggrek bebas

virus dan penyakit. Teknik ini digunakan umtuk memperbanyak

anggrek spesies yang telah terserang hama penyakit, temaksud virus.

b. Dengan teknik kultur anter dapat dihasilkan anggrek dengan genetik

haploid (1n) sehingga bentuknya lebih kecil dibandingkan dengan

anggrek diploid (2n). Dengan demikian, dapat mengghasilkan anggrek

mini. Disamping itu, teknik kultur anter berpeluang memunculkan sifat


14

resesif yang mempunyai sifat unggul yang pada kondisi normal tidak

akan muncul karna tertutup sifat yang dominan.

c. Dengan teknik klon dihasilkan anggrek dalam jumlah banyak dan

seragam. Sebagai penganggrek telah mampu melakukan teknik ini.

Pada dasarnya semua bagaian anggrek yang masih hidup dapat

dikulturkan dan diklonkan.

d. Dengan teknik mutasi, dapat memperoleh anggrek mutasi yang

harganya relatif mahal. Secra alami, peluang mutasi hanya dapat terjadi

1 berbanding 100.000.000. Namun, dengan kultur in vitro mutasi bisa

diatur sesuai keinginan.

e. Dengan teknik pertumbuhan minimal dalam kultur jaringan, kita bisa

mengoleksi berbagai jenis anggrek tanpa harus memiliki lahan yang

luas dan perawatan yang intensif. Teknik ini dapat diterapkan untuk

mengoleksi anggrek spesies asli indonesia atau anggrek spesies luar

negeri yang masih mempunyai keaslian genetik dan sangat penting bagi

pemulihan anggrek. Teknik ini juga dapat digunakan untuk mrngoleksi

anggrek komersial unggulan dengan nilai yang tinggi.

E. Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Keberhasilan Pertumbuhan Kultur

Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan dan perkembangan

kultur in vitro, selain faktor sterilisasi keberhasilan kultur in vitro ada 3 faktor

yang mempengaruhi keberhasilan dan kegagalan dalam melakukan kegiatan,

yaitu: 1). Eksplant, 2). Media, dan 3). Lingkungan (Katuuk, 1984).


15

1). Eksplant

Eksplant adalah bagian kecil jaringan atau organ yang

dikeluarkan/dipisahkan dari tanaman induk kemudian dikulturkan. Berhasil

tidaknnya pengkulturan Eksplant tergantung pada faktor yang dimiliki oleh

Eksplant itu sendiri. Menurut Hughes (1981), faktor-faktor itu meliputi:

ukuran eksplant, umur eksplant, dan sumber eksplant

a. Ukuran Eksplant: Ukuran eksplant sangat menentukan proses

pengkulturan. Ukuran eksplant yang terlalu besar, maka makin besar pula

kemungkinan mendapatkan jaringan yang rusak akibat kontaminasi

(Seabrook, 1980). Biasanya eksplant yang terlalu kecil, mempunyai daya

tahan kurang. Ukuran eksplant yang paling baik berkisar antara 0,5

sampai 1.0 cm, namun ukuran ini dapat bervariasi, tergantung pada

material tanaman yang dipakai serta jenis tanaman.

b. Umur Eksplant: Umur eksplant sangat berpengaruh serta tipe dan daya

morfogenesis. Jaringan yang paling banyak memiliki bagian

meristematik ialah bagian tanaman yang masih muda, serta belum

banyak berdiferensiasi. Pada bagian tunas dan daerah nodus batang, dan

ketiak daun memiliki jaringan muda. Pada tanaman berkayu, jaringan

embrio dan tanaman muda atau seedling, serta tunas, ternyata

mempunyai kapasitas beregenerasi yang sangat tinggi. Sel dan jaringan

yang masih muda dinamakan juvenile akan tetap muda dalam

pengkulturan sehingga daya daya regenerasi masih ada, dibandingkan

dengan sel-sel tua.


16

c. Sumber eksplant: Sumber eksplant yang dimaksud ialah tanaman induk

dari mana eksplant diperoleh. Tanaman yang dijadikan sebagai sumber

eksplant haruslah tanaman yang sehat, dan bertumbuh baik.

2). Media

Media mempunyai dua fungsi utama yaitu: memasok (suplai)

nutrisi, dan mengarahkan pertumbuhan melalui zat pengatur tumbuh..

Dalam media kultur in vitro kelengkapan unsur sangat dibutuhkan, hal ini

sangat berpengaruh dengan keseimbangan antara garam-garam organik,

garan anorganik, serta zat pengatur pertumbuhan didalam media. Selain

itu, pertumbuhan plantlet serta jumlah pembentukan tunas dapat

dipengaruhi juga oleh keadaan fisik media. Keadaan fisik media dapat

berbentuk: padat, cair atau stationary cair.

Media padat adalah media yang dipadatkan dengan maksud agar

plantlet tidak mudah berpindah tempat. Memadatkan media dapat

menggunakan Agar dikenal juga gelrite. Agar adalah bahan yang banyak

digunakan untuk media padat. Media padat memiliki keuntungan dan

kekurangan, ada pun kelebihan penggunaan media padat, yaitu:

a).Perkembangan akar serta tunas plantlet mudah untuk diamati. Hal ini

terutama bagi plantlet yang berukuran sangat kecil, b).Tidak semua bagian

plantlet yang tertanam dalam medium, sehingga aerasi yang berkenan

dengan sirkulasi udara bagi plantlet masih ada, dan tidak memerlukan

aerasi tambahan, c). Apabila terjadi kontaminasi, maka plantlet yang tidak

terkontaminasi masih dapat diselamatkan, dengan jalan memindahkan ke


17

botol kultur yang baru. Kekurangan media padat antara lain: a). Hanya

sebagian permukaan plantlet yang mengalami aerasi yang baik, b). Kontak

antar medium dan plantlet (sel-sel), masih terbatas yaitu hanya pada bagian

yang kena medium. Akibatnya perkembangan terjadi tidak seimbang

(George and Sherrington, 1984; dalam Kattuk, 1989).

