OBSERVACIÓN DE ESTOMAS Y CLOROPLASTOS

OBJETIVOS

- Observar la morfología típica de las células vegetales y la presencia de estomas.

- Practicar las técnicas de tinción de preparaciones microscópicas.

- Reconocer los principales orgánulos fotosintéticos vegetales.

FUNDAMENTO TEÓRICO

La EPIDERMIS es un tejido formado por una única capa de

células unidas entre sí, sin dejar espacios intercelulares. Se

encuentra en las hojas, tallo y raíces de las plantas jóvenes. Sus

células no poseen cloroplastos y pueden estar engrosadas

exteriormente con materiales lipídicos, formando una capa

impermeable llamada cutina. Cuando esto es así, la capa de

cutina impide el necesario intercambio de agua y gases con la

atmósfera, por lo que aparecen, especialmente en el envés de las

hojas, unas estructuras denominadas estomas que hacen posible

ese intercambio. Los estomas poseen un mecanismo que regula

su apertura y cierre.

La epidermis es un tejido protector cuya función es la de

proteger al vegetal de la desecación y de la agresión de los

agentes externos. En la raíz permite la absorción de agua y sales

minerales.

La forma de las células epidérmicas y la de los estomas depende

del tipo de planta que estemos estudiando. En ocasiones el ostiolo

no se ve por encontrarse cerrado; en estos casos se debe preparar

otra muestra utilizando una hoja que esté recién cortada, ya que los ostiolos suelen estar cerrados en las

hojas marchitas o bien que llevan mucho tiempo cortadas.

Las células de la epidermis de la hoja Lirio son alargadas e incoloras, tienen núcleos bien visibles (n). Cada estoma está formado por dos células simétricas arriñonadas, células estomáticas u oclusivas (est), éstas son las únicas de la epidermis que contienen granos de clorofila (cp). Entre las dos células se percibe un orificio de forma oval, el ostiolo (ost). Si aparecen granos de cloroplastos en las células de la epidermis pertenecen al parénquima clorofílico de la hoja (par).

Los vegetales son seres autótrofos fotosintéticos. Gracias a la clorofila son capaces de sintetizar materia orgánica, fundamentalmente glúcidos, a partir de compuestos inorgánicos como el CO2. Los cloroplastos son los principales orgánulos implicados en dicho proceso.

En la hoja de musgo, el citoplasma aparecerá lleno de abundantes gránulos de color verde, cloroplastos (cp). La forma y tamaño de los cloroplastos varía de acuerdo con el material que observemos, en general, son más o menos esféricos u ovalados.

MATERIAL

Material de laboratorio

Microscopio.

Escalpelo o bisturí

Pinzas.

2 Portaobjetos/ 2 Cubreobjetos.

Banco de tinción o Placa de Petri.

Papel de filtro.

Frasco Lavador.

Reactivos Glicerina al 50% en frasco cuentagotas

Verde de metilo acético.

Material biológico

Hojas recién cortadas de lirio, tulipán, gladiolo, cebolla o

puerros (cualquier monocotiledónea)

Hojas de musgo o Elodea (alga acuática).

Verde metilo acético: 1 gramo de colorante en polvo, 100 ml de alcohol etílico y 1 ml de ácido acético glacial.

MÉTODO

a) Obervación de estomas de epidermis de Lirio

1. Hacer una incisión transversal, con una cuchilla, de medio

centímetro de longitud, en el tercio superior de la hoja. Con las pinzas tirar de uno de los bordes del corte rasgando en sentido longitudinal de la hoja. Se desprenderá fácilmente una fina membrana, que es la epidermis de la hoja.

2. Con el portaobjetos situado encima de la placa de Petri, añade a la muestra unas gotas de colorante verde de metilo acético y espera, más o menos 5 minutos, para que este ejerza su acción.

3. Transcurrido los cinco minutos, elimina el colorante vertiendo agua sobre la muestra, que

habrás sujetado al porta con ayuda de unas pinzas. El exceso de agua o de colorante que

queda en los alrededores de la muestra se seca con un trozo de papel de filtro.

4. Añade unas 2 ó 3 gotas de glicerina al 50% y con cuidado coloca el cubreobjetos sobre el

fragmento de epidermis, cuidando de que no queden burbujas de aire entre el cubre y el

portaobjetos. Observa al microscopio comenzando con el objetivo de menor aumento, para

luego ir pasando a otros de mayor aumento.

b) Observación de cloroplastos en la hoja de musgo.

1. Sobre un portaobjetos con una gota de glicerina al 50 % colocar una hoja de musgo. Poner el cubre siguiendo la técnica de las práctica anterior.

2. Observar al microscopio, empezando por los objetivos de menor aumentos cambiando

progresivamente a los de mayor aumento

ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE LOS RESULTADOS.

De los dibujos que se muestran a continuación indica cuál de ellos representa mejor la imagen que

observas en el microscopio.

¿Cuáles son las partes de la célula que observas más claramente?

¿Cómo se encontraban los estomas que has observado, abiertos o cerrados?. ¿A que es debido?

¿Por qué piensas que debe teñirse la epidermis antes de observarla al microscopio?

¿Qué es la epidermis de una hoja y qué finalidad tiene? ¿Porqué encontramos en ella plastos?

¿Has podido ver algún otro orgánulo celular? ¿Cuáles?

Las células que ves presentan una membrana fácilmente visible. ¿Se trata de la membrana

plasmática o de la pared celular?

Realiza un esquema de la imagen observada y sobre él señala la membrana, el núcleo, el

citoplasma y los estomas. Colorea el núcleo de la célula.

¿Con cuántos aumentos estás observando la imagen? ¿Qué función realizan los estomas?

Cuál es el pigmento que contienen los cloroplastos?¿Qué función tienen?

Establece la relación que existe entre el color observado en los cloroplastos y la función que tienen

en las plantas. Al observar con el MO. ¿Qué aspecto tendrán las células de una planta que germinó bajo una

roca? Argumenta tu respuesta. Propón un experimento que te permita apoyar el argumento anterior.

Esta actividad práctica permite corroborar la teoría celular. Fundamenta este planteamiento.