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Objetivo: Conocer las técnicas básicas para el análisis de fertilidad microbiana del suelo
Técnicas mas utilizadas
Abundancia de microorganismos
• Biomasa total
• Determinación de grupos funcionales (fijadores de nitrógeno, celulolíticos, nitrificadores, amonificadores, etc.)
Actividad microbiana
• Heterótrofa total (producción de CO2, consumo de O2)
• Enzimas especificas (nitrogenasa, sacarasa, ureasa, amilasa)
PRÁCTICO N°4
Análisis de fertilidad de los suelos
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INCUBAR 7 DIAS
20 g suelo
BlancoMuestra
300-400 cc 300-400 cc
15 ml OHNa
Producción de CO2 en laboratorio: Preparación de muestras
CO2 + 2 OHNa CO3Na2 + H2O
Reacción química que se producen durante incubación:
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Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
Materiales
OHNa 0.2 N
H2O
Pipeta
Cubeta
Frasco de 300-400 cc Balanza
Muestra
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pesar 20 g de suelo
colocar en el frasco
hidratar: 60% cc (3 ml)
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
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colocar OHNa en las cubetas (15 ml)
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
preparar un “blanco”
colocar las cubetas en los frascos
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incubar a 28-30°C (7 días)
cerrar los frascos herméticamente
sellar con papel parafinado
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
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Producción de CO2 en laboratorio: Titulación
2 OHNa + Cl2Ba 2 ClNa + (OH)2Ba
CO3Na2 + Cl2Ba 2 ClNa + CO3Ba
(OH)2Ba + 2 ClH Cl2Ba + 2 H2O
Reacciones químicas que se producen durante la titulación:
colocar en erlenmeyer
agregar 1 ml Cl2Ba y una gota de fenolftaleina
titular con ClH 0.2 N
CALCULAR BlancoMuestra
OHNaCO3Na2
H2O
OHNaCO3Na2
H2O
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Cl2Ba 2%
fenolftaleina
OHNa 0.2 N
vaso de precipitado
erlenmeyer bureta
blanco y muestra
pinza
pizeta
Titulación: Materiales
ClH 0.2 N
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
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enrasar la bureta con ClH blanco
extraer cubeta con pinzacolocar el OHNa en un erlenmeyer
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
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agregar Cl2Ba (1ml)
agregar fenolftaleina (1 gota)
Cambio de color del indicador
registrar lectura del blanco(ml de ClH )
agitar mientras se titula
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
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OHNa de la muestra agregar Cl2Ba y fenolftaleina
Cambio de color del indicador titular
registrar la lectura de la muestra(ml de ClH )
agitar mientras se titula
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
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(Blanco - Muestra) 4.4 = mg CO2 / 7 d / g de suelo peso del suelo
ClH ≡ CO2/2
ClH 0.2 N ≡ ClH/5 ≡ CO2/2 x 5
peso molecular del CO2 = 44
ml de ClH 0.2 N gastados para titular el blanco
ml de ClH 0.2 N gastados para titular la muestra
factor de conversión
entre ClH y CO2
Cálculo para determinar la cantidad de CO2 por gramo de suelo
Ejemplo:
ClH 0.2 N gastados para titular el blanco: 13,4 ml
ClH 0.2 N gastados para titular la muestra: 7,3 ml
suelo: 20 g
(13.4 – 7.3) 4.4 = 1.34 mg CO2 / 7 d / g de suelo 20
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INCUBAR 7 DIAS
Síntesis para medir CO2 en laboratorio
20 g suelo
colocar en erlenmeyer
BlancoMuestra
300-400 cc 300-400 cc
agregar 1 ml Cl2Ba y una gota de fenolftaleina
titular con ClH 0.2 N
15 ml OHNa
CALCULAR
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recipiente hermético enterrado (10 cm) medición con jeringa
lectura de CO2
Procedimiento para medir la producción de CO2 a campo
jeringa extractora de gases y detector graduado
x tiempo
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Actividades
1) CO2 a campo: observar los implementos
2) CO2 en laboratorio: titular muestras incubadas
3) Cálculos: resolver problemas de CO2 en laboratorio
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Casos prácticos de análisis microbiano del suelo
Factores a considerar:
1) No hay valores óptimos absolutos para todos los sitios en estudio.
Usar testigo de suelo sin disturbar
2) Valores mayores no significa mejor fertilidad. Procesos
balanceados
3) Índices entre parámetros químicos y biológicos: por ej. Índice de
mineralización de C (CO2/MO)
Efecto de las practicas productivas
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Situaciones analizadas: Bosque Chaqueño
tala y sobrepastoreo testigo
testigo
testigo
quema de pastizal
desmonte selectivo y pasturas
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Situaciones analizadas: Agroecosistemas
monocultivo – labranza convencional ganadería y pasturas
siembra directa y rotación
Testigo: suelo bajo alambrado
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Parámetros analizados
• Químicos:
• Materia Orgánica• pH• N total• Nitrato
• Biológicos:
• Respiración • Grupos Funcionales• Estructura Poblacional• Índice de Mineralización de C
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Bosque Chaqueño
Agroecosistemas
Porcentaje (%) de variación con el suelo testigo
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Estructura de las comunidades microbianas
Bosque Chaqueño
Agroecosistemas
33 31 29 33
27 3138
26
2427
17
24
16 11 816
0%
20%
40%
60%
80%
100%
testigo sobrepastoreo quema desmonte-pasturas
nitrificadores
celulolíticos
fijadores
amonificadores
36 3748
34
31
28
30
19
25 16
20
154 8
15
34
0%
20%
40%
60%
80%
100%
testigo lab.convencional SD-rotación ganadería
nitrificadores
celulolíticos
fijadores
amonificadores
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Índice de Mineralización de C (IMC)
Bosque Chaqueño IMC
Testigo 0.96
Tala y sobrepastoreo 2.29
Quema de pastizal 1.17
Desmonte selectivo y pasturas
0.96
Agroecosistemas IMC
Testigo 1.02
Monocultivo convencional 1.36
Ganadería y pastura 1.18
Siembra directa y rotación 0.93
IMC= 1 balanceado
>1 pierde C
< 1 gana C