a. Nutrisi

Nutrisi atau unsur-unsur dibutuhkan oleh jaringan tanaman dikelompokan

menjadi dua, yaitu: Unsur hara makro dan mikro.

a) Unsur makro merupakan unsur yang dibutuhkan dalam jumlah besar,

jenis-jenis yang termaksud unsur makro adalah:

- Nitrogen (N). Nitrogen berpengaruh dalam menaikan daya tumbuh

tanaman. Unsur ini sangat penting dalam proses pembentukan

klorofil, terpenoid, asam inti, beberapa hormon tumbuhan serta asam

amino. Bila tanaman kekurangan nitrogen, tanaman akan terlihat

warna kekuningan pada daun, sedangkan bila terlalu banyak

menyebabkan perkembangan vegetatif akan lebih besar dari pada

perkembangan buah (Lailiya, 2016). Sumber nitrogen padaa media

kultur berasal dari amonium (NH4+) dan yang paling penting nitrat

(NO3-). Jumlah amonium yang digunakan berkisar 2-8 mM

sedangkan nitrat sekitar 25-40 mM.

- Fosfor (P), Menurut Sutejo (2002) fosfor berperan pada tanaman

antaranya merangsang pertumbuhan akar tanaman muda ataupun

mempercepat pertumbuhan akar semai, merangsang pembentukan


18

bagian-bagaian tubuh tanaman saat pembiakan generatif,

memperkuat tanaman dewasa. Dalam jaringan meristematik

merupakan daerah yang cepat pertumbuhan biasanya banyak

terdapat fosfor. Terlalu banyak fosfor dalam media dapat

menghambat pertumbuhan Plantlet. Hal ini disebabkan oleh adanya

persaingan penyerapan unsur lainya seperti seng (Zn), besi (Fe), dan

tembaga (Cu). Sumber fosfor dalam media diberkan dalam bentuk

natrium hidrofosfat (NaH2PO4.H2O) atau kalium Hidrofosfat

(KH2PO4).

- Potasium (K). Potasium adalah unsur yang berguna untuk

pembelahan sel, sintesa karbohidrat dan protein, pembuatan klorofil

serta untuk mereduksi nitrat. Potasium terdapat pada sel-sel muda

tanaman, juga berperan dalam mengatur pemeliharaan dari masa

vegetatif ke masa generatif sehinga bunga dan bakal buah tidak

gugur (Rahman, 2014). Potasium harus diberikan dalam media

dengan konsetrasi 20 mM. Bentuk ikatan potasium yang banyak

digunakan dalam media kultur yakni KNO3 dan KH2PO4 (Gamborg,

1986; dalam Kattuk, 1989).

- Magnesium (Mg). Magnesium adalah elemen utama dalam molekol

klorofil. Selain magnesium bekerja sebagai aktivator enzim. Dalam

media kultur sering diberikan dalam bentuk MgSo4.7H2O.


19

- Belarang (S). Belerang terdapat dalam beberapa molekul protein,

berguna untuk perkembangan akar. Belerang diberikan kedalam

media dalam bentuk Mg SO4.7H2O atau {Ca(No3)2.4H2O}.

b) Unsur mikro: unsur mikro merupakan unsur yang dibutuhkan dalam

jumlah sedikit tetapi harus tersedia. Kegunaan unsur mikro yang

diperlukan bagi tumbuhan untuk dapat bertahan hidup dan

mendukung pertumbuhan akan dijabarkan sebagai berikut ini:

- Besi (Fe). Besi berperan dalam sintesis klorofil. Dalam media kultur

zat besi terlebih dahulu dicampur dengan EDTA (Asam etilen

diamin tetraasetik). Zat besi tidak boleh dicampurkan secara

langsung ke dalam media di karenakan sifat besi yang tidak mudah

larut sehigga dapat menimbulkan endapan.

- Mangan (Mn). Pada tumbuhan yang tumbuh di tanah, kekurangan

mangan dapat menyebabkan klorotik (tanaman berwarna pucat) dan

sering menunjukan bintik-bintik hitam yang tidak lain adalah

kematian setempat. Dalam media kultur in vitro, unsur ini berguna

untuk membentuk membran kloroplas, mangan diberikan dalam

bentuk MgSO4 (Janick, 1972; dalam Kattuk, 1989).

- Boron (B). Unsur boron berperan dalam perombakan gula.

kekurangan boron dapat mengakibatkan terganggunya sintesa

sitokinin. Bila kebanyakan boron dapat mengakibatkan tanaman

mati, boron diberikan dalam bentuk H3BO3 (Kattuk, 1989).


20

- Seng (zn). Seng merupakan unsur penting dalam pembentukan

protoplasma. Tanaman yang berkecukupan seng mampu

memproduksi IAA endengenous.

- Kobalt (Co). Kegunaan kobalt dalam kultur in vitro adalah untuk

pembentukan asam inti dan juga untuk mengikat unsur nitrogen.

- Tembaga (Cu). Berperan penting dalam proses konverensi energi.

- Molibdenum (Mo). Zat ini berguna dalam proses pengikatan

nitrogen dari atsmosfer menjadi nitrat dengan bentuan bakteri

pengikat N. Selain itu juga berguna dalam proses pembentukan

klorofil. Bila diberikan secara berlebihan dapat merusak jaringan

tanaman. dibutuhkan oleh tanaman dalam jumlah kecil akan sangat

efektif. Kelebihan Mo akan menjadi racun bagi tanaman (Sutejo,

2002).

c) Vitamin

Pemberian vitamin dalam media kultur merupakan suatu

keharusan lantaran tanaman yang dikulturkan tersebut belum

mampu untuk membuat vitaminnya sendiri. Adapun jenis vitamin

yang sering diberikan:

- Thiamin HCL di mana berfungsi sebagai koenzim yang

membantu daur asam organik dalam proses respirasi;

- Nicotiamida yaitu suatu koenzim yang menjadi aktif dalam

reaksi cahaya;

- Myi-Inositol adalah alkohol gula;


21

- Asam panthenik adalah suatu jenis vitamin B yang bekerja aktif

sebagai koenzim dan berfungsi dalam metabolisme zat lemak;

- Pyridoxine (vitamin B6) adalah koenzim yang membantu reaksi

kimia dalam proses metabolisme;

- Choline sebagai terpenoid yang ada dalam vitamin B

- Riboflavin dimana dikenal dengan vitamin B2.

