pengaruh pemberian fraksi terpenoid daun … awal.pdf · setyawan, s.farm., m.sc., apt.; ibu ni...
TRANSCRIPT
i
PENGARUH PEMBERIAN FRAKSI TERPENOID
DAUN KATUK (Sauropus androgynus (L.) Merr)
TERHADAP PROFIL LIPID TIKUS PUTIH JANTAN
GALUR WISTAR YANG DIINDUKSI
PAKAN KAYA LEMAK
Skripsi
KOMANG AYU PARAMITA WIDHIASTUTI
1108505024
JURUSAN FARMASI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS UDAYANA
2015
ii
iii
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadapan Tuhan Yang Maha Esa karena
atas berkat rahmat-Nya penulis dapat menyelesaikan Tugas Akhir II (Skripsi)
yang berjudul “Pengaruh Pemberian Fraksi Terpenoid Daun Katuk
(Sauropus Androgynus (L.) Merr) terhadap Profil Lipid Tikus Putih Jantan
Galur Wistar yang Diinduksi Pakan Kaya Lemak” tepat pada waktunya,
sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi (S.Farm) di
Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas
Udayana.
Penyusunan Tugas Akhir II ini tidak terlepas dari dukungan, saran, dan
bimbingan dari berbagai pihak. Maka dari itu, pada kesempatan ini penulis ingin
mengucapkan terima kasih kepada:
1. Bapak Ir. Anak Agung Gede Raka Dalem, M.Sc. (Hons). selaku Dekan
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.
2. Bapak Dr. rer. nat. I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku
Ketua Jurusan Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Udayana
3. Ibu Ni Kadek Warditiani, S.Farm., M.Sc., Apt. selaku dosen pembimbing I
yang telah meluangkan waktu, tenaga dan pikiran dalam membimbing
penyusunan Tugas Akhir II ini.
4. Ibu Ni Made Pitri Susanti, S.Farm., M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing
II yang telah meluangkan waktu, tenaga dan pikiran dalam membimbing
penyusunan Tugas Akhir II ini.
5. Ibu Dr. Sagung Chandra Yowani, S.Si., M.Si., Apt.; Bapak Eka Indra
Setyawan, S.Farm., M.Sc., Apt.; Ibu Ni Putu Linda Laksmiani S.Farm,
M.Sc., Apt. selaku dosen penguji Tugas Akhir II yang telah memberi
bimbingan dan dukungan pada penulis dalam penyusunan Tugas Akhir II
ini.
6. Ibu Ni Ketut Widyani Astuti, S.Si., M.Biomed., Apt. selaku pembimbing
akademik yang telah membimbing penulis selama perkuliahan.
iv
7. Seluruh dosen dan staf pegawai di Jurusan Farmasi yang telah
memberikan bantuan dan bimbingan kepada penulis selama penyusunan
Tugas Akhir II ini.
8. Orang tua tercinta Ir. Ketut Sumadiasa dan Ir. Hestin Yuswanti, M.P.,
kakak tercinta Gede Bagus Premana Mahatvayudha, S.P. dan Made Agung
Prebawa Parama Artha, S.Kom., serta seluruh keluarga besar yang selalu
memberikan semangat dan motivasi dalam penyusunan Tugas Akhir II ini.
9. Sahabat-sahabat dan teman-teman seperjuangan (Aditya, Mila, Cheristien,
Putri, Gung Sinta, dan Dayu Tu, Andre, Fatwa, Redika) yang selalu ada
disaat susah dan senang, yang telah membantu dan memberi dukungan
semangat, serta kritik dan saran selama penyusunan Tugas Akhir II ini.
10. Teman-teman "Bahan Alam 2011", teman-teman angkatan 2011 "LOV",
serta teman-teman KKN-PPM Universitas Udayana Periode X di Desa
Belumbang, Kecamatan Kerambitan, Kabupaten Tabanan yang telah
membantu dan selalu memberikan semangat selama penyusunan Tugas
Akhir II ini.
11. Laboran Lab. Fitokimia Kak anggi, Lab. Analisis Mbok Dwik serta Lab.
Nonsteril Kak Pasek atas bantuan serta bimbingan yang diberikan dalam
penyelesaian Tugas Akhir II ini.
12. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan
Tugas Akhir II ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu.
Penulis menyadari bahwa penyusunan Tugas Akhir II ini masih jauh dari
sempurna. Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak
yang bersifat membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih
baik. Penulis berharap semoga Tugas Akhir II ini dapat bermanfaat bagi semua
pihak.