3). Lingkungan

Kultur in vivo memiliki faktor lingkungan utama yang harus

dipenuhi ialah lahan, suhu, pH, serta kelembaban. Sangat berbeda dalam

kultur in vitro bagian lahan akan digantikan dengan media tanam, sehingga

yang akan dibahas ialah faktor-faktor lingkungan yang meliputi: cahaya,

suhu, pH, kelembaban, dan wadah atau botol kultur.

a. Cahaya: Bagi tanamn in vitro cahaya berperan dalam pertumbuahan

dan perkembangan yang disebut fotomorfogenesis. Pertumbuhan sel

kultur in vitro yang teratur pada dasarnya tidak dihambat oleh cahaya.

Malah sebaliknya pembelahan sel mula-mula pada plantlet, serta

pertumbuhan jaringan kalus, banyak dibatasi/dihambat oleh persoalan

cahaya. Ada tiga pokok yang berpengaruh dalam cahaya ialah:

Kandungan fisik cahaya, sumber cahaya, serta persyaratan cahaya

dalam kultur in vitro.

b. Suhu: Pada umumnya kultur in vitro memerlukan suhu sebesar 25-

300C. Namun, pertumbuhan optimum hal ini akan berbeda-beda pada

setiap spesies, serta jenis eksperimen. Ada juga yang menyukai suhu


22

tertentu dan ada pula yang memiliki variasi suhu. Suhu rendah sangat

berpengaruh pada perkembangan embrio.

c. pH: Keasaman serta kebasahan media juga merupakan faktor

lingkungan plantlet yang sangat menentukan. Keadaaan ini ditandai

dengan pH, yaitu logaritma dari konsentrasi ion H, ditulis pH =

-log[H+]. pH ditulis dengan unit 1-14, selanjutnya golongan pH dibagi

dua, yaitu 1.) larutan bersifat asam pH 1-7; 2.) larutan bersifat basa,

pH 7-14, dan 3) bersifat netral berada di pH-7 (Janick, 1972; dalam

Kattuk, 1989).

Walaupun pH media akan berubah selama proses

pengkulturan, pH harus diatur lebih dahulu sebelum diinokulasi.

Manfaat pH dalam media adalah untuk menjaga kestabilan membran

sel, mengatur garam-garam agar tetap dalam bentuk terlarut,

membantu penyerapan zat hara, mengatur sifat gel agar (George dan

sherringthon, 1984).

Kultur akan berubah menjadi asam diakibatkan adanya

pembentukan asam-asam organik, atau penambahan ion amonium

dari sumber nitrogen. Sebaliknya media kultur akan berubah menjadi

basa bila ion nitrat dari Na atau K, telah digunakan oleh sel, atau ion

amonium dilepaskan dalam media, atau reduksi nitrat (Martin, 1980).

Keasaman medium adalah salah satu faktor yang

mempengaruhi keberhasilan kultur in vitro tanaman. Pada

umumnya, keasaman medium ditetapkan antara 5,6-5,8. Medium


23

yang terlalu asam (pH 7,0) dapat

menghambat pertumbuhan dan perkembangan Plantlet (Pierik et al,

1997). Hal itu mungkin disebabkan oleh tidak tersedianya sejumlah

unsur hara pada kisaran pH tertentu. Pada pH tinggi, unsur-unsur

seperti besi, seng, mangan, tembaga, dan boron mengalami

presipitasi sebagai hidroksida sehingga tidak tersedia bagi jaringan

yang dikulturkan. Sedangkan pada pH rendah, unsur-unsur seperti

kalium, magnesium, belerang, fosfor, dan molibdenum menjadi

tidak tersedia. Selain mempengaruhi ketersediaan unsur-unsur hara,

pH mempengaruhi pula proses pemadatan medium. Menurut Taji et

al., 1997; dalam Zulkarnian, 2009, medium akan menjadi terlalu

keras apabila pH >6,0, sedangkan pH

24

e. Wadah atau botol kultur: Ukuran botol kultur sangat mempengaruhi

pertumbuhan kultur in vitro. Wadah kultur jarinagn sangat cocok

bila diadakan dalam botol kultur berukuran kecil. Namun setelah

pertumbuhan berlangsung, plantlet akan dipindahkan ke botol kultur

yang lebih besar.

Eksplant berukuran kecil, dapat dikulturkan dalam botol

yang memiliki diameter 1,5 cm, kemudian untuk melihat

pertumbuhan akar maka diameter tabung kultur digani 2,5 cm.

Kultur pucuk akan membutuhkan tabung kultur berukuran 2,5 cm x

10 cm. Selanjutnaya akan diganti dengan tabung berukuran 6 cm x

15 cm, hingga perkembanggan selanjutnya akan dipakai botol

erlemayer berukuran 50-125 ml.

Wadah kultur tidak tergantung pada botol kultur buatan

pabrik. Banyak macam wadah yang bisa dijadikan tempat kultur

antara lain, botol-botol bekas obat-obatan atau bekas minuman atau

makan. Wadah berbahan gelas adalah yang paling baik, karena

mudah untuk dicuci dan digunakan kembali. Botol kultur berbahan

plastik hanya bisa digunakan sekali pakai saja, dan akan sulit untuk

disterilkan kembali.

F. Faktor Pertumbuhan Planlet dalam kultur in vitro

1. Karakteristik Plantlet

Plantlet merupakan tanaman baru atau lengkap yang telah

mempunyai akar, batang dan daun (tanaman mini hasil perkembangan


25

kalus). Eksplan ialah bagian dari tanaman yang digunakan dalam

perbanyakan tanaman dengan metode kultur jaringan (kultur in vitro) adalah

pucuk muda, batang muda, daun muda, kotiledon, hipokotil, endosperm,

ovari muda, anther, embrio, dll.