Bukit Jimbaran, Juni 2015
Penulis
v
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ............................................................................................ i
LEMBAR PENGESAHAN .................................................................................. ii
KATA PENGANTAR .......................................................................................... iii
DAFTAR ISI ......................................................................................................... v
DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH ............................................................ viii
DAFTAR TABEL ................................................................................................. x
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xi
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii
ABSTRAK ............................................................................................................ xiii
ABSTRACT .......................................................................................................... xiv
BAB I PENDAHULUAN .................................................................................. 1
1.1 Latar Belakang............................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah ......................................................................... 3
1.3 Tujuan ............................................................................................ 3
1.4 Manfaat Penelitian ......................................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 5
2.1 Katuk (Sauropus androgynous (L.) Merr)..................................... 5
2.1.1 Klasifikasi Tanaman .......................................................... 5
2.1.2 Deskripsi Tanaman ............................................................ 5
2.1.3 Kandungan Kimia .............................................................. 6
2.1.4 Kegunaan dan Bioaktivitas ................................................ 6
2.2 Terpenoid ....................................................................................... 7
2.3 Ekstraksi dengan Metode Maserasi ............................................... 9
2.4 Fraksinasi dengan Metode Kromatografi Kolom .......................... 9
2.5 Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ................................................... 11
2.6 Lipid .............................................................................................. 11
2.7 Dislipidemia .................................................................................. 14
2.8 Hewan Uji ...................................................................................... 15
vi
2.9 Terapi Dislipidemia ....................................................................... 15
2.9.1 Terapi Non Farmakologi.................................................... 15
2.9.2 Terapi Farmakologi ........................................................... 16
2.10 Metode Induksi .............................................................................. 17
BAB III METODE PENELITIAN........................................................................ 18
3.1 Rancangan Penelitian .................................................................... 18
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ......................................................... 21
3.3 Objek Penelitian ............................................................................ 21
3.4 Bahan Penelitian ............................................................................ 21
3.5 Alat Penelitian ............................................................................... 22
3.6 Prosedur Penelitian ........................................................................ 23
3.6.1 Determinasi Tanaman ........................................................ 23
3.6.2 Penetapan Kadar Air Serbuk Daun Katuk ......................... 23
3.6.3 Ekstraksi Daun Katuk ........................................................ 23
3.6.4 Penetapan Kadar Air Ekstrak Etanol 90% Daun Katuk .... 24
3.6.5 Fraksinasi dengan Kromatografi Kolom ........................... 24
3.6.6 Kromatografi Lapis Tipis Hasil Fraksinasi........................ 25
3.6.7 Skrining Fitokimia ............................................................. 26
3.6.8 Uji Residu Pelarut .............................................................. 28
3.6.9 Pembuatan Pakan Kaya Lemak ......................................... 29
3.6.10 Pembuatan CMC Na 0,1% ................................................. 29
3.6.11 Pembuatan Larutan Uji ...................................................... 29
3.6.12 Induksi dan Perlakuan Hewan Uji ..................................... 30
3.6.13 Preparasi Serum ................................................................. 31
3.6.14 Pengukuran Kadar Lipid Serum ........................................ 31
3.7 Analisis Data ................................................................................. 33
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 34
4.1 Determinasi Tanaman .................................................................... 34
4.2 Penetapan Kadar Air Serbuk Daun Katuk ..................................... 34
4.3 Ekstraksi Daun Katuk .................................................................... 35
4.4 Penetapan Kadar Air Ekstrak Etanol 90% Daun Katuk ................ 35
vii
4.5 Fraksinasi dengan Kromatografi Kolom ....................................... 36
4.6 Kromatografi Lapis Tipis Hasil Fraksinasi ................................... 37
4.7 Skrining Fitokimia ......................................................................... 39
4.8 Residu Metanol Fraksi Terpenoid ................................................. 40
4.9 Uji Aktivitas Antidislipidemia ...................................................... 41
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................................ 46
5.1 Kesimpulan .................................................................................... 46
5.2 Saran .............................................................................................. 46
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 47
LAMPIRAN ......................................................................................................... 52
viii
DAFTAR SINGKATAN DAN ISTILAH
Ad libitum : Memberikan makanan dan minuman kepada hewan uji hingga
kondisi kenyang.
ANOVA : Analysis of Variance
Aterosklerosis : Radang akibat pengumpulan lemak di sepanjang dinding
arteri.