Menurut Zulkarnian (2009), beberapa karakteristik khas tanaman

hasil perbanyakan kultur in vitro diuraikan bagai berikut:

a) Daun: Plantlet memiliki daun-daun yang tipis, lunak, tidak aktif

berfotosintesis, dan lebih sedikit jumlahnya sehingga tidak dapat

menerima cahaya secara efisien dan rongga udara mesofil yang lebih

besar dibandingkan tanaman normal. Stomata tidak berfungsi dengan

sempurna dan tidak menutup sehingga meyebabkan cekaman air pada

beberapa jam pertama aklimatisasi. Perkembangan lapisan lilin

(kutikula) yang kurang berkembang sehingga tingginya kelembaban di

wadah kultur (90-100%) hal ini mengakibatkan tanaman kehilangan air

dalam jumlah yang cukup besar melalui evaporasi kutikula pada saat

tanaman di pindahkan ke tanah karena kelembaban udara dan kondisi

in vivo jauh lebih rendah dari pada kondisi in vitro.

b) Akar: sistem perakaran pada plantlet yang berasal dari kultur in vitro

cenderung mudah rusak dan tidak berfungsi dengan sempurna. Hal ini

dikarenakan akar yang terbentuk sedikit atau tidak ada sama sekali.

c) Jaringan angkut: sistem pembuluh angkut antar pucuk dan akar sering

tidak terhubung denagn sempurna sehingga menyebabkan


26

berkurangnya transportasi air dan unsur hara, dalam keadaan in vitro

plantlet bersifat heterotrof.

d) Kemampuan bersimbiosis: plantlet dari tanaman yang pada kondisi

pertumbuhan normal bersimbiosos dengan bakteri atau mikoriza yang

memiliki kemampuan bersimbiosis yang sangat terbatas pada saat

dipindahkan dari lingkungan in vitro ke lingkungan in vivo.

2. Faktor lingkungan

Faktor lingkungan kultur in vitro merupakan hasil interaksi antara

bahan tanaman, wadah kultur, dan lingkungan eksternal ruang kultur,

memiliki pengaruh yang sangat besar terhadap suatu sistem in vitro. Secara

teoritis, semua variabel di dalam setiap wadah kultur pada ruang kultur yang

sama adalah seragam. Sebagai konsekuensinya, hal yang sama terjadi pula

di wadah-wadah kultur pada ruang kultur yang lain. Agar pertumbuhan

kultur seragam maka keseragaman faktor lingkungan harus diupayakan,

tidak hanya di dalam ruang kultur, tetapi juga di dalam semua wadah kultur

dengan cara menggunakan wadah yang seragam (Zulkarnain, 2009).

Lingkungan tumbuh yang dapat mempengaruhi regenerasi

tanaman menurut Gunawan, 1995; dalam Zulkarnian, 2009, meliputi:

a) Temperatur;

b) Penyinaran: panjang penyinaran, intensitas penyinaran, dan kualitas

sinar; serta

c) Ukuran wadah kultur.


27

G. Zat Pengatur Tumbuh (Fitohormon)

Hormon pada tumbuhan dapat didefinisikan dalam berbagai istilah,

hormon pada tumbuhan atau zat pengatur tumbuhan tanaman (fitohormon).

Zainal (1983), Mengemukakan zat pengatur tumbuhan pada tanaman (plant

regulator) adalah senyawa organik yang bukan unsur hara (nutrient), yang dalam

jumlah sedikit dapat mendukung (promote), menghambat (inhibit), dan

mengubah proses fisiologi tumbuhan. Zat Pengatur Tumbuh (Plant Growth

Regulator) adalah senyawa organik bukan nutrisi yang dalam konsentrasi rendah

(

28

1. Hormon Auksin

Dewi et al. (2008) menyebutkan bahwa fungsi auksin antara lain

mempengaruhi pertambahan panjang batang, pertumbuhan, diferensiasi dan

percabangan akar, perkembangan buah, dominansi apikal, fototropisme dan

geotropisme. Auksin terbagi menjadi beberapa jenis antara lain: Indole Acetic

Acid (IAA), Indole Butyric Acid (IBA), Naphtalene Acetic Acid (NAA), dan

2,4-dichlorophenoxy Acetic Acid (2,4-D).

Di alam IAA diidentifikasikan sebagai auksin yang aktif di dalam

tumbuhan (endogenous) yang diproduksi dalam jaringan meristematik yang

aktif seperti contonya tunas, sedangkan IBA dan NAA merupakan auksin

sintetis (Hoesen et al., 2000). Berbagai jenis auksin dapat diaplikasikan

bersama-sama atau dikombinasikan dengan golongan sitokinin dan

giberelin.

2. Hormon Sitokinin

Sedangkan sitokinin, ialah zat pengatur tumbuhan selain dari auksin.

Sitokinin dialam berfungsi sebagai: mengatur pertumbuhan melalui

pembelahan sel, membantu mengawasi perkecambahan biji, mempengaruhi

pembentukan selaput abscisic pada tangkai daun dan buah, mengatur trasport

auksin, membantu griberilin untuk aktif dengan jalan menghalangi

pembentukan abscisic, dan menunda senescens (penuaan), dengan cara

menghambat jalan penguraian klorofil, protein, dan asam inti yang ada dalam

daun (Jeanett, 1989; dalam Zein, 2016).