BB : Berat Badan
BR-1 : Pakan tikus dengan komposisi yang dapat dilihat pada
lampiran 10.
CHOD-PAP : Cholesterol oxidase - phenol aminophenazone
CMC Na : Carboksimetilselulosa Natrium
Degradasi : Penurunan
GPO-PAP : Glycerol-3-phosphate oxidase - phenol aminophenazone
HDL : High-Density Lipoprotein
IDL : Intermediate-Density Lipoprotein
Katabolisme : Lintasan metabolisme yang merombak suatu substrat kompleks
molekul organik menjadi komponen-komponen penyusunnya.
Kolesterol ester : Produk dari reaksi antara asam lemak dan kolesterol.
LCAT : Lecithin Cholesterol Acylterase
LDL : Low-Density Lipoprotein
Lemak jenuh : Lemak kaya kolesterol, mempunyai ikatan tunggal.
Lipid ampifatik : Lipid yang mengandung bagian yang hidrofobik dan hidrofilik
Lipoprotein : Kompleks antara lipid dengan protein yang berfungsi sebagai
pengangkut lipid di dalam darah.
LSD : Least Significant Difference
Metabolisme : Proses reaksi biokimiawi yang terjadi di dalam sel tubuh
makhluk hidup meliputi anabolisme (penyusunan) dan
katabolisme (penguraian).
p.o. : Per oral
PKL : Pakan Kaya Lemak
ix
Perifer : Terletak di tepi, jauh dari pusat
Sentrifugasi : Proses menggunakan sentrifuge untuk memisahkan padatan
dari cairan, terutama digunakan dalam uji klinis untuk
memproses sampel darah.
Serum : Plasma darah yang dipisahkan dari fibrinogen dan faktor
pembekuan darah lainnya dengan cara memutar darah dalam
sentrifuge.
Simplisia : Bagian tanaman yang belum mengalami pengolahan apapun
kecuali pengeringan.
Sinus orbitalis : Sudut mata
SPSS : Statistical Product and Service Solutions
UV-vis : Ultra Violet-visible
VLDL : Very Low-Density Lipoprotein
WFI : Water for Injection
WHO : World Health Organization
x
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 2.1 Golongan terpenoid berdasarkan jumlah atom karbon .................... 7
Tabel 2.2 Klasifikasi kolesterol total, LDL, HDL, dan trigliserida tikus ........ 15
Tabel 4.1 Kadar air serbuk daun katuk (Sauropus androgynus (L.) Merr) .... 34
Tabel 4.2 Kadar air ekstrak etanol 90% daun katuk (Sauropus androgynus
(L.) Merr) ......................................................................................... 36
Tabel 4.3 Hasil skrining fitokimia fraksi-fraksi hasil pemisahan ekstrak
etanol 90% daun katuk .................................................................. 39
Tabel 4.4 Kadar rata-rata lipid tikus sebelum diberikan perlakuan dan
setelah diberikan perlakuan ............................................................. 42
xi
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 2.1 Tanaman katuk (a) dan daun katuk (b) ............................................ 7
Gambar 3.1 Skema umum penelitian uji aktivitas antidislipidemia fraksi
terpenoid hasil pemisahan ekstrak etanol 90% daun katuk
(Sauropus androgynous (L.) Merr) .................................................. 19
Gambar 3.2 Skema kerja uji aktivitas antidislipidemia fraksi terpenoid daun
katuk (Sauropus androgynous (L.) Merr) ........................................ 20
Gambar 4.1 Pengamatan profil KLT fraksi secara visual setelah disemprot
H2SO4 10% (a) Pengamatan profil KLT secara visual setelah
disemprot vanilin-asam sulfat (b) .................................................... 38
xii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1 Hasil Determinasi Tanaman Katuk (Sauropus androgynus (L.)