29

Dalam kultur in vitro sitokinin berfungsi untuk mengatur

pertumbuhan serta mikrofogenesis. Sama seperti auksin, sitokinin juga ada

yang bersifat alami dan sintetik. Sitokinin lebih banyak diproduksi di akar

tanaman, itulah sebabnya adakala sitokinin tidak perlu ditambahkan ked alam

media jika yang dikulturkan ialah akar. Sebaliknya, jika yang dikulturkan

adalah bagian pucuk, di mana produksi sitokinin sangat sedikit, dan materi

tanaman tidak terlalu banyak memproduksi sitikonin, maka perlu adanya

penambahan sitokinin. Sekarang ini sudah ditemukan sitokinin buatan yang

mempunyai sifat sama dengan sitokin alamiah. Zat-zat itu meliputi: BAP (N6-

banzyl Amino Purine), atau BA (Benzly Adenin), dan Kitenin (N6-

Furfurylamino Prine) (Jeanett, 1989; dalam Zein, 2016). Zat pengatur

tumbuh ini mempengaruhi pertumbuhan dan morfogenesis dalam kultur.

Selain auksisn dan sitokinin, giberilin dan senyawa lain juga dapat

ditambahkan didalam media kultur in vitro (Gunawan, 1992; dalam

Arimarsetiowati dan Ardiyani, 2012).

Gambar 2. 3 Keseimbangan Auksin dan Sitokinin dalam Proses Morfogenesis

(Sumber: Wattimena et al., 1992)


30

F. Ekstrak Buah Nangka (Artocarpus heterophyllus)

Pohon nangka termaksud suku Moraceae, nama ilmiahnya adalah

Artocarpus heterophyllus. Dalam bahasa Inggris dikenal dengan buah Jackfruit.

Buah nangka, yang merupakan buah majemuk dari bunga majemuk, memiliki

buah dengan rasa yang manis. Nangka tumbuh baik di iklim tropis. Tanaman ini

sangat menyukai dengan curah hujan lebih dari 1500 mm pertahun di mana

musim kering tidak terlalu keras. Nangka kurang toleran dengan kondisi dingin,

kekeringan dan penggenangan. Ekstrak buah nangka memilik kandungan unsur

hara makro, mikro, dan vitamin yang dapat mendukung untuk pertumbuhan

tanaman. Unsur hara makro pada ekstrak buah nangka ialah nitrogen, posfor,

kalium, belerag, dan mangnesium. Menurut Sarief (1985), bahwa proses

pembelahan sel akan berjalan cepat seiring dengan ketersediaan nitrogen yang

cukup. Nitrogen mempunyai peranan penting untuk merangsang pertumbuhan

secara keseluruhan, khususnya pertumbuhan batang yang akan memacu

pertumbuhan tinggi tanaman.

Daging buah nangka umumnya tebal dan berwarna kuning, kuning

pucat, kuning kemerah-merahan atau jingga dan beraroma harum berasal dari

kandungan senyawa etil butirat, berair, dan berasa manis. Kandungan vitamin

dalam ektrak buah nagka, seperti thiamine, riboflavin, nicotiamida, pyrdoxine,

dapat meningkatkan laju koenzim yang membantu reaksi proses metabolisme

pada pertumbuhan tanaman (Rusdiana, 2004).


31

G. Ekstrak Buah Pisang Ambon (Musa acuminata Linn.)

Pisang merupakan salah satu jenis komponen organic yang sering

ditambahkan dalam kultur in vitro tanaman. Bagian yang dapat ditambahkan

dalam kultur in vitro tanaman. Bagian yang dapat dimakan dari buah pisang ialah

sebesar 57%. Air merupakan kandungan terbesar dari buah pisang karena

memiliki proporsi sebesar 97%.

Ekstrak pisang, yang ditambahkan dalam media berfungsi sebagai

sumber asam amino, peptide, vitamin dan zat pengatur tumbuh. Asam amino

yang terkandung dalam ekstrak tanaman merupakan bentuk organik yang lebih

mudah diserap dari pada asam amino anorganik (George dan Sherrington, 1948).

Menurut Macdonald (2002), asam amino dapat membantu diferensiasi jaringan

serta digunakan dalam sintesis protein. Sedangkan vitamin berperan penting

pada pertumbuhan tanaman khususnya jaringan yang sedang aktif tumbuh.

Beberapa vitamin berperan sebagai co-faktor enzim, yaitu senyawa yang harus

tersedia agar enzim dapat aktif bekerja.

Kandungan makro, mikro, dan vitamin yang terdapat pada buah pisang

ambon dan buah nangka dapat dilihat pada tabel dibawah ini:

Tabel 2. 2 Kandungan Hara Pisang Ambon dan Nangka dalam jumlah 100g

Kandungan Pisang Ambon (a) Nangka (b)

Air (g) 0,757 g 70,00 g

Protein (g) 0,11 g 1,70 g

Karbohidrat (g) 0,222g 23 g


32

Lemak (g) 0,2 g 0,64g

Abu (g) - -

Gula (mg) 0,008 mg 19,08 mg

Serat (mg) - 1,5 mg

N (mg) - 2 mg

Ca (mg) 7 mg 24 mg

Fe (mg) 0,67 mg 0,23 mg

Mg (mg) 36 mg 29 mg

P (mg) 27 mg 19 mg

K (mg) 460 mg 448 mg

Cu (mg) - -

Cl (mg) - -

S (mg) 34 mg 21 mg

Zn (mg) - 0,13 mg

Mn (mg) - 0,02 mg

B (mg) - -

Mo (mg) - -

Ascorbic (mg) Acid 10 mg 0,045 mg

Thiamine (mg) 0,04 mg 0,105 mg

Riboflavin (mg) 0,07 mg 0,055 mg

Niacin (mg) - 0,92 mg

Pantothenic acid

(mg)

0,26 mg 0,235 mg

Pyridoxine (mg) 0,51 mg 0,329 mg

Biotin (mg) - -

Nicotin acid (mg) - -


33

Vit A (mg) 0,04 g 0,33 g

Vit C (mg) 100,85 g 5 µg

Vit D (mg) - -

Vit E (mg) - 0,34 mg

Glycine (mg) - -

Auksin (IAA) (mg) Sedang -

Sumber: a) Robinson and Sauco, 2010; Garvita and Handini, 2011

b) Dr. Duke’s Pytoochemical and Ethnobotanical

H. Hasil Penelitian yang Relevan

Beberapa Penelitian yang relevan dalam penelitian, baik metode

maupun bahan yang digunakan mengacu pada penelitian-penelitian yang

sebelumnya pernah dilakukan. Penelitian ini memodifikasi penelitian yang

sudah ada sebelumnya, yaitu:

1. Vitri dan Handayani (2011) penelitian berjudul “Pengaruh Penambahan

Berbagai Kadar Pisang Dan Ubi Jalar Pada Pertumbuhan Kultur Tiga Jenis

Phalaenopsis”. Penelitian yang dilakukan, Pada P. fuscata, media KC 1

dengan penambahan 150 ml/l air kelapa muda, 25 g/L pisang ambon lumut

dan 15 g/L ubi jalar mampu memacu multiplikasi tunas dan daun. Media

KC 2 dengan penambahan 150 ml/L air kelapa muda, 50 g/L pisang ambon

lumut dan 20 g/K ubi jalar mampu meningkatkan inisiasi akar. Kemampuan

tumbuh benih anggrek ini akan lebih baik jika dilakukan subkultur ke media

yang sama pada saat penelitian dilakukan.

2. Ira Djajanegara, (2010) dengan judul penelitian “Pemanfaatan Limbah Buah

Pisang dan Air Kelapa sebagai Bahan Media Kultur in vitro Anggrek Bulan


34

(Phalaenopsis amabilis) Tipe 229. Perlakuan yang digunakan meliputi

penggunaan Pisang mas, Pisang raja, pisang ambon, dan pisang kepok

sebanyak 100g/L dan air kelapa dengan berbagai konsentrasi. Hasil

penelitian menunjukan bahwa pemberian 100g/L bubur pisang ambon dan

150 g/L air kelapa memberikan pengaruh nyata terhadap pembentukan arar,

tunas, jumlah daun, dan tinggi pertumbuhan batang planlet.

3. Garuda, Dkk., (2015) penelitian berjudul “Pengaruh Berbagai Senyawa

Organik Kompleks Terhadap Planlet Anggrek Dendrobium”. Dari

penelitian tersebut didapatkan pemberian ekstrak melon sebanyak 100g/L

memberikan pertumbuhan vegetatif paling baik terhadap jumlah akar, daun,

panjang akar dan berat segar dan pemberian ekstrak jambu biji 100g/L

memperlihatkan hasil terbaik terhadap pertambahan tinggi dan tunas planlet

anggrek dendrobium pada mediua VW.

4. Gravita dan Elizabet, (2011) penelitian berjudul “Pengaruh Penambahan

Berbagai Kadar Pisang Dan Ubi Jalar Pada Pertumbuhan Kultur Tiga Jenis

Phalaenopsis”. Dari penelitiaan ini pemberian 25g/L pisang ambon lumut

dan 15g/L ubi jalar mampu merangsang multipikasi tunas dan daun serta

pemberian 50g/L pisang ambon lumut dan 20g/L ubi jalar mampu

meningkatkan inisiasi akar pada Phalaenopsis. fuscata pada media KC.

I. Kerangka Berpikir

Tanaman anggrek merupakan tanaman hias yang menarik minat

pencinta anggrek atau pengoleksi tanaman hias. Tanaman anggrek memiliki

banyak jenis bunga yang berwarna warni dan memiliki bentuk yang berbeda


35

dengan anggrek lainnya, baik dalam segi warna, ukuran, bentuk, dan

keunikan tiap-tiap bunga anggrek. Kendala perbanyakan secara generatif

yang sangat lama dan keadaan faktor lingkungan yang kerap kali mempersulit

tanaman anggrek untuk sampai pada masa pembungaan dan mendapatkan

calon tumbuhan baru. Hal ini juga diperkuat indukan tanaman anggrek sangat

sulit diperoleh untuk mendapatkan anakan yang memiliki sifat sama seperti

indukannya.

Anggrek diminati oleh beberapa kalangan, namun karena sulit

mendapatkan bibit anakan, dipengaruhi faktor lingkungan sangat

berpengaruh dalam mendapatkan bibit yang sehat untuk diperbanyak,

mendapatkan bibit yang sehat dan memiliki kemiripan dengan indukan jarang

terjadi atau sulit didapatkan. Menggunakan teknik kultur in vitro kita dapat

mendapatkan klon anakan yang sama dengan indukan, yang sehat dan

beragam variasi, serta tahan terhadap penyakit dan lingkungan.

Metode yang telah berkembang tentang kultur in vitro tanaman

secara vegetatif dapat memberikan keuntungan yaitu diperoleh anakan yang

sama dengan induknya (identik) dalam jumlah yang banyak dan dalam waktu

yang singkat. Tanaman anggrek menjadi salah satu tanaman yang sering

dilakukan kultur in vitro, mulai dari kultur biji, kultur pollen dan anther,

kultur sel, meristem dan protoplasma. Kultur bagian vegetatif tanaman

anggrek (Axillary, Keki, dan Apical).


36

Sistem kultur in vitro berpegang pada kesterilan wadah (botol) serta

nutrisi yang diperoleh dari media yang pas, dan paling tepat bagi

pertumbuhan plantlet anggrek. Berdasarkan media tanam anggrek yang

biasanya digunakan yaitu, Media MS, Media VW, dan Media Kncdson.

Beberapa media ini kerap di modifikasi dengan menambahkan unsur organik

yang berasal sari buah, kecambah, maupun ekstrak lain bahkan ada pula yang

menambahkan pupuk organik (Hyponex).

Penggunaan media dalam kultur in vitro tanaman merupakan syarat

utama, hal ini dikarenakan tumbuhan menyerap unsur-unsur makro dan mikro

yang terkandung di dalam media. Sama halnya tanaman mengambil makanan

langsung dari dalam tanah. Hanya perbedaannya media tanah, berganti

dengan media agar yang telah mengandung unsur-unsur yang telah diperkaya

dan dapat merangsang pertumbuhan eksplan atau plantlet.

Penelitian yang dilakukan ini menggunakan media Murashige and

Skoog yang dalam proses pembuatan media tanam di berikan penambahan

ekstrak yang berasal dari buah yaitu buah pisang ambon dan buah nangka.