Merr) .............................................................................................. 52
Lampiran 2 Hasil Skrining Fitokimia Fraksi Hasil Pemisahan Ekstrak Etanol
90% Daun Katuk (Sauropus androgynous (L.) Merr)................... 53
Lampiran 3 Hasil Kromatogram Uji Residu Metanol dalam Fraksi Terpenoid
dengan Metode Kromatografi Gas ................................................ 56
Lampiran 4 Hasil Evaluasi Kelayakan Etik (Ethical Clearance) Hewan Uji ... 60
Lampiran 5 Output Uji Shapiro-Wilk dan Uji Lavene untuk Uji Distribusi
Normal dan Homogenitas .............................................................. 61
Lampiran 6 Output Uji Kruskal-Wallis ............................................................. 64
Lampiran 7 Output Uji Mann-Withney ............................................................. 65
Lampiran 8 Output Uji Mann-Withney Selisih Kadar Lipid ............................. 70
Lampiran 9 Perhitungan Dosis Simvastatin ...................................................... 72
Lampiran 10 Komposisi Pakan BR-1 ................................................................. 73
xiii
ABSTRAK
Daun katuk (Sauropus androgynus (L.) Merr) diketahui memiliki aktivitas
sebagai antidislipidemia. Senyawa kimia yang terkandung dalam ekstrak etanol
90% yaitu alkaloid, saponin, flavonoid, tanin, dan terpenoid. Salah satu
kandungan kimia yang diduga memiliki aktivitas sebagai antidislipidemia yaitu
terpenoid. Tujuan dari penelitian ini yaitu untuk mengetahui pengaruh pemberian
fraksi terpenoid daun katuk (Sauropus androgynus (L.) Merr) terhadap profil lipid
darah tikus putih jantan galur wistar yang diinduksi pakan kaya lemak.
Penelitian ini meliputi beberapa tahap yaitu: ekstraksi, fraksinasi dengan
kromatografi kolom lambat dengan pelarut campur kloroform:metanol (9:1-1:9
v/v), identifikasi kandungan kimia dengan KLT, skrining fitokimia, dan induksi
pakan kaya lemak selama 30 hari sebelum perlakuan. Kelompok penelitian dibagi
menjadi 5 kelompok yang terdiri dari kontrol negatif (CMC Na 0,1%), kontrol
positif (simvastatin 1,8 mg/kgBB), dan perlakuan yang diberikan dua variasi dosis
fraksi terpenoid daun katuk yaitu 50 mg/kgBB dan 100 mg/kgBB selama 21 hari
dengan pembawa CMC Na 0,1%. Pengambilan darah dilakukan sebelum dan
setelah perlakuan. Pengukuran kadar kolesterol total, trigliserida, LDL, dan HDL
menggunakan reaksi enzimatis. Data yang diperoleh diolah secara statistik.
Hasil pemisahan menggunakan metode kromatografi kolom lambat
didapatkan 7 fraksi terpenoid. Fraksi terpenoid daun katuk pada dosis 50mg/kgBB
dan 100mg/kgBB memiliki pengaruh yang baik terhadap profil lipid dalam
menurunkan kadar kolesterol total, trigliserida, dan LDL serta meningkatkan
kadar HDL (p<0,05).
Kata kunci: Sauropus androgynus (L.) Merr, terpenoid, kromatografi kolom
lambat, profil lipid
xiv
ABSTRACT
Katuk leaves (Sauropus androgynus (L.) Merr) is known to have activity as
antidislipidemia. Chemical constituent that contained in the 90% ethanol extract
of katuk leaves such as alkaloid, saponin, flavonoid, tanin, dan terpenoid. One of
the chemical constituents are thought to have activity as antidislipidemia is
terpenoid. The study was aimed to determine the effect of terpenoid fraction of
katuk leaves (Sauropus androgynus (L.) Merr) on blood lipid profile of wistar
strain male rats which induced high-fat rat food.
This study includes several stages: extraction, fractionation by column
chromatography with mobile phase gradient system solvent mixture
chloroform:methanol (9:1-1:9 v/v), identification chemical constituent with KLT,
phytochemical screening, and high-fat rat food induction for 30 days before
treatment. Research groups were divided into 5 groups consisted of negative
group (CMC Na 0,1%), positive control (simvastatin 1,8 mg/kgBB), and treatment
with 2 dosages variation of terpenoid fraction katuk leaves which were 50
mg/kgBB and 100 mg/kgBB for 21 days with CMC Na 0,1% as the carrier. Blood
sampling was done before and after the treatment. Measurement of total
cholesterol level, triglyceride, LDL, and HDL were using enzymatic reaction. The
obtained data were processed statistically.
Result of separation using column chromatography obtained 7 fractions.
Terpenoid fraction of katuk leaves in a dose 50 mg/kgBB and 100 mg/kgBB have
good effect in reducing total cholesterol level, triglycerides, LDL, and also
increased HDL level (p < 0,05).
Keyword: Sauropus androgynus (L.) Merr, terpenoid, column chromatography,
lipid profiles