Setelah itu, akan dilakukan dengan cara kerja aseptis baik dalam penggunaan

alat dan tempat dan pembuatan media. Parameter yang diamati adalah

parameter pertambahan bobot (massa berat tanaman), pertambahan tinggi

tanaman, dan presentase hidup tanaman anggrek selama

37

Gambar 2. 4 Kerangka Konseptual

J. Hipotesa

1. Pengaruh penambahan ekstrak buah pisang ambon dan ekstrak buah

nangka mempengaruhi pertumbuhan plantlet anggrek Dendrobium

nobile Linn. pada medium Murashige and Skoog.

2. Pengaruh pemberian ekstrak buah nangka dan dan ekstrak buah pisang

ambon terhadap pertambahan bobot, pertambahan tinggi, dan persentase

hidup planlet anggrek Dendrobium nobile Linn. pada medium

Murashige and Skoog.

Anggrek

Kultur in vitro Media MS

Ekstrak pisang ambon Ekstrak nangka

Pengaruh pada

Pertumbuhan

1. Pertambahan Bobot 2. Pertambahan Tinggi 3. Persentase Hidup Plantlet

Peminat

Anggrek

Kendala Budidaya

Anggrek


38

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Jenis penelitian yang digunakan ialah penelitian ekperimen.

Percobaan perbanyakan anggrek Dendrobium menggunakan rancangan

acak lengkap tiga perlakuan, yaitu ekstrak buah pisang ambon, ekstrak buah

nangka dan kontrol. Terdapat 3 kombinasi perlakuan dengan 13 ulangan.

Setiap ulangan terdiri dari satu botol Kultur sehingga terdapat 33 botol

Kultur. Setiap botol Kultur terdiri dari satu buah Plantlet anggrek

dendrobium. Pada percobaan ini memakai zat pengatur tumbuh

Napthaleneacetic Acid (NAA), dan 6-benzyl Amino Purine (BAP).

B. Variabel Penelitian

Variabel penelitian yang digunakan dalam penelitian ini meliputi:

1. Variabel bebas

Variabel bebas dalam penelitian ini adalah media MS dengan

penambahan ekstrak buah pisang ambon dan penambahan ekstrak

buah nangka

2. Variabel terikat

Variabel terikat penelitian ini adalah pertambahan berat plantlet,

pertambahan tinggi plantlet, dan persentase hidup plantlet


39

3. Variabel kontrol

Variabel kontrol dalam penelitian ini adalah suhu ruangan inkubasi.

Suhu ruangan air conditions (AC) 180C, Umur plantlet ±5 bulan

sebelum di subkulturkan, Tinggi berkisar 2-3 cm, intensitas cahaya

lampu Cooldaylight 453 Lux.

C. Batasan Penelitian

a. Bobot plantlet awal adalah hasil pengurangan dari bobot media +

Plantlet dengan botol media pada saat subkultur (Overplanting)

b. Bobot plantlet akhir adalah bobot plantlet yang ditimbang pada saat

pengamatan terakhir

c. Pertumbuhan bobot plantlet adalah bobot plantlet akhir dikurangi

dengan bobot plantlet awal

d. Persentase plantlet ialah plantlet yang mati atau layu dikurangi

jumlah pengulangan Plantlet akhir dikali 100%

e. Penggunaan zat pengatur tumbuh dengan perbandingan (1:1)

sebanyak 1 PPM

f. Pertumbuhan tinggi tanaman diukur dan diamati dari luar botol

kultur

g. Penelitian yang digunakan tidak menggunakan kontrol positif,

hanya menggunakan kontrol negatif


40

D. Waktu dan Tempat

Penelitian ini dilakukan pada 16 Agustus 2018 - 12 Oktober 2018.

Pembuatan media dan pengamatan dilakukan Di Laboratorium Kultur

Jaringan Farmasi, Fakultas Farmasi kampus III Universitas Sanata Dharma

E. Alat Dan Bahan

1. Alat:

Botol Kultur Anggrek, Petridish, Gelas baker 1000 ml, Erlenmeyer 500

ml, Pipet Volume 10 ml dan Pompa pipet, Pinset, Tangkai Scalpel, Mata

Pisau Scalpel, Autoklaf, Lampu Coolday light 12 watt, Hot plate and

Magnetic stirrer, Pengukur pH, Kaca Arloji, Kertas saringan, Sendok

pengaduk, Hand sprayer, Neraca analitik, Batang Pengaduk, Gelas

Ukur Plastik 1000 ml, Kertas payung, Kertas label, Laminar air

flowcabinet (LAFC), Lampu ultra violet (UV), dan Alat-alat Pengukur.

2. Bahan:

Bahan plantlet botol anggrek Dendrobium nobile Linn yang diambil dari

pusat penjualan tanaman hias anggrek.

a. Bahan non-organik: Medium Murashige and Skoog Basal medium

with Vitamin, Agar, Gula, Larutan HCL 1 N, Larutan NaOH 1 N,

Napthaleneacetic Acid (NAA), dan 6-benzyl Amino Purine (BAP)

b. Bahan Organik : Buah nangka dan buah pisang ambon

c. Disinfektan : Larutan Ca-hipoklorit, Detergen, Alkohol 70%-96%,

dan Aquades steril


41

F. Cara Kerja

1. Pemilihan Plantlet

Plantlet anggrek Dendrobium nobile Linn yang diambil dari pusat

penjualan tanaman hias anggrek botol dengan tinggi ±2-3 cm dan tanpa

akar.

2. Sterilisasi

a. Alat

Alat-alat dissecting-set (Scalpel dan pinset) dan glass ware

(cawan petri yang berisi kertas saring, baker glass, botol kultur dan

erlenmeyer yang berisi aquades) yang digunakan, setelah dicuci

dengan detergen lalu bilas dengan air bersih, kemudian dibilas

kembali dengan larutan Ca-hipoklorit dan dikeringkan. Kemudian

dibungkus dengan kertas payung sedangkan botol kultur yang

digunakan dibilas dahulu dengan alkohol 96% sebelum diautoklaf.

Sterilisasi alat-alat tersebut didalam autoklaf dengan suhu 121oC

selama 15 menit.

b. Ruangan

Dinding-dinding ruangan LAFC dan rak inkubasi disterilkan

dengan menggunakan alkohol 70%. Selanjutnya lampu UV baik

yang ada di ruangan maupun UV LAFC dinyalakan selama 1 jam

sebelum digunakan.


42

3. Pembuatan Ekstrak buah

Sebanyak 100 g buah dihancurkan. Penghancuran dilakukan

dengan menggunakan blender yang di isi dengan air steril. Ekstrak

buah disaring di wadah terpisah dan ekstrak buah disimpan di

erlenmeyer sebelum digunakan, pembuatan ektrak buah dilakukan satu

hari sebelum digunakan.

4. Pembuatan Media

Medium Murashige and Skoog Basal medium with Vitamin

ditimbang sebanyak 4,43 g/L, dilarutkan dalam 1 liter air steril. Media

dibagi menjadi dua bagian sambil ditambahkan ekstrak buah 200 ml/l.

Ditambahkan BAP dan NAA 1 ml/L. Sebanyak 30 g/L gula

ditambahkan ke dalam media. Kemudian tambahkan bahan pemadat

(agar) sebanyak 7 g/l kemudian tambahkan aquades steril sampai tanda

1000 ml, lalu masak sampai mendidih dan dituang ke dalam botol-botol

steril. Sebelum dituang derajat keasaman diukur pH antara 5.6 – 5.8.

Jika terlalu alkali tambahkan HCL 1N, tetapi jika terlalu asam

tambahkan NaOH 1N. Tiap-tiap media dimasukan ke dalam botol

kultur steril sebanyak ±30-40 ml/botol, kemudian ditutup dengan

penutup botol. Auotoklaf selama ±20 menit, pada suhu 1210C tekanan

17.5 psi. Sebelum digunakan, media tersebut disimpan selama satu

minggu untuk melihat kesterilan media sebelum dilakukan penanaman,

media disimpan di dalam incubator steril dengan suhu 250C.


43

5. Perlakuaan Plantlet

Kelompok media dibagai menjadi tiga kelompok, yaitu:

a) Kelompok Media A : Media MS dengan penambahan ekstrak buah

pisang ambon 200 ml/L,

b) Kelompok Media B : Media MS dengan penambahan ekstrak buah

Nangka 200 ml/L,

c) Media Kontrol : Media MS tanpa penambahan ekstrak buah.

6. Subkultur (overplanting) Plantlet

Subkultur (overplanting) dilakukan sebagai berikut, semua

perlengkapan yang akan dipakai yaitu, scalpel, Pinset, mata pisau

scalpel, alat-alat gelas, lampu spiritus, botol media (ditimbang dahulu

untuk mengetahui bobot botol + media), botol berisi plantlet yang telah

tumbuh (Anggrek botol), dan erlenmeyer aquades steril dan alkohol

70% dimasukan dalam LAFC (dahulu disemprot dengan alkohol

sebelum dimasukan ke dalam LAFC. Overplanting dimulai dengan

menyiapkan dan memasukan alat-alat yang diperlukan di dalam LAFC.

Selanjutnya plantlet akan diambil dengan pinset dan diletakkan diatas

cawan petri sebanyak 20 tanaman, plantlet dikeluarkan dengan cara

menjepit bagian di antara akar dan daun, kemudian ditarik dengan

diusahasan agar akar keluar lebih dahulu, pisahkan plantlet yang masih

berhimpitan dengan plantlet yang lain dilakukan secara metode aseptis.

Potongan plantlet ditanam didalam media steril yang telah di letakan di

lemari inkubasi steril selama 1 minggu sebelumnya, untuk melihat


44

media yang aman dan tidak terkontaminasi jamur. Sebelumnya

timbang medium sebelum digunakan untuk overplanting. Media yang

digunakan terbagi dalam 3 kelompok, tananam plantlet ke dalam botol

yang berisi medium baru satu per satu, sehingga jumlahnya dalam botol

1 plantlet per botol. Setelah dilakukan pemindahan plantlet, masing-

masing botol diberi label dan tanggal overplanting, lalu ditimbang

kembali. Hasil penimbangan botol media yang berisi plantlet dikurangi

dengan hasil pertimbangan botol medium sebelum penanaman akan

mendapat botol plantlet awal.

Inkubasi masing-masing plantlet yang telah dipindahkan pada

rak Inkubasi 40 cm, pada suhu ruangan 180C dan pencahayaan lampu

TL”Cool day Light” 12 W. Plantlet didiamkan selama 3 minggu tanpa

dilakukan subkultur berikutnya, sambil terus diamati pertumbuhan

pada plantlet.

7. Pengamatan Plantlet

Pengamatan dilakukan setiap hari sekali setelah dilakukan

penanaman dalam media kultur. Masing-masing kelompok dilakuakan

pegamatan, pengamatan plantlet meliputi: Tinggi plantlet (diukur dari

dasar media hingga ujung plantlet), bobot pertumbuhan planlet dan

Jumlah planlet yang hidup. Pengamatan dan pengukuran dilakukan dari

luar botol, sedangkan plantlet masih tetap berada didalam botol kultur.

Pengambilan data dilakukan setiap minggu sampai 3-4 MST (minggu

setelah tanam).


45

G. Metode Analisis Data

Penelitian ini dilakukan dengan mengikuti pola Rancangan

Kelompok Lengkap (RKL). Data yang diperoleh dalam penelitian ini

dianalisis menggunakan Test ANOVA (Analysis of Variance) satu arah

dengan pengukuran variabilitas antar kelompok. Uji Anova untuk One

factor between Subject Design atau ANOVA satu arah digunakan untuk

mengetes perbedaan di antara dua atau lebih kelo

perbandingan pertumbuhan anggrek dendrobium ...dan ekstrak buah nangka pada media subkultur dapat...

Documents